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马铃薯晚疫病抗性基因分子标记检测及抗性评价
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作者 刘勋 郑克邪 +10 位作者 张娇 徐茜 张蜀敏 赵勇 沈昱辰 谢德斌 唐道彬 吕长文 张凯 任茂智 王季春 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期538-549,共12页
马铃薯是重庆优势特色作物之一,但其安全生产受到晚疫病的严重威胁。马铃薯生产中种植抗病品种是防控马铃薯晚疫病最为经济有效和环境友好的途径。为了了解来自国内外不同种质的晚疫病抗性基因组成以及确定在重庆市具有晚疫病抗性的马... 马铃薯是重庆优势特色作物之一,但其安全生产受到晚疫病的严重威胁。马铃薯生产中种植抗病品种是防控马铃薯晚疫病最为经济有效和环境友好的途径。为了了解来自国内外不同种质的晚疫病抗性基因组成以及确定在重庆市具有晚疫病抗性的马铃薯品种(系),本研究以218份来自国内外的品种(系)为材料,进行了6个晚疫病抗性(R)基因分子标记检测,同时进行了田间晚疫病抗性评价及室内接种鉴定和筛选。研究结果显示,6个R基因的分子标记在供试材料中均有分布,但分子标记的组成不尽相同,主要分为4大类。第Ⅰ类含有具有广谱抗性基因的RB,晚疫病抗性评价表现为中抗以上;第Ⅲ类缺失R2 family基因标记,绝大部分表现为晚疫病敏感型;第Ⅱ类和第Ⅳ类中分别主要含有3个R基因(R2 Family+R3a+R3b)标记类型和4个R基因(R1+R2 Family+R3a+R3b)标记类型,这两类材料中表现出一定比例的晚疫病抗性水平,但第Ⅳ类中出现抗性表现的比例高于第Ⅱ类。结果说明含有RB基因标记贡献了较高的晚疫病抗性,缺失R2 famlily基因标记的材料可能不利于晚疫病抗性,利用这些基因标记辅助筛选有助于提高重庆地区晚疫病抗性育种效率。本研究评价了218份马铃薯材料6个重要R基因组成,并筛选出重庆地区表现抗性的多个材料,为新品种(系)的推广应用以及抗病育种选育提供了科学依据,同时为发掘新的抗病基因提供了遗传资源。 展开更多
关键词 马铃薯 晚疫病抗性 分子标记 评价
马铃薯Shaker基因家族全基因组鉴定和分析 预览
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作者 尹欢 卓凤萍 +1 位作者 邓可宣 任茂智 《重庆科技学院学报:自然科学版》 CAS 2019年第3期104-108,116共6页
钾素营养在植物的生长发育过程中具有重要作用。Shaker家族基因参与植物对低钾环境胁迫的响应过程,可帮助植物从土壤中吸收钾素。将拟南芥Shaker蛋白质序列作为源序列,在马铃薯数据库PGSC中搜索获得22个StShaker基因;通过多序列比对和... 钾素营养在植物的生长发育过程中具有重要作用。Shaker家族基因参与植物对低钾环境胁迫的响应过程,可帮助植物从土壤中吸收钾素。将拟南芥Shaker蛋白质序列作为源序列,在马铃薯数据库PGSC中搜索获得22个StShaker基因;通过多序列比对和保守结构域分析,最终从马铃薯基因组中鉴定出9个StShaker基因。通过分析其外显子内含子结构、系统发育树、染色体分布、蛋白质序列等,发现StShaker基因能够分为5组,有4个保守的结构域,所有的StShaker基因在结构域I中都有一个核心的GYGDE基序。低钾胁迫对大多数StShaker基因在转录水平上没有显著影响,StShaker可能是受转录后水平上的调控来影响马铃薯对钾离子的吸收。 展开更多
关键词 Shaker基因家族 马铃薯 钾离子吸收 表达模式 系统发育
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家蚕色氨酸羟化酶(TRH)基因的克隆及表达特性分析
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作者 李田 陈曦 +5 位作者 李海银 王计英 孙伟 申琦 鲁成 陈萍 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期102-113,共12页
5-羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT)是生物界广泛分布的信号分子,涉及动物的重要行为。5-HT是色氨酸羟化酶(Tryptophan hydroxylase, TRH)将L-色氨酸羟化为5-羟-L-色氨酸,5-羟-L-色氨酸随即被多巴脱羧酶(Aromatic L-amino acid decarb... 5-羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT)是生物界广泛分布的信号分子,涉及动物的重要行为。5-HT是色氨酸羟化酶(Tryptophan hydroxylase, TRH)将L-色氨酸羟化为5-羟-L-色氨酸,5-羟-L-色氨酸随即被多巴脱羧酶(Aromatic L-amino acid decarboxylase, DDC)脱羧而成。TRH作为5-HT合成的限速酶,在无脊椎动物神经调控中具有重要地位。鳞翅目昆虫中TRH的功能研究并不多。在家蚕中克隆了家蚕TRH (Bombyx mori TRH, BmTRH)的cDNA序列1667bp,其中包含1632bp的开放读码框(Open reading frame,ORF)。人类TPH或者果蝇TRH(Drosophila TRH, DmTRH)与BmTRH有高度相似性,尤其BmTRH和DmTRH之间大多数氨基酸保守说明它们在系统发育上的密切关系并可能有相似功能。基因表达分析显示BmTRH主要表达于头部和中枢神经组织,免疫组织化学和Western blotting结果显示BmTRH只存在于神经组织中,即BmTRH可能仅参与家蚕的神经活动。此外,家蚕DDC(B.mori decarboxylase,BmDDC)和蛋白具有TRH活性的苯丙氨酸羟化酶基因(Phenylalanine hydroxylase, BmPAH)也在中枢神经系统中有表达,暗示家蚕神经系统5-HT的合成与果蝇中不同,可能有两种不同的调控机制。 展开更多
关键词 5-羟色胺 色氨酸羟化酶 分布 家蚕
数字聚合酶链反应及其在感染性疾病中的应用 预览
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作者 赵云 王蕾 +2 位作者 郭雅萌 陈力 汤慧 《微生物与感染》 2019年第3期185-192,共8页
数字聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)采用与定量PCR相同的荧光化学原理和不同的数学原理来实现对靶标核酸序列的绝对定量,其摒弃了对外部参照的依赖,同时具有更高的数据精密度,提高了重复性和再现性。数字PCR的应用涵盖生... 数字聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)采用与定量PCR相同的荧光化学原理和不同的数学原理来实现对靶标核酸序列的绝对定量,其摒弃了对外部参照的依赖,同时具有更高的数据精密度,提高了重复性和再现性。数字PCR的应用涵盖生命科学众多领域,特别是在医学检验领域,其对疾病相关核酸分子标记的准确分析,为疾病的早期诊断、进展监测、疗效评估提供了动态量化指标。数字PCR的出现将推动基于核酸扩增技术的分子生物学检测迈入精准定量阶段。本文就数字PCR尤其是微滴式数字PCR在感染性疾病中的应用进展及前沿进行综述。 展开更多
关键词 数字聚合酶链反应 微滴式数字聚合酶链反应 泊松分布 绝对定量 感染性疾病
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番茄SlHB8基因的克隆及其对非生物胁迫的响应
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作者 杨洋 先志强 +1 位作者 陈日远 郝彦伟 《北方园艺》 CAS 北大核心 2019年第18期10-18,共9页
HD-Zip Ⅲ转录因子家族在植物的生长发育中发挥着重要作用。以Micro-Tom番茄为试材,采用RT-PCR、荧光定量PCR以及生物信息学的方法,研究了番茄SlHB8基因的序列特征、表达模式以及在非生物胁迫下的响应,以期为鉴定SlHB8基因在番茄中的功... HD-Zip Ⅲ转录因子家族在植物的生长发育中发挥着重要作用。以Micro-Tom番茄为试材,采用RT-PCR、荧光定量PCR以及生物信息学的方法,研究了番茄SlHB8基因的序列特征、表达模式以及在非生物胁迫下的响应,以期为鉴定SlHB8基因在番茄中的功能奠定基础。结果表明:番茄中含有1个编码HD-Zip Ⅲ转录因子的基因SlHB8。该基因全长2 523 bp,编码841个氨基酸,含有HD、bZip、START和MEKHLA 4个保守结构域,与拟南芥的ATHB8同源性最高。SlHB8在番茄各组织中均有表达,在茎中的表达量最高。高低温、干旱、伤害、乙烯、水杨酸处理均能诱导该基因下调表达,而赤霉素、脱落酸、生长素处理均能使该基因的表达先增加再下降。利用PLACE和PlantCARE对SlHB8启动子区域的顺式作用元件进行预测分析发现,SlHB8启动子含有赤霉素、脱落酸、水杨酸、热激、伤害、干旱等顺式作用元件。表明SlHB8可能在番茄的非生物胁迫应答中发挥重要调控作用。 展开更多
关键词 番茄 SlHB8 HD-ZIP Ⅲ转录因子 非生物胁迫
重庆市黔江猕猴桃果园土壤养分状况分析 预览
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作者 严明书 吴春梅 +6 位作者 蒙丽 丁相伦 董攀 邓海 雷家立 龚媛媛 鲍丽然 《物探与化探》 CAS 北大核心 2019年第5期1123-1130,共8页
为全面了解重庆市黔江区猕猴桃果园土壤养分状况,对黔江区具有代表性的果园土壤进行实地取样,系统分析了黔江猕猴桃果园土壤的pH、有机质、阳离子交换量、土壤中植物营养元素和重要生命元素全量及有效量。结果表明:黔江猕猴桃果园土壤... 为全面了解重庆市黔江区猕猴桃果园土壤养分状况,对黔江区具有代表性的果园土壤进行实地取样,系统分析了黔江猕猴桃果园土壤的pH、有机质、阳离子交换量、土壤中植物营养元素和重要生命元素全量及有效量。结果表明:黔江猕猴桃果园土壤整体呈中到酸性,有机质含量较丰富,平均值达到2.89%,但土壤阳离子交换量整体偏低,4级(中偏贫)和5级(贫缺)水平的样本累计占75%;果园土壤大量营养元素氮、磷和钾含量总体较好,但部分样点已经超过猕猴桃适宜生长的范围,中量营养元素钙整体缺乏,个别地区含量丰富,镁含量整体丰富,个别地区较缺乏,微量元素铁、锰和钼含量在不同采样点差异较大,研究区土壤总体富硒。综合以上分析,建议在今后的施肥过程中,可增施有机肥,以提高有机质含量和土壤阳离子交换量;维持或适量增加氮肥的施用量,控制磷肥和钾肥的施用量;对于土壤中微量元素的缺乏,是否需要施肥,还需进一步研究。 展开更多
关键词 黔江区 猕猴桃园 土壤养分 pH 有机质 阳离子交换量 微量元素
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水淹胁迫下三峡库区消落带适生狗牙根转录因子的转录组分析 预览
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作者 李彦杰 杨俊年 +3 位作者 刘仁华 周大祥 甘丽萍 吴应梅 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期265-269,共5页
【目的】从转录水平整体分析狗牙根在水淹生境下的基因表达模式对探索植物的抗水淹机制具有重要意义。【方法】本研究通过转录组测序研究了水淹(处理组)和非水淹(对照组)生境下的三峡库区消落带适生狗牙根的转录因子(transcription... 【目的】从转录水平整体分析狗牙根在水淹生境下的基因表达模式对探索植物的抗水淹机制具有重要意义。【方法】本研究通过转录组测序研究了水淹(处理组)和非水淹(对照组)生境下的三峡库区消落带适生狗牙根的转录因子(transcription factor,TF)基因表达变化。【结果】测序数据经拼接共获得147 256条非冗余Unigenes,经Nr、Nt、Swissprot、KEGG、COG、Interpro和GO数据库可注释72.84%的Unigene;筛选到与狗牙根响应水淹胁迫有关的54个家族的785条差异表达TF,其中属于27个家族的348条TF上调表达,34个家族的437条TF下调表达;WRKY、b HLH、MYB、AP2-EREBP、MYB-related、Trihelix、NAC、MADS和TCP等是9个差异表达TF数量最多和表达量变化最显著的TF家族。基于实时定量PCR对水淹生境下狗牙根TF表达水平进行了检测,结果与转录组分析基本一致。【结论】初步分析了水淹生境下狗牙根转录因子的特征表达谱,为进一步筛选与抗水淹有关的关键基因和调控基因提供基础。 展开更多
关键词 狗牙根 水淹胁迫 转录组分析 TF 差异表达基因
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基于ISSR、SCoT、SRAP标记的川续断属药用植物亲缘关系研究 被引量:2
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作者 陈大霞 张雪 +4 位作者 王钰 潘媛 李隆云 易思荣 张泽 《中草药》 CSCD 北大核心 2018年第4期903-909,共7页
目的 研究9种川续断属药用植物的亲缘关系。方法 采用ISSR、SCoT、SRAP 3种分子标记进行多态性检测,TREECONW分析软件计算遗传距离,UPGMA方法构建树状聚类图。结果 ISSR、SCoT、SRAP标记揭示的多态百分率差异不大,分别为90.4%、88.5%、8... 目的 研究9种川续断属药用植物的亲缘关系。方法 采用ISSR、SCoT、SRAP 3种分子标记进行多态性检测,TREECONW分析软件计算遗传距离,UPGMA方法构建树状聚类图。结果 ISSR、SCoT、SRAP标记揭示的多态百分率差异不大,分别为90.4%、88.5%、88.2%,均表明供试材料的遗传多态性极为丰富;3种标记均揭示日本续断与大头续断之间遗传距离最大,表明二者亲缘关系最远;3种标记均将川续断属9种药用植物聚为3类,即大头续断与丽江续断、深紫续断与日本续断分别聚为一类,峨眉续断单独为一支,其余4个种聚为一类;ISSR标记和SRAP标记的聚类结果基本相同,仅是大理续断和川续断聚类先后略有差异。结论 3种标记的聚类结果与经典分类具有很好的吻合度,证实了分子标记技术的可靠性,可作为川续断属植物亲缘关系研究的有效方法之一。 展开更多
关键词 川续断属 ISSR SCoT SRAP 亲缘关系
六种生物降解地膜对马铃薯生育期及产量的影响初探 预览 被引量:2
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作者 金良 李明聪 +3 位作者 冯顺 张蜀敏 王安平 任茂智 《南方农业》 2018年第1期10-12,共3页
为了在马铃薯生产中推广使用安全环保的地膜,选择6种生物可降解地膜进行试验,研究其对马铃薯生育期及产量的影响,结果表明:1)K9-8和V1-8两个类型的降解膜降解时间短,适合中、低海拔地区早市早熟马铃薯品种地膜覆盖栽培需要。2)K9-10... 为了在马铃薯生产中推广使用安全环保的地膜,选择6种生物可降解地膜进行试验,研究其对马铃薯生育期及产量的影响,结果表明:1)K9-8和V1-8两个类型的降解膜降解时间短,适合中、低海拔地区早市早熟马铃薯品种地膜覆盖栽培需要。2)K9-10和V1-10两个类型的降解膜降解时间长一些,能够满足中晚熟马铃薯品种的地膜覆盖栽培需要。3)K9-12和V1-12两个类型的降解膜降解时间较长,不太适合本地区的马铃薯地膜覆盖栽培需要。 展开更多
关键词 马铃薯 生物降解地膜 生育期 产量
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重庆市石柱县黄连根腐病病原菌的分离与鉴定
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作者 陈姗姗 罗秀媚 杨星勇 《植物保护学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期1437-1438,共2页
黄连Coptis chinensis是一种常用中药,具有泻火、解毒、清热、燥湿和良好的抗菌作用,主产于重庆市石柱县,其产量占我国黄连总产量的60%(宋旭红等,2017)。近年来,黄连的长期复耕、复种导致黄连根腐病发生逐年加重,平均发病率达40%,严重... 黄连Coptis chinensis是一种常用中药,具有泻火、解毒、清热、燥湿和良好的抗菌作用,主产于重庆市石柱县,其产量占我国黄连总产量的60%(宋旭红等,2017)。近年来,黄连的长期复耕、复种导致黄连根腐病发生逐年加重,平均发病率达40%,严重地块达80%~90%,平均产量由2250kg/hm^2降到750kg/hm^2以下(宋旭红等,2017)。 展开更多
关键词 根腐病 石柱县 黄连 重庆 病原菌 鉴定 分离 总产量
巫溪县早熟马铃薯高产栽培技术 预览 被引量:1
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作者 金良 李明聪 +3 位作者 冯顺 张蜀敏 宋祖武 任茂智 《现代农业科技》 2018年第7期89-89,93共2页
马铃薯是世界上四大主要粮食作物之一,在巫溪县以脱毒种薯推广、晚疫病防治为核心技术,集成推广“一推三改”关键技术,提前了品种上市时间,提高了产量和质量。从选地、品种选择、种薯处理、播种、田间管理、病害防治、贮存等方面介绍了... 马铃薯是世界上四大主要粮食作物之一,在巫溪县以脱毒种薯推广、晚疫病防治为核心技术,集成推广“一推三改”关键技术,提前了品种上市时间,提高了产量和质量。从选地、品种选择、种薯处理、播种、田间管理、病害防治、贮存等方面介绍了早熟马铃薯高产栽培技术,以期为种植户提供参考。 展开更多
关键词 马铃薯 早熟 高产栽培 “一推三改”技术 重庆巫溪
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马铃薯生产使用中小型机械全程化净作试验研究 预览 被引量:1
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作者 李明聪 金良 +4 位作者 王安平 冯顺 张蜀敏 汤世才 任茂智 《南方农业》 2018年第7期52-54,共3页
2012—2017年,在重庆市巫溪县的试验表明,马铃薯生产全程机械化模式比传统模式每667 m2降低成本299.7元,增产增收269元,两项共增加收入568.7元。由于山区田块面积偏小,各家各户的田块之间有边界,多年机耕道路失修甚至没有留机耕道,这些... 2012—2017年,在重庆市巫溪县的试验表明,马铃薯生产全程机械化模式比传统模式每667 m2降低成本299.7元,增产增收269元,两项共增加收入568.7元。由于山区田块面积偏小,各家各户的田块之间有边界,多年机耕道路失修甚至没有留机耕道,这些因素严重制约着机械化操作。因此,首先需加强农田适应机械化作业改造,留出机耕道,利于机械化作业。实际生产中,还应统一马铃薯种植品种或者几个村社用生育期相近的品种,以有利于机械化操作,避免马铃薯生育期不一致造成机手效益低的局面。 展开更多
关键词 马铃薯 净作 生产 全程化机械 传统模式
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马铃薯套种玉米不同种植模式研究 预览 被引量:1
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作者 李明聪 金良 +4 位作者 王安平 梁峰铭 冯顺 张蜀敏 任茂智 《现代农业科技》 2018年第8期82-83,共2页
对全程机械化生产和传统生产2种模式下马铃薯套种玉米效果进行比较。结果表明,机械化生产能显著降低生产成本(降低了1 572元/hm2),利润增加10 782元/hm2,达到了降低成本、提高经济效益的目的。
关键词 马铃薯 玉米 套作 全程机械化
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重庆市马铃薯生产现状问题与对策初探 预览
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作者 金良 李明聪 +4 位作者 王继平 王昌忠 冯顺 张蜀敏 任茂智 《南方农业》 2018年第28期88-89,107共3页
马铃薯是粮菜饲兼具的作物之一.通过分析重庆的地理和气候特点,解析重庆市马铃薯品种复杂、种性退化严重等问题,提出引进良种、使用脱毒薯种、发展绿色马铃薯品种,推动产业化进程、科研单位和企业要增加投入等措施来提高效益,达到农户... 马铃薯是粮菜饲兼具的作物之一.通过分析重庆的地理和气候特点,解析重庆市马铃薯品种复杂、种性退化严重等问题,提出引进良种、使用脱毒薯种、发展绿色马铃薯品种,推动产业化进程、科研单位和企业要增加投入等措施来提高效益,达到农户增收的目的. 展开更多
关键词 马铃薯 种植 高效 重庆市
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H2S可能作为H2O2的上游信号介导茉莉酸甲酯诱导竹根姜对青枯菌的抗性 预览
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作者 周大祥 熊书 《西北农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期775-780,共6页
为探讨H_2S和H_2O_2在茉莉酸甲酯(MeJA)诱导竹根姜抗姜瘟病过程中的上下游关系,以竹根姜幼苗为研究对象,采用MeJA、NH_2OH+MeJA、AsA+MeJA、无菌水等进行喷雾,观察竹根姜发病情况,并对H_2S、H_2O_2、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化... 为探讨H_2S和H_2O_2在茉莉酸甲酯(MeJA)诱导竹根姜抗姜瘟病过程中的上下游关系,以竹根姜幼苗为研究对象,采用MeJA、NH_2OH+MeJA、AsA+MeJA、无菌水等进行喷雾,观察竹根姜发病情况,并对H_2S、H_2O_2、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和木质素等指标进行检测。结果显示,MeJA处理可以显著降低竹根姜的病情指数,提高抗病性,而H_2S合成抑制剂NH_2OH和H_2O_2清除剂AsA均抑制MeJA诱导的抗病效果。进一步研究发现,MeJA能够明显促进H_2S(主要由半胱氨酸脱巯基酶合成)和H_2O_2的合成以及半胱氨酸脱巯基酶的活性,提高木质素合成相关酶(PAL和POD)活性,促进木质素合成。H_2S合成抑制剂NH2OH可降低半胱氨酸脱巯基酶的活性并抑制H_2S和H_2O_2的产生,而H_2O_2清除剂AsA可抑制H_2O_2的产生,但对H_2S的合成和半胱氨酸脱巯基酶的活性没有影响。由此证明,H_2S可能作为H_2O_2的上游信号参与竹根姜对MeJA的响应。MeJA在竹根姜细胞内进行有效的信号传导,通过调控细胞内下游信号分子H_2S和H_2O_2的产生,激活木质素合成相关酶的活性,促进木质素的合成,提高竹根姜对青枯菌的抗性。 展开更多
关键词 硫化氢 过氧化氢 茉莉酸甲酯 竹根姜 青枯菌
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EMA-qPCR方法快速检测番茄溃疡病菌活菌研究 预览 被引量:1
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作者 周大祥 熊书 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第1期99-104,共6页
将叠氮溴乙锭(EMA)与实时荧光定量PCR技术相结合(EMA-q PCR),建立一种有效快速检测番茄溃疡病活菌的方法。以番茄溃疡病菌Pat-1基因为检测靶标,菌体经EMA渗透处理,再进行q PCR特异性扩增。结果显示,q PCR检测灵敏度为1.0×101CF... 将叠氮溴乙锭(EMA)与实时荧光定量PCR技术相结合(EMA-q PCR),建立一种有效快速检测番茄溃疡病活菌的方法。以番茄溃疡病菌Pat-1基因为检测靶标,菌体经EMA渗透处理,再进行q PCR特异性扩增。结果显示,q PCR检测灵敏度为1.0×101CFU/m L;当EMA的浓度为2.0μg/m L时,能有效抑制1.0×107CFU/m L灭活死菌的扩增,对活菌的扩增没有影响。当活菌数在1.0×101~1.0×105CFU内,每个q PCR反应体系中活菌CFU数与Ct值呈线性相关(R2=0.987)。不同温度处理后EMA-q PCR检测番茄溃疡病菌的存活情况并与平板计数法进行比较,表明待检样品可在4和20℃短期保存。对疑似带病番茄种子样品进行EMA-q PCR检测,发现EMA-q PCR方法能减少番茄溃疡病菌PCR检测的假阳性结果 。本研究建立的EMA-q PCR方法是一种能有效检测番茄溃疡病活菌的方法,并能有效避免PCR检测实际样品可能造成的假阳性结果。 展开更多
关键词 番茄溃疡病菌 叠氮溴乙锭(Ethidium monoazide bromide EMA) 实时荧光定量PCR(q PCR)
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油菜MADS-box家族基因AGL11的克隆、表达及转化油菜的研究 预览 被引量:1
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作者 熊书 李彦杰 周大祥 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第10期2174-2178,共5页
【目的】本研究为油菜种子中油脂合成分子调控机理提供新的线索。【方法】通过定量PCR分析油菜AGL11基因的组织表达模式,同时构建AGL11的干扰载体。【结果】生物信息学分析发现油菜AGL11具有完整且典型的MADS-box保守结构域,蛋白整体形... 【目的】本研究为油菜种子中油脂合成分子调控机理提供新的线索。【方法】通过定量PCR分析油菜AGL11基因的组织表达模式,同时构建AGL11的干扰载体。【结果】生物信息学分析发现油菜AGL11具有完整且典型的MADS-box保守结构域,蛋白整体形态呈现典型的DNA核酸结合结构,属于MADS-box家族转录调控因子,亲源关系与拟南芥AGL11蛋白最近。定量PCR研究发现,AGL11在油菜盛花期和果夹5DAP(盛花后5 d的种子)表达量最高,实验成功构建了RNA干扰载体。【结论】AGL11基因在油菜种子发育和油脂积累过程中强烈表达,该基因可能在种子发育及油脂的合成中发挥着重要作用。RNA干扰载体的构建成功将为后续获得转基因油菜,观察转基因油菜胚的发育和种子油脂的积累,从而确定AGL11在油菜胚的发育及油脂的合成中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 油菜 MADS-BOX AGL11 RNAI 油脂合成
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利用EMA-qPCR建立快速检测猕猴桃溃疡病菌活菌的方法 预览 被引量:3
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作者 周大祥 殷幼平 +1 位作者 王中康 熊书 《植物保护》 CSCD 北大核心 2017年第3期143-148,共6页
利用叠氮溴乙锭(ethidium monoazide bromide,EMA)与实时荧光定量PCR技术相结合(EMA-qPCR),建立了一种有效快速检测猕猴桃溃疡病菌活菌的方法。以猕猴桃溃疡病菌ITS序列为检测靶标,菌体经EMA渗透处理,再进行qPCR特异性扩增。结果显... 利用叠氮溴乙锭(ethidium monoazide bromide,EMA)与实时荧光定量PCR技术相结合(EMA-qPCR),建立了一种有效快速检测猕猴桃溃疡病菌活菌的方法。以猕猴桃溃疡病菌ITS序列为检测靶标,菌体经EMA渗透处理,再进行qPCR特异性扩增。结果显示,qPCR检测灵敏度为2cfu;当EMA的浓度为2.0μg/mL时,能有效抑制1.0×10~7 cfu/mL经高温灭活的死菌的扩增,对活菌的扩增没有影响。当活菌数在1.0×10~1~1.0×10~5 cfu范围内,每个qPCR反应体系中活菌数与Ct值呈线性相关(R~2=0.988)。不同温度处理活菌菌悬液后用EMA-qPCR检测猕猴桃溃疡病菌的存活情况并与平板计数法进行比较,结果表明待检样品可在4℃和20℃短期保存。对疑似带病猕猴桃材料进行EMA-qPCR检测,结果表明能减少猕猴桃溃疡病菌PCR的假阳性结果。本研究建立的EMAqPCR方法是一种有效检测猕猴桃溃疡病菌活菌的方法,能有效避免PCR检测实际样品可能造成的假阳性结果。 展开更多
关键词 猕猴桃溃疡病菌 叠氮溴乙锭 实时荧光定量PCR 活菌检测
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沉默CDC37抑制结肠癌细胞Lovo和Ls174T侵袭迁移
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作者 朱剑军 燕芳 +3 位作者 陶佳 朱晓华 刘家有 邓世山 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期58-65,共8页
前期研究发现周期分裂蛋白37(cell division cycle 37,CDC37)的异常表达可能与结直肠腺癌的转移有关,但是其作用机制尚不清楚。本研究通过实时定量PCR和免疫印迹实检测CDC37在不同肠癌细胞中的m NRA和蛋白质表达水平,结果发现CDC37在... 前期研究发现周期分裂蛋白37(cell division cycle 37,CDC37)的异常表达可能与结直肠腺癌的转移有关,但是其作用机制尚不清楚。本研究通过实时定量PCR和免疫印迹实检测CDC37在不同肠癌细胞中的m NRA和蛋白质表达水平,结果发现CDC37在结肠癌Lovo和Ls174T细胞中表达较高。siRNA靶向沉默CDC37表达后,细胞侧向迁移能力、垂直迁移能力、侵袭活性均显著降低。实时定量PCR和免疫印迹实验结果发现,敲除CDC37后,MMP9和MMP2的m NRA和蛋白质表达水平均显著下调。以上研究结果表明,CDC37通过调节MMP9和MMP2等侵袭转移关键分子的表达在结肠癌细胞侵袭转移过程中发挥关键作用。 展开更多
关键词 CDC37 结肠癌 肿瘤转移 侵袭
金龟子绿僵菌CQMa421与杀虫剂、杀菌剂的兼容性 预览 被引量:3
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作者 彭国雄 谢佳沁 夏玉先 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期747-751,共5页
本研究通过测试杀虫剂和杀菌剂在田间使用剂量下对金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae CQMa421孢子萌发率的影响,筛选了与菌株CQMa421兼容的25种防治水稻、蔬菜和茶叶重要害虫的常用杀虫剂和11种防治水稻、蔬菜重要病害的杀菌剂。结果... 本研究通过测试杀虫剂和杀菌剂在田间使用剂量下对金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae CQMa421孢子萌发率的影响,筛选了与菌株CQMa421兼容的25种防治水稻、蔬菜和茶叶重要害虫的常用杀虫剂和11种防治水稻、蔬菜重要病害的杀菌剂。结果表明,农药有效成分、浓度影响绿僵菌CQMa421孢子萌发率外,制剂组成也是重要影响因素,不同厂家的同一有效成分的杀虫剂对菌株CQMa421活性影响存在差异,研究结果为活体微生物农药与其他杀虫剂、杀菌剂的联合使用提供了依据。 展开更多
关键词 金龟子绿僵菌 化学杀虫剂、杀菌剂 兼容性
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