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家蚕核型多角体病毒bro基因的单核苷多态性研究 预览 被引量:3
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作者 王霞 潘国庆 +2 位作者 庞敏 李艳红 周泽扬 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期 294-299,共6页
bro(baculovirus repeated ORFs)基因家族是一类存在于核型多角体病毒中比较复杂的基因家族.家蚕核型多角体病毒T3 BmNPV基因组中有5个bro基因,分别为bro-a,bro-b,bro-c,bro-d,bro-e.对我国的BmNPV CQ1株进行了全基因组测序,与T3序列比... bro(baculovirus repeated ORFs)基因家族是一类存在于核型多角体病毒中比较复杂的基因家族.家蚕核型多角体病毒T3 BmNPV基因组中有5个bro基因,分别为bro-a,bro-b,bro-c,bro-d,bro-e.对我国的BmNPV CQ1株进行了全基因组测序,与T3序列比较发现两个差异较大区域,分别命名为V1,V2区.在此基础上,对来自国内不同地区的另外5株BmNPV分离株对应的差异区域进行了研究,克隆了包含15个bro基因的10个DNA片段,其中包含了5个bro-c基因序列,5个bro-d基因序列,4个bro-e基因序列,加上公共数据库中已有的2个bro-c、2个bro-d、1个bro-e,合并后对bro-c、bro-d、bro-e分别进行核苷酸多态性分析,结果表明bro-c、d、e类基因都存在高密度的SNP位点.出现在这3类基因中的单核苷酸位点或核苷酸片段的插入/缺失数目分别为9、1、1.(θ,π)分析表明bro-c类基因的多态性在3类bro基因中最高.Tajima'D检验结果说明这些核苷酸变化符合中性突变假说.Pi(a)/Pi(s)分析暗示bro-c,bro-d和bro-e的N端的一些区段受到正向选择. 展开更多
关键词 家蚕核型多角体病毒 bro基因 单核苷多态性 插入/缺失 Tajima’D检验
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家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)侵染草地贪夜蛾卵巢细胞(Sf21)体系的建立 预览 被引量:6
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作者 李艳红 潘国庆 +1 位作者 胡军华 周泽扬 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期 151-154,共4页
家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,简称N.b)经KOH处理后,接种于草地贪夜蛾卵巢细胞(Sf21),建立家蚕微孢子感染增殖体系,同时,对孢子与宿主细胞在感染增殖过程中的形态变化进行了跟踪观察.KOH处理的孢子发芽率约为67%,Sf21细胞的初期感染率... 家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,简称N.b)经KOH处理后,接种于草地贪夜蛾卵巢细胞(Sf21),建立家蚕微孢子感染增殖体系,同时,对孢子与宿主细胞在感染增殖过程中的形态变化进行了跟踪观察.KOH处理的孢子发芽率约为67%,Sf21细胞的初期感染率约为4.3%,接种24 h内,细胞感染率变化不明显,但随后逐渐增加,到接种后的第7天达76.9%.接种后第12天起,细胞内充满不同发育阶段的孢子,并可见大量的胞外游动孢子.随后,大量细胞破裂,孢子逸出后,破裂的细胞内出现大量囊泡,且有合胞体(巨型多核融合细胞)出现.另外,将感染孢子的家蚕中肠组织和丝腺组织用胰蛋白酶处理后直接接种Sf21细胞,不经发芽处理,细胞也能感染. 展开更多
关键词 家蚕微孢子虫 草地贪夜蛾卵巢细胞(Sf21) 感染 合胞体
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杆状病毒表达载体系统研究进展 预览 被引量:4
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作者 曾铮 吴大洋 《中国蚕业》 2005年第3期 4-7,共4页
杆状病毒(Baculovirus)是一类超大双链环状DNA分子(约135kbp),因其成员的病毒体呈杆状而得名.这类病毒主要见于昆虫体内,是已知昆虫病毒中类群最大、发现最早、研究最多且实用意义很大的昆虫病毒.其代表型苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Au... 杆状病毒(Baculovirus)是一类超大双链环状DNA分子(约135kbp),因其成员的病毒体呈杆状而得名.这类病毒主要见于昆虫体内,是已知昆虫病毒中类群最大、发现最早、研究最多且实用意义很大的昆虫病毒.其代表型苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa Californica Nuclear Polyhedrosis Virus,AcMNPV)研究得最为深入.80年代初,国外学者发现多角体蛋白基因(polh)的强启动子及晚期大量表达的特性,Smith等首次建立了AcMNPV/秋黏虫细胞(spodoptera frugiperda,sf)表达系统,表达了人β干扰素.从此,以杆状病毒作为载体,在昆虫细胞或虫体内表达外源基因,形成了昆虫杆状病毒表达载体系统(Baculovirus Expression Vector System,BEVS).早期的BEVS有很多不足,如重组率较低、筛选困难、操作周期长、产物不易纯化等.短短20多年时间里,随着杆状病毒分子生物学研究的不断深入,杆状病毒表达系统迅速发展,不断完善,已成为当今基因工程领域四大表达系统之一,在研究基因表达调控、蛋白质结构和功能分析及各种生物活性物质的制备等方面发挥着越来越重要的作用. 展开更多
关键词 表达载体系统 杆状病毒 苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒 研究进展 环状DNA分子 多角体蛋白基因 昆虫病毒 ACMNPV Virus
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低分子量热激蛋白Bmhsp19.9基因的表达 预览 被引量:5
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作者 李斌 夏庆友 +2 位作者 藤井博 伴野丰 鲁成 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 2005年第2期 195-201,共7页
利用RT-PCR技术,对家蚕(Bombyxmori)低分子量热激蛋白Bmhsp19.9基因进行了定量表达分析.Bmhsp19.9在各组织中均有一定量的表达,但不同组织间的表达差异达10多倍,表达量丰富的组织是生长发育旺盛的组织,如精巢和卵巢,然后是丝腺、蛹等组... 利用RT-PCR技术,对家蚕(Bombyxmori)低分子量热激蛋白Bmhsp19.9基因进行了定量表达分析.Bmhsp19.9在各组织中均有一定量的表达,但不同组织间的表达差异达10多倍,表达量丰富的组织是生长发育旺盛的组织,如精巢和卵巢,然后是丝腺、蛹等组织.其应激表达模式可分为3类,以其在精巢、后部丝腺和脂肪体中的强应激表达模式为主,经热刺激处理后其表达量有显著增加.经刺激诱导2 h后其表达量达到最高,随后逐渐降低,在热刺激诱导12 h后是未刺激的2~3倍,而此时Bmhsp19.9在脂肪体中的应激表达是其对照的10多倍.根据Bmhsp19.9在不同组织中的基本表达量、应激表达量和应激表达的持续时间各不相同,显示其与细胞分裂与分化等生命活动有一定联系.并认为其在后部丝腺、脂肪体、精巢、卵巢与血液中作用方式不一样,推测其作为分子伴侣在组织间的作用对象与作用效应也应有所差异. 展开更多
关键词 热激蛋白 低分子量 基因 RT-PCR技术 表达模式 后部丝腺 表达量 脂肪体 表达分析 表达差异 生长发育 持续时间 生命活动 细胞分裂 作用方式 作用效应 作用对象 分子伴侣 热刺激 组织 应激 精巢 定量 卵巢 诱导 分化 血液
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热激蛋白研究进展 预览 被引量:7
5
作者 孙卫忠 李斌 +2 位作者 王彦文 柴春利 鲁成 《蚕学通讯》 2003年第1期 21-27,共7页
热激蛋白(Heat Shock Protein)是生物体在多种刺激下产生的一种蛋白质.其特点是分布广泛、表达具有多样性.其生理功能主要起分子伴侣作用,维持生物体正常生理功能.热激蛋白基因的表达调控主要在转录水平上进行,但也有部分表现为翻译水... 热激蛋白(Heat Shock Protein)是生物体在多种刺激下产生的一种蛋白质.其特点是分布广泛、表达具有多样性.其生理功能主要起分子伴侣作用,维持生物体正常生理功能.热激蛋白基因的表达调控主要在转录水平上进行,但也有部分表现为翻译水平调控.其基因一般含有保守序列,根据序列的保守性和多样性可推断相应生物体在生物进化过程中的位置.同时本文介绍了热激蛋白在体外表达的研究状况. 展开更多
关键词 热激蛋白 生理功能 分子伴侣作用 基因表达 体外表达 热刺激
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家蚕铜锌超氧化物歧化酶cDNA的克隆与测序 预览
6
作者 唐云明 鲁成 +1 位作者 向仲怀 许禾声 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第4期 543-546,共4页
超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)是超氧阴离子自由基(O-2)的专一清除剂,故其在维持生物体内阴离子自由基产生与消除的动态平衡中起着重要的作用.SOD还可以预防衰老,在一些疾病(如肿瘤、炎症及自身免疫疾病等)的治疗中具有良... 超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)是超氧阴离子自由基(O-2)的专一清除剂,故其在维持生物体内阴离子自由基产生与消除的动态平衡中起着重要的作用.SOD还可以预防衰老,在一些疾病(如肿瘤、炎症及自身免疫疾病等)的治疗中具有良好的疗效.因此SOD的研究与应用,具有广阔的前景(袁勤生,1991). 展开更多
关键词 家蚕 超氧化物歧化酶 CDNA 克隆 测序
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家蚕线粒体基因组全序列测定与分析 预览 被引量:21
7
作者 鲁成 刘运强 +4 位作者 廖顺尧 李斌 向仲怀 韩华 王学刚 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 2002年第2期 163-170,共8页
家蚕(Bombyx mori)线粒体基因组全序列为15 664bp,AT含量较高,为81.3%,包括13个蛋白质编码基因,2个rRNA基因,22个tRNA基因和一段498 bp的A+T富集区域.与其它10种节肢动物线粒体基因组全序列相比,家蚕与果蝇(Drosophilamelanogaster)在... 家蚕(Bombyx mori)线粒体基因组全序列为15 664bp,AT含量较高,为81.3%,包括13个蛋白质编码基因,2个rRNA基因,22个tRNA基因和一段498 bp的A+T富集区域.与其它10种节肢动物线粒体基因组全序列相比,家蚕与果蝇(Drosophilamelanogaster)在核苷酸组成、编码偏好性、以及氨基酸组成上较相近,只是在基因排列上,tRNAMet的位置发生了重排,在家蚕线粒体基因组中,tRNAMet位于A+T富集区与tRNA.之间,而在果蝇中,其位于tRNAGin与ND2基因之间. 展开更多
关键词 家蚕 线粒体基因组 全序列测定 基因结构
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QTL形态标记定位的一种数学方法 预览 被引量:5
8
作者 谭远德 鲁成 《生物数学学报》 CSCD 1998年第3期 402-408,共7页
根据家蚕中位于Z染色体上的伴性遗传的双形态标记和假定与其有连锁关系的一个有一对主基因差异的数量性状在测交世代中,所作的理论分布,本文建立了QTL形态标记定位的数学方法,
关键词 基因位点 QTL定位 形态标记定位 家蚕
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应用频数分布面积法定位家蚕QTL 预览 被引量:4
9
作者 谭远德 李发德 《生物数学学报》 CSCD 1998年第1期 97-103,共7页
利用生态型差异较大的两个家蚕品种782和od100作正反杂交,得到F1。让F1雄蚕与叠双隐性标记的od100回 到回交子代。
关键词 家蚕 QTL定位 形态标记定位 基因位点
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家蚕肾脏形卵(ki)的荧光差异显著研究 预览
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作者 李斌 HiroshiFujii 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 2002年第3期 262-266,共5页
为了探明家蚕(Bombyx mori)肾脏形卵的胚子不能正常发育的原因。使用FDD(flourescent different display)法对ki(kidney)基因同质型与异质型的母蛾所产未受精卵及受精24h卵的mRNA进行了差异显示研究。通过137组引物组合进行FDD差异显... 为了探明家蚕(Bombyx mori)肾脏形卵的胚子不能正常发育的原因。使用FDD(flourescent different display)法对ki(kidney)基因同质型与异质型的母蛾所产未受精卵及受精24h卵的mRNA进行了差异显示研究。通过137组引物组合进行FDD差异显示,结果检出8254条扩增带。其中未受精卵与受精后24h卵之间的差异片段为206条,占总片段数的2.5%,而ki同质型与ki异质型的差异片段为141条,占总片段数的1.7%,其余的95.8%的扩增片段为4方共有,并且约60%的差异带是比较清晰的。回收了较明显的差异片段计199条,占总扩增带数的2.4%,并对其中部分差异片段进行序列分析表明,其中5个克隆序列分析为:small heat shock proteins,proprotein convertase,cancer antigen like protein fusion RNA-binding protein及receptor like protein kinase同源序列,其余5个克隆序列未发现同源性,可能是新基因。 展开更多
关键词 家蚕 肾脏形卵 荧光差异显示
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转基因作物和转基因技术的发展与未来 预览 被引量:4
11
作者 司马杨虎 《生物学通报》 北大核心 2001年第8期 12-15,共4页
转基因作物的安全性问题在20世纪末引起全球的争论,一些人反应对转基因植物和转基因技术,本文概述了转基因植物产生的必然性,应用现状,发展趋势,引起争论的主要原因以及必须建立的安全保障,阐明对转基因作物和技术应采取的科学态度。
关键词 转基因作物 转基因技术 现状 发展前景
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转基因蚕研究现状 预览
12
作者 郭秀洋 周泽扬 《蚕学通讯》 1999年第4期14-18,共5页
自从Palmiter等用小鼠金属硫蛋白-1基因融合大鼠生长激素基因显微注射入小鼠受精卵原核中,获得了“超级小鼠”,并提出可以从转基因动物中获取有价值的蛋白质以来,转基因生物的研究发展迅速.利用转基因技术,我们既可以加快农作物和家畜... 自从Palmiter等用小鼠金属硫蛋白-1基因融合大鼠生长激素基因显微注射入小鼠受精卵原核中,获得了“超级小鼠”,并提出可以从转基因动物中获取有价值的蛋白质以来,转基因生物的研究发展迅速.利用转基因技术,我们既可以加快农作物和家畜品种改良,又可以生产珍贵药用蛋白,为遗传病患者造福.家蚕是最重要的经济昆虫之一,对世界经济文化的发展作出过重大的贡献.随着近年来生命科学和生物技术的飞速发展,家蚕分子生物学基础研究和应用研究也取得了可喜的业绩,在转基因蚕的研究上更是方兴未艾,以下对此做一叙述. 展开更多
关键词 转基因蚕 家蚕 转基因技术 外源基因 转座子 外源DNA 启动子 报告基因 丝素基因 转基因研究
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家蚕对质型多角体病毒(CPV)的抵抗性及其与经济性状相关性分析 预览 被引量:3
13
作者 陈萍 曾华明 《西南农业大学学报》 CSCD 1999年第2期 190-193,共4页
对22个家蚕纯种进行了CPV抵抗性调查,并分析了与经济性状的相关性,结果表明,品种间对CPV的抵抗性差异极显著,日本种抵抗性比中国种强,家蚕对CPV抵抗性性状与其它数量性状一样,个体间存在差异。差异大小反应了品种群体在该性状的... 对22个家蚕纯种进行了CPV抵抗性调查,并分析了与经济性状的相关性,结果表明,品种间对CPV的抵抗性差异极显著,日本种抵抗性比中国种强,家蚕对CPV抵抗性性状与其它数量性状一样,个体间存在差异。差异大小反应了品种群体在该性状的纯合度,家蚕对CPV抵抗性与万蚕收茧量呈显著正相关,与强健性和茧质优劣无明显相关。 展开更多
关键词 家蚕 质型多角体病毒 抵抗性 经济性状 相关性 CPV
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加强生物技术的研究与开发发展高科技蚕业——21世纪蚕业科技发展战略研究 预览 被引量:1
14
作者 向仲怀 鲁成 周泽扬 《广西蚕业》 1998年第1期 5-8,共4页
通过对蚕业的特点、蚕业生产的现状及我国蚕业科技发展与存在的问题进行深入分析.提出我国21世纪的蚕业发展战略应该是:加强生物技术的研究与开发,发展高科技蚕业;同时.提出了今后l5年我国蚕业科技发展战略的重点。
关键词 蚕业科技 研究与开发 强生 高科技 蚕业发展 发展战略研究 中国 生物技术 蚕业生产
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家蚕基因库突变系统的研究 预览 被引量:19
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作者 鲁成 代方银 向仲怀 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期 968-975,共8页
经过十几年的研究,整理了包括最早于20世纪40年代,尤其是80年代后期以来收集、引进、创造的家蚕各种突变基因、染色体变异系统及特色遗传材料1 000余份,通过对其进行形态、生理、生化性状的鉴定和遗传分析,构建和完善的保存系统有600余... 经过十几年的研究,整理了包括最早于20世纪40年代,尤其是80年代后期以来收集、引进、创造的家蚕各种突变基因、染色体变异系统及特色遗传材料1 000余份,通过对其进行形态、生理、生化性状的鉴定和遗传分析,构建和完善的保存系统有600余个家蚕基因的资源库,保存的家蚕突变基因种类覆盖国际现存家蚕突变基因的90%以上.其中珍稀突变基因达100多个,首次发现的突变基因60余个.通过对突变系统进行杂交分析,连锁检索和三点测验定位,构建了完善的家蚕连锁检索标记体系,含全部28个连锁群的标志基因有230个;构建了各连锁群的基因定位系统(隐性基因合成系);发现了基因互补突变卵色和第三型母性遗传卵色,发现了白色卵突变基因上位作用的普遍性.育成了以形态突变基因为标记的、相互独立的近等基因系28个.开发了高饲料效率、性别标记、天然有色茧丝、抗病性、广食性、可控制单性别孵化等一系列有重大应用前景的有用突变基因育种新素材.建立了较为完善的家蚕基因资源持续保存的方法和管理技术体系. 展开更多
关键词 家蚕 基因库 突变系统 突变基因 染色体变异系统 遗传分析 连锁检索标记体系 母性遗传卵色
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