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正选择基因无启动子的供体质粒pN(CDS)(N2)-R的构建及应用
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作者 王英泽 曹晴晴 +4 位作者 马文惠 王凤利 薛巍 王晨晨 杜朝 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期465-472,共8页
为提高对发生基因编辑细胞的筛选效率,本研究构建了具备正负筛选功能的供体质粒pN(CDS)(N2)-R,其正选择基因是无启动子NeoR,负选择基因是能自主表达的RED。利用该质粒和CRISPR-Cas9系统对小鼠B16细胞FasL进行编辑。G418筛选2周,获得混... 为提高对发生基因编辑细胞的筛选效率,本研究构建了具备正负筛选功能的供体质粒pN(CDS)(N2)-R,其正选择基因是无启动子NeoR,负选择基因是能自主表达的RED。利用该质粒和CRISPR-Cas9系统对小鼠B16细胞FasL进行编辑。G418筛选2周,获得混合克隆。镜下观察显示,混合克隆质量较高。junction PCR结果表明,有基因编辑发生。DNA测序结果表明,NeoR准确插入靶位点。细胞杀伤实验表明,FasL功能被有效敲除。该供体质粒的多克隆位点,充分利用同尾酶酶切位点,因而具有广泛的适用性。综上所述,在对各种位点进行编辑时,使用该供体质粒有助于混和克隆的筛选。 展开更多
关键词 供体质粒 基因编辑 同源重组 FASL
Brr2解旋U4/U6 SnRNAs的调控机制
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作者 仇燕 付育 李俊英 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期378-385,共8页
前体mRNA(precursor messager RNA,pre-mRNA)剪接是去除内含子和将外显子彼此连接形成成熟mRNA的过程。剪接过程在一个呈动态变化的大核糖核蛋白(ribonucleoprotein, RNP)复合体,即剪接体催化作用下完成。DExD/H-box RNA解旋酶在剪接体... 前体mRNA(precursor messager RNA,pre-mRNA)剪接是去除内含子和将外显子彼此连接形成成熟mRNA的过程。剪接过程在一个呈动态变化的大核糖核蛋白(ribonucleoprotein, RNP)复合体,即剪接体催化作用下完成。DExD/H-box RNA解旋酶在剪接体组装、激活及解聚过程中都发挥着重要作用。Brr2(bad response to refrigeration 2)这种DExD/H-box RNA解旋酶是构成U5稳定的亚单位。Brr2含有两个串联解旋酶盒结构,在剪接体激活中负责U4/U6的解旋,还参与剪接体催化及解聚过程,因此Brr2在剪接过程中必需具备严格的调控机制。在剪接过程中,Prp8的C端包含两个连续的RNase H域和Jab1/MPN域,能够正负调控Brr2活性。Snu114在调节Brr2活性中具有非常重要的作用。此外,Brr2通过C端解旋酶盒(C-terminal cassette, CC)与N末端域(N-terminal region)进行分子内的自我活性调节。本文综述了近年来在Brr2的分子间和分子内活性调节机制的研究进展,这些不同的调节机制协同作用才确保真核生物pre-mRNA可变剪接的保真性。 展开更多
关键词 前体MRNA 剪接体 RNA解旋酶 活性调节
奥沙利铂联合卡培他滨或氟脲嘧啶/叶酸方案治疗晚期胃癌的临床疗效比较 预览 被引量:2
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作者 刘风玲 郑毅琳 《实用临床医药杂志》 CAS 2010年第12期 50-51,共2页
胃癌是消化道恶性肿瘤,发病时多为中晚期,病死率列于癌症第2位。随着奥沙利铂的问世,该药与氟脲嘧啶或口服希罗达联合治疗晚期胃癌中获得一定疗效。本院自2008年5月-2010年4月,应用奥沙利铂联合卡培他滨(XELOX)或奥沙利铂联合氟... 胃癌是消化道恶性肿瘤,发病时多为中晚期,病死率列于癌症第2位。随着奥沙利铂的问世,该药与氟脲嘧啶或口服希罗达联合治疗晚期胃癌中获得一定疗效。本院自2008年5月-2010年4月,应用奥沙利铂联合卡培他滨(XELOX)或奥沙利铂联合氟脲嘧啶卅酸(mFOLF0X-6)治疗晚期胃癌60例,现报告如下。 展开更多
关键词 胃癌 进展期 奥沙利铂 卡培他滨 氟脲嘧啶 叶酸
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阿尔茨海默病患者血液及脑脊液中血糖和真胰岛素的测定比较 预览
4
作者 刘卫刚 郑毅琳 +4 位作者 李玲 刘蓉辉 田瑞振 董艳红 吕佩源 《河北医药》 CAS 2010年第12期 1519-1520,共2页
目的 检测阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)患者血液及脑脊液中血糖、真胰岛素水平,探讨AD患者体内胰岛素代谢异常.方法 随机选取70例正常人为对照Ⅰ组,55例AD患者,检验其空腹血糖、真胰岛素水平; 35例为对照Ⅱ组,48例AD患者,... 目的 检测阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)患者血液及脑脊液中血糖、真胰岛素水平,探讨AD患者体内胰岛素代谢异常.方法 随机选取70例正常人为对照Ⅰ组,55例AD患者,检验其空腹血糖、真胰岛素水平; 35例为对照Ⅱ组,48例AD患者,检验其脑脊液中葡萄糖,真胰岛素水平;将AD按轻、中重度分组后与对照组进行比较.结果 AD患者各组空腹血糖及脑脊液中葡萄糖与对照组比较,差异无统计学意义(P〉 0.05);轻度AD组血液及脑脊液真胰岛素与对照组比较,差异无统计学意义(P〉 0.05);中重度AD组血液中真胰岛素较对照组升高,差异有统计学意义(P〈 0.05),脑脊液中真胰岛素较对照组降低,差异有统计学意义(P〈 0.05).结论 AD患者体内及脑内胰岛素代谢异常,与疾病的严重程度相关. 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 真胰岛素 血糖
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吉非替尼二线治疗晚期非小细胞肺癌临床研究 预览
5
作者 刘风玲 郑毅琳 +1 位作者 赵瑞贞 周连亚 《湖南中医药大学学报》 CAS 2009年第9期 3-5,共3页
目的观察吉非替尼在一线治疗失败的晚期非小细胞肺癌的疗效和不良反应。方法每日口服吉非替尼250mg治疗化疗失败的80例晚期非小细胞肺癌。一个月以后进行疗效评价。无进展者继续服用,之后每个月进行CT检查评价疗效观察受益,病情进展... 目的观察吉非替尼在一线治疗失败的晚期非小细胞肺癌的疗效和不良反应。方法每日口服吉非替尼250mg治疗化疗失败的80例晚期非小细胞肺癌。一个月以后进行疗效评价。无进展者继续服用,之后每个月进行CT检查评价疗效观察受益,病情进展或不能耐受相关毒性者停止使用吉非替尼。结果80例均可评价疗效,CR11例(13.75%),PR26例(32.50%),SD23例(28.75%),PD21例(26.50%)。有效率(CR+PR)46.25%,病症控制率(CR+PR+SD)75.00%,无进展生存期4.2个月,中位生存期9.4个月。1a生存率为51.25%,2a生存率25%,3a生存率12.5%。主要不良反应包括皮疹64例,腹泻30例。没有患者因毒性不能耐受而停药。结论吉非替尼对化疗失败的晚期非小细胞肺癌具有一定疗效,不良反应轻微。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 吉非替尼 化疗耐药
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半分子转运蛋白ABCG2的肿瘤多药耐药性研究及其应用 预览 被引量:5
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作者 王英泽 段相林 +1 位作者 李永福 梁兴杰 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第12期 1523-1529,共7页
肿瘤常对临床上传统使用的多种化学治疗显示其内源性或获得性的药物耐受性即多药耐药性(multidrug resistance,MDR).这种多药耐药性主要是由一类称为ABC(ATP-binding cassette)转运体蛋白超家族的跨膜蛋白引起的,它们结合并利用水解... 肿瘤常对临床上传统使用的多种化学治疗显示其内源性或获得性的药物耐受性即多药耐药性(multidrug resistance,MDR).这种多药耐药性主要是由一类称为ABC(ATP-binding cassette)转运体蛋白超家族的跨膜蛋白引起的,它们结合并利用水解ATP提供的能量来转运药物,导致肿瘤细胞呈现抗药性.半分子转运蛋白ABCG2是近年来才发现的可归于ABC转运体大家族中的一个新成员,在肠、肝、胎盘和血脑屏障等部位大量表达,与全分子转运蛋白如P-gp(P-glycoprotein)和多药耐药蛋白(multi-drug resistance protein,MRP)相似,可以主动地把具有不同化学结构和作用于细胞内不同靶位点的化疗药物泵出胞外,从而引起肿瘤对多种抗癌药物(包括最新开发的药物)产生抗性.最近的一些十分有趣的研究还表明,ABCG2可能与干细胞分化状态和保护干细胞发育过程中免受周围环境的影响有关,而且还发现,它在侧群骨髓和神经干细胞内大量存在,因此,ABCG2可能在基因治疗中作为选择性的蛋白质标记正受到研究者们的极大关注.同时,ABCG2的单核苷酸多态性影响其结合并转运不同的底物/药物.鉴于ABCG2在肿瘤抗药性研究中的重要性以及它的一些新功能的初步研究表明,对ABCG2的生物学功能和作用机理以及在医学实践中的应用研究必将受到更大的关注.主要阐述了半分子ABC转运蛋白ABCG2的发现、重要的生化特性和生理功能及其相关的新研究进展和问题. 展开更多
关键词 ABCG2 ABC转运蛋白 多药耐药性 癌症化疗
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重组人白细胞介素-11预防和治疗化疗后血小板减少的临床观察 预览 被引量:1
7
作者 刘风玲 郑毅琳 《肿瘤防治杂志》 2005年第19期 1518-1519,共2页
化疗是目前治疗晚期恶性肿瘤的主要手段.化疗在抑制肿瘤细胞生长,控制肿瘤进展的同时,也使患者在化疗过程中常出现骨髓抑制,如以血小板降低为主者,一旦发生脑出血则抢救成功率极低.动物实验证实重组人白介素-11(巨和粒,rhIL-11)可明显... 化疗是目前治疗晚期恶性肿瘤的主要手段.化疗在抑制肿瘤细胞生长,控制肿瘤进展的同时,也使患者在化疗过程中常出现骨髓抑制,如以血小板降低为主者,一旦发生脑出血则抢救成功率极低.动物实验证实重组人白介素-11(巨和粒,rhIL-11)可明显促进骨髓内造血细胞增殖,诱导巨核细胞的成熟和分化,促进巨核细胞和血小板的生成,增加外周血血小板的数目[1].我们对48例非小细胞肺癌(non-smallceil lung cancer,NSCLC)患者进行健择加卡铂方案治疗,观察了巨和粒治疗和预防血小板减少的临床疗效,总结报道如下. 展开更多
关键词 肿瘤/药物疗法 血小板减少预防和控制 白细胞介素11/治疗应用
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吉西他滨加卡铂治疗晚期非小细胞肺癌疗效观察 预览
8
作者 刘风玲 许虹 +1 位作者 郑毅琳 张乐民 《临床荟萃》 CAS 北大核心 2005年第8期 456,共1页
肺癌的发病率呈逐年上升的趋势,晚期肺癌的治疗以化疗为主,但非小细胞肺癌(NSCLC),尤其是肺腺癌,因其癌细胞的生物学特性,决定其对化疗不敏感,目前多采用以化疗为主的综合治疗.吉西他滨是一种新型脱氧胞苷类似物,属抗代谢类抗癌药物,199... 肺癌的发病率呈逐年上升的趋势,晚期肺癌的治疗以化疗为主,但非小细胞肺癌(NSCLC),尤其是肺腺癌,因其癌细胞的生物学特性,决定其对化疗不敏感,目前多采用以化疗为主的综合治疗.吉西他滨是一种新型脱氧胞苷类似物,属抗代谢类抗癌药物,1996年美国食品及药物管理局(FDA)批准用于治疗NSCLC.2002年10月至2004年10月,我们采用吉西他滨加卡铂治疗38例晚期NSCLC,现报道如下. 展开更多
关键词 非小细胞肺 吉西他滨 卡铂
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