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胆道感染的病原菌组成及药敏变化分析 预览 被引量:32
1
作者 孟泽武 陈燕凌 唐南洪 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期 117-118,共2页
目的了解胆汁中感染病原菌菌群及其对抗菌药物的敏感性变化。方法取2002年1月-2005年12月,在福建医科大学附属协和医院确诊为胆道感染行内镜鼻胆管引流或外科手术采集的胆汁标本进行培养、菌种鉴定及药敏分析。结果2002-2005年革兰阴性... 目的了解胆汁中感染病原菌菌群及其对抗菌药物的敏感性变化。方法取2002年1月-2005年12月,在福建医科大学附属协和医院确诊为胆道感染行内镜鼻胆管引流或外科手术采集的胆汁标本进行培养、菌种鉴定及药敏分析。结果2002-2005年革兰阴性菌在胆道感染中所占的比率下降(r=-0.983,P〈0.05),而革兰阳性菌(r=0.982,P〈0.05)及真菌(r=0.971,P〈0.05)的比率上升;革兰阴性菌中主要为大肠埃希菌(r=-0.992,P〈0.01)、摩氏摩根菌(r=-0.970,P〈0.05)所占的比率下降,革兰阳性菌中主要为肠球菌属所占的比率上升(r=0.981,P〈0.05),真菌中主要为假丝酵母菌属所占的比率上升(r=0.976,P〈0.05);大肠埃希菌对大部分抗菌药物的耐药率随着超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测阳性率改变而改变。结论4年来胆道感染菌群变迁,临床应用广泛的抗菌药物耐药率增加,ESBLs为病原菌耐药主要因素。 展开更多
关键词 胆汁 病原菌 药物敏感试验 超广谱Β-内酰胺酶
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福建地区血红蛋白H病基因突变的研究 被引量:1
2
作者 王林铄 唐南洪 +5 位作者 黄海龙 王燕 吴小青 陈雪美 徐两蒲 林元 《中国妇幼保健》 CAS 2015年第19期3264-3266,共3页
目的:分析福建地区119例血红蛋白H病(HbH病)基因型和血液学资料,探讨两者关系。方法:采用血细胞自动分析仪进行红细胞参数分析,应用聚合酶链反应(PCR)和反向斑点杂交(RBD)技术进行α-地中海贫血(α-地贫)基因分析。结果:... 目的:分析福建地区119例血红蛋白H病(HbH病)基因型和血液学资料,探讨两者关系。方法:采用血细胞自动分析仪进行红细胞参数分析,应用聚合酶链反应(PCR)和反向斑点杂交(RBD)技术进行α-地中海贫血(α-地贫)基因分析。结果:来自福建各地的14817例患者中检出HbH病119例,发生率达0.803%,所有HbH病患者的相关红细胞参数均呈现不同程度的降低,基因型构成比顺位分别是--SEA/-α^3.7、--SEA/-α^4.2、--SEA/-α^CSα、--SEA/-α^QSα、--SEA/-α^WSα。非缺失型中HbH—WS贫血程度与另两种基因型差异较大,含有HbH—WS的非缺失型Hb含量与缺失型无明显差异,而去除HbH—WS的非缺失型Hb含量明显低于缺失型。--SEA/-α^4.2与--SEA/-α^3.7、--SEA/-α^CSα与--SEA/-α^QSα各项红细胞参数比较,均无明显统计学差异。结论:该研究丰富了福建地区HbH病患者的分子遗传学和血液学的科学资料,可为HbH病患者的遗传指导提供重要的依据。 展开更多
关键词 血红蛋白H病 基因型 红细胞参数
福建地区β-地中海贫血基因突变谱分析 被引量:6
3
作者 王林铄 黄海龙 +4 位作者 林娜 王燕 陈雪美 唐南洪 徐两蒲 《中国妇幼保健》 CAS 2015年第13期2040-2043,共4页
目的:分析福建地区β-地中海贫血基因突变类型和频率,与我国其他地贫高发区主要基因突变类型特点进行比较,为指导遗传咨询及制定有效的人群预防计划提供参考。方法:选择2008年7月-2014年6月福建省妇幼保健院收治的14 817例患者,采用PC... 目的:分析福建地区β-地中海贫血基因突变类型和频率,与我国其他地贫高发区主要基因突变类型特点进行比较,为指导遗传咨询及制定有效的人群预防计划提供参考。方法:选择2008年7月-2014年6月福建省妇幼保健院收治的14 817例患者,采用PCR和反向点杂交(RDB)方法检测血样中β-地中海贫血基因17个常见位点突变类型,计算基因突变频率,所得结果和广东、广西、海南、云南、贵州和重庆6个地区分布特点进行比较。结果:在14 817例就诊者中,1 842例带有β-地中海贫血突变基因,阳性检出率为12.43%。在突变基因中,存在16种不同的突变类型,从高到低分别为IVS-2-654(C→T)、CD41-42(-TCTT)、CD17(A→T)、-28(A→G)、CD27-28(+C)、CD26(G→A)、CD71-72(+A)、CD43(G→T)、-29(A→G)、起始密码子ATG→AGG、IVS-1-1(G→T)、IVS-1-5(G→T)、codon 36(-C)、codon30(A→G)、+22(G→A)、codons54-58(-TTATGGGCAACCC);基因突变频率依次为40.41%、32.89%、13.91%、6.02%、3.09%、1.33%、0.75%、0.59%、0.27%、0.27%、0.11%、0.11%、0.11%、0.05%、0.05%、0.05%。其中最常见的基因突变类型是IVS-2-654(C→T)、CD41-42(-TCTT),占全部突变基因频率的73.30%,与广东、广西、海南基因变异存在一定相似性,和云南、贵州、重庆基因变异差异较大。结论:通过本次较大样本量的研究,较以往所发现的β地贫突变的例数更多,类型更加丰富,并具有其自身特点,从一定程度上反映了福建地区β-地中海贫血发生率高,基因突变谱复杂,研究其分布并与其他地域的差异进行比较是有一定意义的,为本地区开展β-地中海贫血群体干预和人类学研究具有重要意义。 展开更多
关键词 Β-地中海贫血 基因突变 基因频率
穿膜蛋白1和基质金属蛋白酶9在胆管癌中的表达及意义 预览 被引量:2
4
作者 王晓茜 唐南洪 +1 位作者 李秀金 陈燕凌 《临床肝胆病杂志》 CAS 2014年第3期260-263,共4页
目的通过观察胆管癌组织中穿膜蛋白1(DLK1)与基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达,分析两者的临床意义及相关性。方法收集2001-2010年96例胆管癌患者癌组织,20例正常人胆管组织作为对照,采用sP免疫组织化学法检测组织中DLKl与MMP-9的... 目的通过观察胆管癌组织中穿膜蛋白1(DLK1)与基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达,分析两者的临床意义及相关性。方法收集2001-2010年96例胆管癌患者癌组织,20例正常人胆管组织作为对照,采用sP免疫组织化学法检测组织中DLKl与MMP-9的表达。组间比较采用卡方检验,相关性检验采用speaman相关分析。结果DLK1与MMP-9在胆管癌中的阳性表达率分别为59.38%和79.17%,2者显著高于在正常胆管组织中的表达(0和15%),差异有统计学意义(x0=23.35、31.37,P〈0.05)。胆管癌中DLK1的表达与肿瘤的分化程度相关(X^2=7.46,P〈0.05);MMP-9的表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移相关(X^2=7.28、9.67,P〈0.05)。与性别、年龄、肿瘤组织大小无关(P〉0.05)。两者在胆管癌组织中的表达呈正相关(X^2=O.41,P〈O.05)。结论DLK2与MMP-9在胆管癌中高表达,且两者呈正相关,提示可能与胆管癌的发生、发展、侵润、转移有关,其表达的检测为胆管癌的诊断及治疗提供一定的参考依据。 展开更多
关键词 胆管肿瘤 表皮生长因子 基质金属蛋白酶9 免疫组织化学
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蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂重组腺病毒对人肝癌细胞 MHCC97H 侵袭转移的影响
5
作者 谢群 唐南洪 +1 位作者 林扬元 林建银 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期668-671,共4页
目的构建携带蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂(sv-cystatin)基因的重组腺病毒载体(Ad/sv—cystatin),研究其对人肝癌细胞MHCC97H在体内、外侵袭转移的影响。方法构建携带sv-cystatin的重组腺病毒,体外感染MHCC97H细胞,采用CCK一8法检... 目的构建携带蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂(sv-cystatin)基因的重组腺病毒载体(Ad/sv—cystatin),研究其对人肝癌细胞MHCC97H在体内、外侵袭转移的影响。方法构建携带sv-cystatin的重组腺病毒,体外感染MHCC97H细胞,采用CCK一8法检测细胞生长,Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力,通过裸鼠皮下肝癌细胞肺转移模型观察Ad/sv—cystatin瘤内注射对裸鼠的治疗作用。结果体外实验证实Ad/sv-cystatin能够感染MHCC97H细胞。与对照组及空载体组相比,Ad/sv-cystatin对MHCC97H细胞体外生长、侵袭和迁移均具有明显的抑制作用,瘤内注射Ad/sv—cystatin可以显著降低MHCC97H细胞的肺转移。结论重组腺病毒Ad/sv-cystatin具有抑制人肝癌细胞MHCC97H体内外侵袭转移的作用,在肝癌基因治疗方面具有开发应用潜能。 展开更多
关键词 蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂 腺病毒 肝细胞癌 肿瘤侵袭 肿瘤转移
蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂重组蛋白对人肝癌MHCC97H细胞TGF-β2、TNF-α表达的影响 预览 被引量:3
6
作者 谢群 林扬元 +1 位作者 唐南洪 林建银 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1208-1212,共5页
目的研究蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂(snakevenomcystatin,SV—cystatin)重组蛋白对人肝癌MHCC97H细胞转化生长因子-β2(transforminggrowthfactor-β2,TGF-β2)、肿瘤坏死因子一仅(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)表达的影响。... 目的研究蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂(snakevenomcystatin,SV—cystatin)重组蛋白对人肝癌MHCC97H细胞转化生长因子-β2(transforminggrowthfactor-β2,TGF-β2)、肿瘤坏死因子一仅(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)表达的影响。方法采用ELISA方法检测不同浓度SV—eystatin重组蛋白对人肝癌MHCC97H细胞TGF—β2、TNF-α分泌的影响;实时定量PCR和Westernblot法分别分析不同浓度SV—cystatin重组蛋白体外处理入肝癌MHCC97H细胞后TGF—β2、TNF-α的mR—NA及蛋白表达。结果与对照组相比,5种浓度的SV—cysta-α重组蛋白对MHCC97H细胞TGF-β2、TNF-α的分泌具有明显的抑制作用,并呈剂量依赖性(P〈0.05);25、50、100、200mg·L^-14种浓度的重组蛋白能够抑制TGF-β2的mR—NA及蛋白表达,与对照组比较差异具有统计学意义(P〈0.05);而50、100、200mg·L^-13种浓度的重组蛋白能够抑 制TNF-α的mRNA及蛋白表达,与对照组比较差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论SV—cystatin重组蛋白可能通过抑制TGF-β2和TNF-α的表达来发挥多方面的抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 蛇毒 半胱氨酸蛋白酶抑制剂 肝癌 MHCC97H 转化生长因子Β2 肿瘤坏死因子α
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基于生物人工肝细胞材料研究新进展 预览 被引量:1
7
作者 张飞媛(综述) 唐南洪(审校) 《福建医科大学学报》 2011年第4期 309-312,共4页
1986年Demetrion教授首先提出生物人工肝(bioartificial liver,BAL),它由微载体粘附的肝细胞和人工解毒装置共同组成的体外肝灌流系统,能发挥肝细胞合成并结合胆红素和合成肝特异性蛋白的作用[1]。BAL是以人工培养的肝细胞为基础构建... 1986年Demetrion教授首先提出生物人工肝(bioartificial liver,BAL),它由微载体粘附的肝细胞和人工解毒装置共同组成的体外肝灌流系统,能发挥肝细胞合成并结合胆红素和合成肝特异性蛋白的作用[1]。BAL是以人工培养的肝细胞为基础构建的体外生物反应装置,是当前体外人工肝支持系统研究领域的主流,主要由肝细胞来源、 展开更多
关键词 人工 肝功能衰竭 急性 肝细胞 生物反应器
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HBx通过上调前列腺素E2受体2的表达增强HL-7702肝细胞的侵袭能力 预览 被引量:1
8
作者 陈文豪 王晓茜 +1 位作者 李秀金 唐南洪 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第24期 1529-1534,共6页
目的:以HL-7702肝细胞为研究对象,探讨HBx的表达对EPs的影响以及与侵袭转移的相关性.方法:建立表达HBx的HL-7702人正常肝细胞(HL-7702/HBx),采用HBxRNAi载体构建抑制HBx的HL-7702肝细胞株(HL-7702/HBx-siRNA),检测抑制HBx前后细... 目的:以HL-7702肝细胞为研究对象,探讨HBx的表达对EPs的影响以及与侵袭转移的相关性.方法:建立表达HBx的HL-7702人正常肝细胞(HL-7702/HBx),采用HBxRNAi载体构建抑制HBx的HL-7702肝细胞株(HL-7702/HBx-siRNA),检测抑制HBx前后细胞培养上清PGE2浓度的变化、细胞表达EPs mRNA和基质金属蛋白酶(MMPs)mRNA的变化,并进一步采用EP2-siRNA瞬时转染、Western-blot、明胶酶谱和Transwell小室等技术观察EP2表达的抑制对MMPs活性以及细胞侵袭和转移能力的影响.结果:与对照细胞相比,PGE2、EP2和MMP-2的mRNA相对表达值在HL-7702/HBx细胞明显增高(P〈0.05),分别为(123.9±9.9)Pg·mL-1、(0.445+0.025)Pg·mL-1和(0.226±0.016)Pg·mL-1,在抑制HBx表达后则明显下调(P〈0.05),分别为(78.0±5.9)Pg·mL-1、(0.336±0.007)Pg·mL-1和(0.117±0.012)Pg·mL-1;对照细胞HL-7702的EP2表达抑制前后,MMP2活性、细胞侵袭和移动能力变化不明显;而HL-7702/HBx细胞的EP2表达受抑制后,其MMP2活性和细胞侵袭能力则明显下降(P〈0.05),侵袭细胞数由(64.4±3.4)个,视野下降为(55.2±2.2)个/视野,细胞的移动能力变化不大.结论:HBx可以促进EP2表达和增加MMP2活性,并通过EP2上调HL-7702肝细胞的侵袭能力.抑制EP2表达可能对HBV感染的肝癌侵袭转移治疗研究具有潜在的应用价值. 展开更多
关键词 肝细胞 乙肝病毒X蛋白 前列腺素E2受体 侵袭
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抑制乙肝病毒X蛋白表达对肝癌细胞上皮一间质转化和凋亡的影响
9
作者 王晓茜 滕菁 +2 位作者 李秀金 徐振兴 唐南洪 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期566-570,共5页
目的探讨乙肝病毒x蛋白(HBx)对肝癌细胞转移能力的影响及其机制。方法采用siRNA干扰技术抑制MHCC97H细胞的HBx表达。通过Transwell小室和裸鼠肺转移模型实验比较HBx抑制前后MHCC97H细胞转移能力的变化。应用Western blotting技术检测... 目的探讨乙肝病毒x蛋白(HBx)对肝癌细胞转移能力的影响及其机制。方法采用siRNA干扰技术抑制MHCC97H细胞的HBx表达。通过Transwell小室和裸鼠肺转移模型实验比较HBx抑制前后MHCC97H细胞转移能力的变化。应用Western blotting技术检测肝癌细胞上皮间质转化(EMT)和凋亡相关基因的表达变化。结果将Hgx-siRNA导入MHCC97H细胞可以抑制HBx的表达及其转移能力,可下调EMT相关分子Twist和N—cadherin的表达,并上调E—cad—herin表达而抑制EMT,同时还可通过Twist—P53途径诱发细胞的凋亡。结论抑制HBx表达可以通过改变上皮一间质转化和诱发凋亡而减弱高侵袭肝癌细胞MHCC7H的转移能力。 展开更多
关键词 乙肝病毒X蛋白 肝癌细胞 上皮一间质转化 凋亡
PGE_2,mPGES-1和HBx在肝细胞癌的表达及相关性 预览 被引量:2
10
作者 王燕 王晓茜 +1 位作者 李秀金 唐南洪 《临床肝胆病杂志》 CAS 2011年第2期174-177,共4页
目的研究肝细胞癌(HCC)患者的前列腺素E2(PGE2)、微粒体型前列腺素E2合成酶-1(mPGES-1)与乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)的表达情况、相关性和临床意义。方法采用酶联免疫法检测65例HCC患者外周血和癌组织的PGE2水平,用免疫组织化学法... 目的研究肝细胞癌(HCC)患者的前列腺素E2(PGE2)、微粒体型前列腺素E2合成酶-1(mPGES-1)与乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)的表达情况、相关性和临床意义。方法采用酶联免疫法检测65例HCC患者外周血和癌组织的PGE2水平,用免疫组织化学法检测癌组织及癌旁肝组织mPGES-1和HBx的表达,并分析这些指标与患者的临床病理特征的关系。结果肝癌组织PGE2含量明显高于癌旁肝组织,分别为(9.10±2.03)ng/g和(2.78±0.19)ng/g;肝癌患者外周血中PGE2含量为(128.74±14.44)pg/ml,与肝癌组织中PGE2含量呈正相关(r=0.862);HCC组织中HBx和mPGES-1的阳性表达率分别为86.2%和78.5%,而癌旁肝组织的HBx和mPGES-1阳性表达率分别为81.5%和46.2%,其中mPGES-1蛋白在肝癌组织及癌旁肝组织的阳性表达率差异有统计学意义(P〈0.05)。HBx和mPGES-1的表达升高与肝癌分化程度和肝外是否转移相关(P〈0.05);HBx的表达与mPGES-1的表达呈正相关(r=0.389);外周血PGE2水平和组织mPGES-1的表达呈正相关(r=0.526)。结论肝细胞癌与PGE2、HBx、mPGES-1表达相关;可以通过检测肝细胞癌患者外周血的PGE2水平来辅助评估肝癌的复发转移;HBx和mPGES-1可作为肝癌的治疗靶点进行更深入的研究。 展开更多
关键词 肝细胞 地诺前列酮 前列腺素内过氧化物合酶类 病毒蛋白质类 肝炎病毒 乙型
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HBx、Twist、E-cadherin及N-cadherin在肝细胞肝癌中的表达及意义 预览 被引量:8
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作者 滕菁 唐南洪 +4 位作者 徐振兴 李秀金 金福顺 王晓茜 吴健朗 《临床肝胆病杂志》 CAS 2009年第6期431-434,共4页
目的探讨HBx、Twist、E-cadherin及N-cadherin在肝细胞肝癌中的表达及意义。方法采用免疫组织化学法检测72例HBsAg阳性的肝细胞肝癌组织及癌旁组织中HBx、Twist、E-cadherin及N-cadherin的表达,并与临床病理资料做对照分析。结果HCC组织... 目的探讨HBx、Twist、E-cadherin及N-cadherin在肝细胞肝癌中的表达及意义。方法采用免疫组织化学法检测72例HBsAg阳性的肝细胞肝癌组织及癌旁组织中HBx、Twist、E-cadherin及N-cadherin的表达,并与临床病理资料做对照分析。结果HCC组织中HBx、Twist、E-cadherin及N-cadherin的阳性表达率分别为84.7%、80.6%、52.8%和45.8%,而癌旁组织的阳性表达率分别为81.9%、51.4%、70.8%和27.8%。除HBx外,后三种蛋白在肝癌组织及癌旁组织的表达差异均有显著性(P〈0.05)。HBx、Twist和N-cadherin的表达升高及E-cadherin表达下降分别与有无门脉癌栓和肝外是否转移相关(P〈0.05);HBx的表达分别与Twist和N-cadherin的表达呈正相关(P〈0.05);HBx、Twist和N-cadherin的表达则分别与E-cadherin的表达呈负相关(P〈0.05)。结论HBx、Twist和N-cadherin的高表达以及E-cadherin的低表达与肝癌的侵袭和转移有密切关系,HBx可能通过上调Twist而促进肝癌细胞的上皮—间质转化(EMT)改变。 展开更多
关键词 肝细胞肝癌 乙肝病毒X蛋白 转录因子Twist 上皮性钙粘蛋白 神经性钙粘蛋白
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构建特异高表达人谷氨酰胺合成酶基因的肝细胞
12
作者 王晓茜 唐南洪 +1 位作者 李秀金 陈燕凌 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期 817-819,共3页
目的建立高表达人谷氨酰胺合成酶(hGS)基因的人肝细胞系。方法克隆hGS基因及人甲胎蛋白转录调控元件(AFPTREs),构建真核表达载体pLNChGS及插入人AFPTREs的载体pLNAFhGS;经包装产生重组逆转录病毒并感染HepG2细胞,得到阳性细胞克... 目的建立高表达人谷氨酰胺合成酶(hGS)基因的人肝细胞系。方法克隆hGS基因及人甲胎蛋白转录调控元件(AFPTREs),构建真核表达载体pLNChGS及插入人AFPTREs的载体pLNAFhGS;经包装产生重组逆转录病毒并感染HepG2细胞,得到阳性细胞克隆HepG2/pLNChGS和HepG2/pLNAFhGS;进行细胞增殖、hGSmRNA半定量及酶活性检测。结果HepG2/pLNChGS、HepG2/pLNAFhGs细胞的hGSmRNA表达分别为8.306±0.336和21.358±1.716,均显著高于对照细胞(P〈0.01),且两者之间比较差异有统计学意义(P〈0.01);HepG2/pLNChGS、HepG2/pLNAFhGS细胞的hGS酶活性分别为3.279±0.328和4.557±0.253,均显著高于对照细胞(P〈0.05),两者之间比较差异也有统计学意义(P〈0.05)。结论成功构建高分泌hGS的人肝细胞系,为进一步降氨毒功能的研究打下基础。 展开更多
关键词 肝细胞 谷氨酰胺合成酶
C-kit和SCF基因在胆管细胞癌中的表达及意义 被引量:5
13
作者 杨焕星 李秀金 +2 位作者 唐南洪 王晓茜 陈燕凌 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 2006年第1期 40-42,共3页
目的 拟通过检测C-kit、SCF基因在胆管细胞癌中的表达来了解C-kit、SCF与胆管细胞癌发生和发展之间的关系。方法采用免疫组化S-P法检测48例肝胆管细胞癌及20例肝外胆管癌标本C-kit、SCF蛋白表达情况,同时取对应的癌旁胆管组织及另取30... 目的 拟通过检测C-kit、SCF基因在胆管细胞癌中的表达来了解C-kit、SCF与胆管细胞癌发生和发展之间的关系。方法采用免疫组化S-P法检测48例肝胆管细胞癌及20例肝外胆管癌标本C-kit、SCF蛋白表达情况,同时取对应的癌旁胆管组织及另取30例肝及胆管良性病变胆管组织作对照,所有数据采用X^2检验。结果48例肝胆管细胞癌组织中C-kit、SCF蛋白表达分别为39例(81.3%)和36例(75.0%),20例肝外胆管癌组织中C-kit、SCF蛋白表达分别为12例(60.0%)和13例(65.0%),癌旁胆管组织中4例C-kit、5例SCF呈弱阳性表达,30例肝及胆管良性病变胆管组织C-kit、SCF蛋白均呈阴性表达。两癌组织与癌旁胆管组织、肝及胆管良性病变胆管组织C-kit、SCF表达阳性率比较差异有显著性(P〈0.05)。Ⅲ~Ⅳ期胆管细胞癌C-kit、SCF蛋白表达阳性率高于Ⅰ~Ⅱ期(P〈0.05),中低分化癌高于高分化癌(P〈0.05),有淋巴结转移癌高于无淋巴结转移癌(P〈0.05)。而肝外胆管癌组织中C-kit、SCF蛋白表达与其临床病理各因素无明显相关(P〉0.05)。C-kit、SCF蛋白表达与胆管细胞癌病人年龄、性别、肿瘤直径无关。结论 C-kit、SCF蛋白过表达可能在胆管细胞癌的发生、发展中发挥作用。 展开更多
关键词 胆管肿瘤 C-KIT基因 SCF基因 免疫组织化学
逆转录病毒载体介导RhoC-siRNA对高转移肝癌细胞生物行为的影响 被引量:4
14
作者 唐南洪 王晓茜 +1 位作者 李秀金 陈燕凌 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期 1299-1301,共3页
目的探讨RhoC-siRNA对高转移肝癌细胞生物行为的影响。方法合成特异性RhoC-siRNA并克隆入逆转录病毒表达载体pSIREN—RetroQ,重组RhoC-siRNA逆转录病毒感染高转移人肝癌细胞系MHCC97H;分别采用逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)和Weste... 目的探讨RhoC-siRNA对高转移肝癌细胞生物行为的影响。方法合成特异性RhoC-siRNA并克隆入逆转录病毒表达载体pSIREN—RetroQ,重组RhoC-siRNA逆转录病毒感染高转移人肝癌细胞系MHCC97H;分别采用逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)和Western blot方法检测RhoC-siRNA对RhoC表达的作用;并观测细胞的增殖曲线、黏附以及移动能力的改变。结果RhoC蛋白在MHCC97H细胞中表达增强;重组RhoC-siRNA逆转录病毒感染MHCC97H细胞后,RhoC mRNA和蛋白的表达均下降。仅在培养的第7天,MHCC97H/RhoC—siRNA细胞的增殖与MHCC97H细胞相比差异有统计学意义(P〈0.05);与MHCC97H和MHCC97H/RhoC-N细胞相比:(1)MHCC97H/RhoC-siRNA细胞移动能力明显减弱(P〈0.05);(2)MHCC97H/RhoC-siRNA细胞与内皮细胞ECV304之间的黏附率无明显下降(P〉0.05)。结论RhoC-siRNA可特异性抑制高转移人肝癌细胞的移动能力,为后期的动物体内RhoC-siRNA治疗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 肝细胞 转移 小干扰RNA 逆转录病毒
丙肝病毒受体CD81与肝外胆管癌的相关性 预览 被引量:1
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作者 唐南洪 许春森 +4 位作者 王晓茜 李秀金 杨焕星 陈燕凌 殷凤峙 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第18期 1034-1036,共3页
目的:探讨肝外胆管癌与丙型肝炎病毒受体CD81的相关性.方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶法(SP法)检测62例肝外胆管癌及30例胆道良性病变组织中HCV RNA、CD81mRNA序列片段以及HCV NS5抗原、CD81蛋白的... 目的:探讨肝外胆管癌与丙型肝炎病毒受体CD81的相关性.方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶法(SP法)检测62例肝外胆管癌及30例胆道良性病变组织中HCV RNA、CD81mRNA序列片段以及HCV NS5抗原、CD81蛋白的表达.结果:肝外胆管癌组织中HCV RNA和CD81 mRNA的阳性率分别为58.1%和72.6%,与对照组相比差异有显著性(x2=22.030,P<0.001;x2=7.453,P<0.01);HCV RNA阳性的肝外胆管癌组织CD81 mRNA表达率为55.6%,HCV RNA阴性的CD81 mRNA表达率为96.2%,两者差异有显著性(x2=12.503,P<0.001);免疫组化检测均有类似结果.HCV RNA阳性肝外胆管癌的CD81 mRNA丢失与否与分化状况有关(x2=14.103,P<0.01);分化Ⅳ级与Ⅰ级的CD81 mRNA丢失差异有显著性(P<0.05/3).结论:肝外胆管癌组织中有HCV基因的高表达;CD81作为HCV感染胆管细胞的受体与肝外胆管癌分化有一定的相关性. 展开更多
关键词 肝外胆管癌 丙肝病毒 受体CD81
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原发性肝癌C—kit和SCF基因的表达及意义 预览 被引量:3
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作者 李秀金 杨焕星 +2 位作者 王晓茜 唐南洪 陈燕凌 《临床肝胆病杂志》 CAS 2005年第2期 108-109,共2页
探讨C-kit、SCF基因编码的蛋白在肝癌(HCC)组织中的表达及其临床病理意义.采用免疫组化SP法检测92例肝癌中C-kit、SCF蛋白表达,同时取对应的癌旁肝组织及30例良性肝病组织作对照.结果显示,HCC中有较强的C-kit和SCF蛋白表达,癌旁组织呈... 探讨C-kit、SCF基因编码的蛋白在肝癌(HCC)组织中的表达及其临床病理意义.采用免疫组化SP法检测92例肝癌中C-kit、SCF蛋白表达,同时取对应的癌旁肝组织及30例良性肝病组织作对照.结果显示,HCC中有较强的C-kit和SCF蛋白表达,癌旁组织呈弱表达,良性肝病组织则呈阴性表达.C-kit、SCF阳性率肝癌组织与癌旁组织、良性肝病组织比较差异有非常显著意义(P均<0.01).C-kit、SCF蛋白表达与AFP异常、肝癌分级、门脉癌栓有关.C-kit、SCF蛋白过表达可能在原发性肝癌的发生、发展中发挥作用. 展开更多
关键词 肝癌 C-KIT基因 SCF基因 免疫组织化学
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hIL-2基因修饰人肝细胞的腹腔移植抗肿瘤作用
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作者 唐南洪 陈燕凌 +3 位作者 李秀金 王晓茜 杨焕星 殷凤峙 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 2005年第2期 114-117,共4页
目的探讨hIL-2基因修饰人肝细胞腹腔移植的抗肿瘤作用.方法采用鼠尾胶原包裹转hIL-2基因人肝细胞并移植入癌性腹水型小鼠模型腹腔,观察移植1、4、7、10 d后小鼠脾淋巴细胞的增殖反应、脾淋巴细胞杀伤活性、血清hIL-2浓度及移植小鼠生存... 目的探讨hIL-2基因修饰人肝细胞腹腔移植的抗肿瘤作用.方法采用鼠尾胶原包裹转hIL-2基因人肝细胞并移植入癌性腹水型小鼠模型腹腔,观察移植1、4、7、10 d后小鼠脾淋巴细胞的增殖反应、脾淋巴细胞杀伤活性、血清hIL-2浓度及移植小鼠生存期.结果移植4 d后,小鼠血清hIL-2浓度达到(76.2±2.2) pg/ml,脾淋巴细胞的增殖反应OD值和脾淋巴细胞杀伤活性达到峰值,分别为(0.674±0.046)%和(35.6±1.9)%,与对照组和L-02细胞移植组相比,差别均有非常显著意义(P<0.05);移植L-02/IL-2肝细胞的小鼠生存率显著高于对照组和L-02细胞移植组(P=0.0003).结论 IL-2基因修饰肝细胞移植于腹腔,可上调淋巴细胞的增殖和杀伤功能,达到抗肿瘤的目的,对肝细胞结合转基因的应用研究有积极意义. 展开更多
关键词 HIL-2 肝细胞 腹腔 细胞移植 小鼠 基因修饰 抗肿瘤作用 转基因 增殖 胶原
微载体培养人肝细胞在混合型生物人工肝系统上的应用
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作者 陈燕凌 唐南洪 +3 位作者 王晓茜 李秀金 杨焕星 殷凤峙 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 2004年第9期 627-629,共3页
目的探讨微载体培养L-02人肝细胞株应用于混合型生物人工肝系统(HBLS)及其治疗实验效果.方法采用微载体Cytodex 3培养人肝细胞,经简易体外灌流实验后装配成HBLS,用于治疗急性肝衰犬;观察模型犬的临床体征、生存时间、生化指标以及死亡... 目的探讨微载体培养L-02人肝细胞株应用于混合型生物人工肝系统(HBLS)及其治疗实验效果.方法采用微载体Cytodex 3培养人肝细胞,经简易体外灌流实验后装配成HBLS,用于治疗急性肝衰犬;观察模型犬的临床体征、生存时间、生化指标以及死亡后各脏器的病理检查.结果 HBLS治疗组和对照组的平均生存时间分别为(7.9±2.3) h和(3.4±1.4) h,差异具有显著性(P<0.05);空舱对照组生化指标呈现进行性恶化趋势,而HBLS组治疗过程中,FBI上升,TBIL、ALT、AST、LDH、PT指标呈下降趋势;肝组织的病理显示治疗组较对照组肝细胞变性坏死程度减轻.结论微载体培养L-02人肝细胞株成功应用于HBLS,能改善急性肝衰犬的状态,延长生命,具有一定的安全性和有效性. 展开更多
关键词 微载体 培养 人肝细胞 混合型生物人工肝系统
应用快速微量培养人肝癌细胞抗癌药敏试验的临床意义 预览
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作者 王晓茜 唐南洪 +2 位作者 李秀金 殷凤峙 朱金海 《中国民康医学》 2003年第1期 5-6,共2页
目的:为肝癌治疗中合理使用抗癌药提供可靠的科学依据.方法:采用改良MTT比色分析法测定35例肝癌细胞原代培养药敏.结果:35例人肝癌细胞抗癌药敏试验有33例获得成功,在六种抗癌药中敏感率最高的为EPB,其后依次为DDP、MMC、5-Fu、MTX和VCR... 目的:为肝癌治疗中合理使用抗癌药提供可靠的科学依据.方法:采用改良MTT比色分析法测定35例肝癌细胞原代培养药敏.结果:35例人肝癌细胞抗癌药敏试验有33例获得成功,在六种抗癌药中敏感率最高的为EPB,其后依次为DDP、MMC、5-Fu、MTX和VCR;人肝癌细胞对6种抗癌药敏感性的不同浓度间比较皆有显著性.结论:EPB和DDP一般为肝癌化疗的首选药,而VCR几乎没有作用;肝癌细胞对抗癌药有明显的药物浓度依赖性. 展开更多
关键词 肝癌 化疗药敏 MTT 治疗
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逆转录病毒载体介导IL—2基因转染人肝细胞的建立及其部分生物学性状 被引量:4
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作者 唐南洪 王晓茜 +3 位作者 陈燕凌 李秀金 殷凤峙 朱金海 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期 146-148,共3页
目的建立hIL-2基因修饰的人肝细胞株并探讨对其生物学活性的影响. 方法应用重组逆转录病毒载体pLNCIL-2,将hIL-2基因导入人肝细胞系L-02,观察其形态及克隆形成率的变化,检测细胞培养上清中hIL-2的含量,以及进行转染细胞基因组DNANeoR基... 目的建立hIL-2基因修饰的人肝细胞株并探讨对其生物学活性的影响. 方法应用重组逆转录病毒载体pLNCIL-2,将hIL-2基因导入人肝细胞系L-02,观察其形态及克隆形成率的变化,检测细胞培养上清中hIL-2的含量,以及进行转染细胞基因组DNANeoR基因片段的PCR扩增.结果 L-02/IL-2细胞的增殖速度和克隆形成率低于L-02/Neo细胞和L-02细胞.L-02/IL-2细胞的培养液中hIL-2的含量达32000 pg/106cells*d,并可持续表达10wk以上.从L-02/IL-2细胞和L-02/Neo细胞基因组DNA中,均扩增到NeoR基因片段(790bp).结论应用重组逆转录病毒载体成功地建立了L-02/IL-2细胞株,为进一步进行肝细胞移植动物实验奠定了基础. 展开更多
关键词 逆转录病毒载体 白细胞介素2 肝细胞 基因转移 肝癌
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