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牛羊泰勒虫病的流行、危害、防控技术及致病机制研究进展 预览
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作者 刘军龙 关贵全 +6 位作者 刘群 李祥瑞 赵俊龙 周金林 张西臣 朱兴全 罗建勋 《中国动物保健》 2019年第6期55-57,共3页
牛羊泰勒虫病是由寄生于牛或羊的淋巴样细胞和红细胞内的泰勒虫所引起的一类血液原虫病,通过硬蜱传播,在我国农牧区广泛分布,患病动物表现为发热、贫血、黄疸、浅表淋巴结肿胀等典型临床症状,重症病例常会导致死亡,给养殖业带来巨大经... 牛羊泰勒虫病是由寄生于牛或羊的淋巴样细胞和红细胞内的泰勒虫所引起的一类血液原虫病,通过硬蜱传播,在我国农牧区广泛分布,患病动物表现为发热、贫血、黄疸、浅表淋巴结肿胀等典型临床症状,重症病例常会导致死亡,给养殖业带来巨大经济损失。本文将从泰勒虫病主要病原、流行特点、临床症状、诊断治疗、防控方法及致病机制等方面对该病进行介绍。 展开更多
关键词 泰勒虫病 临床症状 诊断治疗 防控 致病机制
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捻转血矛线虫病的研究进展 预览
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作者 李芳芳 张挺 +6 位作者 周彩显 冯新港 杜爱芳 索勋 李祥瑞 朱兴全 胡敏 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第3期107-111,共5页
捻转血矛线虫病是由主要寄生于反刍动物皱胃的捻转血矛线虫引起的一种重要的寄生线虫病,在我国草地牧区普遍流行,可引起宿主消瘦、贫血等慢性消耗性症状,严重感染甚至可引起死亡,给我国养殖业带来巨大的经济损失。由于基层养殖人员常常... 捻转血矛线虫病是由主要寄生于反刍动物皱胃的捻转血矛线虫引起的一种重要的寄生线虫病,在我国草地牧区普遍流行,可引起宿主消瘦、贫血等慢性消耗性症状,严重感染甚至可引起死亡,给我国养殖业带来巨大的经济损失。由于基层养殖人员常常忽视寄生线虫病的危害,缺乏基本的防控常识和驱虫意识,从而错过了预防和治疗该病的最佳时机,最终导致动物大批感染,极大的降低了动物的品质和养殖的经济效益。本文从捻转血矛线虫的形态和生活史着手,介绍了捻转血矛线虫病的危害和症状、诊断和治疗、防控方法及感染和致病的相关分子机制研究进展,希望能为该病的防控提供一定的指导。 展开更多
关键词 捻转血矛线虫病 感染 致病分子机制 防控
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一种测定氟尼辛葡甲胺含量新方法的建立
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作者 左儒楠 王雅倩 +4 位作者 张曦予 李日飞 刘筱 孟德兰 李引乾 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期247-253,共7页
为了建立高效液相色谱法测定复方庆大霉素注射液中氟尼辛葡甲胺的含量,选用色谱柱Thermo Accucore C18 100×2.1 mm,2.6 m;流动相A为0.1%三氟乙酸水溶液,B为乙腈;流动相A与B之间的比例为9∶1;用DAD检测器检测波长为254 nm;流速0.4 m... 为了建立高效液相色谱法测定复方庆大霉素注射液中氟尼辛葡甲胺的含量,选用色谱柱Thermo Accucore C18 100×2.1 mm,2.6 m;流动相A为0.1%三氟乙酸水溶液,B为乙腈;流动相A与B之间的比例为9∶1;用DAD检测器检测波长为254 nm;流速0.4 mL/min;柱温30℃,进样体积2.00 L。化合物的色谱图采集和积分由软件Chemstation进行处理。用内标法计算待测样品中氟尼辛葡甲胺的含量。结果,氟尼辛葡甲胺在该色谱条件下具有良好的系统适应性。回归方程的结果如下:y=2.545 35x+0.020 695 2。线性相关系数为r=0.999 91,氟尼辛葡甲胺的浓度在31.25~1000 g/mL范围内线性相关性良好。平均回收率在102.71%~108.33%之间,相对标准偏差为2.35%,小于3%。精密度试验中所有相对标准偏差都低于5%。复方庆大霉素注射液中氟尼辛葡甲胺的平均含量为212.8 g/mL,为标示量的106.4%,符合《中华人民共和国兽药典一部》的规定。上述结果表明,该方法可用于复方庆大霉素注射液中氟尼辛葡甲胺含量的测定。 展开更多
关键词 复方庆大霉素注射液 氟尼辛葡甲胺 高效液相色谱法 内标法 含量测定
传染性法氏囊病病毒感染DF-1细胞的转录组学分析
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作者 彭曦冉 俞天奇 +2 位作者 张宜娜 周继勇 胡伯里 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1101-1109,共9页
传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus, IBDV)感染鸡(Gallus gallus)引起的IBD是一种严重的、高度传染的免疫抑制性疾病。为探索IBDV感染所引起的宿主细胞转录组变化,本研究以IBDV感染鸡成纤维细胞系DF-1,提取细胞总RNA... 传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus, IBDV)感染鸡(Gallus gallus)引起的IBD是一种严重的、高度传染的免疫抑制性疾病。为探索IBDV感染所引起的宿主细胞转录组变化,本研究以IBDV感染鸡成纤维细胞系DF-1,提取细胞总RNA,使用TruSeq? RNA LT Sample Prep Kit v2构建RNA文库,采用Illumina HiSeq 3000平台进行高通量测序,分析IBDV感染12 h引起的DF-1细胞转录组变化,筛选显著变化基因。实验结果显示,差异表达基因总共有3 417条,其中在IBDV感染组中相对高表达的基因有1 887条,相对低表达的基因有1 530条(差异倍数(Fold change, FC)>2且P≤0.05)。对差异基因进行基因本体(Gene Ontology, GO)注释及KEGG信号通路富集分析,发现IBDV感染能够引起DF-1细胞中免疫、凋亡、代谢等20多条信号通路发生显著变化;其中细胞免疫和细胞凋亡通路可能在IBDV感染和免疫调控机制中具有重要作用。随机选择9条差异表达基因进行qRT-PCR验证,变化趋势与转录组数据一致。本研究为揭示IBDV致病及免疫抑制的分子机制提供了参考信息。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒(IBDV) 高通量测序 转录组 信号通路
猪瘟病毒E2囊膜糖蛋白在昆虫细胞中的分泌表达与免疫特性研究
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作者 高莹 白娟 +1 位作者 宋中宝 姜平 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期983-989,共7页
以猪瘟病毒石门株E2囊膜糖蛋白基因序列为基础,构建了3种重组杆状病毒rAc-E2、rAc-E2oKm和rAc-HE2oKm。Western-blot和间接免疫荧光试验结果显示,这3种重组杆状病毒均可正确表达重组E2蛋白,与E2蛋白和His的单克隆抗体均有良好的抗原反... 以猪瘟病毒石门株E2囊膜糖蛋白基因序列为基础,构建了3种重组杆状病毒rAc-E2、rAc-E2oKm和rAc-HE2oKm。Western-blot和间接免疫荧光试验结果显示,这3种重组杆状病毒均可正确表达重组E2蛋白,与E2蛋白和His的单克隆抗体均有良好的抗原反应特性,其中rAc-HE2oKm可分泌表达重组E2蛋白,可形成病毒样颗粒,可诱导免疫仔猪产生高水平抗体和中和抗体,免疫效果与猪瘟活疫苗相当,为猪瘟病毒E2蛋白亚单位疫苗研究奠定了重要基础。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 E2蛋白 亚单位疫苗
猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
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作者 于洁 刘雪威 +2 位作者 白娟 宋中宝 姜平 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期821-827,共7页
为了鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白抗原表位,本研究将PRRSV N蛋白进行了原核表达和纯化,并用纯化后的N蛋白免疫BALB/c小鼠。利用淋巴瘤细胞融合技术和间接ELISA抗体筛选方法,制备获得4株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株3D10... 为了鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白抗原表位,本研究将PRRSV N蛋白进行了原核表达和纯化,并用纯化后的N蛋白免疫BALB/c小鼠。利用淋巴瘤细胞融合技术和间接ELISA抗体筛选方法,制备获得4株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株3D10、3G12、6E2和6F4,Western-blot和IFA鉴定其均能与PRRSV特异性反应。4株单抗均属于IgG1亚类,轻链均为κ链。ELISA结果显示,3D10、3G12、6E2和6F4之间的叠加系数均在50%以上。选择N蛋白3个主要抗原表位合成肽进行ELISA检测,证明4株单抗识别的抗原表位均为30~52 aa,提示4株单克隆抗体亲和力可能存在一定差异,为该病毒研究提供了重要材料。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 单克隆抗体 N蛋白
犬脂肪间充质干细胞的分离、分化与鉴定 预览
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作者 文依信 贾绍昌 +5 位作者 乐建铭 鲁希 邓茜文 赵炳枢 吴文达 张海彬 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期729-733,共5页
[目的]本试验旨在分离、多向诱导分化并鉴定犬脂肪间充质干细胞。[方法]无菌条件下采取经过健康筛查的犬腹部脂肪,机械剪碎,采用1g·L^-1胶原酶Ⅰ型消化,用DMEM+10%FBS培养,观察细胞形态特征,流式细胞术分析细胞表面抗原标志的表达... [目的]本试验旨在分离、多向诱导分化并鉴定犬脂肪间充质干细胞。[方法]无菌条件下采取经过健康筛查的犬腹部脂肪,机械剪碎,采用1g·L^-1胶原酶Ⅰ型消化,用DMEM+10%FBS培养,观察细胞形态特征,流式细胞术分析细胞表面抗原标志的表达,并检测其体外成脂、成骨、成软骨分化能力。[结果]运用酶消化法可以从犬新鲜脂肪组织中分离到脂肪间充质干细胞,流式分析结果显示其高表达CD29(99.9%),低表达CD34(0.5%)和CD45(0.3%)。这些细胞在体外经诱导可以分化成为骨、软骨和脂肪。[结论]犬腹部脂肪组织中分离得到脂肪间充质干细胞,这些细胞具有多向分化能力。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 细胞分化
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肾素血管紧张素系统(RAS)两条轴相互负向调节与大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)肝损伤的关系研究
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作者 刘颖 王凯 +1 位作者 纪晓霞 张源淑 《畜牧与兽医》 北大核心 2019年第5期48-54,共7页
探讨了肾素血管紧张素系统(renin angiotensin system,RAS)两条轴对大鼠非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)肝脏损伤的相互负向调节作用。30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和用药组。除正常对照组外,... 探讨了肾素血管紧张素系统(renin angiotensin system,RAS)两条轴对大鼠非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)肝脏损伤的相互负向调节作用。30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和用药组。除正常对照组外,其余2组饲喂高脂饲料,用药组另外给伐他汀50 mg/kg·d。3周后,宰杀大鼠,测定血清中甘油三酯(TG)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的含量;测定肝组织匀浆羟自由基(·OH)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)酶活性;ELISA法测定组织匀浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管紧张素1-7(Ang1-7)及白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;Western blot分析肝组织血管紧张素转化酶(ACE)、血管紧张素转化酶2(ACE2)、血管紧张素Ⅱ受体1亚型(AT1R)、Mas受体(MasR)蛋白水平。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠血清TG、AST和ALT含量以及·OH和NOS活性均显著升高(P<0.05), T-AOC、SOD活性显著降低(P<0.05);IL-1β和TNF-α含量极显著升高(P<0.01);ACE、ACE2的蛋白表达水平与ACE/ACE2的比值均显著升高(P<0.05),AngⅡ、Ang1-7含量与AT1R表达升高(P<0.05),MasR表达有升高趋势(P>0.05)。结论:高脂饲料连续饲喂3周可诱导大鼠发生NAFLD,肝脏局部RAS两条轴均处于激活状态,ACE介导AngⅡ-AT1R经典轴促进肝损伤,而ACE2介导Ang1-7-MasR轴抵抗肝损伤;ACE2负性调节RAS作用,对大鼠NAFLD时肝脏氧化应激及炎性损伤有一定保护作用。 展开更多
关键词 肾素血管紧张素系统(RAS) 负向调节 血管紧张素转化酶2(ACE2) 非酒精性脂肪肝病 肝损伤
血管紧张素转化酶2对Ang Ⅱ诱导的牛乳腺上皮细胞炎症损伤的缓解作用 预览
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作者 朱斌 刘小倩 +2 位作者 刘颖 纪晓霞 张源淑 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1458-1465,共8页
以不同浓度血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导牛乳腺上皮细胞(MAC-T)炎症损伤,探讨血管紧张素转化酶2(ACE 2)的变化及与AngⅡ的相互作用。研究包括:ELISA检测细胞上清中细胞炎性因子的分泌或释放;Western blot检测细胞ACE 2和ACE的蛋白表达变化,... 以不同浓度血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导牛乳腺上皮细胞(MAC-T)炎症损伤,探讨血管紧张素转化酶2(ACE 2)的变化及与AngⅡ的相互作用。研究包括:ELISA检测细胞上清中细胞炎性因子的分泌或释放;Western blot检测细胞ACE 2和ACE的蛋白表达变化,并进行相关性分析;添加ACE 2活性蛋白对AngⅡ诱导损伤的保护作用。结果显示:1)AngⅡ处理MAC-T,细胞上清中促炎因子TNF-α、IL-6、IL-8含量显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)增加,抗炎因子IL-10含量显著降低(P<0.05);2)不同浓度AngⅡ处理细胞后,ACE 2蛋白表达均有降低,10-6 mol·L^-1 AngⅡ处理后显著降低(P<0.05);ACE蛋白表达结果相反;ACE 2与AngⅡ浓度之间存在显著负相关;3)添加外源性ACE 2活性蛋白,细胞上清中TNF-α、IL-6和IL-8浓度均有一定程度的下降,IL-10浓度升高。本研究表明ACE 2/ACE轴的失衡是AngⅡ诱导细胞炎性损伤的主要原因。高水平AngⅡ可激活炎症因子促进炎症反应,是促进炎症反应的主要介质,ACE 2可以通过降解AngⅡ,抑制其对炎症反应的上调效应。 展开更多
关键词 血管紧张素转化酶2(ACE 2) 血管紧张素Ⅱ(AngⅡ) 牛乳腺上皮细胞(MAC-T) 炎性反应
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塞内卡病毒A的RT-PCR检测方法的建立和应用 预览
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作者 范慧 李亮 +3 位作者 姜平 王先炜 李玉峰 白娟 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1312-1318,共7页
塞内卡病毒A(Senecavirus A,SVA)是一种无囊膜的单股正链RNA病毒,可引起成年母猪水疱性病变,并导致新生仔猪死亡。为建立SVA的快速检测方法,本研究对NCBI发表的40株SVA的基因序列进行同源比较,选择保守区域设计了3对引物P1、P2和P3,从... 塞内卡病毒A(Senecavirus A,SVA)是一种无囊膜的单股正链RNA病毒,可引起成年母猪水疱性病变,并导致新生仔猪死亡。为建立SVA的快速检测方法,本研究对NCBI发表的40株SVA的基因序列进行同源比较,选择保守区域设计了3对引物P1、P2和P3,从中筛选出最佳扩增引物,通过对引物浓度、退火温度、延长时间、循环次数进行优化,成功建立了SVA的RT-PCR检测方法。用该方法检测SVA、脑心肌炎病毒(EMCV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)无交叉反应,具有良好的特异性。敏感性试验结果显示,病毒检测限可达1TCID50,比国外文献报道的检测方法灵敏性更高。用该方法检测山东省的100份猪组织样品,阳性率为2%。本研究所建立的方法特异性强、敏感性高、可靠性好,为SVA的快速检测及流行病学调查提供了有效的技术手段。 展开更多
关键词 塞内卡病毒A RT-PCR 检测
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灵芝孢子粉对小鼠抗疲劳作用及生化机制初探
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作者 王换换 申正杰 +2 位作者 肖航 刘小倩 张源淑 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期173-177,共5页
目的观察灵芝孢子粉对小鼠的抗疲劳作用并探讨其生化机制。方法 80只SPF级ICR小白鼠,按体质量随机分为对照组和灵芝孢子粉高剂量(500mg/kg)、中剂量(300mg/kg)、低剂量(100mg/kg)实验组,每组20只,雌雄各半。根据小鼠体质量和实验设计的... 目的观察灵芝孢子粉对小鼠的抗疲劳作用并探讨其生化机制。方法 80只SPF级ICR小白鼠,按体质量随机分为对照组和灵芝孢子粉高剂量(500mg/kg)、中剂量(300mg/kg)、低剂量(100mg/kg)实验组,每组20只,雌雄各半。根据小鼠体质量和实验设计的剂量,每只小鼠按0.2 ml/10g的灌胃量于每天上午灌胃灵芝孢子粉溶液一次。实验周期为30d。末次灌胃30 min后,小鼠在30℃的温水浴中进行负重游泳实验;剖杀后采集小鼠肝脏和后腿肌肉组织,检测肝糖原和肌糖原含量,同时采集小鼠血清,检测血清中葡萄糖、尿素氮含量和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)、和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, AKP)等酶活性。结果灌胃不同剂量灵芝孢子粉30d后,各组小鼠的游泳时间明显长于对照组,高剂量组雌、雄鼠差异显著(5.53±1.44、16.90±5.98和10.65±1.26、20.61±3.31),分别提高了205.6%和93.5%;与对照组相比,三个剂量组小鼠肝糖原含量均显著升高(P<0.01);雌性小鼠肌糖原含量较对照组略有降低,雄性小鼠肌糖原含量较对照组略有升高,但各组间差异均不显著(P>0.05)。各剂量组小鼠血糖含量都高于对照组,且对照组与高剂量组差异显著(1.43±0.03、2.94±0.11,1.78±0.04、2.75±0.07,P<0.05);各剂量组小鼠血清尿素氮含量低于对照组。灌胃灵芝孢子粉各剂量组雌鼠血清中AKP活性均低于对照组,且在高剂量组显著或极显著降低(P<0.05,P<0.01)。与对照组相比,各剂量组小鼠血清LDH活性显著或极显著升高(P<0.05、P<0.01)。结论灌胃灵芝孢子粉可以延长小鼠游泳时间,提高小鼠抗疲劳能力。其生化特点表现在:一方面通过增加小鼠肝脏和肌肉中糖原的积累,提高了小鼠的能量储备;另一方面通过减缓尿素氮的累积和血糖水平的下降,使机体对负荷的适应性增强。 展开更多
关键词 灵芝孢子粉 小鼠 游泳 抗疲劳作用
利用CRISPR/Cas9系统靶向敲除猪肠上皮细胞(IPEC-J2)ace2基因及其功能分析
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作者 王凯 王换换 +2 位作者 刘颖 纪晓霞 张源淑 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期656-665,共10页
关于血管紧张素转移酶2 (angiotensin converting enzyme 2, ACE2)的研究目前主要集中于啮齿类动物和人类(Homo sapiens),猪(Sus scrofa domesticus)方面的资料较少。ACE2在不同组织器官中良好的抗炎、抗损伤作用已被广泛认可,但在肠道... 关于血管紧张素转移酶2 (angiotensin converting enzyme 2, ACE2)的研究目前主要集中于啮齿类动物和人类(Homo sapiens),猪(Sus scrofa domesticus)方面的资料较少。ACE2在不同组织器官中良好的抗炎、抗损伤作用已被广泛认可,但在肠道中的作用尚不明确。本研究拟利用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立猪肠上皮细胞(porcine intestinal epithelial cell, IPEC-J2) ace2基因敲除方法,探究ace2缺失对细胞炎性损伤的影响。首先通过Western blot和免疫荧光染色方法证实所选取的IPEC-J2细胞有ACE2蛋白表达;然后以猪ace2基因为敲除靶点,设计合成3对单导向RNA (single guide RNA, sgRNA),并插入含有Cas9骨架的pX330质粒,构建ace2基因打靶载体pX330-ace2-1、pX330-ace2-2和pX330-ace2-3。将测序正确的重组质粒pX330-ace2-2转染至IPEC-J2细胞,Western blot和免疫荧光染色结果显示ACE2蛋白表达缺失;以酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)方法检测ace2敲除细胞的炎性因子水平,结果显示,脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)处理组的促炎因子白介素(interleukin, IL)-1β和IL-8显著升高(P<0.01)、抗炎因子IL-10显著降低(P<0.05),细胞炎性损伤加剧,提示肠道ACE2具有一定的抗炎作用。本研究利用CRISPR/Cas9系统建立了靶向敲除猪肠上皮细胞ace2基因的方法,并初步探讨了ACE2在猪肠道的抗炎作用,为深入开展ACE2相关功能和作用机制研究提供了基础资料。 展开更多
关键词 血管紧张素转移酶2基因(ace2) CRISPR/Cas 9 猪肠上皮细胞(IPEC-J2)
牛奶中玉米赤霉烯酮和氯霉素二合一检测芯片的开发研究
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作者 李丽 张晓龙 +3 位作者 任帅 丁乔棋 宋素泉 闫丽萍 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第3期15-19,23,175共7页
为了开发出能同时检测玉米赤霉烯酮(ZEN)和氯霉素(CAP)的二合一免疫芯片,试验首先制备抗ZEN的单克隆抗体,并结合抗CAP多克隆抗体采用间接竞争ELISA方法进行芯片组装,最终确定定量标准曲线,并进行加标样品的检测。结果表明:共筛选得到3株... 为了开发出能同时检测玉米赤霉烯酮(ZEN)和氯霉素(CAP)的二合一免疫芯片,试验首先制备抗ZEN的单克隆抗体,并结合抗CAP多克隆抗体采用间接竞争ELISA方法进行芯片组装,最终确定定量标准曲线,并进行加标样品的检测。结果表明:共筛选得到3株抗ZEN的单克隆抗体(1C5、2B10、4F3),选择其中的1株杂交瘤细胞1C5制备小鼠腹水,抗体效价为5.12×104,半抑制浓度(IC50)为6.57ng/mL。试验建立的免疫芯片对ZEN和CAP的最低检测限分别为2.84ng/mL、9.49ng/mL。在牛奶加标回收试验中,ZEN回收率为95.2%~109.8%,CAP回收率为95.1%~100.3%,回收率均较高,且与高效液相色谱(HPLC)法检测结果有良好的相关性,变异系数(CV)小于15.0%。说明该芯片能用于检测实际样品中的ZEN和CAP。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 氯霉素 免疫芯片 单克隆抗体 间接竞争ELISA法 化学发光
益生菌对肉鸡生长性能及缓解LPS引起的肝脏炎症的研究
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作者 郝雅蓉 解慧林 +4 位作者 陈渠 牛立琼 华灿枫 耿雅丽 倪迎冬 《畜牧与兽医》 北大核心 2019年第4期48-53,共6页
脂多糖(LPS)是革兰阴性菌细胞壁的主要成分,常被用于模拟革兰阴性菌所致的感染,诱导机体炎症反应。益生菌能提高机体的免疫力,改善动物健康和福利。然而,目前有关益生菌对家禽细菌感染的防治效果的研究尚未见报道。试验选用40只1日龄罗... 脂多糖(LPS)是革兰阴性菌细胞壁的主要成分,常被用于模拟革兰阴性菌所致的感染,诱导机体炎症反应。益生菌能提高机体的免疫力,改善动物健康和福利。然而,目前有关益生菌对家禽细菌感染的防治效果的研究尚未见报道。试验选用40只1日龄罗斯308白羽肉鸡,随机分为2组:对照组(CON1)和益生菌组(Pb),Pb组鸡的饮水中添加益生菌(0.05 g/只),连续饲喂2周,按正常标准饲养。29日龄时进行LPS注射处理,分别将CON和Pb组随机分为2组,即生理盐水注射组(CON2)、LPS注射组(LPS)、Pb+生理盐水组(Pb)、Pb+LPS注射组(Pb+LPS),注射后2 h采集血液和肝脏组织待测。结果显示,与对照组相比,益生菌可降低肉鸡的采食量及料重比(P<0.01);LPS可显著增加肝脏、脾脏重及器官指数(P<0.05),但显著降低法氏囊重及器官指数(P<0.05)。血液生化指标分析显示,益生菌可以缓解LPS导致的谷丙转氨酶(ALT)升高(P<0.05),并降低谷草转氨酶(AST)及肌酸激酶(CK)的水平(P<0.05)。实时荧光定量PCR显示,LPS处理可激活肝脏中LPS-TLR4-NF-κB信号通路且上调下游基因IL-6、IL-1β、IFN-γ及IL-10的表达(P<0.05)。与LPS组和Pb组相比,Pb+LPS组抑炎细胞因子IFN-γ、IL-10基因的表达显著上调(P<0.05)。此外,LPS能显著上调肝脏C-反应蛋白(CRP)mRNA的表达(P<0.01)。研究表明,益生菌能提高肉鸡的生长性能,参与机体免疫调节,并对LPS引起的肝脏炎症反应有一定的缓解作用,这些结果为益生菌防治细菌感染提供了参考。 展开更多
关键词 益生菌 LPS 炎症 肝脏 肉鸡
血管紧张素转换酶2在仔猪空肠中的分布表达及其与物质转运的关系 预览
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作者 李志强 闫书平 +2 位作者 纪晓霞 王凯 张源淑 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1676-1684,共9页
通过研究血管紧张素转换酶2(ACE2)与中性氨基酸转运载体B~0AT1和葡萄糖转运载体SGLT-1、GLUT-2在不同日龄仔猪肠道中的分布表达,探讨其相互关系。以断奶仔猪为研究对象,分别取21、35日龄仔猪空肠中段组织,采用免疫组化、Western blot和R... 通过研究血管紧张素转换酶2(ACE2)与中性氨基酸转运载体B~0AT1和葡萄糖转运载体SGLT-1、GLUT-2在不同日龄仔猪肠道中的分布表达,探讨其相互关系。以断奶仔猪为研究对象,分别取21、35日龄仔猪空肠中段组织,采用免疫组化、Western blot和RT-qPCR、HPLC等方法,明确ACE2在仔猪空肠中的分布表达,以及B~0AT1及SGLT-1和GLUT-2的mRNA在不同日龄仔猪空肠组织中表达,并通过检测血浆中游离氨基酸的种类和含量,分析各指标之间的关系。结果表明,ACE2主要分布在小肠皱襞和绒毛处,空肠上皮细胞的刷状缘、浆膜层和肌层均有ACE2的显著表达;随着仔猪日龄的增加,ACE2与B~0AT1、SGLT-1的mRNA表达量及血液中性氨基酸的含量均随之上升,GLUT-2的mRNA表达量无明显变化。结果提示,仔猪空肠中有ACE2存在,且ACE2与肠道氨基酸等物质的转运有关,这为挖掘ACE2的新功能提供了理论依据。 展开更多
关键词 血管紧张素转换酶2 中性氨基酸转运载体 葡萄糖转运载体 断奶仔猪 物质转运
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两种小鼠肺癌模型的构建及Micro PET-CT观察 预览
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作者 沈艳 王韵 +2 位作者 张汝 阮铮 毛建华 《实验动物与比较医学》 CAS 2019年第1期39-45,共7页
目的比较尾静脉注射与肋间隙肺部原位注射人源非小细胞肺癌(NSCLC)细胞制备肺癌小鼠模型肿瘤形成情况的差异。方法使用NSCLC株NCI-H1975细胞,通过尾静脉注射以及经肋间隙肺部原位注射的方法制备NOD-SCID小鼠肺癌模型,于造模后15d,应用... 目的比较尾静脉注射与肋间隙肺部原位注射人源非小细胞肺癌(NSCLC)细胞制备肺癌小鼠模型肿瘤形成情况的差异。方法使用NSCLC株NCI-H1975细胞,通过尾静脉注射以及经肋间隙肺部原位注射的方法制备NOD-SCID小鼠肺癌模型,于造模后15d,应用小动物PET-CT技术观察小鼠肺部肿瘤形成情况:解剖小鼠,检测肺部病理改变。结果造模15d后,经尾静脉注射NCI-H1975细胞的小鼠在肺部不能检测到肿瘤,而经肋间隙肺部原位注射NCI-H1975细胞的小鼠能够在肺部检测到明显的肿瘤形成。结论肋间隙肺部原位注射肺癌细胞制备的肺癌小鼠模型肺部肿瘤形成均一、稳定、可重复、高效,是较好制备原位肺癌模型的方法. 展开更多
关键词 原位肺癌 小鼠模型 小动物PET-CT 尾静脉注射 肋间隙注射
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热应激对兔下丘脑-垂体-睾丸轴NMB及其受体基因表达和睾酮分泌的影响 预览
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作者 马志禹 张莹 +5 位作者 陈风雷 杨盛 乔文娜 胡佳慧 张金龙 雷治海 《湖北农业科学》 2019年第12期141-146,共6页
研究热应激对公兔下丘脑-垂体-睾丸(HPT)轴神经介素B(NMB)及其受体(NMBR)基因表达水平及血清皮质醇和睾酮分泌的影响,探讨热应激对神经肽和相关激素分泌的影响。建立热应激模型,采用荧光定量PCR(RT-PCR)检测兔NMB和NMBRmRNA在HPT轴的表... 研究热应激对公兔下丘脑-垂体-睾丸(HPT)轴神经介素B(NMB)及其受体(NMBR)基因表达水平及血清皮质醇和睾酮分泌的影响,探讨热应激对神经肽和相关激素分泌的影响。建立热应激模型,采用荧光定量PCR(RT-PCR)检测兔NMB和NMBRmRNA在HPT轴的表达情况,采用放射免疫分析法(RIA)检测兔血清中皮质醇和睾酮浓度的变化规律。结果表明,兔NMB和NMBR基因在HPT轴中表达;NMB和NMBRmRNA在HPT轴的表达模式相似,且热应激后在一定程度上可以促进NMB和NMBR基因的表达,并按时序在下丘脑(热应激0.5h)、垂体(热应激1.0h)和睾丸(热应激2.0h)促进作用最为明显;热应激可以促进皮质醇的分泌,并抑制睾酮的分泌,但这种抑制作用随着热应激时间的增加(热应激2.0h)逐渐恢复正常。表明热应激可能通过NMB/NMBR系统调节HPT轴的功能,进而影响动物繁殖。 展开更多
关键词 热应激 神经介素B NMBR 下丘脑-垂体-睾丸轴 睾酮
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仔猪消化道生理与预消化营养
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作者 赵茹茜 《饲料与畜牧》 2019年第1期59-64,共6页
生理学:生命的哲学什么是生理学?生理学是生命的哲学,哲学是科学的科学。国外的学者对中国的“生理学”3个字特别崇拜,他们认为这3个字充分体现了什么是“Physiology”,因为“生”是“Life”,“理”是“Logic”,“学”是“Study”,所以... 生理学:生命的哲学什么是生理学?生理学是生命的哲学,哲学是科学的科学。国外的学者对中国的“生理学”3个字特别崇拜,他们认为这3个字充分体现了什么是“Physiology”,因为“生”是“Life”,“理”是“Logic”,“学”是“Study”,所以生理学就是“A study about the logic of life”,是生命逻辑的科学。很多专家都在研究如何对饲料进行加工,如何对饲料进行预消化,而这些过程最终都要经过生命活动来体现畜牧业的宗旨. 展开更多
关键词 饲料 消化 哲学 科学 生理学 生命
sRNA_EsR240调控迟缓爱德华菌胞内生存及其毒力 预览
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作者 张圆圆 夏养敏 +5 位作者 贾莹婷 朱运霈 王燕 房正邹 高大庆 陆承平 《东南大学学报:医学版》 CAS 2019年第4期563-571,共9页
目的:探讨非编码小RNA(sRNA_EsR240)调控迟缓爱德华菌( Edwardsiella tarda , Et )胞内生存和毒力的作用。方法:根据转录组测序,结合生物信息学方法分析ET13菌sRNA。采用RT - PCR检测在不同应激(低酸、营养缺乏、氧化和高盐)条件下sRNA... 目的:探讨非编码小RNA(sRNA_EsR240)调控迟缓爱德华菌( Edwardsiella tarda , Et )胞内生存和毒力的作用。方法:根据转录组测序,结合生物信息学方法分析ET13菌sRNA。采用RT - PCR检测在不同应激(低酸、营养缺乏、氧化和高盐)条件下sRNA的转录水平,筛选高表达的sRNA;Northern blotting和RACE试验检测EsR240的长度及转录起始和终止位点。采用BLAST软件对EsR240的保守性进行分析;IntaRNA软件预测EsR240靶基因;qRT - PCR检测这些靶基因的表达水平。采用自杀质粒同源重组的方法构建ET13菌的EsR240缺失株和互补株。比较野生株ET13、EsR240缺失株和互补株在胞外不同应激条件下的存活率,及其在巨噬细胞胞内存活能力和对小鼠毒力的差异。结果:根据ET13菌RNA测序的结果,与蛋白库注释基因相比对;比对不上的候选sRNA与sRNA库比对;用软件发现13个具有启动子和ρ-非依赖型终止子新的sRNA,RT - PCR显示其中8个sRNA在各种应激条件下的转录水平不一,EsR128、EsR139和EsR240转录水平均较高。Northern blotting验证了EsR240在 Et 生长期和稳定期均转录,大小是596 bp。RACE试验确定了EsR240的转录起始和终止位点。BLAST软件分析显示,EsR240在 Et 中普遍存在,符合sRNA的特征。 IntaRNA软件预测EsR240靶基因及qRT - PCR结果显示,EsR240调控大部分预测靶基因的表达,这些靶基因注释可能为三磷酸腺苷结合盒(ATP binding cassette,ABC)- F转运体、FtsH蛋白酶的调控子YccA、Na +/H +反向转运体和糖苷水解酶等;在不同条件下,EsR240调控靶基因数目不同。EsR240的缺失明显影响 Et 在胞外不同应激条件下存活率和胞内生存能力,而且影响 Et 对小鼠的毒力。结论: EsR240通过调控靶基因影响 Et 的胞内生存,是一个正调控 Et 对小鼠毒力的sRNA。 展开更多
关键词 迟缓爱德华菌 RNA测序 胞内生存 非编码小RNA 毒力
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转录因子Eha直接调控迟缓爱德华菌的靶基因 预览
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作者 田畅 刘念 +2 位作者 郑恩金 高大庆 陆承平 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期299-310,共12页
目的Eha是一种重要转录调控因子,它可以影响迟缓爱德华氏菌(Et)的胞内存活,本实验探究Eha直接调控的靶基因如何抵御巨噬细胞杀灭细菌的分子机制。方法构建pGEX-4T-ehaflag重组质粒,电击导入eha基因缺失株的ET-13菌,得到Cehaflag ET13重... 目的Eha是一种重要转录调控因子,它可以影响迟缓爱德华氏菌(Et)的胞内存活,本实验探究Eha直接调控的靶基因如何抵御巨噬细胞杀灭细菌的分子机制。方法构建pGEX-4T-ehaflag重组质粒,电击导入eha基因缺失株的ET-13菌,得到Cehaflag ET13重组菌;用Western blot检测重组菌Eha-Flag融合蛋白的表达,并用细菌胞内存活实验检测细菌EhaFlag融合蛋白的活性;我们釆用染色质免疫共沉淀(CHIP)技术,用抗Flag标签抗体对靶基因沉淀Eha-DNA片段,除去结合的蛋白并纯化DNA片段;以RNA-Sequencing的差异表达基因设计引物,以CHIP得到的DNA样品为模板,进行qRT-PCR;PCR扩增靶基因的启动子区域,构建了pBAD-P靶 lac Z重组质粒,电击分别导入ET-13野生株和eha基因缺失株,比较它们β-半乳糖苷酶活性的差异;SDS-PAGE电泳比较野生株和缺失株外膜蛋白、厌氧C4二羧酸转运蛋白DcuA1和鞭毛钩蛋白FlgK表达的差异,并用细菌胞内存活实验比较野生株和缺失株的差异。结果Westernblot表明,CehaflagET13重组菌能够表达Eha-Flag融合蛋白;细菌胞内存活实验表明,该融合蛋白完全可以恢复缺失株在胞内降低的生存能力,Flag融合标签不影响Eha蛋白的功能;通过qPCR鉴定CHIP,富集到Eha的结合靶点,最终筛选出10个Eha直接结合的基因;通过野生株和缺失株中β-半乳糖苷酶活性的差异,证明eha基因对5个靶基因启动子有直接调控作用;通过检测野生株和缺失株表型的差异,证明eha基因对靶蛋白DcuA1,TnaA和FlgK的表达和活性有调控作用。结论Eha可以通过直接调控这些靶基因,使Et菌在巨噬细胞内的存活受到影响。 展开更多
关键词 迟缓爱德华氏菌 转录调控因子 eha基因 CHIP
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