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茶树叶片蛋白双向电泳体系建立与应用 预览
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作者 周琳 申加枝 +5 位作者 段玉 王婷 王玉花 朱旭君 马媛春 房婉萍 《亚热带植物科学》 2019年第3期220-226,共7页
为开展茶树Camellia sinensis 低温和干旱胁迫下差异蛋白的分离和鉴定,以抗逆性较强的茶树品种‘迎霜’为试材,通过对提取方法、IPG 胶条pH 范围、上样量、分离胶浓度、染色方法的比较,筛选适用于茶树叶片的蛋白质双向电泳体系。结果表... 为开展茶树Camellia sinensis 低温和干旱胁迫下差异蛋白的分离和鉴定,以抗逆性较强的茶树品种‘迎霜’为试材,通过对提取方法、IPG 胶条pH 范围、上样量、分离胶浓度、染色方法的比较,筛选适用于茶树叶片的蛋白质双向电泳体系。结果表明,采用TCA-丙酮法或Tris-HCl 法提取叶片总蛋白,选用17 cm pH 4~7IPG 胶条用于等电聚焦,选择1.6~2.2 mg 上样量、13.5%聚丙烯酰胺凝胶进行分离,随后通过高敏考马斯亮蓝R-250 法染色;最终,叶片各分子量的蛋白充分分离,获得的双向电泳图谱分辨率高、背景清晰、重复性好,适用于‘迎霜’低温和干旱胁迫下叶片差异蛋白分析。 展开更多
关键词 茶树 叶片 蛋白双向电泳 体系建立 应用
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信阳茶区土壤养分的演变
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作者 李贞霞 陈倩倩 +1 位作者 任秀娟 黎星辉 《土壤通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期341-347,共7页
为了解信阳茶区茶园土壤养分丰缺现状,为化肥减施提供理论依据,本研究监测了不同植茶年限(0、10、20、30、40年)0~20 cm土壤的养分及土壤交换性离子,分析其随植茶年限的变化特性。结果表明:茶园土壤有机质、碱解氮、有效钾与植茶年限呈... 为了解信阳茶区茶园土壤养分丰缺现状,为化肥减施提供理论依据,本研究监测了不同植茶年限(0、10、20、30、40年)0~20 cm土壤的养分及土壤交换性离子,分析其随植茶年限的变化特性。结果表明:茶园土壤有机质、碱解氮、有效钾与植茶年限呈显著正相关,有效磷与植茶年限呈显著负相关;茶园土壤有机质含量达36.15 g kg^-1,达理想状态;碱解氮、有效钾、有效磷含量都表现为富集;土壤有机质与碱解氮和有效钾呈显著正相关,与有效磷呈显著负相关;茶园氮肥以铵态氮(NH4^+-N)为主,氮肥形态可影响土壤pH及交换性Al^3+、Ca^2+、Mg^2+的变化,有机质直接影响交换性K^+的变化。信阳茶区茶园土壤养分达到并超过优质高产高效茶园土壤养分需求,其氮磷钾肥明显呈现施入过量后的积累现象。该研究结果可以为茶园土壤可持续利用及茶园减施化肥提供依据。 展开更多
关键词 茶园 施肥 土壤养分 土壤PH 植茶年限
茶树漆酶基因CsLAC4和CsLAC12的克隆与表达分析
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作者 黄晨 陈帅 +3 位作者 程小芳 张新 黎星辉 孙晓玲 《植物保护学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期1069-1077,共9页
为探究漆酶(laccase,LAC)基因在茶树防御植食性昆虫为害中的作用,以龙井43茶树为材料,采用反转录PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术克隆得到了2条漆酶基因CsLAC4和CsLAC12的完整cDNA序列,并通过实... 为探究漆酶(laccase,LAC)基因在茶树防御植食性昆虫为害中的作用,以龙井43茶树为材料,采用反转录PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术克隆得到了2条漆酶基因CsLAC4和CsLAC12的完整cDNA序列,并通过实时荧光定量RCR技术测定其在茶树不同组织中的表达模式以及不同处理下表达量的变化。结果表明,茶树漆酶基因CsLAC4和CsLAC12的序列全长分别为1 665 bp和1 743 bp,分别编码555个和581个氨基酸残基。预测蛋白分子量分别为61.1 kD和63.9 kD,理论等电点分别为8.34和9.18;均具有植物漆酶的3个典型离子结合域;在系统进化树上聚在不同分支。CsLAC4和CsLAC12均在茶树茎中相对表达量最高,分别为2.62和1.33,CsLAC4在茶树花和种子中相对表达量最低,分别为0.58和0.66,CsLAC12在茶树种子中相对表达量最低,仅为0.20;与对照相比,CsLAC4的相对表达量能够在茉莉酸处理3 h、机械损伤和茶尺蠖Ectropis obliqua幼虫取食处理12、24 h时被显著诱导;但CsLAC12的相对表达量在茉莉酸处理12 h和机械损伤处理12、24 h时被显著抑制,茶尺蠖幼虫取食处理6 h时能够诱导其相对表达量升高。表明CsLAC4和CsLAC12在茶树防御植食性昆虫为害中作用不同,但都在对茶尺蠖取食的响应中具有重要作用。 展开更多
关键词 茶树 漆酶 茶尺蠖 表达分析
茶树鸟苷酸交换因子 CsRopGEF1 和 CsRopGEF3基因的克隆及表达特性 预览
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作者 赵悦 申加枝 +5 位作者 马媛春 文博 周琳 朱旭君 王玉花 房婉萍 《植物资源与环境学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期1-10,共10页
从茶树〔Camellia sinensis (Linn.) O. Ktze.〕品种‘龙井长叶’(‘Longjingchangye’)叶片中克隆获得鸟苷酸交换因子 RopGEF 的编码基因 CsRopGEF1 和 CsRopGEF3;用生物信息学方法分析了这 2 个基因编码的氨基酸序列的同源性及理... 从茶树〔Camellia sinensis (Linn.) O. Ktze.〕品种‘龙井长叶’(‘Longjingchangye’)叶片中克隆获得鸟苷酸交换因子 RopGEF 的编码基因 CsRopGEF1 和 CsRopGEF3;用生物信息学方法分析了这 2 个基因编码的氨基酸序列的同源性及理化性质;并用 qRT-PCR 研究了 CsRopGEF1 和 CsRopGEF3 基因在茶树不同组织中的表达模式及其对外源ABA 处理的响应模式. 结果显示:茶树 CsRopGEF1 和CsRopGEF3 基因全长分别为1 844 和1 509 bp,分别包含长度1 731 和 1 434 bp 的开放阅读框,各编码 576 和 477 个氨基酸. 茶树 CsRopGEF1 和 CsRopGEF3 基因编码的氨基酸序列均含有保守的 PRONE 结构域,其中均包含保守基序 Motif 1 至 Motif 7;分子式分别为 C2797H4402N762O856 S32和C2356H3696N648O752S29,理论相对分子质量分别为 63 420 和54 060,理论等电点分别为 pI 6. 69 和 pI 5. 10,不稳定系数均大于 40,亲水性平均系数分别为-0. 368 和-0. 552,并存在多个磷酸化位点,以丝氨酸磷酸化位点最多,表明这2 个基因编码的氨基酸序列均属于不稳定的酸性、亲水性蛋白,且其功能可能受磷酸化调控. 茶树 CsRopGEF1 和CsRopGEF3 基因编码的氨基酸序列与水稻(Oryza sativa Linn.)等植物的RopGEF1 和RopGEF3 氨基酸序列的相似度均在 75%以上,且与双子叶植物同类氨基酸序列的同源性较高,而与单子叶植物同类氨基酸序列的同源性较低.qRT-PCR 分析结果显示:茶树 CsRopGEF1 基因的相对表达量在茎中最高、叶片中最低,且差异显著(P〈0. 05);而CsRopGEF3 基因的相对表达量在根和茎中均较高,且均显著高于叶片,表明 CsRopGEF1 和 CsRopGEF3 基因表达存在组织特异性. 经 100 μmol·L^-1外源 ABA 处理后,茶树 CsRopGEF1 基因的相对表达量整体显著下调,而CsRopGEF3基因的相对表达量则整体上调,说明这 2 个基因对外源 ABA 的响应模式存在差异. 根据研究结果,推测茶树 CsRopGEF1 和 CsRopGEF3 基因在 ABA 展开更多
关键词 茶树 RopGEF基因 理化特性 同源性 表达特性
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SNP分子标记及其在木本植物遗传育种的应用 预览
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作者 周琳 段玉 +4 位作者 文博 马媛春 朱旭君 王玉花 房婉萍 《亚热带植物科学》 2018年第2期187-193,共7页
木本植物因其生命周期长、基因组杂合度高、基因组较大、遗传背景不清晰等特性,制约了其研究进程。随着现代生物技术的发展,DNA分子标记技术在木本植物研究领域的应用越来越多,其中单核苷酸多态性(SNP)作为第三代分子标记技术以其高... 木本植物因其生命周期长、基因组杂合度高、基因组较大、遗传背景不清晰等特性,制约了其研究进程。随着现代生物技术的发展,DNA分子标记技术在木本植物研究领域的应用越来越多,其中单核苷酸多态性(SNP)作为第三代分子标记技术以其高效、快速、稳定、可靠等诸多优点得到广泛应用。本文简述SNP标记的特点、开发方法、检测方法及其在木本植物遗传多样性和亲缘关系分析、品种鉴定、连锁图谱构建和辅助育种等方面的研究进展,为更好地应用SNP技术开展木本植物研究提供参考。 展开更多
关键词 木本植物 SNP标记 遗传多样性分析 品种鉴定 指纹图谱构建 辅助育种
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信阳茶区不同植茶年限土壤酶活性演变 预览
6
作者 李贞霞 陈倩倩 +2 位作者 胡宏赛 王广印 黎星辉 《生态环境学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期1076-1081,共6页
为了探讨信阳茶区不同植茶年限茶园土壤酶活性与土壤养分的关系,采集了不同植茶年限(0、10、20、30、40a)0-20cm土层土壤,分析4种土壤酶活性随土壤养分的演变特征.结果表明,过氧化氢酶、蔗糖酶活性与植茶年限呈显著负相关,与茶园土壤p... 为了探讨信阳茶区不同植茶年限茶园土壤酶活性与土壤养分的关系,采集了不同植茶年限(0、10、20、30、40a)0-20cm土层土壤,分析4种土壤酶活性随土壤养分的演变特征.结果表明,过氧化氢酶、蔗糖酶活性与植茶年限呈显著负相关,与茶园土壤pH呈显著正相关;酸性磷酸酶活性与植茶年限相关性不显著;植茶土壤脲酶活性显著高于未植茶土壤,但与植茶年限相关性不显著.过氧化氢酶和蔗糖酶与土壤碱解氮、有机质、速效钾、NH^4+-N呈显著负相关,与速效磷、NO3-N的相关性不显著;酸性磷酸酶和脲酶与土壤pH、土壤养分相关性不显著.逐步线性回归分析表明,土壤养分对过氧化氢酶影响最显著的为碱解氮、速效钾与NH^4+-N,对蔗糖酶影响最显著的为有机质.土壤交换性离子对过氧化氢酶、蔗糖酶、脲酶影响最显著的是交换性Mg^2+;对酸性磷酸酶影响最显著的是交换性K+.土壤酶的几何平均数(GMea)随着植茶年限的延长而降低,说明随着植茶年限的延长,土壤质量下降.灰色关联度分析表明,与GMea关联度最高的4个因子为:交换性Mg^2+、土壤pH、NO3^-N、速效磷.研究结果可为茶园土壤分析与评价、茶园土壤施肥及可持续生产提供科学参考. 展开更多
关键词 茶园 土壤酶活性 养分 交换性离子
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基于EST和GSS序列的茶树miRNA及其靶基因数据挖掘 预览
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作者 张玥 熊飞 +2 位作者 胡雲飞 柯子星 房婉萍 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2018年第10期1999-2006,共8页
microRNA(miRNA)是一类长19~24个碱基的小分子内源性非编码单链RNA,通过介导靶基因的裂解或抑制靶基因的翻译,在植物的发育、新陈代谢、应激响应等方面起着重要的调控作用,在进化上具有高度的保守性。据此本研究以miRBase注册的全部... microRNA(miRNA)是一类长19~24个碱基的小分子内源性非编码单链RNA,通过介导靶基因的裂解或抑制靶基因的翻译,在植物的发育、新陈代谢、应激响应等方面起着重要的调控作用,在进化上具有高度的保守性。据此本研究以miRBase注册的全部成熟植物miRNA序列为探针,基于NCBI数据库中茶树表达序列标签(EST)和基因组勘测序列(GSS)进行同源搜索和miRNA二级结构分析,总共发现7条茶树的miRNA,分属于6个不同的miRNA家族。通过靶基因的预测分析表明,这些miRNA可能调节28种靶标基因,功能涉及新陈代谢、生长发育、胁迫应答及转录,为茶树miRNA的试验鉴定和功能研究提供更详细精确的范围,为进一步探究茶树miRNA的调控机理奠定基础。 展开更多
关键词 MICRORNA 茶树 EST GSS 靶基因
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冠突散囊菌和植物乳杆菌联合发酵对绿茶液态饮料品质的影响 预览
8
作者 涂政 梅慧玲 +6 位作者 李欢 刘馨秋 Emmanuel Arkorful 张彩丽 陈暄 孙康 黎星辉 《茶叶科学》 CSCD 北大核心 2018年第5期496-507,共12页
为了抑制冠突散囊菌发酵绿茶液态饮料中儿茶素的降解,本研究采用植物乳杆菌和冠突散囊菌对绿茶液态饮料进行联合发酵,试验通过响应面法优化了联合发酵绿茶液态饮料工艺,并采用高效液相色谱(HPLC)法和顶空固相微萃取串联气质联用(HS-SPME... 为了抑制冠突散囊菌发酵绿茶液态饮料中儿茶素的降解,本研究采用植物乳杆菌和冠突散囊菌对绿茶液态饮料进行联合发酵,试验通过响应面法优化了联合发酵绿茶液态饮料工艺,并采用高效液相色谱(HPLC)法和顶空固相微萃取串联气质联用(HS-SPME/GS-MS)法分别检测了联合发酵绿茶液态饮料中儿茶素含量和香气成分。结果表明,在干茶添加量10g·L^-1、冠突散囊菌添加量10mL·L^-1的前提下,联合发酵绿茶液态饮料的最佳工艺条件为植物乳杆菌添加量20mL·L^-1、蔗糖添加量75g·L^-1、30℃下静置发酵3d。在此工艺下联合发酵绿茶液态饮料中总儿茶素含量为1419.94μg·mL^-1,与冠突散囊菌发酵绿茶液态饮料(848.72μg·mL^-1)相比,显著增加(P<0.05);且醇类化合物(30.27%)、醛类化合物(15.25%)、烃类化合物(11.35%)、酯类化合物(9.86%)和酮类化合物(9.01%)含量与未发酵绿茶液态饮料相比均显著增加(P<0.05)。 展开更多
关键词 植物乳杆菌 冠突散囊菌 香气成分 儿茶素 绿茶液态饮料
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越南茶叶生产现状与展望 预览
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作者 Tran Xuan Hoang Hoang Ha Nguyen +4 位作者 Dang Van Thu 刘馨秋 陈暄 孙康 黎星辉 《中国茶叶》 2018年第6期57-59,共3页
调查分析了越南茶园面积、茶叶产量、加工技术、产品结构、质量管理与食品安全、内销与外销等多方面现状。提出未来越南茶叶发展中需控制茶园面积、推广优良茶树品种、加大设备和管理投入、提升茶叶品质、调整茶叶产品结构。
关键词 越南 茶叶 生产 现状 展望
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茶树磷酸烯醇式丙酮酸转运子CsPPT2基因的克隆和分析 预览 被引量:1
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作者 纪志芳 甘玉迪 +4 位作者 陈常颂 杨鼎俊 孙康 黎星辉 陈暄 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期149-159,共11页
以茶树(Camelliasinensis)白叶1号为材料,应用RT-PCR和RACE技术克隆获得茶树磷酸烯醇式丙酮酸转运子家族一个基因CsPPT2的cDNA序列,并与茶树体内另一个磷酸烯醇式丙酮酸转运子家族的基因CsPPT1在不同时期和不同部位的表达进行比较。... 以茶树(Camelliasinensis)白叶1号为材料,应用RT-PCR和RACE技术克隆获得茶树磷酸烯醇式丙酮酸转运子家族一个基因CsPPT2的cDNA序列,并与茶树体内另一个磷酸烯醇式丙酮酸转运子家族的基因CsPPT1在不同时期和不同部位的表达进行比较。CsPPT2的cDNA全长1469bp,其中开放阅读框(ORF)为1218bp,编码406个氨基酸。通过生物学信息分析表明,CSPPT2蛋白分子量为44.6kD,理论等电点为9.90,CsPPT2有6个跨膜区,属于疏水性叶绿体跨膜蛋白。聚类分析显示,茶树磷酸烯醇式丙酮酸转运子家族分为2个亚组,而CsPPT1与CsPPT2属于不同亚组。荧光定量结果分析表明,两个基因可能在茶树体内功能不同,CsPPT2在所考察的组织中均有表达,且在根和成熟叶片中表达量远大于CsPPT1;CsPPT1在茎和复绿前的幼嫩芽叶中表达量高于CsPPT2。在白化期起始时CsPPT2有短暂的升高,但伴随白化受到较大的抑制,表明CsPPT2的表达抑制可能是白叶1号低儿茶素高氨基酸品质形成的关键因素。 展开更多
关键词 茶树 白叶1号 磷酸烯醇式丙酮酸转运子 CsPPT2 表达分析
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自然越冬期间茶树叶片生理生化指标和解剖结构的变化 预览 被引量:3
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作者 曾光辉 周琳 黎星辉 《植物资源与环境学报》 CSCD 北大核心 2017年第1期63-68,共6页
为探讨自然越冬条件下茶树〔 Camellia sinensis (Linn . ) O. Ktze.〕 叶片的生理生化指标和解剖结构变化, 以种 植于南京的茶树品种‘龙井长叶’(‘ Long jingchangye’)的 10年生植株为研究对象, 对自然越冬期间( 2012年 11 ... 为探讨自然越冬条件下茶树〔 Camellia sinensis (Linn . ) O. Ktze.〕 叶片的生理生化指标和解剖结构变化, 以种 植于南京的茶树品种‘龙井长叶’(‘ Long jingchangye’)的 10年生植株为研究对象, 对自然越冬期间( 2012年 11 月 15 日至2013年 3 月 31 日) 其叶片的叶绿素、 可溶性蛋白质、 可溶性糖、 游离脯氨酸和丙二醛( MDA )含量, 超氧化物 歧化酶( S0D )、 过氧化氢酶( CAT )和过氧化物酶( POD)活性, 以及上表皮、 下表皮、 栅栏组织和海绵组织厚度及上 表皮厚度与海绵组织厚度的比值进行了比较分析.结果表明:自然越冬期间, 叶片的叶绿素含量随时间推移呈现 先降低后升高的变化趋势, 而叶片的可溶性蛋白质、 可溶性糖、 游离脯氨酸和M D A含量以及SOD 、 CAT和 POD 活 性则总体上呈现先升高后降低的变化趋势, 并且均在2013年1月15日达到其各自的最低值或最高值.与人冬前 相比, 越冬后叶片的叶绿素和可溶性糖含量显著降低, M D A含量略降低, 可溶性蛋白质含量显著升高, 游离脯氨酸 含量及S0D、CAT和 P0D 活性均略升高. 自然越冬期间, 叶片的上表皮、 下表皮、 栅栏组织和海绵组织厚度随时间 推移总体上呈现先降低后升高的变化趋势, 上表皮和栅栏组织厚度在2013年 2 月 15 日达到最低值, 而下表皮和海 绵组织厚度则在2013年 1 月 30 日达到最低值;上表皮厚度与海绵组织厚度的比值呈波动变化趋势.与人冬前相 比, 人冬后叶片的上表皮、 下表皮、 栅栏组织和海绵组织厚度均显著降低, 而上表皮厚度与海绵组织厚度的比值略 降低.研究结果显示: 自然越冬条件下, 茶树具有一定的耐寒能力, 为了减轻低温对其机体的伤害可通过增加可溶 性蛋白质、 可溶性糖和游离脯氨酸合成及提高相关抗氧化酶活性来调解越冬期间的代谢平衡. 展开更多
关键词 茶树 自然越冬 抗寒性 生理生化指标 解剖结构
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茶树磷转运蛋白基因CsPT4的克隆、亚细胞定位及表达分析 预览
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作者 辛华洪 王伟东 +3 位作者 王明乐 马青平 甘玉迪 黎星辉 《茶叶科学》 CSCD 北大核心 2017年第5期493-502,共10页
茶园中磷肥的利用效率取决于茶树体内与磷元素吸收、转运及生理利用等相关蛋白的协同调控,而磷转运蛋白(Phosphatetransporterproteins,Phts)在此过程中起着关键的调控作用。本研究以茶树品种龙井长叶(Camelliasinensiscv.Longjing... 茶园中磷肥的利用效率取决于茶树体内与磷元素吸收、转运及生理利用等相关蛋白的协同调控,而磷转运蛋白(Phosphatetransporterproteins,Phts)在此过程中起着关键的调控作用。本研究以茶树品种龙井长叶(Camelliasinensiscv.Longjing-changye)为试验材料,采用同源克隆的方法首次克隆获得茶树磷转运蛋白编码基因CsPht1:4(CsPT4)的全长cDNA。该基因全长1642bp,开放阅读框(ORF)1620bp(GenBank登录号:KY132100),编码539个氨基酸。生物信息学分析显示,CsPT4基因编码蛋白分子量为59.12kD,理论等电点(pI)为8.51;具有典型的Pht1家族特性:“6-亲水-6”跨膜结构。亚细胞定位结果显示,该蛋白分布于质膜上,与Softberry软件预测结果一致。荧光定量PCR表明:CsPT4在正常生长的茶树根、茎、嫩叶、老叶中均有表达,在老叶中的表达量较高,在根部表达量最低。低磷处理,根和叶中CsPT4上调表达水平均先上升后下降;根部CsPT4表达量48h内各个时间点均高于叶部。缺磷处理,根和叶中CsPT4上调表达水平均升高;根部和叶部分别在72h和48h达最大值。本研究为茶树响应低磷的分子机制提供了参考。 展开更多
关键词 茶树 磷转运蛋白 基因克隆 亚细胞定位 表达分析
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EGCG纳米硒的稳定性及其对硒吸收利用的影响 预览
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作者 王乐 李欢 +3 位作者 李嘉豪 陈暄 黎星辉 孙康 《茶叶科学》 CSCD 北大核心 2017年第4期373-382,共10页
使用维生素C(VitaminC,Vc)作为氧化还原剂和(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)作为分散剂,成功制备了纳米硒(EGCG-SeNPs)。使用透射电子显微镜(TEM)和激光粒度分析仪电动电势仪(Zetasizer)测定的EGCG-SeNPs是平均直径为(3... 使用维生素C(VitaminC,Vc)作为氧化还原剂和(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)作为分散剂,成功制备了纳米硒(EGCG-SeNPs)。使用透射电子显微镜(TEM)和激光粒度分析仪电动电势仪(Zetasizer)测定的EGCG-SeNPs是平均直径为(35±0.12)nm、Zeta电位为-0.05mV的球形颗粒。EGCG-SeNPs在pH1.0的强酸或70℃高温环境下发生聚集,其颗粒大小增加大约10倍。而且,EGCG-SeNPs中的EGCG作为分散剂具有良好的稳定性。通过分别灌胃25、50、100μg·kg-1(以含Se量计算)的亚硒酸钠和EGCG-SeNPs发现,肝脏和肾脏中的硒含量在50、100μg·kg-1的硒处理后均显著增加;在血清、肝脏和肾脏中,所有处理组的谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性均显著增加,且具有剂量依赖效应。然而,在相同剂量的亚硒酸钠和EGCG-SeNPs处理组中,硒含量和GPx活性之间没有显著差异。因此可以得出,Vc作为氧化还原剂制备的EGCG-SeNPs可能具有和亚硒酸钠相似的生物利用度。 展开更多
关键词 (-)-表没食子儿茶素-3-没食子酸酯 纳米颗粒 生物利用度 谷胱甘肽过氧化物酶活性
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茶树两个Dof转录因子的分离及其在温度胁迫中的响应分析 预览 被引量:3
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作者 李辉 黄蔚 +3 位作者 刘志薇 王永鑫 吴致君 庄静 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期312-322,共11页
茶树是一种重要的经济作物,温度胁迫对茶叶生产影响较大.本研究以茶树品种迎霜为实验材料,克隆获得2个编码Dof转录因子的基因CsDof1和CsDof2.序列分析显示,CsDof1含有1 389 bp,编码463个氨基酸;CsDof2含有1 458 bp,编码486个氨基酸.CsD... 茶树是一种重要的经济作物,温度胁迫对茶叶生产影响较大.本研究以茶树品种迎霜为实验材料,克隆获得2个编码Dof转录因子的基因CsDof1和CsDof2.序列分析显示,CsDof1含有1 389 bp,编码463个氨基酸;CsDof2含有1 458 bp,编码486个氨基酸.CsDof1和CsDof2转录因子都具有典型的锌指结构域,分别位于第133-195和124-186个氨基酸位点之间.对CsDof1和CsDof2转录因子理化性质、亲/疏水性、二级和三级结构分析显示,两者都是亲水性蛋白且显偏碱性.空间结构分析显示,CsDof1和CsDof2均有1个α-螺旋,且Dof结构域的位点完全相同,均有4个半胱氨酸残基.实时定量PCR表明,CsDof1和CsDof2在不同茶树品种、不同温度胁迫下均能诱导表达,且表达呈现差异. 展开更多
关键词 茶树 Dof转录因子 锌指结构 温度胁迫 基因表达
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茶树转录因子基因CsDREB-A4的克隆与温度胁迫响应的分析 预览 被引量:3
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作者 刘志薇 熊洋洋 +4 位作者 李彤 严雅君 韩洪润 吴致君 庄静 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期24-26,27-34共11页
基于本实验室茶树品种迎霜的转录组数据,通过PCR 方法从迎霜的DNA 中克隆得到CsDREB-A4 基因.分析显示,该基因含开放阅读框长708 bp,编码235 个氨基酸,含有AP2/ERF 家族转录因子典型的保守AP2结合域,并且与大豆、番茄、葡萄、拟南芥等的... 基于本实验室茶树品种迎霜的转录组数据,通过PCR 方法从迎霜的DNA 中克隆得到CsDREB-A4 基因.分析显示,该基因含开放阅读框长708 bp,编码235 个氨基酸,含有AP2/ERF 家族转录因子典型的保守AP2结合域,并且与大豆、番茄、葡萄、拟南芥等的DREB 转录因子有高度同源性.从进化树、亲/疏水性、无序化特性、二级和三级结构等方面进行预测与分析,结果表明,该转录因子属于AP2/ERF 家族中的DREB 亚族的A4 组,大多数氨基酸属亲水性氨基酸,无序化特征比较明显,三级结构与AtERF1 相似.利用实时荧光定量PCR 分析表明,在迎霜、安吉白茶、云南十里香3 个茶树品种中CsDREB-A4 基因均受高温、低温诱导表达.在4℃处理下,在上述3 个茶树品种中CsDREB-A4 基因表达量均在24 h 时达到最大值,分别为对照的23、4、43 倍,并且CsDREB-A4 基因在迎霜和云南十里香中均比安吉白茶的基因表达上调时间更长,上调程度更大.在38℃处理下,CsDREB-A4 基因在迎霜和云南十里香中表达受抑制,均只在8 h 时表达量高于对照,而在安吉白茶中表达量显著增加,在12 h 时高达对照的2 720 倍. 展开更多
关键词 茶树 转录因子 DREB类 进化分析 温度胁迫 表达分析
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施肥结构对茶园土壤氮素营养及茶叶产量品质的影响 预览 被引量:12
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作者 朱旭君 王玉花 +2 位作者 张瑜 肖润林 黎星辉 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期248-254,共7页
通过设置施氮水平、有机肥与化肥配施比双因素田间试验,研究了不同施肥结构对茶园土壤有机质和氮素营养、春茶产量和品质的影响。结果表明,与不施肥处理相比,各种施肥处理均能有效提高茶园土壤有机质和全氮含量,且均在900 kg·hm-2... 通过设置施氮水平、有机肥与化肥配施比双因素田间试验,研究了不同施肥结构对茶园土壤有机质和氮素营养、春茶产量和品质的影响。结果表明,与不施肥处理相比,各种施肥处理均能有效提高茶园土壤有机质和全氮含量,且均在900 kg·hm-2的施氮水平下75%有机肥+25%化肥处理效果最为显著;施肥可以显著提高春茶芽叶密度、百芽重等产量指标;有机肥比例高于25%的氮素处理能显著提高春茶的品质指标,有机肥比例50%以上时效果更好。 展开更多
关键词 施肥结构 茶园 氮素营养 茶叶产量 茶叶品质
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内生真菌短密木霉对茶树修剪叶降解及土壤真菌的影响 被引量:6
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作者 胡雲飞 李荣林 +2 位作者 杨亦扬 张玥 黎星辉 《生态学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期820-825,共6页
通过向盆栽土壤中分别添加茶树修剪叶和无菌水(CK),茶树修剪叶和灭菌短密木霉菌发酵液(BY),茶树修剪叶、短密木霉菌和无菌水(FG),茶树修剪叶、短密木霉菌和灭菌发酵液(BF),研究茶树内生真菌短密木霉菌(Trichoderma brevicompac... 通过向盆栽土壤中分别添加茶树修剪叶和无菌水(CK),茶树修剪叶和灭菌短密木霉菌发酵液(BY),茶树修剪叶、短密木霉菌和无菌水(FG),茶树修剪叶、短密木霉菌和灭菌发酵液(BF),研究茶树内生真菌短密木霉菌(Trichoderma brevicompactum)对茶树修剪叶的降解作用,同时利用变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)检测土壤真菌的变化。结果表明:添加短密木霉菌后能加速茶树修剪叶软化,提高褐化程度;处理60 d后,与CK组相比,FG处理组中茶树修剪叶纤维素降解率增加了18.16%;而BF处理组相对于BY增加了19.02%。FG和BF处理组中促进木质素降解效应较为明显,30~45 d木质素的降解速率加快;与CK和BY相比,在处理60 d后木质素降解率分别增加了12.49%和9.61%。处理前期,FG和BF组的土壤纤维素酶活性和木质素酶活性要远高于CK和BY;处理后期则稍低于对照组,但差异不明显。处理60 d后各处理组之间土壤真菌群落数量存在一定差异,但群落结构较相似。可见,短密木霉菌能促进茶树修剪叶的降解,对土壤真菌群落影响较小。 展开更多
关键词 纤维素 木质素 酶活性 真菌群落
茶树修剪物对茶园土壤真菌群落多样性影响研究 预览 被引量:2
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作者 袁赛艳 陈暄 +3 位作者 房婉萍 王玉花 朱旭君 黎星辉 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期255-262,共8页
茶树修剪物直接还田是茶园管理中常见的栽培措施。本文通过提取不同处理的土壤样品总DNA,以未处理土壤样品为对照,利用变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE),研究添加茶树修剪物对茶园土壤真菌群落结构多样性的影响。结果显示,各处理土壤样品的... 茶树修剪物直接还田是茶园管理中常见的栽培措施。本文通过提取不同处理的土壤样品总DNA,以未处理土壤样品为对照,利用变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE),研究添加茶树修剪物对茶园土壤真菌群落结构多样性的影响。结果显示,各处理土壤样品的DGGE图谱中发现许多公共条带,这些共有条带主要属于Pezizomycotina门、Basidiomycota门、Mortierellomycotina门和Mucoromycotina门;通过DGGE的条带数和亮度进行真菌群落多样性各项指标的比较,显示各处理的丰富度指数和香农-威纳指数均低于对照,表明茶树修剪物的降解产物和茶树本身固有的酚类物质对茶园的真菌群落有一定的抑制作用。 展开更多
关键词 茶树修剪物 PCR-DGGE 群落结构 多样性
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茶树磷酸烯醇式丙酮酸转运子基因CsPPT的克隆与表达分析 预览 被引量:2
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作者 赵真 陈暄 +3 位作者 王明乐 王伟东 Najeeb Ahmed 黎星辉 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期491-500,共10页
以白叶1号为试验材料,通过RT-PCR和RACE技术克隆获得茶树磷酸烯醇式丙酮酸转运子基因CsPPT(GenBank登录号:KJ652972).CsPPT完整ORF长度为1 227 bp,编码408个氨基酸,蛋白分子量为44.7 kDa,理论等电点为10.16;无信号肽位点,属于非分泌... 以白叶1号为试验材料,通过RT-PCR和RACE技术克隆获得茶树磷酸烯醇式丙酮酸转运子基因CsPPT(GenBank登录号:KJ652972).CsPPT完整ORF长度为1 227 bp,编码408个氨基酸,蛋白分子量为44.7 kDa,理论等电点为10.16;无信号肽位点,属于非分泌型蛋白;建立了茶树CsPPT蛋白的系统发育树;磷酸化修饰预测该蛋白质多肽链中共有26个磷酸化位点;TMHMM预测表明CsPPT蛋白为跨膜蛋白;亚细胞定位发现,CsPPT蛋白定位于叶绿体上,推测CsPPT蛋白可能定位于叶绿体膜上.荧光定量PCR结果表明CsPPT基因在茶树花中表达量最高,其次为芽、叶和嫩茎,根中最低. 展开更多
关键词 茶树 磷酸烯醇式丙酮酸转运子 基因克隆 亚细胞定位 表达分析
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茶树NADPH氧化酶基因的克隆、亚细胞定位与表达分析 被引量:7
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作者 王明乐 王伟东 +1 位作者 赵真 黎星辉 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期95-103,共9页
以茶树(Camellia sinensis)‘迎霜’为试验材料,采用同源克隆的方法,利用RACE和RT-PCR技术获得茶树NADPH氧化酶基因Cs RBOHA的c DNA全长(Gen Bank登录号:KJ782632)。该基因全长3 157 bp,开放阅读框2 769 bp,编码922个氨基酸。生物信息... 以茶树(Camellia sinensis)‘迎霜’为试验材料,采用同源克隆的方法,利用RACE和RT-PCR技术获得茶树NADPH氧化酶基因Cs RBOHA的c DNA全长(Gen Bank登录号:KJ782632)。该基因全长3 157 bp,开放阅读框2 769 bp,编码922个氨基酸。生物信息学分析显示,该基因编码的蛋白分子量为103.33 k D,理论等电点为9.28;C端序列较保守,N端序列保守性较低,与烟草和蓖麻的相似性达79%,进化关系最近;蛋白结构具有典型的家族特征。该蛋白分布于细胞质膜上,与预测结果一致。实时荧光定量PCR结果显示,该基因的表达存在组织特异性,并且在低温(4℃)、高盐(200 mmol·L-1 Na Cl)、ABA(200 mg·L-1)和干旱(10%PEG 6000)条件下出现不同程度的上调。 展开更多
关键词 NADPH氧化酶 基因克隆 亚细胞定位 实时荧光定量 表达分析
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