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miR-593通过调控PLK1基因的表达抑制结肠癌细胞的增殖 预览
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作者 马金珠 朱益平 +6 位作者 王箴 昝嘉伟 曹陇 冯遵永 王森林 范倩 颜亮 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期144-149,共6页
目的探讨miR-593在结肠癌细胞增殖中的作用及分子机制。方法利用生物信息学分析筛选miR-593可能结合的靶基因为PLK1;利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-593和PLK1基因的结合;通过qRT-PCR、Western blotting验证PLK1为miR-593直接作用... 目的探讨miR-593在结肠癌细胞增殖中的作用及分子机制。方法利用生物信息学分析筛选miR-593可能结合的靶基因为PLK1;利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-593和PLK1基因的结合;通过qRT-PCR、Western blotting验证PLK1为miR-593直接作用的靶基因;通过CCK-8实验证明miR-593通过调控PLK1基因的表达抑制结肠癌细胞的增殖。结果运用三种生物信息学软件对PLK1可能结合的miRNA进行了预测与分析,发现miR-593可能结合PLK1基因;双荧光素酶报告基因实验证明miR-593与PLK1基因发生了结合;Western blotting结果表明,PLK1在miR-593 mimic转染组表达量显著下降,而在miR-593 inhibitor组明显升高,相对于对照组均具有统计学差异(P<0.05);qRT-PCR结果表明,PLK1RNA水平在各组中表达水平差异无统计学意义(P>0.05);细胞增殖实验表明,miR-593与PLK1对结肠癌细胞增殖的影响为相反关系,且共转染miR-593 mimic与PLK1过表达质粒组对细胞增殖的影响介于单独转染miR-593 mimic组与PLK1过表达质粒组之间。结论miR-593通过调控PLK1基因的表达抑制了结肠癌细胞的增殖,并发挥抑癌miRNA的作用。 展开更多
关键词 miR-593 结肠癌细胞 PLK1
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二吲哚吡啶基噻唑烷对肺癌A549细胞增殖的影响 预览
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作者 颜亮 曹陇 +5 位作者 张名康 陆鑫宇 李雨朦 马金珠 徐蕾 范倩 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1994-1998,共5页
目的:探讨二吲哚吡啶基噻唑烷(DIIT)对肺癌A549细胞增殖的影响。方法:通过CCK-8法测定DIIT对肺癌A549细胞活力的影响;EdU/DAPI双染法观察细胞增殖情况;Western blot法检测DIIT对Akt和mTOR磷酸化及细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)及细胞... 目的:探讨二吲哚吡啶基噻唑烷(DIIT)对肺癌A549细胞增殖的影响。方法:通过CCK-8法测定DIIT对肺癌A549细胞活力的影响;EdU/DAPI双染法观察细胞增殖情况;Western blot法检测DIIT对Akt和mTOR磷酸化及细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)表达水平的影响。结果:与DMSO对照组相比,用浓度为12.5、25、50和100 mg/L的DIIT处理A549细胞后,细胞的增殖情况分别下降12%、27%(P<0.01)、33%(P<0.01)及52%(P<0.01);EdU阳性细胞相对数比DMSO对照组分别降低10%、21%(P<0.05)、26%(P<0.05)及34%(P<0.01)。与DMSO对照组相比,DIIT可以抑制Akt及mTOR的磷酸化水平,抑制细胞周期蛋白CDK4及cyclin D1的表达水平(P<0.01)。结论:二吲哚吡啶基噻唑烷抑制A549细胞增殖,其作用机制可能与Akt及mTOR的磷酸化水平下降及细胞周期蛋白表达受到抑制有关。 展开更多
关键词 肺癌 二吲哚吡啶基噻唑烷 细胞增殖 细胞周期 PI3K/Akt/mTOR信号通路
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二吲哚吡啶基吡咯烷通过抑制AKT-mTOR阻滞MDA-MB231乳腺癌细胞周期 预览
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作者 颜亮 昝嘉伟 +3 位作者 冯遵永 马金珠 徐蕾 王毅 《中国药科大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期718-724,共7页
探索吡咯烷衍生物的螺旋吲哚化合物二吲哚吡啶基吡咯烷(Di-indolyl pyrrolidine,DIPRD)对人乳腺癌MDA-MB231细胞周期的阻滞作用。使用CCK-8法检测DIPRD对MDA-MB231细胞的毒性剂量;使用DAPI/EdU双染法检测MDA-MB231细胞周期阻滞作用;使用... 探索吡咯烷衍生物的螺旋吲哚化合物二吲哚吡啶基吡咯烷(Di-indolyl pyrrolidine,DIPRD)对人乳腺癌MDA-MB231细胞周期的阻滞作用。使用CCK-8法检测DIPRD对MDA-MB231细胞的毒性剂量;使用DAPI/EdU双染法检测MDA-MB231细胞周期阻滞作用;使用Western blot检测信号通路蛋白AKT、mTOR和凋亡相关蛋白p53、MDM2的磷酸化水平以及DNA修复酶PARP的水平。DIPRD在12.5、25、50 mg/mL剂量依赖性抑制MDA-MB231细胞活力,下调EdU阳性细胞数量,增加G 1期并减少S/G 2期细胞数量,下调p-AKT(Ser473)、p-mTOR、p-p53、cyclin D1和CDK4水平并上调p-AKT(Thr308),p-MDM2及Cleaved-PARP水平。DIPRD可能通过AKT信号通路发挥周期阻滞作用。 展开更多
关键词 二吲哚吡啶基吡咯烷 乳腺癌 MDA-MB231 细胞周期
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Sidt2基因剔除小鼠的肺部形态学改变 预览
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作者 蒋雪 章尧 +5 位作者 王李卓 王云 夏礼斌 陈月平 王莹 高家林 《皖南医学院学报》 CAS 2016年第4期307-310,共4页
目的:观察Sidt2基因剔除小鼠的肺组织超微结构,探讨Sidt2基因在肺脏形态发育过程中的作用。方法:将利用基因打靶及同源重组技术获得的Sidt2基因全身剔除小鼠和野生型B129品系小鼠合笼交配,鼠尾提取DNA进行基因型鉴定,挑选出子代Sidt2-... 目的:观察Sidt2基因剔除小鼠的肺组织超微结构,探讨Sidt2基因在肺脏形态发育过程中的作用。方法:将利用基因打靶及同源重组技术获得的Sidt2基因全身剔除小鼠和野生型B129品系小鼠合笼交配,鼠尾提取DNA进行基因型鉴定,挑选出子代Sidt2-/+小鼠,同笼交配,再挑选出子代Sidt2-/-小鼠为实验组,以同窝野生型小鼠为对照,进行DNA、RNA和Western鉴定,并行肺组织光镜和电镜形态学观察。结果:通过DNA、RNA、蛋白质水平验证模型构造成功。光镜下对照鼠肺泡壁光滑,仅有少量粒细胞浸润;模型鼠肺泡间质内毛细血管扩张、充血,多处炎症细胞呈灶状分布。电镜下对照鼠的肺组织形态较规则;模型鼠可见肺泡上皮细胞崩解,毛细血管充血及基底膜增厚。结论:Sidt2基因剔除可影响小鼠肺组织形态,表现为细胞坏死,毛细血管充血及基底膜增厚,大量炎症细胞浸润,造成肺损伤。 展开更多
关键词 溶酶体膜蛋白 Sidt2 肺部形态 炎症 肺损伤
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尿糖敏感的尿蛋白指数用于糖尿病肾病易感性预测的相关分析 预览
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作者 高家林 朱玉 +6 位作者 张魏 鲁雅群 胡永慧 曹雪华 李勤 何俊俊 王李卓 《皖南医学院学报》 CAS 2019年第4期343-347,共5页
目的:初步建立和定义尿蛋白发生敏感指数(尿蛋白/尿糖、糖肾指数)方法,并探讨其用于预测糖尿病肾病(DKD)发病的有效性。方法:筛选近3年本院至少2次以上住院糖尿病患者(前后间隔不少于3个月)期间段内第一次住院尿糖阳性患者,并根据尿蛋... 目的:初步建立和定义尿蛋白发生敏感指数(尿蛋白/尿糖、糖肾指数)方法,并探讨其用于预测糖尿病肾病(DKD)发病的有效性。方法:筛选近3年本院至少2次以上住院糖尿病患者(前后间隔不少于3个月)期间段内第一次住院尿糖阳性患者,并根据尿蛋白是否阳性分为尿蛋白阳性合并尿糖阳性(UP+/G+)组和尿蛋白阴性合并尿糖阳性(UP-/G+)组,通过相关性分析、分层分析、分组分析等回顾性分析,评估糖肾指数用于DKD早期预测的可行性。结果:一般资料分析表明,UP+/G+组尿糖低于UP-/G+组(P<0.05),而糖肾指数、尿酸、肌酐、尿素氮、血压、病程、体质量等指标高于UP-/G+组(P<0.05或0.01),其余HbA1c、空腹血糖、年龄等指标差异无统计学意义。基于尿糖敏感(尿蛋白阳性)的UP+/G+组患者后期住院尿蛋白阳性率高于UP-/G+组(P<0.01),对糖肾指数进行高低分层后分析表明,随着糖肾指数及分层的危险程度增加,后期尿蛋白出现阳性的比率也随之增高,差异具有统计学意义(P<0.001)。对尿蛋白发生的相关因素及尿糖相关性分层分析表明,除病程、血压、体质量外(P<0.01),尿糖也是尿蛋白发生的密切相关因素(分层条件相关),对尿糖的相关性按糖肾指数进行分层分析发现,糖肾指数在0.1~1之间时(中度~高度),尿蛋白与尿糖的发生高度相关(具有尿糖敏感性),有统计学意义(P<0.01),而在低度及极高度分层时,尿蛋白与尿糖不具有明显相关性(P>0.05)。结论:DKD患者尿蛋白的发生具有尿糖敏感性,与尿糖存在着条件(临床易感)相关性,基于尿糖敏感性的尿蛋白发生敏感指数(糖肾指数)可作为DKD的易感预测指数,指导临床DKD的防治。 展开更多
关键词 尿蛋白 尿糖敏感性 糖肾指数 糖尿病肾病 预测 发病易感性
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山奈素对大鼠动脉性勃起功能障碍治疗作用的机制研究 预览
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作者 孟宇 王李卓 陈靠山 《通化师范学院学报》 2019年第12期53-56,共4页
目的:观察牛蒡根化学成分山奈素对动脉性勃起功能障碍(A-ED)大鼠阴茎和睾丸组织中一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性及一氧化氮合酶基因(NOSmRNA)表达的影响,探讨牛蒡根成分山奈素对A-ED大鼠治疗作用的可能机制;方法:按试剂盒操... 目的:观察牛蒡根化学成分山奈素对动脉性勃起功能障碍(A-ED)大鼠阴茎和睾丸组织中一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性及一氧化氮合酶基因(NOSmRNA)表达的影响,探讨牛蒡根成分山奈素对A-ED大鼠治疗作用的可能机制;方法:按试剂盒操作说明来测定NO和NOS含量,用RT-PCR的方法检测阴茎组织和睾丸组织中3种亚型NOSmRNA的表达.结果:山奈素100 mg·kg^-1组能促使阴茎组织中NO和NOS的含量显著增加,山奈素50 mg·kg^-1组能明显提高阴茎和睾丸组织中eNOS和nNOS基因的表达.结论:牛蒡根化学成分山奈素可以提高阴茎组织中NO和NOS含量,并对NOSmRNA有上调作用. 展开更多
关键词 山奈素 NO NOS NOSmRNA A-ED
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临床青年女教师教学能力认知调查及提升对策——以三所安徽省属医科高等院校为例 预览
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作者 熊磊 凌烈锋 +2 位作者 齐世美 戚之琳 徐蕾 《科技视界》 2019年第13期201-202,200共3页
目的:开展临床青年女教师教学能力认知调查并提出提升对策。方法:对三所安徽省医科高等院校360名临床青年女教师进行问卷调查。结果临床青年女教师整体学历层次偏高,以硕士学历为主(53.33%);职称结构中级职称比例偏高(51.39%)。其中,70.... 目的:开展临床青年女教师教学能力认知调查并提出提升对策。方法:对三所安徽省医科高等院校360名临床青年女教师进行问卷调查。结果临床青年女教师整体学历层次偏高,以硕士学历为主(53.33%);职称结构中级职称比例偏高(51.39%)。其中,70.83%认为最重要的教学能力是具备扎实的专业知识,72.22%认为教案写作是基本教学基本能力,81.94%认为不熟悉教学内容是影响教学能力的因素,66.94%最希望得到临床教学理论知识提升,73.61%认为提供有竞争力的薪酬是最有效的提升措施。结论:注重临床青年女教师思想观念更新,重视教学基本功训练,多种形式加强教学培训,加大对青年女教师队伍关心和爱护,将教学成果纳入绩效考核奖励制度,促进临床青年女教师教学能力提升。 展开更多
关键词 高等医学院校 教学能力 临床青年女教师
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医学院校生物化学课程移动网络教学系统的初步构建 预览
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作者 汪茗 谢向荣 +12 位作者 齐世美 王李卓 徐蕾 孙玲玲 戚之琳 颜亮 孟宇 吕俊 赵劲松 陈祥攀 凌烈锋 叶明全 章尧 《基础医学教育》 2018年第7期590-592,共3页
生物化学是医学院校一门重要的主干课,但因传统教学模式存在弊端导致诸多教学矛盾的出现。为解决这些矛盾,提高教学效果,皖南医学院生物化学与分子生物学教研室初步构建了适合医学院校学生使用的生物化学移动网络教学系统。鉴于该系统... 生物化学是医学院校一门重要的主干课,但因传统教学模式存在弊端导致诸多教学矛盾的出现。为解决这些矛盾,提高教学效果,皖南医学院生物化学与分子生物学教研室初步构建了适合医学院校学生使用的生物化学移动网络教学系统。鉴于该系统建设过程中存在一些困难和问题,拟采取相应措施进行处理,完善其后期建设。期待通过此系统的构建能使更多的学生从中受益,获得学习的乐趣。 展开更多
关键词 生物化学 移动网络 教学系统
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三阴性乳腺癌TCL诱导THP-1细胞活化及分化的研究 预览
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作者 董博翰 丁园园 +2 位作者 戴广丽 王贝茹 张思远 《皖南医学院学报》 CAS 2018年第3期205-209,共5页
目的:研究三阴性乳腺癌细胞裂解物(TCL)对单核细胞活化和分化所产生的影响,以及裂解物诱导单核细胞分化的机制。方法:选取三阴性乳腺癌细胞系HCC1937制备细胞裂解物,以人单核细胞系THP-1作为研究对象。将HCC1937细胞裂解物作用于TH... 目的:研究三阴性乳腺癌细胞裂解物(TCL)对单核细胞活化和分化所产生的影响,以及裂解物诱导单核细胞分化的机制。方法:选取三阴性乳腺癌细胞系HCC1937制备细胞裂解物,以人单核细胞系THP-1作为研究对象。将HCC1937细胞裂解物作用于THP-1细胞,检测细胞培养上清液中TNF-α、IL-12的分泌情况,并确定促进细胞因子分泌的最佳裂解物剂量和时间点。流式检测HCC1937细胞裂解物作用的THP-1细胞形态及细胞表面CD68表达的改变,并利用Q-PCR的方法检测裂解物作用后THP-1细胞中促分化关键因子转录因子CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)和PU.1蛋白的表达情况。结果:HCC1937细胞裂解物活化的THP-1细胞,大量合成分泌TNF-α、IL-12(P〈0.05)。THP-1细胞在裂解物作用后细胞体积、颗粒度等会发生增大,细胞表面CD68表达上调(P〈0.05),上述表现符合巨噬细胞的特征。与此同时,作用后THP-1细胞中C/EBPα表达出现上调(P〈0.05),而PU.1表达出现下调(P〈0.05)。结论:三阴性乳腺癌HCC1937细胞裂解物活化人单核细胞THP-1,并通过促进分化因子C/EBPα的表达和抑制PU.1的表达诱导THP-1向巨噬细胞分化。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 肿瘤细胞裂解物 THP-1 C/EBPΑ PU.1
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皖南地区中青年与老年冠心病患者危险因素的研究 预览 被引量:2
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作者 谢向荣 汪和贵 +6 位作者 汪茗 查林涛 潘大彬 朱正才 曹蘅 柯永胜 汤圣兴 《皖南医学院学报》 CAS 2018年第1期15-18,共4页
目的:研究皖南地区中青年与老年冠心病患者危险因素的差异。方法:选择在弋矶山医院住院经冠状动脉造影确诊的冠心病患者337例,按年龄分为中青年组(〈60岁)和老年组(≥60岁)。分析2组之间男性比例、高血压、糖尿病、吸烟史、冠心... 目的:研究皖南地区中青年与老年冠心病患者危险因素的差异。方法:选择在弋矶山医院住院经冠状动脉造影确诊的冠心病患者337例,按年龄分为中青年组(〈60岁)和老年组(≥60岁)。分析2组之间男性比例、高血压、糖尿病、吸烟史、冠心病家族史、血脂水平等危险因素的差异。结果:老年组冠心病患者的吸烟比例及有高血压病史的比例均高于中青年组(P〈0.05),但中青年冠心病组则具有更高的BMI、TC、TG、LDL-C水平(P〈0.05)。按性别区分后,男性中青年冠心病组具有更高的BMI、TG水平以及更低的HDL-C水平(P〈0.05),而男性老年冠心病组有高血压病史和吸烟史的比例更高。女性中青年冠心病组的LDL-C水平高于女性老年冠心病组(P〈0.05),女性老年冠心病组有高血压病史的比例更高(P〈0.05)。结论:皖南地区中青年冠心病患者可能应注重体质量指数和血脂的控制,而老年患者则可能更应关注控制吸烟及高血压。 展开更多
关键词 皖南地区 冠心病 危险因素
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4种方法制备蝉蛹蛋白质效果的比较 预览
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作者 张巳轩 徐芊芊 +4 位作者 孙长婷 张倩 任晶晶 湛孝东 李朝品 《皖南医学院学报》 CAS 2018年第6期598-601,共4页
目的:比较4种方法提取蝉蛹蛋白质效果的差异。方法:以蝉蛹为原料,通过控制变量法进行预实验,筛选出碱提取法、盐提取法、酶提取法以及水提取法这4种方法在不同测试因素下蛋白质收率最高的实验条件,并以该条件作为各个方法的最优条件,利... 目的:比较4种方法提取蝉蛹蛋白质效果的差异。方法:以蝉蛹为原料,通过控制变量法进行预实验,筛选出碱提取法、盐提取法、酶提取法以及水提取法这4种方法在不同测试因素下蛋白质收率最高的实验条件,并以该条件作为各个方法的最优条件,利用最优条件提取蝉蛹蛋白质并测定蛋白质含量。结果:蛋白质收率为碱提取法41.62%、盐提取法6.77%、酶提取法73.02%、水提取法69.35%。结论:酶提取法收率最高,其次是水提取法、碱提取法,盐提取法收率最低。 展开更多
关键词 蝉蛹 蛋白质 提取 制备
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牛蒡低聚果糖的提取条件及其稳定性研究 预览
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作者 袁平川 陈靠山 +2 位作者 柳春燕 房芳 王颜天池 《皖南医学院学报》 CAS 2017年第5期424-427,共4页
目的:研究牛蒡低聚果糖的最佳提取条件及其稳定性。方法:通过单因素实验及正交实验对牛蒡低聚果糖的提取条件进行优化,采用蒽酮法测定其在不同条件下的稳定性。结果:牛蒡低聚果糖最佳提取条件为固液比1∶25、提取温度80℃、提取时间9... 目的:研究牛蒡低聚果糖的最佳提取条件及其稳定性。方法:通过单因素实验及正交实验对牛蒡低聚果糖的提取条件进行优化,采用蒽酮法测定其在不同条件下的稳定性。结果:牛蒡低聚果糖最佳提取条件为固液比1∶25、提取温度80℃、提取时间90 min,在此条件下,牛蒡低聚果糖得率为67.54%。牛蒡低聚果糖热稳定性及光照条件下稳定性较好,易被氧化,在pH〉8或pH〈4及含有Cu~(2+)、Fe~(3+)溶液中的稳定性较差。结论:牛蒡低聚果糖在存储过程中应避免与空气及铁铜制品直接接触,提取时温度应低于90℃,且溶液无强酸碱性。 展开更多
关键词 牛蒡低聚果糖 提取 稳定性
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尖吻蝮蛇毒PCA对HUVEC活性的影响 预览 被引量:1
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作者 桑金凤 张根葆 +1 位作者 周淑艳 季娜 《中国实验血液学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第2期572-576,共5页
目的:观察皖南尖吻蝮蛇毒蛋白C激活剂(PCA)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的超微结构及其合成组织因子(TF)、血管性血友病因子(vWF)和内皮素-1(ET-1)水平的影响,并探讨PCA的抗血栓机制。方法:实验分为对照组(DMEM液)、脂... 目的:观察皖南尖吻蝮蛇毒蛋白C激活剂(PCA)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的超微结构及其合成组织因子(TF)、血管性血友病因子(vWF)和内皮素-1(ET-1)水平的影响,并探讨PCA的抗血栓机制。方法:实验分为对照组(DMEM液)、脂多糖(LPS)组(LPS 0.1μg/ml)、PCA组(PCA 1μg/ml)、PCA+LPS组(1μg/ml PCA+0.1μg/ml LPS),加药作用12 h后在透射电镜下观察各组细胞的内质网、线粒体形态及自噬体数量变化;ELISA检测各组培养上清中TF、vWF、ET-1含量;RT-PCR检测细胞内vWF、ET-1基因表达水平;Western blot检测细胞内TF蛋白表达水平。结果:LPS组的HUVEC与对照组相比,细胞膜不光滑、出现凸起样改变,并发生线粒体、内质网肿胀,自噬体数量增多等超微结构的改变,PCA组HUVEC的超微结构与对照组比无明显变化;与LPS组相比,PCA+LPS组的HUVEC线粒体、内质网肿胀消失,自噬体数量明显减少。与对照组相比,LPS组细胞培养上清中TF、vWF、ET-1的含量及细胞内vWF、ET-1基因、TF蛋白的表达水平显著增高(P〈0.05);PCA组细胞培养上清及细胞内3种物质的表达量较对照组无显著变化(P〉0.05);与LPS组相比,LPS+PCA组HUVEC培养上清及细胞内TF、vWF、ET-1的表达水平显著降低(P〈0.05)。结论:1μg/ml的PCA可减轻LPS引起的HUVEC超微结构的改变,也可抑制LPS对HUVEC的TF、vWF、ET-1分泌量的增加作用。 展开更多
关键词 尖吻蝮蛇毒蛋白C激活剂 脐静脉血管内皮细胞 组织因子 血管性血友病因子 内皮素-1
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屋尘螨变应原Der p2 T细胞表位疫苗对哮喘小鼠的特异性免疫治疗效果 被引量:1
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作者 湛孝东 段彬彬 +1 位作者 洪勇 李朝品 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期59-63,共5页
目的 探讨屋尘螨变应原Der p2的4个T细胞表位融合肽对哮喘小鼠的特异性免疫治疗效果。方法 30只雌性BALB/c小鼠随机分为3组,分别为阴性对照组(PBS组)、阳性对照组(哮喘组)以及Der p2 T细胞融合肽治疗组(Der p2 T组)。用屋尘螨粗... 目的 探讨屋尘螨变应原Der p2的4个T细胞表位融合肽对哮喘小鼠的特异性免疫治疗效果。方法 30只雌性BALB/c小鼠随机分为3组,分别为阴性对照组(PBS组)、阳性对照组(哮喘组)以及Der p2 T细胞融合肽治疗组(Der p2 T组)。用屋尘螨粗提取液致敏小鼠建立哮喘模型,PBS组以PBS缓冲液代替,Der p2 T组分别于小鼠致敏第25~27天雾化致敏前30 min行背部皮下注射相应治疗蛋白。最后一次雾化激发24 h后,收集各组小鼠血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)。采用ELISA法检测小鼠BALF中IFN-γ、IL-4、IL-13以及血清中屋尘螨粗提取液致敏的特异性IgE、IgG2a抗体水平,并行肺组织切片HE染色。结果 哮喘组小鼠BALF中的嗜酸性粒细胞数量为(5.57±0.64)×10~5个/ml,高于PBS组[(0.50±0.30)×10~5个/ml](P〈0.01)和Der p2 T组[(3.45±0.36)×10~5个/ml](P〈0.01)。PBS组、哮喘组、Der p2 T组小鼠BALF中IFN-γ含量分别为(267.00±21.98)、(155.80±20.53)pg/ml和(234.40±24.46)pg/ml;与哮喘组比较,Der p2 T组小鼠BALF中产生了较高的IFN-γ水平(P〈0.01)。PBS组、哮喘组、Der p2 T组小鼠BALF中IL-4含量分别为(23.40±5.96)、(53.28±8.26)pg/ml和(30.00±5.50)pg/ml;与哮喘组比较,Der p2 T组小鼠BALF中IL-4含量显著降低(P〈0.01)。与哮喘组[(308.10±28.32)pg/ml]比较,Der p2 T组小鼠BALF中IL-13含量[(174.50±25.99)pg/ml]显著下降(P〈0.01);PBS组鼠BALF中IL-13含量为(95.99±31.14)pg/ml。肺组织切片显示,Der p2 T组小鼠肺部炎症较哮喘组明显减轻,且炎性细胞浸润显著减少、气道上皮结构重塑。结论 Der p2 T细胞表位融合肽可有效改善哮喘小鼠变态反应性气道及肺部炎症,可作为屋尘螨哮喘患者特异性免疫治疗的候选疫苗。 展开更多
关键词 屋尘螨 Der P2 T细胞表位 哮喘 免疫治疗
户尘螨Derp2T细胞表位融合肽对哮喘小鼠STAT6信号通路的影响 被引量:2
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作者 湛孝东 段彬彬 +1 位作者 陶宁 李朝品 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期19-23,共5页
目的 通过户尘螨(Dermatophagoides pteronyssinus)2类变应原Der p 2 T细胞表位融合肽对哮喘小鼠的特异性免疫治疗,探讨信号转导因子和转录活化因子6(signal transducer and activator of transcription factor 6, STAT6)的变化及... 目的 通过户尘螨(Dermatophagoides pteronyssinus)2类变应原Der p 2 T细胞表位融合肽对哮喘小鼠的特异性免疫治疗,探讨信号转导因子和转录活化因子6(signal transducer and activator of transcription factor 6, STAT6)的变化及其特异性免疫治疗的作用机制。 方法 30只小鼠用随机数表法分为哮喘组、Der p 2 T细胞表位融合肽免疫治疗组(简称免疫治疗组)和阴性对照组(PBS组),每组10只。哮喘组和免疫治疗组分别于第0、7、14天经小鼠腹腔注射100 μl致敏液[含100 μg/ml Der p2和2% Al(OH)3的PBS液],PBS组注射等量PBS液[含2% Al(OH)3]。哮喘组和免疫治疗组自第21天起,雾化吸入0.5 μg/ml Der p 2致敏液,1次/d × 30 min,连续7 d; PBS组雾化吸入等量PBS液。免疫治疗组在第25~27天雾化前30 min,经腹腔注射100 μg/ml Der p 2 T细胞表位融合肽200 μl, PBS组和哮喘组注射等量PBS液。末次雾化吸入24 h后处死小鼠,收集每组小鼠的支气管肺泡灌洗液(BALF),用ELISA检测BALF中白细胞介素-4(IL-4)、IL-13、γ干扰素(IFN-γ)水平。取肺组织提取肺组织全蛋白,蛋白质印记(Western blotting)检测肺组织全蛋白中STAT6和磷酸化STAT6(p-STAT6)的表达情况。组间样本的均数比较采用单因素方差分析。 结果 免疫治疗组小鼠的IFN-γ水平为(234.40 ± 24.46)pg/ml,高于哮喘组的(155.80 ± 20.53)pg/ml(P 〈 0.01);免疫治疗组小鼠的IL-4和IL-13水平分别为(30.00 ± 5.50)和(174.50 ± 25.99)pg/ml,均低于哮喘组小鼠的(53.28 ± 8.26)和(308.10 ± 28.32)pg/ml(P 〈 0.01)。免疫治疗组小鼠STAT6、p-STAT6的相对表达量分别为0.803 ± 0.221和0.966 ± 0.323,均低于哮喘组的1.669 ± 0.296和1.735 ± 0.298(P 〈 0.01)。 结论 Der p 2 T细胞表位融合肽可能通过抑制STAT6治疗哮喘组小鼠。 展开更多
关键词 户尘螨 特异性免疫治疗 T细胞表位 STAT6
利用合成多肽制备兔多克隆抗体 预览
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作者 谭凤彪 高家林 +1 位作者 陆晓华 章尧 《皖南医学院学报》 CAS 2016年第5期422-425,共4页
目的:利用人工合成多肽制备载脂蛋白M(appliprotein M,ApoM)兔多克隆抗体。方法:分析并选取一段特异性的ApoM氨基酸序列用于合成多肽,并耦联钥孔血蓝蛋白(KLH),用来免疫雄性的新西兰大白兔,经过多次加强免疫后用收集的兔抗血清制... 目的:利用人工合成多肽制备载脂蛋白M(appliprotein M,ApoM)兔多克隆抗体。方法:分析并选取一段特异性的ApoM氨基酸序列用于合成多肽,并耦联钥孔血蓝蛋白(KLH),用来免疫雄性的新西兰大白兔,经过多次加强免疫后用收集的兔抗血清制备多克隆抗体,并进行Western Blot检测。结果:利用人工合成并纯化的多肽,经多次免疫后获得所需的多克隆抗体。结论:成功制备了兔ApoM多克隆抗体,为后续的实验研究ApoM的功能提供实验基础。 展开更多
关键词 载脂蛋白M 多肽 多克隆抗体
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人HCN4基因真核表达质粒构建及在HEK293细胞中的表达 预览
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作者 谢向荣 左产锋 +8 位作者 程浪 汪茗 曹蘅 汪和贵 蔚有权 杨浩 芮世宝 杨玉雯 汤圣兴 《皖南医学院学报》 CAS 2016年第6期511-515,共5页
目的:构建人HCN4基因的真核表达质粒并转染人胚胎肾细胞,建立异源性表达HCN4通道模型。方法:通过聚合酶链反应扩增人HCN4基因全长核苷酸序列,双酶切( XhoI和EcoRI)后插入真核表达质粒pIRES2-EGFP中,构建重组真核表达质粒pIRES2-H... 目的:构建人HCN4基因的真核表达质粒并转染人胚胎肾细胞,建立异源性表达HCN4通道模型。方法:通过聚合酶链反应扩增人HCN4基因全长核苷酸序列,双酶切( XhoI和EcoRI)后插入真核表达质粒pIRES2-EGFP中,构建重组真核表达质粒pIRES2-HCN4-EGFP。应用脂质体法将重组质粒pIRES2-HCN4-EGFP转染入HEK293细胞中进行表达。全细胞膜片钳技术检测HCN4通道电流。结果:酶切及测序的结果显示pIRES2-HCN4-EGFP构建成功,倒置荧光显微镜能观察到EGFP绿色荧光,反转录-聚合酶链反应检测到HCN4 mRNA表达,膜片钳检测到HCN4基因编码的通道电流。结论:成功建立异源性表达HCN4通道模型,为进一步研究HCN4通道电生理特性提供了实验基础。 展开更多
关键词 HCN4基因 转染 异源性表达 HEK293细胞
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超声辅助法在亚洲日月蛤多糖提取工艺优化中的应用 预览 被引量:2
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作者 胡伟 唐小牛 《皖南医学院学报》 CAS 2016年第6期515-518,共4页
目的:探讨超声辅助法对亚洲日月蛤多糖最佳提取工艺。方法:分别用热水浸提法和超声辅助热水浸提法提取亚洲日月蛤多糖,并比较两种方法的生物多糖得率。再分别以液固比、提取温度和提取时间为条件,采用超声辅助法提取亚洲日月蛤多糖... 目的:探讨超声辅助法对亚洲日月蛤多糖最佳提取工艺。方法:分别用热水浸提法和超声辅助热水浸提法提取亚洲日月蛤多糖,并比较两种方法的生物多糖得率。再分别以液固比、提取温度和提取时间为条件,采用超声辅助法提取亚洲日月蛤多糖,通过单因素正交实验确定多糖得率的最优提取条件。结果:相同条件下,热水浸提法提取出的亚洲日月蛤多糖得率为1.05%,而超声辅助热水浸提法的多糖得率为1.71%。超声辅助热水法提取亚洲日月蛤多糖的最优条件是:在超声功率160 W条件下,液固比40∶1(mL/g)、温度为90℃、时间4 h,在此条件下亚洲日月蛤多糖得率为2.01%,其中液固比(P<0.01)和提取温度( P<0.05)对多糖提取率影响较大。结论:超声辅助法提取亚洲日月蛤多糖得率明显优于热水浸提法。 展开更多
关键词 超声 亚洲日月蛤 多糖 优化
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溶酶体膜蛋白Sidt2对血糖代谢的影响 预览
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作者 王李卓 章尧 +10 位作者 余翠 熊钱颖 谭凤彪 蒋雪 陆晓华 夏礼斌 陆美琴 陈月平 张斌华 凌烈峰 高家林 《皖南医学院学报》 CAS 2015年第6期518-521,共4页
目的:通过模式动物研究溶酶体膜蛋白Sidt2与糖代谢的关系。方法:利用Lox P-Flox-Lox P系统,通过基因重组及打靶技术获得Sidt2剔除小鼠模型。检测成年小鼠的空腹血糖及葡萄糖耐量,评估Sidt2基因剔除对小鼠糖代谢的影响。同时通过HE染... 目的:通过模式动物研究溶酶体膜蛋白Sidt2与糖代谢的关系。方法:利用Lox P-Flox-Lox P系统,通过基因重组及打靶技术获得Sidt2剔除小鼠模型。检测成年小鼠的空腹血糖及葡萄糖耐量,评估Sidt2基因剔除对小鼠糖代谢的影响。同时通过HE染色观察Sidt2-/-小鼠胰岛形态结构改变。结果:通过对Sidt2剔除模型小鼠的Sidt2 mRNA及蛋白水平鉴定,确定Sidt2基因剔除小鼠模型成功构建。对小鼠末梢血糖检测发现,Sidt2-/-成年小鼠表现出空腹血糖增高及糖耐量受损的糖尿病表现。对Sidt2-/-小鼠胰岛形态检测发现,其胰岛出现结构紊乱,胰岛空泡变性及部分细胞出现肥大等病理改变。结论:溶酶体膜蛋白Sidt2与糖代谢密切相关。 展开更多
关键词 溶酶体膜蛋白 Sidt2 糖代谢 糖尿病
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ABCB1基因C1236T多态性与血脂异常相关性研究
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作者 谢向荣 程浪 +2 位作者 郑雅俊 汪茗 曹蘅 《中华全科医学》 2015年第11期1751-1753,1801共4页
目的 研究ATP结合盒转运蛋白B1(ABCB1)基因C1236T多态性在皖南地区汉族自然人群中的频率分布及与血脂异常者各项血脂指标的相关性。方法 根据血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(... 目的 研究ATP结合盒转运蛋白B1(ABCB1)基因C1236T多态性在皖南地区汉族自然人群中的频率分布及与血脂异常者各项血脂指标的相关性。方法 根据血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)4项指标入选197例血脂异常患者和26例血脂正常受试者,采用PCRRFLP方法检测所有入选对象ABCB1基因C1236T位点的基因多态性,进行基因分型,比较血脂异常和血脂正常者的各基因型频率分布。对于具有血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白AI(apo AI)、载脂蛋白B(apo B)、脂蛋白(a)[LP(a)]完整7项血脂指标的177例血脂异常患者,比较各基因型之间各项血脂指标的差异。结果 ABCB1基因C1236T位点在皖南地区汉族人群有CC、CT、TT三种基因型,血脂异常人群3种基因型例数分别为21、78、98,血脂正常人群3种基因型例数分别为8、8、10。ABCB1基因C1236T位点基因型在血脂异常和血脂正常人群中分布不同(χ2=8.206,P=0.017)。具有完整7项血脂指标的血脂异常患者各基因型间各项血脂指标差异无统计学意义(P〉0.05)。结论 ABCB1基因C1236T多态性在皖南地区汉族血脂异常和血脂正常人群中频率分布不同,但与血脂异常患者各项血脂指标无相关性。 展开更多
关键词 ABCB1基因 单核苷酸多态性 血脂异常
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