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Surfactin生物表面活性剂及其驱油研究进展 预览
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作者 王晨伊 刘琦 +1 位作者 彭勃 吕静 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第9期4012-4019,共8页
表面活性素(surfactin)是一类由革兰氏阳性的枯草芽孢杆菌产生的脂肽(lipopeptide)型生物表面活性剂,因其具有优于化学合成表面活性剂的若干优点,如低毒性、高生物降解性、更好的环境相容性,且在极端环境下稳定性好,在提高石油采收率方... 表面活性素(surfactin)是一类由革兰氏阳性的枯草芽孢杆菌产生的脂肽(lipopeptide)型生物表面活性剂,因其具有优于化学合成表面活性剂的若干优点,如低毒性、高生物降解性、更好的环境相容性,且在极端环境下稳定性好,在提高石油采收率方面有较好的应用潜力,但是目前只有少数的生物表面活性剂可以大规模生产实现工业化应用。本文介绍了surfactin生物表面活性剂的化学结构和生物合成机制,并对其发酵生产过程的影响因素进行分析,为提高其生产经济性探索不同的策略,例如使用更便宜的原材料、优化培养基组分、优化反应器等,系统论述了surfactin生物表面活性剂的驱油机理和其与化学合成表面活性剂的复配研究,同时针对其应用时的不足之处提出研究新思路。 展开更多
关键词 生物表面活性剂 脂肽 表面活性素 非原位微生物采油 提高采收率
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Isolation and characterization of biosurfactant producing bacteria from groundnut oil cake dumping site for the control of foodborne pathogens 预览
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作者 Obula Reddy Chittepu 《粮油科技:英文版》 2019年第1期15-20,共6页
Infection and intoxication are two common types of foodborne illnesses throughout the world.The aim of the present work was to isolate and characterize biosurfactant producing bacteria fromgroundnut oil cake dumping s... Infection and intoxication are two common types of foodborne illnesses throughout the world.The aim of the present work was to isolate and characterize biosurfactant producing bacteria fromgroundnut oil cake dumping sites and evaluate their biocontrol effects against foodborne pathogens.Bacteria were isolated by enrichment culture technique and preliminary screening method.Biosurfactant activity evaluation was carried out by oil displacement,drop collapse test,lipase activity,hemolytic activity,emulsification index and emulsification assay methods.16s rRNA sequence analysis was used for the isolate identification.Crude biosurfactant was extracted by acid precipitation method and characterized using FTIR(Fourier Transform Infrared Spectroscopy).Antibacterial activity was investigated using disc diffusion method.CMCand surface reduction were analyzed by DuNouy tensiometer.Top 10 strains were selected for biosurfactant activity assessment from the total 30 isolates.In addition,16s rRNA sequence identified that the potential isolate was Bacillus pseudomycoides OR 1.Then,FTIR result of the extracted biosurfactant established the extract as a lipopeptide based on the absorption peaks at 3500 to 3200 cm^-1 and 2963 to 2854.68 cm^-1,respectively.50μg/mL of lipopeptide showed the highest antibacterial activity.Critical Micelle Concentration(CMC)of the lipopeptide was 60 mg/L and it reduced the surface tension of water from 71.6 to 31.6 mN/m.Hence,this study widens the scope to employ the bacterial lipopeptide surfactant as a promising biocontrol agent against foodborne pathogens. 展开更多
关键词 Bacillus Biosurfactants LIPOPEPTIDE CONTROL FOODBORNE Pathogens
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内生解淀粉芽胞杆菌BEB33脂肽类化合物分析及对香蕉枯萎病菌拮抗作用研究 预览
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作者 王宝 杨扬 +2 位作者 蔡吉苗 陈奕鹏 黄贵修 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2019年第5期785-792,共8页
为解析内生解淀粉芽胞杆菌BacillusamyloliquefaciensBEB33的生防机理,检测了该菌株脂肽类化合物合成相关基因,利用基质协助激光解吸附离子化-飞行时间质谱分析了该菌株脂肽类化合物的种类,评价了脂肽类粗提物对香蕉枯萎病菌(FOC4)形态... 为解析内生解淀粉芽胞杆菌BacillusamyloliquefaciensBEB33的生防机理,检测了该菌株脂肽类化合物合成相关基因,利用基质协助激光解吸附离子化-飞行时间质谱分析了该菌株脂肽类化合物的种类,评价了脂肽类粗提物对香蕉枯萎病菌(FOC4)形态、镰刀菌酸合成的影响,以及粗提物对香蕉枯萎病的生防潜力分析。结果显示,BEB33基因组中编码有surfactin、fengycin、iturin和bacillomycin D 4种脂肽类物质合成酶基因。使用M9培养基发酵能产生surfactin、fengycin和bacillomycin D 3种脂肽类物质;脂肽类粗提物可导致香蕉枯萎病菌菌丝细胞膨大,细胞膜穿孔,镰刀菌酸产量降低70%;并发现脂肽类粗提物对香蕉枯萎病具有明显的防治效果。在不同处理中,枯萎病发病率分别降低47.67%、23.22%和36.56%,病情指数分别降低38.09、28.56和35.87。本文所获研究结果为进一步利用该菌株进行香蕉枯萎病生防制剂的研发提供理论基础。 展开更多
关键词 内生细菌 解淀粉芽胞杆菌 脂肽类化合物 香蕉枯萎病菌
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利用马铃薯全粉加工废水培养解淀粉芽胞杆菌产抗菌脂肽条件优化 预览 被引量:1
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作者 申光辉 余国贤 +4 位作者 张志清 陈安均 黎杉珊 刘兴艳 吴贺君 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2019年第1期89-98,共10页
为实现马铃薯全粉加工废水资源高值化利用,以马铃薯全粉加工废水为基础培养基,采用Plackett-Burman设计和Box-Behnken响应面设计,对解淀粉芽胞杆菌BacillusamyloliquefaciensPC2利用马铃薯全粉加工废水发酵产抗菌脂肽的培养基进行优化... 为实现马铃薯全粉加工废水资源高值化利用,以马铃薯全粉加工废水为基础培养基,采用Plackett-Burman设计和Box-Behnken响应面设计,对解淀粉芽胞杆菌BacillusamyloliquefaciensPC2利用马铃薯全粉加工废水发酵产抗菌脂肽的培养基进行优化。结果表明,马铃薯全粉加工废水蛋白质、游离氨基酸、游离淀粉和还原糖含量分别为16.0、2.11、0.18和1.29mg/mL,钾、钙和镁含量分别为1.07、0.05和0.10 mg/mL,铁、锌、锰和铜含量分别为7.10、2.34、0.25和0.09μg/mL。蔗糖、谷氨酸钠和硫酸铵是影响菌株PC2发酵抗菌脂肽的3个主要因素。菌株PC2以马铃薯全粉废水为基础培养基无抗菌脂肽产生,采用响应面法优化获得了产抗菌脂肽的最佳培养基配方为:蔗糖30.2 g,谷氨酸钠3.96 g,硫酸铵6.0 g,马铃薯全粉加工废水1000 mL,所得抗菌脂肽粗提物对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为21.74 mm。采用单因素试验结合响应面法,获得最适发酵条件为:接种量6.0%,装液量50 mL/250 mL,初始pH 6.8,发酵温度31℃,摇床转速170 r/min,发酵时间35 h。获得的抗菌脂肽粗提物抑菌圈直径可达22.81 mm,较优化前增加了1.08 mm,发酵液活菌数由优化前的2.6×108 CFU/mL提高至3.2×1010 CFU/mL。试验结果为马铃薯全粉加工废水资源化利用奠定了基础。 展开更多
关键词 马铃薯全粉加工废水 解淀粉芽胞杆菌 抗菌脂肽 响应面法 培养基优化
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基于2,4-二硝基氟苯标记氨基酸的高效液相色谱法测定脂肽含量 预览
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作者 邵穿石 杨世忠 +2 位作者 郎剑桥 杨佳颖 牟伯中 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期220-224,共5页
本文将提取的一种脂肽(表面活性素)水解成其组成的氨基酸,以2,4-二硝基氟苯标记产生的氨基酸后,用高效液相色谱(HPLC)分离标记的目标氨基酸(亮氨酸),记录色谱图,分析氨基酸的硝基苯标记物的积分面积与氨基酸的关系。结果表明,脂肽中的... 本文将提取的一种脂肽(表面活性素)水解成其组成的氨基酸,以2,4-二硝基氟苯标记产生的氨基酸后,用高效液相色谱(HPLC)分离标记的目标氨基酸(亮氨酸),记录色谱图,分析氨基酸的硝基苯标记物的积分面积与氨基酸的关系。结果表明,脂肽中的氨基酸与标记产物的积分面积有很好的线性关系(R~2>0.99),据此可以测定脂肽的含量。测定了样品中表面活性素的含量,其相对标准偏差为6.5%,样品回收率92.6%(n=5)。因大部分脂肽均含有一个或多个亮氨酸或异亮氨酸,所含氨基酸的种类和数量是一定的,故该方法还可以用于测定其它类别脂肽的含量。 展开更多
关键词 脂肽 氨基酸 标记 水解 高效液相色谱
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海洋巨大芽孢杆菌产脂肽的培养基优化
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作者 王孟娟 马云晓 +1 位作者 孔青 牟海津 《食品科技》 CAS 北大核心 2019年第7期23-29,共7页
该课题组分离得到一株对黄曲霉有良好抑制作用的海洋巨大芽孢杆菌,对其产抗菌脂肽的发酵培养基进行优化。结果表明,5种基础发酵培养基中的Landy修饰培养基为最佳培养基;PB实验结果表明葡萄糖(P=0.0004)对抗菌脂肽的产量为正效应,影响程... 该课题组分离得到一株对黄曲霉有良好抑制作用的海洋巨大芽孢杆菌,对其产抗菌脂肽的发酵培养基进行优化。结果表明,5种基础发酵培养基中的Landy修饰培养基为最佳培养基;PB实验结果表明葡萄糖(P=0.0004)对抗菌脂肽的产量为正效应,影响程度大,且为发酵培养基的唯一碳源。由于葡萄糖的添加量过大,将导致发酵物过于黏稠,不利于离心去除菌体及抗菌物质的分离纯化,因此只选取酵母浸膏(P<0.0001)、KH2PO4(P<0.0001)、MgSO4(P=0.0005)及CuSO4(P=0.0035)作为影响产量的关键因子。在此基础上,通过BBD响应曲面法确定了关键因子的最佳水平及交互作用并建立了产抗菌脂肽的二次多项数学模型,之后对最佳发酵工艺进行了预测,利用回归方程得到抗菌脂肽产量最高时各关键因子的最优组合:MgSO40.78g/L、酵母浸膏0.05g/L、KH2PO41.50g/L、CuSO40.39mg/L。利用优化后的发酵培养基产生的抗菌脂肽含量为(571.26±9.72)mg/L,为优化前产量的1.82倍。研究结果为产抑制黄曲霉的抗菌脂肽大规模生产奠定基础。 展开更多
关键词 海洋巨大芽孢杆菌 脂肽 培养基优化 PB实验 BBD响应曲面法
马铃薯黑痣病菌拮抗菌的筛选鉴定及生防因子分析 预览
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作者 宋本超 赵冬梅 +3 位作者 杨志辉 张岱 赵志 朱杰华 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期9-16,共8页
应用平板对峙法从马铃薯根际土中筛选得到9株对马铃薯黑痣病抑菌效果较好的生防菌。采用形态学、生理生化特征及16S rDNA(Gen-bank MK271286)和gyrB(Gen-bank MK295695)序列分析对其中抑菌效果最好的菌株Z17-2鉴定为解淀粉芽胞杆菌Bacil... 应用平板对峙法从马铃薯根际土中筛选得到9株对马铃薯黑痣病抑菌效果较好的生防菌。采用形态学、生理生化特征及16S rDNA(Gen-bank MK271286)和gyrB(Gen-bank MK295695)序列分析对其中抑菌效果最好的菌株Z17-2鉴定为解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliquefaciens。测定其抑菌谱的结果证明其对黑痣病菌、早疫病菌、枯萎病菌、干腐病菌、疮痂病菌有抑制作用,对黑胫病菌无抑制作用。通过测定其产脂肽、蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、铁载体及解磷解钾能力,确定菌株Z17-2含有sfp、fenB、bacD、mycB等脂肽合成基因,能够产生蛋白酶、铁载体、纤维素酶,不能产生果胶酶,不具有解磷解钾能力。通过带毒培养基确定脂肽粗提物的抑菌能力达到70.38%。 展开更多
关键词 立枯丝核菌 解淀粉芽胞杆菌 脂肽类物质 生物防治
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油茶炭疽病拮抗细菌P-14的拮抗物质分析 预览
8
作者 喻锦秀 何振 +4 位作者 李密 邬颖 彭邵锋 钟杰 高必达 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2019年第1期118-124,共7页
[目的]探索解淀粉芽孢杆菌P-14对油茶炭疽病病原菌的拮抗物质,以期为油茶炭疽病的生物农药开发利用提供理论依据。[方法]利用酸沉淀法和高效液相色谱法分离解淀粉芽孢杆菌P-14发酵液中的拮抗物质,通过顶空固相微萃取法和气相色谱-质谱... [目的]探索解淀粉芽孢杆菌P-14对油茶炭疽病病原菌的拮抗物质,以期为油茶炭疽病的生物农药开发利用提供理论依据。[方法]利用酸沉淀法和高效液相色谱法分离解淀粉芽孢杆菌P-14发酵液中的拮抗物质,通过顶空固相微萃取法和气相色谱-质谱法对解淀粉芽孢杆菌P-14的挥发性物质进行了分离鉴定。[结果]分离后的组分a对油茶炭疽病的病原菌具有良好的抑制作用,其主要成分为C15 bacillomycin D(杆菌霉素D)。此外,共分离得到35种挥发性化合物,其相对抑菌率为(26.19±3.82)%,其中包含苯类物质(benzenes)10种、烷基类物质(alkyls)8种、醇类物质(alcohols)2种、酮类物质(ketones)11种、醛类物质(aldehydes)3种和1种酯类物质(esters)。[结论]解淀粉芽孢杆菌P-14能产生对油茶炭疽病的病原菌具有明显的拮抗作用的物质,并确定了其拮抗物质种类,为油茶炭疽病的生物农药开发提供了可靠的研究内容。 展开更多
关键词 油茶炭疽病 解淀粉芽孢杆菌 拮抗物质 脂肽类抗生素 挥发性物质
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枯草芽孢杆菌WL2脂肽粗提物对致病疫霉的抑制作用及其分离鉴定 预览
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作者 吴艳清 王游游 +1 位作者 王畅 沙梦莹 《河北大学学报:自然科学版》 北大核心 2018年第6期632-639,共8页
为明确枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)WL2产生的脂肽对致病疫霉菌丝体生长的影响及其预防马铃薯晚疫病的潜力,以滤纸片法检测脂肽粗提物对菌丝生长的抑制效果,显微镜观察脂肽粗提物对致病疫霉孢子萌发的影响,离体组织培养法明确脂肽粗... 为明确枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)WL2产生的脂肽对致病疫霉菌丝体生长的影响及其预防马铃薯晚疫病的潜力,以滤纸片法检测脂肽粗提物对菌丝生长的抑制效果,显微镜观察脂肽粗提物对致病疫霉孢子萌发的影响,离体组织培养法明确脂肽粗提物对晚疫病的预防效果,高效液相色谱法(HPLC)纯化脂肽、电子喷雾质谱(ESI-MS)鉴定脂肽种类.结果表明,当脂肽粗提物质量浓度为25μg/mL时,抑菌圈直径为5.9mm,抑制后的菌丝恢复生长速度仅有5.2mm/d,与对照组(11.2mm/d)存在显著差异(P<0.05);当脂肽质量浓度为3μg/mL时,孢子囊萌发比率只有9.7%,用质量浓度为4μg/mL的脂肽抑制后,释放游动孢子比率只有7.6%,与对照组均存在显著差异(P<0.05);脂肽粗提物(20μg/mL)对晚疫病的预防效果最好,病情指数最低(20.6),与对照组病情指数(73.1)有显著差异(P<0.05);经HPLC分离和ESI-MS鉴定,明确了WL2菌株可产iturinA和surfactin两类脂肽物质.以上结果说明WL2菌株产生的脂肽在预防马铃薯晚疫病方面具有较大的潜力. 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 脂肽 抑制 致病疫霉 鉴定
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内生解淀粉芽孢杆菌BEB17脂肽类和聚酮类化合物的抑菌活性分析 被引量:2
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作者 桑建伟 杨扬 +3 位作者 陈奕鹏 蔡吉苗 陆翠梅 黄贵修 《植物病理学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期402-412,共11页
BEB17是本实验室从健康香蕉植株根部中分离得到的一株具有较强抑制真菌活性的内生解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。在本研究中,我们通过PCR检测多个脂肽类和聚酮类化合物的合成相关基因,并结合基质协助激光解吸附离子化... BEB17是本实验室从健康香蕉植株根部中分离得到的一株具有较强抑制真菌活性的内生解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。在本研究中,我们通过PCR检测多个脂肽类和聚酮类化合物的合成相关基因,并结合基质协助激光解吸附离子化-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和液相色谱-质谱联用(LC-MS)分析,发现该菌株能产生表面活性素Surfactin、泛革素Fengycin和伊枯草菌素Iturin三类脂肽类化合物以及Bacillibactin、Difficidin和Bacillaene三类聚酮类化合物。通过比较两种发酵培养基(M9和Landy培养基)和两种提取方法(酸沉淀法和大孔树脂抽提法),结果发现酸沉淀法提取较为高效,Landy培养基更易于BEB17脂肽类和聚酮类化合物的发酵。活性检测表明,两种提取方法提取的粗提物对香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense race 4,Foc4)都具有较好的抑制作用,其中大孔树脂抽提法提取的物质抑制效果最好,当其浓度为300μg·m L^-1时抑制率可达80.75%,说明该方法制备的粗提物的活性物质含量相对较高。进一步研究表明,该提取物能引起Foc4菌丝膨大和畸形,并抑制其孢子萌发。分析表明,该提取物对Foc4细胞膜具有破坏作用。 展开更多
关键词 内生解淀粉芽孢杆菌 脂肽类化合物 聚酮类化合物 抑菌活性
新型环脂肽抗生素达托霉素研究进展 被引量:1
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作者 彭希希 王赛赛 +2 位作者 付琛 胡昌华 廖国建 《药学学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期839-844,共6页
作为首个进入临床应用的新型环脂肽抗生素,达托霉素抗菌活性强,耐药比例低,已成为治疗耐药革兰阳性菌所致感染的一线用药。本文主要对达托霉素的抗菌谱、生物合成途径、作用机制、耐药机制、构效关系、新型衍生物surotomycin和铁载体-... 作为首个进入临床应用的新型环脂肽抗生素,达托霉素抗菌活性强,耐药比例低,已成为治疗耐药革兰阳性菌所致感染的一线用药。本文主要对达托霉素的抗菌谱、生物合成途径、作用机制、耐药机制、构效关系、新型衍生物surotomycin和铁载体-达托霉素偶联物杀灭耐药鲍曼不动杆菌等研究结果进行综述,以期为新型达托霉素衍生物研发有所裨益。 展开更多
关键词 脂肽 达托霉素 抗菌谱 作用机制 耐药机制 构效关系
热带海水中生物表面活性剂生产菌的筛选及特性研究
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作者 苏增建 张玉秀 +1 位作者 李敏 刘芳池 《安全与环境学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期1457-1463,共7页
为评估生物表面活性剂生产菌对石油烃降解菌的辅助效应,从热带近海海域石油烃污染水样中筛选出一株生物表面活性剂生产菌BSM-301,通过生理生化试验和16S r DNA序列分析,确定该菌为微球菌属(Micrococcus sp.),利用薄层色谱法和傅里叶... 为评估生物表面活性剂生产菌对石油烃降解菌的辅助效应,从热带近海海域石油烃污染水样中筛选出一株生物表面活性剂生产菌BSM-301,通过生理生化试验和16S r DNA序列分析,确定该菌为微球菌属(Micrococcus sp.),利用薄层色谱法和傅里叶变换红外光谱法初步确定其产物为脂肽类生物表面活性剂。以菌株发酵液的表面张力值为评价指标,对其生活条件进行优化,并进行海水环境条件下的石油烃辅助降解试验。结果表明,该菌株最佳碳源为葡萄糖,最适初始p H值为7.5,最适培养温度为30℃,添加后石油烃降解率比两种降解菌SJDQ-112和SJDQ-1122单独作用分别提高了64.9%和86.2%。试验正向辅助效果较为明显,为进一步研究海水中石油污染的生物修复提供了理论依据。 展开更多
关键词 环境工程学 生物表面活性剂生产菌 表面张力 脂肽 石油降解
福建海参内源微生物多样性分析及益生菌抑菌机理初探 预览
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作者 李智 黄晓山 +1 位作者 郑宝东 邓凯波 《食品工业科技》 CSCD 北大核心 2018年第12期137-141,170共6页
为探明福建吊笼养殖海参内源微生物群落结构及抑菌作用机理,采用16S r DNA序列同源性比对手段对分离自海参肠道中的优势菌株进行多样性分析,测定其中益生菌及其代谢产物脂肽类化合物的抑菌能力,并采用薄层色谱(TLC)初步确定其抑菌成... 为探明福建吊笼养殖海参内源微生物群落结构及抑菌作用机理,采用16S r DNA序列同源性比对手段对分离自海参肠道中的优势菌株进行多样性分析,测定其中益生菌及其代谢产物脂肽类化合物的抑菌能力,并采用薄层色谱(TLC)初步确定其抑菌成分。结果表明,福建吊笼养殖海参肠道中共分离出95株优势菌株,包括31株潜在益生菌、37株潜在致病菌及27株普通肠道菌。微生物群落结构分析发现,高丰度假交替单胞菌属和不动杆菌属以及低丰度芽孢杆菌属是福建海参体表产生病灶的可能原因之一。以其中8株典型致病菌为指示菌,筛选出两株抑菌谱广且抑菌能力较强的益生菌菌株—解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)YD1及枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)YK5,其脂肽类代谢产物的抑菌作用明显,初步确定其中的抑菌成分均为含有亲水性成分的环脂肽类化合物。本研究为开发新型微生态制剂和功能性益生菌提供了重要的理论支持。 展开更多
关键词 海参 群落结构 脂肽类化合物 抑菌机理
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解淀粉芽孢杆菌gfj-4发酵上清液及其混剂对番茄早疫病菌抑制活性研究 预览
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作者 段海明 余利 +2 位作者 孙甜甜 黄伟东 余海兵 《东北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期40-49,79共11页
为探究解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)gfj-4次级代谢产物及其化学杀菌剂复配剂对番茄早疫病菌(Alternaria solani)抑制活性。文章采用菌丝生长速率法测定接种量、发酵培养时间对抑菌物质的影响及发酵上清液、脂肽粗提... 为探究解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)gfj-4次级代谢产物及其化学杀菌剂复配剂对番茄早疫病菌(Alternaria solani)抑制活性。文章采用菌丝生长速率法测定接种量、发酵培养时间对抑菌物质的影响及发酵上清液、脂肽粗提物、发酵上清液与化学杀菌剂混配剂的病菌抑制活性。结果表明,种子液最适接种量为0.125%(V/V),最适发酵时间为96 h。生防菌发酵上清液和脂肽粗提物对番茄早疫病菌EC50分别为3.774和0.943μL·m L-1。番茄早疫病菌对咪鲜胺、苯醚甲环唑和丙环唑敏感性较高,其中咪鲜胺对病菌EC50达0.095μg·m L-1。发酵上清液和吡唑醚菌酯混配主要表现为相加和增效作用,其中以8.2比例混配毒性比最高为1.26。研究结果可为番茄早疫病防治措施更新和研制新配方农药提供理论依据。 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌 番茄早疫病 发酵上清液 化学杀菌剂 脂肽
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甲基营养型芽孢杆菌BH21对葡萄灰霉病菌的拮抗作用 预览 被引量:6
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作者 魏新燕 黄媛媛 +1 位作者 黄亚丽 杜克久 《中国农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第5期883-892,共10页
【目的】甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)BH21是一株对葡萄灰霉病菌(Botrytis cinerea)有较好拮抗作用的海洋源细菌,鉴定该菌株脂肽类抗菌物质合成基因,检测脂肽粗提物对葡萄灰霉病菌的拮抗作用,为应用该菌株防治葡... 【目的】甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)BH21是一株对葡萄灰霉病菌(Botrytis cinerea)有较好拮抗作用的海洋源细菌,鉴定该菌株脂肽类抗菌物质合成基因,检测脂肽粗提物对葡萄灰霉病菌的拮抗作用,为应用该菌株防治葡萄灰霉病提供科学依据。【方法】通过特异引物的基因组PCR法检测甲基营养型芽孢杆菌BH21菌株合成脂肽的能力;盐酸沉淀和甲醇抽提法从无菌发酵液中提取脂肽粗提物;排油圈法检测脂肽粗提物的表面活性;采用菌丝生长速率法检测脂肽粗提物对灰霉病菌菌丝生长的抑制作用并计算有效中浓度EC50;利用高效液相色谱技术(HPLC)对脂肽粗提物洗脱分离,并采用菌丝生长速率法检测各组分对葡萄灰霉病菌的抑制能力;采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)分析主要抑菌成分的脂肽类型。采用离体叶片接种法检测脂肽粗提物对葡萄灰霉病的防治效果。【结果】选取11对特异引物对菌株BH21基因组扩增,其中7对引物扩增出预期核酸片段;扩增产物经测序、BLAST比对分析,结果显示扩增产物与相关菌株脂肽基因相似度为96%—99%,扩增产物翻译的蛋白与相关菌株的脂肽合成蛋白相似度为96%—100%,表明甲基营养型芽孢杆菌BH21基因组中含有ituA、bamD、ituC、ituD、fenD、srfAB、yndJ,该菌株具有合成surfactin、iturin及fengycin等多种脂肽类抗菌物质的能力。盐酸沉淀和甲醇抽提从LB无菌发酵液中获得脂肽粗提物,得率为428 mg·L~(-1)。排油圈检测结果显示,脂肽粗提物使橄榄油膜形成排油圈,表明脂肽粗提物具有表面活性。脂肽粗提物对葡萄灰霉病菌菌丝生长具有显著的抑制作用,脂肽粗提物浓度为440μg·mL~(-1)时,对葡萄灰霉病菌菌丝生长的相对抑制率为82.8%。根据毒力方程计算,抑制葡萄灰霉病菌菌丝生长的脂肽粗提物EC50为144.39μg·mL~(-1)。HPLC分离纯化脂� 展开更多
关键词 甲基营养型芽孢杆菌 葡萄灰霉病菌 抗真菌活性 脂肽 葡萄灰霉病
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解淀粉芽孢杆菌gfj-4发酵上清液和化学杀菌剂混配抑制葡萄白腐病菌的室内筛选 预览 被引量:1
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作者 段海明 余利 +2 位作者 梁海申 黄伟东 余海兵 《西北农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第8期1216-1224,共9页
为探明解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)gfj-4次级代谢产物及其和化学杀菌剂的复配剂对葡萄白腐病菌(Coniella diplodiella)的抑制活性。采用菌丝生长速率法测定发酵上清液、脂肽粗提物以及发酵上清液与化学杀菌剂的混配剂... 为探明解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)gfj-4次级代谢产物及其和化学杀菌剂的复配剂对葡萄白腐病菌(Coniella diplodiella)的抑制活性。采用菌丝生长速率法测定发酵上清液、脂肽粗提物以及发酵上清液与化学杀菌剂的混配剂对病菌的抑制特性。结果表明,种子液培养时间为4 h与发酵培养时间为84 h对病菌的抑制率最高。拮抗菌发酵上清液和脂肽粗提物对病菌的EC 50分别为11.10μL/mL和3.02μL/mL。葡萄白腐病菌对苯醚甲环唑、腈菌唑和戊唑醇的敏感性较高。其中,苯醚甲环唑对病菌的抑制活性最高,EC 50为0.02μg/mL。保护性杀菌剂福美双和百菌清对病菌抑制活性较高,EC 50分别为2.81μg/mL和3.51μg/mL。解淀粉芽孢杆菌gfj-4发酵上清液和苯醚甲环唑混配对葡萄白腐病菌的抑制活性表现为增效作用,其中与苯醚甲环唑以3∶7的体积比混配毒性比最高,达1.60。解淀粉芽孢杆菌gfj-4发酵上清液、脂肽粗提物以及发酵上清液与苯醚甲环唑的混配剂对葡萄白腐病菌有较强的抑制活性,具有潜在的利用价值。 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌 葡萄白腐病 脂肽 化学杀菌剂 混配
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一株拮抗海鱼干优势耐盐真菌芽孢杆菌HY-5筛选及其抗菌成分鉴定 预览
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作者 杨秀文 邓旗 +6 位作者 陶森 孙力军 王雅玲 廖建萌 刘颖 房志家 徐德峰 《食品工业科技》 CSCD 北大核心 2018年第16期120-125,共6页
目的:开发新的海鱼干耐高盐优势真菌抑制剂。方法:取用湛江市特呈岛红树林海域的海水、海泥以及红树林的根、茎和叶的样本,利用琼脂扩散法和平板点种法筛选出一株强抗菌活性菌株HY-5,通过传统细胞形态观察并结合生理生化实验及16S r ... 目的:开发新的海鱼干耐高盐优势真菌抑制剂。方法:取用湛江市特呈岛红树林海域的海水、海泥以及红树林的根、茎和叶的样本,利用琼脂扩散法和平板点种法筛选出一株强抗菌活性菌株HY-5,通过传统细胞形态观察并结合生理生化实验及16S r DNA序列进行分析鉴定;利用杯碟法测定上清液对17株霉变海鱼干优势真菌抗菌谱,发酵液酸沉后经LC-MS检测其抗菌成分。结果:HY-5被鉴定为解淀粉芽孢杆菌,其上清液对17株霉变海鱼干优势真菌均有明显抗菌作用;LC-MS检测到HY-5发酵液中含2组抗菌脂肽surfactin(994.6、1008.6、1022.5和1036.6)和iturin(1016.5、1030.5、1044.4和1058.3)组分。结论:海洋源解淀粉芽孢杆菌HY-5的粗提液中含有抗菌脂肽,其对霉变海鱼干优势真菌有较强的拮抗作用。 展开更多
关键词 海洋源解淀粉芽孢杆菌 真菌 海鱼干 脂肽 液相色谱-质谱法(LC-MS)
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生防绿针假单胞菌HT66中脂肽的鉴定与功能 被引量:2
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作者 熊欣 侯博文 +2 位作者 金雪洁 彭华松 张雪洪 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期611-619,共9页
【目的】脂肽(Lipopeptide,LP)是微生物合成的一类重要的生物表面活性剂,不仅影响细菌的生物学功能,还对多种植物和人类病原菌具有广谱的拮抗作用。然而至今未见绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)中脂肽产物的报道。【方法】... 【目的】脂肽(Lipopeptide,LP)是微生物合成的一类重要的生物表面活性剂,不仅影响细菌的生物学功能,还对多种植物和人类病原菌具有广谱的拮抗作用。然而至今未见绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)中脂肽产物的报道。【方法】通过生物信息学手段预测绿针假单胞菌HT66中脂肽的氨基酸组成及顺序,构建脂肽合成基因缺失突变株HT66Δclp,根据突变株缺失代谢产物的UPLC/QTOF-MS信息验证预测结果,并研究了脂肽对该菌株的生长、吩嗪-1-甲酰胺(PCN)合成、生物膜形成和群集运动性的影响。【结果】预测菌株HT66的脂肽氨基酸顺序为L-Leu–D-Glu–D-allo-Thr–D-Val–L-Leu–D-Ser–L-Leu–D-Ser–L-Ile,通过比对野生型和突变株代谢产物的质谱信息确定该产物为黏液菌素(Viscosin);脂肽合成基因缺失后,菌株HT66的生长无明显变化,但其PCN合成、生物膜形成和群集运动性均有不同程度地下降。【结论】菌株HT66的脂肽产物为黏液菌素,对菌株的代谢、生物膜形成和运动性等生物学功能具有重要的调控作用。研究报道了绿针假单胞菌中一种脂肽分子的结构与功能,为研究其合成和调控机制及开发和应用奠定了基础。 展开更多
关键词 假单胞菌 脂肽 黏液菌素 吩嗪-1-甲酰胺
脂肽表面活性剂对光系统Ⅰ结构和稳定性的影响
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作者 朱世玉 李泉 +2 位作者 王小强 于道永 徐海 《生命科学仪器》 2017年第3期23-26,58共5页
本文设计合成了五种脂肽表面活性剂分子C_(14)KD、C_(14)DK、C_(16)KD、C_(16)DK、C_(16)GDGK,以钝顶螺旋藻光合膜蛋白复合物光系统I(PSI)为研究对象,从增溶、结构完整性、时间稳定性和热稳定性等方面系统研究了五种脂肽表... 本文设计合成了五种脂肽表面活性剂分子C_(14)KD、C_(14)DK、C_(16)KD、C_(16)DK、C_(16)GDGK,以钝顶螺旋藻光合膜蛋白复合物光系统I(PSI)为研究对象,从增溶、结构完整性、时间稳定性和热稳定性等方面系统研究了五种脂肽表面活性剂与PSI的相互作用。研究发现,设计的DK系列脂肽表面活性剂都能较好地增溶PSI,尤其是C_(16)GDGK对PSI的增溶能力最强;与传统表面活性剂十二烷基麦芽糖苷相比,设计的脂肽表面活性剂能够长时间保持PSI结构的稳定性,同时C_(14)DK、C_(16)DK、C_(16)GDGK增溶PSI的热稳定性显著提高。 展开更多
关键词 脂肽 光系统Ⅰ 增溶 热稳定性
Bacillomycin D发酵与纯化工艺优化及其抑菌活性初步研究 被引量:2
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作者 顾康博 张道敬 +1 位作者 罗远婵 李元广 《农药学学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期465-473,共9页
为建立高纯度bacillomycin D(杆菌霉素D)脂肽的可放大制备工艺,促进其在农用抗生素领域应用价值的开发,经分离纯化及分子结构鉴定,确定了海洋源解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens TYg 3-2所产活性化合物为bacillomycin D脂肽... 为建立高纯度bacillomycin D(杆菌霉素D)脂肽的可放大制备工艺,促进其在农用抗生素领域应用价值的开发,经分离纯化及分子结构鉴定,确定了海洋源解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens TYg 3-2所产活性化合物为bacillomycin D脂肽类抗生素;选择精制过的天然培养基(酵母提取物和蛋白胨),与组分明确的速效碳源、氮源(葡萄糖和硫酸铵)组成复合培养基,结合响应面优化调整培养基配方,建立了bacillomycin D发酵水平高达990 mg/L的5 L罐发酵工艺,其20.62 mg/(L·h)的比生产速率远高于文献报道的10.23 mg/(L·h);在高品质原料基础上,发酵液经菌液分离、酸化沉淀、甲醇浸提、乙醚沉淀、大孔树脂吸附及硅胶柱层析工艺,可高效制备纯度达94.72%的样品。针对所制备的高纯度bacillomycin D样品进行了抑菌活性初步研究,证实其可离体拮抗德氏霉菌、玉米弯孢霉、稻绿核菌和长柄链格孢,并通过盆栽试验证实了bacillomycin D能提升同源芽孢杆菌TYg 3-2的防效,500 mg/L的bacillomycin D与4×10~6 CFU/mL的TYg 3-2菌体混合施用,对黄瓜炭疽病的防效可达95.3%,优于单独施用bacillomycin D(78.4%)和菌体(0)的防治效果。研究初步探索了bacillomycin D在农用抗生素领域的开发价值,同时其高纯度脂肽可放大制备工艺的建立至关重要,不仅能在保全生产菌(其芽孢为生防菌剂原料)的同时从其发酵液中分离和纯化目标脂肽,以促成对农用抗生素价值的深入研究,也能够满足中国农药登记相关毒理学试验对样品的要求(纯度〉85%的克量级样品),其结果可为芽孢杆菌源脂肽类抗生素的研究与开发提供参考。 展开更多
关键词 杆菌霉素D 脂肽类化合物 解淀粉芽孢杆菌 发酵工艺优化 可放大纯化工艺 抑菌活性
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