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Inhibitory Effect of Histone Deacetylase Inhibitor on the Proliferation of Leukemia Cells and Its Anti-Tumor Pharmacology 认领
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作者 Shubo Wang 《生物科学与医学(英文)》 2021年第1期30-40,共11页
The aim of this study was to explore the inhibitory effect of histone deacetylase inhibitor (HDACI) on the proliferation of leukemia cells. The two kinds of leukemia cells (human promyelocytic leukemia cell (HL-60) an... The aim of this study was to explore the inhibitory effect of histone deacetylase inhibitor (HDACI) on the proliferation of leukemia cells. The two kinds of leukemia cells (human promyelocytic leukemia cell (HL-60) and human acute myelogenous leukemia cell (KG-1)) were selected for in vitro research. Besides, Chidamide, a kind of benzamide HDACI, was applied to induce and culture the HL-60 and KG-1 cells, and the anti-tumor cell proliferation activity of Chidamide on HL-60 and KG-1 was detected by the methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay, which was 5.6 and 6.1 in turn. The cell scratch experiment verified that Chidamide had the metastasis inhibitory effect on HL-60 and KG-1 cells. Flow cytometry was employed to measure the percentage of apoptotic cells, and it was found that the percentage of apoptotic cells was 55.6% ± 1% and 48.6% ± 1% in sequence after HL-60 and KG-1 cells were treated with Chidamide for 36 hours. The number of auto-phagosomes was determined by transmission electron microscopy showing that the number of auto-phagosomes in HL-60 and KG-1 cells was 12 ± 1 and 10 ± 1, respectively after the induction process of Chidamide. The phosphorylated histone H2AX protein (γ-H2AX) recognition antibody immunofluorescence method was adopted to determine the deoxyribonucleic acid (DNA) damage, and the positive rates of HL-60 and KG-1 cells reached 28.41% and 26.35%, respectively after Chidamide treatment. Therefore, Chidamide, as a kind of HDACI, could effectively inhibit the proliferation of leukemia cells, so that the results of this experiment had a good guiding meaning for the clinical diagnosis and treatment of leukemia. 展开更多
关键词 Tumor Cell Proliferation Histone Deacetylase Inhibitor CHIDAMIDE Leukemia Treatment
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Poly (C)-Binding Protein 1: A Novel Function Attributed to the Nervous System Microenvironment 认领
2
作者 Bingbing Jia Lirong Huo +1 位作者 Meng Ye Chensi Liang 《神经科学国际期刊(英文)》 2021年第1期48-66,共19页
Poly (C)-binding protein 1 (PCBP1), which acts as an RNA binding protein, has multiple functions and regulates gene expression by binding to polycytosine, poly (C). The aim of the present study was to investigate the ... Poly (C)-binding protein 1 (PCBP1), which acts as an RNA binding protein, has multiple functions and regulates gene expression by binding to polycytosine, poly (C). The aim of the present study was to investigate the novel function of PCBP1 in the nervous system microenvironmen. The overexpression of PCBP1 has a critical effect on the proliferation and anti-apoptosis of neuroblastoma and glial cells in the direct model, whereas the overexpression of PCBP1 in neuroblastoma or glial cells cannot affect the proliferation or apoptosis of neuroblastoma or glial cells through substances secreted extracellularly. Fur-thermore, through direct or indirect actions, PCBP1 suppressed the expression of nuclear factor kappa B (NF-κB) and the inflammatory cytokine interleukin (IL)-6 and increased the levels of the anti-inflammatory cytokine IL-10;addi-tionally, PCBP1 changed the expression of functional proteins, such as heat shock protein 70 (HSP70), glial cell line-derived neurotrophic factor (GDNF) and brain-derived neurotrophic factor (BDNF). The results suggest that PCBP1 can regulate the nervous system in proliferation, apoptosis, inflammatory re-sponse and expression of relevant functional proteins, and it could provide novel targets for gene treating human neurological disorders. 展开更多
关键词 PCBP1 Neurological Disorders INFLAMMATORY PROLIFERATION APOPTOTIC
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沉默泛素结合酶E2O对人非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭的影响 认领
3
作者 贺倩 李岩 邓为民 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期163-168,共6页
目的:研究泛素结合酶E2O(ubiquitin-conjugating enzyme E2O,UBE2O)蛋白在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖、细胞周期、迁移、侵袭中的作用。方法:通过慢病毒介导的shRNA靶向抑制人NSCLC细胞株A549中UBE2O基因... 目的:研究泛素结合酶E2O(ubiquitin-conjugating enzyme E2O,UBE2O)蛋白在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖、细胞周期、迁移、侵袭中的作用。方法:通过慢病毒介导的shRNA靶向抑制人NSCLC细胞株A549中UBE2O基因的表达,应用CCK-8法、流式细胞术分别检测UBE2O对A549细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响,应用Transwell实验检测下调UBE2O表达后对A549细胞迁移、侵袭能力的影响,应用Western blot检测细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)两种标志分子E-cadherin蛋白、N-cadherin蛋白和PI3K-Akt信号通路相关蛋白表达量的变化。结果:下调UBE2O表达后,A549细胞UBE2O mRNA和蛋白表达均下调(均P<0.01),CCK-8实验结果显示沉默UBE2O可以抑制A549的增殖(P<0.001),Transwell实验显示下调UBE2O的表达能够抑制A549细胞的迁移、侵袭(均P<0.001)。Western blot结果表明下调UBE2O的表达可使A549细胞中的E-cadherin蛋白表达水平升高、p-Akt蛋白表达水平下降。结论:UBE2O蛋白能够促进NSCLC细胞侵袭和迁移,作用机制可能是通过诱导肺癌细胞发生EMT和促进pI3K-Akt信号通路的激活。 展开更多
关键词 沉默 泛素结合酶E20 非小细胞肺癌 增殖 侵袭
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LncRNA TUG1通过调控microRNA-132-3p/SIRT1减轻脂多糖诱导的小肠上皮细胞损伤 认领
4
作者 刘景全 邵自强 +6 位作者 林宗斌 蔡涵晖 公方晓 莫世静 洪军 杨向红 孙仁华 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期435-442,共8页
目的探讨LncRNA-TUG1在脂多糖(LPS)诱导的小肠黏膜上皮细胞损伤中的作用和机制。方法使用LPS处理HIEC-6人类小肠黏膜上皮细胞24 h构建脓毒症损伤模型。全转录组RNA测序分析LPS处理后HIEC-6细胞中的mRNA、microRNA及lncRNA表达变化。实... 目的探讨LncRNA-TUG1在脂多糖(LPS)诱导的小肠黏膜上皮细胞损伤中的作用和机制。方法使用LPS处理HIEC-6人类小肠黏膜上皮细胞24 h构建脓毒症损伤模型。全转录组RNA测序分析LPS处理后HIEC-6细胞中的mRNA、microRNA及lncRNA表达变化。实时荧光定量(qRT-PCR)及western blot检测LncRNA-TUG1、microRNA-132-3p(miR-132-3p)、SIRT1 mRNA及SIRT1蛋白的表达在LPS处理后HIEC-6细胞中的表达变化。体外转染技术改变LncRNA-TUG1、microRNA-132-3p及SIRT1的表达水平。qRT-PCR及western blot分析LncRNA-TUG1对miR-132-3p及SIRT1的表达调控。CCK-8及流式细胞术分析LncRNA-TUG1、miR-132-3p及SIRT1对HIEC-6细胞增殖和凋亡的影响。双荧光素酶报告分析验证LncRNA-TUG1、miR-132-3p及SIRT1之间的靶向关系。统计学分析采用SPSS 17.0进行,两组间的差异比较采用独立样本t检验。结果RNA测序结果显示LPS处理后的HIEC-6细胞中出现LncRNA-TUG1及SIRT1表达降低(t=3.26,P<0.05以及t=2.55,P<0.05),但是miR-132-3p表达升高(t=4.12,P<0.05)。在体外细胞实验中,LPS处理后HIEC-6细胞后,LncRNA-TUG1及SIRT1表达降低(t=5.69,P<0.05以及t=5.712,P<0.05),而miR-132-3p表达升高(t=3.88,P<0.05)。LncRNA-TUG1过表达能够增加LPS处理后细胞的增殖率(t=6.55,P<0.05)同时降低其凋亡率(t=3.94,P<0.05)。上调LncRNA-TUG1可以降低miR-132-3p的表达(t=4.66,P<0.05),同时增加SIRT1 mRNA(t=3.91,P<0.05)及蛋白的水平。转染miR-132-3p mimic可以抑制SIRT1 mRNA(t=4.08,P<0.05)及蛋白的水平。在LPS处理的细胞中,与仅转染pcDNA3.1-LncRNA-TUG的细胞相比,共转染miR-132-3pmimic和siRNA-SIRT1的细胞增殖率较低(t=4.55,P<0.05以及t=5.67,P<0.05),凋亡率较高t=3.90,P<0.05以及t=4.22,P<0.05)。结论lncRNA-TUG1可能作为ceRNA调控miR-132-3p/SIRT1从而减轻LPS造成的HIEC-6细胞损伤。干预lncRNA-TUG1/microRNA-132-3p/SIRT1调控通路可能成为防治脓毒症引起小肠损伤的潜在策略。 展开更多
关键词 脓毒症 lncRNA MICRORNA 小肠上皮细胞 脂多糖 竞争性内源RNA SIRT1 增殖 凋亡
白藜芦醇对银屑病HaCaT细胞增殖、凋亡及STAT3信号通路的影响 认领
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作者 张敏 彭娇 +3 位作者 刘洁 毛倩倩 陈丽明 林明和 《福建中医药》 2021年第3期42-45,共4页
目的研究白藜芦醇(RES)抑制HaCaT细胞增殖及促进凋亡的作用及其对STAT3信号通路的调控作用,探讨RES治疗银屑病的作用机制。方法体外培养HaCaT细胞,加以不同浓度RES干预。通过检测细胞增殖和凋亡、STAT3通路相关基因(STAT3、PIM1、Bax、B... 目的研究白藜芦醇(RES)抑制HaCaT细胞增殖及促进凋亡的作用及其对STAT3信号通路的调控作用,探讨RES治疗银屑病的作用机制。方法体外培养HaCaT细胞,加以不同浓度RES干预。通过检测细胞增殖和凋亡、STAT3通路相关基因(STAT3、PIM1、Bax、Bcl-2、Cyclin D1)以及STAT3磷酸化蛋白表达水平影响。结果倒置显微镜观察提示,RES能够抑制HaCaT细胞增殖。MTT法结果显示,低浓度RES对HaCaT细胞活力无明显影响,而高浓度RES随浓度增加细胞活力明显降低,同时呈现一定的剂量和时间依赖(P<0.05)。FCM结果显示,加入RES后,凋亡的细胞数量可明显增加。Western blot结果显示,RES可升高凋亡相关基因Bax/Bcl-2的表达(P<0.01),显著抑制PIM1及STAT3通路基因Cyclin D1、p-STAT3/STAT3的表达(P<0.01)。结论RES可有效抑制HaCaT细胞增殖及促进其凋亡,其作用机制可能与调控STAT3信号通路的活化有关,表明RES可通过缓解皮肤过度角化进而治疗银屑病。 展开更多
关键词 银屑病 白藜芦醇 STAT3通路 表皮细胞 增殖 凋亡
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ATP柠檬酸裂解酶对结肠癌细胞脂质代谢及肿瘤生物学行为的作用 认领
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作者 邱振东 邓文宏 +3 位作者 洪育蒲 李满 余佳 王卫星 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2021年第1期48-52,共5页
目的研究ATP柠檬酸裂解酶(ACLY)基因对结肠癌细胞脂质代谢、增殖、凋亡和侵袭的影响。方法体外培养HCT116结肠癌细胞,根据细胞处理方式分为3组:以敲减ACLY基因的HCT116细胞作为ACLY敲减组,以空载体转染的HCT116细胞作为阴性对照组,以未... 目的研究ATP柠檬酸裂解酶(ACLY)基因对结肠癌细胞脂质代谢、增殖、凋亡和侵袭的影响。方法体外培养HCT116结肠癌细胞,根据细胞处理方式分为3组:以敲减ACLY基因的HCT116细胞作为ACLY敲减组,以空载体转染的HCT116细胞作为阴性对照组,以未经处理的HCT116细胞作为空白对照组。以嘌呤霉素筛选出稳定的新细胞系后,采用蛋白质印迹法检测ACLY蛋白的表达情况;采用甘油三酯检测试盒检测细胞甘油三酯水平,采用CCK-8法检测细胞的增殖能力,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,采用细胞划痕实验检测细胞的迁移能力。结果ACLY敲减组的细胞存活率在120 h时相较于空白对照组和阴性对照组降低,但在24 h和48 h时3组的细胞存活率比较差异不大;与阴性对照组和空白对照组比较,ACLY敲减组的凋亡率升高,24 h的迁移率以及胞内甘油三酯水平降低。结论ACLY基因敲减能够抑制结肠癌细胞的增殖、凋亡和迁移,其机制可能与细胞的脂质合成能力降低有关。 展开更多
关键词 结肠癌 ATP柠檬酸裂解酶 脂质代谢 增殖 迁移
长链非编码RNA LINC00478抑制微小RNA-214对口腔鳞癌细胞顺铂耐药性的影响 认领
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作者 李冠睿 李建武 颜家渝 《暨南大学学报:自然科学与医学版》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期19-25,70,共8页
目的:探讨长链非编码RNA LINC00478对口腔鳞癌细胞顺铂耐药性的影响及其对微小RNA-214(miR-214)的靶向调控作用.方法:采用qRT-PCR法检测口腔鳞癌组织、癌旁组织中LINC00478、miR-214的表达量;体外培养口腔鳞癌细胞CAL-27,建立顺铂耐药... 目的:探讨长链非编码RNA LINC00478对口腔鳞癌细胞顺铂耐药性的影响及其对微小RNA-214(miR-214)的靶向调控作用.方法:采用qRT-PCR法检测口腔鳞癌组织、癌旁组织中LINC00478、miR-214的表达量;体外培养口腔鳞癌细胞CAL-27,建立顺铂耐药性细胞CAL-27/DDP,分别将pcDNA、pcDNA-LINC00478、pcDNA-LINC00478与miR-NC、pcDNA-LINC00478与miR-214 mimics转染至CAL-27/DDP细胞;采用qRT-PCR法检测CAL-27细胞与CAL-27/DDP细胞中LINC00478、miR-214的表达量;MTT法与克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测LINC00478、miR-214的靶向关系;Western blot法检测Ki67、Pro-caspase3、Cleaved-caspase3蛋白表达量.结果:与癌旁组织比较,口腔鳞癌组织LINC00478的表达水平显著降低(P<0.05),miR-214的表达水平显著升高(P<0.05);与CAL-27组比较,CAL-27/DDP组LINC00478的表达水平显著降低(P<0.05),miR-214的表达水平显著升高(P<0.05);与转染pcDNA比较,CAL-27/DDP细胞中转染pcDNA-LINC00478可提高增殖抑制率、凋亡率及Cleaved-caspase3蛋白水平(P<0.05),减少克隆形成数(P<0.05),降低Ki67、Pro-caspase3蛋白水平(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实LINC00478能够靶向调控miR-214的表达及活性;与共转染pcDNA-LINC00478与miR-NC比较,共转染pcDNA-LINC00478与miR-214 mimics可降低增殖抑制率、凋亡率及Cleaved-caspase3蛋白水平(P<0.05),增加克隆形成数(P<0.05),提高Ki67、Pro-caspase3蛋白水平(P<0.05).结论:LINC00478通过靶向抑制miR-214的表达而抑制口腔鳞癌细胞增殖及诱导细胞凋亡,从而降低细胞顺铂耐药性. 展开更多
关键词 长链非编码RNA LINC00478 miR-214 口腔鳞癌 顺铂耐药性 增殖 凋亡
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蜂毒肽对口腔鳞癌细胞的增殖及迁移能力的影响 认领
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作者 王崇 李国林 +1 位作者 郭净洁 杜超 《中国临床研究》 CAS 2021年第1期18-22,共5页
目的探讨蜂毒肽对人口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞系Scc-15、Tca8113、Cal-27增殖性、迁移性的影响及其作用机制。方法以用四种不同浓度梯度(2、4、8、16μg/ml)的蜂毒肽分别处理的OSCC细胞系为蜂毒肽组,以不含药的培养液处理的细胞系为对... 目的探讨蜂毒肽对人口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞系Scc-15、Tca8113、Cal-27增殖性、迁移性的影响及其作用机制。方法以用四种不同浓度梯度(2、4、8、16μg/ml)的蜂毒肽分别处理的OSCC细胞系为蜂毒肽组,以不含药的培养液处理的细胞系为对照组。采用MTT实验检测蜂毒肽对OSCC细胞系Scc-15、Tca8113、Cal-27增殖的抑制作用;划痕实验观察蜂毒肽对Scc-15细胞迁移能力的抑制效果;Transwell实验验证蜂毒肽对Scc-15细胞侵袭能力的抑制作用;Western blot检测蜂毒肽作用于Scc-15细胞后核因子(NF)κB、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9的表达情况。结果MTT检测结果示,相对于对照组,2、4、8、16μg/ml蜂毒肽组的Scc-15、Tca8113、Cal-27细胞增殖存活率均明显降低,且呈浓度依赖性(P均<0.01)。划痕实验结果示,在细胞划痕培养6、12和24 h时相对于对照组,8、16μg/ml蜂毒肽组的Scc-15细胞划痕愈合率均明显降低,且呈浓度依赖性(P均<0.01)。Transwell侵袭实验结果示,对照组与16μg/ml蜂毒肽组穿过滤过膜的Scc-15细胞数分别为(46.0±2.3)个/视野和(21.0±1.7)个/视野,蜂毒肽组显著少于对照组(P<0.01)。Western blot结果示,相对于对照组,加入蜂毒肽后,Scc-15细胞的NF-κB蛋白表达量显著下降(P<0.01)、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达量显著升高(P均<0.01)。结论蜂毒肽可显著抑制OSCC细胞的增殖、迁移及侵袭能力,还可促进OSCC细胞凋亡,其作用机制可能与NF-κB的生成减少相关。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 蜂毒肽 增殖 迁移 侵袭
雷公藤内酯酮对SHI-1细胞增殖及凋亡的影响 认领
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作者 李慧杰 洪坤 +2 位作者 李晓强 刘丽 谭余庆 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期72-77,共6页
目的:探讨雷公藤内酯酮(TN)对人急性单核细胞白血病(AML)细胞株SHI-1细胞增殖、周期、凋亡以及凋亡相关蛋白表达水平的影响,并探究其可能的作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测20,40,80,160,320 nmol·L-1的雷公藤内酯酮作... 目的:探讨雷公藤内酯酮(TN)对人急性单核细胞白血病(AML)细胞株SHI-1细胞增殖、周期、凋亡以及凋亡相关蛋白表达水平的影响,并探究其可能的作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测20,40,80,160,320 nmol·L-1的雷公藤内酯酮作用SHI-1细胞48,72 h对细胞增殖的抑制作用,流式细胞术碘化丙啶(PI)单染法检测雷公藤内酯酮作用前后SHI-1细胞周期的变化,流式细胞术AnnexinV/PI双染法检测雷公藤内酯酮作用前后SHI-1细胞凋亡的变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测80,160 nmol·L-1雷公藤内酯酮作用于SHI-1细胞前后半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),半胱氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)和核转录因子-κB(NF-κB)的蛋白表达。结果:分别作用48,72 h,与空白组比较,40,80,160,320 nmol·L-1雷公藤内酯酮对SHI-1细胞增殖均具有显著抑制作用(P<0.01),且具有剂量依赖性;雷公藤内酯酮160,320 nmol·L-1可诱导SHI-1细胞凋亡(P<0.01),并且雷公藤内酯酮160 nmol·L-1可使SHI-1细胞S期比例降低(P<0.01)。此外,与空白组比较,雷公藤内酯酮80,160 nmol·L-1组NF-κB蛋白表达水平显著下调(P<0.05,P<0.01),雷公藤内酯酮160 nmol·L-1组Caspase-3,Caspase-8蛋白表达水平显著下调(P<0.01)。结论:雷公藤内酯酮可以体外抑制SHI-1细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与雷公藤内酯酮降低SHI-1细胞S期比例,下调Caspase-3,Caspase-8以及NF-κB的蛋白表达水平有关。 展开更多
关键词 急性单核细胞白血病 雷公藤内酯酮 SHI-1细胞 增殖 凋亡
LncRNA AC009686.2促进乳腺癌细胞增殖和侵袭 认领
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作者 邱惠思 周逸海 +3 位作者 李志英 吴华振 冯正富 王馨 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期236-243,共8页
长非编码RNAs(long non-coding RNAs, LncRNAs)作为一类基因表达的调控因子,在多种肿瘤的发生发展中发挥关键作用,然而LncRNAs在乳腺癌中的作用及相关机制尚未完全阐明。为了寻找在乳腺癌发生发展中起关键作用的LncRNAs,本研究通过分析T... 长非编码RNAs(long non-coding RNAs, LncRNAs)作为一类基因表达的调控因子,在多种肿瘤的发生发展中发挥关键作用,然而LncRNAs在乳腺癌中的作用及相关机制尚未完全阐明。为了寻找在乳腺癌发生发展中起关键作用的LncRNAs,本研究通过分析TCGA数据库发现,LncRNA AC009686.2在乳腺癌组织中表达明显高于正常组织,并且与乳腺癌病人的预后不良正相关。qRT-PCR分析发现LncRNA AC009686.2在乳腺癌细胞中的表达明显上调,其中在乳腺癌细胞MCF7、T47D、ZR7530、BT549、HCC1937、MDA-MB-231和SKBR3的表达量分别是MCF10A细胞的6.58倍、5.66倍、7.29倍、9.06倍、6.89倍、11.17倍和5.38倍。在相对高表达的MDA-MB-231和BT549细胞中干扰LncRNA AC009686.2能明显抑制细胞的增殖、克隆形成和侵袭能力,并且诱导细胞发生G1 /S期阻滞,其中干扰LncRNA AC009686.2表达的乳腺癌细胞MDA-MB-321和BT549的克隆抑制率分别为对照组的0.496%,0.438%和0.495%,0.353%。同时干扰LncRNA AC009686.2能下调细胞周期蛋白D2(cyclinD2,CCND2)和锌指E盒结合同源框1(zinc finger E-box binding homeobox1,ZEB1)的蛋白质水平。而在乳腺癌细胞中过表达ZEB1能明显逆转干扰LncRNA AC009686.2引起的细胞侵袭能力下降。进一步通过在线软件JASPAR数据库分析发现LncRNA AC009686.2的启动子存在ZEB1结合位点,过表达ZEB1能上调细胞中LncRNA AC009686.2的表达水平。总之,LncRNA AC009686.2在乳腺癌中高表达,通过上调细胞周期蛋白D2和上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关分子ZEB1促进乳腺癌细胞增殖和侵袭,而ZEB1能正向调控LncRNA AC009686.2的表达。本研究将为阐明AC009686.2在乳腺癌中的作用和相关分子机制提供理论依据。 展开更多
关键词 长非编码RNA 锌指E盒结合同源框1 增殖 侵袭 乳腺癌
Transcriptome analysis of molecular mechanisms underlying facial nerve injury repair in rats 认领
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作者 Qian-Qian Cao Shuo Li +4 位作者 Yan Lu Di Wu Wei Feng Yong Shi Lu-Ping Zhang 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2021年第11期2316-2323,共8页
Although the transcriptional alterations inside the facial nucleus after facial nerve injury have been well studied,the gene expression changes in the facial nerve trunk after injury are still unknown.In this study,we... Although the transcriptional alterations inside the facial nucleus after facial nerve injury have been well studied,the gene expression changes in the facial nerve trunk after injury are still unknown.In this study,we established an adult rat model of facial nerve crush injury by compressing the right lateral extracranial nerve trunk.Transcriptome sequencing,differential gene expression analysis,and cluster analysis of the injured facial nerve trunk were performed,and 39 intersecting genes with significant variance in expression were identified.Gene Ontology annotation and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes pathway analyses of the 39 intersecting genes revealed that these genes are mostly involved in leukocyte cell-cell adhesion and phagocytosis and have essential roles in regulating nerve repair.Quantitative real-time polymerase chain reaction assays were used to validate the expression of pivotal genes.Finally,nine pivotal genes that contribute to facial nerve recovery were identified,including Arhgap30,Akr1b8,C5ar1,Csf2ra,Dock2,Hcls1,Inpp5d,Sla,and Spi1.Primary Schwann cells were isolated from the sciatic nerve of neonatal rats.After knocking down Akr1b8 in Schwann cells with an Akr1b8-specific small interfering RNA plasmid,expression levels of monocyte chemoattractant protein-1 and interleukin-6 were decreased,while cell proliferation and migration were not obviously altered.These findings suggest that Akr1b8 likely regulates the interaction between Schwann cells and macrophages through regulation of cytokine expression to promote facial nerve regeneration.This study is the first to reveal a transcriptome change in the facial nerve trunk after facial nerve injury,thereby revealing the potential mechanism underlying repair of facial nerve injury.This study was approved by the Animal Ethics Committee of Nantong University,China in 2018(approval No.S20180923-007). 展开更多
关键词 Akr1b8 cell proliferation facial nerve injury Gene-Act Networks inflammatory response RNA-SEQ Schwann cells transcriptomics analysis
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消癌解毒方提取物对乳腺癌细胞增殖活力、细胞周期蛋白、PI3K/AKT通路的调节作用 认领
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作者 李佳 杨晓丹 刘永叶 《中国医学创新》 CAS 2021年第6期24-28,共5页
目的:研究消癌解毒方提取物对乳腺癌细胞增殖活力、细胞周期蛋白、PI3K/AKT通路的调节作用。方法:培养乳腺癌MDA-MB-231细胞并分为用不含血清及药物的DMEM处理的对照组、用含有不同浓度(0.375、0.75、1.5 mg/mL)消癌解毒方提取物DMEM处... 目的:研究消癌解毒方提取物对乳腺癌细胞增殖活力、细胞周期蛋白、PI3K/AKT通路的调节作用。方法:培养乳腺癌MDA-MB-231细胞并分为用不含血清及药物的DMEM处理的对照组、用含有不同浓度(0.375、0.75、1.5 mg/mL)消癌解毒方提取物DMEM处理的提取物组,测定细胞增殖活力、细胞周期及细胞周期蛋白、PI3K/AKT通路分子的表达水平。结果:不同浓度提取物组细胞增殖抑制率均显著高于对照组,且随着浓度的增加、时间的延长,细胞增殖抑制率明显升高;不同浓度提取物组G0/G1期比例及p53、p21的mRNA表达水平均显著高于对照组,G2/M期比例及CyclinD1、CyclinB1、PI3K、AKT、mTOR的mRNA表达水平均明显低于对照组,且随着浓度的增加,G0/G1期比例及p53、p21的mRNA表达水平明显升高,G2/M期比例及CyclinD1、CyclinB1、PI3K、AKT、mTOR的mRNA表达水平均明显降低。结论:消癌解毒方提取物对乳腺癌细胞增殖活力、细胞周期具有抑制作用,拮抗PI3K/AKT通路是潜在的分子机制。 展开更多
关键词 乳腺癌 消癌解毒方 增殖 细胞周期 PI3K/AKT
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结肠腺癌组织中DNA结合/分化抑制蛋白2的表达特征及与细胞增殖的关系 认领
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作者 刘爱东 张爽 +2 位作者 庞久玲 唐慧 刘爱军 《中国综合临床》 2021年第2期123-128,共6页
目的分析结肠腺癌组织中DNA结合/分化抑制蛋白2(inhibitor of DNA binding2,ID-2)与细胞增殖的关系。方法收集2014年11月至2015年9月华北理工大学附属医院确诊的67例结肠腺癌患者临床资料进行回顾性分析,均行根治术,以肿瘤组织作为观察... 目的分析结肠腺癌组织中DNA结合/分化抑制蛋白2(inhibitor of DNA binding2,ID-2)与细胞增殖的关系。方法收集2014年11月至2015年9月华北理工大学附属医院确诊的67例结肠腺癌患者临床资料进行回顾性分析,均行根治术,以肿瘤组织作为观察组,以距肿物边缘>3 cm处的正常结肠黏膜组织作为对照组。应用免疫组化法检测两组标本组织中ID-2及癌组织中Ki67的表达。构建过表达ID-2结肠癌SW480细胞系,应用Western Blot法检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达,应用CCK-8法检测细胞活性。应用pearson相关分析分析ID-2和Ki67的相关性,应用Kaplan-Meier生存分析和Log-rank检验分析ID-2的表达对判断结肠腺癌预后的价值。结果观察组患者ID-2的阳性率49.3%(33/67),高于对照组的9.0%(6/67),两组比较差异有统计学意义(x2=23.927,P<0.05)。观察组患者癌组织中ID-2的表达在不同浸润深度[浆膜及以外为68.7%(22/32),未及浆膜为31.4%(11/35)]、分化程度[低分化为80.0%(8/10),中分化为57.9%(11/19),高分化为36.8%(14/38)]、临床分期[Ⅲ、Ⅳ期为64.3%(18/28),Ⅰ、Ⅱ期为38.5%(15/39)]及有无淋巴结转移[有为70.8%(17/24),无为37.2%(16/43)]、癌栓[有为75.0%(12/16),无为41.2%(21/51)]比较差别均有统计学意义(x2值分别为6.311、4.023、4.349、6.967、5.575,P均<0.05)。ID-2与Ki67呈正相关性(r=0.65,P<0.05)。生存分析显示结肠腺癌中ID-2的表达与患者的预后有关(x2=5.29,P=0.013)。相对于空载体转染组和空白对照组,过表达ID-2结肠癌细胞中PCNA表达升高(P<0.05),细胞活性升高(P<0.05)。结论ID-2在结肠腺癌中高表达,与临床病理特征和预后相关,ID-2异常表达可能对增殖有一定调节作用。 展开更多
关键词 结肠腺癌 DNA结合/分化抑制蛋白2 增殖 预后
miR-190b通过PTEN/PI3K/AKT信号通路对肾母细胞瘤细胞SK-NEP-1增殖、迁移和凋亡的影响 认领
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作者 张剑春 陶涛 刘俊启 《郑州大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2021年第2期226-231,共6页
目的:探讨miR-190b通过PTEN/PI3K/AKT信号通路对肾母细胞瘤细胞SK-NEP-1增殖、迁移和凋亡的影响。方法:采用qRT-PCR法检测miR-190b在肾母细胞瘤和相应的癌旁正常组织(n=20)中的表达,免疫组化法检测组织中PTEN、PI3K、p-AKT蛋白的表达。T... 目的:探讨miR-190b通过PTEN/PI3K/AKT信号通路对肾母细胞瘤细胞SK-NEP-1增殖、迁移和凋亡的影响。方法:采用qRT-PCR法检测miR-190b在肾母细胞瘤和相应的癌旁正常组织(n=20)中的表达,免疫组化法检测组织中PTEN、PI3K、p-AKT蛋白的表达。TargetScan预测miR-190b与PTEN是否具有靶向关系,并采用双荧光素酶报告实验进行验证。SK-NEP-1细胞分为4组:空白对照组,不进行任何处理;miR-对照(NC)组,转染miR-NC质粒;miR-190b模拟物组,转染miR-190b模拟物质粒;miR-190b抑制剂组,转染miR-190b抑制剂质粒;48 h后,qRT-PCR法检测细胞中miR-190b的表达;细胞集落形成实验检测细胞增殖能力;Transwell小室法检测各组细胞的侵袭、迁移能力;Annexin V-FITC/PI染色法检测细胞凋亡;Western blot法检测细胞中PTEN、PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达。结果:与癌旁正常组织相比,肾母细胞瘤组织中miR-190b表达上调,PTEN阳性细胞百分比下降,PI3K和p-AKT阳性细胞百分比上升(P<0.05)。miR-190b可靶向负调节PTEN的表达。与空白对照组和miR-NC组相比,miR-190b模拟物组中miR-190b表达水平上升,细胞增殖、迁移和侵袭能力提高,凋亡率下降(P<0.05);miR-190b抑制剂组中miR-190b的表达水平下降,增殖能力、迁移和侵袭能力下降,凋亡率上升(P<0.05)。与空白对照组和miR-NC组相比,miR-190b模拟物组中PTEN蛋白表达下调,而PI3K和p-AKT/AKT上调(P<0.05);miR-190b抑制剂组PTEN蛋白表达上调,PI3K和p-AKT/AKT下调(P<0.05)。结论:miR-190b通过调控PTEN/PI3K/AKT信号通路影响肾母细胞瘤细胞的增殖、迁移和凋亡。 展开更多
关键词 miR-190b PTEN/PI3K/AKT信号通路 肾母细胞瘤 SK-NEP-1细胞 增殖 迁移 凋亡
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纤维蛋白粘合剂与人角膜成纤维细胞的生物相容性 认领
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作者 叶青 蒋林志 +2 位作者 陈文琳 张炜 曾静 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期113-118,共6页
目的探讨纤维蛋白粘合剂(FS)与全飞秒激光小切口透镜取出术(SMILE)来源的人角膜成纤维细胞(HCFs)的生物相容性。方法人角膜组织取自2018年3—4月于广西医科大学第一附属医院行SMILE患者12例24眼术中取出的角膜基质透镜,体外分离培养HCFs... 目的探讨纤维蛋白粘合剂(FS)与全飞秒激光小切口透镜取出术(SMILE)来源的人角膜成纤维细胞(HCFs)的生物相容性。方法人角膜组织取自2018年3—4月于广西医科大学第一附属医院行SMILE患者12例24眼术中取出的角膜基质透镜,体外分离培养HCFs,观察HCFs在FS表面的生长状态。将HCFs分为2倍浸提液组和正常对照组,分别与2倍浸提液和完全培养基共培养,采用吖啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)双染色法观察并比较各组细胞凋亡情况。将HCFs分为3个组,2倍浸提液组和正常对照组细胞每孔分别加入2倍浸提液和完全培养基各100μl,空白对照组无细胞,每孔加入100μl完全培养基,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测并比较3个组HCFs的细胞增生能力,并进行细胞毒性分级。将HCFs分为1倍浸提液组、2倍浸提液组和正常对照组,分别用1倍浸提液、2倍浸提液和完全培养基培养,采用Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测并比较3个组细胞凋亡率。结果HCFs在FS表面生长良好,形态正常。MTT法检测结果显示,2倍浸提液组与正常对照组的HCFs具有相似的增生趋势,2倍浸提液组HCFs的0~72 h毒性评级为0~1级。AO/EB染色结果显示,2倍浸提液组和正常对照组的HCFs状态均正常,仅可见极少量早期凋亡细胞。流式细胞术检测结果显示,正常对照组、1倍浸提液组和2倍浸提液组的细胞凋亡率分别为(4.96±1.09)%、(3.66±1.35)%和(2.88±0.66)%,差异无统计学意义(F=2.89,P=0.13)。结论FS无体外细胞毒性,与HCFs有良好的生物相容性。 展开更多
关键词 纤维蛋白粘合剂 角膜成纤维细胞 角膜穿孔 生物相容性 增生 凋亡
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miR-181b在动脉粥样硬化血管中的表达及对H2O2诱导的血管内皮细胞增殖与凋亡的影响 认领
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作者 葛丽 许红峰 《解剖科学进展》 CAS 2021年第1期9-13,共5页
目的探讨miR-181b在动脉粥样硬化血管中的表达及miR-181b对H 2O2诱导的血管内皮细胞增殖与凋亡的影响。方法 qPCR法检测动脉粥样硬化模型组小鼠主动脉和H2O2诱导的血管内皮细胞中miR-181b的表达情况;酶联免疫法检测miR-181b对鼠血清中T... 目的探讨miR-181b在动脉粥样硬化血管中的表达及miR-181b对H 2O2诱导的血管内皮细胞增殖与凋亡的影响。方法 qPCR法检测动脉粥样硬化模型组小鼠主动脉和H2O2诱导的血管内皮细胞中miR-181b的表达情况;酶联免疫法检测miR-181b对鼠血清中TNF-α、IL-6和IL-10含量的影响;克隆形成实验检测miR-181b对H2O2诱导的血管内皮细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测miR-181b对H2O2诱导的血管内皮细胞凋亡能力的影响;qPCR和Western blot法检测miR-181b对主动脉和H2O2诱导的血管内皮细胞中Caspase-3、Bax和Bcl-2mRNA和蛋白表达的影响。结果 miR-181b在动脉粥样硬化模型组小鼠主动脉和H2O2诱导的血管内皮细胞表达水平显著下调,血清中TNF-α、IL-6含量均增加,IL-10含量减少;过表达miR-181b使小鼠血清中TNF-α、IL-6含量均减少(P<0.05),IL-10含量增加(P<0.05)。与对照组比较,H2O2诱导的血管内皮细胞的增殖能力显著下降,凋亡能力显著提高,miR-181b过表达使血管内皮细胞增殖能力提高,凋亡能力下降;与对照组比较,动脉粥样硬化模型组小鼠主动脉和H2O2诱导的血管内皮细胞中Caspase-3、Bax的mRNA和蛋白表达水平均上调,Bcl-2mRNA和蛋白表达水平下调,miR-181b过表达使动脉粥样硬化模型组小鼠主动脉和H2O2诱导的血管内皮细胞中Caspase-3、Bax的mRNA和蛋白表达水平均下调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达上调(P<0.05)。结论 miR-181b在动脉粥样硬化血管和H2O2诱导的血管内皮细胞中低表达,过表达miR-181b抑制细胞凋亡及促进细胞的增殖,可能在动脉粥样硬化的治疗中起到积极作用。 展开更多
关键词 miR-181b 动脉粥样硬化 血管内皮细胞 增殖 凋亡
miR-198过表达抑制视网膜母细胞瘤生长及侵袭的实验研究 认领
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作者 赵鑫 胥朵 +1 位作者 李少海 张文信 《局解手术学杂志》 2021年第1期6-11,共6页
目的探究微小RNA-198(miR-198)过表达对视网膜母细胞瘤(RB)Y79细胞系生长、侵袭及裸鼠异体移植瘤的影响。方法培养RB Y79细胞系,随机分为空白对照组(Control组)、阴性对照组和过表达组,采用Lipofectamine2000分别转染miR-NC、miR-198... 目的探究微小RNA-198(miR-198)过表达对视网膜母细胞瘤(RB)Y79细胞系生长、侵袭及裸鼠异体移植瘤的影响。方法培养RB Y79细胞系,随机分为空白对照组(Control组)、阴性对照组和过表达组,采用Lipofectamine2000分别转染miR-NC、miR-198模拟物至阴性对照组和过表达组Y79细胞。qRT-PCR检测转染后Y79细胞中miR-198的相对表达水平;利用干细胞成球试验和Transwell小室试验分别检测各组Y79细胞的增殖及侵袭能力;Western blot检测各组Y79细胞中Ki67、SOX2、OCT4、VEGF、Fibronectin蛋白表达水平。将培养好的miR-NC和miR-198 mimic细胞分别进行裸鼠皮下注射,60只裸鼠分为阴性对照组和过表达组,各组每5 d随机处死3只裸鼠,检测RB质量及体积,qRT-PCR检测瘤体中miR-198的mRNA相对表达水平;免疫组化法检测Ki67、SOX2、VEGF阳性表达率。结果与Control组及阴性表达组比较,过表达组Y79细胞中miR-198的相对表达水平较高(P<0.05),并且干细胞成球直径、数量、细胞侵袭率均较低(P<0.05);Western blot结果显示,与Control组及阴性表达组比较,过表达组Y79细胞中Ki67、SOX2、OCT4、VEGF、Fibronectin蛋白表达水平均较低(P<0.05)。过表达组裸鼠的瘤体质量及体积均小于阴性对照组(P<0.05),并且过表达组裸鼠瘤体组织中miR-198的mRNA相对表达水平高于阴性对照组(P<0.05),过表达组Ki67、SOX2、VEGF的阳性表达率低于阴性对照组(P<0.05)。结论miR-198可能在RB中作为抑癌基因发挥作用,过表达miR-198可明显抑制RB的增殖及侵袭能力,并抑制裸鼠瘤体生成。 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 微小RNA-198 增殖 侵袭动物模型 靶向治疗
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槲皮素通过抑制Src磷酸化抑制成纤维细胞的生长 认领
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作者 刘洋 陶凯 《中国美容整形外科杂志》 CAS 2021年第2期122-124,I0008,共4页
目的探讨槲皮素(quercetin,QE)对成纤维细胞生长的调节作用。方法自2018年1月至2019年1月辽宁中医药大学附属第四医院外科分别使用不同浓度的QE和生理盐水(对照组)处理增生性瘢痕成纤维细胞。通过MTT实验检测不同浓度的QE对成纤维细胞... 目的探讨槲皮素(quercetin,QE)对成纤维细胞生长的调节作用。方法自2018年1月至2019年1月辽宁中医药大学附属第四医院外科分别使用不同浓度的QE和生理盐水(对照组)处理增生性瘢痕成纤维细胞。通过MTT实验检测不同浓度的QE对成纤维细胞增殖的作用,应用Annexin V-PI染色法观察成纤维细胞的凋亡情况。通过Western blot检测QE对p-Src和Src蛋白的调节作用。构建沉默Src的成纤维细胞系,MTT实验检测QE对于沉默Src的成纤维细胞的增殖作用;Western blot检测QE对沉默Src的成纤维细胞中p-Src和Src蛋白的调节作用。结果与对照组相比,24 h时10μmol/L、20μmol/L和40μmol/L的QE对于细胞增殖的抑制率分别为(28.72±4.23)%、(39.69±4.09)%和(53.51±5.53)%;QE能够促进成纤维细胞的凋亡,抑制p-Src的表达水平。沉默Src后,QE对于成纤维细胞增殖能力的抑制作用消失。结论QE能够通过抑制Src的磷酸化抑制成纤维细胞的生长。 展开更多
关键词 槲皮素 成纤维细胞 增殖 凋亡
体外骨形态发生蛋白4抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移 认领
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作者 李海云 杨东光 +2 位作者 洪秀丽 李金波 王辉 《解剖学杂志》 CAS 2021年第2期123-128,共6页
目的:研究骨形态发生蛋白4(BMP4)对乳腺癌细胞MCF-7增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:将重组慢病毒Lv-BMP4及干扰慢病毒Lv-shBMP4感染MCF-7细胞,构建MCF-7/Lv-BMP4过表达组及MCF-7/LvshBMP4干扰实验组,同时设空白组(Blank)、慢病毒空... 目的:研究骨形态发生蛋白4(BMP4)对乳腺癌细胞MCF-7增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:将重组慢病毒Lv-BMP4及干扰慢病毒Lv-shBMP4感染MCF-7细胞,构建MCF-7/Lv-BMP4过表达组及MCF-7/LvshBMP4干扰实验组,同时设空白组(Blank)、慢病毒空载对照组(Lv-NC)、过表达实验组(Lv-BMP4)、干扰试验组(Lv-shBMP4)。RT-PCR及ELISA技术检测MCF-7细胞中BMP4过表达及干扰情况;CCK-8法检测MCF-7细胞的增殖能力;划痕愈合和Transwell实验检测MCF-7细胞的迁移能力和侵袭能力。结果:BMP4过表达的乳腺癌细胞株MCF-7/Lv-BMP4及BMP4低表达的干扰细胞株MCF-7/Lv-shBMP4构建成功;BMP4过表达组的BMP4蛋白表达水平较对照组显著升高,而Lv-shBMP4组的BMP4蛋白表达水平较对照组显著降低,表明BMP4过表达的乳腺癌细胞株MCF-7/Lv-BMP4及BMP4低表达的干扰细胞株MCF-7/Lv-shBMP4构建成功。BMP4过表达组的细胞增殖较对照组受到明显抑制,增殖活力较对照组明显降低;48 h后Lv-BMP4组划痕愈合能力较对照组显著降低,而Lv-shBMP4组划痕愈合能力较对照组明显升高;48 h后Lv-BMP4组MCF-7细胞穿膜数显著低于对照组,而Lv-shBMP4组MCF-7细胞穿膜数显著高于对照组。结论:BMP4可抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白4 慢病毒 乳腺癌 增殖 迁移
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盐酸埃克替尼对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响 认领
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作者 马志敏 巨晓 +4 位作者 魏会强 李海宁 郝秀玲 柴永娜 郭丽萍 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期510-514,共5页
目的研究盐酸埃克替尼对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响及对PTEN/PI3K/Bad信号通路的调控。方法肺癌A549细胞随机分为对照组和低、中、高剂量实验组及高剂量+SF1670实验组,各组设置6个复孔,低、中、高剂量实验组以12.5,25,50 mg·mL^... 目的研究盐酸埃克替尼对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响及对PTEN/PI3K/Bad信号通路的调控。方法肺癌A549细胞随机分为对照组和低、中、高剂量实验组及高剂量+SF1670实验组,各组设置6个复孔,低、中、高剂量实验组以12.5,25,50 mg·mL-1盐酸埃克替尼处理,对照组给予等量0.9%NaCl处理。以CCK-8法检测肺癌细胞A549存活率,以Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测肺癌A549细胞凋亡率,以蛋白质印迹法检测肺癌A549细胞凋亡相关蛋白及PTEN/PI3K/Bad信号通路相关蛋白的表达情况。结果给药48 h,低、中、高剂量实验组A549细胞存活率分别为(78.74±2.28)%,(58.20±6.15)%,(32.90±2.84)%,凋亡率分别为(15.70±2.39)%,(19.12±1.52)%,(33.40±3.16)%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与对照组相比,给药48 h低、中、高剂量实验组A549细胞Cleved Caspase-3、Bax、PTEN和p-Bad蛋白相对表达量升高,且随着盐酸埃克替尼作用浓度增大逐渐升高;Bcl-2,p-PI3K蛋白相对表达量降低,且随盐酸埃克替尼作用浓度增大逐渐降低(均P<0.05)。给药48 h,高剂量实验组和高剂量+SF1670实验组A549细胞凋亡率分别为(26.02±1.94)%,(13.98±1.31)%。与高剂量实验组相比,给药48 h,高剂量+SF1670实验组A549细胞Cleved Caspase-3和Bax蛋白相对表达量降低;Bcl-2蛋白相对表达量升高(均P<0.05)。结论盐酸埃克替尼可有效抑制肺癌A549细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与上调PTEN进而调控PI3K/Bad通路相关蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 肺癌 盐酸埃克替尼 增殖 凋亡
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