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番茄细菌性斑点病菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
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作者 柴阿丽 帕提古丽 +4 位作者 郭威涛 石延霞 谢学文 席先梅 李宝聚 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期182-192,共11页
以番茄细菌性斑点病病原菌丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv. tomato,Pst)的致病相关基因HrpZ为靶序列,设计了特异性引物Pst3F/Pst3R,能从Pst基因组DNA中特异性扩增出大小为161 bp的目的片段。建立的Pst实时荧光定量PC... 以番茄细菌性斑点病病原菌丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv. tomato,Pst)的致病相关基因HrpZ为靶序列,设计了特异性引物Pst3F/Pst3R,能从Pst基因组DNA中特异性扩增出大小为161 bp的目的片段。建立的Pst实时荧光定量PCR检测技术体系的检测灵敏度比普通PCR高1 000倍。利用实时荧光定量PCR检测体系,检测模拟带菌种子中Pst的带菌量,检测下限为4.21 cfu·g^-1;检测人工接种叶片组织中Pst的带菌量,检测到1级发病叶片带菌量为4.15×102 cfu·g^-1。对田间采集的63个番茄细菌性斑点病明显症状和疑似症状样本,分别进行了实时荧光定量PCR、普通PCR和病原菌分离检测,检测到54个样本中含有Pst,3种方法检测结果一致。结果表明,建立的Pst实时荧光定量PCR检测体系具有特异性强、灵敏度高的特点,可以快速准确地定量检测番茄种子和发病组织中Pst的含量,为番茄细菌性斑点病的早期预防和流行监测提供了有效的技术手段。 展开更多
关键词 番茄 丁香假单胞菌番茄致病变种 实时荧光定量PCR 种子检测 组织检测
超高效液相色谱-串联质谱法测定猪肉和猪肝中烯丙孕素残留
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作者 任玉琴 卜仕金 +1 位作者 王双 钱鸣蓉 《食品安全质量检测学报》 CAS 2018年第9期2118-2123,共6页
目的建立猪肉和猪肝中烯丙孕素残留测定的超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)。方法肌肉和肝脏样品,经β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶酶解、乙腈提取、乙腈... 目的建立猪肉和猪肝中烯丙孕素残留测定的超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)。方法肌肉和肝脏样品,经β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶酶解、乙腈提取、乙腈饱和正己烷溶液除脂;经乙酸乙酯溶解后,用10%碳酸钠溶液净化,UPLC-MS/MS测定,外标法定量。结果烯丙孕素在猪肉和猪肝中的检测限为0.5μg/kg,定量限为1.0μg/kg;在1.0、2.0和5.0μg/kg浓度添加的回收率为68.8%~87.6%、日内相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为1.8%~8.9%,日间RSD为1.8%~6.9%。结论该方法操作简便、准确、重现性好,适用于猪肌肉、肝脏中烯丙孕素残留物含量测定。 展开更多
关键词 超高效液相色谱-串联质谱法 烯丙孕素 可食性组织中 残留检测
肉品品质变化的蒙特卡罗方法仿真
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作者 王建旭 范利锋 +1 位作者 王忠义 黄岚 《食品安全质量检测学报》 CAS 2018年第10期2433-2439,共7页
目的采用蒙特卡罗方法仿真研究检测间距对检测深度的影响以及光子在不同肉品组织中的迁移规律。方法使用Windows界面的蒙特卡罗仿真软件对肉品的不同品质、不同检测间距的光子迁移分布进行仿真。结果随着检测器与光源之间间距的增加,检... 目的采用蒙特卡罗方法仿真研究检测间距对检测深度的影响以及光子在不同肉品组织中的迁移规律。方法使用Windows界面的蒙特卡罗仿真软件对肉品的不同品质、不同检测间距的光子迁移分布进行仿真。结果随着检测器与光源之间间距的增加,检测深度逐渐增加;对于不同新鲜度的样品,散射系数在0.4~1.5 mm~(-1)范围内,随着散射系数的增大,光子在组织中的迁移路径长度逐渐减小,检测器可以捕获更多的光子包。结论对不同检测间距下检测深度的蒙特卡罗仿真实验结果与实际测定结果基本相同,因此蒙特卡罗仿真可以为光学在肉品无损检测方案的研究提供有效理论支撑。 展开更多
关键词 蒙特卡罗仿真 生物组织 光子迁移 品质变化 无损检测
烟草苗床期普通花叶病(TMV)组织印迹检测技术研究 预览 被引量:1
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作者 匡传富 刘世超 +2 位作者 曾涛 孙现超 陈德鑫 《农业科学》 2018年第8期967-975,共9页
本文探讨了烟草苗床期TMV组织印迹检测技术,包括第一抗血清最适浓度的确定、第一抗血清和第一抗血清最佳温度及时间的优化、烟苗最佳取样部位的选择、感染烟草普通花叶病毒后的发病时间、不同品种烟草花叶病毒发病情况检测等。结果表明... 本文探讨了烟草苗床期TMV组织印迹检测技术,包括第一抗血清最适浓度的确定、第一抗血清和第一抗血清最佳温度及时间的优化、烟苗最佳取样部位的选择、感染烟草普通花叶病毒后的发病时间、不同品种烟草花叶病毒发病情况检测等。结果表明:第一抗血清最适浓度以1000倍效果较理想;用第一抗血清稀释1000倍,第二抗血清稀释6000倍,样品在37℃恒温振荡器60r/min封闭状态下,与第一抗血清连接1h,37℃恒温震荡,与第二抗血清连接1h,37℃恒温震荡,效果最好;烟苗最佳取样部位的选择为叶柄中部;接种后第1天烟苗茎的各部位都有病毒积累,茎尖病毒积累出现较早,病毒接种第6天烟苗各个部位都检测到病毒的积累;试验了KRK26、K326、云烟87、红大、云烟97等5个品种,检测的5个样品均被TMV侵染,云烟97感染TMV的感病率最高,K326感病率最低。 展开更多
关键词 烟草 苗床期 普通花叶病(TMV) 组织印迹 检测技术
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激光诱导胃体组织自体荧光诊断早癌的检测系统研究及临床实验 预览
5
作者 陈正义 欧辉彬 +2 位作者 傅昇 林松挺 钟文州 《中国医疗设备》 2018年第10期57-59,63共4页
激光诱导自体荧光(LIAF)诊断技术是利用正常组织与癌变组织自体荧光光谱及强度存在明显差异来诊断病变,克服常规取样活检容易出现微小病变和较深层病变漏检的缺点,使临床诊断早癌变为现实.该系统在相同条件下对海口市人民医院消化内... 激光诱导自体荧光(LIAF)诊断技术是利用正常组织与癌变组织自体荧光光谱及强度存在明显差异来诊断病变,克服常规取样活检容易出现微小病变和较深层病变漏检的缺点,使临床诊断早癌变为现实.该系统在相同条件下对海口市人民医院消化内镜中心41个患者进行在体连续LIAF光谱检测和分析,以磷状细胞癌光谱图为中心分别与正常胃体组织,炎性组织、增生组织等进行横向分析比较查找出其差异性.LIAF光谱检测技术可以明确区分正常组织与癌变组织,实时发现早癌和癌前病变,实现“光活检”。 展开更多
关键词 激光诱导 自体荧光 癌变组织 光谱检测
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乳腺癌组织中GSTP1和BRCA1及MGMT基因甲基化状态及其与临床病理特征的关系研究 预览
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作者 钱小英 林海锋 +1 位作者 周安喜 卓曼云 《中国全科医学》 北大核心 2018年第24期2952-2956,共5页
目的 分析乳腺癌组织中胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)、乳腺癌易感基因1(BRCA1)、O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)基因甲基化状态及其与临床病理特征的关系。方法 选取2015年1月—2016年6月海南医学院第二附属医院收治的符合纳入标准的乳... 目的 分析乳腺癌组织中胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)、乳腺癌易感基因1(BRCA1)、O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)基因甲基化状态及其与临床病理特征的关系。方法 选取2015年1月—2016年6月海南医学院第二附属医院收治的符合纳入标准的乳腺癌患者100例为研究对象,采用甲基化特异性PCR法检测乳腺癌及癌旁组织中GSTP1、BRCA1、MGMT基因甲基化情况,并分析其与临床病理特征的关系,采用Cox回归分析分析GSTP1、BRCA1、MGMT基因甲基化状态与乳腺癌患者预后的关系。结果 乳腺癌组织中GSTP1、BRCA1、MGMT基因甲基化的发生率均高于癌旁组织(P<0.05)。每例患者乳腺癌组织甲基化基因数高于癌旁组织(P<0.05)。不同肿瘤分期、淋巴结转移情况的乳腺癌组织中甲基化基因数比较,差异有统计学意义(P<0.05);癌组织直径≥20 mm、有淋巴结转移乳腺癌组织的GSTP1基因甲基化阳性率高于癌组织直径<20 mm、无淋巴结转移乳腺癌组织(P<0.05);年龄<50岁、雌激素受体阴性乳腺癌组织BRCA1基因甲基化性阳率高于年龄≥50岁、雌激素受体阳性乳腺癌组织(P<0.05);组织学Ⅲ级、乳腺癌Ⅱ~Ⅳ期、有淋巴结转移乳腺癌组织MGMT基因甲基化阳性率高于组织学Ⅰ~Ⅱ级、乳腺癌Ⅰ期、无淋巴结转移乳腺癌组织(P<0.05)。Cox回归分析结果显示,GSTP1、BRCA1、MGMT基因甲基化阳性是乳腺癌患者预后的影响因素(P<0.05)。结论 乳腺癌组织中GSTP1、BRCA1、MGMT基因甲基化基因数目高于高于癌旁组织,而且其异常甲基化与乳腺癌临床病理特征有关,能影响乳腺癌病情进展。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 基因甲基化 组织检测 病理学
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甲状腺组织碘含量测定方法及应用的研究进展
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作者 吴言美智 Esma Jamaspishvili 乔虹 《中华实用诊断与治疗杂志》 2017年第7期719-721,共3页
碘是人体必需的微量元素之一,与甲状腺代谢、功能改变,甲状腺疾病发病密切相关。尿液、血液中碘含量检测结果易受多种影响因素干扰,而检测甲状腺组织碘含量可直接反映人体近期碘摄入量与体内储碘水平,反映机体的碘营养状况,对进一步了... 碘是人体必需的微量元素之一,与甲状腺代谢、功能改变,甲状腺疾病发病密切相关。尿液、血液中碘含量检测结果易受多种影响因素干扰,而检测甲状腺组织碘含量可直接反映人体近期碘摄入量与体内储碘水平,反映机体的碘营养状况,对进一步了解甲状腺疾病具有重要意义。本文就甲状腺组织碘含量测定方法及应用的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 甲状腺组织 碘含量测定 离子色谱法 能谱CT X射线荧光光谱分析
人体组织反射光谱的检测研究 预览
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作者 许智宏 吴琼 +4 位作者 孙丽清 戈小松 林学亮 林多 陈荣 《激光生物学报》 CAS 2017年第4期294-297,共4页
反射光谱是一种非侵入式的光学技术,可提高癌症实时反馈和诊断效率.本文综述了基于反射光谱技术在人体皮肤、口腔、肺、鼻咽等组织疾病的研究概况,包括离体组织和活体组织反射光谱的检测,展望了发展前景.
关键词 反射光谱 人体组织 癌症 检测
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菌袋培育竹荪栽培种的方法初探 预览
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作者 黄元射 陈敏 +1 位作者 刘守艳 聂中霞 《安顺学院学报》 2017年第6期129-132,共4页
为改进传统竹荪栽培种的培育方法,文章探讨用菌袋代替玻璃瓶培育竹荪栽培种。实验以贵州红托竹荪为实验材料,先制备出竹荪母种、液体二级菌种,待菌丝长出来以后选取菌丝生长最好的培养基进行扩大培养,再将获得的最好的液体菌种分别接种... 为改进传统竹荪栽培种的培育方法,文章探讨用菌袋代替玻璃瓶培育竹荪栽培种。实验以贵州红托竹荪为实验材料,先制备出竹荪母种、液体二级菌种,待菌丝长出来以后选取菌丝生长最好的培养基进行扩大培养,再将获得的最好的液体菌种分别接种于菌袋和玻璃瓶中,观察对比玻璃瓶和菌袋中竹荪菌丝的生长情况。实验结果表明:菌袋中菌丝体的生长情况、生长速率和菌丝质量都优于玻璃瓶。实验改善了原有的竹荪栽培菌种制种方法,为竹荪制种提供一个很好的理论依据,为菌农的增收提供一个实践基础。 展开更多
关键词 组织分离 液体菌种 生长周期 菌丝检测
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偏振光成像技术在眼科学中的应用展望 被引量:1
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作者 刘曦 朱垣洹 +1 位作者 何宏辉 马辉 《生命科学仪器》 2017年第5期3-8,共6页
随着现代眼科学的发展和防盲治盲工程的推进,对眼科疾病的检查方法和技术提出了更高的要求,发展更精准、有效的光学成像技术,是眼科学及光学交叉领域的重要研究问题。偏振光成像近年来在生物医学领域发展迅速并具有独特优势,呈现出越来... 随着现代眼科学的发展和防盲治盲工程的推进,对眼科疾病的检查方法和技术提出了更高的要求,发展更精准、有效的光学成像技术,是眼科学及光学交叉领域的重要研究问题。偏振光成像近年来在生物医学领域发展迅速并具有独特优势,呈现出越来越广阔的应用前景。本文对偏振光成像技术在眼科学的应用进行综述,重点阐述偏振光成像技术在眼科疾病临床诊疗、基础研究的发展、技术原理、仪器功能和应用优势,并提出讨论了偏振光成像技术结合眼科学现有形态学和功能学检查方法的应用展望。 展开更多
关键词 偏振光 成像 眼科 临床诊疗 组织检测
基于组合向量滤波的膝关节CT图像边缘检测 预览
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作者 李颖婕 赵晶 《厦门理工学院学报》 2017年第3期18-22,共5页
为克服传统分割方法依赖人工选取阈值的缺陷,提出基于组合向量滤波的膝关节CT图像边缘检测方法.经组合特征向量预处理后,利用拟牛顿算法改进的神经网络算法,实现膝关节CT图像自动分割和处理.仿真实验表明,处理后的图像能够较好地检测到... 为克服传统分割方法依赖人工选取阈值的缺陷,提出基于组合向量滤波的膝关节CT图像边缘检测方法.经组合特征向量预处理后,利用拟牛顿算法改进的神经网络算法,实现膝关节CT图像自动分割和处理.仿真实验表明,处理后的图像能够较好地检测到原始膝关节CT图像的边缘,边缘轮廓圆滑清晰,封闭性好.与传统神经网络方法相比,该检测方法可提高边缘特征信息的精度和处理效率. 展开更多
关键词 膝关节组织 CT图像 边缘检测 组合特征向量滤波 拟牛顿算法 神经网络
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生物阻抗谱技术在乳腺癌保乳手术中对切缘组织快速定性的有效性 被引量:2
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作者 陈玉娟 王晓东 +5 位作者 吴剑 付峰 朱彩蓉 蒲洋 向飞 戴涛 《四川大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期267-271,共5页
目的评价生物阻抗谱(bio-impedance spectroscopy,BIS)技术在乳腺癌保乳手术(breast-conserving surgery,BCS)过程中对切缘肿瘤细胞是否残留进行快速定性的有效性。方法采用多中心、平行试验设计,收集150份标本,对同一份被测切缘样... 目的评价生物阻抗谱(bio-impedance spectroscopy,BIS)技术在乳腺癌保乳手术(breast-conserving surgery,BCS)过程中对切缘肿瘤细胞是否残留进行快速定性的有效性。方法采用多中心、平行试验设计,收集150份标本,对同一份被测切缘样本按顺序先后使用BIS、冰冻切片活检和石蜡切片活检进行检测,在该标本的3项检测结果全部得到以后,将BIS的检测结果与冰冻切片活检的检查结果作一致性比较;将石蜡切片活检的检测结果作为金标准,评估BIS检测的灵敏度和特异度。比较三种方法的检测用时。结果BIS检测的灵敏度为92.98%,特异度为94.62%,与冰冻切片活检的一致性较高,Kappa值大于0.75。BIS检测时间均值为2.63min,短于冰冻切片活检(18.97min)和石蜡切片用时(1.12d)。结论利用BIS技术对乳腺癌保乳手术中的切缘样本是否含有癌变组织的定性检测具有较高准确性,适用于术中的快速判断。 展开更多
关键词 生物阻抗谱 乳腺癌保乳手术 组织鉴定 术中检测
磁共振组织介电特性断层成像在癌症早期发现中的应用 预览
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作者 辛学刚 《中国医学物理学杂志》 CSCD 2016年第12期1204-1207,共4页
基于新原理、新机制、新材料、新发现的新型成像前沿技术研究及其实现将为早期诊断、精确诊断、微创治疗、精准治疗提供核心技术支撑。“高场磁共振新成像机制一组织介电特性断层成像技术及其在临床乳腺、颅脑肿瘤诊断中的应用研究”项... 基于新原理、新机制、新材料、新发现的新型成像前沿技术研究及其实现将为早期诊断、精确诊断、微创治疗、精准治疗提供核心技术支撑。“高场磁共振新成像机制一组织介电特性断层成像技术及其在临床乳腺、颅脑肿瘤诊断中的应用研究”项目获得首批国家重点研发计划项目支持,该项目将开展磁共振组织介电特性断层成像(MREPT)技术研究,以实现无创高分辨率组织介电特性断层成像,并在临床乳腺、颅脑肿瘤诊断中开展应用研究。鉴于组织癌变后其介电特性改变较大,介电特性改变甚至达到几倍以上,MREPT技术有望为肿瘤早期发现带来新的工程技术手段。 展开更多
关键词 癌症 组织 早期诊断 磁共振成像 介电特性 断层成像
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一种新型优化的肺组织羟脯氨酸水平测定方法的建立 预览 被引量:2
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作者 彭方毅 周欢 +2 位作者 姜海蓉 袁兵占 崔玉花 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1354-1356,共3页
目的建立大鼠肺组织羟脯氨酸(HYP)水平测定方法,以评价大鼠肺组织纤维化程度。方法比较不同酸水解时间、氧化时间、显色时间等对大鼠肺组织HYP水平测定结果的影响,据此建立大鼠肺组织HYP水平测定方法,并初步应用于博莱霉素诱导大... 目的建立大鼠肺组织羟脯氨酸(HYP)水平测定方法,以评价大鼠肺组织纤维化程度。方法比较不同酸水解时间、氧化时间、显色时间等对大鼠肺组织HYP水平测定结果的影响,据此建立大鼠肺组织HYP水平测定方法,并初步应用于博莱霉素诱导大鼠肺纤维化HYP水平的测定。结果通过优化得出HYP水平测定最佳条件为110℃7.50mol盐酸(HCL)水解16h,常温氧化10min,60℃显色25min。本方法灵敏度为0.067/μg/mL,回收率为88.85%~110.88%,平均CV为4.70%~6.60%。该法应用于博莱霉素诱导大鼠肺纤维化研究中,模型组HYP水平明显高于对照组。结论该法灵敏度与回收率均较高、重现性较好,可用作临床对肺纤维化程度判定的定量方法。 展开更多
关键词 大鼠 组织 羟脯氨酸 检测 方法 优化
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露地菊离体再生体系建立及BrDFR基因遗传转化 被引量:3
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作者 许志茹 陈智华 +3 位作者 姜艳东 侯杰 佟玲 李玉花 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1517-1526,共10页
以露地菊(Chrysanthemum morifolium)品种‘神韵’无菌苗叶片为外植体材料,研究植物生长调节剂配比对其愈伤组织诱导再生芽的影响,以建立离体再生体系。研究结果表明,露地菊‘神韵’在含NAA1.0mg·L-1+BA1.0mg·L-1的MS培养... 以露地菊(Chrysanthemum morifolium)品种‘神韵’无菌苗叶片为外植体材料,研究植物生长调节剂配比对其愈伤组织诱导再生芽的影响,以建立离体再生体系。研究结果表明,露地菊‘神韵’在含NAA1.0mg·L-1+BA1.0mg·L-1的MS培养基上获得了最高的再生芽分化率。利用已经克隆的‘津田’芜菁BrDFR基因构建非抗生素筛选的表达载体。以露地菊‘神韵’的无菌苗叶片为受体,通过农杆菌介导进行BrDFR基因的遗传转化。以载体的PMI基因为筛选标记,通过甘露糖筛选获得了‘神韵’的遗传转化再生植株。经过PCR验证和Southern杂交检测证实BrDFR基因已经整合到‘神韵’基因组中。 展开更多
关键词 露地菊 组织培养 二氢黄酮醇4–还原酶基因 遗传转化 分子检测
食道癌组织表面增强拉曼光谱研究 被引量:1
16
作者 汪跃 陈炜生 +6 位作者 黄祖芳 刘嫩容 张吉学 林居强 翁存程 陈荣 冯尚源 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2013年第6期525-532,共8页
本研究采用以金纳米粒子为增强基底的表面增强拉曼光谱技术对31位食道癌患者的62例食道组织样本进行分析,其中包含31例肿瘤组织与31例正常组织.食道癌组织和正常组织表面增强拉曼光谱之间存在明显差异.利用主成分分析和线性判别分析算... 本研究采用以金纳米粒子为增强基底的表面增强拉曼光谱技术对31位食道癌患者的62例食道组织样本进行分析,其中包含31例肿瘤组织与31例正常组织.食道癌组织和正常组织表面增强拉曼光谱之间存在明显差异.利用主成分分析和线性判别分析算法对采集的组织表面增强拉曼光谱进行诊断研究.利用主成分分析-线性判别分析统计分析方法得到诊断灵敏度与特异性分别为90.3%与90.3%.为验证所构建的主成分分析-线性判别分析算法的有效性,利用受试样品的工作特征曲线方法,对所构建的算法的有效性进行评价.通过对组织表面增强拉曼光谱谱峰归属分析可知,癌组织中蛋白质结构可能发生变化,磷脂质的相对含量下降;而氨基化合物、组蛋白、苯基丙氨酸和酪氨酸的相对含量出现上升.研究表明,以金纳米粒子为增强基底的表面增强拉曼光谱技术结合主成分分析-线性判别分析统计分析方法能够准确区分食道癌患者肿瘤与正常组织.食道癌组织表面增强拉曼光谱技术有望成为一种食道癌的临床诊断与筛查工具. 展开更多
关键词 食道癌 组织 表面增强拉曼光谱 检测 金纳米粒子 PCA-LDA多元统计分析算法
南方养殖草鱼呼肠孤病毒的分子特性比较及双重PCR检测方法的建立 被引量:15
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作者 迟妍妍 田园园 +3 位作者 叶星 邓国成 黎炯 王杭军 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期358-365,共8页
本实验室2009年从广东省患典型出血病的养殖草鱼中分离到一株具强致病性的水生呼肠孤病毒GCRV-GD108株,该毒株具有11个节段双链RNA。全基因组序列分析显示与草鱼呼肠孤病毒GCRV及水生呼肠孤病毒属其它已知种存在较大的分子差异。本研究... 本实验室2009年从广东省患典型出血病的养殖草鱼中分离到一株具强致病性的水生呼肠孤病毒GCRV-GD108株,该毒株具有11个节段双链RNA。全基因组序列分析显示与草鱼呼肠孤病毒GCRV及水生呼肠孤病毒属其它已知种存在较大的分子差异。本研究进一步检测了广东、福建、湖南等地草鱼出血病流行毒株的分子特性。根据已克隆到的GCRV-GD108株11个节段序列分别设计合成特异引物,从各地收集患出血病草鱼,提取组织总RNA,RT-PCR检测。结果表明各检测样品均可扩增到特异性条带,而GCRV标准株则无特异条带;同时根据GCRV标准株序列合成的特异引物进行扩增,GCRV标准株有特异性条带,而各检测样品则均无带。测序结果显示各样品间相应片段序列的同源性很高(95.2%~99.4%),与GCRV-GD108的相应序列也具高同源性(95.0%~99.8%),说明检测样品与GCRV-GD108株具有相似的分子特性,均与GCRV及水生呼肠孤病毒属的其它种存在较大差异。本研究结果提示我国养殖草鱼出血病病毒存在着不同的分子类型,GCRV-GD108株在南方具有一定的代表性,在病害防控上尤其是疫苗研制与使用上应予关注。此外,从上述引物中筛选出适合于双重PCR的引物对,建立了双重PCR检测方法,可在一次PCR反应中鉴别所感染的病毒属于GCRV或GCRV-GD108株。 展开更多
关键词 草鱼呼肠孤病毒 分子差异 组织特异性 双重PCR 检测
动物组织中沙丁胺醇残留检测的样品前处理方法研究进展 预览 被引量:5
18
作者 王国民 李应国 +2 位作者 郗存显 张进忠 李正国 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期400-404,共5页
综述了动物组织中沙丁胺醇残留检测的样品前处理方法,包括样品的水解、提取、净化和衍生化。免疫亲和柱具有很高的选择性和特异性,特别适用于复杂样品基质中痕量组分的净化,在沙丁胺醇残留分析中具有很好的应用前景。
关键词 动物组织 沙丁胺醇 残留检测 样品前处理
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本生烟草组培再生及遗传转化的研究 预览 被引量:2
19
作者 苏上 张旋 +1 位作者 冯思思 李凤兰 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第20期 10530-10531,10607,共3页
[目的]获得本生烟草转胰高血糖素样肽-1基因植株。[方法]以本生烟草无菌苗叶片为外植体材料,建立本生烟草再生系统,通过农杆菌叶盘法浸染进行遗传转化,获得本生烟草转胰高血糖素样肽-1基因植株。[结果]通过多重比对和重复,确定本生烟草... [目的]获得本生烟草转胰高血糖素样肽-1基因植株。[方法]以本生烟草无菌苗叶片为外植体材料,建立本生烟草再生系统,通过农杆菌叶盘法浸染进行遗传转化,获得本生烟草转胰高血糖素样肽-1基因植株。[结果]通过多重比对和重复,确定本生烟草叶片最适分化培养基为MS+1.5mg/L6-BA+0.1mg/LNAA,生根培养基为MS+0.1mg/LIBA;经由卡那霉素浓度梯度试验,确定选择压力为5mg/L卡那霉素;对经卡那霉素筛选获得的抗性芽进行GUS组织化学检测,获得阳性信号。[结论]初步证实外源基因胰高血糖素样肽-1已整合到本生烟草基因组中。 展开更多
关键词 本生烟草 组培 转基因 GUS检测
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大豆花叶病毒的组织印迹与RT-PCR检测 预览 被引量:1
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作者 战勇 喻德跃 《大豆科学》 CSCD 北大核心 2010年第6期 915-919,共5页
用改进的组织印迹方法批量检测黄淮地区69份SMV样品,结果显示42个标样呈现非常清晰的蓝紫色阳性反应,26个标样显色较弱而无法确证,1个标样呈阴性反应。进一步对图片进行600 dpi扫描并放大200倍进行分析,发现26个显色弱的标样中有25个呈... 用改进的组织印迹方法批量检测黄淮地区69份SMV样品,结果显示42个标样呈现非常清晰的蓝紫色阳性反应,26个标样显色较弱而无法确证,1个标样呈阴性反应。进一步对图片进行600 dpi扫描并放大200倍进行分析,发现26个显色弱的标样中有25个呈阳性反应,1个标样显色很弱仍无法确证,使得检出率提高了37%。利用RT-PCR程序对随机选取的8个样品进行验证,发现纯化与未纯化的RNA模板均能得到较为清晰的扩增条带,而只有纯化后的PCR产物二次扩增才有预期的条带,且双酶切可产生245 bp、255 bp和307 bp 3个预期的片段。表明改进的组织印迹方法能够用于批量、高效地检测SMV,而RT-PCR可用于更为精确的检验。 展开更多
关键词 大豆花叶病毒检测 组织印迹 RT-PCR
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