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EB病毒对不同分化程度胃癌细胞的易感性 预览
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作者 张科 邰智慧 +7 位作者 李淑英 杜海军 李劲涛 朱丽华 赵莹 张云茹 周玲 曾毅 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第21期6127-6130,共4页
目的建立携带EB病毒(EBV)的人胃癌细胞株,探讨EBV对不同分化程度胃癌细胞的易感性。方法用携带EBV的B95-8细胞系制备EBV,感染胃癌细胞BGC823、MKN45及MKN28,用有限稀释法对感染细胞进行克隆,观察细胞形态,并用PCR法检测未感染及感染细胞... 目的建立携带EB病毒(EBV)的人胃癌细胞株,探讨EBV对不同分化程度胃癌细胞的易感性。方法用携带EBV的B95-8细胞系制备EBV,感染胃癌细胞BGC823、MKN45及MKN28,用有限稀释法对感染细胞进行克隆,观察细胞形态,并用PCR法检测未感染及感染细胞中EBV编码核抗原EBNA1、EBNA2、潜伏感染膜蛋白LMP1、LMP2A、裂解感染早期基因BARF1、晚期基因BLLF1及Bc LF1的表达状况。结果已感染细胞的形态由原来的梭形变为多形态,并检测到EBNA1、BARF1及Bc LF1的表达,而未检测到EBNA2、BLLF1、LMP1及LMP2A的表达。结论不同分化程度的胃癌细胞对EBV都易感,并且EBV感染可改变细胞的表型,提示不同分化程度的胃癌细胞系可作为EBV感染的靶细胞。 展开更多
关键词 胃癌 EB病毒 感染
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BARF1基因真核表达载体PIRES2-EGFP/BARF1的构建及鉴定 预览
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作者 李淑英 张科 +6 位作者 杜海军 王湛 李旭坤 慈雅丽 王新燕 张秀军 周玲 《辽宁师范大学学报:自然科学版》 CAS 2011年第1期 98-101,共4页
提取B95-8细胞RNA,进行逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)扩增BARF1基因,将其克隆到pUM-T载体,转化E.coliDH5α,筛选阳性克隆,提取质粒并用EcoRI和BamHI双酶切,电泳回收BARF1片段.同时用Ec... 提取B95-8细胞RNA,进行逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)扩增BARF1基因,将其克隆到pUM-T载体,转化E.coliDH5α,筛选阳性克隆,提取质粒并用EcoRI和BamHI双酶切,电泳回收BARF1片段.同时用EcoRI和BamHI双酶切真核载体PIRES2-EGFP,电泳后回收载体PIRES2-EGFP并与BARF1片段连接;转化E.coliDH5α,筛选阳性克隆.提取质粒并用EcoRI和BamHI双酶切鉴定插入方向,并进行测序分析.转染胃上皮细胞GES-1后,观察细胞形态与行为变化.得到666 bp的BARF1基因片段.经双酶切鉴定,BARF1基因已正确连接到PIRES2-EGFP真核表达载体;测序结果与B95-8细胞株序列完全一致.BARF1基因转染GES-1细胞后,细胞由梭形圆化,黏着力减弱,重叠生长.结果表明成功地构建了携带EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)编码BARF1基因的真核表达载体. 展开更多
关键词 EB病毒 BARF1基因 真核表达载体
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EB病毒BARF1基因对人胃上皮细胞恶性转化的作用 被引量:1
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作者 李淑英 李劲涛 +4 位作者 杜海军 王湛 朱丽华 周玲 曾毅 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第19期 2025-2028,共4页
目的探讨EB病毒编码BARF1基因在人胃上皮细胞恶性转化中的作用。方法用携带BARF1基因的真核载体PIRES2-EGFP/BARF1,转染人胃上皮细胞系GES-1,通过G418筛选,获得稳定表达BARF1基因的人胃上皮细胞株。GES-1细胞被分为4组,包括1个转染BARF... 目的探讨EB病毒编码BARF1基因在人胃上皮细胞恶性转化中的作用。方法用携带BARF1基因的真核载体PIRES2-EGFP/BARF1,转染人胃上皮细胞系GES-1,通过G418筛选,获得稳定表达BARF1基因的人胃上皮细胞株。GES-1细胞被分为4组,包括1个转染BARF1基因的细胞组,1个转染BARF1基因并有TPA刺激细胞组,1个转染空载体细胞组和未转染的细胞组。观察软琼脂克隆形成能力和SCID鼠体内成瘤能力。SCID鼠被分成不同的组进行皮下接种,每一组接种3只。结果转染BARF1基因的细胞组及其TPA刺激组在软琼脂中能形成克隆,转染组克隆形成率为24.2%(58/240),TPA组克隆形成率为40.0%(96/240);而未转染组和转染空载体组细胞在软琼脂中没有克隆形成。转染BARF1基因的TPA刺激组细胞在SCID鼠体内能形成了肿瘤;未转染组、转染空载体组及转染BARF1基因的细胞组在SCID鼠体内没能形成肿瘤,但转染BARF1基因的细胞组在SCID鼠体内产生了结节。结论作为EBV的一个癌基因BARF1能够使细胞发生恶性转化,获得肿瘤细胞生长的特性,在人胃上皮细胞恶性转化过程中起重要作用。 展开更多
关键词 人胃上皮细胞 转染 BARF1基因
携带BARF1基因的人胃上皮细胞株的建立 预览
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作者 李淑英 张科 +5 位作者 杜海军 王湛 慈雅丽 王新燕 周玲 曾毅 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期 407-410,共4页
目的建立携带BARF1基因的人胃上皮细胞株,为探讨EB病毒编码BARF1基因对胃上皮细胞的影响而建立体外模型。方法构建携带BARF1基因的真核载体pcDNA3.1(+)-his/BARF1,转染人胃上皮细胞系GES-1,G418筛选单克隆。用CCK-8检测未转染的GES-... 目的建立携带BARF1基因的人胃上皮细胞株,为探讨EB病毒编码BARF1基因对胃上皮细胞的影响而建立体外模型。方法构建携带BARF1基因的真核载体pcDNA3.1(+)-his/BARF1,转染人胃上皮细胞系GES-1,G418筛选单克隆。用CCK-8检测未转染的GES-1、转染空载体GES-1及转染BARF1基因的GES-1增殖状况。结果双酶切鉴定,666bp的BARF1基因片段已连接到真核表达载体pcDNA3.1(+)-his。转染细胞通过G418筛选,获得了稳定表达BARF1基因的人胃上皮细胞株,转染BARF1基因的GES-1细胞增殖速度显著高于未转染的GES-1和转染空载体GES-1细胞(P〈0.01)。结论建立了稳定表达BARF1基因的人胃上皮细胞株。 展开更多
关键词 人胃上皮细胞 转染 BARF1基因
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密码子优化的甲型H1N1流感病毒HA/HA1基因真核载体的构建及初步表达 预览
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作者 李捧花 张晓光 +2 位作者 王晶钰 马晶 张晓梅 《西北农林科技大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2010年第11期共7页
【目的】构建甲型流感病毒H1N1血凝素基因HA/HA1的真核表达载体,并检测其在BHK-21细胞中的表达。【方法】按照人的偏爱密码子,对H1N1流感病毒的HA/HA1基因进行优化改造,以提高其表达量,经全基因合成后插入到真核表达载体pSNAV中,构建了... 【目的】构建甲型流感病毒H1N1血凝素基因HA/HA1的真核表达载体,并检测其在BHK-21细胞中的表达。【方法】按照人的偏爱密码子,对H1N1流感病毒的HA/HA1基因进行优化改造,以提高其表达量,经全基因合成后插入到真核表达载体pSNAV中,构建了真核表达质粒pSNAV-Mod. HA与pSNAV-Mod. HA1;质粒转染BHK-21细胞,G418筛选后,用免疫荧光及Western blot技术检测其表达情况。【结果】成功构建了血凝素基因HA/HA1的真核表达载体。经G418筛选得到单克隆,免疫荧光技术和Western blot检测10代,显示Mod. HA和Mod. HA1皆可在BHK-21细胞中稳定表达。【结论】成功构建的流感病毒HA和HA1真核表达载体,可为今后开展多基因表达的基因工程疫苗及H1N1检测试剂奠定基础。 展开更多
关键词 流感病毒 HA基因 HA1基因 密码子优化 真核表达
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密码子优化的人H5N1流感病毒HA基因在哺乳动物细胞中获得高效表达 预览
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作者 李魁彪 张晓光 +6 位作者 马晶 贾晓俊 王敏 董婕 张晓梅 徐红 舒跃龙 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期 101-105,共5页
为了提高人禽流感病毒血凝素HA的表达量,应对流感大流行疫苗的需求,按照人的偏爱密码子将H5N1(A/Anhui/1/2005)流感病毒的HA基因进行优化改造,经全基因合成后插入到真核表达载体pDC315中,构建了真核表达质粒pDC315-Mod.HA;... 为了提高人禽流感病毒血凝素HA的表达量,应对流感大流行疫苗的需求,按照人的偏爱密码子将H5N1(A/Anhui/1/2005)流感病毒的HA基因进行优化改造,经全基因合成后插入到真核表达载体pDC315中,构建了真核表达质粒pDC315-Mod.HA;将此质粒和含野生HA基因的真核表达质粒pDC315-Wt.HA分别转染293T细胞,比较HA蛋白的表达量。结果表明:经间接免疫荧光实验及Western blot实验比较和鉴定,密码子优化后,HA蛋白在293T细胞中的表达水平显著提高,为流感大流行疫苗的研究打下了基础。 展开更多
关键词 H5N1 HA 密码子优化 真核表达
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北京部分地区女性下生殖道感染流行病学调查 被引量:3
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作者 王晓莉 刘朝晖 +2 位作者 周玲 廖秦平 刘宏图 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期119-121,共3页
目的调查北京地区部分农村人口、流动人口、高危人群及医务工作者女性下生殖道感染情况。方法分别在北京市门头沟区医院、北京市展览路医院及北京大学第一医院对当地农村人口、流动人口(批发市场商户)、北京大学第一医院妇科门诊就诊... 目的调查北京地区部分农村人口、流动人口、高危人群及医务工作者女性下生殖道感染情况。方法分别在北京市门头沟区医院、北京市展览路医院及北京大学第一医院对当地农村人口、流动人口(批发市场商户)、北京大学第一医院妇科门诊就诊人群及北京大学第一医院医务人员体检人群进行女性下生殖道感染调查,对所有参加者进行调研表登记及各项下生殖道感染指标检查,比较四组患者的流行病学资料。结果衣原体感染在下生殖道感染中发病率最高;滴虫阳性与阴性者相比较,盆浴者感染率高于淋浴者;北京大学第一医院门诊就诊人群衣原体感染阳性率明显高于其他三组人群。结论下生殖道感染在女性中发病率高,其中衣原体发生率最高(12.6%),卫生习惯中盆浴可能与滴虫感染率的升高有一定的关系(P=0.02,P〈0.05)。 展开更多
关键词 生殖器疾病 女(雌)性 感染 流行病学
新一代腺病毒载体研究进展 被引量:2
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作者 付华 周玲 曾毅 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期 190-193,共4页
由于腺病毒载体具有高核转移效率,对人致病性低等优点,所以在众多的载体系统中脱颖而出,成为基础研究、基因治疗和重组疫苗开发等领域中的重要工具.至今腺病毒载体已经发展了3代:第1代腺病毒载体(通常来源于Ad5和Ad2)主要是去除了E1和(... 由于腺病毒载体具有高核转移效率,对人致病性低等优点,所以在众多的载体系统中脱颖而出,成为基础研究、基因治疗和重组疫苗开发等领域中的重要工具.至今腺病毒载体已经发展了3代:第1代腺病毒载体(通常来源于Ad5和Ad2)主要是去除了E1和(或)E3区;第2代腺病毒在E1、E3缺失的基础上进一步去除了E2和(或)E4区;然后人们对腺病毒进行彻底的缺失,发展了第3代腺病毒载体,即high-capacity Ad vectors(HC-Ad),它仅含有ITRS和包装信号. 展开更多
关键词 载体研究 腺病毒载体 转移效率 载体系统 基础研究 疫苗开发 基因治疗 致病性 E3区 第3代 E1 去除 缺失
重组巴氏毕赤酵母高密度发酵表达人乳铁蛋白的研究
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作者 应革 吴淑华 +4 位作者 王静 赵小东 陈建明 张晓光 侯云德 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期 181-185,共5页
目的在保持生物学活性的前提下,实现人乳铁蛋白基因在巴氏毕赤酵母中的高密度发酵表达.方法从人外周血中分离中性粒细胞,提取总RNA,RT-PCR方法获得人乳铁蛋白前体全长cDNA序列,适当改造后克隆至巴氏毕赤酵母表达载体pPIC 3.5 K上并转化... 目的在保持生物学活性的前提下,实现人乳铁蛋白基因在巴氏毕赤酵母中的高密度发酵表达.方法从人外周血中分离中性粒细胞,提取总RNA,RT-PCR方法获得人乳铁蛋白前体全长cDNA序列,适当改造后克隆至巴氏毕赤酵母表达载体pPIC 3.5 K上并转化酵母宿主KM71,双层滤膜法筛选高表达株进行补料分批发酵,对发酵产物的理化及生物学活性进行初步检测.结果筛选到一株人乳铁蛋白表达量较高的重组巴氏毕赤酵母p3.5-k-7并对其进行了补料分批发酵.整个发酵历时约9 d,菌浓吸光度A600值最高达到260以上,重组人乳铁蛋白最高表达量为115 mg/L,是摇瓶培养条件下的7.67倍.结论成功实现了人乳铁蛋白基因在巴氏毕赤酵母中的高密度发酵表达,并对发酵参数的优化进行了初步探索. 展开更多
关键词 重组巴氏毕赤酵母 高密度发酵 人乳铁蛋白 基因表达 发酵参数
用甲醇酵母表达经基因优化的HPV6型L1蛋白 被引量:2
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作者 李平川 张晓光 +1 位作者 周玲 曾毅 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期 310-314,共5页
目的利用甲醇酵母系统Pichia pastoris高效表达HPV 6型L1蛋白.方法按照Pichia pastoris偏爱密码子合成L1全长基因,构建pPIC3.5K- HPV6- L1表达载体,转化KM71,经组氨酸缺陷的MD培养基和G418筛选,PCR 确认L1基因整合,使用BMGY/BMMY培养/... 目的利用甲醇酵母系统Pichia pastoris高效表达HPV 6型L1蛋白.方法按照Pichia pastoris偏爱密码子合成L1全长基因,构建pPIC3.5K- HPV6- L1表达载体,转化KM71,经组氨酸缺陷的MD培养基和G418筛选,PCR 确认L1基因整合,使用BMGY/BMMY培养/诱导目的基因的表达.结果筛选到3株阳性表达克隆,Western blot显示表达产物有部分糖基化现象,使用能识别完整VLP的单抗进行间接免疫荧光检测提示L1蛋白在Pichia细胞内以空间构象形式存在.通过离子交换和亲和层析两步纯化从1L发酵液中得到125 μg纯的L1蛋白.结论通过基因优化在甲醇酵母中表达HPV6- L1蛋白,这将为结构与功能研究以及疫苗开发提供条件. 展开更多
关键词 甲醇酵母系统 基因优化 乳头状瘤病毒 HPV 克隆 尖锐湿疣
BARF1基因转染对人胃上皮细胞Bcl-2表达的影响 预览
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作者 张科 张垅 +5 位作者 李淑英 杜海军 赵莹 张云茹 周玲 曾毅 《河北联合大学学报:医学版》 2013年第2期144-145,共2页
①目的探讨EB病毒编码BARFl基因对人胃上皮细胞Bcl-2表达的影响。②方法用携带BARFl基因的真核载体PIRES2-EGFP/BARFI,转染人胃上皮细胞系GES-l,G418筛选单克隆。用免疫组化法检测转染细咆及采转染细胞Bcl-2的表达状况。⑧结果... ①目的探讨EB病毒编码BARFl基因对人胃上皮细胞Bcl-2表达的影响。②方法用携带BARFl基因的真核载体PIRES2-EGFP/BARFI,转染人胃上皮细胞系GES-l,G418筛选单克隆。用免疫组化法检测转染细咆及采转染细胞Bcl-2的表达状况。⑧结果获得稳定表达BAR.F1基因的人胃上皮细胞株,转染BARFl基因的细胞Bcl-2表达显著高于未转染和转染空载体GES-1细胞(P〈0.01)。④结论BARFl基因可能上调了人胃上皮细胞Bcl-2表达。 展开更多
关键词 人胃上皮细胞 BARF1基因转染 BCL-2
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人乳头瘤病毒16型内变异株与宫颈病变
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作者 郝敏 王晓莉 +1 位作者 卞美璐 刘宏图 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期24-26,共3页
目的 研究患宫颈上皮内瘤变(Cervical intraepithelial neoplasia,CIN)的汉族妇女中人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)16型内变异株的类型及其在临床上的意义.方法 随机收集中日友好医院妇科门诊就诊的77例感染HPV16的汉族患... 目的 研究患宫颈上皮内瘤变(Cervical intraepithelial neoplasia,CIN)的汉族妇女中人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)16型内变异株的类型及其在临床上的意义.方法 随机收集中日友好医院妇科门诊就诊的77例感染HPV16的汉族患者的宫颈脱落细胞DNA,用PCR法扩增HPV16型包含E6和E7基因的DNA片段并测序.通过对测序得到的E6基因序列与GenBank下载的参考株的比对,研究77例汉族患者中HPV16变异株的类型并探讨其与CIN的关系.结果 纳入研究的77例患者中,最小年龄21岁,最大年龄56岁,平均年龄36.39±6.86岁.其中,CIN Ⅱ级以下病变16例(占比20.8%),CIN Ⅱ级及以上病变61例(占比79.2%).HPV16型内变异株只有亚洲株和欧洲株两种,亚洲株38例,欧洲株39例.经χ^2检验,χ^2=0.0034,P〉0.05,尚不支持亚洲株与欧洲株的致癌作用不同.结论 虽然本研究未发现HPV16型亚洲株与欧洲株的致癌作用不同,但本研究发现77例汉族患者感染的HPV16型内变异株以亚洲株和欧洲株为主,故我们有理由推测,HPV16型内变异株在我国汉族妇女中的分布以亚洲株和欧洲株为主,而其他变异株,特别是高致癌的亚美株并不常见. 展开更多
关键词 乳头状瘤病毒 变异(遗传学) 序列分析 宫颈肿瘤
鼻咽癌血清学检测方法的改进 被引量:1
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作者 詹少兵 钟建明 +4 位作者 麦稚平 叶树清 周玲 曾毅 廖建 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期65-67,共3页
目的改进现有鼻咽癌血清学早期诊断方法,提高检测灵敏度。方法用链霉亲和素一生物素放大免疫酶法与既有常规免疫酶法对鼻咽癌防治示范基地所取294份普查血清IgA/VCA,IgMEA抗体进行血清学检测,并用SPSS统计软件对检测结果进行χ^2检... 目的改进现有鼻咽癌血清学早期诊断方法,提高检测灵敏度。方法用链霉亲和素一生物素放大免疫酶法与既有常规免疫酶法对鼻咽癌防治示范基地所取294份普查血清IgA/VCA,IgMEA抗体进行血清学检测,并用SPSS统计软件对检测结果进行χ^2检验和t检验。结果共检测30岁以上294份普查人群血清,其中鼻咽癌患者血清106份,健康人血清188份。改进的链霉亲和素.生物素放大免疫酶法与既往已有的免疫酶法相比,血清IgMVCA、IgMEA抗体的检测阳性率增加;检测血清抗体的几何平均数明显提高。结论改进方法可以提高血清学检测的灵敏度,同时保证了检测结果的特异性,提高了鼻咽癌的检出率,可以应用于鼻咽癌早期筛查工作。 展开更多
关键词 疱疹病毒4型 鼻咽肿瘤 抗生蛋白链菌素 生物素
生物素—链霉亲和素放大免疫酶法在鼻咽癌血清学检测中的应用
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作者 詹少兵 麦稚平 +5 位作者 谭珍连 钟建明 叶树清 周玲 廖建 曾毅 《中国肿瘤》 CAS 2009年第5期396-398,共3页
[目的]探讨生物素一链霉亲和素放大免疫酶法(BSA)应用于鼻咽癌(NPC)IgA/EA血清学早期筛查效果,提高鼻咽癌早期诊断效率。[方法]免疫酶法(IE)检测广西鼻咽癌示范基地筛查血清中IgA/VCA(针对EBV壳抗原VCA的IgA型抗体),IgA/VC... [目的]探讨生物素一链霉亲和素放大免疫酶法(BSA)应用于鼻咽癌(NPC)IgA/EA血清学早期筛查效果,提高鼻咽癌早期诊断效率。[方法]免疫酶法(IE)检测广西鼻咽癌示范基地筛查血清中IgA/VCA(针对EBV壳抗原VCA的IgA型抗体),IgA/VCA阳性者再用IE法及生物素-链霉亲和素放大免疫酶法(BSA)分别检测血清IgA/EA(针对EBV早期抗原EA的IgA型抗体),以临床病理检查结果为确诊标准,t检验及χ^2检验统计分析改进前后两种方法在鼻咽癌血清学早期检测方面的差异。[结果]IE法检测IgA/VCA阳性血清388例,IE法检测IgA/EA阳性率3.6%(14例1,BSA法检测IgA/EA阳性率12.9%(50例),BSA法检出阳性率显著高于IE法(χ2=22.070,P〈0.001)。在两种方法检测的血清IgA/EA均阳性的样品中,IgA/EA检测滴度的几何平均值(GMT)分别为1:17.04和1:51.87,BSA法显著高于IE法(t=2.804,P〈0.05)。进一步的病理检测确诊鼻咽癌患者16例,BSA法提高了NPC检测灵敏度(χ^2=16.347.P〈0.001)。[结论]用生物素一链霉亲和素放大免疫酶法(BSA)检测血清EBV相关抗体特异性较高,并且可以提高鼻咽癌血清学早期检测的灵敏度,为在基层开展更有效的流行病学筛查提供了可行的方法。 展开更多
关键词 EBV 鼻咽肿瘤 链霉亲和素 生物素 筛查
EB病毒感染与胃癌患者临床病理特征相关性的Meta分析 被引量:4
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作者 李淑英 杜海军 +3 位作者 王湛 周玲 赵晓瑜 曾毅 《中国科学:C辑》 CSCD 北大核心 2009年第9期891-897,共7页
EB病毒(EPstein-Barr virus,EBV)感染与多种恶性肿瘤的发生相关.大约10%的胃癌组织细胞中可以检测到EB病毒编码的小RNA(EBERs),表明EBV感染与部分胃癌的发生相关.为研究EBV感染与胃癌临床病理特征的相关性,本研究汇总了EBV相关胃癌... EB病毒(EPstein-Barr virus,EBV)感染与多种恶性肿瘤的发生相关.大约10%的胃癌组织细胞中可以检测到EB病毒编码的小RNA(EBERs),表明EBV感染与部分胃癌的发生相关.为研究EBV感染与胃癌临床病理特征的相关性,本研究汇总了EBV相关胃癌的研究论文,对采用原位杂交方法检测EBV的22篇论文进行了Meta分析.22篇入选的论文中收集的胃癌病例5475例,检测到EBV阳性病例411例,EBV阳性率为7.5%.在EBV阳性胃癌中,男性检出率为11.1%,女性检出率为3.0%,男性检出率相当于女性检出率3倍多;EBV阳性胃癌与阴性胃癌相比具有较少的淋巴结转移;EBV阳性胃癌与癌组织发生部位相关,并且残胃癌中EBV感染率较高.依据组织学分型,EBV阳性胃癌弥漫型为8.1%,肠型为8.0%.统计分析显示,EBV感染与组织学分型无显著相关性(P〉0.05);被检标本类型包括存档蜡块和新鲜手术切除组织标本:EBV阳性率分别为7.9%,6.5%.统计分析表明,EBV相关胃癌与标本类型无显著相关性(P〉0.05);在地域分布方面,EBV阳性胃癌检出率美洲为9.4%,亚洲为6.1%,欧洲为9.1%,统计分析显示,EBV相关胃癌与地域分布显著相关(P〈0.05).Meta分析表明,EBV感染仅发生在胃癌组织细胞中,并且与患者性别、淋巴结转移、肿瘤组织发生部位及地域分布显著相关(P〈0.05),与患者肿瘤组织学分型、标本类型无显著相关性(P〉0.05).结果提示,EBV阳性胃癌具有独特的临床病理学特征. 展开更多
关键词 EB病毒 胃癌 META分析 原位杂交
地震灾区环境与女性生殖道感染 预览 被引量:1
16
作者 李颖 郝敏 +1 位作者 王晓莉 刘宏图 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期12-13,共2页
四川省汶川大地震后,随着灾区应急状态的基本结束和灾区重建工作的启动.包括都江堰市、什邡市等在内的地震重灾区的社会秩序逐渐进入了常态。因而,有关地震灾区的公共卫生策略也应随着常态的进入而进行若干调整。女性生殖道感染(rep... 四川省汶川大地震后,随着灾区应急状态的基本结束和灾区重建工作的启动.包括都江堰市、什邡市等在内的地震重灾区的社会秩序逐渐进入了常态。因而,有关地震灾区的公共卫生策略也应随着常态的进入而进行若干调整。女性生殖道感染(reproductive tract infection,RTI)是妇科常见病,若不及时治疗,可降低生活质量、影响妊娠结局、降低出生人口质量、增加疾病负担等,极大地影响女性的生活质量和健康水平。 展开更多
关键词 女性生殖道感染 地震灾区 环境 公共卫生策略 出生人口质量 生活质量 妇科常见病 都江堰市
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保定地区食管癌患者癌组织中人乳头瘤病毒感染的检测 被引量:3
17
作者 赵晓瑜 李淑英 +6 位作者 李颖 王晓莉 李玉兰 吴晓舟 周玲 刘宏图 曾毅 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期91-93,共3页
目的探讨人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)与我国河北省保定地区食管癌发生的相关性。方法应用HPVL1通用引物GP5+/6+、HPV16E6和HPV18E6型特异性引物多聚酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR),检测保定地区食管癌... 目的探讨人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)与我国河北省保定地区食管癌发生的相关性。方法应用HPVL1通用引物GP5+/6+、HPV16E6和HPV18E6型特异性引物多聚酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR),检测保定地区食管癌组织中HPV存在状况。结果42例食管癌组织中,37例检测到HPV阳性,阳性率为88.1%;其中19例检测到HPV16E6基因,阳性率为45.2%,8例为HPV18E6基因阳性,阳性率为19.0%,5例HPV16E6和18E6基因均阳性,为混合感染。结论我国河北省保定地区食管癌组织中有HPV存在,并且HPV感染可能是食管癌发生的重要影响因子。 展开更多
关键词 食管肿瘤 乳头状瘤病毒 聚合酶链反应
应用聚合酶链反应检测食管癌组织中人乳头瘤病毒 被引量:6
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作者 李淑英 李颖 +5 位作者 王立东 吴晓舟 周玲 赵晓瑜 刘宏图 曾毅 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期251-253,共3页
目的探讨人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)与我国河南地区食管癌发生的相关性。方法应用HPVL1通用引物GP5+/6+、HPV16E6和HPV18E6型特异性引物多聚酶链反应(Pol,merase chain reaction,PCR),检测林州市食管癌组织中HP... 目的探讨人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)与我国河南地区食管癌发生的相关性。方法应用HPVL1通用引物GP5+/6+、HPV16E6和HPV18E6型特异性引物多聚酶链反应(Pol,merase chain reaction,PCR),检测林州市食管癌组织中HPV存在状况。结果3l例食管癌组织中,29例检测到HPV阳性,阳性率为93.5%;其中19例检测到HPV16E6基因,阳性率为61.3%,8例为HPV18E6基因阳性,阳性率为25.8%,5例HPV16E6和18E6基因均阳性,为混合感染。HPV16和18型阳性率为71.0%。结论我国河南省林州市食管癌组织中有HPV存在,并且HPV感染可能是食管癌发生的重要病因。 展开更多
关键词 食管肿瘤 乳头状瘤病毒 聚合酶链反应
含密码子优化型HIV-1gp120基因重组腺病毒的构建及其免疫效果研究
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作者 冯霞 余双庆 +3 位作者 陈国敏 左建民 周玲 曾毅 《中国生物学文摘》 2005年第2期 27-31,共5页
目的 构建能表达野生型利密码子优化型人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)B亚型中国流行株gp120基因的非复制型腺病毒。方法 按哺乳动物细胞偏好的密码子对HIV-1B亚型中国流行株Ch gp42的gp120基因进行优化,合成优化基因。将野生型和密码子优化... 目的 构建能表达野生型利密码子优化型人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)B亚型中国流行株gp120基因的非复制型腺病毒。方法 按哺乳动物细胞偏好的密码子对HIV-1B亚型中国流行株Ch gp42的gp120基因进行优化,合成优化基因。将野生型和密码子优化的gp120基因插入穿梭质粒.再与腺病毒骨架质粒pAdEasv-1共转化E.coli BJ5183,获得重组子.转染293细胞后获得重组病毒。分别以两种重组腺病毒疫苗免疫小鼠.ELISA检测小鼠血清中的特异性抗体,乳酸脱氢酶法检测小鼠细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应。结果 获得两株重组腺病毒rAd-wt.gp120和rAd-mod.gp120,能正确表达Gp120。rAd-mod.gp120比rAd-wt.gp120蛋白表达水平明显提高。重组腺病毒免疫小鼠后能产生HIV-1特异性的抗体及CTL反应,rAd-mod.gp120组明显优于rAd-wt.gp120组。结论 成功构建了表达野生型和密码子优化的HIV1gp120基因的重组腺病毒.能诱导HIV-1特异性体液利细胞免疫反应。 展开更多
关键词 GP120 HIV-1 重组腺病毒 基因 表达 B亚型 小鼠 密码子 重组子 哺乳动物细胞
含密码子优化型HIV-1 gp120基因重组腺病毒的构建及其免疫效果研究 被引量:3
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作者 冯霞 余双庆 +3 位作者 陈国敏 左建民 周玲 曾毅 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期 113-117,共5页
目的构建能表达野生型和密码子优化型人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)B亚型中国流行株gp120基因的非复制型腺病毒.方法按哺乳动物细胞偏好的密码子对HIV-1 B亚型中国流行株Ch gp42的gp120基因进行优化,合成优化基因.将野生型和密码子优化的gp... 目的构建能表达野生型和密码子优化型人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)B亚型中国流行株gp120基因的非复制型腺病毒.方法按哺乳动物细胞偏好的密码子对HIV-1 B亚型中国流行株Ch gp42的gp120基因进行优化,合成优化基因.将野生型和密码子优化的gp120基因插入穿梭质粒,再与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化E.coli BJ5183,获得重组子,转染293细胞后获得重组病毒.分别以两种重组腺病毒疫苗免疫小鼠,ELISA检测小鼠血清中的特异性抗体,乳酸脱氢酶法检测小鼠细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应.结果获得两株重组腺病毒rad-wt.gp120和rAd-mod.gp120,能正确表达Gp120.rAd-mod.gp120比rAd-wt.gp120蛋白表达水平明显提高.重组腺病毒免疫小鼠后能产生HⅣ-1特异性的抗体及CTL反应,rAd-mod.gp120组明显优于rAd-wt.gp120组结论成功构建了表达野生型和密码子优化的HIV-1 gp120基因的重组腺病毒,能诱导HIV-1特异性体液和细胞免疫反应. 展开更多
关键词 HIV-1 GP120 重组腺病毒 免疫效果 人免疫缺陷病毒Ⅰ型 密码子优化型 野生型 基因优化
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