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蜂胶与β-环糊精复合物在西番莲果汁饮料中的应用研究 预览
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作者 杜天雨 耿倩倩 +5 位作者 陈立府 李玉洁 梁孟达 史培颖 缪晓青 吴珍红 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2019年第20期143-148,共6页
为改善蜂胶的水溶性,将其添加到西番莲果汁饮料中,研制一款功能性西番莲果汁饮料。将β-环糊精(β-cyclodextrin,β-CD)与蜂胶乙醇提取物(ethanol extract of propolis,EEP)制成复合物(compound of ethanol extract of propolis and bet... 为改善蜂胶的水溶性,将其添加到西番莲果汁饮料中,研制一款功能性西番莲果汁饮料。将β-环糊精(β-cyclodextrin,β-CD)与蜂胶乙醇提取物(ethanol extract of propolis,EEP)制成复合物(compound of ethanol extract of propolis and beta cyclodextrin,EEP-βCD),测定EEP-βCD的水溶性和热稳定性,并对西番莲果汁饮料的工艺参数进行优化。结果表明:EEP与β-CD复合后,水溶性和热稳定性都显著提高(P<0.01);西番莲果汁饮料的最佳工艺参数为:西番莲果汁15%,木糖醇12%,EEP-βCD 0.6%。蜂胶与β-环糊精复合后水溶性、热稳定性和刺激性味道都得到改善,可将其应用于西番莲果汁饮料。 展开更多
关键词 蜂胶 Β-环糊精 西番莲 水溶性 热稳定性
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赤芝LS基因酵母单杂交文库构建及其上游调控因子的筛选
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作者 徐晓兰 朱风丽 +2 位作者 赖荣才 石林春 陈士林 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第18期3967-3973,共7页
赤芝羊毛甾醇合酶(lanosterol synthase,LS)是灵芝三萜生物合成甲羟戊酸途径(mevalonate pathway,MVA途径)中生成前体化合物——羊毛甾醇的关键酶,LS基因的转录调控可直接影响灵芝三萜含量的高低。为了进一步研究赤芝MVA途径关键酶基因... 赤芝羊毛甾醇合酶(lanosterol synthase,LS)是灵芝三萜生物合成甲羟戊酸途径(mevalonate pathway,MVA途径)中生成前体化合物——羊毛甾醇的关键酶,LS基因的转录调控可直接影响灵芝三萜含量的高低。为了进一步研究赤芝MVA途径关键酶基因的转录调控机制,该研究利用酵母单杂交技术,筛选出赤芝LS基因上游的转录调控因子。提取赤芝全基因组DNA,PCR扩增LS启动子序列。由LS启动子构建诱饵载体,转化Y1H酵母感受态细胞构建诱饵菌株。运用SMART技术构建灵芝酵母单杂交c DNA文库,再共转化诱饵菌株,经同源重组筛选LS基因上游的转录调控因子。该实验共筛选出23个阳性克隆,经测序后与全基因组序数据库行blast比对,筛选出LS基因上游的候选调控因子8个,包括转录起始因子TFIIB,α/β折叠水解酶超家族、醛脱氢酶超家族、60S核糖体蛋白L21,ATP合成酶β亚基、微管结合蛋白Cript、蛋白酶体亚基β-1和转醛醇酶。这8个调控因子在灵芝三萜生物合成路径中的调控作用尚未见报道,该研究为深入研究LS基因的表达调控机制提供了候选蛋白。 展开更多
关键词 LS 灵芝三萜 酵母单杂交 调控因子
韩国赤芝全基因组重测序分析 预览
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作者 朱风丽 徐晓兰 +3 位作者 陈体强 石林春 缪晓青 兰进 《世界科学技术:中医药现代化》 CSCD 北大核心 2019年第4期764-774,共11页
目的:探索韩国赤芝与中国赤芝CGMCC5.0026间在基因组水平上存在的差异,为赤芝的遗传育种提供研究基础。方法:采用高通量重测序技术,对韩国赤芝进行全基因组重测序,并对单核苷酸多态位点突变(SNP)、小片段插入缺失变异(InDel)、结构变异(... 目的:探索韩国赤芝与中国赤芝CGMCC5.0026间在基因组水平上存在的差异,为赤芝的遗传育种提供研究基础。方法:采用高通量重测序技术,对韩国赤芝进行全基因组重测序,并对单核苷酸多态位点突变(SNP)、小片段插入缺失变异(InDel)、结构变异(SV)进行检测和注释。对DNA水平变异基因进行KEGG、GO、COG、NR、SwissProt数据库注释。结果:韩国赤芝重测序覆盖深度为44×,与中国赤芝CGMCC5.0026相比,共发现10607个基因发生非同义SNP,4774个InDel和1428个SV,共导致9469个基因发生变异。这些变异基因中有转录因子86个,细胞色素P450 195个。结论:本研究通过对中国赤芝和韩国赤芝基因组序列进行比较,为赤芝的分子标记育种和对完善灵芝模式真菌研究体系提供了基础。 展开更多
关键词 菌丝生长 全基因组重测序 单核苷酸多肽性(SNP) 小片段插入缺失(InDel) 结构变异(SV) 转录因子 细胞色素P450
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蜜蜂生物节律研究进展
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作者 陈文锋 王丹凤 黄少康 《科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期98-103,共6页
生物节律主要指有机体生命活动的内在节律性。蜜蜂生物节律受到其社会性的影响,从而参与许多复杂行为的调控。与果蝇相比,蜜蜂的生物节律与哺乳动物更相似。工蜂和蜂王的生物节律表现出高度的可塑性。例如,工蜂的昼夜节律受其劳动分工... 生物节律主要指有机体生命活动的内在节律性。蜜蜂生物节律受到其社会性的影响,从而参与许多复杂行为的调控。与果蝇相比,蜜蜂的生物节律与哺乳动物更相似。工蜂和蜂王的生物节律表现出高度的可塑性。例如,工蜂的昼夜节律受其劳动分工形式的调控,并通过与幼蜂的直接接触来调节,哺育蜂昼夜照料幼虫,在行为或时钟基因表达方面没有昼夜节律变化。从蜜蜂的社会性、蜜蜂生物节律产生的分子机制、神经基础、研究方法、可塑性、蜜蜂的睡眠等方面综述了蜜蜂生物节律的研究进展。 展开更多
关键词 蜜蜂 生物节律 劳动分工 可塑性
蜂产品中新烟碱类农药检测前处理方法研究进展 预览
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作者 伍思源 陈文彬 +1 位作者 涂熹娟 缪晓青 《中国蜂业》 2019年第5期63-67,共5页
样品前处理方法可分为提取、净化、和浓集三个步骤,有效的前处理方法可以富集目标物,提高灵敏度,降低杂质干扰该文章综述了近几年对于检测蜂产品中新烟碱类农药的前处理方法,并对前处理方法的主要参数进行归纳总结。
关键词 蜂产品 新烟碱类农药 样品前处理
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蜂毒肽获取方法的研究概述 预览
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作者 高照生 伍思源 缪晓青 《蜜蜂杂志》 2019年第6期3-6,共4页
蜂毒肽是蜂毒中的主要活性成分,作为典型的抗菌肽,具有镇痛、抗炎、抗病毒、抗肿瘤等药理活性,有较大的科学研究价值和广泛的医疗应用价值。但蜂毒肽纯品获取的高成本阻碍了其开发和应用。主要从蜂毒中分离纯化和生物工程技术应用两个... 蜂毒肽是蜂毒中的主要活性成分,作为典型的抗菌肽,具有镇痛、抗炎、抗病毒、抗肿瘤等药理活性,有较大的科学研究价值和广泛的医疗应用价值。但蜂毒肽纯品获取的高成本阻碍了其开发和应用。主要从蜂毒中分离纯化和生物工程技术应用两个方面概括和比较了目前获取蜂毒肽的方法,以期为相关研究提供参考。 展开更多
关键词 蜂毒肽 分离纯化 生物工程
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地熊蜂非视觉相关beta-arrestin基因的克隆与表达谱分析 预览
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作者 唐朋 赵沫涵 +2 位作者 杨慧鹏 苏松坤 吴杰 《山西农业大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第5期82-89,共8页
[目的]克隆鉴定地熊蜂非视觉相关 beta-arrestin 基因并分析其在蜂王不同发育时期及特定组织中的表达差异,以期为该基因的功能研究奠定基础。[方法]利用PCR扩增和基因克隆技术获得地熊蜂非视觉相关 beta-arrestin 基因的cDNA全长序列;... [目的]克隆鉴定地熊蜂非视觉相关 beta-arrestin 基因并分析其在蜂王不同发育时期及特定组织中的表达差异,以期为该基因的功能研究奠定基础。[方法]利用PCR扩增和基因克隆技术获得地熊蜂非视觉相关 beta-arrestin 基因的cDNA全长序列;利用生物信息学技术对该基因编码的氨基酸序列进行比对和进化树分析;运用Real-time PCR技术分析该基因在地熊蜂蜂王出房前1天、出房第1天、交配后5天、越冬3个月、越冬5个月、产卵第1天和饲养3个月后的脑、卵巢、中肠和脂肪体表达情况。[结果] beta-arrestin 基因CDS序列长1 248 bp,编码的蛋白大小为415 aa。该蛋白氨基酸序列中第27~182个氨基酸残基为 Arrestin-N superfamily的保守结构域;第201~354个氨基酸残基为 Arrestin-C superfamily的保守结构域。相似性分析表明,地熊蜂 beta-arrestin 基因氨基酸序列与NCBI中收录的地熊蜂转录组数据的氨基酸序列一致性高达97%。Real-time PCR结果表明, beta-arrestin 基因在地熊蜂所有检测的发育阶段及特定组织均有所表达,但表达量差异很大( P <0.05)。其中在头部和中肠表达量较高的时期是越冬3个月蜂王,在卵巢和脂肪体表达量较高的时期是出房第1天蜂王。[结论]本研究克隆了地熊蜂 beta-arrestin 基因的CDS序列,确定了 beta-arrestin 基因CDS序列编码的氨基酸序列,分析了该基因的序列特征和表达谱,推测其与蜂王越冬期间生理代谢过程和蜂王性成熟阶段激素分泌活动有关。 展开更多
关键词 地熊蜂 beta-arrestin基因 基因克隆 表达分析
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蜜蜂规模化饲养管理技术 预览
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作者 周冰峰 朱翔杰 +2 位作者 周姝婧 徐新建 付中民 《中国蜂业》 2019年第1期17-21,共5页
我国蜜蜂饲养管理技术在世界养蜂中非常独特,主要特征是饲养管理精细,在蜜粉植物资源不是很理想的条件下仍能获得较高的产量。由于片面追求单群产量,导致养蜂生产机械化程度低、投入劳动多、产品质量差和养蜂收益低,改变我国蜜蜂饲养技... 我国蜜蜂饲养管理技术在世界养蜂中非常独特,主要特征是饲养管理精细,在蜜粉植物资源不是很理想的条件下仍能获得较高的产量。由于片面追求单群产量,导致养蜂生产机械化程度低、投入劳动多、产品质量差和养蜂收益低,改变我国蜜蜂饲养技术模式已成为当前蜂业发展的主要任务。一、规模化蜂场和蜜蜂规模化饲养技术定义规模化蜂场与蜜蜂规模化饲养技术的概念虽然有关系但有所不同,规模化蜂场重点在蜂场的蜂群数量规模,蜜蜂规模化饲养技术重点在一个人能饲养蜜蜂的数量。 展开更多
关键词 饲养管理技术 规模化 蜜蜂 饲养技术 养蜂生产 机械化程度 植物资源 产品质量
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无刺蜂蜂胶乙醇提取物的体外抗氧化及抗炎活性 预览
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作者 王蓓 常化松 +2 位作者 苏松坤 孙丽萍 王凯 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期939-948,共10页
【目的】无刺蜂(stingless bees)是热带和亚热带地区重要的授粉昆虫之一,以尾部无蛰针为典型特征,其蜂胶采集量较意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica)更多,然而其蜂胶活性研究却相对匮乏。本文以来源于马来西亚无刺蜂(Heterotrigona i... 【目的】无刺蜂(stingless bees)是热带和亚热带地区重要的授粉昆虫之一,以尾部无蛰针为典型特征,其蜂胶采集量较意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica)更多,然而其蜂胶活性研究却相对匮乏。本文以来源于马来西亚无刺蜂(Heterotrigona itama)采集蜂胶的乙醇提取物(ethanol extract of H. itama propolis,EEHI)为研究对象,旨在探究其体外抗氧化和抗炎活性。【方法】采用福林酚法和硝酸铝法测定EEHI中总酚酸和总黄酮含量,并采用DPPH和ABTS+·自由基清除能力评价EEHI的体外抗氧化能力;在此基础上,采用细菌脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW 264.7炎症模型,通过CCK-8法检测EEHI对细胞相对存活率的影响,在保证EEHI对细胞无细胞毒性作用基础上,分别采用Griess法和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术评估EEHI对LPS诱导的RAW 264.7细胞中炎症介质一氧化氮(NO)释放量的影响以及其对炎症因子(IL-1β、IL-10和INOS)和抗氧化基因(HO-1)信使RNA表达的影响;进一步利用免疫印迹和免疫荧光方法,以NF-κB炎症信号通路为切入点,研究EEHI对LPS诱导巨噬细胞中p-IκΒα和IκΒα蛋白表达以及NF-κB-p65蛋白移位的影响,从而探究EEHI潜在的抗炎机理。【结果】EEHI中总酚酸和总黄酮含量分别为54.70 mg GAE·g-1和116.20 mg QE·g-1;DPPH和ABTS+·自由基清除能力IC50值分别为275.60和284.00μg·mL-1。EEHI对RAW 264.7细胞的安全浓度为0—40μg·mL-1。在LPS诱导的Raw 264.7细胞炎症模型中,相对于LPS刺激组,0—40μg·mL-1的EEHI以浓度依赖方式显著地抑制了LPS诱导的RAW 264.7细胞中NO的释放量,且降低了细胞中炎症因子IL-1β、IL-10和INOS的基因表达量,并增强了抗氧化基因HO-1的表达。进一步研究发现,0—40μg·mL-1的EEHI以浓度依赖方式显著抑制了LPS诱导的RAW 264.7细胞IκΒα蛋白的磷酸化,且40μg·mL-1的EEHI显著降低了NF-κB-p65蛋白的核移位现象,因此推测EEHI可能是通过抑制LPS诱� 展开更多
关键词 无刺蜂 无刺蜂蜂胶 抗氧化 抗炎 NF-ΚB
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感染意大利蜜蜂工蜂的东方蜜蜂微孢子虫及其纯化孢子的高表达基因分析 预览 被引量:1
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作者 熊翠玲 耿四海 +7 位作者 周丁丁 石彩云 郭意龙 陈大福 郑燕珍 徐国钧 张曦 郭睿 《上海交通大学学报:农业科学版》 2019年第2期6-13,共8页
为探究东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)在侵染意大利蜜蜂(Aips melliferaligustica)过程的基因表达谱及高表基因(highly expressed gene,HEG)的功能,本研究利用RNA-seq技术对N.ceranae感染的意蜂工蜂7和10d工蜂中肠(NcT1和NcT2)及其... 为探究东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)在侵染意大利蜜蜂(Aips melliferaligustica)过程的基因表达谱及高表基因(highly expressed gene,HEG)的功能,本研究利用RNA-seq技术对N.ceranae感染的意蜂工蜂7和10d工蜂中肠(NcT1和NcT2)及其纯化孢子(NcCK)进行高通量测序。根据FPKM值15的标准筛选出各组的HEG并进行Venn分析,进而通过GO分类和KEGG代谢通路富集分析对各组的共有HEG进行功能注释。测序得到的原始读段经严格质控后分别得到5816465、28501225和210824312条高质量的有效读段,分别从NcT1、NcT2和NcCK中筛选出1263、1233和1511个HEG,其中有1079个基因在各组均高量表达,分别有15和7个基因仅在NcT1和NcT2中高量表达。GO分类结果显示,共有HEG涉及9个生物学进程相关条目,10个细胞组分相关条目,以及5个分子功能相关条目。KEGG代谢通路富集分析结果表明,共有HEG富集在218条代谢通路,富集基因数最多的是核糖体、Epstein-Barr病毒感染、细胞周期、内质网蛋白加工和真菌核糖体生物合成。深入分析结果显示分别有5和5个共有HEG富集在MAPK和cAMP信号通路,表明此2条信号通路及富集的HEG可能在N.ceranae的环境应激和侵染过程中发挥重要作用。研究结果提供了N.ceranae感染意蜂工蜂过程中的基因表达谱,揭示了HEG的作用,为深入解析N.ceranae的侵染机制打下了初步基础。 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 中肠 转录组 东方蜜蜂微孢子虫 高表达基因
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中、意蜂Atg12基因克隆表达及生物信息学分析 预览
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作者 涂洋洋 武江利 +6 位作者 吴鹏杰 谭静 于慧敏 徐进 郭岳琴 王丽华 徐书法 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第3期643-651,共9页
试验旨在探究自噬相关基因Atg12(autophagy-related 12 gene)在中华蜜蜂(中蜂)、意大利蜜蜂(意蜂)中的表达差异,为探讨中蜂抗螨分子机理提供参考。参照GenBank中东方蜜蜂Atg12基因序列(登录号:XM_017048509.1)设计引物,扩增中、意蜂头... 试验旨在探究自噬相关基因Atg12(autophagy-related 12 gene)在中华蜜蜂(中蜂)、意大利蜜蜂(意蜂)中的表达差异,为探讨中蜂抗螨分子机理提供参考。参照GenBank中东方蜜蜂Atg12基因序列(登录号:XM_017048509.1)设计引物,扩增中、意蜂头部组织Atg12基因,并对其进行克隆、测序、原核表达及其氨基酸序列和蛋白结构分析,同时采用实时荧光定量PCR技术分析该基因在中、意蜂头部组织中的表达差异。结果显示,本试验成功扩增出大小为450bp的目的片段,并表达出大小约42ku重组蛋白;遗传进化树分析表明,在Atg12基因进化过程中,中蜂(Apis cerana cerana)、意蜂(Apis mellifera)、大蜜蜂(Apis dorsata)和小蜜蜂(Apis florea)亲缘关系较近;重组蛋白生物信息学分析显示,该蛋白的二级结构中共含有6个多肽结合位点、6个β-折叠和4个α-螺旋,分子质量约为16.13ku,等电点为6.73;实时荧光定量PCR结果显示,Atg12基因在中蜂头部组织中表达极显著高于意蜂(P<0.01)。本试验结果为后续深入研究Atg12基因在中蜂抗螨上的作用机制提供了参考。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 意大利蜜蜂 Atg12基因 克隆 原核表达 抗螨
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我国蜂业标准化体系建设 预览
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作者 徐国钧 谭丽蕊 《中国蜂业》 2019年第5期48-50,共3页
为落实十八届三中全会《中共中央关于全面深化改革若干重大问题的决定》,2017年11月4日,第十二届全国人民代表大会常务委员会第三十次会议公布通过修订《中华人民共和国标准化法》(以下简称《标准化法》),自2018年1月1日起施行。这标志... 为落实十八届三中全会《中共中央关于全面深化改革若干重大问题的决定》,2017年11月4日,第十二届全国人民代表大会常务委员会第三十次会议公布通过修订《中华人民共和国标准化法》(以下简称《标准化法》),自2018年1月1日起施行。这标志中国标准化工作正在进入强化法制管理的新阶段,中国也正在向标准强国、质量强国、信用强国之路坚定迈进。 展开更多
关键词 标准化体系建设 《中华人民共和国标准化法》 全国人民代表大会常务委员会 蜂业 《标准化法》 中国标准 法制管理 干重
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东北地区东方蜜蜂遗传分化和多样性分析 预览
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作者 郝璐楠 周姝婧 +6 位作者 朱翔杰 徐新建 蔡宗兵 牛庆生 袁春颖 陈东海 周冰峰 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期35-43,共9页
调查我国东北地区东方蜜蜂Apis cerana,分析其遗传分化并探讨隔离机制,明确东北东方蜜蜂种群遗传特征和多样性水平,探究蜜蜂种群遗传分化和遗传多样性相关规律,建立并完善东方蜜蜂种群遗传学。利用33个形态标记和38个微卫星DNA标记,对东... 调查我国东北地区东方蜜蜂Apis cerana,分析其遗传分化并探讨隔离机制,明确东北东方蜜蜂种群遗传特征和多样性水平,探究蜜蜂种群遗传分化和遗传多样性相关规律,建立并完善东方蜜蜂种群遗传学。利用33个形态标记和38个微卫星DNA标记,对东北7个样点共461群东方蜜蜂及北京平谷、浙江金华、四川平昌、海南儋州外群作遗传分化、遗传特征和遗传多样性分析。形态标记、微卫星DNA标记分析结果均显示,分布于长白山山脉抚松、安图、敦化、本溪、宽甸东方蜜蜂聚为同一种群。长白山种群肘脉指数、翅长、第五背板绒毛带长、第四腹板长等形态指标数值较高。微卫星各位点等位基因以1、2种为主,频率达80%以上的21个。遗传多样性结果显示,长白山种群的观察杂合度、有效等位基因数、多态信息含量等数值较低。东北地区东方蜜蜂主要分布在吉林、辽宁长白山山区,形成长白山东方蜜蜂种群。该种群与北京、四川、浙江、海南东方蜜蜂发生明显遗传分化,遗传多样性水平较低。分化主要原因为辽宁省长白山以西平原地区,东方蜜蜂逐渐消失,基因流阻断。长白山东方蜜蜂种群遗传多样性水平较低,环境和人为因素导致种群数量减少。 展开更多
关键词 东方蜜蜂 遗传分化 遗传多样性 微卫星 长白山
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意大利蜜蜂响应东方蜜蜂微孢子虫胁迫的免疫应答 预览
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作者 付中民 陈华枝 +9 位作者 刘思亚 祝智威 范小雪 范元婵 万洁琦 张璐 熊翠玲 徐国钧 陈大福 郭睿 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第17期3069-3082,共14页
【目的】通过对意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica,简称意蜂)工蜂中肠响应东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)胁迫的差异表达基因(differentially expressed gene,DEG)及免疫通路进行深入细致的分析,揭示宿主的细胞和体液免疫应答,为... 【目的】通过对意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica,简称意蜂)工蜂中肠响应东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)胁迫的差异表达基因(differentially expressed gene,DEG)及免疫通路进行深入细致的分析,揭示宿主的细胞和体液免疫应答,为关键免疫应答基因的筛选及功能研究打下基础。【方法】基于前期获得的正常及东方蜜蜂微孢子虫胁迫的意蜂7日龄和10日龄工蜂中肠(Am7CK、Am7T、Am10CK、Am10T)转录组数据,按照FDR≤1,P≤0.05和|log2 fold change|≥1的标准筛选出各组的DEG,利用相关生物信息学软件对DEG进行Pearson相关性分析、Venn分析、GO分类和KEGG代谢通路富集分析,进而对免疫通路富集基因进行统计和分析,利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-q PCR)验证转录组数据的可靠性。【结果】差异分析结果显示,Am7CK vs Am7T比较组包含472个上调基因和385个下调基因;Am10CK vs Am10T比较组包含611个上调基因和360个下调基因。Venn分析结果显示,两个比较组特有的DEG分别为739和853个,共有的DEG为118个。GO分类结果显示,Am7CK vs Am7T比较组中上调和下调基因分别涉及23和29个功能条目,其中富集上调基因数最多的前5位分别为结合、催化活性、代谢进程、细胞进程和单组织进程;富集下调基因数最多的前5位分别为代谢进程、单组织进程、催化活性、细胞进程和结合。Am10CK vs Am10T比较组中上调和下调基因分别涉及36和26个功能条目,其中富集上调基因数最多的前5位分别为单组织进程、结合、细胞进程、催化活性和代谢活性;富集下调基因数最多的前5位分别为结合、细胞进程、催化活性、代谢进程和单组织进程。KEGG代谢通路富集分析结果显示,Am7CK vs Am7T比较组中上调和下调基因分别富集在38和33条代谢通路,富集上调基因数最多的前5条分别为胆汁分泌、内质网蛋白加工、泛素介导的蛋白水解、PI3K-Akt� 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 东方蜜蜂微孢子虫 中肠 免疫应答 细胞免疫 体液免疫
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意大利蜜蜂幼虫肠道在球囊菌胁迫后期的差异表达微小RNA及其靶基因分析 预览
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作者 郭睿 杜宇 +9 位作者 周倪红 刘思亚 熊翠玲 郑燕珍 付中民 徐国钧 王海朋 耿四海 周丁丁 陈大福 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期49-60,共12页
【目的】蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis(简称球囊菌)是一种特异性侵染蜜蜂幼虫肠道的致死性真菌病原。微小RNA(microRNA,miRNA)是一种在转录后水平对mRNA进行负调控的关键调控因子。本研究旨在对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica(简称... 【目的】蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis(简称球囊菌)是一种特异性侵染蜜蜂幼虫肠道的致死性真菌病原。微小RNA(microRNA,miRNA)是一种在转录后水平对mRNA进行负调控的关键调控因子。本研究旨在对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica(简称意蜂)幼虫肠道在球囊菌胁迫后期的差异表达miRNAs(DEmiRNAs)及其靶基因进行深入分析,为揭示DEmiRNAs在胁迫应答中的作用提供重要信息。【方法】利用small RNA-seq(sRNA-seq)技术对正常及球囊菌侵染的意蜂6日龄幼虫肠道(分别表示为AmCK和AmT)进行测序,通过相关生物信息学软件对DEmiRNAs进行预测和分析。利用TargetFinder软件预测DEmiRNAs的靶基因,然后利用Blast软件对靶基因进行GO和KEGG数据库的功能注释。通过Cytoscape软件构建DEmiRNAs与其靶mRNAs的调控网络。通过茎环实时荧光定量PCR(stem-loop RT-qPCR)验证测序数据的可靠性。【结果】AmCK和AmT的测序分别得到9 230 496和10 823 667条有效序列标签;AmCK vs AmT比较组中包含15个上调和6个下调miRNAs,分别结合3 503和3 252个靶基因,它们可分别注释到40和39个GO terms以及104和99条代谢通路;进一步分析发现调控网络中的17个DEmiRNAs靶向结合116个与丝氨酸蛋白酶相关的mRNAs,14个DEmiRNAs靶向结合54个与泛素介导的蛋白水解相关的mRNAs。Stem-loop RT-qPCR验证结果显示随机选择的4个DEmiRNAs(miR-251-x,miR-9277-y,miR-1672-x和miR-4968-y)的表达量变化趋势与测序结果一致,表明测序数据真实可信。【结论】本研究率先对意蜂幼虫肠道在球囊菌胁迫后期的DEmiRNAs及其靶基因进行预测与分析,提供了miRNAs的表达谱和差异表达信息。ame-miR-927b,miR-429-y和miR-8440-y等DEmiRNAs可能参与对丝氨酸蛋白酶的调控和对泛素介导的蛋白水解的调控,DEmiRNAs与靶基因之间存在复杂的调控网络关系。DEmiRNAs可参与到意蜂幼虫肠道与球囊菌间的互作。 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 蜜蜂球囊菌 胁迫应答 微小RNA 免疫防御 靶基因
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意大利蜜蜂幼虫响应东方蜜蜂微孢子虫胁迫的高表达基因分析 预览
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作者 黄枳腱 陈华枝 +8 位作者 郭意龙 周丁丁 万洁琦 熊翠玲 郑燕珍 付中民 徐国钧 郭睿 陈大福 《上海交通大学学报:农业科学版》 2019年第3期87-94,共8页
为探究意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica,简称意蜂)幼虫响应东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)胁迫的高表达基因(HEG)的作用,利用RNA-seq技术对正常的意蜂4、5和6日龄幼虫(Am4CK、Am5CK和Am6CK)及N.ceranae胁迫的意蜂4、5和6日龄幼... 为探究意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica,简称意蜂)幼虫响应东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)胁迫的高表达基因(HEG)的作用,利用RNA-seq技术对正常的意蜂4、5和6日龄幼虫(Am4CK、Am5CK和Am6CK)及N.ceranae胁迫的意蜂4、5和6日龄幼虫(Am4T、Am5T和Am6T)进行测序。共得到268765544条原始读段,经过滤得到的有效读段数为266318442条,各样品的Q30均在92.42%及以上。根据FPKM值≥15的标准从上述6个样品中分别筛选出2460、2692、2908、2367、2549和2270个HEG。Venn分析结果显示,去除与对照组共有的HEG,Am4T、Am5T和Am6T的共有HEG数为3个,特有HEG数分别为373、210和79个。GO分类结果显示,Am4T、Am5T和Am6T的特有HEG分别能够注释26、27和16个GO条目,注释基因数最多的分别是代谢进程、结合和结合。KEGG分析结果显示这些特有HEG可分别富集在145、138和68条代谢通路,富集基因数最多的分别是过氧化物酶体、碳代谢和内质网蛋白加工。进一步分析结果表明N.ceranae胁迫可导致宿主的部分物质代谢、能量代谢和免疫代谢通路水平提高。从6个样品的共有HEG中随机选取10个进行RT-PCR验证,均能成功扩增出目的条带,说明本研究中的HEG真实存在。研究结果揭示了意蜂幼虫响应N.ceranae胁迫的HEG表达谱及作用,为深入解析宿主的胁迫应答机制提供了重要信息。 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 幼虫 东方蜜蜂微孢子虫 转录组 高表达基因 胁迫应答
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中华蜜蜂健康饲养技术要点 预览
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作者 梁勤 罗岳雄 《农家科技》 2019年第2期33-34,共2页
随着我国居民收入水平的提高,人们对健康食品的需求愈发旺盛,绿色健康食品的市场需求量大,价格也高,所以生产优质、无农药残留的蜂蜜是当下养蜂业者必须遵从的原则,也是获得高效益的重要途径.近些年来,中华蜜蜂渊以下简称中蜂冤生产的... 随着我国居民收入水平的提高,人们对健康食品的需求愈发旺盛,绿色健康食品的市场需求量大,价格也高,所以生产优质、无农药残留的蜂蜜是当下养蜂业者必须遵从的原则,也是获得高效益的重要途径.近些年来,中华蜜蜂渊以下简称中蜂冤生产的蜂蜜受到消费者的推崇,中蜂产业在我国发展极快,就是因为中蜂主要在山区饲养,蜜源丰富,污染少,蜜质优良. 展开更多
关键词 健康食品 饲养技术 中华蜜蜂 市场需求量 农药残留 养蜂业 消费者 中蜂
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东方蜜蜂微孢子虫的基因结构优化及新基因鉴定 预览
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作者 熊翠玲 童新宇 +7 位作者 陈华枝 耿四海 庄天艺 郑燕珍 付中民 陈大福 赵红霞 郭睿 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2019年第2期373-379,共7页
东方蜜蜂微孢子虫 Nosema ceranae 是一种寄生于蜜蜂中肠上皮细胞的单细胞真菌,对蜜蜂的健康危害严重,给世界各国的养蜂业造成较大损失。本研究基于前期获得的 N. ceranae 孢子的转录组数据对其已注释基因进行结构优化,并对未注释基因... 东方蜜蜂微孢子虫 Nosema ceranae 是一种寄生于蜜蜂中肠上皮细胞的单细胞真菌,对蜜蜂的健康危害严重,给世界各国的养蜂业造成较大损失。本研究基于前期获得的 N. ceranae 孢子的转录组数据对其已注释基因进行结构优化,并对未注释基因进行预测和分析。通过将测序得到的clean reads比对参考基因组和转录本重构,共对10个 N. ceranae 的已注释基因的5 端或3 端进行了延长。利用Cuffcompare软件将重构转录本与参考基因组进行比对,共鉴定出27个新基因,随机挑选9个新基因进行RT-PCR验证,均能扩增出符合预期的目的片段,表明预测出的新基因真实存在。有6个新基因能够注释到GO数据库和6个基因注释到KEGG数据库。进一步分析结果显示上述新基因注释到细胞等10个GO条目上,它们可能在 N. ceranae 的生命活动中具有重要功能。研究结果为 N. ceranae 的基因结构和功能注释信息的完善提供了有益补充,也为新基因的功能研究打下了基础。 展开更多
关键词 东方蜜蜂微孢子虫 RNA-SEQ 已注释基因 结构优化 新基因
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基于线粒体COI基因的印度新曲厉螨的分子鉴定 预览 被引量:1
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作者 邓洁 郭浩杰 +3 位作者 黄少康 林焱 黄伟峰 段辛乐 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2019年第2期380-386,共7页
本研究利用线粒体 COI 基因对印度新曲厉螨进行分子鉴定,以期为研究该螨的生物学习性及对蜜蜂的危害提供技术支持。分别从中华蜜蜂、意大利蜜蜂工蜂体上,以及桉树花序上采集试螨,扩增印度新曲厉螨的 COI 基因,并将获得的 COI 基因序列在... 本研究利用线粒体 COI 基因对印度新曲厉螨进行分子鉴定,以期为研究该螨的生物学习性及对蜜蜂的危害提供技术支持。分别从中华蜜蜂、意大利蜜蜂工蜂体上,以及桉树花序上采集试螨,扩增印度新曲厉螨的 COI 基因,并将获得的 COI 基因序列在Genbank中Blast对比;利用Genedoc软件分析基因序列的相似性;利用MEGA 7.0计算厉螨科不同种螨之间的遗传距离,构建 COI 基因的系统发育树。结果表明:采自中华蜜蜂、意大利蜜蜂及桉树花序上的印度新曲厉螨样本 COI 基因序列完全一致,均表现出明显的A/T碱基偏向性,与同属 Neocypholaelaps apicola 的 COI 基因序列的相似性为88%。基于 COI 基因的印度新曲厉螨的种内的遗传距离(0.00)显著小于与厉螨科6种螨的遗传距离(0.203~0.403)且不存在重叠区域。构建的 COI 基因的系统发育树显示,采自印度新曲厉螨样本 COI 与同属的 Neocypholaelaps apicola 聚同一进化枝,其它不同属螨则按照属的不同聚集在不同的进化枝。本研究所用的线粒体 COI 基因序列的差异可应用于印度新曲厉螨的分子鉴定。 展开更多
关键词 印度新曲厉螨 COI基因 分子鉴定
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意大利蜜蜂幼虫肠道在球囊菌侵染前期的差异表达microRNA及其调控网络 预览
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作者 郭睿 杜宇 +9 位作者 童新宇 熊翠玲 郑燕珍 徐国钧 王海朋 耿四海 周丁丁 郭意龙 吴素珍 陈大福 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期166-180,共15页
【目的】微小RNA(microRNA,miRNA)是一类重要的基因表达调控因子,可影响宿主与病原间的互作过程。蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis)是一种特异性侵染蜜蜂幼虫的致死性真菌病原。本研究旨在对意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica,简称意蜂... 【目的】微小RNA(microRNA,miRNA)是一类重要的基因表达调控因子,可影响宿主与病原间的互作过程。蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis)是一种特异性侵染蜜蜂幼虫的致死性真菌病原。本研究旨在对意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica,简称意蜂)幼虫肠道在球囊菌胁迫前期的差异表达miRNA(differentially expressed miRNA,DEmiRNA)及其靶基因进行深入分析,在miRNA组学水平探究意蜂幼虫在球囊菌侵染前期的胁迫应答,并通过构建显著DEmiRNA的调控网络筛选出与宿主应答相关的关键miRNA。【方法】利用small RNA-seq(sRNA-seq)技术对正常及球囊菌侵染的意蜂4日龄幼虫肠道(AmCK和AmT)进行高通量测序,首先对原始数据进行质控和评估,随后将过滤后的数据与西方蜜蜂(Apis mellifera)参考基因组进行比对;将比对上的序列标签(tags)注释到miRBase数据库,得出已知miRNA的表达量;通过TPM(tags per million)算法对各样本中miRNA的表达量进行归一化处理,以|log2 fold change|≥1且P≤0.05作为标准筛选得到显著DEmiRNA;利用TargetFinder软件预测显著DEmiRNA的靶基因,并对其进行GO和KEGG代谢通路(pathway)富集分析。利用Cytoscape软件对miRNA-mRNA调控网络进行可视化。最后,利用茎环反转录PCR(Stem-loop RT-PCR)和荧光定量PCR(qPCR)验证测序数据的可靠性。【结果】AmCK和AmT样品的测序分别得到13 553 302和10 777 534条原始读段(raw reads),经严格过滤后得到的有效读段(clean reads)数分别为13 186 921和10 480 913条。各样品的生物学重复间的Pearson相关性系数分别在0.9822和0.9508以上。共有10个显著DEmiRNA,包括4个上调miRNA和6个下调miRNA。显著DEmiRNA在AmT的整体表达水平低于AmCK。10个显著DEmiRNA可靶向结合3 788个靶基因,其中上调miRNA的1 240个靶基因可注释到GO数据库中的39个GO条目,主要富集在结合、细胞进程、代谢进程和应激反应等;下调miRNA的749个靶基因可注释到34个GO条目, 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 幼虫肠道 发育 差异表达微小RNA 调控网络
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