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16型鼻病毒感染引起Hl-HeLa细胞的内源性siRNA变化
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作者 宋娟 刘宓 +7 位作者 程恒顺 史冰田 王文军 夏志强 宋芹芹 曹天宇 夏冬 韩俊 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2019年第3期248-252,共5页
目的观察鼻病毒16型感染Hl-HeLa细胞后的细胞内源性siRNA变化。方法将鼻病毒16型感染Hl?HeLa敏感细胞12 h、24 h、36 h后,利用高通量测序(二代测序)筛选出差异siRNA,再通过qRT-PCR方法进行验证。结果高通量测序分析鼻病毒感染的不同时... 目的观察鼻病毒16型感染Hl-HeLa细胞后的细胞内源性siRNA变化。方法将鼻病毒16型感染Hl?HeLa敏感细胞12 h、24 h、36 h后,利用高通量测序(二代测序)筛选出差异siRNA,再通过qRT-PCR方法进行验证。结果高通量测序分析鼻病毒感染的不同时间点均有差异性siRNA产生,其中novel_sir907和novel_sirl950在三个时间点均降低;进一步通过qRT-PCR验证发现,与细胞对照相比novel_sir907在病毒感染12h、24h、36h下降,novel_sirl950在12 h升高后在24h 、36h降低。结论 HRV16感染细胞诱导了内源性siRNA的含量发生变化。 展开更多
关键词 SIRNA 16型鼻病毒 高通量测序
子宫内膜异位症中nm23-H1和β-catenin基因表达及意义 预览
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作者 王玮 王玥 +3 位作者 段仁杰 曹慧茹 李铁臣 孙青 《皖南医学院学报》 CAS 2019年第2期152-154,共3页
目的:检测β连环蛋白(β-catenin)、nm23-H1在子宫内膜异位症(EMs)患者异位的间质细胞和正常组的间质细胞中的表达情况,研究其表达的差异,探讨nm23-H1和β-catenin在EMs中的作用以及病理机制。方法:收集10例EMs患者的异位病灶(卵巢)和1... 目的:检测β连环蛋白(β-catenin)、nm23-H1在子宫内膜异位症(EMs)患者异位的间质细胞和正常组的间质细胞中的表达情况,研究其表达的差异,探讨nm23-H1和β-catenin在EMs中的作用以及病理机制。方法:收集10例EMs患者的异位病灶(卵巢)和10例正常对照组子宫内膜组织标本,利用分离法,培养原代间质细胞,通过nm23-H1的siRNA的转染试剂作用24~48h,采用qRT-PCR方法检测两基因在两组中的表达变化。结果:①在EMs的间质细胞中,nm23-H1的表达量较正常组降低,而β-catenin的表达量较正常组增高,差异有统计学意义(P<0.05);②在EMs组和正常组的间质细胞中,经转染后nm23-H1基因的表达水平均有所减少,β-catenin的表达水平较前均有所增加,两者的变化也有统计学意义(P<0.05)。结论:nm23-H1、β-catenin相互作用调控EMs的发展,β-catenin可能接受nm23-H1基因的调节在子宫内膜异位症中发挥重要作用。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 原代间质细胞培养 Β-连环蛋白 NM23-H1 SIRNA
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siRNA注射给药系统研究进展
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作者 刘宵钰 闫仪 王坚成 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1113-1125,共13页
siRNA作为RNA干扰技术的重要效应分子,可以特异性沉默靶基因,在疾病治疗领域具有较好的应用潜力。然而,作为一种负电性核酸分子,siRNA在临床疾病治疗应用中仍面临诸多挑战,如被RNA酶降解、体内快速清除、跨膜转运能力差、生物利用率低... siRNA作为RNA干扰技术的重要效应分子,可以特异性沉默靶基因,在疾病治疗领域具有较好的应用潜力。然而,作为一种负电性核酸分子,siRNA在临床疾病治疗应用中仍面临诸多挑战,如被RNA酶降解、体内快速清除、跨膜转运能力差、生物利用率低等问题。因此,安全高效的递送载体的研究开发是siRNA成药的关键。目前已有诸多将生物相容性纳米载体应用于siRNA体内注射给药的研究,并在临床或临床前研究中取得了较好的应用效果。本文详细综述了siRNA注射给药系统的结构和功能特征,整理分析了现有siRNA注射给药系统的优势和不足,探讨了siRNA药物研究的未来发展趋势。 展开更多
关键词 SIRNA 注射给药 载体系统 基因沉默
Effect of CHOP siRNA on mRNA expression of PERK-ATF4-CHOP pathway in diabetic peripheral neuropathy rats
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作者 杨鑫伟 《中国医学文摘:内科学分册(英文版)》 2019年第2期86-87,共2页
Objective To investigate the effect of C/EBP homologous protein (CHOP) on mRNA expressions of RNA-dependent protein kinase-like ER kinase (PERK)-activating transcription factor 4 (ATF4)-C/EBP homologous protein (CHOP)... Objective To investigate the effect of C/EBP homologous protein (CHOP) on mRNA expressions of RNA-dependent protein kinase-like ER kinase (PERK)-activating transcription factor 4 (ATF4)-C/EBP homologous protein (CHOP) pathway in diabetic peripheral neuropathy(DPN) rats. Methods 48 SD male rats werefed with high-fat diet combined with intraperitoneal injectionof streptozotocin to replicate DPN Model. Then allthe rats were divided into control group (Con),control +CHOP siRNA group ( Con + CHOPsiRNA ), Modelcontrol group (Mod) and CHOP siRNA group. Transfectionreagent and CHOP siRNA were intrathecally injected. 展开更多
关键词 CHOP SIRNA mRNA expression PERK-ATF4-CHOP PATHWAY NEUROPATHY RATS ATF SIRNA
RSV-寄主-介体三者间相互作用研究进展
5
作者 张坤 徐红梅 +2 位作者 张定谅 贺振 刘芳 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期104-115,共12页
为了解国内外关于水稻条纹病毒(Rice stripe virus, RSV)-寄主-介体三者间互作关系的研究现状,采用文献检索的方法,对研究结果进行总结和比较分析。结果表明:1)RSV自身编码蛋白间存在着较为复杂的直接互作,从而保证了病毒生命过程的有... 为了解国内外关于水稻条纹病毒(Rice stripe virus, RSV)-寄主-介体三者间互作关系的研究现状,采用文献检索的方法,对研究结果进行总结和比较分析。结果表明:1)RSV自身编码蛋白间存在着较为复杂的直接互作,从而保证了病毒生命过程的有序衔接。2)RSV与寄主水稻及介体灰飞虱间的间接互作,大多与病毒造成的在植物上症状,病毒经介体卵传播等特点相吻合。3)RSV编码蛋白与介体因子间的直接互作,参与了病毒在介体中的复制,传播及抵御介体免疫等生命过程。4) RSV-寄主-介体三者间互作关系的研究已成为领域内的研究热点,国内每年高水平研究论文不断涌现。针对RSV-介体互作研究中病毒与介体遗传体系均不成熟的现状,提出以下的解决方案:加快RSV全长侵染性cDNA克隆的构建或者RSV微小复制子的构建;另外可以对现有的CRISPR/Cas9技术进行优化,尽快实现对灰飞虱进行高通量的基因敲除。 展开更多
关键词 水稻条纹病毒 病毒-寄主-介体互作 SIRNA 寄主因子
siRNA干扰S100A4蛋白引起钙离子信号改变后对人胃癌细胞的影响 预览 被引量:1
6
作者 高立红 张天彪 赵滢 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第10期1675-1680,共6页
目的:探讨siRNA干扰S100A4蛋白引起钙离子信号改变后对人胃癌细胞的影响。方法:利用lip2000将siRNA-NC和siRNA-S100A4转染进胃癌细胞SGC-7901和MGC-803中。S100A4的基因表达的变化由qRT-PCR检测验证;细胞增殖能力的改变通过MTT、细胞克... 目的:探讨siRNA干扰S100A4蛋白引起钙离子信号改变后对人胃癌细胞的影响。方法:利用lip2000将siRNA-NC和siRNA-S100A4转染进胃癌细胞SGC-7901和MGC-803中。S100A4的基因表达的变化由qRT-PCR检测验证;细胞增殖能力的改变通过MTT、细胞克隆、细胞凋亡实验检测。侵袭和迁移能力的改变利用Transwell实验和细胞划痕实验检测;采用荧光探针Fura-2乙酰羧甲酯(Fura-2/AM)测定细胞内钙离子浓度。Westernblot检测蛋白激酶PKC-α、钙调蛋白CaM和S100A4蛋白的表达变化。结果:与siRNA-NC组相比,siRNA-S100A4组S100A4基因的水平显著降低;细胞增殖、侵袭和迁移能力也降低;siRNA-S100A4组细胞的凋亡增加,细胞内PKC-α、CaM和S100A4蛋白以及游离钙离子浓度降低。结论:下调S100A4的表达使细胞内钙离子浓度降低,从而导致需要钙离子激活才能发挥作用的PKC-α和CaM蛋白表达量降低,进而诱发一系列生物功能改变。 展开更多
关键词 胃癌 S100A4 siRNA CA^2+
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Notch1小干扰RNA对人绒毛膜上皮癌细胞增殖及侵袭能力的影响研究 预览
7
作者 曲平波 王春红 夏维 《上海医药》 CAS 2019年第21期66-70,共5页
目的:通过siRNA技术,探讨Notch1靶向沉默对人绒毛膜上皮癌JEG3细胞增殖及侵袭力的影响。方法:设计并合成Notch1-siRNA寡核苷酸链,将与人类基因无同源性的siRNA片段作为阴性对照,分别转染JEG-3细胞。将JEG-3细胞进行分离培养,并分3组:未... 目的:通过siRNA技术,探讨Notch1靶向沉默对人绒毛膜上皮癌JEG3细胞增殖及侵袭力的影响。方法:设计并合成Notch1-siRNA寡核苷酸链,将与人类基因无同源性的siRNA片段作为阴性对照,分别转染JEG-3细胞。将JEG-3细胞进行分离培养,并分3组:未转染正常对照组(NT)、转染对照siRNA的阴性对照组(CS)、转染Notch1 siRNA基因沉默组(NS)。利用MTT法检测细胞增殖情况,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果:NS组细胞增殖情况显著低于NT组和CS组。侵袭实验结果显示NS组侵袭细胞数目(58.3±4.2)明显少于NT组(109.2±6.3)与CS组(116.8±5.9)(P<0.05)。结论:Notch1靶向沉默能够减缓JEG-3细胞增殖,降低侵袭能力,提示Notch1可能是治疗人绒毛膜上皮癌的靶点。 展开更多
关键词 绒毛膜上皮癌 NOTCH1 SIRNA JEG-3 细胞
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植物小RNA在病毒致病过程中的作用研究进展
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作者 邱艳红 王超楠 +1 位作者 张永江 朱水芳 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期17-24,共8页
目前,我国正遭受多种外来有害生物的入侵,给我国的农业生产以及生态环境造成了严重影响。其中检疫性植物病毒危害大、隐蔽性强,是重要的外来生物。掌握病毒致病的相关机制是有效防控入侵病毒病害的基础。微小RNA(microRNA,miRNA)以及病... 目前,我国正遭受多种外来有害生物的入侵,给我国的农业生产以及生态环境造成了严重影响。其中检疫性植物病毒危害大、隐蔽性强,是重要的外来生物。掌握病毒致病的相关机制是有效防控入侵病毒病害的基础。微小RNA(microRNA,miRNA)以及病毒小干扰RNA(small interferingRNA,siRNA)是植物体内重要的非编码小RNA,在病毒致病过程中扮演着重要角色。病毒在侵染过程中,可以利用植物抗病毒免疫反应产生的siRNA进行致病,同时可以直接或间接干扰miRNA的代谢途径,导致相关症状的产生。本文根据植物小RNA的近期研究进展,对miRNA和病毒siRNA的产生途径、生物学特性以及作用分子机制进行了综述,并对其在病毒侵染过程中的作用进行了探讨,初步从小RNA的角度阐述了植物病毒的致病机制,以期为检疫性病毒病害的防控提供理论基础。 展开更多
关键词 MIRNA SIRNA 植物病毒 致病机制
鱼精蛋白-siRNA不同形貌复合体的制备、结构及药效学分析 预览
9
作者 史迈 江芮 +4 位作者 崔新霞 张欣 申世刚 丁良 潘学峰 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1164-1171,共8页
利用涡旋混匀及室温孵育的方法制备了不同形貌的鱼精蛋白-siRNA复合体,并利用聚丙烯酰胺凝胶电泳结合银染、原子力显微镜和透射电子显微镜等手段进行了结构表征.结果表明,鱼精蛋白可以和不同的siRNA分子以不同的质量比形成球形和纤维状... 利用涡旋混匀及室温孵育的方法制备了不同形貌的鱼精蛋白-siRNA复合体,并利用聚丙烯酰胺凝胶电泳结合银染、原子力显微镜和透射电子显微镜等手段进行了结构表征.结果表明,鱼精蛋白可以和不同的siRNA分子以不同的质量比形成球形和纤维状鱼精蛋白-siRNA复合物.在此基础上,利用Mg^2+等金属离子探针,确认鱼精蛋白与siRNA的磷酸-戊糖骨架之间通过静电力发生作用.利用原子力和透射电子显微镜表征了鱼精蛋白-siRNA复合体的形貌和结构特征;利用激光纳米粒度仪测量了该复合体的粒径;并进一步比较了黑色素瘤细胞对不同形貌复合体的吞噬及药效学特征. 展开更多
关键词 鱼精蛋白 SIRNA 黑色素瘤 药物递送
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靶向大鼠Vegf/Vegfr基因siRNA的基因沉默效应研究 预览
10
作者 陈林中日 殷冬来 +3 位作者 赵泽婷 韦羊含 陈昕 张雨梅 《实验动物与比较医学》 CAS 2019年第1期26-33,共8页
目的筛选靶向血管内皮生长因子/血管内皮生长因子受体(Vegf/Vegfr)基因的siRNA序列,有效沉默大鼠Vegf/Vegfr基因的表达。方法根据大鼠Vegf;Vegfr1(Fit1),Vegfr2(Flk1)基因,设计合成了各三个siRNA序列,转染大鼠内皮细胞后,通过RT-PCR、We... 目的筛选靶向血管内皮生长因子/血管内皮生长因子受体(Vegf/Vegfr)基因的siRNA序列,有效沉默大鼠Vegf/Vegfr基因的表达。方法根据大鼠Vegf;Vegfr1(Fit1),Vegfr2(Flk1)基因,设计合成了各三个siRNA序列,转染大鼠内皮细胞后,通过RT-PCR、Western blot检测对靶基因的沉默效果。结果所设计的siRNA有2个序列可有效沉默Vegf的表达,分别有一个序列可有效沉默Flt1和Flk1好的表达。结论所筛选岀的靶向Vegf/Vegfr基因的siRNA有效序列,可用于VEGF/VEGFR相关的血管生成研究中。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子(VEGF) 血管内皮生长因子受体(VEGFR) 小干扰RNA(siRNA) 大鼠
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miRNA和siRNA在乳腺癌靶向治疗中的研究进展
11
作者 马蔚 徐高生 《生命的化学》 CAS CSCD 2019年第2期297-302,共6页
microRNAs(miRNAs)和效应分子小干扰RNAs(siRNAs)在细胞发育、细胞分化、细胞功能周期调控与细胞凋亡中具有重要的作用,其可用于沉默或关闭特异性癌症基因。目前研究发现,siRNA和miRNA在乳腺癌中表达异常且与乳腺癌的发生、发展以及疗... microRNAs(miRNAs)和效应分子小干扰RNAs(siRNAs)在细胞发育、细胞分化、细胞功能周期调控与细胞凋亡中具有重要的作用,其可用于沉默或关闭特异性癌症基因。目前研究发现,siRNA和miRNA在乳腺癌中表达异常且与乳腺癌的发生、发展以及疗效有关,提示它们可作为筛查、诊断及预后的生物学标志物。本文将回顾siRNA和miRNA在乳腺癌靶向治疗方面的研究进展以及它们作为靶向治疗工具的潜在可能和所面临的挑战。 展开更多
关键词 MIRNA SIRNA 乳腺癌 靶向治疗
表观遗传药物研发的现状与挑战 预览
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作者 江芮 吕柯孬 +3 位作者 潘学峰 崔新霞 申世刚 丁良 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期213-225,共13页
表观遗传修饰不影响DNA序列,却可通过DNA甲基化/去甲基化、多种类型组蛋白可逆修饰以及非编码RNA分子影响染色质活性状态,影响DNA遗传信息的表达。基于表观遗传机制的药物旨在通过人为干预疾病状态下染色质表观遗传修饰状态,以矫正疾病... 表观遗传修饰不影响DNA序列,却可通过DNA甲基化/去甲基化、多种类型组蛋白可逆修饰以及非编码RNA分子影响染色质活性状态,影响DNA遗传信息的表达。基于表观遗传机制的药物旨在通过人为干预疾病状态下染色质表观遗传修饰状态,以矫正疾病关联基因的表达,实现疾病预防和治疗。围绕DNA甲基转移酶抑制剂、组蛋白修饰酶抑制剂和siRNA等在内的表观遗传药物的研发现状进行了系统的总结,并对相关研发和产业化过程中所遇到的问题进行了系统的梳理和较为深入的讨论,旨为促进国内表观遗传药物的研发和相关生物技术产业化发展。 展开更多
关键词 表观遗传药物 DNA甲基化抑制剂 组蛋白修饰抑制剂 SIRNA
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下调SUZ12抑制人宫颈癌细胞的增殖及作用机制
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作者 李诗韵 饶进军 《中国热带医学》 CAS 2019年第3期209-214,共6页
目的探讨下调SUZ12表达对人宫颈癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法通过RNAi(RNA干扰技术)下调SUZ12和Cdc25C蛋白的表达,通过慢病毒转染法对Hela细胞构建Cdc25C蛋白过表达及其对照细胞株,并用含嘌呤霉素培养基进行为期14 d的筛选,荧光... 目的探讨下调SUZ12表达对人宫颈癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法通过RNAi(RNA干扰技术)下调SUZ12和Cdc25C蛋白的表达,通过慢病毒转染法对Hela细胞构建Cdc25C蛋白过表达及其对照细胞株,并用含嘌呤霉素培养基进行为期14 d的筛选,荧光拍照检测绿色荧光蛋白以及Western Blot法进行验证;MTT法检测下调SUZ12和Cdc25C蛋白对细胞增殖的影响;Western Blot法检测下调SUZ12表达后蛋白表达量的改变。结果 MTT结果显示,siSUZ12组中Hela及SiHa的增殖率远低于对照组,细胞增殖明显受到抑制,Hela的生存率为(60.65±7.64)%(P<0.01),SiHa的生存率为(73.81±9.30)%(P<0.01)。时效研究结果显示,转染siSUZ12后,Hela细胞在转染第2天后开始出现抑制,其中第5天最为明显,生存率为(56.13±7.78)%(P<0.01);SiHa细胞在转染第1天后开始出现抑制,其中第5天最为明显,生存率为(70.50±3.15)%(P<0.01)。细胞周期结果显示,Hela细胞在siSUZ12作用48 h后,G0/G1期的比例明显增加(P<0.05),细胞发生G1/S期阻滞。SiHa细胞在siSUZ12作用60 h后,G2/M期细胞数比例显著升高(P<0.01),细胞发生G2/M期阻滞。Western Blot结果显示,下调SUZ12表达后,细胞内Cdc25C的表达明显被抑制。阻断Cdc25C的表达后能显著拮抗siSUZ12对Hela、SiHa细胞的抑制作用,而过表达Cdc25C能降低siSUZ12对细胞的抑制作用。结论下调SUZ12能通过干扰Cdc25C的表达,产生抑制人宫颈癌细胞增殖的作用。 展开更多
关键词 SUZ12 宫颈癌 Cdc25C SIRNA
SHCBP1基因在结肠癌组织中表达及对结肠癌细胞增殖迁移的影响 预览
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作者 陶汉川 王珵 +2 位作者 赵晶晶 张根根 朱洵 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第13期2244-2249,共6页
目的:探讨SHCBP1基因在结肠癌组织中的表达情况及结肠癌进展过程中的作用。方法:荧光定量PCR、免疫组织化学法检测SHCBP1基因在57例临床结肠癌样本的癌及癌旁组织中表达情况、SHCBP1蛋白表达与定位;构建SHCBP1过表达质粒及合成特异性靶... 目的:探讨SHCBP1基因在结肠癌组织中的表达情况及结肠癌进展过程中的作用。方法:荧光定量PCR、免疫组织化学法检测SHCBP1基因在57例临床结肠癌样本的癌及癌旁组织中表达情况、SHCBP1蛋白表达与定位;构建SHCBP1过表达质粒及合成特异性靶向SHCBP1的siRNA、shRNA并转染结肠癌细胞株,Real-timePCR、Western blot检测细胞株SHCBP1 mRNA和蛋白的表达量,CCK8法、克隆形成检测SHCBP1对结肠癌细胞株增殖能力的影响;划痕实验、Transwell实验检测过表达、干扰后SHCBP1对细胞迁移能力的影响。结果:在57对样本中,结肠癌组织中SHCBP1的表达高于癌旁组织(P<0.001);SHCBP1主要表达于结肠癌细胞的胞质中。过表达SHCBP1后可显著促进结肠癌细胞株增殖迁移,干扰SHCBP1可抑制结肠癌细胞株增殖迁移。结论:SHCBP1在结肠癌组织中起到促进细胞增殖迁移的作用,在结肠癌的发生发展起到促进作用。 展开更多
关键词 SHCBP1 结肠癌 过表达 siRNA 增殖迁移
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siRNA干扰Nrf2基因对铅染毒TK6细胞凋亡和氧化应激的影响 预览
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作者 刘祥铨 吴京颖 刘雯 《海南医学》 CAS 2019年第21期2725-2728,共4页
目的研究应用siRNA抑制Nrf2基因表达后对乙酸铅染毒所致TK6细胞凋亡和氧化应激的影响。方法体外培养TK6细胞,设正常组、阴性对照组及Nrf2-siRNA1、Nrf2-siRNA2、Nrf2-siRNA3转染组。Western blot验证转染效果,筛选出干扰效果最佳序列。... 目的研究应用siRNA抑制Nrf2基因表达后对乙酸铅染毒所致TK6细胞凋亡和氧化应激的影响。方法体外培养TK6细胞,设正常组、阴性对照组及Nrf2-siRNA1、Nrf2-siRNA2、Nrf2-siRNA3转染组。Western blot验证转染效果,筛选出干扰效果最佳序列。采用480μmol/L的乙酸铅染毒TK6细胞,运用流式细胞技术、2',7-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色分析、高度水溶性四唑盐(WST-1)法技术检测TK6细胞凋亡、细胞内活性氧(ROS)含量和细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果正常组、阴性对照组、Nrf2-siRNA1转染组、Nrf2-siRNA2转染组、Nrf2-siRNA3转染组细胞Nrf2蛋白表达水平分别为1.00±0.08、0.96±0.07、0.71±0.05、0.58±0.07、0.20±0.07,差异有显著统计学意义(F=29.361,P˂0.01),其中Nrf2-siRNA3转染组的Nrf2蛋白表达水平低于其他四组细胞,故选用Nrf2-siRNA3转染组进行后续实验;经乙酸铅染毒TK6细胞24 h后,Nrf2-siRNA3转染组细胞凋亡率为(26.8±2.13)%,与正常组的(8.5±1.79)%及阴性对照组的(9.0±2.02)%比较,差异均有显著统计学意义(P˂0.01);Nrf2-siRNA3转染组细胞内ROS探针荧光强度为21621±345,与正常组的14141±289及阴性对照组的14694±301比较差异均有显著统计学意义(P˂0.01);Nrf2-siRNA3转染组细胞SOD含量为(13.3±2.8)U/mg·prot,与正常组的(34.6±3.3)U/mg·prot及阴性对照组的(31.9±3.2)U/mg·prot比较差异均具有显著统计学意义(P˂0.01)。结论Nrf2基因表达受抑制后,TK6细胞对铅毒性的敏感性增强,TK6细胞凋亡率增加和抗氧化损伤能力下降。 展开更多
关键词 TK6细胞 Nrf2基因 SIRNA 细胞凋亡 氧化应激
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Bax在普萘洛尔诱导人血管瘤内皮细胞凋亡中的作用 预览
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作者 姚天华 KrishnaRegmi +4 位作者 杜婧婷 史婧怡 虎小毅 李立峰 屠军波 《中国美容医学》 CAS 2019年第1期100-104,共5页
目的:通过不同浓度的普萘洛尔干预体外培养的血管瘤内皮细胞,探讨Bax基因在普萘洛尔诱导血管瘤内皮细胞凋亡中的作用。方法:体外培养人增殖期血管瘤内皮细胞,分别加入不同浓度的普萘洛尔药物干预,选择适宜的研究浓度及观察时间。构建Ba... 目的:通过不同浓度的普萘洛尔干预体外培养的血管瘤内皮细胞,探讨Bax基因在普萘洛尔诱导血管瘤内皮细胞凋亡中的作用。方法:体外培养人增殖期血管瘤内皮细胞,分别加入不同浓度的普萘洛尔药物干预,选择适宜的研究浓度及观察时间。构建Bax基因高表达及低表达组,检测其表达差异对于血管瘤内皮细胞凋亡的影响。结果:经普萘洛尔干预后细胞呈凋亡形态学改变,且随着药物浓度和药物作用时间的增加,细胞凋亡率也相应增加,其中300μmol/L的普萘洛尔干预24h时细胞凋亡率为28.49%,此为本实验中普萘洛尔诱导血管瘤内皮细胞凋亡的最佳药物浓度和时间点。Bax高表达组细胞构建成功后,经普萘洛尔干预,BAM7+普萘洛尔组>DMSO+普萘洛尔组>普萘洛尔组>BAM7组>空白对照组。Bax低表达组构建成功后,经普萘洛尔干预,BaxsiRNA+普萘洛尔组>N.CsiRNA+普萘洛尔组>转染试剂+普萘洛尔组>普萘洛尔组>空白对照组。结论:300μmol/L的普萘洛尔干预24h,是普萘洛尔诱导血管瘤内皮细胞凋亡的最佳药物浓度和时间点。Bax与普萘洛尔诱导血管瘤内皮细胞凋亡密切相关,Bax表达量越高,普萘洛尔诱导血管瘤内皮细胞凋亡的能力越强,Bax表达量降低,血管瘤内皮细胞凋亡无明显变化。 展开更多
关键词 普萘洛尔 血管瘤 凋亡 BAX BAM7 SIRNA
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沉默表皮生长因子受体的表达对肺腺癌A549细胞自噬的影响 预览
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作者 马阳 吴娟 +5 位作者 纪晓坤 王蕊 杜芸 王珩 郭晓 张艳 《癌变.畸变.突变》 CAS 2019年第5期347-351,358共6页
目的:研究降低表皮生长因子受体(EGFR)的表达对肺腺癌A549细胞自噬活性的影响.方法:A549细胞中加入EGF处理,分为4组,即未处理组和10、25、50 ng/mL EGF处理组,用Western blot方法检测EGFR的蛋白表达;采用转染siRNA降低肺腺癌细胞A549细... 目的:研究降低表皮生长因子受体(EGFR)的表达对肺腺癌A549细胞自噬活性的影响.方法:A549细胞中加入EGF处理,分为4组,即未处理组和10、25、50 ng/mL EGF处理组,用Western blot方法检测EGFR的蛋白表达;采用转染siRNA降低肺腺癌细胞A549细胞EGFR的表达,将A549细胞分为4组,即未处理组、EGFR siRNA-1组、EGFR siRNA-2组和EGFR siRNA-3组,分别采用Real-time RT-PCR和Western blot方法检测EGFR mRNA和蛋白表达水平来评价3个siRNA的沉默效果;将A549细胞分为转染EGFR siRNA组、转染空载体组、转染试剂组(只加入等量转染试剂)及未处理组,且4组均加入等量的50 ng/mL EGF,用Western blot检测LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达,观察沉默EGFR表达对自噬活性变化;A549细胞分为转染EGFR siRNA组和转染空载体组,用透射电子显微镜观察自噬小体.结果:转染siRNA后A549细胞EGF蛋白的表达降低,LC3Ⅰ向LC3Ⅱ的转化水平升高(P<0.05),细胞内出现较多自噬小体,自噬活性明显增加.结论:降低EGFR的表达可以提高肺腺癌A549细胞自噬活性. 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 肺腺癌 自噬 SIRNA LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ
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siRNA下调AEG-1基因表达对胶质瘤细胞血管拟态形成的影响 预览
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作者 梁晨 唐荣华 +2 位作者 上官健 廉民学 郭世文 《西安交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期87-91,共5页
目的探讨下调星型细胞上调基因-1(AEG-1)表达对胶质瘤细胞血管拟态(VM)形成的影响及其可能的机制。方法利用siRNA下调U87胶质瘤细胞中AEG-1表达,通过体外构建胶质瘤VM模型,研究下调AEG-1表达对胶质瘤VM形成的影响;Real-timePCR及Western... 目的探讨下调星型细胞上调基因-1(AEG-1)表达对胶质瘤细胞血管拟态(VM)形成的影响及其可能的机制。方法利用siRNA下调U87胶质瘤细胞中AEG-1表达,通过体外构建胶质瘤VM模型,研究下调AEG-1表达对胶质瘤VM形成的影响;Real-timePCR及Westernblot分别检测AEG-1表达下调对U87细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP2)mRNA及蛋白表达的影响;免疫荧光法检测AEG-1表达下调对VM模型中VEGF及MMP2表达的影响。结果siRNA下调AEG-1表达能显著降低U87细胞体外VM的形成(P<0.01),同时下调AEG-1基因能够显著抑制U87细胞及其构成的VM中VEGF及MMP2的表达(P<0.01)。结论siRNA下调AEG-1表达能显著抑制胶质瘤细胞VM的形成,其部分机制可能是通过下调VEGF及MMP2表达实现。 展开更多
关键词 星型细胞上调基因-1 SIRNA 胶质瘤 血管拟态
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siRNA沉默NDRG2基因表达对卵巢癌细胞增殖的影响
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作者 康份红 王彦龙 骆亚平 《中国妇幼保健》 CAS 2019年第15期3573-3576,共4页
目的构建N-myc下游调节基因2(NDRG2)siRNA重组真核表达载体,研究NDRG2基因与卵巢癌转移、侵袭等生物学行为的关系。方法应用NDRG2 siRNA基因重组质粒载体感染卵巢癌细胞,从而实现NDRG2基因在卵巢癌细胞中的低表达,通过定量Q-PCR检测转... 目的构建N-myc下游调节基因2(NDRG2)siRNA重组真核表达载体,研究NDRG2基因与卵巢癌转移、侵袭等生物学行为的关系。方法应用NDRG2 siRNA基因重组质粒载体感染卵巢癌细胞,从而实现NDRG2基因在卵巢癌细胞中的低表达,通过定量Q-PCR检测转染后细胞中NDRG2的表达情况;通过平板克隆形成实验、CCK8实验观察NDRG2基因低表达后对OVCAR-3、SK0V3、CA0V3等卵巢癌细胞生物学特性的影响。结果质粒转染后,Q-PCR检测NDRG2基因特异低表达。CCK8检测、平板克隆实验结果显示,沉默NDRG2基因对OVCAR-3、SKOV3、CAOV3细胞生长均有明显促进作用(P<0.05)。结论通过真核表达载体使细胞NDRG2基因的低表达,可以明显促进OVCAR-3、SKOV3、CAOV3细胞的生长和增殖。 展开更多
关键词 卵巢癌 NDRG2 SIRNA 增殖
Six1在结肠癌组织中的表达及对结肠癌细胞迁移能力的影响
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作者 侯鹏 杨志忠 +1 位作者 崔俊飞 张馨允 《临床心身疾病杂志》 CAS 2019年第1期4-7,共4页
探讨同源异形框基因Six1在结肠癌组织中的表达及其对结肠癌细胞迁移能力的影响.方法 采用免疫组织化学法检测90例结肠癌患者肿瘤细胞及癌旁正常组织中Six1的蛋白阳性表达率.采用针对Six1的siRNA 、niRNA及质粒载体转染结肠癌细胞系 HT-2... 探讨同源异形框基因Six1在结肠癌组织中的表达及其对结肠癌细胞迁移能力的影响.方法 采用免疫组织化学法检测90例结肠癌患者肿瘤细胞及癌旁正常组织中Six1的蛋白阳性表达率.采用针对Six1的siRNA 、niRNA及质粒载体转染结肠癌细胞系 HT-29细胞,RT-PCR法及Western blot法鉴定其转染效果,采用细胞侵袭实验观察各组细胞迁移能力变化.结果 Six1蛋白在结肠癌组织中的阳性表达率显著高于其在癌旁正常组织中的阳性表达率( P<0 .05) .在体外转染实验中,Six1-siRNA组Six1 mRNA 、Six1蛋白表达水平显著低于Six1-niR-NA组及对照组(P<0 .05). Sixl-siRNA组HT-29细胞穿膜细胞数显著少于Six1-niRNA组及对照组(P<0 .05).结论 Six1表达与结肠癌发展密切相关,抑制Six1的表达可以抑制结肠癌细胞的迁移能力. 展开更多
关键词 Six1 结肠癌 迁移 SIRNA niRNA
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