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基因Ⅶ型和Ⅳ型新城疫病毒诱导鸡脾脏细胞外基质组织病理学变化的比较
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作者 顾晗 胡增垒 +3 位作者 施丽薇 石磊 胡顺林 刘秀梵 《中国家禽》 北大核心 2019年第17期25-29,共5页
为系统比较基因Ⅶ型和Ⅳ型新城疫病毒(NDV)引起的细胞外基质(ECM)组织病理学变化,采用ECM特异性染色,包括Masson三色法染色和天狼星红染色,对基因Ⅶ型NDV JS5/05株与基因Ⅳ型NDV Herts/33株感染的鸡脾脏进行了ECM组织病理学分析。此外,... 为系统比较基因Ⅶ型和Ⅳ型新城疫病毒(NDV)引起的细胞外基质(ECM)组织病理学变化,采用ECM特异性染色,包括Masson三色法染色和天狼星红染色,对基因Ⅶ型NDV JS5/05株与基因Ⅳ型NDV Herts/33株感染的鸡脾脏进行了ECM组织病理学分析。此外,通过免疫组化检测了ECM关键组分Ⅰ型胶原蛋白在感染鸡脾脏中的分布。结果显示:与Ⅳ型Herts/33株相比,Ⅶ型JS5/05株能引起以脾脏广泛坏死为特征的更严重的病理变化;ECM特异性染色以及免疫组化结果表明,与Herts/33相比,JS5/05显著降低脾脏ECM蛋白丰度,严重破坏胶原纤维的走向、排列与网络结构。结果表明:鸡脾脏ECM的严重降解是基因Ⅶ型NDV感染过程中特征性的病理事件,且ECM的病理变化在促进Ⅶ型NDV诱导免疫病理损伤方面可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 新城疫病毒 细胞外基质 组织病理学 致病机制
副溶血性弧菌广谱裂解性噬菌体的筛选及其在海产品安全控制中的应用 预览
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作者 郑小双 高璐 +2 位作者 张辉 饶胜其 杨振泉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第10期141-148,共8页
以致病性副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)菌株作为宿主,从污水样品中分离裂解性噬菌体,并对其生物学特性及其在模拟污染黄鱼中Vp的抑菌作用进行研究。结果获得5株广谱裂解性噬菌体,形态鉴定属于肌尾噬菌体科(Myoviridae)、长... 以致病性副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)菌株作为宿主,从污水样品中分离裂解性噬菌体,并对其生物学特性及其在模拟污染黄鱼中Vp的抑菌作用进行研究。结果获得5株广谱裂解性噬菌体,形态鉴定属于肌尾噬菌体科(Myoviridae)、长尾噬菌体科(Siphoviridae)和盖噬菌体科(Corticoviridae),裂解谱结果显示单噬菌体分别可以对5~24株不同来源的Vp菌株产生裂解效应,由5株噬菌体构成的混合物VppMIX能裂解所有Vp菌株(42株)。噬菌体分离株在60℃和pH 4~10条件下具有良好的裂解活性。单噬菌体不敏感突变频率(bacteriophage insensitive mutant frequency,BIMF)在10-3~10-5范围内,但VppMIX能够显著降低的BIMF值达到10^-6。应用Vp模拟污染黄鱼片作为模型研究VppMIX的抑菌效果,结果显示在25℃恒温保藏12 h后,不同剂量VppMIX处理的黄鱼样品中Vp载量比对照组(未处理)降低了1.41~4.98(lg(CFU/g))(P<0.01)。本研究为海产品中致病性Vp的控制提供了新型生物抑菌剂。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 噬菌体 广谱 抑菌作用
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胎儿弯曲菌PCR检测方法的建立及其初步应用 预览
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作者 唐虹 徐仲兰 +4 位作者 孔科 唐海燕 范正杨 焦新安 黄金林 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期694-698,共5页
目的建立胎儿弯曲菌PCR快速检测方法。方法 以胎儿弯曲菌表面蛋白基因 sapB2 为靶基因,应用软件设计特异性引物,通过反应条件的优化,引物敏感性、特异性和灵敏度的试验以及模拟污染样品的检测,建立胎儿弯曲菌PCR快速检测方法并应用于临... 目的建立胎儿弯曲菌PCR快速检测方法。方法 以胎儿弯曲菌表面蛋白基因 sapB2 为靶基因,应用软件设计特异性引物,通过反应条件的优化,引物敏感性、特异性和灵敏度的试验以及模拟污染样品的检测,建立胎儿弯曲菌PCR快速检测方法并应用于临床样品检测。结果该研究建立的PCR方法能特异性扩增胎儿弯曲菌 sapB2 (789 bp)基因片段,空肠弯曲菌、结肠弯曲菌、唾液弯曲菌和豚肠弯曲菌以及其他17株参考菌如大肠杆菌、沙门菌等均未扩增出条带;胎儿弯曲菌纯培养物最低可检出0.23 pg/μL的DNA,模拟感染样品污水和奶牛粪便样品中胎儿弯曲菌的最低检出量分别为0.9 CFU/mL和20 CFU/g;临床样品检测中,400份奶牛肛门擦拭样品和125份产妇阴道擦拭样品的PCR检测结果均为胎儿弯曲菌阴性,与传统的平板分离方法同步检测结果一致。结论 所建立的胎儿弯曲菌PCR检测方法具有特异性强、敏感度高、简便快速等特点,为胎儿弯曲菌的快速检测提供了技术支持,对识别该菌株的暴发流行,相关疾病的诊断和控制具有重要意义。 展开更多
关键词 胎儿弯曲菌 PCR 快速检测
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肠炎沙门菌sipC缺失株构建及部分生物学特性分析
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作者 张钰 陈阳 +2 位作者 徐琪 朱国强 陈国宏 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期330-336,共7页
肠炎沙门菌(Salmonella enteritidis, SE)可长期定植于家禽的肠道与生殖道组织,造成禽蛋的直接污染和垂直传播,难于清除与预防,不仅影响产蛋量,还造成环境污染,危害人类健康。Ⅲ型分泌系统(type secretion system, T3SS)的效应蛋白在肠... 肠炎沙门菌(Salmonella enteritidis, SE)可长期定植于家禽的肠道与生殖道组织,造成禽蛋的直接污染和垂直传播,难于清除与预防,不仅影响产蛋量,还造成环境污染,危害人类健康。Ⅲ型分泌系统(type secretion system, T3SS)的效应蛋白在肠炎沙门菌与宿主细胞表面黏附时至关重要。为研究肠炎沙门菌T3SS1主要效应蛋白SipC (type secretion system-1 effector SipC, T3SS1-SipC)在感染中的作用,本研究利用λRed同源重组系统构建肠炎沙门菌MY1的sipC基因缺失株MY1ΔsipC,同时将sipC基因克隆至载体质粒pBR322,构建回补株MY1ΔsipC/psipC。比较分析了野生株MY1、缺失株MY1ΔsipC以及回补株MY1ΔsipC/psipC在生长特性、对人(Homo sapiens)结肠细胞(human colorectaladeno carcinoma cell line,Caco-2)、鸭(Anas platyrhynchos)卵泡颗粒细胞(duck granulosa cells, dGCs)的黏附和侵袭能力,以及雏鸭半数致死量的差异。结果显示,缺失sipC基因后,肠炎沙门菌生长特性不变;感染2 h后,对Caco-2黏附和侵袭数量分别下降44.9%和34.5%;对dGCs黏附和侵袭数量分别下降37.9%和30.4%;对雏鸭的致病性显著降低(P<0.05)。本研究初步证实sipC参与肠炎沙门菌的致病力,为进一步探索sipC在肠炎沙门菌黏附宿主的分子机制提供实验材料。 展开更多
关键词 肠炎沙门菌 sipC基因 缺失株 毒力
表达分泌型与膜结合型HH7N9 AIV血凝素蛋白重组NDV载体疫苗的免疫原性比较
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作者 胡增垒 刘晓文 +6 位作者 胡娇 顾晗 石磊 李如梦 甘军纪 焦新安 刘秀梵 《中国家禽》 北大核心 2018年第14期14-18,共5页
研究以新城疫病毒(NDV)弱毒株LX为载体,构建了一株表达H7N9亚型禽流感病毒(H7N9 AIV)血凝素(HA)胞外区的重组病毒(LXs HA),并与一株前期构建的表达膜结合型HA的重组病毒(LXHAF)进行比较。生物学特性评价显示,两株病毒均为弱... 研究以新城疫病毒(NDV)弱毒株LX为载体,构建了一株表达H7N9亚型禽流感病毒(H7N9 AIV)血凝素(HA)胞外区的重组病毒(LXs HA),并与一株前期构建的表达膜结合型HA的重组病毒(LXHAF)进行比较。生物学特性评价显示,两株病毒均为弱毒且在鸡胚中的繁殖性能较强。此外,LXs HA主要以分泌形式表达HA蛋白,而LXHAF则以膜结合形式表达HA。鸡的免疫试验显示,两株重组病毒在一次免疫后均能诱导针对NDV载体的血凝抑制抗体,但LXHAF能够诱导较高水平的H7N9 AIV特异性Ig Y抗体,而LXs HA不能诱导H7N9 AIV抗体应答。结果表明,表达膜结合型HA的重组病毒具有针对H7N9 AIV较好的免疫原性,而表达分泌型HA的重组病毒免疫原性较差。这为研发H7N9亚型禽流感载体疫苗提供新的信息与参考。 展开更多
关键词 H7N9亚型禽流感病毒 新城疫病毒 载体疫苗 分泌型HA 膜结合型HA 免疫原性
辐照技术对食源性病原菌的影响研究 被引量:1
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作者 许佳 肖欢 +1 位作者 焦新安 黄金林 《食品安全质量检测学报》 CAS 2018年第19期5029-5033,共5页
食源性病原菌,指在食品加工和流通过程中引入的病原菌,是引发食源性疾病的重要因素。这些病原菌以食品作为载体进行传播,一定程度上增加了某些食源性疾病爆发的可能,而传统的控制措施抑菌效果有限,当务之急是寻求革新的食品杀菌技术。... 食源性病原菌,指在食品加工和流通过程中引入的病原菌,是引发食源性疾病的重要因素。这些病原菌以食品作为载体进行传播,一定程度上增加了某些食源性疾病爆发的可能,而传统的控制措施抑菌效果有限,当务之急是寻求革新的食品杀菌技术。食品辐照技术作为一种高新的冷杀菌技术,具有安全、无污染等优点,近年来在保障食品质量安全方面发挥的作用也引起了社会的高度重视,关于辐照技术对食品中病原菌致死作用的系统描述相对较少。本文结合国内外关于食品辐照灭菌的研究报道,综述了辐照技术的发展、辐照技术控制食品病原菌进展、辐照杀菌机制以及影响辐照灭菌效果的主要因素,并对该技术存在的问题和未来的研究进行了探讨,以期为进一步预防和控制食源性疾病提供新的思路。 展开更多
关键词 食源性病原菌 辐照灭菌 食品安全
一株猴源空肠弯曲菌的鉴定及其生物学特性分析 预览
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作者 金微微 唐海燕 +3 位作者 任方哲 唐虹 焦新安 黄金林 《中国人兽共患病学报》 CSCD 北大核心 2018年第12期1102-1106,共5页
目的对一株腹泻猴源的空肠弯曲菌分离株M166进行鉴定和生物学特性研究。方法通过多重PCR、生化鉴定、MALDI-TOF-MS质谱鉴定、电镜观察等方法验证猴源分离株,通过与标准株NCTC11168进行比较,对生长曲线、运动力、Balb/c小鼠体内定殖实验... 目的对一株腹泻猴源的空肠弯曲菌分离株M166进行鉴定和生物学特性研究。方法通过多重PCR、生化鉴定、MALDI-TOF-MS质谱鉴定、电镜观察等方法验证猴源分离株,通过与标准株NCTC11168进行比较,对生长曲线、运动力、Balb/c小鼠体内定殖实验等生物学特性进行研究。结果该分离株多重PCR显示空肠弯曲菌阳性,马尿酸钠水解阳性,VITEK-2生化和MALDI-TOF-MS分析均鉴定为空肠弯曲菌,电镜观察显示为典型的弯曲菌形态;与NCTC11168相比,M166在MH液体培养基中的生长速度和增殖程度弱于NCTC11168,但运动力更为活跃;攻毒后第7d小鼠体内定殖实验结果表明,NCTC11168攻毒组无细菌检出,而M166攻毒组能持续排菌,且在十二指肠、空肠、回肠、盲肠中定殖,每克载菌量分别可达3.09±0.47,3.01±0.84,3.80±0.46,5.63±0.34CFU/g。结论M166具有空肠弯曲菌典型的生物学特性,且在小鼠肠道中定殖能力强,这可能是M166能在实验猴体内定殖并导致腹泻的重要因素。 展开更多
关键词 空肠弯曲菌 生化鉴定 MALDI-TOF-MS 生物学特性 定殖 猴源
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副溶血性弧菌vpa0166基因与耐药性相关性研究 预览 被引量:1
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作者 周海波 薛峰 +2 位作者 高璐 饶胜其 杨振泉 《中国人兽共患病学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期509-514,共6页
目的了解2006-2014年江苏省部分地区的副溶血性弧菌分离株基因型特征,并探索编码推测外膜蛋白VPA0166的分子多样性与耐药性的关系。方法对166株分离株采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法鉴定tlh、tdh、trh毒力基... 目的了解2006-2014年江苏省部分地区的副溶血性弧菌分离株基因型特征,并探索编码推测外膜蛋白VPA0166的分子多样性与耐药性的关系。方法对166株分离株采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法鉴定tlh、tdh、trh毒力基因、大流行株标志物orf8基因以及外膜蛋白编码序列vpa0166,并用纸片扩散法(Kindy-Bauer,KB)进行药敏试验。结果测序分析发现vpa0166扩增片段呈现a型(996bp)和b型(1050bp)两个形态(同源性为94%),其中a型产物较b型产物在523bp至580bp之间有54个碱基缺失,药敏结果表明a型菌群对环丙沙星的敏感率显著高于b型菌群(P〈0.05)。结论 vpa0166序列多样性与环丙沙星耐药性存在显著相关性。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 外膜蛋白 多样性 耐药性 相关性
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微生物组与动物疫病防控 预览 被引量:1
9
作者 李求春 焦新安 《微生物与感染》 2018年第2期65-69,共5页
微生物组研究的发展推动了人类不断探索人体微生物群与疾病之间的相关性。然而,微生物组学在动物疫病防控中的研究尚处于起步阶段。本文对动物疫病防控领域中微生物组研究所发挥的6个作用进行了阐述:揭示疾病与菌群的相关性,鉴定新发病... 微生物组研究的发展推动了人类不断探索人体微生物群与疾病之间的相关性。然而,微生物组学在动物疫病防控中的研究尚处于起步阶段。本文对动物疫病防控领域中微生物组研究所发挥的6个作用进行了阐述:揭示疾病与菌群的相关性,鉴定新发病原体,确立有益于维持机体健康生长的菌群,筛选疾病防控的新药物和新制剂,开发新疫苗或改进疫苗的使用效果,提出更简单有效的防控措施。 展开更多
关键词 微生物组 微生物群 动物疫病防控
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空肠弯曲菌fliD基因突变株的构建及其生物学特性
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作者 唐虹 张小燕 +3 位作者 杜雪晴 宋召军 焦新安 黄金林 《微生物学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期219-227,共9页
【目的】研究fliD基因对空肠弯曲菌生物学特性的影响,为阐明该基因的功能和作用机制奠定基础。【方法】利用同源重组技术构建fliD基因的插入失活突变株NCTC11168△fliD,并通过与野生株比较,对∥国突变株生长速率、运动力、黏附力和... 【目的】研究fliD基因对空肠弯曲菌生物学特性的影响,为阐明该基因的功能和作用机制奠定基础。【方法】利用同源重组技术构建fliD基因的插入失活突变株NCTC11168△fliD,并通过与野生株比较,对∥国突变株生长速率、运动力、黏附力和侵袭力等生物学特性进行研究。【结果】与野生型NCTC11168相比,突变株NCTC11168△fliD的生理生化特性不变;突变株的生长速率无明显变化;MH半固体穿刺实验中,突变株只能在接种处生长,运动力明显减弱;在Caco-2细胞黏附、侵袭实验中,fliD突变株的黏附率和侵袭率分别为164.00+19.49、55.00±6.09,fliD基因失活使得突变株的黏附率和侵袭率显著降低(0〈P〈0.01)。【结论】fliD基因是空肠弯曲菌运动能力重要的分子基础,与空肠弯曲菌感染细胞的黏附侵袭作用密切相关,即与空肠弯曲菌的致病性密切相关。 展开更多
关键词 空肠弯曲菌 fliD基因 突变株 生物学特性
鼠源炎症因子流式蛋白定量试剂盒的优化及初步应用 预览 被引量:1
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作者 胡茂志 赵维芯 +4 位作者 康喜龙 顾杰 潘志明 崔桂友 焦新安 《动物医学进展》 北大核心 2017年第5期17-21,共5页
以小鼠炎症因子流式蛋白定量(cytometric bead array,CBA)检测试剂盒为参考,分别从降低试剂用量和缩短孵育时间两个方面进行优化,然后以沙J'l菌感染小鼠为模型,动态分析小鼠血清中炎症因子的分泌情况。结果表明,试剂用量由50肛... 以小鼠炎症因子流式蛋白定量(cytometric bead array,CBA)检测试剂盒为参考,分别从降低试剂用量和缩短孵育时间两个方面进行优化,然后以沙J'l菌感染小鼠为模型,动态分析小鼠血清中炎症因子的分泌情况。结果表明,试剂用量由50肛L降至20肚L、孵育时间由2h缩短至30min仍然可以得到较好的检测效果。沙门菌感染小鼠后,利用该方法动态分析了小鼠血清中炎症因子的变化情况,并且发现炎症因子的早期分泌与沙门菌在小鼠体内的定殖呈正相关。通过CBA技术的优化和初步应用,为其推广应用提供了重要数据。 展开更多
关键词 流式蛋白定量技术 剂量 孵育时间 沙门菌 小鼠
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嵌合鞭毛蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)和沙门菌SL5928中的表达与组装分析
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作者 胡茂志 潘志明 +4 位作者 杨芸 孟闯 张磊 耿士忠 焦新安 《生物工程学报》 CSCD 北大核心 2017年第8期1335-1342,共8页
鞭毛蛋白根据能否组装可以表达为单体或多聚体。目前,关于它们之间的区别少有报道。文中,将重组质粒p ET-fli C/M2e2分别导入大肠杆菌BL21(DE3)和沙门菌SL5928中来表达嵌合鞭毛蛋白mfli C/M和pfli C/M,然后分析它们的组装特性。SDS-P... 鞭毛蛋白根据能否组装可以表达为单体或多聚体。目前,关于它们之间的区别少有报道。文中,将重组质粒p ET-fli C/M2e2分别导入大肠杆菌BL21(DE3)和沙门菌SL5928中来表达嵌合鞭毛蛋白mfli C/M和pfli C/M,然后分析它们的组装特性。SDS-PAGE结果表明,两重组菌成功表达了嵌合鞭毛蛋白。透射电镜观察显示,在重组大肠杆菌表面未见鞭毛,而重组沙门菌表面呈现鞭毛。将嵌合蛋白纯化后,圆二色谱(Circular dichroism,CD)分析表明,两者的CD信号明显不同,pfli C/M的CD信号与野生型鞭毛蛋白一致,而mfli C/M基本上没有CD信号出现。动态光散射分析表明,mfli C/M的聚集程度明显低于pfli C/M。将嵌合蛋白转染小鼠腹腔细胞3 h后,两者均能诱导产生IL-1β,但mfli C/M组高于pfli C/M组。以上结果对于鞭毛蛋白表达形式的选择具有重要的参考价值。 展开更多
关键词 鞭毛蛋白 表达 组装 白细胞介素1Β
抗鸡白细胞介素4单克隆抗体的制备及其鉴定 被引量:1
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作者 戴华 陈俊华 +3 位作者 张海霞 沈颖 陈祥 焦新安 《细胞与分子免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第7期986-990,共5页
目的制备抗鸡白细胞介素4(ChIL-4)单克隆抗体(mAb)并进行鉴定。方法以重组鸡IL-4(GST-ChIL-4)作为免疫原免疫8周龄BALB/c小鼠,以重组蛋白His-ChIL-4作为检测抗原建立筛选阳性杂交瘤细胞株的间接ELISA;以有限稀释法制备稳定分泌抗C... 目的制备抗鸡白细胞介素4(ChIL-4)单克隆抗体(mAb)并进行鉴定。方法以重组鸡IL-4(GST-ChIL-4)作为免疫原免疫8周龄BALB/c小鼠,以重组蛋白His-ChIL-4作为检测抗原建立筛选阳性杂交瘤细胞株的间接ELISA;以有限稀释法制备稳定分泌抗ChIL-4 mAb细胞株;采用间接ELISA、间接免疫荧光法(IFA)以及Western blot法分析mAb的特异性。结果获得4株抗ChIL-4的mAb,分别命名为6A8、18F12、19F1、20G3,腹水mAb的ELISA效价为(1.6~6.4)×10^4;ELISA、IFA及Western blot结果显示该4株mAb均是特异针对重组ChIL-4的mAb,不具有识别重组牛IL-4、鸡γ干扰素(IFN-γ)等其他蛋白的能力。结论成功制备了抗ChIL-4的mAb。 展开更多
关键词 鸡白细胞介素4(ChIL-4) 单克隆抗体
家禽生产中弯曲菌防控技术研究进展 被引量:1
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作者 张小燕 唐梦君 +2 位作者 杜雪晴 黄金林 高玉时 《食品安全质量检测学报》 CAS 2017年第11期4282-4287,共6页
弯曲菌是世界范围内引起人细菌性胃肠炎主要病原菌之一,而家禽作为弯曲菌的重要储库是人类弯曲菌病的主要来源。研究表明对生产初级阶段的鸡群中弯曲菌进行预防和控制有益于保障食品安全和公众健康。目前研究的弯曲菌防控措施主要包括... 弯曲菌是世界范围内引起人细菌性胃肠炎主要病原菌之一,而家禽作为弯曲菌的重要储库是人类弯曲菌病的主要来源。研究表明对生产初级阶段的鸡群中弯曲菌进行预防和控制有益于保障食品安全和公众健康。目前研究的弯曲菌防控措施主要包括卫生和生物安全措施、饮水和饲料处理、噬菌体应用、免疫策略等方面。本文就家禽生产中弯曲菌防控技术的最新研究进展进行综述,以期为家禽生产中弯曲菌防控措施的选择与应用提供理论参考。 展开更多
关键词 弯曲菌 家禽生产 防控技术
水产品中副溶血性弧菌LAMP检测方法的优化 被引量:3
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作者 胡元庆 黄玉萍 +2 位作者 李凤霞 郑艺梅 张丹凤 《现代食品科技》 北大核心 2017年第6期313-320,247共9页
本文用副溶血性弧菌不耐热溶血素(tlh)基因作靶标,优化环介导等温扩增技术检测水产品副溶血性弧菌的方法。体系用Bst DNA聚合酶催化,恒温反应60 min,产物分别用2%琼脂糖凝胶电泳和SYBR Green I染色鉴定,对各项反应参数进行优化;将新... 本文用副溶血性弧菌不耐热溶血素(tlh)基因作靶标,优化环介导等温扩增技术检测水产品副溶血性弧菌的方法。体系用Bst DNA聚合酶催化,恒温反应60 min,产物分别用2%琼脂糖凝胶电泳和SYBR Green I染色鉴定,对各项反应参数进行优化;将新鲜菌液作10倍梯度稀释后进行LAMP和PCR反应,比较二者的敏感度;对32株食源性病原菌(包括分离于水产品的25株副溶血弧菌,1株副溶血性弧菌ATCC17802标准株,大肠杆菌D5、金黄色葡萄球菌CMCC26003、志贺氏菌B4、蜡样芽胞杆菌63302、单核细胞增生李斯特菌54001和沙门氏菌50041各1株)进行LAMP扩增,验证其特异性;虾样品用菌液进行模拟污染,分析LAMP的可靠性。各参数最佳条件为:Mg2+浓度为3.6 mmol/L,d NTPs浓度为0.96 mmol/L,Bst DNA聚合酶用量为4.8 U,内外引物浓度比为8:1,最佳反应温度为63℃,时间为60 min;LAMP的检测限为1 CFU/m L,低于PCR方法的最低检测限;特异性试验检测26株副溶血性弧菌均为阳性,6株非副溶血性弧菌为阴性;人工污染试验中检测限达1 CFU/m L,无假阳性。建立的LAMP方法操作简单且灵敏度高,适用于水产食品中副溶血弧菌的现场快速检测。 展开更多
关键词 环介导等温扩增技术 副溶血性弧菌 tlh基因
漳州市夏秋季主要贝类中副溶血性弧菌分布情况分析 预览 被引量:1
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作者 胡元庆 周赞虎 +2 位作者 黄玉容 张燕瑜 庄蕾 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期293-296,303共5页
调查漳州市售主要贝类中副溶血性弧菌的带菌状况,为消费者提供食品安全风险参考。从漳州市区的8大市场无菌采集花蛤、文蛤和蛏的新鲜样品;用硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基(Thiosulfate citrate bile salts sucrose agar cult... 调查漳州市售主要贝类中副溶血性弧菌的带菌状况,为消费者提供食品安全风险参考。从漳州市区的8大市场无菌采集花蛤、文蛤和蛏的新鲜样品;用硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基(Thiosulfate citrate bile salts sucrose agar culture medium,TCBS)分离纯化疑似菌落,聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)扩增不耐热溶血素基因(thermolabile hemolysin,tlh)的特异片段;并对分子检测阳性的菌株进行生化鉴定。结果表明,采集到53份花蛤、50份文蛤和42份蛏的样品,经过TCBS筛选分别得到37株、45株和36株疑似菌落,分离率分别为69.8%、90.0%和85.7%;PCR确定副溶血性弧菌阳性率分别为35.8%(19/53)、30.0%(15/50)和54.8%(23/42);革兰氏染色和主要生化实验确定疑似菌均为副溶血性弧菌,符合率达100%。漳州市所售水产品受副溶血性弧菌污染较为严重,市民食用需严格无害化处理,避免不同种类水产品间的交叉污染。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 花蛤 文蛤 漳州市
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不同贮藏温度下斑点叉尾鮰鲜度及优势腐败菌群变化规律研究
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作者 陶晓雅 杨振泉 +4 位作者 张辉 高璐 饶胜其 尹永祺 方维明 《食品科技》 CAS 北大核心 2016年第12期97-102,共6页
为揭示常温和低温贮藏中斑点叉尾鮰腐败菌群的构成及变化规律,研究测定了4℃和20℃贮藏中斑点叉尾鮰的鲜度指标变化,并应用高通量测序技术分析了不同时间点的菌相构成及其丰度变化。结果表明,在4℃和20℃贮藏期内鮰鱼p H值变化均呈先下... 为揭示常温和低温贮藏中斑点叉尾鮰腐败菌群的构成及变化规律,研究测定了4℃和20℃贮藏中斑点叉尾鮰的鲜度指标变化,并应用高通量测序技术分析了不同时间点的菌相构成及其丰度变化。结果表明,在4℃和20℃贮藏期内鮰鱼p H值变化均呈先下降后上升趋势,挥发性盐基氮(TVB-N)、感官评分(QI)、菌落总数(TAC)呈上升趋势,其中QI、TVB-N值与TAC具有显著相关性(p〈0.01)。高通量测序结果显示16个属的细菌在贮藏期内相对丰度超过0.1%,其中Pseudomonas spp.,Shewanalla spp.和Bacillus spp.在新鲜点的相对丰度分别达到20.62%、3.21%和1.25%。在20℃贮藏1 d后Pseudomonas spp.,Shewanalla spp.,Bacillus spp.,Acinetobacter spp.,Coprothermobacter spp.菌属相对丰度均超过1.0%,表明这些菌属是20℃贮藏中潜在的主要腐败菌。在4℃贮藏中Shewanalla spp.相对丰度显著上升,由3.21%(0 d)上升到45.96%(12 d),而其他菌属变化并不显著,表明Shewanalla spp.是鮰鱼4℃冷藏中主要的致腐菌群。 展开更多
关键词 斑点叉尾鮰 pH TVB-N TAC 高通量测序 腐败菌群.
猪住肉孢子虫病诊断技术的研究进展 被引量:1
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作者 禚振男 唐妍 +5 位作者 郭平 徐晶晶 王子静 刘丹丹 陶建平 许金俊 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第2期67-69,共3页
猪住肉孢子虫引起的住肉孢子虫病对养猪业造成了一定的经济损失,对人类健康也会产生一定威胁。临床上建立的敏感、快速有效的检测方法对猪住肉孢子虫病的诊断、预防和控制具有重要的意义。文章对国内外猪住肉孢子虫病的诊断方法和技术... 猪住肉孢子虫引起的住肉孢子虫病对养猪业造成了一定的经济损失,对人类健康也会产生一定威胁。临床上建立的敏感、快速有效的检测方法对猪住肉孢子虫病的诊断、预防和控制具有重要的意义。文章对国内外猪住肉孢子虫病的诊断方法和技术的研究进展进行了概括和综述。 展开更多
关键词 住肉孢子虫病 诊断 检测 预防 控制
家禽养殖环节弯曲菌分布特点 预览
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作者 张小燕 黄金林 焦新安 《动物医学进展》 北大核心 2016年第11期105-109,共5页
弯曲菌是世界范围内引起人细菌性胃肠炎的主要病原菌,近年来由其引起的弯曲菌病发生率呈指数增长趋势,而家禽作为弯曲菌的天然宿主是人类弯曲菌病的主要来源。论文针对家禽养殖环节,对鸡群中弯曲菌的流行状况、耐药性及鸡群中弯曲菌来... 弯曲菌是世界范围内引起人细菌性胃肠炎的主要病原菌,近年来由其引起的弯曲菌病发生率呈指数增长趋势,而家禽作为弯曲菌的天然宿主是人类弯曲菌病的主要来源。论文针对家禽养殖环节,对鸡群中弯曲菌的流行状况、耐药性及鸡群中弯曲菌来源等方面的研究进展进行分析,以期为家禽养殖环节弯曲菌的防控措施制定提供参考。 展开更多
关键词 弯曲菌 养殖环节 流行状况 耐药性 来源
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利用圆二色谱和流式细胞术分析干扰素-α的构象与其抗病毒活性的相关性 被引量:1
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作者 胡茂志 李文华 +5 位作者 严秋香 杨艳 孙庆 潘志明 崔桂友 焦新安 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1651-1659,共9页
利用圆二色谱(Circular dichroism,CD)和流式细胞术(Flow cytometry,FCM)分析干扰素(Interferon,IFN)-α的构象与其抗病毒活性之间的关系。以重组人IFN-α(rIFN-α2b和rIFN-α2a)为材料,变温CD谱分析表明,在65℃以下,两种IFN-... 利用圆二色谱(Circular dichroism,CD)和流式细胞术(Flow cytometry,FCM)分析干扰素(Interferon,IFN)-α的构象与其抗病毒活性之间的关系。以重组人IFN-α(rIFN-α2b和rIFN-α2a)为材料,变温CD谱分析表明,在65℃以下,两种IFN-α的二级结构相对稳定,当温度高于65℃以后,两者的二级结构发生不可逆的改变。FCM分析构象变化前后IFN-α的抗病毒活性发现,构象的改变一定程度上减弱了其抗病毒活性。rIFN-α2b和rIFN-α2a具有相似的变化趋势。以上结果表明,IFN-α的构象是影响其抗病毒活性的重要因素之一,同时也验证了CD结合FCM是分析蛋白质药物构象与其细胞水平上生物学活性相关性的较好组合。 展开更多
关键词 圆二色谱 流式细胞术 干扰素-Α 构象 抗病毒活性
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