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IncFII-FIA-FIB型多重耐药质粒pBTR-CTXM的结构基因组学分析
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作者 李曼莉 王利君 +4 位作者 赵亚超 蒋昭芳 周冬生 童贻刚 赵宝华 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期139-150,共12页
【背景】IncFII-FIA-FIB型质粒广泛存在于肠杆菌科细菌中,介导了许多耐药基因的水平转移,并导致细菌多重耐药问题日益严重。【目的】分析IncFII-FIA-FIB型多重耐药质粒pBTR-CTXM的基因组结构,并研究其介导大肠杆菌BTR株的耐药基因水平... 【背景】IncFII-FIA-FIB型质粒广泛存在于肠杆菌科细菌中,介导了许多耐药基因的水平转移,并导致细菌多重耐药问题日益严重。【目的】分析IncFII-FIA-FIB型多重耐药质粒pBTR-CTXM的基因组结构,并研究其介导大肠杆菌BTR株的耐药基因水平转移机制。【方法】利用PCR进行耐药基因筛查;接合转移和电转化实验验证质粒pBTR-CTXM是否具备自主接合转移的特性;VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定及药敏分析仪测定相关菌株对抗生素的药物敏感性;构建MatePair文库并进行细菌全基因组高通量测序和质粒结构基因组学分析。【结果】菌株BTR是携带blaNDM-1、blaCTX-M-15、blaTEM、qnrD、qnrS1、mph(A)、erm(B)和tetA(B)等耐药基因的多重耐药大肠杆菌,其中blaCTX-M-15、mph(A)、erm(B)和tet A(B)等耐药基因均位于大小为144 939 bp的质粒p BTR-CTXM (GenBank登录号MF156697)上,该质粒可与菌株BTR内质粒pNDM-BTR接合共转移到受体菌大肠杆菌EC600中。pBTR-CTXM具备IncFII-FIA-FIB型质粒典型的骨架区结构,其多重耐药(Multidrug-resistant,MDR)区由新的复合型转座子Tn6492、Tn2残余、Tn10残余、ISEcp1-blaCTX-M-15-Δorf477转座单元和一些插入序列组成。【结论】pBTR-CTXM中新复合型转座子Tn6492与Tn10残余和ISEcp1-blaCTX-M-15-Δorf477转座单元共同介导大肠杆菌BTR株的多重耐药与耐药基因的水平传播。 展开更多
关键词 大肠杆菌 IncFII-FIA-FIB型质粒 pBTR-CTXM Tn6492 多重耐药
1996-2014年中国HIV-1毒株CRF01_AE亚型传播簇和传播网络研究
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作者 王晓林 贾磊 +5 位作者 李韩平 刘永健 韩婧婉 李天一 李敬云 李林 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期84-88,共5页
目的了解我国HIV-1毒株CRF01_AE亚型在省内和省际的传播规律和风险因素,为实施精准干预提供参考依据。方法收集我国19个省份1996-2014年已有的2094条CRF01_AEpol区基因序列,利用PhyML3.0软件构建系统进化树,确定传播簇,利用Cytoscape3.... 目的了解我国HIV-1毒株CRF01_AE亚型在省内和省际的传播规律和风险因素,为实施精准干预提供参考依据。方法收集我国19个省份1996-2014年已有的2094条CRF01_AEpol区基因序列,利用PhyML3.0软件构建系统进化树,确定传播簇,利用Cytoscape3.6.0软件构建传播网络,结合背景信息分析传播风险。结果发现82个传播簇,包含255条序列(12.18%,255/2094),省内传播簇数量和包含序列数(61个,173条)明显多于跨省传播簇(21个,82条)。传播簇中男男性传播人群的成簇比例随时间上升趋势明显,由1996-2008年的2.41%(2/83)上升为2013-2014年的23.61%(72/305)(χ^2=27.800,df=1,P=0.000)。跨省传播簇的男男性传播人群比例明显高于省内传播簇,由1996-2008年的0.67%(2/297)上升为2013-2014年的6.36%(30/472),具有随时间的上升趋势(χ^2=20.276,df=1,P=0.000)。跨省传播簇中男男性传播的比例(86.59%,71/82)明显高于省内传播簇(56.65%,98/173),差异有统计学意义(χ^2=22.792,P=0.000)。含2种及以上传播途径的跨省传播簇的比例(33.33%,7/21)明显高于省内传播簇(13.11%,8/61),差异有统计学意义(χ^2=4.273,P=0.039)。传播网络分析发现,跨省传播簇内高传播风险人群比例(51.22%,42/82)明显高于省内传播簇(26.59%,46/173),差异有统计学意义(χ^2=14.932,P=0.000)。跨省传播簇以男男性传播人群为主。结论我国HIV-1毒株CRF01_AE亚型存在复杂的传播网络,跨省传播簇快速增长,其中高风险传播者对HIV-1亚型的大范围传播起到重要作用,应深入进行传播网络研究以指导精准干预。 展开更多
关键词 艾滋病病毒 CRF01_AE亚型 传播簇 传播网络
鼠疫耶尔森氏菌基因转录调控的研究进展
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作者 刘磊 郑山根 +2 位作者 郑娅琼 蔡李平 杨瑞馥 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期891-899,共9页
细菌基因转录调控是多种调控机制中研究最为广泛的一种模式。复杂而精细的基因转录调控网络有助于细菌应答外界环境压力,在病原菌致病与传播中均发挥着关键作用。本文以鼠疫耶尔森氏菌基因转录调控的相关研究进展为基础展开论述,重点阐... 细菌基因转录调控是多种调控机制中研究最为广泛的一种模式。复杂而精细的基因转录调控网络有助于细菌应答外界环境压力,在病原菌致病与传播中均发挥着关键作用。本文以鼠疫耶尔森氏菌基因转录调控的相关研究进展为基础展开论述,重点阐述细菌的转录调控机制、转录调控的研究策略及鼠疫菌致病与传播中转录调控的作用,以期为深入研究鼠疫菌致病与传播中的基因转录调控分子机制提供新思路。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森氏菌 基因转录调控 生物膜 毒力
1株携带mcr-1的食品动物源多药耐药奇异变形杆菌耐药性状分析 预览
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作者 张德福 安慧 +10 位作者 张健 赵禹宗 张蕊 刘雪飞 杨立娜 白凤翎 李春 周冬生 李钰金 殷喆 励建荣 《食品科学》 CSCD 北大核心 2018年第14期145-150,共6页
在对食品动物源性多药耐药菌的调查过程中,发现一株携带mcr-1的多药耐药奇异变形杆菌F160211,对其耐药表型及基因型进行进一步研究。通过扩增16S rRNA基因对该菌进行鉴定,用纸片扩散法初步鉴定了该菌的耐药谱,在此基础上测定多种药物对... 在对食品动物源性多药耐药菌的调查过程中,发现一株携带mcr-1的多药耐药奇异变形杆菌F160211,对其耐药表型及基因型进行进一步研究。通过扩增16S rRNA基因对该菌进行鉴定,用纸片扩散法初步鉴定了该菌的耐药谱,在此基础上测定多种药物对其最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),用聚合酶链反应法扩增常见的耐药基因,最后分析携带mcr-1的质粒的复制类型。结果表明,该菌为奇异变形杆菌;纸片扩散法和肉汤稀释法测定耐药谱及MIC表明,该菌对青霉素类、第1代和第2代头孢菌素类、大环内酯类、氨基糖苷类、酰胺醇类、四环素类、磺胺类、利福霉素类和黏菌素类等耐药,对呋喃类、多肽类、喹诺酮类中介耐药,对第3代和第4代头孢菌素类、单环β-内酰胺类、碳青霉烯类、甘氨酰环素类敏感;常见耐药基因扩增表明,该菌携带blaCTX-M-1、blaCTX-M-9、blaTEM、blaOXA-1、mph(A)、qnr S和mcr-1等多种耐药基因;mcr-1基因位于与文献报道的pHNSHP45类似的IncI2型不相容性质粒上。本研究表明,mcr-1基因的宿主范围已由报道的大肠杆菌、沙门菌等进一步扩大至奇异变形杆菌,食品动物源性细菌耐药的形势非常严峻,对食品安全和公众健康都是严重的威胁。 展开更多
关键词 mcr-1 食品动物 多药耐药 最小抑菌浓度 奇异变形杆菌
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细菌毒素-抗毒素系统的功能
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作者 何志利 王慧 《生物工程学报》 CSCD 北大核心 2018年第8期1270-1278,共9页
毒素-抗毒素(Toxin-Antitoxin,TA)系统广泛存在于原核生物和古细菌的染色体和质粒中。此系统由2个共表达的基因组成,分别编码稳定的毒素蛋白和易降解的抗毒素,毒素通常发挥毒性作用抑制细菌生长,而抗毒素则可中和毒性,二者相互作用对... 毒素-抗毒素(Toxin-Antitoxin,TA)系统广泛存在于原核生物和古细菌的染色体和质粒中。此系统由2个共表达的基因组成,分别编码稳定的毒素蛋白和易降解的抗毒素,毒素通常发挥毒性作用抑制细菌生长,而抗毒素则可中和毒性,二者相互作用对细菌生长状态起精密调节作用。根据TA的组成和抗毒素的性质,目前已经发现有6型TA,这些TA系统在细菌中发挥的作用一直是近年来学者们研究的热点,文中对细菌TA的功能研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 毒素-抗毒素系统 环境适应性 持留态细胞 生物被膜 细菌毒力
细菌自然转化的机制及影响因素
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作者 宁年智 王慧 《生物工程学报》 CSCD 北大核心 2018年第8期1297-1305,共9页
水平基因转移对耐药基因传播、编码毒素基因质粒的扩散和毒力岛的转移等过程具有重要的生物学意义。自然转化是指具有感受态的细菌从外界摄取并整合裸露DNA,是水平基因转移的方式之一。细菌发生自然转化极大地促进了耐药基因在不同细菌... 水平基因转移对耐药基因传播、编码毒素基因质粒的扩散和毒力岛的转移等过程具有重要的生物学意义。自然转化是指具有感受态的细菌从外界摄取并整合裸露DNA,是水平基因转移的方式之一。细菌发生自然转化极大地促进了耐药基因在不同细菌间的播散,导致细菌对抗生素耐药,给临床治疗带来极大的困难。许多细菌具备自然转化能力,但不同细菌自然转化过程存在着差异。细菌自然感受及转化的诱发及效率亦受到多种因素的影响。文中着重于阐述不同细菌的自然转化机制及其影响因素。 展开更多
关键词 自然感受态 自然转化 Ⅳ型菌毛 耐药基因
寨卡病毒蛋白结构与功能研究进展
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作者 程梦丽 李晓峰 秦成峰 《微生物学通报》 CSCD 北大核心 2018年第8期1787-1793,共7页
2015年以来,南美暴发大规模寨卡疫情,因其与新生儿小头症等严重神经发育疾病密切相关,被世界卫生组织列为国际关注的突发公共卫生事件。与其他虫媒黄病毒类似,寨卡病毒为单股正链RNA病毒,其基因组编码的3种结构蛋白构成病毒颗粒,7种非... 2015年以来,南美暴发大规模寨卡疫情,因其与新生儿小头症等严重神经发育疾病密切相关,被世界卫生组织列为国际关注的突发公共卫生事件。与其他虫媒黄病毒类似,寨卡病毒为单股正链RNA病毒,其基因组编码的3种结构蛋白构成病毒颗粒,7种非结构蛋白参与病毒复制生活周期的调控。在全球科学家的共同努力下,寨卡病毒蛋白结构与功能的研究取得了突破性进展,极大地促进研究者对病毒复制与致病机制的认识,也为疫苗和药物研发提供了重要科学依据和潜在靶标。本文将对寨卡病毒蛋白的结构与功能的最新研究进展作一综述,并讨论当前面临的挑战和机遇。 展开更多
关键词 寨卡病毒 结构蛋白 非结构蛋白 结构
基于荚膜多糖基因wzc可变区序列的肺炎克雷伯菌荚膜分型
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作者 王灿 李璞媛 +6 位作者 苑鑫 童贻刚 高明明 刘慧莹 秦艳红 米志强 柏长青 《军事医学》 CSCD 北大核心 2018年第8期637-640,共4页
目的对分离培养的肺炎克雷伯菌菌株进行荚膜分型以判断不同荚膜型在其中的分布。方法对来源于北京地区的肺炎克雷伯菌菌株参照编码肺炎克雷伯菌荚膜多糖基因中一段wzc基因可变区(CD1-VR2-CD2)序列设计引物,运用PCR法扩增目的片段并进行... 目的对分离培养的肺炎克雷伯菌菌株进行荚膜分型以判断不同荚膜型在其中的分布。方法对来源于北京地区的肺炎克雷伯菌菌株参照编码肺炎克雷伯菌荚膜多糖基因中一段wzc基因可变区(CD1-VR2-CD2)序列设计引物,运用PCR法扩增目的片段并进行测序,与已发表的荚膜型或NCBI数据库上比对测序结果,最终确定荚膜型别。结果在实验室保存的231株肺炎克雷伯菌中,有210株可用此法进行荚膜分型(分型率为90. 9%);在分出的40种不同的荚膜型中,K47为最常见的荚膜型别,占17. 1%(36/210);其次为K15型,占10. 5%(22/210),其他为K1和K2型,分别占5. 7%(12/210)和6. 6%(14/210)。结论基于荚膜多糖基因wzc可变区序列进行分型的方法操作简单,更有利于不同实验室之间的结果相互比较。另外,K47、K15、K1和K2型为临床肺炎克雷伯杆菌常见的荚膜型。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 荚膜 分型 聚合酶链反应
BSL-3实验室实验活动及意外事故对室内环境生物污染的定量分析 预览
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作者 靳爱军 胡凌飞 +4 位作者 张柯 杜涛 刘波波 李劲松 李娜 《中国医药生物技术》 2018年第2期97-103,共7页
目的对BSL-3实验室内常见的实验活动及意外事故进行模拟,定量研究产生的微生物气溶胶浓度,分析各种实验活动的风险程度,为相关实验操作的风险评估和人员防护提供参考。方法用粘质沙雷菌和噬菌体ΦX174作为替代微生物,在BSL-3实验室对6... 目的对BSL-3实验室内常见的实验活动及意外事故进行模拟,定量研究产生的微生物气溶胶浓度,分析各种实验活动的风险程度,为相关实验操作的风险评估和人员防护提供参考。方法用粘质沙雷菌和噬菌体ΦX174作为替代微生物,在BSL-3实验室对6种实验活动及意外事故进行模拟,通过空气和表面采样检测,对实验活动的生物风险进行定量分析研究。结果6种实验活动及意外事故都会产生不同浓度的微生物气溶胶。注射攻毒实验动物意外喷出可产生浓度达104 CFU/m3的气溶胶,培养瓶意外坠落和冻干粉意外洒落产生的气溶胶浓度可达103 CFU/m3(PFU/m3),吹吸混匀、离心时离心管破裂及超声裂解产生的气溶胶浓度为10~100 CFU/m3(PFU/m3)。结论BSL-3实验室内实验活动及意外事故产生的气溶胶浓度不可忽视,会引发生物污染与人员感染风险。 展开更多
关键词 BSL-3实验室 微生物气溶胶 实验操作 意外事故 定量分析
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BSL-4实验室设施和关键设备生物防护风险研究 预览
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作者 胡凌飞 靳爱军 +4 位作者 张柯 刘波波 杜涛 李劲松 李娜 《中国医药生物技术》 2018年第2期104-109,共6页
目的在正常运行的生物安全四级(BSL-4)实验室内,用生物学方法对实验室设施和关键设备进行气溶胶防护效果测试,为BSL-4实验室的风险评估提供数据参考。方法用粘质沙雷菌和噬菌体ΦX174代替高致病性微生物发生气溶胶,通过安德森采样器定... 目的在正常运行的生物安全四级(BSL-4)实验室内,用生物学方法对实验室设施和关键设备进行气溶胶防护效果测试,为BSL-4实验室的风险评估提供数据参考。方法用粘质沙雷菌和噬菌体ΦX174代替高致病性微生物发生气溶胶,通过安德森采样器定量采样法来测试设施和关键设备的生物防护效果。结果所测试的设施设备对生物气溶胶的防护效率均达到99.9%以上,其中气密门和正压防护服在模拟意外发生的情况下依然达到超过99.99%的防护效率。结论在所测试的BSL-4实验室设施设备正常运行情况下,发生生物泄漏风险的概率很小。 展开更多
关键词 生物安全四级实验室 微生物气溶胶 风险评估 设施 设备
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一种正压式防护口罩对微生物气溶胶防护效果的研究 预览
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作者 张柯 胡凌飞 +4 位作者 靳爱军 李劲松 曹杰 李娜 李光熙 《中国医药生物技术》 2018年第2期110-116,共7页
目的研究一种正压送风式防护口罩对病毒和细菌气溶胶的防护效果。方法制备粘质沙雷菌和噬箘体ΦX174悬液,分别作为细菌和病毒的替代物,发生微生物气溶胶,用空气动力学粒子分析仪检测粒子直径,用Andersen六级采样器采集微生物气溶胶样本... 目的研究一种正压送风式防护口罩对病毒和细菌气溶胶的防护效果。方法制备粘质沙雷菌和噬箘体ΦX174悬液,分别作为细菌和病毒的替代物,发生微生物气溶胶,用空气动力学粒子分析仪检测粒子直径,用Andersen六级采样器采集微生物气溶胶样本,检测正压式防护口罩在不同送风气流的条件下对微生物气溶胶的防护效率。结果实验所发生的粘质沙雷菌和噬箘体ΦX174的气溶胶粒子数量中值直径为1.8μm左右,该正压式防护口罩对气溶胶总粒子和微生物气溶胶粒子的防护效率均达到99%以上,送风气流对该正压式防护口罩的微生物气溶胶防护效率有显著影响,气流速度越大,防护效率越高。结论该正压式防护口罩对细菌和病毒具有良好的防护效果,使用该正压式防护口罩时应尽可能选择使用较高的送风气流。 展开更多
关键词 正压式 防护口罩 微生物气溶胶 防护效率 生物安全
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五种防护口罩的面形密合度定量测试比较 预览
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作者 张柯 胡凌飞 +3 位作者 靳爱军 李劲松 曹杰 李娜 《中国医药生物技术》 2018年第2期117-122,共6页
目的定量测试五种型号的医用防护口罩的面形密合度,为合理选择和佩戴口罩提供参考依据。方法利用口罩密合度测试仪Model8038定量测试29名参试人员对五种防护口罩的面形密合度,检测通过率。结果29名参试人员中,有7人未能通过五种防护口... 目的定量测试五种型号的医用防护口罩的面形密合度,为合理选择和佩戴口罩提供参考依据。方法利用口罩密合度测试仪Model8038定量测试29名参试人员对五种防护口罩的面形密合度,检测通过率。结果29名参试人员中,有7人未能通过五种防护口罩的面形密合度测试,有9人只通过了一种防护口罩的面形密合度测试,6人通过了两种防护口罩的面形密合度测试,6人通过了三种防护口罩的面形密合度测试,只有1人适合佩戴四种口罩。5种防护口罩在不同动作下面形密合度的通过率没有差异(P>0.05),口罩类型和性别对面形密合度的通过率存在差异(P<0.05)。结论同一佩戴者对不同型号的口罩以及不同的佩戴者对同一型号的口罩,其面形密合度不同,在使用防护口罩时,应首先做面形密合度测试,选择适合自己脸形的防护口罩。 展开更多
关键词 呼吸道 防护口罩 面形密合度 密合度因子 定量测试
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低温等离子体空气消毒机对微生物气溶胶杀灭效果的评价 被引量:2
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作者 于龙 李娜 +5 位作者 靳爱军 张柯 胡凌飞 李亮亮 曹杰 于洋 《中国消毒学杂志》 北大核心 2017年第10期902-904,908共4页
目的观察低温等离子体空气消毒机对空气中细菌和病毒气溶胶的灭活效果。方法使用气溶胶发生器在密闭气溶胶暴露柜内分别发生细菌和病毒气溶胶,采用六级Andersen采样器采集柜内空气,评价该空气消毒机对人工发生的细菌和病毒气溶胶的灭活... 目的观察低温等离子体空气消毒机对空气中细菌和病毒气溶胶的灭活效果。方法使用气溶胶发生器在密闭气溶胶暴露柜内分别发生细菌和病毒气溶胶,采用六级Andersen采样器采集柜内空气,评价该空气消毒机对人工发生的细菌和病毒气溶胶的灭活效果。结果该低温等离子体空气消毒机对金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌和噬菌体Phi X174气溶胶的净化效率(除菌率)分别为99.98%、99.98%和99.95%。结论该低温等离子体空气消毒机对密闭空间内空气中细菌和病毒气溶胶灭活效果较好。 展开更多
关键词 低温等离子体 空气消毒机 微生物气溶胶 杀灭效果
上转发光免疫层析技术快速检测猪抗旋毛虫IgG抗体方法的建立
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作者 王春 张平平 +6 位作者 赵勇 唐斌 刘晓雷 白雪 李仕存 刘明远 王学林 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期931-935,共5页
基于上转发光免疫层析(UPT-LF)技术,旨在建立UPT-LF快速检测猪抗旋毛虫IgG抗体的方法。采用间接法制备UPT-LF试纸条,通过共价偶联使二抗山羊抗猪IgG和上转发光纳米颗粒(UCP)结合,并加入样品垫和被检血清结合,以旋毛虫肌幼虫丝氨酸蛋白... 基于上转发光免疫层析(UPT-LF)技术,旨在建立UPT-LF快速检测猪抗旋毛虫IgG抗体的方法。采用间接法制备UPT-LF试纸条,通过共价偶联使二抗山羊抗猪IgG和上转发光纳米颗粒(UCP)结合,并加入样品垫和被检血清结合,以旋毛虫肌幼虫丝氨酸蛋白酶抑制因子基因(WM5)表达的蛋白WM5为猪抗旋毛虫IgG特异性结合抗原,WM5(2 g/L)与兔抗山羊IgG(0.5 g/L)喷点于分析膜上作为UPT-LF试纸条检测带(T)与质控带(C),该试纸条命名为Tsp-UPT-LF。Tsp-UPT-LF通过对95份阴性血清检测,确定Tsp-UPT-LF的Cutoff值为0.099。Tsp-UPT-LF和ELISA分别对273份旋毛虫感染猪血清样本进行检测,总符合率为92.31%,一致性系数Kappa(K)值为0.837,表明两种方法具有高度一致性。Tsp-UPT-LF检测旋毛虫、猪囊虫、华支睾吸虫感染的猪血清Tsp-UPT-LF呈现对旋毛虫良好的特异性。Tsp-UPT-LF检测感染50 000条旋毛虫肌幼虫28 d猪血清为阳性,T/C值0.109,122 d阳性最强,T/C值为0.207,至425 d时阳性值有所下降,抗旋毛虫IgG阳性率为71.4%。本研究建立了基于UPT-LF技术快速检测猪抗旋毛虫IgG抗体的方法,为猪旋毛虫即时感染检测、确保食品安全提供了一种可参考的检测方法。 展开更多
关键词 上转发光技术 免疫层析 旋毛虫 即时检测 食品安全
表达CTLA4抗体的重组流感病毒构建及溶瘤效果研究
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作者 董锁花 王立朋 +6 位作者 程晋霞 杨晓岚 孙芳 段跃强 王希良 包金风 杨鹏辉 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期444-450,共7页
目的拯救表达免疫检查点CTLA4抗体的重组流感病毒,全面鉴定并体内外实验评价其溶瘤效果。方法利用流感病毒反向遗传学(reverse genetics,RG)技术,以A/Puerto Rico/8/34(PR8)为载体,分别在PR8病毒PB1和PA基因片段插入免疫检查点CTLA4抗... 目的拯救表达免疫检查点CTLA4抗体的重组流感病毒,全面鉴定并体内外实验评价其溶瘤效果。方法利用流感病毒反向遗传学(reverse genetics,RG)技术,以A/Puerto Rico/8/34(PR8)为载体,分别在PR8病毒PB1和PA基因片段插入免疫检查点CTLA4抗体的重链和轻链构建重组质粒pFlu-CTLA4-PB1、pFlu-CTLA4-PA,与PR8病毒的其余6个质粒pHW191-PB2、pHW194-HA、pHW195-NP、pHW196-NA、pHW197-M、pHW198-NS共转染COS-Ⅰ和MDCK细胞,经拯救、筛选、鉴定获得重组溶瘤流感病毒,命名为rFlu-muCTLA4。通过血凝试验、EID50、PCR等方法全面鉴定;ELISA测定anti-CTLA4抗体含量;3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulphophenyl)-2H-tetrazolium 3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5(MTS)细胞活力测定重组病毒对小鼠肝癌H22细胞的杀伤效果;利用小鼠肝癌模型,评价重组病毒在体内对肿瘤的抑制效果。结果 rFlu-muCTLA4的血凝效价为29^210,且能够在鸡胚中稳定传代;EID50为10-8EID50/ml;重组病毒的PB1、PA片段与预期大小一致;重组病毒接种鸡胚培养2 d可检测到anti-CTLA4抗体,4天达到高峰值。MTS结果显示,rFlu-muCTLA4能特异性杀伤H22细胞活力,呈现剂量依赖性。动物实验表明,重组病毒能显著减小小鼠肝癌肿瘤体积,提高动物存活率并延长存活时间。结论表达免疫检查点CTLA4抗体的重组流感病毒rFlu-muCTLA4在体内外能靶向杀伤肝癌细胞,有望为溶瘤病毒靶向治疗肝癌提供新的思路。 展开更多
关键词 溶瘤病毒 免疫检查点抑制剂 细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4
microRNAs与流感病毒感染
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作者 张森 户义 +2 位作者 李靖 康晓平 姜涛 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第5期965-968,共4页
MicroRNAs是一类数目庞大,而且可以广泛参与到生命活动各个进程的非编码RNA分子,在病毒感染宿主过程中存在着复杂的microRNAs与病毒的相互作用。流感病毒感染可以引起宿主microRNAs表达谱的明显变化,流感病毒能通过调控某些microRNAs的... MicroRNAs是一类数目庞大,而且可以广泛参与到生命活动各个进程的非编码RNA分子,在病毒感染宿主过程中存在着复杂的microRNAs与病毒的相互作用。流感病毒感染可以引起宿主microRNAs表达谱的明显变化,流感病毒能通过调控某些microRNAs的表达来实现免疫逃逸等增强其感染能力;同时,宿主也可以通过某些microRNAs的变化启动相应的抗流感病毒反应。本文主要针对流感病毒感染过程中宿主-病毒二者在microRNA水平的相互作用进行综述,以期更好的了解流感病毒的致病机制,为抗流感病毒的新药研制提供新的思路。 展开更多
关键词 流感病毒 MICRORNAS 宿主细胞
副溶血弧菌耐药及其机制的研究进展 预览 被引量:1
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作者 张德福 安慧 +10 位作者 张健 赵禹宗 张明 郭佳佳 冯娇 刘雪飞 李春 白凤翎 李钰金 殷喆 励建荣 《食品工业科技》 CSCD 北大核心 2018年第9期311-317,324共8页
副溶血弧菌是引起食源性疾病的主要致病菌之一,也给水产品养殖业造成重大经济损失。临床和养殖业者一般使用抗菌药物治疗副溶血弧菌引起的感染,但由于抗菌药物的不规范使用,导致耐药性副溶血弧菌的大量出现。耐药性副溶血弧菌可以通过... 副溶血弧菌是引起食源性疾病的主要致病菌之一,也给水产品养殖业造成重大经济损失。临床和养殖业者一般使用抗菌药物治疗副溶血弧菌引起的感染,但由于抗菌药物的不规范使用,导致耐药性副溶血弧菌的大量出现。耐药性副溶血弧菌可以通过食物链传播给人类,严重威胁人民群众的食品安全和身体健康。目前,文献报道关于副溶血弧菌耐药谱分析的较多,但关于耐药基因和相关移动元件、耐药机理的研究较少。本文综述了世界上多个国家副溶血弧菌耐药性的情况及其耐药机理的研究现状,并对发展前景进行了分析。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 耐药 质粒 移动元件
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加巴喷丁体内外抗RSV感染的作用
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作者 时艳婷 谷宏婧 +5 位作者 杨晓岚 段跃强 赵忠鹏 周娅 杨鹏辉 王希良 《免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第5期378-384,共7页
目的探讨加巴喷丁对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的抗病毒作用。方法体外实验通过MTS、TCID50、q RT-PCR方法检测不同浓度加巴喷丁对RSV感染的抑制作用,包括细胞活力、病毒复制及细胞因子的变化。体内实验选取4~... 目的探讨加巴喷丁对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的抗病毒作用。方法体外实验通过MTS、TCID50、q RT-PCR方法检测不同浓度加巴喷丁对RSV感染的抑制作用,包括细胞活力、病毒复制及细胞因子的变化。体内实验选取4~6周龄C57BL/6小鼠,随机分为空白对照组、RSV感染组、低剂量及高剂量加巴喷丁处理组,连续腹腔注射给药,每日观察体质量变化,HE染色观察小鼠肺部的病理变化,q RT-PCR方法检测肺部病毒载量。结果 1、2、5、10 mmol/L不同浓度加巴喷丁显著增加RSV感染A549细胞的活力;5、10 mmol/L浓度的加巴喷丁可显著降低RSV感染A549细胞的病毒载量,10 mmol/L的加巴喷丁可显著抑制病毒的复制,减少CCL3、CCL5、CXCL2及TNF-α、IL-6、IL-8等趋化因子和炎性因子表达,促进干扰素IFN-α、IFN-β表达;动物实验表明90μg、180μg的加巴喷丁处理组可减轻RSV感染小鼠的体质量变化、改善肺部病理损伤和降低病毒载量。结论加巴喷丁可通过抑制病毒复制,调节趋化因子及炎性因子释放,促进干扰素分泌的方式发挥体内抗病毒作用,对RSV感染的C57BL/6小鼠有一定的治疗作用,可改善肺部病理,为进一步临床应用提供实验依据。 展开更多
关键词 加巴喷丁 呼吸道合胞病毒 抗病毒 细胞因子
检测4种血流感染病原体的靶向序列富集与测序相结合技术方法评价
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作者 李倩 刘鹏 +5 位作者 张彦 张超 黄文华 郑玉玲 王洪权 姜永强 《军事医学》 CSCD 北大核心 2018年第1期53-56,共4页
目的应用Ampliseq技术,建立可同时检测金黄色葡萄球菌(S.0M阳泌)、表皮葡萄球菌(S.epidermidis)、肺炎克雷伯茵(五pneumoniae)、单核细胞增生李斯特菌(L.monocytogenes)4种常见血流感染病原体的目标片段特异性富集结合二代... 目的应用Ampliseq技术,建立可同时检测金黄色葡萄球菌(S.0M阳泌)、表皮葡萄球菌(S.epidermidis)、肺炎克雷伯茵(五pneumoniae)、单核细胞增生李斯特菌(L.monocytogenes)4种常见血流感染病原体的目标片段特异性富集结合二代测序的方法,为准确、快速检测血流感染提供有效的依据。方法构建模拟临床样本评价该法的最低检出限(LOD),与实际掺入菌量比较,评价其灵敏度和特异性。结果与结论Ampliseq法的灵敏度为95.38%,特异性为95.45%,Kappa值为0.839~1.000,LOD均可达到10’数量级CFU/ml。该法可在15h内在同一反应体系内快速检测4种常见血流感染病原体,灵敏度和特异性均较好。 展开更多
关键词 血流感染 Ampliseq 二代测序 目标序列富集
以乙脑减毒活疫苗SA14-14-2为骨架的重组嵌合登革4病毒的构建与鉴定 预览
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作者 解东洋 祝琴 +5 位作者 刘忠钰 赵慧 邓永强 叶青 李晓峰 秦成峰 《寄生虫与医学昆虫学报》 2018年第2期80-86,共7页
登革4型病毒近年来在我国东南沿海地区时有流行,威胁人民健康与公共卫生安全.本研究以乙脑减毒活疫苗SA14-14-2为骨架,通过反向遗传学技术构建了携带登革4型病毒主要结构蛋白prM/E基因重组嵌合病毒(ChinDENV4);进一步通过蚀斑、 生长... 登革4型病毒近年来在我国东南沿海地区时有流行,威胁人民健康与公共卫生安全.本研究以乙脑减毒活疫苗SA14-14-2为骨架,通过反向遗传学技术构建了携带登革4型病毒主要结构蛋白prM/E基因重组嵌合病毒(ChinDENV4);进一步通过蚀斑、 生长曲线、 动物实验等对其生物学特征进行了鉴定.结果显示,重组嵌合病毒ChinDENV4可高效表达登革4型病毒的结构蛋白,蚀斑大小与亲本株类似;ChinDENV4并能够在BHK-21、C6/36等细胞中高效复制,滴度分别达到1.26×105和1.58×106 PFU/mL.更重要的是,嵌合病毒ChinDENV4在乳鼠模型中的神经毒力显著弱于亲本株.本研究成功构建了乙脑/登革4型嵌合病毒,为下一步四价嵌合登革减毒活疫苗研究奠定了重要基础. 展开更多
关键词 乙脑病毒 登革4型病毒 反向遗传学 减毒活疫苗 嵌合病毒
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