酵母双杂交技术筛选Hcbp6结合的肝细胞蛋白编码基因

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摘　　要:

目的：Hcbp6是与核心蛋白相结合的未知功能蛋白基因，为了初步提示他的生物学功能和在细胞中的存在形式采用酵母双杂交体系寻找与他相互作用的肝细胞蛋白，探讨Hcbp6的生物功能、方法：应用酵母双杂交系统3，构建Hcbp6诱饵质粒并转化酵母AHl09，与含人肝细胞cDNA文库质粒的酵母Y187进行配合，在涂有x—α—gal营养缺陷型培养基（SD／—Trp-Leu—His—Ade)上筛选生长．挑选蓝色克隆，提取此酵母克隆的质粒，转化大肠杆菌提取质粒DNA后进行测序，然后进行生物信息学分析．结果：筛选出4种与Hcbp6特异性相互作用的蛋白，包括Paralemmin(PALM)、Ran结合蛋白2(Ranbp2)、跨膜运输蛋白21(Tmp21)和血清白蛋白．结论：推测该蛋白可能为一分泌性蛋白，或与分泌蛋白的形成有关，进一步的生物学功能的研究需要更多的实验加以探讨． (共4页)