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高纯度大鼠下颌骨来源间充质干细胞的分离、培养及生物学特性 认领
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作者 程兵坤 梁建飞 +2 位作者 秦东泽 程子绪 赵云转 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第1期67-72,共6页
背景:以募集颌骨来源间充质干细胞来修复颌骨骨缺损这种新观点逐渐被广泛认可,但目前对颌骨来源间充质干细胞的研究相对较少,主要由于颌骨来源间充质干细胞分离困难。目的:建立大鼠下颌骨来源间充质干细胞的体外分离、培养方法,并观察... 背景:以募集颌骨来源间充质干细胞来修复颌骨骨缺损这种新观点逐渐被广泛认可,但目前对颌骨来源间充质干细胞的研究相对较少,主要由于颌骨来源间充质干细胞分离困难。目的:建立大鼠下颌骨来源间充质干细胞的体外分离、培养方法,并观察研究其相关生物学特性。方法:解剖分离大鼠下颌骨,剥离表面附着肌肉后剪碎,用Ⅱ型胶原酶消化疏松密质骨,利用间充质干细胞的迁徙和贴壁生长能力分离下颌骨间充质干细胞。采用倒置显微镜观察细胞形态;流式细胞仪检测细胞表面抗原;MTT法检测细胞增殖情况并绘制细胞生长曲线;克隆形成实验计算克隆形成率;成骨、成脂诱导实验研究细胞的多向分化潜能。结果与结论:胶原酶消化骨片培养法分离的细胞阳性表达CD29、CD44、Sca-1,阴性表达CD31、CD34和CD45;细胞增殖能力检测提示下颌骨间充质干细胞生长经历了潜伏期、对数生长期和平台期,具有较强的增殖能力;细胞克隆形成率达20%且处于DNA合成期的细胞占52.5%;成骨、成脂诱导后行茜素红和油红O染色均呈阳性,表明该细胞具有多向分化潜能。结果表明胶原酶消化骨片培养法可从大鼠下颌骨分离足量、高纯度的下颌骨间充质干细胞,且该细胞具有较强的增殖和成骨分化能力,为以种植体骨缺损修复为代表的颌骨骨组织工程提供充足的种子细胞来源。 展开更多
关键词 干细胞 间充质干细胞 下颌骨 Ⅱ型胶原酶 增殖 分化 大鼠
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硫化氢缓释供体ADT-OH对神经前体细胞增殖的调控 认领
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作者 周立宇 马艳霞 +3 位作者 齐士斌 赛吉拉夫 韦善文 倪莉 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第1期96-100,共5页
背景:研究人员认为,硫化氢作为一种重要的细胞保护分子,通过人为调控内源性硫化氢生物合成或使用硫化氢供体体外给药可能成为新的疾病治疗方式,用来恢复病变细胞或器官系统的生理功能。ADT-OH是硫化氢的一种缓释供体,它能够提高谷氨酸... 背景:研究人员认为,硫化氢作为一种重要的细胞保护分子,通过人为调控内源性硫化氢生物合成或使用硫化氢供体体外给药可能成为新的疾病治疗方式,用来恢复病变细胞或器官系统的生理功能。ADT-OH是硫化氢的一种缓释供体,它能够提高谷氨酸诱导的损伤海马神经细胞的生存率,但是对大脑皮质神经前体细胞增殖的影响尚不清楚。目的:探究ADT-OH对胚胎期大脑皮质神经前体细胞增殖的影响。方法:分离E14.5 d胚胎小鼠大脑皮质心室带和脑室管膜下区神经前体细胞,将1只胎鼠的神经前体细胞接种于1个孔中(24孔板),培养基中加入100μmol/L ADT-OH药物进行培养,3 d后统计每孔中神经球的大小和数目,对培养的神经前体细胞进行BrdU标记检测细胞增殖率,用增殖细胞的特异性抗体Ki67对细胞进行免疫荧光染色进一步验证细胞增殖情况,最后采用Western blot检测增殖相关基因cyclin D1的表达。结果与结论:ADT-OH可促进神经球的形成,提高神经前体细胞的增殖率,同时神经前体细胞中增殖相关基因cyclin D1的表达上调。由以上数据可知,ADT-OH促进神经前体细胞的增殖可能是通过调控cyclin D1的表达来完成。 展开更多
关键词 硫化氢 ADT-OH 神经前体细胞 细胞增殖 神经球 BRDU Ki67 免疫荧光染色 cyclin D1
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鱼鳞胶原膜对大鼠骨髓间充质干细胞黏附增殖及成骨分化的影响 认领
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作者 陈亮 孟姝 +1 位作者 程国平 丁一 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第16期2494-2499,共6页
背景:近年来鱼类来源胶原蛋白被视为哺乳动物胶原蛋白的潜在替代品,其在生物医学材料领域的研究逐渐成为热点,保留鱼鳞外形所得鱼鳞胶原材料具有优良的机械性能,目前尚无研究探索此类材料是否有骨组织再生的潜力。目的:探讨鱼鳞胶原膜... 背景:近年来鱼类来源胶原蛋白被视为哺乳动物胶原蛋白的潜在替代品,其在生物医学材料领域的研究逐渐成为热点,保留鱼鳞外形所得鱼鳞胶原材料具有优良的机械性能,目前尚无研究探索此类材料是否有骨组织再生的潜力。目的:探讨鱼鳞胶原膜对大鼠骨髓间充质干细胞黏附增殖及成骨分化的作用。方法:通过草鱼鱼鳞制备胶原膜,大体及扫描电镜观察鱼鳞胶原膜结构,傅里叶变换红外光谱分析鉴定胶原蛋白类型,差示扫描量热仪测定鱼鳞胶原膜变性温度;取第3代大鼠骨髓间充质干细胞,接种于胶原膜上培养为实验组,常规细胞贴壁培养为对照组。扫描电镜观察鱼鳞胶原膜上细胞黏附情况;CCK-8实验检测各组细胞增殖活性;碱性磷酸酶染色检测各组细胞成骨分化能力。结果与结论:①鱼鳞胶原膜为方圆形,透光性较高,表面可见"年轮状"纹路,扫描电镜观察可见鱼鳞胶原膜为多板层状结构,由I型胶原和羟基磷灰石构成,变性温度测定结果为50.55℃;②鱼鳞胶原膜表面骨髓间充质干细胞黏附良好,细胞增殖优于对照组,鱼鳞胶原膜表面细胞碱性磷酸酶活性高于对照组,差异均有显著性意义;③结果表明,鱼鳞胶原膜表面骨髓间充质干细胞黏附良好,可促进骨髓间充质干细胞增殖及成骨向分化,具有良好的生物相容性及骨组织再生潜力。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓间充质干细胞 草鱼 鱼鳞 胶原 增殖 成骨分化
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低氧预处理人羊膜间充质干细胞的生物学特征 认领
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作者 代敏 王帅 +6 位作者 张霓霓 黄桂林 余丽梅 胡小华 易杰 姚礼 张立刚 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第19期3004-3008,共5页
背景:干细胞移植治疗为许多疑难疾病带来了希望,但移植细胞存活数量少及分泌功能差,很难发挥治疗效用,致使该技术在临床应用受阻。低氧预处理可有效改善植入细胞的增殖活性、抗凋亡能力、分泌功能等生物学特性,因而,低氧预处理的人羊膜... 背景:干细胞移植治疗为许多疑难疾病带来了希望,但移植细胞存活数量少及分泌功能差,很难发挥治疗效用,致使该技术在临床应用受阻。低氧预处理可有效改善植入细胞的增殖活性、抗凋亡能力、分泌功能等生物学特性,因而,低氧预处理的人羊膜间充质干细胞有望在组织损伤修复中发挥更好的治疗作用。目的:探讨低氧预处理对人羊膜间充质干细胞生物学特征的影响。方法:利用机械法和酶消化法分离人羊膜间充质干细胞并传至第3代,将其低氧预处理(体积分数为3%O2)48 h,设置常氧(体积分数为21%O2)对照组,通过CCK-8及Edu增殖实验检测两组人羊膜间充质干细胞增殖活性及DNA合成率。将两组细胞用无血清培养基培养24 h后,Annexin V-FITC/PI实验检测细胞凋亡情况,收集上清液,采用血管生成蛋白芯片(Proteome Profiler)检测上清液中分泌的血管生成相关因子水平。结果与结论:低氧预处理不影响人羊膜间充质干细胞的干细胞特性,能提高人羊膜间充质干细胞的增殖活性;在无血清培养条件下,低氧预处理使人羊膜间充质干细胞的抗凋亡作用得到增强,同时分泌了更多量的血管相关生成因子。 展开更多
关键词 干细胞 人羊膜间充质干细胞 低氧 预处理 生物学特征 增殖 凋亡 血管生成
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两种月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞生物学特性的比较 认领
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作者 高元慧 向杨 +6 位作者 曹卉 王顺兰 郑琳麟 何浩伟 张应爱 张淑芳 黄邓高 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第19期2988-2993,共6页
背景:干细胞是再生医学研究的热点,影响干细胞生物学特性的因素很多,其中供体年龄是重要的影响因素之一。目的:观察两种月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞生物学特性的变化,筛选最佳种子细胞来源。方法:以4月龄和12月龄近交系五... 背景:干细胞是再生医学研究的热点,影响干细胞生物学特性的因素很多,其中供体年龄是重要的影响因素之一。目的:观察两种月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞生物学特性的变化,筛选最佳种子细胞来源。方法:以4月龄和12月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞为研究对象,分别选取第3代细胞和第10代细胞,观察细胞形态,绘制细胞增殖曲线,检测细胞表面抗原、细胞周期、细胞凋亡情况,然后进行成骨诱导分化茜素红染色和成脂诱导分化油红O染色以及细胞衰老β-半乳糖苷酶染色等。结果与结论:①4月龄和12月龄细胞均呈漩涡状贴壁生长,表面标志物CD29、CD44和CD90表达均为阳性,CD8a、CD45和HLA-DR表达均为阴性;②4月龄和12月龄第3代细胞增殖能力均较强;第10代细胞,与4月龄相比,12月龄G0/G1期百分比增高(P<0.001),早期凋亡增加(P<0.001),而S期和G2/M期百分比显著下降(P<0.001);③4月龄和12月龄第3代细胞的体外诱导分化能力无显著性差异;12月龄第10代细胞的钙化结节率和脂滴率与4月龄相比显著降低(P<0.001);④4月龄和12月龄第3代细胞β-半乳糖苷酶几乎不表达;12月龄第10代细胞β-半乳糖苷酶阳性细胞与4月龄相比显著增加(P<0.001),且细胞形态变得更加扁平和肥大、折光性弱;⑤结果表明,4月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞具有更强的增殖和分化能力,且细胞衰老活性更低,提示4月龄更适合用于自体移植的种子细胞。 展开更多
关键词 干细胞 脂肪间充质干细胞 近交系五指山小型猪 年龄 增殖 分化 衰老
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miR-335-5p靶向程序化细胞死亡基因5对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡的影响 认领
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作者 张云青 王健 +1 位作者 阳春华 李聪 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第14期2142-2147,共6页
背景:研究发现,miR-335-5p在骨关节炎患者关节液中表达下调,其可能与骨关节炎的发生发展有关。目的:探讨miR-335-5p对骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的影响及潜在机制。方法:分离培养人原代关节软骨细胞,以10μg/L白细胞介素1β处理软骨细... 背景:研究发现,miR-335-5p在骨关节炎患者关节液中表达下调,其可能与骨关节炎的发生发展有关。目的:探讨miR-335-5p对骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的影响及潜在机制。方法:分离培养人原代关节软骨细胞,以10μg/L白细胞介素1β处理软骨细胞建立骨关节炎模型,并对处理后的软骨细胞进行转染和分组:对照组(常规培养基)、白细胞介素1β组、mi R-NC组、mi R-335-5p组、si-NC组、si-PDCD5组、mi R-335-5p+pc DNA3.1组、mi R-335-5p+pcDNA3.1-PDCD5组。培养至24,48和72 h采用MTT法和流式细胞术分别检测软骨细胞增殖和凋亡率;qRT-PCR检测软骨细胞miR-335-5p、程序化细胞死亡基因5(programmed cell death 5,PDCD5)、软骨蛋白聚糖抗体(ADAMTS-5)和基质金属蛋白酶13 mRNA的表达;Western blot实验检测软骨细胞中PDCD5、Cyclin D1、p21、Bax和Bcl-2蛋白的表达,双荧光素酶报告系统验证miR-335-5p与PDCD5的调控关系。研究方案的实施符合长沙市第一医院的相关伦理要求。结果与结论:①与对照相比,白细胞介素1β可抑制软骨细胞增殖并促进细胞凋亡,抑制软骨细胞中miR-335-5p的表达;过表达miR-335-5p可促进白细胞介素1β作用的软骨细胞增殖和抑制细胞凋亡;②miR-335-5p靶向负调控PDCD5的表达;③抑制PDCD5可促进白细胞介素1β作用的软骨细胞增殖并抑制细胞凋亡;过表达PDCD5可逆转上调miR-335-5p对白细胞介素1β作用的软骨细胞增殖和凋亡的作用;④结果说明,miR-335-5p通过靶向PDCD5促进细胞增殖和抑制细胞凋亡;miR-335-5p是骨关节炎潜在分子靶点。 展开更多
关键词 骨关节炎 软骨细胞 miR-335-5p PDCD5 增殖 凋亡
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五苓散治疗骨关节炎潜在分子机制及网络药理学与分子对接 认领
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作者 宋世雷 陈跃平 +3 位作者 章晓云 李时斌 赖渝 周毅 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第20期3185-3193,共9页
背景:目前临床运用五苓散治疗膝关节炎疗效确切,但其药理作用、分子机制及药物活性物质尚未明确。目的:基于网络药理学方法寻找五苓散在治疗骨关节炎方面存在的潜在分子机制,阐述该类分子及相关信号通路作用,为进一步提取关键药物化合... 背景:目前临床运用五苓散治疗膝关节炎疗效确切,但其药理作用、分子机制及药物活性物质尚未明确。目的:基于网络药理学方法寻找五苓散在治疗骨关节炎方面存在的潜在分子机制,阐述该类分子及相关信号通路作用,为进一步提取关键药物化合物提供理论基础。方法:运用中药数据库分析平台TCMSP筛选五苓散的活性成分及对应靶点,整合Gene Cards,OMIM和DigSee疾病数据库得到骨关节炎相关靶点,将两者运用Venny平台进行映射交集得到五苓散治疗骨关节炎的潜在作用靶点。利用Cytoscape软件构建五苓散治疗骨关节炎的"单味药-活性成分-作用靶点"网络和蛋白质相互作用网络,并使用David数据库对五苓散治疗骨关节炎的作用靶点进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,最后运用PyMOL等软件对五苓散的关键活性成分与关键靶点进行分子对接验证。结果与结论:①共筛选得到五苓散"单味药-活性成分-作用靶点"活性成分包括β-谷甾醇、儿茶素及花旗松素等52个;②蛋白互作分析提示五苓散治疗骨关节炎关键靶点26个,包括可促进软骨细胞增殖,并抑制相关炎性细胞因子表达的雌激素受体1,参与骨关节内炎症反应的肿瘤蛋白p53以及介导细胞凋亡的泛素连接酶CUL3蛋白等;③分子对接结果显示亲和力最低的儿茶素和NTRK1进行分子对接良好,表明预测的五苓散的关键活性成分与治疗骨关节炎的关键作用靶点具有较好的结合活性;④GO富集分析得到GO条目共709个,包括生物过程649个,细胞成分22个和分子功能38个,主要涉及对机体雌激素、炎症和脂多糖的反应;⑤KEGG通路富集分析得到关键蛋白模块的相关通路,包括参与软骨细胞氧化应激、炎症及细胞凋亡过程的AGE-RAGE、白细胞介素17、肿瘤坏死因子、p53及影响软骨细胞增殖与修复的雌激素信号通路等;⑥结果证实,五苓散内具有的活性化合 展开更多
关键词 软骨 骨关节炎 中药 分子 炎症 细胞 增殖 凋亡 网络药理学
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骨髓间充质干细胞与舌鳞癌细胞:是促进生长还是靶向生物治疗 认领
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作者 徐竹青 王珠慧 +1 位作者 张馨予 郑建金 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第1期128-132,共5页
背景:关于舌鳞癌的治疗方法目前主要采取以手术为主的综合序列治疗,但其治疗效果仍不能使人满意。近年来肿瘤靶向生物治疗逐渐受到关注,干细胞技术可以使治疗因子选择性送至肿瘤部位发挥相应作用,骨髓间充质干细胞在这一方面表现出很大... 背景:关于舌鳞癌的治疗方法目前主要采取以手术为主的综合序列治疗,但其治疗效果仍不能使人满意。近年来肿瘤靶向生物治疗逐渐受到关注,干细胞技术可以使治疗因子选择性送至肿瘤部位发挥相应作用,骨髓间充质干细胞在这一方面表现出很大的优势,但是骨髓间充质干细胞对舌鳞癌的作用及作用机制尚不明确。目的:综述骨髓间充质干细胞对舌鳞癌细胞影响的研究进展,明确其作用并探讨作用机制。方法:应用计算机检索PubMed数据库、万方数据库、中国知网数据库,以"骨髓间充质干细胞,肿瘤细胞""骨髓间充质干细胞,舌鳞癌""骨髓间充质干细胞,增殖""骨髓间充质干细胞,迁移,侵袭"为中文检索词;以"bone marrow mesenchymal stem cells,cancer cells""bone marrow mesenchymal stem cells,tongue squamous cell carcinoma""bone marrow mesenchymal stem cells,proliferation""bone marrow mesenchymal stem cells,migration,invasion"为英文检索词,共纳入43篇文献进行分析。结果与结论:骨髓间充质干细胞具有很强的增殖特性,可以定向迁移并促进舌鳞癌细胞侵袭,提示即使骨髓间充质干细胞具有促进缺损修复的作用,并且可以通过基因修饰的方法表达治疗因子,迁移至肿瘤生长部位发挥治疗作用,也不能用于舌鳞癌的基因转染治疗及术后缺损的修复治疗。间充质干细胞进行靶向生物治疗是一个全新、充满希望的领域,但其安全性依旧需要着重考虑,其作用机制及潜在风险依旧需要不断探索。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓间充质干细胞 舌鳞癌 肿瘤 增殖 生物靶向 综述
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腰突颗粒通过调控miR-221表达干预髓核细胞的增殖与凋亡 认领
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作者 何升华 付远飞 +5 位作者 蓝志明 孙志涛 赖居易 冯华龙 郭子宾 李盖 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第14期2177-2182,共6页
背景:microRNA与椎间盘退变密切相关,腰突颗粒能显著延缓椎间盘退变进展。目的:通过研究miR-221对髓核细胞增殖与凋亡功能的影响及腰突颗粒对miR-221的调控作用探讨腰突颗粒延缓椎间盘退变的机制。方法:应用miR-221模拟物(模拟物组)及... 背景:microRNA与椎间盘退变密切相关,腰突颗粒能显著延缓椎间盘退变进展。目的:通过研究miR-221对髓核细胞增殖与凋亡功能的影响及腰突颗粒对miR-221的调控作用探讨腰突颗粒延缓椎间盘退变的机制。方法:应用miR-221模拟物(模拟物组)及抑制剂(抑制剂组)转染大鼠髓核细胞,肿瘤坏死因子α诱导髓核细胞退变模型(模型组),并分别应用100,200 mg/L腰突颗粒冻干粉处理退变的髓核细胞(腰突颗粒低、高浓度组),模拟物+腰突颗粒组为同时加入miR-221模拟物和200 mg/L腰突颗粒冻干粉处理的髓核细胞。采用CCK-8法检测细胞增殖,TUNEL法检测凋亡情况,RT-qPCR检测miR-221的mRNA表达,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的蛋白表达。结果与结论:①与模拟物阴性对照组比较,模拟物组在24,48,72 h细胞增殖减缓(P <0.05),凋亡增多(P <0.05);与抑制剂阴性对照组比较,抑制剂组在24,48,72 h细胞增殖明显(P <0.05),凋亡减少(P <0.05);与正常组比较,模型组细胞增殖抑制(P <0.05),凋亡增加(P <0.05),miR-221表达上调(P <0.05);②与模型组比较,腰突颗粒低、高浓度组细胞明显增殖(P <0.05),细胞凋亡率下降(P <0.05),miR-221表达下调(P <0.05);与模拟物组比较,模拟物+腰突颗粒组细胞凋亡降低(P <0.05),细胞增殖改善(P <0.05),Bax蛋白表达下降(P <0.05),Bcl-2蛋白表达增高(P <0.05)。③提示:miR-221影响髓核细胞增殖与凋亡,腰突颗粒通过下调miR-221的表达发挥延缓椎间盘退变的作用。 展开更多
关键词 中药 腰突颗粒 MIR-221 髓核细胞 增殖 凋亡 椎间盘 脊柱
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以电纺丝膜为载体观察桂皮醛对高糖环境下成骨细胞的影响 认领
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作者 刘珂珂 段昕 +1 位作者 马向瑞 张云涛 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第22期3500-3504,共5页
背景:前期研究发现,桂皮醛对高糖环境下成骨细胞的生物学性能具有促进作用。目的:以静电纺丝薄膜为载体观察桂皮醛对高糖环境下成骨细胞增殖与分化的影响。方法:采用静电纺丝法制备聚己内酯薄膜。将对数生长期的MC3T3-E1细胞分4组培养:... 背景:前期研究发现,桂皮醛对高糖环境下成骨细胞的生物学性能具有促进作用。目的:以静电纺丝薄膜为载体观察桂皮醛对高糖环境下成骨细胞增殖与分化的影响。方法:采用静电纺丝法制备聚己内酯薄膜。将对数生长期的MC3T3-E1细胞分4组培养:空白对照组加入高糖培养液,聚己内酯组加入聚己内酯薄膜支架与高糖培养液,药物组加入含桂皮醛的高糖培养液,联合组加入聚己内酯薄膜与含桂皮醛的高糖培养液。培养1,4,7 d时,采用CCK-8法检测细胞增殖,碱性磷酸酶试剂盒检测细胞碱性磷酸酶活性;培养7 d时,采用RT-qPCR法检测细胞骨钙蛋白mRNA表达。结果与结论:①CCK-8检测显示,聚己内酯组、药物组、联合组各时间点的细胞增殖快于空白对照组(P<0.05),联合组培养4,7 d时的细胞增殖快于聚己内酯组、药物组(P<0.05),药物组培养4,7 d时的细胞增殖快于聚己内酯组(P<0.05);②聚己内酯组、药物组、联合组培养4,7 d时的碱性磷酸酶活性高于空白对照组(P<0.05),联合组培养4,7 d时的碱性磷酸酶活性高于聚己内酯组、药物组(P<0.05),药物组培养7 d时的碱性磷酸酶活性高于聚己内酯组(P<0.05);③4组骨钙蛋白mRNA表达由高到低依次为联合组、药物组、聚己内酯组、空白对照组,组间两两比较差异均有显著性意义(P<0.05);④结果表明,聚己内酯静电纺丝薄膜与桂皮醛可协同促进高糖环境下成骨细胞的增殖与分化。 展开更多
关键词 材料 聚己内酯 静电纺丝薄膜 载体 桂皮醛 MC3T3-E1细胞 增殖 分化 高糖环境 双重作用
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文章速递微小218-5p调控Wnt家族成员2B抑制骨肉瘤细胞143B的增殖、迁移和侵袭 认领
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作者 韦杰合 韦仁杰 周业修 《安徽医药》 CAS 2021年第1期13-16,I0002,共5页
目的探讨微小RNA-218-5p(miR-218-5p)对骨肉瘤细胞增殖,侵袭和迁移能力的影响及其作用机制。方法2016年1月至2019年1月,实时荧光定量PCR检测miR-218-5p在骨肉瘤与正常骨组织及正常成骨细胞株与骨肉瘤细胞株的表达差异。应用CCK-8法检测... 目的探讨微小RNA-218-5p(miR-218-5p)对骨肉瘤细胞增殖,侵袭和迁移能力的影响及其作用机制。方法2016年1月至2019年1月,实时荧光定量PCR检测miR-218-5p在骨肉瘤与正常骨组织及正常成骨细胞株与骨肉瘤细胞株的表达差异。应用CCK-8法检测过表达miR-218-5p对人骨肉瘤细胞株143B增殖的影响;细胞划痕实验检测和Transwell小室实验检测过表达miR-218-5p对骨肉瘤细胞143B迁移能力的影响。同时,应用在线miRNA靶基因预测软件预测miR-218-5p的靶基因,并应用荧光素酶报告实验进行结合位点验证。蛋白质印迹法验证靶基因的蛋白表达水平。结果miR-218-5p在骨肉瘤组织中的表达水平(0.59±0.21)%明显低于正常骨组织,骨肉瘤细胞系中的表达水平(0.712±0.015)%、(0.685±0.016)%、(0.542±0.021)%、(0.524±0.011)%明显低于正常成骨细胞,P<0.05。同时,与对照组相比,过表达miR-218-5p(miR-218-5p mimic)的骨肉瘤细胞143B的细胞活力t6h(0.274±0.011),t24h(0.514±0.04),t48h(0.828±0.16),t72h(1.212±0.013),侵袭(164±12)个和迁移距离(26±2.4)%明显减弱,P<0.05。应用TargetScan网站进行预测,结果显示Wnt家族成员2B(WNT2B)为miR-218-5p的潜在靶基因之一;荧光素酶报告实验结果表明miR-218-5p直接靶向WNT2B;蛋白质印迹法证实miR-218-5p过表达组细胞中WNT2B蛋白的表达水平较对照组明显减少。结论miR-218-5p在人骨肉瘤组织和癌细胞中低表达,其可能通过靶向WNT2B抑制骨肉瘤细胞143B的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 骨肉瘤 微小RNA-218-5p Wnt蛋白质类s 增殖 侵袭
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文章速递微小RNA-129-5p在喉鳞状细胞癌中的表达及对细胞增殖、侵袭的影响 认领
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作者 张炜 魏珍星 +1 位作者 郭洁 张严乐 《安徽医药》 CAS 2021年第1期22-27,共6页
目的研究微小RNA-129-5p在喉鳞状细胞癌中的表达及对细胞增殖、侵袭的影响。方法采用实时定量实时荧光定量PCR仪(RT-qPCR)检测喉鳞状细胞癌、癌旁组织及喉鳞状细胞癌Hep-2细胞中miR-129-5p表达水平,转染miR-129-5p模拟物(mimics)喉鳞状... 目的研究微小RNA-129-5p在喉鳞状细胞癌中的表达及对细胞增殖、侵袭的影响。方法采用实时定量实时荧光定量PCR仪(RT-qPCR)检测喉鳞状细胞癌、癌旁组织及喉鳞状细胞癌Hep-2细胞中miR-129-5p表达水平,转染miR-129-5p模拟物(mimics)喉鳞状细胞癌Hep-2细胞设为mimics组,转染miR-129-5p mimics空白对照组(NC)喉鳞状细胞癌Hep-2细胞设为mimics-NC组,将未转染喉鳞状细胞癌Hep-2细胞设为NC组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、平板克隆试验检测各组喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖情况;采用Transwell各组喉鳞状细胞癌Hep-2细胞侵袭情况;采用蛋白质印迹法试验检测各组喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖、侵袭相关蛋白表达水平。结果与癌旁组织(1.03±0.14)比较,喉鳞状细胞癌组织中miR-129-5p(0.48±0.08)表达水平显著降低(P<0.05)。同一时间和不同时间NC组、mimic-NC组miR-129-5p表达水平、喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖抑制率、平板克隆形成率、侵袭细胞数、一抗鼠源原癌基因(c-Myc)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。同一时间与NC组、mimics-NC组比较,mimics组miR-129-5p表达水平、喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖抑制显著增加(P<0.05),与24 h比较,48 h mimics组miR-129-5p表达水平、喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖抑制显著增加(P<0.05)。平板克隆形成率为(98.96±10.60)%、(97.57±10.82)%、(46.91±9.03)%、侵袭细胞数为(235.62±36.18)、(227.31±35.90)、(94.38±19.86)个、c-Myc(3.92±0.71)、(3.89±0.60)、(2.18±0.46)、Cyclin D1(1.54±0.27)、(1.52±0.30)、(0.39±0.08)、MMP-2(1.12±0.28)、(1.11±0.25)、(0.36±0.07)、MMP-9(1.03±0.14)、(0.98±0.13)、(0.29±0.05)蛋白水平均显著降低(均P<0.05)。结论miR-129-5p在喉鳞状细胞癌组织中低表达,上调miR-129-5p可抑制喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖及侵袭。 展开更多
关键词 喉肿瘤 转染 microRNA-129-5p 细胞周期蛋白D1 人喉表皮样癌细胞(Hep-2细胞) 基质金属蛋白酶类 增殖 侵袭
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文章速递钙敏感受体在胰岛素抵抗状态下肾动脉平滑肌细胞增殖和迁移中的作用 认领
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作者 李光伟 李波 +3 位作者 金莉 邱丽萍 张亚珍 吴淑琴 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期62-68,共7页
目的探讨钙敏感受体(calcium sensing receptor,CaSR)在胰岛素抵抗状态下肾动脉平滑肌细胞(renal artery smooth muscle cell,RAMSC)增殖和迁移中的作用及机制。方法将对数生长期的RASMC随机分为:对照组、单纯模型组、模型+GdCl 3(CaSR... 目的探讨钙敏感受体(calcium sensing receptor,CaSR)在胰岛素抵抗状态下肾动脉平滑肌细胞(renal artery smooth muscle cell,RAMSC)增殖和迁移中的作用及机制。方法将对数生长期的RASMC随机分为:对照组、单纯模型组、模型+GdCl 3(CaSR激动剂)组、模型+NPS2143(CaSR抑制剂)组。应用α平滑肌肌动蛋白免疫组化染色鉴定RAMSC;Western blot检测CaSR、PCNA及MMP-2蛋白的表达;采用流式细胞术检测细胞增殖周期变化;应用Transwell小室法检测细胞迁移能力;应用ELISA法检测MMP-2蛋白的含量;应用激光共聚焦扫面显微镜技术检测细胞中钙离子浓度的变化。结果与对照组比较,模型组RAMSC CaSR蛋白表达增多,PCNA及细胞增殖指数增加,细胞穿膜数量及MMP-2表达增多,同时细胞内钙离子浓度升高。GdCl 3及NPS2143分别上调和下调胰岛素抵抗引起的上述作用。结论胰岛素抵抗活化的CaSR能够促进大鼠RASMC的增殖与迁移过程,细胞内钙离子在其中发挥重要作用。 展开更多
关键词 钙敏感受体 肾动脉平滑肌细胞 高糖 高胰岛素 增殖 迁移
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文章速递蛇葡萄素对人宫颈癌SiHa细胞增殖、周期及凋亡的影响 认领
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作者 方佳慧 桂春 +3 位作者 张超 熊晓妹 李永华 张秀桥 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期83-89,共7页
目的探究蛇葡萄素(ampelopsin,AMP)对人宫颈癌SiHa细胞增殖、周期、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法MTT法检测不同浓度(10、20、40、80、160、320μmol·L^-1)和不同干预时间(24、48、72 h)的AMP对SiHa细胞增殖抑制作用;Hoechst... 目的探究蛇葡萄素(ampelopsin,AMP)对人宫颈癌SiHa细胞增殖、周期、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法MTT法检测不同浓度(10、20、40、80、160、320μmol·L^-1)和不同干预时间(24、48、72 h)的AMP对SiHa细胞增殖抑制作用;Hoechst 33258法、Annexin-FITC/PI法检测AMP对SiHa细胞凋亡的影响;流式细胞术检测细胞周期变化;Rh-123法检测线粒体膜电位的变化;Western blot检测AMP对SiHa细胞中Bcl-2、Bax、Cleaved-caspase-3蛋白表达的影响。结果AMP对SiHa细胞抑制率呈浓度和时间依赖性(P<0.05),最低IC 50值为40.33μmol·L^-1;随着AMP浓度的增加或作用时间的延长,细胞凋亡率逐渐增加(P<0.05);当AMP浓度为80μmol·L^-1时,细胞周期阻滞在G 2/M期,呈一定的时间依赖性;线粒体膜电位随AMP浓度上升而下降;Bax/Bcl-2和Cleaved-caspase-3表达水平均上调,呈浓度和时间依赖性(P<0.05)。结论AMP明显抑制SiHa细胞的增殖,阻滞细胞周期于G 2/M期,可能通过线粒体途径诱导SiHa细胞凋亡。 展开更多
关键词 蛇葡萄素 宫颈癌 SiHa细胞 增殖 周期 凋亡
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文章速递LncRNA SIL沉默促进A549细胞增殖和迁移 认领
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作者 张万方 何金娇 朱艳平 《信阳师范学院学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2021年第1期37-41,共5页
研究了lncRNA SIL与肺纤维化中肺泡上皮细胞的增殖和迁移之间的关系.设计小干扰RNA沉默内源性lncRNA SIL的表达,通过RT-PCR、MTT、Western blot、细胞损伤修复实验及Transwell实验研究沉默后细胞的增殖和迁移变化.MTT结果显示:沉默lncRN... 研究了lncRNA SIL与肺纤维化中肺泡上皮细胞的增殖和迁移之间的关系.设计小干扰RNA沉默内源性lncRNA SIL的表达,通过RT-PCR、MTT、Western blot、细胞损伤修复实验及Transwell实验研究沉默后细胞的增殖和迁移变化.MTT结果显示:沉默lncRNA SIL后细胞的增殖能力与对照组相比显著增加,细胞增殖相关蛋白PCNA和Ki67的表达量也显著增加.细胞损伤修复实验和Transwell实验结果都显示,沉默lncRNA SIL后细胞的迁移能力与对照组相比显著增加.上述结果说明lncRNA SIL沉默后能够促进肺泡上皮细胞A549的增殖和迁移,lncRNA SIL很可能是潜在的肺纤维化的抑制因子. 展开更多
关键词 长链非编码RNA 肺泡上皮细胞 增殖 迁移
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文章速递促红细胞生成素预处理增强大鼠骨髓间充质干细胞定向归巢能力的初步研究 认领
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作者 乔禹铭 周松 +2 位作者 张亚 刘永光 赵明 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期57-63,共7页
目的探讨促红细胞生成素(EPO)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)增殖及迁移能力的影响。方法将第5代BMSC分为5组,分别为对照组(不加EPO)及10、100、500、1000 IU/mL EPO组,培养24 h和48 h后检测各组BMSC的增殖率、迁移能力以及趋化因子受体(... 目的探讨促红细胞生成素(EPO)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)增殖及迁移能力的影响。方法将第5代BMSC分为5组,分别为对照组(不加EPO)及10、100、500、1000 IU/mL EPO组,培养24 h和48 h后检测各组BMSC的增殖率、迁移能力以及趋化因子受体(CXCR)4的表达情况。将第5代BMSC分为BMSC组和EPO-BMSC组,培养48 h后观察EPO对两组BMSC的表面标志物、定向分化和细胞骨架形态的影响。结果EPO与BMSC共培养48 h后,与对照组比较,100、500 IU/mL EPO组BMSC增殖率和迁移能力增强,CXCR4蛋白表达量增高(均为P<0.05)。EPO-BMSC组BMSC表面标志物的表达和定向分化能力未受EPO影响。在EPO-BMSC组中,大多数细胞的纤维骨架沿细胞的长轴排列,呈平行状。结论EPO可提高BMSC的增殖率、迁移能力和组织修复治疗能力,可能通过增加CXCR4的表达,促进其向损伤器官组织的定向归巢。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 移植 促红细胞生成素 归巢 迁移 增殖 趋化因子受体 分化
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文章速递七厘散治疗兔膝骨关节炎及其相关分子机制研究 认领
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作者 宋寒冰 刘家兴 +4 位作者 王革强 张大鹏 姜益常 任树军 王飞 《陕西中医》 北大核心 2021年第1期18-22,共5页
目的:探讨七厘散对膝骨关节炎(KOA)兔的治疗作用及与Wnt/β-catenin信号通路的关系。方法:将清洁级新西兰兔20只随机分为对照组和七厘散组(n=10),雌雄各取5只。七厘散组采取2%木瓜蛋白酶溶液关节腔注射及复合强迫屈曲位法构建兔膝关节... 目的:探讨七厘散对膝骨关节炎(KOA)兔的治疗作用及与Wnt/β-catenin信号通路的关系。方法:将清洁级新西兰兔20只随机分为对照组和七厘散组(n=10),雌雄各取5只。七厘散组采取2%木瓜蛋白酶溶液关节腔注射及复合强迫屈曲位法构建兔膝关节骨性关节炎(KOA)模型;造模结束后七厘散组兔进行灌胃七厘散(0.25 g/kg),对照组兔给予相同体积的生理盐水,连续14 d。治疗前后对所有兔行右后肢X线拍摄,采用免疫组化法检测家兔软骨组织中Wnt4a的表达情况;取5只幼龄SD大鼠骨膜通过密度梯度离心法分离纯化制备骨膜间质干细胞(BMSC),再取另外5只灌胃七厘散后6 h取血制备含药血清,制备所得的七厘散含药血清用于给药。实验分为正常组,七厘散血清组,DKK-1组(0.1μg/kg),DKK-1组(0.2μg/kg);在第1、2、3、7、14天时,通过MTT法检测细胞增殖情况,利用RT-PCR法检测Runx2,Osteocalcin,β-catenin,Wnt4a基因的表达。结果:七厘散治疗后,七厘散组兔膝关节表面恢复光滑,少数软骨下骨出行高密度影;七厘散含药血清组促进了BMSCs增殖,增加Runx2、Osteocalcin、β-catenin,Wnt4a基因的表达;免疫组织化学染色观察显示,与治疗前相比,七厘散治疗后Wnt4a表达量明显增加。结论:七厘散能够通过调控Wnt/β-catenin信号通路促进骨髓间质干细胞的增殖从而改善兔膝骨关节炎。 展开更多
关键词 七厘散 膝骨关节炎 骨髓间质干细胞 增殖 Wnt/β-catenin信号通路
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The Role of Prostaglandin E2 on Osteoblast Proliferation Induced by Hydroxyapatite 认领
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作者 Erwan Sugiatno Endang Herminajeng Wihaskoro Sosroseno 《生物科学与医学(英文)》 2020年第1期42-55,共14页
Objective: Prostaglandin E2 (PGE2) plays a crucial role in regulating bone cell differentiation and proliferation. The aim of the present study was to determine whether PGE2 may regulate osteoblast proliferation induc... Objective: Prostaglandin E2 (PGE2) plays a crucial role in regulating bone cell differentiation and proliferation. The aim of the present study was to determine whether PGE2 may regulate osteoblast proliferation induced by hydroxyapatite. Materials and Methods: Osteoblasts (HOS cell line) pre-treated with cyclooxygenase (COX) inhibitors (indomethacin, aspirin and nimesulide) were then cultured. The cells were also pre-treated with or without nimesulide and then cultured with PGE2. The cell cultures were also treated with SQ22536 (adenylyl cyclase inhibitor) and added with Db-cAMP (cAMP analog), and/or PGE2. KT5720 [protein kinase A (PKA) inhibitor.], Db-cAMP and/or forskolin (adenylyl cyclase activator)-treated cultures were used to assess the role of PKA. The role of EP2 and/or EP4 was determined by using EP2 antagonist (PF-04418948) and EP4 antagonist (L-161,982) with PGE2. All cells were cultured with or without hydroxyapatite. The levels of PGE2 and cAMP were detected from the culture supernantants and the cell proliferation was assessed colorimetrically. Results: Nimesulide and indomethacin but not aspirin suppressed partially the cell proliferation but fully PGE2 production. PGE2 abrogated nimesulide-mediated suppression of cell proliferation. The cell proliferation was enhanced by low but suppressed by high concentration of PGE2. Moreover, the SQ22536-mediated suppression of cell proliferation was abolished by Db-cAMP but not PGE2. Conversely, PGE2, Db-cAMP or forskolin failed to eliminate KT5720-mediated suppression of cell proliferation. The effect of PGE2 on cell proliferation and cAMP levels was mediated predominantly via EP2 and to a lesser extent, EP4. The results of the controls for all experiments were significantly lower than hydroxyapatite-stimulated cell cultures. Conclusion: These results suggest thatPGE2, acting via a COX-2-, cAMP-PKA- and both EP2 and EP4-dependent pathway may partially regulate hydroxyapatite-induced human osteoblasts in an autocrine fashion. 展开更多
关键词 HYDROXYAPATITE OSTEOBLAST PGE2 PROLIFERATION
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hsa-miR-4483促进人乳腺癌细胞系的增殖和迁移 认领
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作者 阳德全 李常有 +2 位作者 崔军威 韦伟 王少平 《基础医学与临床》 CSCD 2020年第9期1230-1236,共7页
目的探讨hsa-miR-4483在乳腺癌细胞系中表达及作用。方法利用TargetScan找出hsa-miR-4483可作用c-Myc基因;利用RT-qPCR对hsa-miR-4483的表达量进行验证。转染MCF-7和MDA-MB-231,并设置NC阴性对照,Western blot检测hsa-miR-4483作用c-my... 目的探讨hsa-miR-4483在乳腺癌细胞系中表达及作用。方法利用TargetScan找出hsa-miR-4483可作用c-Myc基因;利用RT-qPCR对hsa-miR-4483的表达量进行验证。转染MCF-7和MDA-MB-231,并设置NC阴性对照,Western blot检测hsa-miR-4483作用c-myc基因的表达量,利用MTT法和Transwell小室法验证乳腺癌细胞的增殖及迁移的能力。结果hsa-miR-4483在MCF-7和MDA-MB-231中显著低表达(P<0.001,P<0.01);MCF-7和MDA-MB-231的c-myc蛋白表达量上调(P<0.05);hsa-miR-4483促进了MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖和迁移(P<0.001)。结论hsa-miR-4483可促进了乳腺癌细胞系的增殖以及迁移,其在乳腺癌的发展及其预后中起到调控的作用。 展开更多
关键词 MICRORNA 乳腺癌 增殖 迁移 增殖曲线
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Evaluation of the Anti-Proliferative Effects of a Green Tea and <i>Capsicum</i>Powder Extract in Cancer Cell Lines 认领
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作者 Eleana Hatzidaki Maria Papadimitriou Ioannis Papasotiriou 《癌症治疗(英文)》 2020年第2期44-54,共11页
In recent years the use of natural supplements in order to prevent, treat or delay recurrence of cancer or reduce chemotherapy toxicity has attracted much?attention. One such supplement is Capsol-T which consists of d... In recent years the use of natural supplements in order to prevent, treat or delay recurrence of cancer or reduce chemotherapy toxicity has attracted much?attention. One such supplement is Capsol-T which consists of de-caffeinated green tea and chili pepper extracts. The aim of the study was the evaluation of Capsol-T effect on the proliferation of various cancer cell lines representing different cancer types. Cell lines that were used in the study were: DU145, LNCap,?MCF7, HCT116 and MOR. The effect of various concentrations and incubation times of Capsol-T on cell viability was determined using the MTT method. The results do not show a common anti-proliferative pattern in all cancer cells.?In some cell lines and certain concentrations cell growth was significantly decreased at 24 hr which became more evident at 48?hr. The role of Capsicum?powder in cancer is unclear since both cancer cell proliferation and growth arrest have been demonstrated. Green tea on the other hand was found to decrease certain drugs’ bioavailability. Our results suggest that an anti-proliferative?effect in certain types of cancer should not be generalized to other types as well.?Different concentrations also affect the net result often having opposite effects. Overall, caution should be taken when using natural supplements for their anti-cancer effects. 展开更多
关键词 Proliferation Cancer Green TEA CAPSICUM POWDER
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