目的探讨6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-二磷酸酶(6-phosphofructokinase-2/fructose-2,6-bisphosphatase 3,PFKFB3)抑制剂3-(3-吡啶基)-1-(4-吡啶基)-2-丙烯-1-酮[3-(3-pyridinyl)-1-(4-pyridinyl)-2-propen-1-one,3PO]对高糖环境下人脐...目的探讨6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-二磷酸酶(6-phosphofructokinase-2/fructose-2,6-bisphosphatase 3,PFKFB3)抑制剂3-(3-吡啶基)-1-(4-吡啶基)-2-丙烯-1-酮[3-(3-pyridinyl)-1-(4-pyridinyl)-2-propen-1-one,3PO]对高糖环境下人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)增殖、迁移和管腔形成的影响。方法将传代培养的HUVEC随机分为4组:正常对照组(5.5 mmol·L ^-1 葡萄糖)、高渗组(5.5 mmol·L ^-1 葡萄糖+24.5 mmol·L ^-1 甘露醇)、高糖组(30.0 mmol· L ^-1 葡萄糖)及高糖+3PO组(30.0 mmol·L ^-1 葡萄糖+ 10 μmol·L ^-1 3PO)。细胞同步化后按分组情况更换相应培养基,继续培养细胞,用于后续实验。采用MTS实验检测细胞增殖率,细胞划痕实验检测细胞迁移率,体外管腔形成实验检测细胞成管情况,实时荧光定量PCR检测PFKFB3 mRNA表达,Western blot检测PFKFB3及ERK蛋白表达情况。结果与正常对照组相比,高渗组细胞增殖能力降低(均为 P <0.05);24 h高糖组细胞增殖能力无明显升高( P >0.05),48 h高糖组细胞增殖能力升高( P <0.05)。与高糖组相比,高糖+3PO组细胞增殖能力明显被抑制(均为 P <0.05)。与正常对照组相比,高渗组细胞迁移率明显升高(均为 P <0.05);24 h高糖组细胞迁移率明显升高( P <0.05),但在48 h高糖组中细胞迁移率升高不明显( P >0.05)。与高糖组相比,高糖+3PO组细胞迁移率明显降低(均为 P <0.05)。与正常对照组相比,高渗组及高糖组细胞管腔形成能力均明显减弱(均为 P <0.05)。与高糖组相比,高糖+3PO组细胞管腔形成能力减弱( P <0.05)。与正常对照组相比,高渗组PFKFB3 mRNA的表达水平变化不大( P >0.05),高糖组PFKFB3 mRNA的表达升高( P <0.05)。与高糖组相比,高糖+3PO组 PFKFB3 mRNA的表达明显降低( P <0.05)。与正常对照组相比,高渗组及高糖组中p-ERK/ERK蛋白比值及PFKFB3蛋白表达均升高(均为 P <0.05)。与高糖组相比,高糖+3PO组p-ERK /ERK蛋白比值展开更多
文摘目的探讨6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-二磷酸酶(6-phosphofructokinase-2/fructose-2,6-bisphosphatase 3,PFKFB3)抑制剂3-(3-吡啶基)-1-(4-吡啶基)-2-丙烯-1-酮[3-(3-pyridinyl)-1-(4-pyridinyl)-2-propen-1-one,3PO]对高糖环境下人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)增殖、迁移和管腔形成的影响。方法将传代培养的HUVEC随机分为4组:正常对照组(5.5 mmol·L ^-1 葡萄糖)、高渗组(5.5 mmol·L ^-1 葡萄糖+24.5 mmol·L ^-1 甘露醇)、高糖组(30.0 mmol· L ^-1 葡萄糖)及高糖+3PO组(30.0 mmol·L ^-1 葡萄糖+ 10 μmol·L ^-1 3PO)。细胞同步化后按分组情况更换相应培养基,继续培养细胞,用于后续实验。采用MTS实验检测细胞增殖率,细胞划痕实验检测细胞迁移率,体外管腔形成实验检测细胞成管情况,实时荧光定量PCR检测PFKFB3 mRNA表达,Western blot检测PFKFB3及ERK蛋白表达情况。结果与正常对照组相比,高渗组细胞增殖能力降低(均为 P <0.05);24 h高糖组细胞增殖能力无明显升高( P >0.05),48 h高糖组细胞增殖能力升高( P <0.05)。与高糖组相比,高糖+3PO组细胞增殖能力明显被抑制(均为 P <0.05)。与正常对照组相比,高渗组细胞迁移率明显升高(均为 P <0.05);24 h高糖组细胞迁移率明显升高( P <0.05),但在48 h高糖组中细胞迁移率升高不明显( P >0.05)。与高糖组相比,高糖+3PO组细胞迁移率明显降低(均为 P <0.05)。与正常对照组相比,高渗组及高糖组细胞管腔形成能力均明显减弱(均为 P <0.05)。与高糖组相比,高糖+3PO组细胞管腔形成能力减弱( P <0.05)。与正常对照组相比,高渗组PFKFB3 mRNA的表达水平变化不大( P >0.05),高糖组PFKFB3 mRNA的表达升高( P <0.05)。与高糖组相比,高糖+3PO组 PFKFB3 mRNA的表达明显降低( P <0.05)。与正常对照组相比,高渗组及高糖组中p-ERK/ERK蛋白比值及PFKFB3蛋白表达均升高(均为 P <0.05)。与高糖组相比,高糖+3PO组p-ERK /ERK蛋白比值