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国家级金课驱动人才培养质量提升的探索与实践 认领
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作者 刘华珍 彭克美 宋卉 《教育教学论坛》 2021年第3期113-116,共4页
我国在高校人才培养中存在专业基础知识不扎实、实践动手能力不强、国际化意识淡薄的短板。依托"动物组织胚胎学"国家精品课程、国家精品资源共享课程、国家精品在线开放课程,建设和完善"精品课程+精品教材+教学文件&qu... 我国在高校人才培养中存在专业基础知识不扎实、实践动手能力不强、国际化意识淡薄的短板。依托"动物组织胚胎学"国家精品课程、国家精品资源共享课程、国家精品在线开放课程,建设和完善"精品课程+精品教材+教学文件"教育教学质量保障体系,构建"综合设计型实验+创新探索型实验+本科毕业论文设计"实践动手能力培养体系,着力培养理想信念坚定、专业基础知识扎实、实践动手能力强、国际化视野开阔的新时代大学生。 展开更多
关键词 动物组织胚胎学 精品课程 教学改革 人才培养质量
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DDM-BSA复合纳米材料的制备及对猪繁殖与呼吸综合征病毒增殖的抑制 认领
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作者 蒋晓菡 张晓桐 +1 位作者 梁建功 肖少波 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期82-88,共7页
以牛血清白蛋白、(2,4-二羟基苯基)(2,6-二甲基苯基)甲酮(DDM)为原料,采用去溶剂化的方法,合成DDM-BSA复合纳米材料,通过紫外-可见光谱仪、透射电镜、激光粒度仪等对所合成的复合纳米材料进行表征。结果显示,所合成的复合纳米粒子尺寸... 以牛血清白蛋白、(2,4-二羟基苯基)(2,6-二甲基苯基)甲酮(DDM)为原料,采用去溶剂化的方法,合成DDM-BSA复合纳米材料,通过紫外-可见光谱仪、透射电镜、激光粒度仪等对所合成的复合纳米材料进行表征。结果显示,所合成的复合纳米粒子尺寸分散均匀,平均粒径49.3 nm,对DDM药物的负载率为37.4%,80 h后体外释放率可达95.4%。在此基础上,评估了复合纳米粒子对MARC-145细胞的细胞毒性及对猪繁殖与呼吸综合征病毒增殖的影响。结果发现,当牛血清白蛋白负载的DDM质量浓度为12μg/mL时,MARC-145细胞的存活率超过90%,该质量浓度的复合纳米粒子可有效抑制PRRSV病毒的增殖,与单纯使用DDM相比,具有更好的抗病毒效果。 展开更多
关键词 牛血清白蛋白 复合纳米材料 药物递送 抗病毒药物 靶向治疗 猪繁殖与呼吸综合征病毒
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一例育肥猪猪呼吸道疾病综合征的诊断 认领 被引量:1
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作者 牛伟杰 孙琪 +3 位作者 于学祥 库旭钢 何启盖 罗锐 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第16期57-59,64,165,共5页
猪呼吸道疾病综合征(porcine respiratory disease complex,PRDC)是由多种病原及环境条件等多种因素引起的猪呼吸系统疾病。2019年4月份,湖北省某猪场育肥阶段猪只出现明显的呼吸道症状,且发病率高达60%,死亡率约为8%,造成了严重的经济... 猪呼吸道疾病综合征(porcine respiratory disease complex,PRDC)是由多种病原及环境条件等多种因素引起的猪呼吸系统疾病。2019年4月份,湖北省某猪场育肥阶段猪只出现明显的呼吸道症状,且发病率高达60%,死亡率约为8%,造成了严重的经济损失。为了对该病进行诊断,试验采用剖检病变、实验室检测进行诊断,对分离菌进行药敏试验,并根据诊断结果进行防控。结果表明:根据病猪临床症状、剖检病变及实验室检测结果,最后确定该场PRDC是由细菌、病毒混合感染所致。推断可能是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)与猪圆环病毒2型(PCV-2)混合感染引起免疫抑制后继发多杀性巴氏杆菌(Pm)和副猪嗜血杆菌(Hps)、猪链球菌(SS)感染所致。可采取改善饲养环境、药物治疗及对猪群进行群体保健等防控措施。说明猪场应重视PRDC的实验室诊断及防控。 展开更多
关键词 猪呼吸道疾病综合征 经济损失 混合感染 免疫抑制 诊断 防控
Bartha K61株活疫苗对猪伪狂犬变异毒株和传统毒株的免疫保护效力分析 认领
4
作者 严伟东 李畅 +2 位作者 于学祥 何启盖 杨汉春 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第7期15-18,23,I0001,共6页
为了分析猪伪狂犬病活疫苗Bartha K61株预防流行变异毒株的效力。以经典PRV-EA株和变异PRV-XT株为攻毒毒株,评价Bartha K61活疫苗免疫仔猪对伪狂犬病病毒变异株的保护效力。用Bartha K61株活疫苗免疫4~5周龄断奶仔猪,免疫28 d后,分别用P... 为了分析猪伪狂犬病活疫苗Bartha K61株预防流行变异毒株的效力。以经典PRV-EA株和变异PRV-XT株为攻毒毒株,评价Bartha K61活疫苗免疫仔猪对伪狂犬病病毒变异株的保护效力。用Bartha K61株活疫苗免疫4~5周龄断奶仔猪,免疫28 d后,分别用PRV-EA株和流行变异PRV-XT株攻毒,观察仔猪的临床症状和病理变化,检测鼻腔排毒情况。结果显示,Bartha K61株活疫苗可对经典PRV-EA株攻毒提供良好的免疫保护,但对变异毒株PRV-XT仅能提供部分保护。PRV-EA株攻毒组所有猪只未出现明显临床症状,而PRV-XT攻毒组出现较为明显的临床症状。表明Bartha K61株活疫苗对传统毒株有良好保护效果,而对流行变异毒株不能提供完全保护。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 Bartha K61株活疫苗 PRV-EA株 变异强毒PRV-XT株 攻毒保护试验
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一例猪瘟混合感染副猪嗜血杆菌和猪蛔虫的案例诊治 认领
5
作者 陈晓雨 于学祥 +3 位作者 孙琪 库旭钢 范盛先 何启盖 《猪业科学》 2020年第7期76-80,共5页
2019年11月底,湖北某商品猪场保育猪只出现厌食、消瘦、呼吸困难、咳嗽等症状,偶有病猪急性死亡,为查找病因,控制疫情,减少损失,依次通过流行病学调查、病理剖检和实验室检测,最终确定该发病猪场为感染猪瘟病毒,进而继发感染Hps-4混合感... 2019年11月底,湖北某商品猪场保育猪只出现厌食、消瘦、呼吸困难、咳嗽等症状,偶有病猪急性死亡,为查找病因,控制疫情,减少损失,依次通过流行病学调查、病理剖检和实验室检测,最终确定该发病猪场为感染猪瘟病毒,进而继发感染Hps-4混合感染,并伴随蛔虫感染导致。通过筛选敏感药物治疗,优化生产管理,成功控制了此次疫情。该案例对此次疫情进行了分析总结,就加强生物安全建设,优化养殖管理,实现生产质量可控提供了参考建议。也为猪瘟混合感染呼吸系统细菌性疾病的防控提供参考。 展开更多
关键词 保育猪 混合感染 诊断 防控
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牛支原体VspX蛋白黏附特性解析 认领
6
作者 陈曦 刘东明 +4 位作者 张慧 朱习芳 陈颖钰 胡长敏 郭爱珍 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期77-84,共8页
为进一步解析牛支原体(Mgcoplasma bovis)VspX蛋白的黏附特性,采用间接免疫荧光法检测VspX蛋白在M.bovis中的分布,通过黏附试验和抗体黏附抑制试验检测VspX蛋白的黏附性,采用ELISA方法进一步分析VspX蛋白和突变株结合纤连蛋白(Fn)的特... 为进一步解析牛支原体(Mgcoplasma bovis)VspX蛋白的黏附特性,采用间接免疫荧光法检测VspX蛋白在M.bovis中的分布,通过黏附试验和抗体黏附抑制试验检测VspX蛋白的黏附性,采用ELISA方法进一步分析VspX蛋白和突变株结合纤连蛋白(Fn)的特性。结果显示,M.bovis VspX蛋白位于M.bovis菌体表面;重组VspX蛋白(rVspX)能黏附到EBL细胞表面,且M.bovis VspX基因缺失突变株(M.bovisΔVspX)体外黏附EBL细胞能力与M.bovis野生株(M.bovis WT)相比显著下降,两个结果说明rVspX蛋白具有黏附特性;并且抗rVspX蛋白单抗能抑制M.bovis黏附EBL细胞,进而证实rVspX蛋白黏附的特异性;此外,rVspX蛋白与Fn呈剂量依赖性结合,且M.bovisΔVspX结合Fn能力与M.bovis WT相比显著下降,证明M.bovis VspX蛋白与Fn为特异性结合,且Fn分布在EBL细胞表面。以上结果表明,M.bovis VspX蛋白是一种具有Fn结合特性的黏附相关蛋白,能通过EBL细胞外基质成分Fn介导其黏附EBL细胞。 展开更多
关键词 牛支原体 VspX蛋白 黏附蛋白 纤连蛋白
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PEDV IgG抗体时间分辨荧光免疫层析(TRFIA)检测方法的建立 认领
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作者 朱玲 程育芳 +3 位作者 曹华 陈淑华 孟宪荣 何启盖 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2085-2089,共5页
为了建立一种快速定量检测血清中猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)IgG抗体时间分辨荧光免疫层析(TRFIA)的检测方法,本研究采用竞争法和荧光免疫层析技术,以羧基荧光微球与PEDV S蛋白偶联,以抗IgG FC片段单抗和PE... 为了建立一种快速定量检测血清中猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)IgG抗体时间分辨荧光免疫层析(TRFIA)的检测方法,本研究采用竞争法和荧光免疫层析技术,以羧基荧光微球与PEDV S蛋白偶联,以抗IgG FC片段单抗和PEDV S1单抗作为试纸条检测线(T线)和质控线(C线),制备PEDV IgG抗体检测荧光定量免疫层析试纸条。通过对蛋白与荧光微球偶联方法、包被抗体量等对本研究工艺进行优化,并通过线性范围、最低检出限、精密性等性能指标以及与临床样品检测结果比对,对PEDV IgG抗体时间分辨荧光层析检测方法进行评价。结果显示,本研究所制备的PEDV IgG抗体检测试纸条线性范围为25~2 500 g/L,低检出限为25 g/L,批内变异系数与批间变异系数均小于15%,平均添加回收率为100.88%~102.70%,检测时间为15 min,试纸条与5种其他猪病血清抗体无交叉反应。临床样品检测发现,其与实验室间接免疫荧光检测结果符合率为95.6%。综上,本研究所研制的PEDV IgG抗体检测时间分辨荧光免疫层析试纸条灵敏度较高、特异性较高、准确度高、操作简便、快速,可用于临床PEDV IgG抗体的检测。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻(PED) IGG抗体 时间分辨荧光免疫层析(TRFIA) 定量检测 快检
牛支原体病诊断技术的研究进展 认领
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作者 刘晓雅 王朝好 +5 位作者 李婷 尹伊娅 李雨芮 陈颖钰 郭爱珍 胡长敏 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1294-1300,共7页
牛支原体感染可引起牛呼吸系统综合征、结膜炎、中耳炎、乳腺炎、关节炎甚至流产等疾病,给各国养牛业带来重大经济损失。由于目前尚无疫苗及有效的药物可用于该病的防治,及时诊断牛支原体病有利于牛场采取有效的措施以降低扩散风险,减... 牛支原体感染可引起牛呼吸系统综合征、结膜炎、中耳炎、乳腺炎、关节炎甚至流产等疾病,给各国养牛业带来重大经济损失。由于目前尚无疫苗及有效的药物可用于该病的防治,及时诊断牛支原体病有利于牛场采取有效的措施以降低扩散风险,减少经济损失。本文就牛支原体病的临床特征、牛支原体分离培养、牛支原体免疫学检测、血清学诊断及分子诊断技术研究进展等方面进行综述,供同行参考。 展开更多
关键词 牛支原体病 诊断技术 防控
miRNA在奶牛乳腺炎疾病中的研究进展 认领
9
作者 李婷 尹伊娅 +5 位作者 唐鑫 张文劲 李雨芮 陈颖钰 郭爱珍 胡长敏 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1660-1664,共5页
奶牛乳腺炎是一种常见的奶牛疾病,多发而且病因复杂,除饲养管理不良或遗传因素外,其他多种病原微生物也会引起该病,如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌及支原体等,给养牛业造成了巨大的经济损失([1])。miRNA作为小的非编码RNA,与mRNA结... 奶牛乳腺炎是一种常见的奶牛疾病,多发而且病因复杂,除饲养管理不良或遗传因素外,其他多种病原微生物也会引起该病,如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌及支原体等,给养牛业造成了巨大的经济损失([1])。miRNA作为小的非编码RNA,与mRNA结合,从而抑制蛋白的翻译或者引起mRNA的降解,参与细胞生长、分化、增殖以及凋亡等多种生物学功能。 展开更多
关键词 奶牛 乳腺炎 MIRNA
牛源A型多杀性巴氏杆菌的免疫检测 认领
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作者 郑冰洁 胡长敏 +1 位作者 胡涌刚 郭爱珍 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期765-769,共5页
本文建立了一种有效捕获和快速检测牛源A型多杀性巴氏杆菌(Pm)的免疫检测方法。该方法将本实验室筛选的一株单克隆抗体(Mc Ab)作为捕获探针偶联到磁珠表面构建免疫磁珠(IMB),并用于特异性捕获牛源A型Pm,辣根过氧化物酶(HRP)标记的另一株... 本文建立了一种有效捕获和快速检测牛源A型多杀性巴氏杆菌(Pm)的免疫检测方法。该方法将本实验室筛选的一株单克隆抗体(Mc Ab)作为捕获探针偶联到磁珠表面构建免疫磁珠(IMB),并用于特异性捕获牛源A型Pm,辣根过氧化物酶(HRP)标记的另一株McAb作为检测探针与捕获的牛源A型Pm相互作用,建立了一种基于磁珠的“双抗夹心”免疫显色方法实现该菌的快速检测。在最优条件下,牛源A型Pm在1.0×10~5~1.0×10~7CFU/m L范围内与信号强度呈良好的线性关系(R~2=0.99),检测限(S/N=3)为1.0×10~5CFU/m L。本方法具有良好的特异性和重现性,对模拟实际样品的检测结果取得了令人满意的效果。 展开更多
关键词 免疫磁珠 多杀性巴氏杆菌 免疫检测
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请勿谈“冠”色变——人和动物冠状病毒的那些事 认领
11
作者 祁明普 郭爱珍 +1 位作者 陈颖钰 胡长敏 《中国奶牛》 2020年第2期1-4,共4页
新型冠状病毒疫情的爆发和持续扩散已经对我国经济、社会和人民生活产生了一定的影响。本文就人们关心的几个问题进行了探讨和澄清,如:冠状病毒家族有哪些成员,目前流行新型冠状病毒与已知人和动物冠状病毒间有什么关系,新型冠状病毒可... 新型冠状病毒疫情的爆发和持续扩散已经对我国经济、社会和人民生活产生了一定的影响。本文就人们关心的几个问题进行了探讨和澄清,如:冠状病毒家族有哪些成员,目前流行新型冠状病毒与已知人和动物冠状病毒间有什么关系,新型冠状病毒可能的来源,养殖场在当前新冠疫情下如何维持生产和降低损失等,以期增加人们对新型冠状病毒的认识,重视当前疫情,同时减少不必要的"新冠"恐惧。 展开更多
关键词 新型冠状病毒 冠状病毒 分类 基因相似度 来源 宿主 措施
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关于当前人间新型冠状病毒肺炎疫情防控对我国养牛企业生产影响及其应对措施建议 认领
12
作者 郭爱珍 彭清洁 +3 位作者 胡长敏 陈颖钰 曹永强 李家奎 《中国奶牛》 2020年第2期5-9,共5页
自2020年1月以来,新型冠状病毒(简称“新冠”)肺炎疫情在局地爆发,隔离、封锁和交通管制已成为阻断人间传染源传播的重要防控措施。为摸清现阶段这些疫情防控措施对养牛业的影响,我们对全国38个养殖单位进行调查。调查结果显示,交通管... 自2020年1月以来,新型冠状病毒(简称“新冠”)肺炎疫情在局地爆发,隔离、封锁和交通管制已成为阻断人间传染源传播的重要防控措施。为摸清现阶段这些疫情防控措施对养牛业的影响,我们对全国38个养殖单位进行调查。调查结果显示,交通管制给绝大部分养牛场饲料、兽药和疫苗等生产物资的供应带来障碍,湖北省尤其严重;并且产品(奶、牛、肉)加工和上市受阻。同时,有可能因牛群防疫计划不能正常实施、牛病不能及时处置等原因导致动物疫病爆发、长期倒奶导致环境污染等次生灾害。据此,我们对相关部门和养殖企业提出了应对措施和政策建议,以期为当前新型冠状病毒肺炎疫情下保持养牛业稳定发展提供数据和政策支持。 展开更多
关键词 新型冠状病毒 养牛业 调查 控制 疾病
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ALG5对猪流感病毒复制的影响 认领
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作者 杨帅科 邹佳辉 +3 位作者 蒋美君 赵亚馨 操继跃 周红波 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1719-1727,共9页
在实验室前期利用猪肾细胞(PK-15)CRISPR/Cas9全基因组敲除文库(PK-15-GeCKO)筛选到猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)复制相关的宿主因子磷酸十二烷基磷酸酯-葡萄糖基转移酶(ALG5)的前提下,深入研究ALG5与SIV复制的关系。本研究利... 在实验室前期利用猪肾细胞(PK-15)CRISPR/Cas9全基因组敲除文库(PK-15-GeCKO)筛选到猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)复制相关的宿主因子磷酸十二烷基磷酸酯-葡萄糖基转移酶(ALG5)的前提下,深入研究ALG5与SIV复制的关系。本研究利用CRISPR/Cas9技术构建了包含ALG5基因向导RNA(gRNA)的质粒LentiGuide-puro-ALG5,并通过慢病毒包装感染稳定表达Cas9蛋白的新生猪气管上皮(NPTr)细胞系,采用有限稀释法筛选ALG5基因敲除的单克隆细胞株,通过靶基因组测序及Western blot验证了ALG5基因在NPTr细胞上的敲除水平,通过CCK-8试验验证基因敲除细胞和野生型细胞的细胞活性。结合TCID50和Western blot试验检测了ALG5敲除和过表达对SIV复制的影响。同时,检测了SIV感染NPTr细胞后内源性ALG5蛋白表达量的变化。最后检测了ALG5敲除对猪流感毒株F26复制的影响。结果显示:获得了ALG5敲除的NPTr单克隆细胞系(ΔALG5),ALG5基因敲除细胞与野生型细胞的细胞活性无显著差异。ALG5基因敲除显著抑制SIV的增殖,过表达促进SIV的增殖。在病毒感染条件下,随着病毒的增殖,ALG5的蛋白表达量上调。ALG5基因敲除后,也可以抑制猪流感毒株F26的复制,无毒株特异性。本研究表明,ALG5是影响猪流感病毒复制过程的一个重要宿主因子,为研究猪流感病毒的复制和致病机制奠定了基础。 展开更多
关键词 ALG5 CRISPR/Cas9 基因敲除 猪流感病毒
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一例夏南牛大肠杆菌与链球菌混合感染的病例报告 认领
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作者 刘心 彭清洁 +2 位作者 郭爱珍 陈曦 陈颖钰 《中国奶牛》 2020年第5期32-34,共3页
本文就一例夏南公牛混合感染大肠杆菌O158与链球菌导致死亡的病例进行了报告分析,提出了大肠杆菌O158与链球菌混合感染的诊断、治疗方法以及防范措施。为临床大肠杆菌O158与链球菌混合感染的识别及处置提供参考,为该病的防治提供支持。
关键词 大肠杆菌O158 链球菌 病例报告
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寨卡病毒NS1蛋白在杆状病毒系统中的表达及免疫原性分析 认领
15
作者 魏思琪 张路平 +3 位作者 张艳芳 叶静 曹胜波 陈政 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期346-352,共7页
本研究旨在采用杆状病毒表达系统表达并纯化寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)NS1蛋白,并对其免疫原性进行鉴定。将ZIKV NS1基因克隆至杆状病毒载体pFastBac1中,构建重组转移载体,将其转化DH10Bac感受态细胞进行蓝白斑筛选。将鉴定正确的重组... 本研究旨在采用杆状病毒表达系统表达并纯化寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)NS1蛋白,并对其免疫原性进行鉴定。将ZIKV NS1基因克隆至杆状病毒载体pFastBac1中,构建重组转移载体,将其转化DH10Bac感受态细胞进行蓝白斑筛选。将鉴定正确的重组杆粒转染sf9细胞,获得重组杆状病毒,经SDSPAGE和Western-blot鉴定蛋白正确表达后,将其感染High5细胞,大量表达重组蛋白,并用镍柱亲和层析法进行纯化,将纯化后的ZIKV NS1蛋白免疫BALB/c小鼠,进行血清特异性抗体效价检测。最终结果显示,获得了纯度较高分泌表达的ZIKV NS1蛋白,并且血清特异性抗体效价实验表明,纯化的ZIKV NS1蛋白能够诱导小鼠产生特异性免疫反应,有很好的免疫原性。本研究为ZIKV疫苗和诊断试剂盒的研发奠定了重要的基础。 展开更多
关键词 寨卡病毒 NS1蛋白 杆状病毒 免疫原性
轮状病毒为主的混合感染性犊牛腹泻病的诊断 认领
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作者 彭清洁 刘心 +10 位作者 晁金 杨莉 陈鸣 薛凯丽 张淏云 朱杰 朱小洁 陈颖钰 胡长敏 陈曦 郭爱珍 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期2316-2319,共4页
犊牛腹泻是危害犊牛健康的重要疾病之一,可由多种病原引起。2019年3-4月份,内蒙古某规模化牛场28.5%(100/350)的犊牛发生严重腹泻。发病后该场兽医利用土霉素、氟尼辛葡甲胺注射液、樟脑磺酸钠、碳酸氢钠进行治疗,病情稳定一段时间后复... 犊牛腹泻是危害犊牛健康的重要疾病之一,可由多种病原引起。2019年3-4月份,内蒙古某规模化牛场28.5%(100/350)的犊牛发生严重腹泻。发病后该场兽医利用土霉素、氟尼辛葡甲胺注射液、樟脑磺酸钠、碳酸氢钠进行治疗,病情稳定一段时间后复发。经研究室临床诊断和实验室检测,最终确诊该场犊牛腹泻的主要病原为牛轮状病毒,同时伴有多种其他病毒和大肠杆菌的混合感染。本研究就该病例进行了诊断报告,以及为临床犊牛腹泻的防控提供病例参考和技术资料。 展开更多
关键词 犊牛 腹泻 轮状病毒 牛冠状病毒 牛病毒性腹泻病毒 混合感染
副猪嗜血杆菌Apd-ELISA抗体检测试剂盒的制备和初步应用 认领
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作者 田杨 刘云宝 +5 位作者 马辉 潘其聪 肖静 陈焕春 蔡旭旺 徐晓娟 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期2227-2237,共11页
旨在对副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)的黏附素蛋白(autotransporter passenger domain,Apd)ELISA抗体检测方法进行参数优化、临界值确定和应用评价,获得性能稳定的副猪嗜血杆菌病抗体检测试剂盒。首先通过猪的免疫攻毒试验获... 旨在对副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)的黏附素蛋白(autotransporter passenger domain,Apd)ELISA抗体检测方法进行参数优化、临界值确定和应用评价,获得性能稳定的副猪嗜血杆菌病抗体检测试剂盒。首先通过猪的免疫攻毒试验获得HPS阴、阳性对照血清,优化Apd-ELISA的反应参数;然后用背景确认的阴、阳性血清确定其临界值,并对封闭液及酶标板的包装方式进行选择;最后用Apd-ELISA试剂盒对临床样品进行检测并与荷兰Biocheck的OppA-ELISA试剂盒进行比较。结果表明,抗原包被质量浓度为0.5μg·mL^-1、被检血清以1:200倍稀释后反应45 min以及二抗稀释度为1:15000时,Apd-ELISA的反应背景下降,区分度提高。根据背景确认的27份阳性和40份阴性血清的OD630 nm值以及临界值计算公式(S-N)/(P-N),得到Apd-ELISA的阴阳性临界值是0.33。证实用封闭液K封闭和真空包装的酶标板可以在50℃保存4 d(相当于在4℃保存22个月)。用Apd-ELISA试剂盒检测1179份临床血清,表明母猪、后备和育肥猪以及仔猪的HPS血清阳性率分别为83.76%、61.09%和27.48%。与荷兰的Biocheck试剂盒进行比较,发现Apd-ELISA与Biocheck试剂盒(OppA-ELISA)对HPS临床阴性血清和疫苗免疫血清检测的符合率为100%,对HPS临床阳性血清的符合率仅为4.76%(6/126)。然而,Apd-ELISA与OppA Western blot的阳性符合率可达到73.02%(92/126)。本研究获得了能有效区分HPS阴、阳性血清和稳定保存的Apd-ELISA抗体检测试剂盒,可用于HPS灭活疫苗免疫后的抗体检测和副猪嗜血杆菌病的血清抗体检测。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌 ELISA试剂盒 抗体检测 临界值 封闭液
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一株猪高致病性蓝耳病病毒的分离鉴定与遗传变异分析 认领
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作者 张维达 杨康 李自力 《中国兽药杂志》 2020年第2期7-15,共9页
为研究猪蓝耳病病毒(PRRSV)的遗传进化规律,于2018年从新疆某猪场采集的病猪血液中分离了一株PRRSV,命名为XJ-b。对临床样品采用RT-PCR扩增鉴定,将阳性样品过滤处理之后接种在Marc-145细胞系进行培养,将盲传3代之后出现病变(CPE)的Marc-... 为研究猪蓝耳病病毒(PRRSV)的遗传进化规律,于2018年从新疆某猪场采集的病猪血液中分离了一株PRRSV,命名为XJ-b。对临床样品采用RT-PCR扩增鉴定,将阳性样品过滤处理之后接种在Marc-145细胞系进行培养,将盲传3代之后出现病变(CPE)的Marc-145样品进行间接免疫荧光鉴定。通过噬斑纯化后,利用RT-PCR对分离株的全基因组进行扩增,使用SeqMan软件对测序结果进行拼接,并根据NCBI上已公布的PRRSV全基因组及Nsp2基因核苷酸序列进行遗传进化与同源性比对分析。结果表明,临床病料RT-PCR检测呈PRRSV核酸阳性,处理后的病料接种至Marc-145细胞72 h之后产生CPE,间接免疫荧光鉴定为PRRSV抗原阳性;序列拼接显示分离株全基因组开放阅读框大小为15119 bp;全基因组和Nsp2基因核苷酸序列分析和同源性比对显示该分离毒株属于中国的高致病性PRRSV亚群。研究结果可为近年来新疆地区PRRSV的毒株差异分析提供参考。 展开更多
关键词 猪高致病性蓝耳病病毒 分离 MARC-145细胞 基因组 进化分析
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2018年湖北省猪源沙门菌的分离鉴定及耐药性分析 认领
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作者 罗郑 彭忠 +7 位作者 杨迪 王湘如 杨斓 杨丹 王斐 华琳 陈焕春 吴斌 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1142-1147,1152,共7页
为了解规模化猪场沙门菌的流行和耐药情况,本研究于2018年10-12月采集湖北武汉、钟祥、大冶、襄阳、黄冈地区5个规模化猪场各年龄段猪的肛门拭子进行沙门菌的分离鉴定,并对所分离的菌株进行耐药表型分析和耐药基因检测。采用沙门菌选择... 为了解规模化猪场沙门菌的流行和耐药情况,本研究于2018年10-12月采集湖北武汉、钟祥、大冶、襄阳、黄冈地区5个规模化猪场各年龄段猪的肛门拭子进行沙门菌的分离鉴定,并对所分离的菌株进行耐药表型分析和耐药基因检测。采用沙门菌选择性培养基进行细菌的分离培养,并通过生化试验和PCR扩增invA基因确定所分离的细菌为沙门菌;采用玻片凝集法对所分离的沙门菌进行血清分型;采用微量肉汤稀释法进行6种抗菌药物的耐药表型检测,并采用PCR方法对相关的15种耐药基因的携带情况进行检测。结果显示,从采集的640份肛门拭子分离鉴定出39株沙门菌,分离率为6.09%,其中来源于保育猪的样品中沙门菌的分离率最高,为16.25%;所分离沙门菌的血清型主要为鼠伤寒沙门菌(69.23%),其次是德比沙门菌(15.38%),其他血清型所占比例为15.38%。药敏试验发现所分离的沙门菌至少对1种抗生素耐药,其中94.87%的分离株对氨苄西林表现出耐药性,对氯霉素和卡那霉素表现出耐药性的分离株所占的比例分别为58.97%和53.84%,仅有20.51%的分离株对阿奇霉素表现出耐药性;此外,53.84%的菌株对3种以上的受试抗生素同时表现出抗性,其中20.51%的分离株同时对5种受试抗生素表现出耐药性。用PCR方法共检测出12种耐药基因,其中blaCMY(79.49%)、aph(3′)-Ⅱ(76.92%)、catA1(76.92%)的检出率较高。研究结果为湖北地区猪场制定沙门菌病的综合防控措施提供参考。 展开更多
关键词 沙门菌 分离鉴定 血清型 耐药性 耐药基因
多糖类化合物的抗菌作用及其机制研究进展 认领 被引量:2
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作者 吴香云 刘亚娜 +4 位作者 周喆麒 潘源虎 郝海红 程古月 王玉莲 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1167-1176,共10页
多糖类化合物根据来源可分为植物多糖、动物多糖以及微生物多糖三大类。其不仅具有高效低毒、来源广泛的特点,还具有调节免疫功能、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、抗糖尿病、抗菌等多种生理功能。目前,人们已成功从高等植物、动物细胞膜以及... 多糖类化合物根据来源可分为植物多糖、动物多糖以及微生物多糖三大类。其不仅具有高效低毒、来源广泛的特点,还具有调节免疫功能、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、抗糖尿病、抗菌等多种生理功能。目前,人们已成功从高等植物、动物细胞膜以及微生物细胞壁中提取了大量多糖并广泛应用于食品、饲料、医药等行业中。随着细菌耐药性的不断产生,多糖类作为一种抗生素替代品已经成为国内外研究的热点。本文拟通过对多糖类化合物的抗菌活性以及主要机制进行详细阐述,为进一步深入开展多糖类化合物的生物活性及其作用机理研究,开发出更加安全、绿色高效的抗生素替代品提供理论依据。 展开更多
关键词 多糖类 抗生素替代品 抗菌作用 作用机制
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