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家禽抗沙门氏杆菌免疫应答的研究进展
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作者 唐娟 康喜龙 +2 位作者 胡茂志 焦新安 潘志明 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第1期36-40,共5页
沙门氏杆菌是一种重要的人兽共患病原菌,食用被沙门氏杆菌污染的家禽产品是人类感染沙门氏杆菌的主要原因。研究家禽抗沙门氏杆菌感染的免疫应答机制对控制沙门氏杆菌在家禽和食物链中的传播具有重要意义。感染早期,机体利用固有免疫系... 沙门氏杆菌是一种重要的人兽共患病原菌,食用被沙门氏杆菌污染的家禽产品是人类感染沙门氏杆菌的主要原因。研究家禽抗沙门氏杆菌感染的免疫应答机制对控制沙门氏杆菌在家禽和食物链中的传播具有重要意义。感染早期,机体利用固有免疫系统抵抗沙门氏杆菌的感染,然而其在体内的完全清除依赖于适应性免疫应答,其中CD_4~+、CD_8~+、γδT细胞和B细胞等发挥重要作用。文章对家禽抗沙门氏杆菌感染的固有免疫和适应性免疫应答研究进展进行了总结,并重点阐述了T细胞和B细胞的作用,以期为家禽沙门氏杆菌病的防控提供新的思路。 展开更多
关键词 沙门氏杆菌 家禽 发病机制 固有免疫应答 适应性免疫应答
生物被膜形成相关基因对鼠伤寒沙门菌耐药性的影响
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作者 阴银燕 史艺 +9 位作者 秦涛 何凯明 徐诺 朱中天 冯政 王敏 殷立晗 陈素娟 徐正中 彭大新 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第1期47-51,共5页
目的检测鼠伤寒沙门菌S025△rpoNi、△rpoS、△csgA和△bcsA缺失株生物被膜形成能力和对药物敏感性的差异,研究生物被膜及其成分对细菌耐药性的影响。方法运用试管法检测生物被膜,药敏试验、最小抑菌浓度(MIC)法和最小杀菌浓度(MBC)法... 目的检测鼠伤寒沙门菌S025△rpoNi、△rpoS、△csgA和△bcsA缺失株生物被膜形成能力和对药物敏感性的差异,研究生物被膜及其成分对细菌耐药性的影响。方法运用试管法检测生物被膜,药敏试验、最小抑菌浓度(MIC)法和最小杀菌浓度(MBC)法检测细菌对药物的敏感性。结果与野生株相比,△rpoN缺失株生物被膜形成能力增强,但对抗生素的敏感性没有发生改变,△rpoS和△csgA缺失株丧失生物被膜形成能力,△bcsA缺失株生物被膜形成能力下降,△rpoSi、△csgA和△bcsA缺失株对头孢噻肟、美福仙、四环素、强力霉素和庆大霉素的敏感性提高,且△csgA缺失株抑菌圈直径大于△bcsA缺失株,表明生物被膜形成提高了细菌的耐药性。庆大霉素MBC结果显示,野生株和△rpoN为6.25μg/ml,而△rpoS、△csgA和△bcsA分别为1.56μg/ml、1.56μg/ml和3.125μg/ml,表明生物被膜形成提髙抗生素的杀菌浓度。结论沙门菌形成生物被膜能提高细菌的耐药性,且卷曲菌毛的作用更为重要。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门菌 生物被膜 耐药性 纤维素 卷曲菌毛
IP-10与A型流感病毒感染关系的研究进展
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作者 宋可可 马春喜 +2 位作者 张评浒 王晓泉 刘秀梵 《中国家禽》 北大核心 2020年第1期87-92,共6页
IP-10(Interferon-inducible protein-10)又名CXCL10,是γ-干扰素所诱导产生的一类可以趋化淋巴细胞的CXC趋化因子亚家族成员。研究发现IP-10表达水平与禽流感病毒感染后肺损伤的严重程度密切相关,在不同亚型流感病毒感染过程中IP-10表... IP-10(Interferon-inducible protein-10)又名CXCL10,是γ-干扰素所诱导产生的一类可以趋化淋巴细胞的CXC趋化因子亚家族成员。研究发现IP-10表达水平与禽流感病毒感染后肺损伤的严重程度密切相关,在不同亚型流感病毒感染过程中IP-10表达水平也有所不同。文章对IP-10及其受体、IP-10与不同亚型禽流感的关系、IP-10作用的信号通路等进行了综述,并阐述了IP-10与其他疾病的联系,以及对IP-10作为流感治疗靶标进行了展望。 展开更多
关键词 IP-10 禽流感 信号通路 CXCR3
姜黄素抑制马立克氏病病毒在CEF细胞中的复制 预览
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作者 冯春 杨帆 +2 位作者 乔丹丹 秦爱建 钱琨 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第2期72-79,共8页
为探究姜黄素对马立克氏病病毒(MDV)在CEF细胞中复制的影响,在病毒感染的不同时间点加入姜黄素,通过real-time PCR、蛋白免疫印迹和病毒噬斑计数实验来检测姜黄素对病毒复制的影响。结果显示:姜黄素能够抑制MDV基因表达、蛋白合成以及... 为探究姜黄素对马立克氏病病毒(MDV)在CEF细胞中复制的影响,在病毒感染的不同时间点加入姜黄素,通过real-time PCR、蛋白免疫印迹和病毒噬斑计数实验来检测姜黄素对病毒复制的影响。结果显示:姜黄素能够抑制MDV基因表达、蛋白合成以及病毒的增殖,且抑制作用具有剂量和时间依赖性;姜黄素还能直接影响MDV的感染性;姜黄素明显影响MDV感染细胞中IL-1β、IL-6等细胞因子的表达。该研究结果表明,姜黄素能体外抑制MDV的复制和增殖,具有开发为抗MDV临床药物的潜力。 展开更多
关键词 马立克氏病病毒 姜黄素 病毒复制 抑制
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超高液相色谱荧光检测法测定鹌鹑蛋和鸽蛋中甲砜霉素残留量 预览
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作者 王旭堂 刁志祥 +7 位作者 张培杨 谢恺舟 王波 刘楚君 张跟喜 张涛 刘学忠 戴国俊 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第1期206-211,共6页
本研究旨在建立鹌鹑蛋和鸽蛋中甲砜霉素(TAP)残留的超高效液相色谱-荧光检测(UPLC-FLD)方法。以鹌鹑蛋和鸽蛋为试验材料,采用加速溶剂萃取(ASE)技术提取目标物,以乙腈饱和的正己烷去脂,净化后用UPLC-FLD法进行检测分析。结果表明,在鹌... 本研究旨在建立鹌鹑蛋和鸽蛋中甲砜霉素(TAP)残留的超高效液相色谱-荧光检测(UPLC-FLD)方法。以鹌鹑蛋和鸽蛋为试验材料,采用加速溶剂萃取(ASE)技术提取目标物,以乙腈饱和的正己烷去脂,净化后用UPLC-FLD法进行检测分析。结果表明,在鹌鹑蛋和鸽蛋中TAP的添加质量比在定量限(LOQ)至250.0μg/kg内,线性关系良好,决定系数均大于0.9992。TAP添加质量比为LOQ、0.5 MRL、1.0 MRL和2.0 MRL时,在鹌鹑蛋和鸽蛋中的回收率分别为83.23%~95.72%、84.37%~97.12%,检测限(LOD)分别为3.4μg/kg、3.3μg/kg,LOQ分别为9.9μg/kg、9.7μg/kg。检测方法快速、高效、灵敏度高,为鹌鹑蛋和鸽蛋中TAP残留检测提供了新方法。 展开更多
关键词 鹌鹑蛋 鸽蛋 甲砜霉素 加速溶剂萃取 超高效液相色谱-荧光检测法
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一株猪链球菌的分离鉴定及其生物学特性研究 预览
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作者 郑成坤 贾梦蝶 王彦红 《安徽农业科学》 CAS 2020年第1期87-89,119共4页
为了确定扬州市某猪场发病猪的病原,对该猪场送检的病猪心脏进行了细菌分离与培养。通过16S rDNA测序和gdh基因PCR扩增,确定细菌种类;用血清型特异性引物进行PCR扩增,确定分离菌株的血清型;通过生长曲线测定、小鼠感染试验和药敏试验对... 为了确定扬州市某猪场发病猪的病原,对该猪场送检的病猪心脏进行了细菌分离与培养。通过16S rDNA测序和gdh基因PCR扩增,确定细菌种类;用血清型特异性引物进行PCR扩增,确定分离菌株的血清型;通过生长曲线测定、小鼠感染试验和药敏试验对分离菌株的生物学特性进行研究。结果表明,分离菌株为猪链球菌2型;分离菌株的生长情况与猪链球菌2型SC19菌株相似,但最高OD 595值略低于SC19菌株;分离菌株对小鼠具有高致病性;分离菌株主要对青霉素类和头孢类药物敏感。这说明猪链球菌2型很可能是该猪场发病猪的病原,该猪场对猪链球菌感染的防控应优先选用青霉素类和头孢类药物。 展开更多
关键词 猪链球菌 分离鉴定 血清型 致病性 药敏试验
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抗鸡源EphA2蛋白小鼠多克隆抗体的制备及其特性研究
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作者 姚晓慧 李拓凡 +4 位作者 谢泉 万志敏 邵红霞 秦爱建 叶建强 《中国家禽》 北大核心 2020年第3期29-34,共6页
为深入探究鸡源EphA2生物学功能,试验首先对鸡源EphA2基因进行了原核分段克隆以及真核表达载体构建。重组原核表达载体分别命名为pGEX-6p-1-EphA2-A(1-534aa)和pGEX-6p-1-EphA2-B(585-972aa),真核表达载体命名为pcDNA3.1-EphA2。重组原... 为深入探究鸡源EphA2生物学功能,试验首先对鸡源EphA2基因进行了原核分段克隆以及真核表达载体构建。重组原核表达载体分别命名为pGEX-6p-1-EphA2-A(1-534aa)和pGEX-6p-1-EphA2-B(585-972aa),真核表达载体命名为pcDNA3.1-EphA2。重组原核表达载体转化BL21后经IPTG诱导以及SDS-PAGE分析发现,融合蛋白GST-EphA2-A和GST-EphA2-B均获得有效表达。以纯化的GST-EphA2-A和GST-EphA2-B蛋白免疫小鼠制备了抗鸡EphA2多克隆抗体。间接免疫荧光试验以及Western blot试验表明,所制备的抗鸡EphA2多克隆抗体不仅能识别转染pcDNA3.1-EphA2的DF-1及LMH细胞中表达的外源性EphA2,而且还能有效识别内源性鸡源EphA2蛋白。本研究中鸡EphA2的成功表达及其多克隆抗体研制为后续研究鸡EphA2的功能提供了分子生物学工具。 展开更多
关键词 鸡源EphA2 原核分段克隆表达 真核表达 多克隆抗体 反应性
散养式和栓系式奶牛舍冬季环境卫生指标差异比较 预览
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作者 韩志蕾 甄永康 +3 位作者 张振斌 顾亚兰 冀德君 王梦芝 《安徽农学通报》 2020年第6期83-86,共4页
该研究比较了冬季散养式和栓系式奶牛舍环境卫生指标的差异,测定了牛舍的温度、噪音、相对湿度、细菌密度及氨气等环境指标,并分析了其相关性。结果表明,散养式牛舍的相对湿度指数为62.02%,显著高于栓系式奶牛舍的44.30%(p<0.05);细... 该研究比较了冬季散养式和栓系式奶牛舍环境卫生指标的差异,测定了牛舍的温度、噪音、相对湿度、细菌密度及氨气等环境指标,并分析了其相关性。结果表明,散养式牛舍的相对湿度指数为62.02%,显著高于栓系式奶牛舍的44.30%(p<0.05);细菌密度为2.86×104个/m~3,显著低于栓系式奶牛舍的12.77×10~4个/m~3(p<0.05);氨气浓度为0.19μg/m~3,显著低于栓系式奶牛舍的0.74μg/m~3(p<0.05);温度、噪音、温湿度指数等在2种牛舍间无显著差异。另外,散养式牛舍内的噪音与温湿度指数、噪音和温度间均存在显著相关关系(Sig.(2-tailed)<0.05)。栓系式牛舍内的相对湿度与温湿度指数、相对湿度和氮氨浓度、相对湿度和温度、温湿度指数和温度间均存在显著相关关系(Sig.(2-tailed)<0.05)。因此,在冬季的环境下,散养式牛舍的环境细菌和氨气浓度较栓系式牛舍低,能够一定程度上改善奶牛养殖环境的卫生状况。 展开更多
关键词 散养式 栓系式 奶牛 环境指标
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影响H1N1亚型猪流感病毒致病性与传播性的分子机制研究进展
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作者 施丽薇 顾敏 刘秀梵 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期435-440,共6页
猪流感(swine influenza,SI)是规模化猪场普遍存在的疾病之一,全球广泛传播的猪流感病毒(swine influenza viruses,SIVs)亚型包括H1N1、H1N2和H3N2,我国以H1N1亚型的流行最为常见。进化上,H1N1亚型SIVs通常分为经典H1N1和欧亚类禽H1N1两... 猪流感(swine influenza,SI)是规模化猪场普遍存在的疾病之一,全球广泛传播的猪流感病毒(swine influenza viruses,SIVs)亚型包括H1N1、H1N2和H3N2,我国以H1N1亚型的流行最为常见。进化上,H1N1亚型SIVs通常分为经典H1N1和欧亚类禽H1N1两大HA分支,分别于1930,1979年被首次分离,且都有直接感染人的病例报道;此后,两者参与重配生成的2009年大流行流感病毒(pdmH1N1/2009)又入侵猪群和人群,严重危害养猪业发展和公共卫生安全。现对致使H1N1 SIVs致病性发生改变或获得跨宿主传播能力的关键氨基酸位点变异及相关机制进行了总结,以期为SI的传播研究和防控提供一定参考。 展开更多
关键词 SIVs H1N1亚型 分子机制 致病性 传播性
迟缓爱德华菌外膜蛋白TolC原核表达及其免疫原性
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作者 张志强 杨楠 +6 位作者 李永慧 苏硕青 吴同垒 康元环 王洪彬 朱国强 史秋梅 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期339-344,共6页
TolC是革兰阴性细菌一种外膜通道蛋白,参与细菌应对外界不利环境的耐受,沙门菌TolC蛋白作为免疫原对动物沙门菌感染的保护效果优良,具有潜在的应用价值。目前,迟缓爱德华菌(Edwardsiella tarda,E.tarda)该蛋白的研究尚未见有报道,本研究... TolC是革兰阴性细菌一种外膜通道蛋白,参与细菌应对外界不利环境的耐受,沙门菌TolC蛋白作为免疫原对动物沙门菌感染的保护效果优良,具有潜在的应用价值。目前,迟缓爱德华菌(Edwardsiella tarda,E.tarda)该蛋白的研究尚未见有报道,本研究以E.tarda TolC蛋白作为研究对象,原核表达并纯化TolC蛋白,进一步通过动物试验确定该蛋白具有较强的免疫原性,免疫动物对致病性E.tarda ET-13强毒株感染具有较高的抵抗力。结果表明,E.tarda TolC蛋白具有较强的免疫原性和潜在的疫苗价值,为进一步研制E.tarda亚单位疫苗提供理论资料。 展开更多
关键词 E.tarda 外膜通道蛋白 TOLC 蛋白表达 免疫保护力
新城疫病毒HN标记疫苗的构建及免疫效力
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作者 郭丽丽 廖天星 +3 位作者 高晓敏 徐立 胡顺林 刘秀梵 《中国家禽》 北大核心 2020年第2期21-25,共5页
将新城疫病毒AI4株的HN蛋白胞外区替换成禽副黏病毒2型T4株HN相应部分,构建获得了一株重组病毒r AI4-T4HNECD,该病毒具有较高繁殖性能,且毒力弱。将该病毒制成灭活疫苗免疫2周龄SPF鸡后,定期采血用于血凝抑制试验(HI),免疫后3周以基因Ⅶ... 将新城疫病毒AI4株的HN蛋白胞外区替换成禽副黏病毒2型T4株HN相应部分,构建获得了一株重组病毒r AI4-T4HNECD,该病毒具有较高繁殖性能,且毒力弱。将该病毒制成灭活疫苗免疫2周龄SPF鸡后,定期采血用于血凝抑制试验(HI),免疫后3周以基因Ⅶd亚型NDV强毒株JS-5-05攻毒,攻毒后定期采血用于HI检测。结果显示:免疫后,该疫苗可有效诱导抗体的产生,并能提供较强的免疫保护。血清学测定数据显示:攻毒前,免疫组鸡血清对AI4株的HI平均效价低于2 log2,但感染后第5、7天免疫组鸡血清对AI4株的HI平均效价可分别达4.3 log2和9.4 log2,而免疫未攻毒组对AI4株的HI效价仍低于2 log2,根据血清对AI4株HI效价的变化可区分免疫动物和感染动物。因此,重组病毒rAI4-T4HNECD可用于新城疫标记疫苗的开发。 展开更多
关键词 新城疫病毒 HN蛋白 标记疫苗 血凝抑制试验
猪食欲肽受体2激动剂细胞筛选模型的建立及对天然中药提取物受体激动剂的筛选 预览
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作者 崔子鹤 张海洁 +4 位作者 蔺帅 姜军娜 肖霞 刘源 王志强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第2期407-415,共9页
本研究旨在构建猪食欲肽受体2(pOX2R)的真核表达载体,探究其对天然中药提取物的药理学活性。将成功构建的pcDNA3.1(+)-myc/pOX2R和报告质粒PGL4.29[luc2p/CRE/Hygro]分别瞬时转染HEK293T细胞,利用萤火虫荧光素酶报告基因检测法测定阳性... 本研究旨在构建猪食欲肽受体2(pOX2R)的真核表达载体,探究其对天然中药提取物的药理学活性。将成功构建的pcDNA3.1(+)-myc/pOX2R和报告质粒PGL4.29[luc2p/CRE/Hygro]分别瞬时转染HEK293T细胞,利用萤火虫荧光素酶报告基因检测法测定阳性细胞株在不同浓度激动剂Orexin A和Orexin B以及颉颃剂TCS作用下胞内cAMP水平。将目的质粒与报告质粒稳定共转染CHO-K1细胞,利用G418和潮霉素B进行抗性筛选,获得6株阳性细胞株和5株阴性细胞株。对具有促进食欲作用的18种天然中药材的36种提取物进行筛选,并用瞬时共转染了pcDNA3.1(+)-myc/pOX2R和PGL4.29[luc2p/CRE/Hygro]的HEK293T细胞作为研究对象,对阳性提取物进行剂量效应分析。结果显示,Orexin A与Orexin B单独作用细胞时,可以使萤火虫荧光素酶的活性提高,呈明显的剂量效应关系,当与颉颃剂TCS联合作用时,TCS可以颉颃激动剂对受体的激活作用。通过优化药物刺激时间和二甲亚砜(DMSO)用量后,建立了以pOX2R为靶点的稳定、可靠的激动剂细胞筛选模型。经过初筛和复筛,得到了甘草水提物、白莲子和山药醇提物3种可以使阳性细胞荧光素酶表达量升高的提取物。提取物在一定浓度范围内可以刺激胞内荧光素酶的表达,呈剂量效应关系。以上结果为筛选出可以提高猪生产效率的先导化合物及相关药物研究提供参考依据。 展开更多
关键词 食欲肽受体2(pOX2R) 萤火虫荧光素酶 天然中药材 筛选
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基于脂蛋白P80的滑液支原体抗体ELISA检测方法的建立及应用
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作者 王宇 李浩然 +6 位作者 温政 尚原冰 刘婷 丁铲 高崧 祁晶晶 于圣青 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期512-524,共13页
【目的】研究滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)脂蛋白P80的免疫反应性及其在MS血清抗体ELISA检测中的应用。【方法】对MS P80的氨基酸序列进行生物信息学分析、原核表达和纯化,并用免疫印迹法分析其与6种不同MS分离株阳性血清的免疫... 【目的】研究滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)脂蛋白P80的免疫反应性及其在MS血清抗体ELISA检测中的应用。【方法】对MS P80的氨基酸序列进行生物信息学分析、原核表达和纯化,并用免疫印迹法分析其与6种不同MS分离株阳性血清的免疫反应性以及与其他禽病原血清的交叉反应性;运用纯化的MS P80表达蛋白作为包被抗原建立了MS血清抗体的间接ELISA检测方法,对其敏感性和重复性进行检测;比较检测了与美国爱德士检测试剂盒对50份临床血清样品的阳性符合率。【结果】生物信息学分析预测MS P80蛋白为脂蛋白且含有信号肽,其在MS种内同源性高达98%−100%,与其他种属P80蛋白同源性在25%−34%之间,成功表达和纯化了MS P80重组蛋白(rMS P80);Western blotting分析表明纯化的rMS P80具有良好的免疫反应性和特异性;运用rMS P80建立的MS血清ELISA抗体检测方法可对不同株MS阳性血清进行抗体效价检测,而对其他禽病原阳性血清均无交叉反应性;该检测方法的批内变异系数小于5%,批间变异系数小于10%,重复性良好;与美国IDEXX检测试剂盒比较,本文建立的ELISA抗体检测方法敏感性更高,阳性符合率为75%,阴性符合率为89.47%,总样本符合率为86%。【结论】MS P80具有较好的免疫反应性、种内保守性和种间特异,并且可用作MS抗体检测的靶标抗原。 展开更多
关键词 脂蛋白 滑液支原体 免疫反应性 间接ELISA
碎米蕨叶马先蒿对小鼠肝肾和血液指标的影响
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作者 王军亮 尤延飞 +1 位作者 赵宝玉 刘宗平 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期389-395,共7页
为探讨碎米蕨叶马先蒿对动物机体的损害程度,以评价其安全性,本试验将采自新疆巴音布鲁克草原的碎米蕨叶马先蒿粉碎,自制含15%和30%的碎米蕨叶马先蒿草粉鼠粮,饲喂小鼠三个月以上,随机抽取小鼠血液进行生化指标天门冬氨酸氨基转移酶(AST... 为探讨碎米蕨叶马先蒿对动物机体的损害程度,以评价其安全性,本试验将采自新疆巴音布鲁克草原的碎米蕨叶马先蒿粉碎,自制含15%和30%的碎米蕨叶马先蒿草粉鼠粮,饲喂小鼠三个月以上,随机抽取小鼠血液进行生化指标天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、尿素(BUN)、肌酐CRE的测定和血常规红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、淋巴细胞绝对值(LYMPH#)、淋巴细胞(LYMPH)百分数、中性粒细胞(NEUT)比率和单核细胞(MONO)比率的测定。生化指标结果显示,高剂量组碎米蕨叶马先蒿对小鼠肝脏可能造成轻微损害,对小鼠肾脏可能造成损害;血液学检测结果显示,在试验第28天时WBC、LYMPH百分数、LYMPH#高剂量组极显著高于对照组(P<0.01),NEUT比率和MONO比率显著低于对照组(P<0.05)。在血液学检测整个试验期间,各测定指标都在不断波动,试验后期均趋于动态平衡。上述结果表明,30%碎米蕨叶马先蒿草粉鼠粮对小鼠肝脏可造成轻微损伤、对肾脏造成损伤,但不影响造血系统。 展开更多
关键词 碎米蕨叶马先蒿 血清生化 肝损伤 肾损伤 毒草
肠道微生物菌群调节中枢神经系统发育及相关疾病的研究进展
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作者 刘家奇 武琥琮 +3 位作者 任文凯 印遇龙 张东 朱国强 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2020年第3期329-337,共9页
人和动物的健康发展与定植在肠道内大量微生物的平衡密切相关且终身相伴.因此,机体与肠道微生物之间关联性功效的探究正日益受到人们的重视并被不断深入.肠道内共生微生物调节宿主的营养吸收和代谢、调控宿主免疫系统的形成和发展,与免... 人和动物的健康发展与定植在肠道内大量微生物的平衡密切相关且终身相伴.因此,机体与肠道微生物之间关联性功效的探究正日益受到人们的重视并被不断深入.肠道内共生微生物调节宿主的营养吸收和代谢、调控宿主免疫系统的形成和发展,与免疫系统共同维持宿主体内平衡.大量的研究数据表明,肠道微生物与中枢神经系统存在互作关系,并且形成双向通信系统,称之为脑-肠轴.肠道微生物可以通过调节神经系统来改变行为,甚至影响神经系统疾病的发生和发展、调节血脑屏障渗透性及脑内炎症反应等.本文从肠道微生物对脑部发育、功能、中枢神经系统相关疾病的影响等方面进行阐述. 展开更多
关键词 肠道微生物 中枢神经系统 脑-肠轴
硒对金黄色葡萄球菌诱导的奶牛乳腺上皮细胞自噬及胞内细菌增殖的影响
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作者 王亨 周钰奇 +5 位作者 毕崇亮 祝启成 崔路莹 孟霞 朱国强 李建基 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期91-96,共6页
为探讨硒对金黄色葡萄球菌(S.aureus)诱导的奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)自噬和细菌增殖的影响,本试验通过蛋白免疫印迹法检测自噬相关蛋白LC3、Atg5、Beclin-1和p62蛋白的表达,免疫荧光检测GFP-LC3与溶酶体的共定位,细菌平板计数检测胞内S.... 为探讨硒对金黄色葡萄球菌(S.aureus)诱导的奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)自噬和细菌增殖的影响,本试验通过蛋白免疫印迹法检测自噬相关蛋白LC3、Atg5、Beclin-1和p62蛋白的表达,免疫荧光检测GFP-LC3与溶酶体的共定位,细菌平板计数检测胞内S.aureus增殖情况。结果发现S.aureus感染后,细胞内自噬相关蛋白LC3、Atg5、Beclin-1和p62蛋白显著升高,GFP-LC3绿色聚点与溶酶体无明显共定位;硒添加后,能够显著或极显著降低S.aureus诱导的LC3和p62蛋白的表达,同时促进GFP-LC3与溶酶体的共定位,降低S.aureus的胞内增殖。综上所述,S.aureus感染诱导BMECs发生自噬,自噬体和溶酶体无法融合,自噬流阻塞。而硒促进自噬体和溶酶体融合,并缓解了自噬流的阻塞,降低S.aureus胞内增殖,这为临床金黄色葡萄球菌性乳腺炎的预防和治疗提供理论基础。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 奶牛乳腺上皮细胞 自噬 增殖
鸡胚原代软骨细胞的分离培养及表型鉴定
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作者 李赛慧 周佳桦 +5 位作者 张雨蓓 张松彬 卞建春 袁燕 刘宗平 顾建红 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期349-354,共6页
选取不同日龄的SPF鸡胚进行骨架染色,确定软骨最佳取材日龄为15日龄,分离关节软骨,采用胰蛋白酶和Ⅳ型胶原酶两步消化法获取软骨细胞。CCK-8法检测细胞增殖率,阿利新蓝染色及实时荧光定量PCR技术检测软骨细胞标志性基因表达来鉴定分离... 选取不同日龄的SPF鸡胚进行骨架染色,确定软骨最佳取材日龄为15日龄,分离关节软骨,采用胰蛋白酶和Ⅳ型胶原酶两步消化法获取软骨细胞。CCK-8法检测细胞增殖率,阿利新蓝染色及实时荧光定量PCR技术检测软骨细胞标志性基因表达来鉴定分离培养的软骨细胞。结果显示,分离培养的软骨细胞3~5 d时增殖较快,阿利新蓝染色阳性,能够表达sox9、colⅡ、acan、vegfA和mmp13等不同分化阶段标志性基因,且随着体外培养时间的增加,晚期表达基因vegfA和mmp13 mRNA表达上调。结果表明,分离培养的鸡胚软骨细胞具有软骨细胞表型,可作为家禽骨骼及钙磷代谢紊乱性疾病研究模型。本试验旨在建立鸡胚原代软骨细胞的体外培养体系,以期为家禽骨骼及钙磷代谢紊乱性疾病研究提供理论依据。 展开更多
关键词 鸡胚原代软骨细胞 骨架染色 阿利新蓝 Ⅱ型胶原 基质金属蛋白酶13
重组型番鸭细小病毒JH10株的分子特征解析 预览
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作者 王志仙 秘清灵 +6 位作者 凌珏怡 贾婧宇 鲍芳 王昱 王钜华 王建业 朱国强 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第2期66-71,共6页
为了解析番鸭细小病毒(MDPV)分离株JH10的分子特征,本研究对该毒株全基因组进行了扩增、测序、重组分析及遗传进化树的构建。结果显示:JH10株基因组由5071个核苷酸组成,P9启动子区和VP3基因内部约1.1 kb区域经历了重组,GPV鹅胚化弱毒株S... 为了解析番鸭细小病毒(MDPV)分离株JH10的分子特征,本研究对该毒株全基因组进行了扩增、测序、重组分析及遗传进化树的构建。结果显示:JH10株基因组由5071个核苷酸组成,P9启动子区和VP3基因内部约1.1 kb区域经历了重组,GPV鹅胚化弱毒株SYG61v参与了P9启动子区的重组,而GPV强毒株LH、B和SYG61v不同程度地参与了VP3基因内部的重组;以VP3基因重组片段构建遗传进化树,JH10株与8个经典型GPV株处于同一个进化分支中,而以毗邻的上下游非重组区片段分别构建的遗传进化树中,JH10株则与4个经典型MDPV株处于同一分支。本研究结果表明,JH10株为经典型MDPV和GPV之间的重组产物,该研究结果为进一步阐明重组型MDPV的致病机理奠定了基础。 展开更多
关键词 番鸭细小病毒 重组 末端倒置重复 P9启动子
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兽医学博士课程《实验技术专题》教学初探 预览
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作者 顾敏 徐利军 +3 位作者 陈素娟 秦涛 彭大新 王志强 《家畜生态学报》 北大核心 2020年第2期92-93,96,共3页
博士研究生是科学研究和创新工程的重要生力军,而实验技术水平是决定其科研创新能力的一个关键因素。本文以扬州大学兽医学院为例,从教学大纲的编写、授课形式及考核方式等方面,对兽医学博士研究生新增课程“实验技术专题”的教学进行... 博士研究生是科学研究和创新工程的重要生力军,而实验技术水平是决定其科研创新能力的一个关键因素。本文以扬州大学兽医学院为例,从教学大纲的编写、授课形式及考核方式等方面,对兽医学博士研究生新增课程“实验技术专题”的教学进行了初步探索,以期进一步提高博士研究生的培养质量,为其今后从事科研创新工作奠定坚实基础。 展开更多
关键词 兽医 博士 实验技术专题 教学
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一种基于NanoLuc荧光素酶报告布鲁菌基因启动子活性质粒的构建及应用
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作者 连拯民 田明星 +3 位作者 尹伊 石文弢 包世俊 于圣青 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期322-329,共8页
[背景]布鲁菌病是由布鲁菌感染引起的一种人兽共患传染病,对畜牧业发展和人类健康有着巨大的威胁。利用新型报告基因NanoLuc荧光素酶构建一种可以检测布鲁菌基因启动子活性的质粒,对于研究布鲁菌毒力基因的调控表达具有重要意义。[目的... [背景]布鲁菌病是由布鲁菌感染引起的一种人兽共患传染病,对畜牧业发展和人类健康有着巨大的威胁。利用新型报告基因NanoLuc荧光素酶构建一种可以检测布鲁菌基因启动子活性的质粒,对于研究布鲁菌毒力基因的调控表达具有重要意义。[目的]制备NanoLuc荧光素酶多克隆抗体,构建一种基于NanoLuc荧光素酶报告布鲁菌基因启动子活性的质粒,并通过测定bcsp31基因启动子和virB启动子活性验证该方法的可行性。[方法]构建NanoLuc荧光素酶原核表达载体pET-Nluc,纯化蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体;以广宿主质粒pBBR1MCS为骨架,构建质粒pNluc、pBcsp31-Nluc和pVirB-Nluc,通过电转化构建S2308(Nluc)、S2308(Bcsp31-Nluc)和S2308(VirB-Nluc)重组菌株,在体外培养条件下测定bcsp31基因启动子和virB启动子活性;比较分析virB启动子在胞内感染条件下和体外培养条件下的活性。[结果]通过原核表达获得NanoLuc荧光素酶重组蛋白,并制备得到效价高于1:100 000的多克隆抗体;成功构建pNluc、pBcsp31-Nluc和pVirB-Nluc质粒以及S2308(Nluc)、S2308(Bcsp31-Nluc)和S2308(VirB-Nluc)重组菌株;体外培养条件下测定bcsp31基因启动子和virB启动子活性,结果显示pNluc质粒可以精确报告其活性;测定virB启动子在胞内诱导条件下和体外培养条件下的活性,结果显示virB启动子活性在胞内感染条件下明显增强。[结论]构建了基于NanoLuc荧光素酶报告布鲁菌基因启动子活性的质粒,并验证其可以精确反映布鲁菌基因启动子活性,为研究布鲁菌毒力基因以及揭示其致病机制奠定了基础。 展开更多
关键词 NanoLuc荧光素酶 布鲁菌 启动子活性 质粒
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