摘 要:
目的：HBeAg被认为与HBV引起免疫耐受、免疫系统功能障碍有关．筛选并克隆人肝细胞cDNA文库中与乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg)相互作用蛋白的基因，明确其具体作用机制．方法：应用酵母双杂交系统3，将多聚酶链反应（PCR)法扩增的HBeAg基因连接入酵母表达裁体pGBKT7中构建诱饵质粒，转化酵母细胞AHl09并在其内表达，然后与转化了人肝cDNA文库质粒pACT2的酵母细胞Y187进行配合，在营养缺陷型培养基和X—α—半乳糖(X—α—gal)上进行双重筛选阳性菌落，提取阳性酵母菌落的质粒转化大肠杆菌，接种在氨苄青霉素—LB平板上选择并测序，结果 在GenBank中进行生物信息学分析．结果：成功克隆出HBeAg基因并在酵母细胞中表达，与肝cDNA文库配合后选出既能在四缺(SD／—Trp—Leu—Ade—His)培养基又能在铺有X—α—gal的四缺培养基上生长，并变成蓝色的真阳性菌落39个，其中有5个未知基因，3个含金属硫蛋白2A基因的菌落，8个补体8α基因，1个补体因子H，1个其他lq，1个维甲酸受体应答元件2基因、2个细胞色素b基因、3个铁蛋白轻链，2个NND(P)H脱氢酶亚基，1个3—羟基类固醇表位酶，1个3—经基，3—甲基戊二酰辅酶A合成酶，1个双—特异性酪氨酸—Y—磷酸化调节激酶1A转录子突变体，1个Syndecans—1，3个2胺氧化酶，4个醒缩酶B，1个CD8l，1个ATP合成酶6基因．结论：成功克隆出乙型肝炎病毒e抗原的结合蛋白，为进一步研究HBeAg在病毒装配、分泌、影响宿主免疫系统功能等方面的具体作用提供了新线索． (共4页)
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