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凤丹转录因子PoDof的克隆及表达分析 认领
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作者 张加强 谭晨 +3 位作者 马广莹 朱开元 刘慧春 周江华 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1286-1294,共9页
以凤丹种子为试材,采用RACE和RT-PCR技术得到转录因子Dof的c DNA全长,命名为Po Dof。该基因全长为1337 bp,ORF为915 bp,编码304个氨基酸,相对分子量为32.55 k Da,等电点为9.01,无跨膜结构和信号肽,亚细胞定位于细胞核。该蛋白含有一个... 以凤丹种子为试材,采用RACE和RT-PCR技术得到转录因子Dof的c DNA全长,命名为Po Dof。该基因全长为1337 bp,ORF为915 bp,编码304个氨基酸,相对分子量为32.55 k Da,等电点为9.01,无跨膜结构和信号肽,亚细胞定位于细胞核。该蛋白含有一个典型的C2C2型锌指结构域,属于Dof蛋白。系统进化树分析表明,以拟南芥At Dof为参照,Po Dof属于B1亚族;Po Dof与月季Rc Dof处于同一分支,亲缘关系最近。实时荧光定量PCR结果显示,Po Dof表达量在凤丹种子发育过程中呈现先升高后降低的变化趋势,在授粉后60 d表达量为最高。 展开更多
关键词 凤丹 DOF 基因克隆 表达分析 油脂合成
施氮量对水稻籽粒脂类合成的影响 认领
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作者 涂云彪 马鹏 +6 位作者 兰艳 隋晓东 王锦 孙影影 龚静 吴超越 李天 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期655-663,共9页
【目的】为明确氮肥对水稻脂类合成的影响,为水稻优质栽培提供参考。【方法】以南粳9108(粳稻)和IR72(籼稻)为材料,设置N0(0 kg/hm^2)、N1(90 kg/hm^2)、N2(135 kg/hm^2)、N3(180 kg/hm^2)4个施氮处理,研究不同施氮水平对脂类合成及其... 【目的】为明确氮肥对水稻脂类合成的影响,为水稻优质栽培提供参考。【方法】以南粳9108(粳稻)和IR72(籼稻)为材料,设置N0(0 kg/hm^2)、N1(90 kg/hm^2)、N2(135 kg/hm^2)、N3(180 kg/hm^2)4个施氮处理,研究不同施氮水平对脂类合成及其积累的影响,并分析脂类合成相关酶对粗脂肪、游离脂肪酸、脂肪酸组分影响。【结果】随施氮量的增加,两品种粗脂肪、游离脂肪酸含量显著增加;对不同品种的不饱和脂肪酸而言,南粳9108和IR72分别在N1和N2处理下亚油酸含量最高,棕榈酸、硬脂酸和花生酸含量最低,且不饱和脂肪酸含量高于其他处理。在不同氮肥处理下,南粳9108不饱和脂肪酸含量高于IR72。进一步分析表明,2个水稻品种的乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)、脂肪酸合酶(FAS)、3-磷酸甘油脱氢酶(3-GPD)和磷脂酸磷酸酯酶(PPase)酶活性均随施氮量的增加显著提高。【结论】氮肥通过提高脂类合成相关酶的活性,进而促进粗脂肪,游离脂肪酸的积累,并影响脂肪酸组分;且在N2处理下,2品种脂类合成相关酶活性大,粗脂肪和游离脂肪酸含量高,不饱和脂肪酸比例达到最优水平。 展开更多
关键词 施氮量 水稻 脂类合成 品种
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薏苡油脂合成关键基因克隆及其生物信息学分析 认领
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作者 付瑜华 蒙秋伊 +5 位作者 李秀诗 杨小雨 敖茂宏 周祥 申刚 刘凡值 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期485-495,共11页
【目的】掌握薏苡二酰甘油酰基转移酶基因(ClDGAT)、内质网油酸脱饱和酶基因(ClFAD2)和硬脂酸脱饱和酶基因(ClSAD)的生物信息学特性,明确薏苡油脂代谢调控机制,为今后开展以提高薏苡含油量和改良脂肪酸组成为目标的育种研究提供理论依... 【目的】掌握薏苡二酰甘油酰基转移酶基因(ClDGAT)、内质网油酸脱饱和酶基因(ClFAD2)和硬脂酸脱饱和酶基因(ClSAD)的生物信息学特性,明确薏苡油脂代谢调控机制,为今后开展以提高薏苡含油量和改良脂肪酸组成为目标的育种研究提供理论依据。【方法】利用RT-PCR和RACE克隆薏苡油脂合成关键基因(ClDGAT、ClFAD2和ClSAD),通过染色体步移技术获得ClFAD2和ClSAD基因启动子序列,并以ExPASy ProtParam tool、SMART、TMHMM Server v.2.0和SOPMA等在线软件进行生物信息学分析。【结果】从薏苡叶片中成功克隆获得ClDGAT、ClFAD2和ClSAD基因,NCBI登录号分别为MK589802、MK589803和MK589804。其中,ClDGAT基因cDNA序列全长1842 bp,其开放阅读框(ORF)为1539 bp,编码512个氨基酸;ClFAD2基因cDNA序列全长1768 bp,其ORF为1164 bp,编码387个氨基酸,无内含子;ClSAD基因cDNA序列全长1727 bp,其ORF为1182 bp,编码393个氨基酸,有2个内含子。ClDGAT和ClFAD2为不稳定蛋白,ClSAD为稳定蛋白;ClDGAT为疏水性蛋白,ClFAD2和ClSAD为亲水性蛋白。ClDGAT蛋白含有MBOAT功能域,有9个跨膜区;ClFAD2蛋白含有2个功能域(DUF3473和FA_desaturase),有3个跨膜区;ClSAD蛋白含有FA_desaturase_2功能域,无跨膜区。基于蛋白氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树显示,ClDGAT、ClFAD2和ClSAD均与高粱对应的蛋白聚类在同一分支上,即薏苡在进化关系上与高粱的亲缘关系最近。ClFAD2和ClSAD基因启动子序列上均含有光响应元件(Light responsive element)、生长素响应元件(Auxin-responsive element)、茉莉酸甲酯响应元件(MeJA-responsive element)和ABA响应元件(ABA responsive element)。【结论】ClFAD2和ClSAD基因启动子序列上含有抗逆性相关顺式作用元件和植物激素响应元件,说明ClFAD2和ClSAD基因不仅参与薏苡的籽粒发育及油脂合成,还可能与植株的抗逆响应相关。 展开更多
关键词 薏苡 ClDGAT基因 ClFAD2基因 ClSAD基因 油脂合成 顺式作用元件
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基于液相色谱-质谱联用的代谢组学技术研究Pokemon诱导的胞内脂代谢变化 认领
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作者 金一宝 李上富 +5 位作者 王珏 高丹 刘红霞 蒋宇扬 殷果 王铁杰 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期162-168,共7页
Pokemon是一种转录抑制因子,能够通过影响染色质的重组或直接与抑癌基因结合而抑制抑癌基因的转录,促使肿瘤形成。该文利用基于液相色谱-质谱联用的代谢组学技术研究了Pokemon在肝癌中调控细胞代谢的作用机制。通过脂质转染,获得了Poke... Pokemon是一种转录抑制因子,能够通过影响染色质的重组或直接与抑癌基因结合而抑制抑癌基因的转录,促使肿瘤形成。该文利用基于液相色谱-质谱联用的代谢组学技术研究了Pokemon在肝癌中调控细胞代谢的作用机制。通过脂质转染,获得了Pokemon高表达的HL7702细胞,分别收集转染后不同时间点的细胞。利用基于液相色谱-质谱联用技术的代谢组学方法,分析胞内代谢物的成分。根据多元统计分析的结果选出差异显著的候选代谢物,通过数据库(METLIN和HMDB)检索、二级图谱比对进行结构解析,确证了36种代谢物。通过KEGG数据库检索发现这些代谢物主要与脂质合成相关。进一步分析发现脂质合成途径中乙酰辅酶羧化酶和脂肪酸合成酶均被激活。结果显示,Pokemon可通过激活细胞中脂质合成通路而影响细胞的代谢。 展开更多
关键词 液相色谱-质谱联用 POKEMON 代谢组学 脂质合成
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藻-菌混合培养及添加NaHCO3促进栅藻生长和脂类合成 认领
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作者 王雪晴 邢向英 +2 位作者 董庆霖 燕然 李文娜 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期96-102,共7页
研究了藻-菌混合培养(M)、添加NaHCO3培养(C)以及二者的结合培养(MC)对栅藻生长和脂类合成的影响。将从栅藻培养液中分离的4种微生物与栅藻进行混合培养,筛选出对栅藻生长促进效果最佳的细菌B1,并确定栅藻与B1的最佳接种比例;确定添加Na... 研究了藻-菌混合培养(M)、添加NaHCO3培养(C)以及二者的结合培养(MC)对栅藻生长和脂类合成的影响。将从栅藻培养液中分离的4种微生物与栅藻进行混合培养,筛选出对栅藻生长促进效果最佳的细菌B1,并确定栅藻与B1的最佳接种比例;确定添加NaHCO3培养的最佳NaHCO3质量浓度;按照确定的最佳参数进行M、C和MC实验,测定每种培养方式的生长指标和脂质合成指标,并与栅藻单独培养进行对比分析。结果表明:与栅藻单独培养相比,M、C和MC的生物量分别提高了68.3%、98.8%、195.1%,脂类含量提高35.6%、41.6%、50.4%,脂肪酸组成中的C18∶1总含量提高了17.0%、30.9%、47.4%。因此,MC比M和C更高效,是一种有潜在应用价值的生物柴油原料生产模式。 展开更多
关键词 藻-菌混合培养 栅藻 生长 脂类合成 生物柴油
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干扰PTEN基因对奶山羊乳腺上皮细胞脂质合成相关基因的转录及脂肪酸组成的影响 认领
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作者 姚大为 马静 +4 位作者 陈丽丽 王添祯 孙欢 宋文芹 马毅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期851-860,共10页
旨在通过RNA干扰技术揭示蛋白酪氨酸磷酸酶(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10,PTEN)基因在奶山羊乳腺上皮细胞中对乳脂合成及脂肪酸组成的影响。利用RT-PCR方法扩增到西农萨能奶山羊乳腺组织中PTEN基因(GenBan... 旨在通过RNA干扰技术揭示蛋白酪氨酸磷酸酶(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10,PTEN)基因在奶山羊乳腺上皮细胞中对乳脂合成及脂肪酸组成的影响。利用RT-PCR方法扩增到西农萨能奶山羊乳腺组织中PTEN基因(GenBank登录号:MK158074.1)的CDS区,进行序列分析和不同泌乳时期差异转录分析。合成靶向该基因的siRNA,由RT-qPCR结果筛选出有效siRNA,将其转染至奶山羊的乳腺上皮细胞,进一步检测干扰该基因后对脂质合成相关基因转录水平及脂肪酸组成的影响。结果表明:本研究首次克隆到奶山羊(Capra hircus)PTEN基因的CDS区,全长为1212 bp;经序列比对发现,山羊的PTEN基因核苷酸序列同牛(Bos taurus)、猪(Sus scrofa)和人(Homo sapiens)的相似度分别为99%、98%和97%,编码氨基酸序列相似性均在99%以上;蛋白质结构预测发现:其蛋白不存在跨膜结构域,亚细胞定位于细胞质中,N端具有保守的磷酸酶功能区;该基因在奶山羊泌乳盛期乳腺组织中的转录量较干奶期下降51.5%;合成的siRNA转染至乳腺上皮细胞后,成功筛选出理想的siRNA,干扰效率达到94%(P<0.01);与对照组相比,干扰PTEN基因后显著上调SREBP1、FASN、ACACA、SCD1基因转录量(P<0.01或P<0.05),显著下调LPL、FABP3、ACOX1、CPT1B、GPAM、DGAT2和HSL基因转录量(P<0.01或P<0.05)。脂肪酸检测分析发现:干扰该基因能够显著上调C16:1的去饱和指数(P<0.05),但对C18:1的去饱和指数没有显著影响。综上所述,PTEN基因能够调控乳腺上皮细胞中脂质合成相关基因的转录及脂肪酸组成,在奶山羊乳脂代谢中发挥重要作用。 展开更多
关键词 奶山羊 乳腺上皮细胞 PTEN RNA干扰 脂质代谢 脂肪酸组成
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SIRT1/FoxO1通路对奶山羊乳腺上皮细胞脂质合成的影响 认领
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作者 李君 梁文双 +4 位作者 赫秋亚 杨芳慧 权凯 王笑笑 邓红雨 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2019年第10期20-25,共6页
为研究SIRT1/FoxO1通路在奶山羊乳腺脂质合成中的作用,本实验采用0(对照)、50、100、150μmol/L的SIRT1激动剂(RES)处理奶山羊乳腺上皮细胞,qRT-PCR检测脂质代谢相关基因的表达,检测细胞中甘油三酯含量,油红O染色法观察脂滴的积累情况... 为研究SIRT1/FoxO1通路在奶山羊乳腺脂质合成中的作用,本实验采用0(对照)、50、100、150μmol/L的SIRT1激动剂(RES)处理奶山羊乳腺上皮细胞,qRT-PCR检测脂质代谢相关基因的表达,检测细胞中甘油三酯含量,油红O染色法观察脂滴的积累情况。结果表明:100μmol/L RES处理组的SIRT1和FoxO1基因的相对mRNA表达量高于对照组(P<0.05),乳脂关键调控因子SREBP1和PPARγ表达量下降(P<0.05);SIRT1/FoxO1通路激活后,脂肪酸合酶FASN(P<0.01)、脂肪酸去饱和酶SCD1(P<0.01)和脂肪酸转运酶CD36(P<0.05)表达量均下降;而脂解相关基因HSL和ATGL的表达上调(P<0.05)。SIRT1/FoxO1激活后,细胞中甘油三酯含量显著降低(P<0.05),脂滴积累减少。综上可知,SIRT1/FoxO1通路负调控奶山羊乳腺上皮细胞脂质合成,为改善羊奶营养价值和风味提供基础资料。 展开更多
关键词 SIRT1 乳腺上皮细胞 脂质合成 甘油三酯 脂滴积累
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莱茵衣藻中脂质代谢过程研究进展 认领
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作者 张岩 罗锋 李楠楠 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期913-930,共18页
微藻中脂质代谢产生的化合物,可用于生物燃料、营养品和生物药品的生产,因此具有重要的经济价值。脂质代谢贯穿微藻的全部生命过程,对微藻的生长发育和应对外界胁迫都具有重要意义。微藻与研究较清楚的真菌和陆地植物在脂质代谢过程方... 微藻中脂质代谢产生的化合物,可用于生物燃料、营养品和生物药品的生产,因此具有重要的经济价值。脂质代谢贯穿微藻的全部生命过程,对微藻的生长发育和应对外界胁迫都具有重要意义。微藻与研究较清楚的真菌和陆地植物在脂质代谢过程方面具有相似性。当然,随着微藻脂质代谢相关功能基因逐渐被鉴定,人们发现微藻的脂质代谢也具有区别真菌和陆地植物的独特性,因此针对微藻脂质代谢过程的分析具有重要意义。莱茵衣藻是研究脂质代谢过程的模式生物,已经通过基因组、转录组、蛋白质组和代谢组等方法,对其质体、内质网和过氧化物酶体中进行的脂质合成和分解过程进行了研究。本文总结了近年来莱茵衣藻质体、内质网和过氧化物酶体中脂质代谢过程的研究成果,并进行综合阐述。 展开更多
关键词 莱茵衣藻 脂质合成 脂质降解
乙酰辅酶A代谢与肿瘤转移 认领
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作者 高超 王胜浩 +3 位作者 朱文伟 陈进宏 鲁明 钦伦秀 《肿瘤代谢与营养电子杂志》 2019年第3期376-381,共6页
转移是恶性肿瘤最重要的特征之一,也是肿瘤患者最主要的致死原因。肿瘤转移涉及肿瘤细胞自身、肿瘤与微环境间的相互作用等多方面调控因素。然而,肿瘤转移的具体调控机制还远未揭示清楚。代谢重编程是肿瘤的另一重要特征,在肿瘤发生、... 转移是恶性肿瘤最重要的特征之一,也是肿瘤患者最主要的致死原因。肿瘤转移涉及肿瘤细胞自身、肿瘤与微环境间的相互作用等多方面调控因素。然而,肿瘤转移的具体调控机制还远未揭示清楚。代谢重编程是肿瘤的另一重要特征,在肿瘤发生、发展中发挥重要作用。乙酰辅酶A是细胞内关键的代谢中间物,在蛋白乙酰化和脂质合成代谢中起关键作用。已知肿瘤发生发展过程中乙酰辅酶A代谢发生了重编程,为肿瘤的快速生长提供了合成代谢原料。近年来,多项研究在不同类型的肿瘤中发现了乙酰辅酶A代谢与肿瘤转移表型存在密切关联,并进一步揭示了乙酰辅酶A代谢调控肿瘤转移的作用机制。本文将从以下三方面对乙酰辅酶A代谢调控及其在肿瘤转移中的作用及机制进行综述:(1)概述乙酰辅酶A的功能、主要代谢途径及关键代谢酶;(2)乙酰辅酶A代谢重编程通过调控肿瘤细胞上皮-间质转化、黏附迁移能力以及干性等机制影响肿瘤的侵袭转移;(3)乙酰辅酶A代谢重编程调控肿瘤转移研究展望。 展开更多
关键词 乙酰辅酶A代谢 肿瘤转移 蛋白乙酰化 上皮-间质转化 脂质合成
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大豆籽粒不同发育时期的转录组分析 认领
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作者 陈锦玲 徐媛 +3 位作者 陈玉梅 李璐璐 李惠敏 秦新民 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期533-541,共9页
为了从分子水平上研究大豆籽粒不同发育时期的油脂合成与累积机理,对大豆开花20 d(DD20)、30 d(DD30)、40 d(DD40)、50 d(DD50)的籽粒进行了转录组测序。通过对转录组测序数据的分析,共得到原始数据461 566 988条,经过滤获得开花后20,30... 为了从分子水平上研究大豆籽粒不同发育时期的油脂合成与累积机理,对大豆开花20 d(DD20)、30 d(DD30)、40 d(DD40)、50 d(DD50)的籽粒进行了转录组测序。通过对转录组测序数据的分析,共得到原始数据461 566 988条,经过滤获得开花后20,30,40和50 d的clean reads,分别为107 548 920,111 670 776,109 339 672和108 884 270条。DD20/DD30、DD30/DD40、DD40/DD50比较组中的差异表达基因分别为4 759,6 245和13 763个,其中上调基因分别为1 801,2 941和5 695个。差异表达基因的KEGG pathway分析中,分别得到134,133和136条代谢通路,筛选到8个与油脂合成相关的差异表达基因,ACC、FATB、GPAT、DGAT1、G3PDH、KASI、SAD和FAD2。研究结果对深入研究大豆籽粒脂质合成的调控机理及大豆高油育种具有重要参考价值。 展开更多
关键词 大豆 差异表达基因 油脂合成 转录组测序
IL-6上调SCD1表达对HepG2细胞脂质合成功能的影响 认领 被引量:2
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作者 曹白鸽 刘冲霄 +1 位作者 陈源文 董艳 《实用肝脏病杂志》 CAS 2019年第2期172-175,共4页
目的探讨IL-6对HepG2细胞硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)基因的影响及其SCD1基因表达的改变对细胞脂质合成的影响。方法应用rIL-6刺激HepG2细胞,检测细胞内脂质合成以及细胞SCD1基因水平变化。分别构建人SCD1真核表达质粒和小干扰(small in... 目的探讨IL-6对HepG2细胞硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)基因的影响及其SCD1基因表达的改变对细胞脂质合成的影响。方法应用rIL-6刺激HepG2细胞,检测细胞内脂质合成以及细胞SCD1基因水平变化。分别构建人SCD1真核表达质粒和小干扰(small interfering)RNA,转染HepG2细胞,观察改变SCD1水平后HepG2细胞脂代谢相关基因表达的变化以及细胞内脂质合成的变化。结果rIL-6刺激HepG2细胞甘油三酯水平显著高于对照组(P<0.05);与空质粒组比,转染真核表达质粒细胞SCD1蛋白表达增加,细胞脂质合成相关基因SREBP1c和FASN相对水平增加1.35倍和1.27倍,脂质氧化代谢相关基因PPARα和ASCL3水平降低12.3%和13.5%;细胞甘油三酯水平显著升高(P<0.01),而转染small interfering RNA,再用rIL-6刺激HepG2细胞SCD1蛋白表达显著降低,细胞甘油三酯水平也显著降低(P<0.05),脂质合成相关基因SREBP1c和FASN水平显著下降了32.3%和51.9%,脂质分解相关基因PPARα相对水平也下降了80%(P<0.05),而ASCL3水平无显著变化(P=0.832)。结论rIL-6通过上调HepG2细胞SCD1基因表达,引起细胞内脂质合成增加,导致甘油三酯含量增多。 展开更多
关键词 HEPG2细胞 硬脂酰辅酶A去饱和酶1 脂质合成
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FGFR2-IIIb D3胞外段抑制角质形成细胞的脂质合成 认领
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作者 谢盈 刘鸽 汪炬 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1501-1507,共7页
目的:探讨成纤维细胞生长因子受体2(FGFR2)-IIIb D3胞外段对角质形成细胞中脂质合成的抑制作用。方法:利用等温滴定量热(ITC)法和CCK-8法检测FGFR2-IIIb D3胞外段的生物特性,并利用real-time PCR、Western blot、流式细胞术和油红O染色... 目的:探讨成纤维细胞生长因子受体2(FGFR2)-IIIb D3胞外段对角质形成细胞中脂质合成的抑制作用。方法:利用等温滴定量热(ITC)法和CCK-8法检测FGFR2-IIIb D3胞外段的生物特性,并利用real-time PCR、Western blot、流式细胞术和油红O染色法分析其对角质形成细胞HaCaT脂质合成的抑制作用。结果:(1)ITC、real-time PCR和CCK-8结果显示FGFR2-IIIb在HaCaT细胞中高表达,FGFR2-IIIb D3胞外段可与FGF7特异性结合,抑制HaCaT细胞活力;(2)Western blot结果显示在HaCaT细胞中FGF7可显著上调固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A合成酶(ACS)、硬脂酰辅酶A脱饱和酶(SCD)和羟甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR) mRNA的表达及p-FGFR、p-AKT和SREBP-1蛋白的表达(P<0.01),用FGFR2-IIIb D3胞外段和AKT抑制剂处理后可抑制它们的上调,且与FGF7组相比差异显著;(3)油红O染色法和流式细胞术结果显示,FGF7诱导后HaCaT细胞的脂质含量明显上调,用FGFR2-IIIb D3胞外段和AKT抑制剂处理后,脂质含量下调(P<0.01)。结论:FGFR2-IIIb D3胞外段竞争性地与FGF7结合,抑制FGFR2-IIIb的自体磷酸化,抑制下游PI3K-AKT信号通路,抑制SREBP-1c和下游脂质合成酶的表达,进而抑制角质形成细胞中脂质的合成。 展开更多
关键词 FGFR2-IIIb D3胞外段 成纤维细胞生长因子7 固醇调节元件结合蛋白1C 脂质合成 角质形成细胞
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干扰CREB基因对奶山羊乳腺上皮细胞脂质合成相关基因表达及甘油三酯合成的影响 认领
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作者 马静 姚大为 +5 位作者 杨春蕾 李秋玲 王添祯 陈成彬 宋文芹 马毅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2413-2421,共9页
旨在筛选奶山羊cAMP应答元件结合蛋白CREB(cAMP response element binding protein)基因的siRNA,揭示干扰该基因后对乳腺上皮细胞中乳脂合成相关基因表达及甘油三酯合成的影响。本研究通过qRT-PCR方法从西农萨能奶山羊乳腺组织中扩增CRE... 旨在筛选奶山羊cAMP应答元件结合蛋白CREB(cAMP response element binding protein)基因的siRNA,揭示干扰该基因后对乳腺上皮细胞中乳脂合成相关基因表达及甘油三酯合成的影响。本研究通过qRT-PCR方法从西农萨能奶山羊乳腺组织中扩增CREB基因完整的CDS区,进行序列分析和不同泌乳时期表达水平分析,合成靶向CREB基因的siRNA,利用荧光定量PCR筛选有效siRNA,并检测脂质合成相关基因的表达,采用试剂盒检测细胞内甘油三酯含量。结果表明:1)克隆得到全长为984 bp的奶山羊CREB基因的CDS区(GenBank登录号:MK158073),并对其进行生物信息学分析。2)该基因在奶山羊泌乳盛期乳腺组织的表达量为干奶期的1.93倍(P<0.05)。3)成功筛选到靶向CREB基因的有效siRNA,干扰效率为72%(P<0.01);并将其在奶山羊乳腺上皮细胞进行转染,通过qRT-PCR检测脂质合成相关基因的表达,与对照组相比,干扰CREB基因后显著抑制了FASN、ACACA、SCD 1、FABP 3、LPL、CPT 1B、GPAM和DGAT 2基因表达量(P<0.05),并显著增加了HSL基因表达量(P<0.05);且细胞内甘油三酯含量被显著下调(P<0.05)。综上所述,CREB基因在奶山羊原代乳腺上皮细胞中很可能通过调控脂质代谢相关基因的表达及甘油三酯含量对山羊的乳脂合成过程发挥重要作用。 展开更多
关键词 奶山羊 乳腺上皮细胞 CREB RNA干扰 脂质合成 甘油三酯
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肌肉生长抑制素(MSTN)对猪前体脂肪细胞增殖和成脂分化的影响 认领
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作者 张琳 伏智亮 +2 位作者 邢华 王珏 潘士锋 《畜牧与兽医》 北大核心 2019年第11期81-86,共6页
为探讨肌肉生长抑制素(MSTN)对猪前体脂肪细胞增殖和成脂分化的影响,本研究以原代培养的断奶猪前体脂肪细胞为研究对象,分别以0 ng/mL(对照组)、25、50和100 ng/mL的MSTN重组蛋白处理细胞,采用油红O染色和提取法定量分析细胞内脂肪生成... 为探讨肌肉生长抑制素(MSTN)对猪前体脂肪细胞增殖和成脂分化的影响,本研究以原代培养的断奶猪前体脂肪细胞为研究对象,分别以0 ng/mL(对照组)、25、50和100 ng/mL的MSTN重组蛋白处理细胞,采用油红O染色和提取法定量分析细胞内脂肪生成和成脂分化程度,使用荧光定量PCR和Western blot分析脂肪细胞分化标志基因过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)、脂肪合成关键酶脂肪酸合成酶(FAS)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的表达,探讨MSTN调控猪前体脂肪细胞成脂分化可能的分子机制。结果显示,处理48 h后,与对照组细胞相比,25和50 ng/mL MSTN处理对细胞增殖活力无显著影响,而100 ng/mL MSTN可显著提高猪前体脂肪细胞增殖活力。油红O染色及提取结果表明,MSTN呈剂量依赖性抑制猪前体脂肪细胞的成脂分化。进一步研究表明,与0 ng/mL MSTN组细胞相比,100 ng/mL MSTN处理组细胞中MSTN表达量显著升高,而PPAR-γ、FAS和ACC的mRNA和蛋白表达均显著降低。研究表明,MSTN抑制猪前体脂肪细胞的成脂分化,效果呈剂量依赖性,此抑制作用可能是通过抑制PPAR-γ的表达,进而抑制脂肪的合成来实现的。 展开更多
关键词 肌肉生长抑制素(MSTN) 猪前体脂肪细胞 增殖 成脂分化 脂肪合成
饲粮添加山竹醇对氧化应激仔猪生长性能、抗氧化功能及肝脏脂质合成的影响 认领
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作者 贺琼玉 邵亚飞 +3 位作者 姚卫磊 王同心 夏军 黄飞若 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期5834-5845,共12页
本试验旨在研究饲粮添加山竹醇对氧化应激仔猪生长性能、抗氧化功能及肝脏脂质合成的影响。选择30头健康状况良好、胎次相近的35日龄三元杂交(杜×长×大)断奶仔猪,随机分为5个组,每组6个重复,每个重复1头仔猪。对照组和应激组... 本试验旨在研究饲粮添加山竹醇对氧化应激仔猪生长性能、抗氧化功能及肝脏脂质合成的影响。选择30头健康状况良好、胎次相近的35日龄三元杂交(杜×长×大)断奶仔猪,随机分为5个组,每组6个重复,每个重复1头仔猪。对照组和应激组仔猪饲喂基础饲粮,山竹醇组仔猪饲喂在基础饲粮中分别添加200、400、600 mg/kg山竹醇的试验饲粮,预饲7 d后开始正式试验,试验期28 d。在试验第15天早晨进行前腔静脉采血,采血后应激组和山竹醇组仔猪按照10 mg/kg BW的剂量腹腔注射敌草快(diquat)溶液,对照组仔猪腹腔注射相同剂量灭菌生理盐水。在试验第29天试验猪空腹进行前腔静脉采血并采取所需肝脏样品,检测血清和肝脏生化指标以及肝脏脂质合成相关基因mRNA的表达量。结果表明:1)注射diquat后(第15~28天),应激组仔猪的平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)显著低于对照组(P<0.05),料重比(F/G)显著高于对照组(P<0.05),各山竹醇组的ADG和ADFI均显著高于应激组(P<0.05),400 mg/kg山竹醇组的F/G显著低于应激组(P<0.05)。2)注射diquat前(第15天),饲粮添加400、600 mg/kg山竹醇显著提高了仔猪血清超氧化物歧化酶(SOD)活性以及总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05)。注射diquat后(第29天),与对照组相比,应激组血清和肝脏SOD、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著降低(P<0.05),血清和肝脏丙二醛(MDA)含量显著增加(P<0.05);饲粮添加200、400和600 mg/kg山竹醇均显著提高了氧化应激仔猪血清和肝脏SOD、GSH-Px活性(P<0.05),显著降低了血清和肝脏M DA含量(P<0.05),其中以山竹醇添加量为400 mg/kg时效果最好。3)肝脏组织病理学观察发现应激组仔猪肝脏组织结构受到损伤,且肝脏内脂质沉积明显增加,与应激组相比,各山竹醇组的肝脏组织结构有一定程度恢复,除此之外,脂质沉积也明显减少。4)注射diquat后,应激组血清甘油三酯(TG)和总胆固醇(T 展开更多
关键词 山竹醇 仔猪 抗氧化 肝脏 脂质合成
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乳酸/GPR81信号通路对运动诱导肌细胞甘油三酯堆积的调节作用 认领
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作者 孙景权 严翊 +1 位作者 李松波 谢敏豪 《体育科学》 CSSCI 北大核心 2019年第3期66-73,共8页
目的:旨在观察乳酸/GPR81信号通路是否参与调节电脉冲刺激(electricalpulsestimulation,EPS)诱发C2C12肌管细胞收缩诱导甘油三酯(triglyceride,TG)堆积的过程。方法:首先用乳酸处理C2C12肌管细胞,比色法检测细胞中TG含量,WesternBlot方... 目的:旨在观察乳酸/GPR81信号通路是否参与调节电脉冲刺激(electricalpulsestimulation,EPS)诱发C2C12肌管细胞收缩诱导甘油三酯(triglyceride,TG)堆积的过程。方法:首先用乳酸处理C2C12肌管细胞,比色法检测细胞中TG含量,WesternBlot方法检测CREB、pCREB和β-actin蛋白含量;然后采用两种EPS方案(30 V 0.5 Hz 2 ms和30 V 1 Hz 2 ms)使C2C12肌管细胞收缩,比色法检测细胞中乳酸含量,化学发光法检测细胞中ATP含量,RT-PCR法检测MyHCI、MyHCIIa、MyHCIIb和MyHCIIx等m RNA含量;随后观察EPS处理后不同时间点C2C12肌管细胞中TG含量的变化,以建立EPS诱发的C2C12肌管细胞TG堆积模型;最后使用GPR81抑制剂3-OBA处理细胞,将C2C12肌管细胞分为6组(n=6):对照组、30 V 0.5 Hz 2 ms组、30 V 1 Hz 2 ms组、3-OBA组、3-OBA+30 V 0.5 Hz 2 ms组和3-OBA+30 V 1 Hz 2 ms组,比色法检测细胞内TG含量。结果:1)与对照组相比,乳酸显著增加C2C12肌管细胞中TG含量(P<0.05)并显著降低p CREB的蛋白含量(P<0.01);2)与未电刺激组相比,两种EPS方案均显著增加肌管细胞中乳酸含量(P<0.05),而显著降低细胞中ATP含量(P<0.01);同时,两组MyHCI和MyHCIIb mRNA含量均显著增加(P<0.05),而MyHCIIa和MyHCIIx mRNA含量变化不明显(P>0.05);在电刺激后36h,细胞中TG含量均显著增加(P<0.05),而电刺激后12h和24h肌管细胞中TG含量未出现显著变化(P>0.05);3)与未刺激组相比,30 V 0.5 Hz 2 ms组C2C12肌管细胞中TG含量出现增加趋势(P=0.052),当使用3-OBA处理细胞后,这一现象无显著变化(P>0.05);而30V1Hz2ms组TG含量出现非常显著增加(P<0.01),当使用3-OBA处理后,这一作用得到显著减弱(P<0.05)。结论:长时间的EPS能够诱导肌管细胞收缩,增加乳酸和TG含量。乳酸/GPR81信号通路参与调节EPS诱发C2C12肌管细胞收缩诱导TG堆积的过程是骨骼肌细胞收缩诱导能源物质脂滴增加的分子机制之一。 展开更多
关键词 运动 乳酸 GPR81 骨骼肌 脂滴合成
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脂质代谢中的重要靶点:法尼酯X受体(FXR) 认领 被引量:2
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作者 刘晓红 李玲 +6 位作者 齐振华 陈彬尧 赵慧佳 郝卓文 乐江 叶啟发 吴建国 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2018年第8期955-960,共6页
法尼酯X受体(FXR)是一种可以被胆汁酸激活的核受体,通过调控CYP7A1等靶基因的表达,影响脂质在肝脏、小肠等重要器官的各种代谢过程。本文拟就近几年来探究FXR在脂质合成、氧化、吸收及转运环节中的作用机制作一综述,进而FXR有望成为... 法尼酯X受体(FXR)是一种可以被胆汁酸激活的核受体,通过调控CYP7A1等靶基因的表达,影响脂质在肝脏、小肠等重要器官的各种代谢过程。本文拟就近几年来探究FXR在脂质合成、氧化、吸收及转运环节中的作用机制作一综述,进而FXR有望成为治疗脂肪肝、高甘油三酯血症等疾病的药物靶点,为预防和治疗临床上疾病的发生提供科学依据。 展开更多
关键词 法尼酯X受体 脂质合成 脂质氧化 脂质吸收
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食用油料经济林油脂合成途径基因研究进展 认领
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作者 赵爱国 杨桂燕 翟梅枝 《北方园艺》 CAS 北大核心 2018年第9期171-176,共6页
油茶和核桃是我国最重要的两类经济木本油料,茶油和核桃油均富含不饱和脂肪酸,深受群众喜爱。该文综述了油茶和核桃油脂合成途径中油茶果糖二磷酸醛缩酶(Co FBA)、油茶乙酰辅酶A羧化酶(Co ACCase)、油茶硬脂酰-ACP脱饱和酶(Co SAD... 油茶和核桃是我国最重要的两类经济木本油料,茶油和核桃油均富含不饱和脂肪酸,深受群众喜爱。该文综述了油茶和核桃油脂合成途径中油茶果糖二磷酸醛缩酶(Co FBA)、油茶乙酰辅酶A羧化酶(Co ACCase)、油茶硬脂酰-ACP脱饱和酶(Co SAD)、油茶脂肪酸脱饱和酶(Co FAD)、油茶甘油-3-磷酸酰基转移酶(Co DGAT)、核桃异质型乙酰辅酶A羧化酶(Jr ACCase)等基因的研究进展,并对其在分子育种中的意义进行了展望。以期为分子育种途径调节食用油料经济林油脂不同成分间比例提供理论基础。 展开更多
关键词 油茶 核桃 油脂合成 基因
共生真菌 Simplicillium lanosoniveum 促进衣藻生长和脂类合成 认领 被引量:1
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作者 董庆霖 王瑜琴 +2 位作者 邢向英 郜海娇 李彤彤 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期2639-2647,共9页
[背景]藻类是生产生物柴油的主要原料,而一些真菌和细菌能够与藻类共生并提高生物柴油产量,因此藻-菌共生培养技术成为国内外研究的热点。[目的]研究共生真菌Simplicillium lanosoniveum对衣藻Chlamydomonas reinhardtii细胞生长和脂类... [背景]藻类是生产生物柴油的主要原料,而一些真菌和细菌能够与藻类共生并提高生物柴油产量,因此藻-菌共生培养技术成为国内外研究的热点。[目的]研究共生真菌Simplicillium lanosoniveum对衣藻Chlamydomonas reinhardtii细胞生长和脂类合成的影响。[方法]将分离的蓝藻共生真菌和衣藻混合(共生)培养。[结果]与衣藻单独培养相比,混合培养衣藻的比生长速率(0.20d^-1)、细胞产率[0.17g/(L·d)]和生物量(2.85g/L)分别提高了10.3%、51.3%和55.7%;脂类比合成速率[0.68mg/(g·d)]、合成速率[1.95mg/(L·d)]和含量(220.4mg/g)分别提高了33.3%、107.5%和32.0%,并且脂类中的饱和脂肪酸以及单不饱和脂肪酸C18-1和C18-2的比例上升,有利于生物柴油的加工。[结论]真菌Simplicillium lanosoniveum能够促进衣藻的生长和脂类合成,因此藻-菌混合培养可用于生物柴油原料的生产。 展开更多
关键词 共生真菌 衣藻 混合培养 细胞生长 脂类合成
植物激素对微拟球藻油脂及二十碳五烯酸积累的影响 认领 被引量:1
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作者 李悦明 崔球 +5 位作者 徐建春 宋晓金 夏修峦 李霞 范栋 李妍 《发酵科技通讯》 CAS 2018年第2期82-87,共6页
考察了6种植物激素对微拟球藻油脂积累与EPA产量的影响,并初步探讨了其对油脂合成的调控机制.每种植物激素对微拟球藻油脂积累都有促进效果.其中添加20mg/L IBA时油脂产量提高最多,油脂质量分数提高20.94%.其次是添加15mg/L的BA,油脂质... 考察了6种植物激素对微拟球藻油脂积累与EPA产量的影响,并初步探讨了其对油脂合成的调控机制.每种植物激素对微拟球藻油脂积累都有促进效果.其中添加20mg/L IBA时油脂产量提高最多,油脂质量分数提高20.94%.其次是添加15mg/L的BA,油脂质量分数提高20.34%.同时,BA在质量浓度为15mg/L时,EPA质量分数提高了29.34%.实时定量PCR证实BA等激素能显著提高微拟球藻中油脂合成相关基因的转录水平.证实了植物激素可用于提高微拟球藻EPA的产量,为利用植物激素提高微拟球藻发酵生产EPA提供了实验依据. 展开更多
关键词 二十碳五烯酸 植物激素 油脂合成 微拟球藻 实时定量PCR
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