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慢病毒介导牛 pre-miR-29b 表达的 Balb/c小鼠模型建立研究
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作者 田瑞鑫 王勇 +5 位作者 关团 史慧君 史梦婷 张辉 陈创夫 付强 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第15期23-27,177共6页
为了通过慢病毒感染的方法建立 pre-miR-29b 表达的 Balb /c 小鼠模型,从而研究 miR-29b在动物模型体内过表达对牛病毒性腹泻病毒( Bovine viral diarrhea virus,BVDV)感染和复制的影响,试验根据 miRBase 数据库中牛 miR-29b 前体 pre-m... 为了通过慢病毒感染的方法建立 pre-miR-29b 表达的 Balb /c 小鼠模型,从而研究 miR-29b在动物模型体内过表达对牛病毒性腹泻病毒( Bovine viral diarrhea virus,BVDV)感染和复制的影响,试验根据 miRBase 数据库中牛 miR-29b 前体 pre-miR-29b 序列设计引物,以 MDBK 细胞全基因组DNA 为模板,PCR扩增 pre-miR-29b 基因,并克隆至空质粒 pLL3.7 中;共同转染 pLL3. 7-pre-miR-29b 及慢病毒包装辅助质粒( pRSV-Rev、pCMV-VSVG 和 pMDLg/pRRE)至 HEK-293T 细胞中,于48,72 小时时收集病毒液,浓缩后接种至 HEK-293T 细胞中进行慢病毒效价测定。将6只 Balb/c小鼠平均分成2组,即空质粒 pLL3.7 感染组和慢病毒 pLL3.7-pre-miR-29b 感染组,每只小鼠尾静脉注射5.0×10^7 infection units(IU)/mL 病毒液,于注射后96小时时处死小鼠,采集肝脏、脾脏、肾脏等器官,提取总 miRNA,并反转录成 cDNA,使用TaqMan 荧光定量RT-PCR法检测 miR-29b 在小鼠不同器官中的表达情况。结果表明:试验成功扩增得到牛 pre-miR-29b 并构建出 pLL3.7-pre-miR-29b;成功包装 pLL3.7-pre-miR-29b慢病毒,其效价为 5.8×10^8 IU /mL;经尾静脉注射慢病毒后,在慢病毒pLL3.7-pre-miR-29b 感染的小鼠不同器官中均有较高水平的 miR-29b 表达。说明试验成功建立了慢病毒介导牛 pre-miR-29b表达的 Balb/c小鼠模型。 展开更多
关键词 慢病毒 miR-29b 前体 BALB/C 小鼠 尾静脉注射 TAQMAN 荧光定量 RT-PCR 牛病毒性腹泻病毒
抗牛结核分枝杆菌VHH抗体T7噬菌体库的构建与筛选
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作者 杨艳丽 张齐 +6 位作者 张星星 许龙 黄新 吴桐忠 韩猛立 钟发刚 张小莺 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1987-1993,共7页
为获得抗牛结核分枝杆菌的VHH纳米抗体,本研究利用牛结核分枝杆菌Ag85B蛋白免疫双峰驼,免疫效价达到1∶8 000后采外周血分离淋巴细胞,提取RNA反转录成cDNA,利用巢式PCR方法扩增出编码单域抗体VHH的400 bp基因片段。将目的片段用限制性... 为获得抗牛结核分枝杆菌的VHH纳米抗体,本研究利用牛结核分枝杆菌Ag85B蛋白免疫双峰驼,免疫效价达到1∶8 000后采外周血分离淋巴细胞,提取RNA反转录成cDNA,利用巢式PCR方法扩增出编码单域抗体VHH的400 bp基因片段。将目的片段用限制性内切酶EcoRⅠ和HindⅢ双酶切,与T7噬菌体载体臂T7Select 10-3RI Arms连接,再通过体外重新包装含目的片段的噬菌体。对建立的VHH噬菌体抗体库进行鉴定,原始文库库容为5.7×10~8 PFU,库阳性率为85.7%。通过4轮生物亲和淘选,筛选并表达出2株高特异性的VHH抗体,均对牛结核分枝杆菌Ag85B蛋白具有特异性。本研究为进一步探讨VHH抗体在牛结核病的诊断和治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 牛结核分枝杆菌 Ag85B蛋白 VHH抗体 T7噬菌体展示
小反刍兽疫病毒N蛋白原核表达条件的优化及反应活性
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作者 苗书魁 汪萍 +9 位作者 魏玉荣 陆桂丽 米晓云 夏俊 沙依兰·卡依扎 魏婕 王延 李金娜 马文戈 黄炯 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2019年第1期30-34,共5页
目的探讨小反刍兽疫病毒(Peste des Petits Ruminants Virus,PPRV)N蛋白原核表达、条件优化及反应活性。方法参照GenBank中PPRV (Nigeria/75/1)N基因序列,人工合成该基因,构建重组表达质粒pET-30a (+)-N,转化至BL21 (DE3)感受态细胞,IPT... 目的探讨小反刍兽疫病毒(Peste des Petits Ruminants Virus,PPRV)N蛋白原核表达、条件优化及反应活性。方法参照GenBank中PPRV (Nigeria/75/1)N基因序列,人工合成该基因,构建重组表达质粒pET-30a (+)-N,转化至BL21 (DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE电泳、Western-blot分析。在不同温度、时间、IPTG浓度条件下诱导表达N蛋白,确定最佳表达条件。结果 PPRV N蛋白(64.4kD)成功表达,能被羊PPRV免疫血清所识别。N蛋白主要以包涵体存在,其最佳诱导条件:诱导温度28℃、IPTG终浓度2.0mmol/L、诱导时间16h。结论原核表达的PPRV N蛋白具有良好的特异性和反应活性,为单克隆抗体的制备及快速诊断方法的建立提供了技术资料。 展开更多
关键词 小反刍兽疫病毒 N蛋白 原核表达 反应活性
病例教学法在兽医临床诊断学教学中的探索与实践 预览
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作者 张淼涛 李勤凡 +3 位作者 蒿彩菊 王妍 李蓉 董强 《畜牧兽医杂志》 2019年第3期64-66,共3页
兽医临床诊断学是动物医学专业重要的专业基础课,具有很强的实践性。通过病例教学法的实施,有效的激发了学生学习兴趣,培养了学生临床思维的能力,提高了教学效果。本文结合兽医临床诊断学的特点,总结近年来的教学成果,介绍了病例教学法... 兽医临床诊断学是动物医学专业重要的专业基础课,具有很强的实践性。通过病例教学法的实施,有效的激发了学生学习兴趣,培养了学生临床思维的能力,提高了教学效果。本文结合兽医临床诊断学的特点,总结近年来的教学成果,介绍了病例教学法在课程教学中的意义、实施方法及注意事项等,以期进一步提高兽医临床诊断学的教学效果。 展开更多
关键词 兽医临床诊断学 病例教学法 教学模式
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静脉滴注犬高免血清治疗犬细小病毒病的体会 预览
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作者 杨力伟 买买提·黑亚斯丁 韩垣奎 《上海畜牧兽医通讯》 2019年第1期78-79,共2页
犬细小病毒病是犬的一种常见传染病,兽医工作者经常在临床中遇到此类病例。在临床治疗过程中,经常使用犬细小病毒高免血清进行治疗,但在给药途径上一般使用皮下或肌肉注射。笔者在多年临床经验的基础上,对10例犬细小病毒病病例采用静脉... 犬细小病毒病是犬的一种常见传染病,兽医工作者经常在临床中遇到此类病例。在临床治疗过程中,经常使用犬细小病毒高免血清进行治疗,但在给药途径上一般使用皮下或肌肉注射。笔者在多年临床经验的基础上,对10例犬细小病毒病病例采用静脉滴注犬高免血清进行治疗,并分析其治疗效果。 展开更多
关键词 细小病毒 诊断 治疗 静脉滴注
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影响伊犁昭苏地区肠胃蝇产卵因素的研究 预览
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作者 阎晓菲 马玉辉 +5 位作者 任晓艺 童婷 李新龙 李海 巴音查汗 刘善辉 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第2期55-60,共6页
为了解影响伊犁昭苏地区肠胃蝇(Gastrophilus intestinalis,G.intestinalis)产卵因素,采集3个马场的伊犁马体表附着的虫卵,进行形态学鉴定,并采用SPSS19.0统计软件分析产卵量与马匹体表部位、被毛颜色、年龄、海拔之间的关系。结果显示... 为了解影响伊犁昭苏地区肠胃蝇(Gastrophilus intestinalis,G.intestinalis)产卵因素,采集3个马场的伊犁马体表附着的虫卵,进行形态学鉴定,并采用SPSS19.0统计软件分析产卵量与马匹体表部位、被毛颜色、年龄、海拔之间的关系。结果显示,虫卵前端具有斜的卵盖,末端黏附于马毛上,平均大小为131.8μm×38.5μm,形状指数3.42,鉴定为肠胃蝇虫卵;以鬃毛、肩胛部、前腿部位,黑骝和红骝颜色的被毛,中年期的马匹,海拔最高的马场中的肠胃蝇产卵量最多。本研究结果表明马匹体表部位、被毛颜色、年龄、海拔对肠胃蝇的产卵有一定的影响,该结果为今后探讨马胃蝇产卵与其流行病学之间的关系提供了前提和基础。 展开更多
关键词 肠胃蝇 产卵量 影响因素
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狐狸源肺炎克雷伯菌的分离鉴定及毒力检测
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作者 韩坤 孟祥玉 +6 位作者 白雪 闫喜军 冯二凯 佟盼盼 吕娇 于莹 陈立志 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期722-727,共6页
从濒死期蓝狐肺脏中分离到1株革兰阴性短杆菌,并对分离菌株进行形态学观察、16S rRNA鉴定、全自动细菌生化鉴定仪鉴定及khe基因鉴定,在此基础上,完成了分离菌株的分型、人工感染小鼠试验、药敏试验及毒力基因检测等。最终鉴定结果显示,... 从濒死期蓝狐肺脏中分离到1株革兰阴性短杆菌,并对分离菌株进行形态学观察、16S rRNA鉴定、全自动细菌生化鉴定仪鉴定及khe基因鉴定,在此基础上,完成了分离菌株的分型、人工感染小鼠试验、药敏试验及毒力基因检测等。最终鉴定结果显示,该分离菌株为K20型肺炎克雷伯菌,命名为SWKp17;同时,Vitek细菌鉴定仪鉴定该菌为肺炎克雷伯菌。人工感染试验和药敏试验结果表明,该细菌有致病性和多重耐药性。其对小鼠的半数致死量(LD_(50))为2.9×10~7 CFU;对三代头孢菌素类、氯霉素类、喹诺酮类、氨基糖苷类、四环素类、磺胺类耐药,但对亚胺培南和多黏菌素敏感。该菌株具有fim、ureA、mrkD及wabG毒力基因,但不具有rmpA、kfu、alls、iroNB、ybtA、uge、iucB等毒力基因。结果表明,引起本次狐狸肺炎的致病菌为非K1、K2、K3、K5、K20、K54及K57型肺炎克雷伯菌,本研究为临床治疗由该菌引起的狐狸肺炎提供参考依据。 展开更多
关键词 狐狸 肺炎克雷伯菌 分离 鉴定 毒力基因
伯氏疏螺旋体TaqMan-MGB探针荧光定量PCR方法的建立及对新疆地区蜱的检测 预览
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作者 王娅 叶锋 +6 位作者 刘丽娅 谢彩云 谷文喜 钟旗 易新萍 古丽扎提·塔力甫汗 马晓菁 《中国动物检疫》 CAS 2019年第11期89-94,99共7页
为建立一种TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR方法,来快速、特异地检测伯氏疏螺旋体,根据GenBank发表的伯氏疏螺旋体16SrRNA序列,应用分子生物学软件进行比对,选取保守序列设计特异性引物及TaqMan-MGB探针,并优化荧光定量PCR反应体系及条件... 为建立一种TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR方法,来快速、特异地检测伯氏疏螺旋体,根据GenBank发表的伯氏疏螺旋体16SrRNA序列,应用分子生物学软件进行比对,选取保守序列设计特异性引物及TaqMan-MGB探针,并优化荧光定量PCR反应体系及条件,分别对大肠杆菌、沙门氏菌及钩端螺旋体进行扩增;构建伯氏疏螺旋体标准株16SrRNA基因片段阳性质粒,10倍系列稀释后进行real-timePCR扩增,测定该方法的敏感性。结果可见:仅伯氏疏螺旋体出现阳性扩增,而大肠杆菌、沙门氏菌及钩端螺旋体扩增均为阴性;该方法对阳性质粒的检测限约为100copies/μL。应用该方法对新疆地区的100份蜱DNA样本进行检测,发现7份为伯氏疏螺旋体阳性。结果表明,本研究建立的TaqMan-MGB探针荧光定量PCR方法具有较高的特异性及良好的敏感性,为今后伯氏疏螺旋体的快速诊断及流行病学调查提供了技术支撑。 展开更多
关键词 伯氏疏螺旋体 TAQMAN-MGB探针 荧光定量PCR 检测 新疆
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布鲁氏菌活疫苗(M5)免疫试验——多浪羊抗体消长规律研究 预览
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作者 靳红娟 叶锋 +8 位作者 刘丽娅 陈雅璐 张悦 陈泽辉 李欣宇 谷文喜 钟旗 姚刚 王延 《中国动物检疫》 CAS 2019年第3期84-86,共3页
为探究多浪羊布鲁氏菌活疫苗(M5)的免疫抗体消长规律,在新疆南疆地区某行政村,选择100只多浪羊进行皮下注射布鲁氏菌活疫苗(M5)免疫试验。免疫前,对所有试验羊只全部采血,分别于免疫后30、90、180d,随机采集30只羊全血,分离血清,用虎红... 为探究多浪羊布鲁氏菌活疫苗(M5)的免疫抗体消长规律,在新疆南疆地区某行政村,选择100只多浪羊进行皮下注射布鲁氏菌活疫苗(M5)免疫试验。免疫前,对所有试验羊只全部采血,分别于免疫后30、90、180d,随机采集30只羊全血,分离血清,用虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)进行布鲁氏菌抗体检测。结果显示:免疫前,所有试验羊只均未检测到抗体,免疫30d后,73.33%的羊检测到抗体,90d后只有13.30%的羊还能检测到抗体,180d后未检测到抗体。结果表明,布鲁氏菌活疫苗(M5)能够使多浪羊产生良好的免疫反应,免疫抗体持续期约为180d。这说明对免疫180d后的多浪羊进行布鲁氏菌抗体检测,可为区分自然感染和免疫提供参考。 展开更多
关键词 布鲁氏菌病 布鲁氏菌活疫苗(M5) 抗体消长规律 多浪羊
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动物狂犬病的研究进展 预览
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作者 洪都孜·波拉提 吴建勇 +2 位作者 古努尔·吐尔逊 穆妮热·喀迪尔 钟旗 《兽医导刊》 2019年第16期190-191,222共3页
狂犬病(Rabies)是由狂犬病毒(Rabies virus,RV)引起的以狂犬病是由狂犬病病毒引起的几乎所有温血动物都易感的神经系统病变为特征的高度致死性人畜共患病,也是我国目前患病率与死亡率高的烈性传染病之一。近年来,狂犬病报告死亡数一直... 狂犬病(Rabies)是由狂犬病毒(Rabies virus,RV)引起的以狂犬病是由狂犬病病毒引起的几乎所有温血动物都易感的神经系统病变为特征的高度致死性人畜共患病,也是我国目前患病率与死亡率高的烈性传染病之一。近年来,狂犬病报告死亡数一直位居我国法定报告传染病前列,给人民群众生命健康带来严重威胁。因此做好预防措施是目前最行之有效的方法。本文将对当前RABV病原学,流行病学,诊断检测技术及疫苗研制等方面的研究进展做一综述,为该病的有效防控提供参考资料。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 病原学 流行病学 诊断与检测 疫苗
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猪硒蛋白W的原核表达及IgY多克隆抗体制备 预览
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作者 周继萍 曹瑞敏 +2 位作者 米克热木·沙依布扎提 蒋志惠 张小莺 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第6期1801-1807,共7页
试验旨在优化硒蛋白W(selenoprotein W,SelW)的原核表达系统,并评估SelW的免疫原性和基于IgY抗体检测猪体内SelW的可行性。将获得的猪SelW基因序列密码子进行优化、合成并连接至pET-32a(+)表达载体中,构建原核表达重组质粒pET32a(+)-Se... 试验旨在优化硒蛋白W(selenoprotein W,SelW)的原核表达系统,并评估SelW的免疫原性和基于IgY抗体检测猪体内SelW的可行性。将获得的猪SelW基因序列密码子进行优化、合成并连接至pET-32a(+)表达载体中,构建原核表达重组质粒pET32a(+)-SelW,转化E.coli BL21(DE3)宿主菌中,进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定重组猪SelW的表达情况,并免疫产蛋鸡制备抗SelW的IgY多克隆抗体,通过间接ELISA检测IgY抗体滴度,采用Western blotting检测IgY识别抗原的特异性。SDS-PAGE结果显示,SelW基因在原核细胞中成功表达,得到了大小约为33 ku的重组蛋白,IPTG最佳诱导浓度及时间分别为0.5 mmol/L和6 h;可溶性分析结果显示,重组蛋白SelW主要以包涵体形式存在。间接ELISA检测结果显示,免疫后45 d的IgY多克隆抗体的效价可达1∶51 200。Western blotting检测结果显示,重组蛋白具有良好的免疫原性,所制备的IgY抗体与SelW的亲和力较高。本试验成功构建并优化了SelW蛋白的原核表达系统,提高了SelW蛋白的表达量,获得了具有良好免疫原性的SelW蛋白,制备的IgY抗体能特异性识别猪肌肉组织中的SelW,可用于检测猪组织中SelW的表达、预防硒中毒和缺硒性疾病的监测等,为进一步探究SelW的生物学功能奠定基础。 展开更多
关键词 硒蛋白W(SelW) 原核表达 IgY多克隆抗体
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6株奶牛乳房炎肺炎克雷伯菌的分离、鉴定及生物学特性
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作者 王乐 王晶 +3 位作者 王丽娟 范玉堂 王妍 李勤凡 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1202-1207,共6页
为研究陕西关中地区奶牛乳房炎肺炎克雷伯菌的流行情况,从某规模化奶牛场无菌采集乳样53份,进行细菌分离鉴定。通过细菌形态学观察、生化试验以及16S rRNA序列分析,共分离出6株肺炎克雷伯菌,并对其进行药物敏感性、生物被膜形成、random... 为研究陕西关中地区奶牛乳房炎肺炎克雷伯菌的流行情况,从某规模化奶牛场无菌采集乳样53份,进行细菌分离鉴定。通过细菌形态学观察、生化试验以及16S rRNA序列分析,共分离出6株肺炎克雷伯菌,并对其进行药物敏感性、生物被膜形成、random amplified polymorphic DNA(RAPD)分型以及小鼠致病性的试验。生化特性结果表明6株肺炎克雷伯菌对各种糖的分解能力无明显差异。药敏试验结果表明,6株菌均对恩诺沙星、阿米卡星、环丙沙星、链霉素、庆大霉素、四环素、美罗培南、头孢曲松和头孢他啶敏感,对青霉素和氨苄西林耐药。生物被膜表型检测结果表明,6株菌均可产生生物被膜,其中菌株KP4为中等黏附,其他5株为弱黏附,生物被膜成分中均含有胞外多糖,不含卷曲菌毛和纤维素。RAPD分型结果表明,分离的6株菌株共分3个基因型,其中C型占50.00%(3/6),B型占33.33%(2/6),A型占16.67%(1/6)。小鼠致病性结果表明,分离株对小鼠均具有较强的致病性,被感染小鼠的肝脏、脾脏和肺脏均有不同程度的出血。本试验为防控陕西省内肺炎克雷伯菌引起的奶牛乳房炎提供依据。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 肺炎克雷伯菌 致病性 生物被膜 RAPD
敲除RIG-I基因流感病毒高产MDCK细胞系的建立及功能研究
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作者 曾为俊 许曼 +5 位作者 王辉 鲁国涛 邵玉乐 陈洪岩 刘建华 孟庆文 《中国家禽》 北大核心 2019年第11期12-17,共6页
利用CRISPR/Cas9技术构建RIG-I基因敲除MDCK细胞株,并验证其生物学功能。试验设计并构建了2个靶向RIG-I基因的导向RNA(sgRNA)表达载体,与pCAG-Cas9-EGFP表达载体共转染MDCK细胞,采用PAGE胶基因型检测、定点测序和Western blot筛选细胞株... 利用CRISPR/Cas9技术构建RIG-I基因敲除MDCK细胞株,并验证其生物学功能。试验设计并构建了2个靶向RIG-I基因的导向RNA(sgRNA)表达载体,与pCAG-Cas9-EGFP表达载体共转染MDCK细胞,采用PAGE胶基因型检测、定点测序和Western blot筛选细胞株;通过荧光定量PCR检测H9N2亚型禽流感病毒(AIV)感染后MAVS、IRF3、IFN-β、IL-6、Mx1 mRNA表达水平和病毒基因拷贝数,测定TCID50。结果表明:获得两株稳定敲除RIG-I基因的MDCK细胞(MDCK-RIG-I-/-),Western blot检测RIG-I蛋白不表达;荧光定量PCR结果显示病毒感染后MDCK-RIG-I-/-的MAVS、IRF3、IFN-β、IL-6、Mx1 mRNA表达水平显著降低,表明RIG-I基因敲除后RIG-I-Ⅰ型干扰素信号通路受阻;病毒基因拷贝数、TCID50测定结果显示,差异最高可分别达到野生型MDCK的2.16倍、3.19倍,表明RIG-I基因敲除后流感病毒复制增加。该研究利用CRISPR/Cas9技术建立了敲除RIG-I基因流感病毒MDCK细胞株,为研究RIG-I天然免疫应答机制奠定基础;该技术方法和策略也为流感疫苗生产及产业更新换代提供候选细胞株。 展开更多
关键词 RIG-I CRISPR/Cas9 MDCK细胞系 基因敲除 H9N2亚型流感病毒
利用CRISPR/Cas9技术敲除TLR3基因及其影响NDV复制的研究
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作者 邵玉乐 许曼 +6 位作者 王辉 曾为俊 鲁国涛 赵丽丽 陈洪岩 刘建华 孟庆文 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1128-1135,共8页
TLR3是Toll样受体家族成员之一,在天然免疫与适应性免疫应答中均发挥重要作用。为探究TLR3在NDV感染中的作用机制,本研究针对犬TLR3基因设计了2个sgRNA,构建重组质粒,转染MDCK细胞,经PCR、测序、Western-blot检测敲除情况,CCK-8方法检... TLR3是Toll样受体家族成员之一,在天然免疫与适应性免疫应答中均发挥重要作用。为探究TLR3在NDV感染中的作用机制,本研究针对犬TLR3基因设计了2个sgRNA,构建重组质粒,转染MDCK细胞,经PCR、测序、Western-blot检测敲除情况,CCK-8方法检测细胞增殖速度;新城疫病毒La Sota毒株感染细胞,荧光定量PCR分析病毒增殖水平和TLR3、TLR7、MDA5、IFN-β和IFIT1的m RNA水平。结果,筛选出1株TLR3基因缺失7 bp的MDCK细胞。Western-blot结果显示,TLR3蛋白不表达,其增殖速度与野生型MDCK细胞无显著差异。新城疫病毒La Sota毒株感染MDCK-WT细胞后,TLR3的m RNA含量在四个时间点均显著上调(P<0.01),表明新城疫病毒La Sota毒株可激活TLR3。再以新城疫病毒La Sota毒株感染MDCK-TLR3-/-细胞,IFN-β和IFIT1的m RNA含量在感染后第12小时和第24小时显著降低(P<0.01),病毒拷贝数在感染后第6、12和24小时显著高于WT组(P<0.01),表明TLR3在NDV介导的IFN-β反应和IFIT1的表达中具有重要作用,能够抑制NDV的复制。TLR7和MDA5的m RNA含量在感染后第6小时和第12小时显著上调(P<0.01),IFN-β和IFIT1的m RNA含量在感染后第48小时表达显著上调(P<0.01),NDV的拷贝数在第48小时在两组间显著性差异消失,提示TLR3缺失后TLR7和MDA5对其具有代偿作用。上述研究结果对NDV介导的天然免疫应答及疾病防控等研究具有重要意义。 展开更多
关键词 TLR3 MDCK CRISPR/Cas9 新城疫病毒
马疱疹病毒1型ORF30基因原核表达载体的构建 预览
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作者 加尔肯 库来汗·巴依多拉 +3 位作者 冉多良 艾海提·亚森 布力布力汗 刘建华 《草食家畜》 2019年第4期25-29,共5页
马疱疹病毒1型(Equid herpesvirus 1,EHV-1)是引起孕马流产的主要病原体之一,也与死胎、新生幼驹死亡、青年马鼻肺炎以及一种名为马疱疹病毒性脑脊髓病(Equine herpesvirus myeloencephalopathy,EHM)的神经系统疾病有关。近些年来,EHM... 马疱疹病毒1型(Equid herpesvirus 1,EHV-1)是引起孕马流产的主要病原体之一,也与死胎、新生幼驹死亡、青年马鼻肺炎以及一种名为马疱疹病毒性脑脊髓病(Equine herpesvirus myeloencephalopathy,EHM)的神经系统疾病有关。近些年来,EHM出现的频率越来越高,对养马业和赛马业的危害很大。最新研究结果显示,神经致病性毒株与编码病毒DNA聚合酶催化亚基的ORF30基因单核苷酸点突变有着很高的相关性。为了获得马疱疹病毒1型DNA聚合酶,并制备DNA聚合酶的多克隆抗体,本研究以EHV-1-XJ2015毒株基因组DNA为模板,扩增ORF30基因编码区,并连接于pMD19-T载体上,用BamHI和HindIII双酶切后,将酶切产物插入表达pET-28a(+)中,转化入大肠杆菌DH5感受态细胞,构建ORF30基因的原核表达载体pET-28a(+)-ORF30。通过酶切、PCR扩增和测序等方法对阳性重组质粒进行了鉴定。结果表明,构建的重组质粒pET-28a(+)-ORF30经BamhⅠ和HindⅢ双酶切后,经1%琼脂糖凝胶电泳,电泳结果与预期相符,表明目的片段成功插入载体pET28a(+)中。通过采用特异性引物对重组质粒pET28a(+)-ORF30进行PCR鉴定,产物经1%琼脂糖凝胶电泳观察,得到一条大小约1074bp的清晰条带,与目的基因大小相符,表明重组质粒pET28a(+)-ORF30构建成功。本研究为进一步探讨马疱疹病毒1型ORF30基因遗传变异对DNA聚合酶功能的影响奠定了基础。 展开更多
关键词 EHV-1 ORF30基因 原核表达 载体
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15例宠物犬临床肿瘤的病理组织学诊断与分析
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作者 邵友培 翟少华 +4 位作者 何善聪 高婷 董超 侯婕 郭庆勇 《当代畜牧》 2019年第3期19-22,共4页
笔者对新疆农业大学动物中心医院2018年7月-10月收集的15例犬临床肿瘤样病例进行病理组织学诊断,并对各类型肿瘤进行分类,以探讨宠物犬临床肿瘤疾病的发病特点。在15例肿瘤病例中,单发性肿瘤14例,多发性病例1例;发生在皮肤的肿瘤9例,发... 笔者对新疆农业大学动物中心医院2018年7月-10月收集的15例犬临床肿瘤样病例进行病理组织学诊断,并对各类型肿瘤进行分类,以探讨宠物犬临床肿瘤疾病的发病特点。在15例肿瘤病例中,单发性肿瘤14例,多发性病例1例;发生在皮肤的肿瘤9例,发生在乳腺区的肿瘤4例,发生在子宫的肿瘤2例。在新疆农业大学动物中心医院接诊的肿瘤病例当中,以皮肤肿瘤占比最高(56%),其次为乳腺区肿瘤(25%),最后为子宫肿瘤(14%)。雌性发病犬为9只,占比60%;雄性犬发病为6只,占比40%。以上结果为新疆地区的小动物肿瘤流行病学提供了数据,对临床诊断有一定的指导意义。 展开更多
关键词 宠物犬 肿瘤 病理组织学 诊断
2018年新疆奶牛结核病监测结果分析 预览
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作者 李龙 肖开提·阿不都克力木 +3 位作者 阿曼古丽 李爽 范冰洁 热依汗古丽 《新疆畜牧业》 2019年第4期33-35,共3页
为了解2018年新疆牛结核病的感染和流行状况,分析流行特点和风险因素,根据《国家中长期动物疫病防治规划(2012-2020年)》和《新疆维吾尔自治区2018年国内动物疫病监测计划》制定实施方案,在自治区10个地州的种牛场、奶牛场、规模场、散... 为了解2018年新疆牛结核病的感染和流行状况,分析流行特点和风险因素,根据《国家中长期动物疫病防治规划(2012-2020年)》和《新疆维吾尔自治区2018年国内动物疫病监测计划》制定实施方案,在自治区10个地州的种牛场、奶牛场、规模场、散养户开展实地现场监测,对检测结果与往年的感染程度进行比较分析,提出疫病防控建议。 展开更多
关键词 牛结核病 监测 评估
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塔里木河流域上游水库鲤年龄与生长 预览
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作者 余春元 姚娜 +3 位作者 马良 宋勇 岳城 陈生熬 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期373-380,共8页
【目的】研究塔里木河流域上游水库鲤的年龄与生长。【方法】2015~2016年,采样观察对塔里木河流域上游水库鲤,运用传统生物学测量方法鉴定年龄,分析其生长特征。【结果】塔里木河流域上游水库的鲤,年龄均值为2.80±0.286+,年龄结构... 【目的】研究塔里木河流域上游水库鲤的年龄与生长。【方法】2015~2016年,采样观察对塔里木河流域上游水库鲤,运用传统生物学测量方法鉴定年龄,分析其生长特征。【结果】塔里木河流域上游水库的鲤,年龄均值为2.80±0.286+,年龄结构不符合正太分布,优势年龄个体1+;体长和体重相关方程为:W=0.0872L2.506(R^2=0.878);体长和肠长的关系式为:LI=3.0913L-50.588(R^2=0.7955);上游水库鲤的渐进体长L∞=69.57cm,生产系数k=0.12,W∞=3610.79g,t0=-0.65,ti=1.65+;种群总体(n=40)体长和体重生长方程为:Lt=69.58(1-e-0.12(t+0.65))和Wt=3610.79(1-e-0.12(t+0.65))2.506。种群总体成熟系数和丰满度:GSI=(12.38±1.69)和K=(72.71±1.62)。【结论】塔里木河流域上游水库鲤属于异速生长,适应性较强,生长性状不稳定,在种群动态和渔业生态平衡,起到了一定的作用。 展开更多
关键词 上游水库 年龄与生长
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奶牛焦虫病的诊断与治疗前后血细胞成分变化的分析 预览
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作者 哈力米拉·拜斯汗 李才善 +2 位作者 郭子涵 吾力江·卡马力 郭庆勇 《亚洲兽医病例研究》 2019年第3期23-30,共8页
为了研究奶牛焦虫病的诊断与治疗前后血细胞成分变化,以便为奶牛焦虫病的防治奠定一定的基础和依据。根据病史调查、临床症状、现场检查,筛选出患有焦虫病奶牛15头,选择临床健康奶牛10头作为对照组,然后采集患病奶牛治疗前、后血样和健... 为了研究奶牛焦虫病的诊断与治疗前后血细胞成分变化,以便为奶牛焦虫病的防治奠定一定的基础和依据。根据病史调查、临床症状、现场检查,筛选出患有焦虫病奶牛15头,选择临床健康奶牛10头作为对照组,然后采集患病奶牛治疗前、后血样和健康奶牛血样,对其血细胞成分进行测定,分析比较。50头患牛治疗后,一头死亡,两头治愈效果不显著,其余全部治愈,治愈率94%,进行采样的15头患牛全部治愈,治愈率100%。奶牛焦虫病治疗前后血细胞成分MID (%)、HCT (%)、MCV (fL)、MCH (pg)、MCHC (g/L)指标差异显著(0.01 0.05)。 展开更多
关键词 奶牛 焦虫病 治疗 综合分析
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牛源大肠杆菌质粒介导喹诺酮类耐药基因的检测分析 预览
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作者 杨艳丽 张星星 +4 位作者 黄新 吴桐忠 何延华 韩猛立 钟发刚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第8期2462-2469,共8页
为研究近年来新疆地区牛源大肠杆菌中质粒介导喹诺酮类药物耐药基因的分布及其对喹诺酮类抗生素的耐药情况,本研究于2016-2018年从新疆石河子、沙湾、奎屯、玛纳斯和伊犁5个地区12个规模化奶牛场分离出116株牛源大肠杆菌,药敏试验检测... 为研究近年来新疆地区牛源大肠杆菌中质粒介导喹诺酮类药物耐药基因的分布及其对喹诺酮类抗生素的耐药情况,本研究于2016-2018年从新疆石河子、沙湾、奎屯、玛纳斯和伊犁5个地区12个规模化奶牛场分离出116株牛源大肠杆菌,药敏试验检测其耐药性,同时利用PCR扩增PMQR耐药基因。药敏试验结果显示,62.93%的菌株对氨苄西林耐药,耐药率最高。对链霉素、四环素、卡那霉素和恩诺沙星的耐药率依次为56.90%、54.31%、43.10%和42.24%。对头孢他啶和头孢噻肟的耐药率较低,分别为7.76%和11.21%。分离菌主要携带qnrA、qnrS和aac(6′)-Ⅰb-cr 3种耐药基因;116株大肠杆菌中有31株携带PMQR的耐药基因,检出阳性率为26.72%,其中26株仅携带1种PMQR耐药基因,占所有菌株的22.41%,4株携带2种PMQR耐药基因,占所有菌株的3.45%,1株携带3种PMQR耐药基因,占所有菌株的0.86%。综上所述,新疆地区牛源大肠杆菌质粒介导喹诺酮类药物基因主要为qnrA、qnrS和aac(6′)-Ⅰb-cr 3种,且对恩诺沙星、诺氟沙星、环丙沙星、左氧氟沙星均产生不同程度的耐药性。 展开更多
关键词 新疆 牛源大肠杆菌 喹诺酮类药物耐药基因 药敏试验
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