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中华按蚊电转化显微注射技术平台的构建及其在基因瞬时过表达中的应用 预览
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作者 车林茸 何正波 +4 位作者 韩宝珠 陈晓洁 闫振天 乔梁 陈斌 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期561-571,共11页
【目的】构建在中华按蚊 Anopheles sinensis 中的电转化显微注射技术平台,并利用该技术平台实现活体基因瞬时过表达对其进行验证,为开展系统的基因功能研究奠定基础。【方法】以CUY21EDIT Ⅱ电转仪为主体构建中华按蚊中的电转化显微注... 【目的】构建在中华按蚊 Anopheles sinensis 中的电转化显微注射技术平台,并利用该技术平台实现活体基因瞬时过表达对其进行验证,为开展系统的基因功能研究奠定基础。【方法】以CUY21EDIT Ⅱ电转仪为主体构建中华按蚊中的电转化显微注射技术平台;使用同源重组法构建 EGFP 和 Bm-iAANAT 基因的瞬时过表达质粒,在中华按蚊化蛹3 h时注射该质粒进入蛹体,随即使用电转仪对注射后的蛹进行电击,待注射个体发育至化蛹39 h时,利用体视荧光显微镜观察蛹体表皮着色和发光情况,并通过荧光定量PCR检测 EGFP 和 Bm-iAANAT 的表达。【结果】构建了用于显微注射的 PIZ-modi-Aepub-EGFP-SV 40和 PIZ-modi-Aepub-AANAT- T2A-EGFP-SV 40过表达载体。 PIZ-modi-Aepub-EGFP-SV 40注射组中华按蚊在化蛹39 h时约87.5%的个体成活并正常黑化,这其中约92.7%的个体的表皮检测到明显的绿色荧光,注射无启动子载体 PIZ-modi-EGFP-SV 40并进行电击的阴性对照组和注射过表达载体 PIZ-modi-Aepub-EGFP-SV 40但未进行电击的阳性对照组个体则没有明显的绿色荧光;并且荧光定量PCR结果显示,注射组中发光个体的 EGFP 基因明显高表达。 PIZ-modi-Aepub-AANAT-T 2 A-EGFP-SV 40注射组的蛹在化蛹39 h时有80.4%个体存活,这其中92.2%的个体相对于注射无启动子载体 PIZ-modi-AANAT- T2A -EGFP-SV 40的阴性对照组和注射过表达载体 PIZ-modi-Aepub-AANAT- T2A -EGFP-SV 40但未进行电击的阳性对照组个体黑化明显受阻,且有明显的绿色荧光;并且荧光定量PCR结果显示,报告基因 Bm-iAANAT 和 EGFP 的表达明显提高。【结论】成功构建了在中华按蚊中的电转化显微注射技术平台;通过此技术平台能够便捷、快速和高效地实现报告基因在活蛹中的瞬时过表达,并产生了目的表型。这为中华按蚊功能基因组研究奠定了基础。 展开更多
关键词 中华按蚊 电转化显微注射 增强型绿色荧光蛋白基因 芳香烷基胺-N-乙酰基转移酶基因 瞬时过表达 基因功能
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基于GEO数据库筛查急性淋巴细胞白血病糖皮质激素耐药相关基因 预览
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作者 张丹阳 董晓敏 +3 位作者 周晓焕 张越 张娟 周合冰 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2019年第3期272-277,共6页
目的:基于全基因组表达芯片筛查急性淋巴细胞白血病糖皮质激素耐药相关的基因,分析其可能参与的信号传导通路。方法:从GEO数据库中下载表达谱数据集,应用R软件分析急性淋巴细胞白血病糖皮质激素敏感组与耐药组差异表达基因(DEGs),并对... 目的:基于全基因组表达芯片筛查急性淋巴细胞白血病糖皮质激素耐药相关的基因,分析其可能参与的信号传导通路。方法:从GEO数据库中下载表达谱数据集,应用R软件分析急性淋巴细胞白血病糖皮质激素敏感组与耐药组差异表达基因(DEGs),并对差异基因进行基因功能(GO)分析和信号通路富集分析,构建基因间相互作用网络,筛选出关键基因。结果:共筛选出差异基因109个,其中表达上调基因86个,下调基因23个。GO富集分析得到DEGs主要涉及免疫应答,凝血调节,细胞增殖和凋亡、细胞迁移等生物过程;pathway分析发现DEGs主要富集参与MAPK信号通路、Toll样受体信号通路、NF-κB-MAP通路、细胞凋亡等;互作网络分析挖掘出的关键基因FOS、NFKB1、MAP2K1、IRS1、CASP3。结论:糖皮质激素耐药的急性淋巴细胞白血病存在基因差异表达,筛选出耐药相关的重要作用基因及信号通路。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 糖皮质激素耐药 基因芯片 基因功能 信号传导通路
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细菌基因敲除策略及其在维氏气单胞菌研究中的应用
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作者 康元环 杨滨僮 +1 位作者 单晓枫 钱爱东(校) 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第6期698-702,共5页
基因敲除技术是20世纪80年代发展起来的一种分子生物学技术,目前已广泛应用于微生物基因功能等相关领域的研究中。维氏气单胞菌(Aeromonas veronii,A. veronii)是气单胞菌科气单胞菌属的一种,近年来,该菌引发疾病的报道逐年增多,因此,... 基因敲除技术是20世纪80年代发展起来的一种分子生物学技术,目前已广泛应用于微生物基因功能等相关领域的研究中。维氏气单胞菌(Aeromonas veronii,A. veronii)是气单胞菌科气单胞菌属的一种,近年来,该菌引发疾病的报道逐年增多,因此,对其致病机制的研究显得尤为重要。本文对细菌不同基因敲除策略及其在A. veronii基因功能研究中的应用作一综述,旨在为A. veronii致病机制的深入研究提供参考。 展开更多
关键词 基因敲除技术 维氏气单胞菌 基因功能
CRISPR/Cas9技术在基因功能研究中的应用 预览
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作者 周芮 张辟 《生物化工》 2019年第1期142-145,148共5页
CRISPR/Cas系统是存在于几乎所有细菌和古细菌中的一种获得性免疫防御系统。2012年起,CRISPR/Cas9系统被发展成为基因编辑工具,并以其高效、快速、便捷等优点被广泛应用于多项科研领域。同时,研究者也将CRISPR/Cas9系统扩展应用于高通... CRISPR/Cas系统是存在于几乎所有细菌和古细菌中的一种获得性免疫防御系统。2012年起,CRISPR/Cas9系统被发展成为基因编辑工具,并以其高效、快速、便捷等优点被广泛应用于多项科研领域。同时,研究者也将CRISPR/Cas9系统扩展应用于高通量筛选、基因表达调控、表观遗传修饰等方面。基因功能研究一直是人类面临的一大课题,CRISPR/Cas9技术的出现加速了该项研究进程。本文综述了CRISPR/Cas9系统在基因功能研究领域的应用进展,并对CRISPR/Cas9技术目前存在的问题及改善方向进行简要总结。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas Cas9 基因编辑 基因功能
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菌株Enterobacter sp.降解除草剂阿特拉津产物测定及降解基因克隆 预览
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作者 刘丹丹 孙宛玉 +3 位作者 刘畅 马浩珂 王瑞娇 隋宇凡 《河南农业科学》 北大核心 2019年第10期70-76,共7页
为解析除草剂阿特拉津的生物降解过程,采用液相色谱与质谱联用技术对菌株Enterobacter sp.降解阿特拉津的产物进行检测,通过PCR扩增技术克隆降解基因,并利用GO功能富集分析对降解基因功能进行检测。在降解产物中先后检测出羟基阿特拉津... 为解析除草剂阿特拉津的生物降解过程,采用液相色谱与质谱联用技术对菌株Enterobacter sp.降解阿特拉津的产物进行检测,通过PCR扩增技术克隆降解基因,并利用GO功能富集分析对降解基因功能进行检测。在降解产物中先后检测出羟基阿特拉津、氰尿酸和尿素组分,克隆出降解基因L465-RS09425、L465-RS10465、L465-RS12445、L465-RS09100、L465-RS12200和UreA。初步推测菌株Enterobacter sp.在降解基因的作用下,经脱氯、脱烷基、脱氨基、环裂解、脱羧和脲基甲酸水解等过程,将阿特拉津逐步矿化。 展开更多
关键词 阿特拉津 降解产物 降解基因 基因功能 液质联用 Enterobacter sp. 除草剂
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哈茨木霉C2H2型转录因子Tha09974功能研究 预览
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作者 李昕玥 王丽荣 +2 位作者 李梅 吴蓓蕾 蒋细良 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2019年第3期407-415,共9页
哈茨木霉Th33菌株能拮抗多种植物病原真菌,具有重要的研究和应用价值。实验室前期研究了哈茨木霉Th33 Gα蛋白基因Thga1的功能,发现Thga1敲除突变株的分生孢子梗和分生孢子量显著减少。对该敲除株和Th33进行转录组测序,发现共有29个转... 哈茨木霉Th33菌株能拮抗多种植物病原真菌,具有重要的研究和应用价值。实验室前期研究了哈茨木霉Th33 Gα蛋白基因Thga1的功能,发现Thga1敲除突变株的分生孢子梗和分生孢子量显著减少。对该敲除株和Th33进行转录组测序,发现共有29个转录因子发生显著差异表达。本文选取差异表达量最大的C2H2型转录因子基因Tha09974进行功能研究。构建了Tha09974敲除突变株△9974及其回复突变株R9974,对野生菌Th33、△9974和R9974分别进行了生长、产孢及拮抗特性检测。结果显示,与野生菌Th33相比,△9974的菌落生长速度没有显著差异,菌丝生物量降低了51.5%,产孢量降低了73.6%;△9974较野生菌Th33对番茄灰霉病菌Botrytis cinerea Pers.和黄瓜枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum的生长抑制率分别降低了41.67%和45.15%。R9974和Th33的生长速度、生物量、产孢量及对番茄灰霉病菌的抑制率没有显著差异,对黄瓜枯萎病菌的抑制率低于野生菌Th33,但高于△9974。以上结果说明,Tha09974能够正调控Th33的生长、产孢和对病原菌的拮抗能力,并受到Thga1的正调控。本研究为进一步揭示木霉菌的产孢调控机制奠定了基础。 展开更多
关键词 哈茨木霉 转录因子Tha09974 基因敲除 回复突变 基因功能
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建兰AGL6基因的表达及功能分析
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作者 吴菁华 杨超 吴少华 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1123-1133,共11页
采用文库稀释池法从建兰花器官全长均一化cDNA文库中筛选出1个AGL6类MADS-box基因CeAGL6,对其进行了信息学分析,并通过表达模式、互作蛋白和烟草的遗传转化研究其功能。研究结果发现,CeAGL6含有MADS结构域和K结构域,并具有AGL6类蛋白的... 采用文库稀释池法从建兰花器官全长均一化cDNA文库中筛选出1个AGL6类MADS-box基因CeAGL6,对其进行了信息学分析,并通过表达模式、互作蛋白和烟草的遗传转化研究其功能。研究结果发现,CeAGL6含有MADS结构域和K结构域,并具有AGL6类蛋白的典型基序。CeAGL6在建兰萼片中高水平表达,其次是花梗,在花瓣、唇瓣和合蕊柱中表达水平较低,不在叶片和根中表达。转CeAGL6烟草花期略微提前,出现四瓣花、六瓣花、雄蕊瓣化和多种不规则的五瓣花等表型。CeAGL6与CeAP1、CePI1、CeAG1和CeSEP3能互作,但自身不能形成同源二聚体。试验结果表明Ce AGL6参与了建兰成花诱导和花器官发育。 展开更多
关键词 建兰 花发育 AGL6同源基因 基因功能
棉花CML基因家族成员鉴定与功能分析 预览
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作者 杨秀 许艳超 +7 位作者 杨芳芳 蔡小彦 侯宇清 王玉红 王星星 王坤波 刘方 周忠丽 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2019年第4期307-318,共12页
【目的】类钙调素(Calmodulin-like,CML)蛋白是1种重要的Ca2+传感器,在调节植物应激反应机制中起重要作用。对CML基因家族进行全基因组学分析,以便深入研究CML基因在棉花逆境胁迫下的作用。【方法】利用生物信息学的方法进行了棉花CML... 【目的】类钙调素(Calmodulin-like,CML)蛋白是1种重要的Ca2+传感器,在调节植物应激反应机制中起重要作用。对CML基因家族进行全基因组学分析,以便深入研究CML基因在棉花逆境胁迫下的作用。【方法】利用生物信息学的方法进行了棉花CML家族成员的鉴定。利用转录组数据和反转录聚合酶链式反应分析陆地棉(Gossypium hirsutum L.)CML基因在盐胁迫下的表达模式。利用病毒诱导基因沉默技术对GhCML44-2基因进行沉默并进行功能验证。【结果】在陆地棉(Gossypium hirsutum L.)、雷蒙德氏棉(G. raimondii Ulbrich)、亚洲棉(G. arboreum L.)中分别获得了154个、74个、78个CML蛋白。进化树和保守基序分析表明,GhCML蛋白分为8个亚类,都含有保守的EF-hand结构域;在盐胁迫下,107个GhCML基因在叶和根中有显著的差异表达,且在根和叶中的差异表达模式不同。启动子分析表明,这些基因启动子中存在多种不同的胁迫响应元件;利用病毒诱导基因沉默技术成功沉默GhCML44-2的棉株相较于对照更加不耐盐。【结论】该研究结果有助于了解棉花CML基因家族的进化与功能,为后续研究其功能提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 棉花 类钙调素蛋白 盐胁迫 病毒诱导基因沉默 基因功能
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小麦全基因组中YABBY基因家族的筛选与特征分析
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作者 葛川 杨荣 +2 位作者 李刘军 张建诚 郑兴卫 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期11-18,共8页
YABBY家族是植物特有的转录因子,在植物侧生器官极性建立和发育过程中起重要的调控作用。从全基因组水平鉴定小麦YABBY家族并进行生物信息学和表达模式分析,为研究小麦YABBY家族基因的功能奠定基础。根据已经报道的拟南芥和水稻YABBY基... YABBY家族是植物特有的转录因子,在植物侧生器官极性建立和发育过程中起重要的调控作用。从全基因组水平鉴定小麦YABBY家族并进行生物信息学和表达模式分析,为研究小麦YABBY家族基因的功能奠定基础。根据已经报道的拟南芥和水稻YABBY基因,在小麦基因组数据库中执行本地BLAST程序鉴定小麦基因组中的YABBY基因,采用MEGA、GSDS、MEME和PlantCARE等软件进行生物信息学分析,并利用已公开的RNA-seq数据绘制不同发育时期和不同组织的表达谱。结果表明,在小麦基因组范围内鉴定得到18个YABBY基因家族成员,分成5个亚家族。Motif分析表明小麦YABBY蛋白均具有C2C2锌指结构域及YABBY结构域;TaYABBY启动子区检测到与植物生长发育、激素诱导和逆境胁迫有关的顺式作用元件。RNA-Seq表达谱发现小麦YABBY基因具有明显的组织表达特异性。 展开更多
关键词 YABBY基因家族 小麦 生物信息 进化分析 基因功能
脂蛋白分解酶基因(LPL)及其与家畜胴体品质的关系 预览
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作者 柳杭 韩越 姜怀志 《畜牧与饲料科学》 2019年第3期60-65,共6页
脂蛋白分解酶作为一个在脂肪分解、转运、沉积中发挥重要作用的水解酶,其基因多态性对动物机体起着至关重要的作用。LPL基因的异常可导致动物机体出现不同程度的生理病理变化。近年来研究发现,哺乳动物LPL基因可以作为遗传标记基因。综... 脂蛋白分解酶作为一个在脂肪分解、转运、沉积中发挥重要作用的水解酶,其基因多态性对动物机体起着至关重要的作用。LPL基因的异常可导致动物机体出现不同程度的生理病理变化。近年来研究发现,哺乳动物LPL基因可以作为遗传标记基因。综述了家畜LPL基因的生物学功能及其与胴体品质关系方面的研究进展,以期为进一步揭示该基因的生物学功能以及充分发挥其在提高家畜胴体品质中的作用提供科学依据。 展开更多
关键词 LPL基因 生物学功能 基因突变 胴体品质
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CREBRF基因及其功能研究进展 预览
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作者 张艳敏 刘颖 +5 位作者 李文通 杨亚岚 葛长利 陈其美 周荣 李奎 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期24-28,共5页
繁殖性状作为多基因控制的数量性状,受到多种转录调控因子、信号通路的共同调控,直接影响规模化养殖生产的经济效益,提高繁殖力已成为当今家畜遗传育种的重要目标之一。Luman/CREB3募集因子(LRF或CREBRF)是一种未折叠蛋白应答响应亮氨... 繁殖性状作为多基因控制的数量性状,受到多种转录调控因子、信号通路的共同调控,直接影响规模化养殖生产的经济效益,提高繁殖力已成为当今家畜遗传育种的重要目标之一。Luman/CREB3募集因子(LRF或CREBRF)是一种未折叠蛋白应答响应亮氨酸拉链转录因子,其在进化过程中保持稳定且具有保守的蛋白结构。近年来的研究发现,CREBRF基因在机体代谢、疾病治疗以及动物繁殖调控过程中发挥着重要功能。本文主要就CREBRF基因的发现与结构特征、表达规律及其与动物繁殖相关的研究进展进行综述,为深入挖掘CREBRF基因在动物机体中的生物学功能奠定基础。 展开更多
关键词 CREBRF基因 Luman基因 繁殖调控 生物学功能
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ZNF804A基因多态性与精神分裂症患者认知功能障碍的关联研究 被引量:1
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作者 于东辰 刘薇 《中华行为医学与脑科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期103-109,共7页
目的探讨ZNF804A基因三个多态性位点与精神分裂症认知功能障碍的关系。方法采用聚合酶链反应技术(PCR)测定320名精神分裂症患者(病例组)和324名正常人(对照组)的ZNF804A基因rs1344706、rs12613195、rs1583048的基因型和等位基因分布频率... 目的探讨ZNF804A基因三个多态性位点与精神分裂症认知功能障碍的关系。方法采用聚合酶链反应技术(PCR)测定320名精神分裂症患者(病例组)和324名正常人(对照组)的ZNF804A基因rs1344706、rs12613195、rs1583048的基因型和等位基因分布频率,采用蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评定认知功能。结果(1)病例组rs1344706位点的基因分布(TT、TG、GG基因型频率分别为20.3%、50.0%、29.7%)与对照组(TT、TG、GG基因型频率分别为13.7%、51.2%、35.1%)比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中在rs1344706位点和rs12613195位点上存在家系传递不平衡。(2)病例组的MoCA评分低于对照组(P<0.05),且病例组MoCA评分低于26分。(3)携带rs1344706位点三种基因型患者的MoCA总分(F=202.49,P<0.05)和不同时间评分(F=53.34,P<0.05)的比较差异均有统计学意义,且基因型和时间的交互作用差异具有统计学意义(F=3.88,P<0.05),其中携带T/T基因型患者MoCA总分最低。(4)携带rs12613195位点三种基因型患者的MoCA总分(F=367.78,P<0.05)和不同时间评分(F=27.35,P<0.05)的比较差异有统计学意义,其中携带C/C基因型患者MoCA总分最低,但基因型和时间的交互作用差异无统计学意义(P>0.05)。(5)rs1344706对认知功能的影响比rs12613195大。(6)携带rs1344706和rs12613195位点的患者MoCA评分逐年下降。结论 ZNF804A基因rs1344706、rs12613195与精神分裂症及认知功能障碍可能存在关联,且rs1344706T和rs12613195C可能是引起精神分裂症发病和认知功能障碍的风险因子。携带rs1344706位点的患者认知功能损害较为明显且随病程延长而加重。rs1583048位点可能与精神分裂症发病和认知功能障碍无关。 展开更多
关键词 精神分裂症 锌指蛋白804A基因 基因多态性 认知功能
多聚半乳糖醛酸基因在果树中的研究进展
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作者 葛廷 黄雪 谢让金 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1075-1088,共14页
多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)由多基因家族成员编码,对细胞壁果胶的降解起着重要作用,主要参与植物生长发育与逆境响应过程。基于全基因组序列,在果树如苹果(Malus pumila)、桃(Prunus persica)中,鉴定出了大量PG基因新成员... 多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)由多基因家族成员编码,对细胞壁果胶的降解起着重要作用,主要参与植物生长发育与逆境响应过程。基于全基因组序列,在果树如苹果(Malus pumila)、桃(Prunus persica)中,鉴定出了大量PG基因新成员,并发现其中某些成员分别参与了果实成熟软化、器官脱落、果树抗病等相关生物过程。尽管近年对果树PG的研究取得了巨大进展,但鲜见相关综述。据此,本文从PG基因结构、转录调控及其在果树中的生物功能等方面进行了综述,旨在为进一步阐明PG在果树中的生物学功能提供有用信息。 展开更多
关键词 果树 多聚半乳糖醛酸酶 细胞壁 基因功能
大豆WRKY转录因子及其生物学功能研究进展
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作者 李换丽 雷佳 +2 位作者 吴霞 王新胜 马燕斌 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期813-820,共8页
WRKY转录因子在植物的逆境胁迫和生长发育中起着关键作用。目前关于WRKY转录因子的功能研究,已经成为植物生物学领域研究的热点。本文阐述了大豆WRKY家族转录因子的生物学功能,同时对目前大豆在各种逆境胁迫和生长发育中相关应答基因进... WRKY转录因子在植物的逆境胁迫和生长发育中起着关键作用。目前关于WRKY转录因子的功能研究,已经成为植物生物学领域研究的热点。本文阐述了大豆WRKY家族转录因子的生物学功能,同时对目前大豆在各种逆境胁迫和生长发育中相关应答基因进行归类和分析,结果有助于大豆WRKY基因家族的挖掘和功能研究,为后续大豆作物遗传改良提供一定的分子依据,同时对新抗逆材料的研究以及创造新种质具有现实意义。 展开更多
关键词 大豆 WRKY转录因子 逆境胁迫 基因功能
墨兰‘达摩’原叶绿素酸酯氧化还原酶基因CsPORB功能的初步研究 预览
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作者 梁迪 杨凤玺 +1 位作者 叶庆生 朱根发 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期285-293,共9页
为了解墨兰‘达摩’(Cymbidium sinense‘Dharma’)的POR基因功能,从其嫩叶中克隆得到CsPORB基因。CsPORB的开放阅读框长度为1200bp,编码399个氨基酸,CsPORB分子量为43.13kDa,理论等电点9.30;CsPORB与其他物种的POR蛋白序列高度同源,在... 为了解墨兰‘达摩’(Cymbidium sinense‘Dharma’)的POR基因功能,从其嫩叶中克隆得到CsPORB基因。CsPORB的开放阅读框长度为1200bp,编码399个氨基酸,CsPORB分子量为43.13kDa,理论等电点9.30;CsPORB与其他物种的POR蛋白序列高度同源,在进化关系上较为保守;qRT-PCR表达分析表明,CsPORB在墨兰不同发育阶段和不同组织中的表达有明显差异,其集中于生长旺盛的嫩叶中表达。经高表达转基因表型验证,35S:CsPORB转拟南芥(Arabidopsis thaliana)植株中PORB及其下游叶绿素合成代谢酶活性显著提高,叶绿素含量增加,尤其在黑暗处理1周后,35S:CsPORB转基因植株仍表现持绿表型。因此,CsPORB基因可能在墨兰‘达摩’叶绿素合成代谢中发挥重要作用。 展开更多
关键词 墨兰 叶绿素 CsPORB 基因功能
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集胞藻Synechocystis sp.PCC 6803 slr1501的克隆及原核表达分析 预览
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作者 张燕 岳寿松 +3 位作者 陈高 游银伟 钟怀荣 于金慧 《山东农业科学》 2019年第7期1-4,16共5页
组蛋白乙酰基转移酶上调表达与抗逆性有一定相关性。集胞藻Synechocystis sp.PCC 6803 Slr1501是一个未知蛋白,预测其属于组蛋白乙酰基转移酶GNAT家族N-乙酰基转移酶。为了进一步明确slr1501基因功能,本研究从集胞藻6803中克隆slr1501基... 组蛋白乙酰基转移酶上调表达与抗逆性有一定相关性。集胞藻Synechocystis sp.PCC 6803 Slr1501是一个未知蛋白,预测其属于组蛋白乙酰基转移酶GNAT家族N-乙酰基转移酶。为了进一步明确slr1501基因功能,本研究从集胞藻6803中克隆slr1501基因,成功构建了pET-28a(+)-slr1501原核表达载体,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行分析。经1 mmol/L IPTG诱导2 h后Slr1501蛋白成功表达,表达量随诱导时间的延长而增加,且主要以包涵体形式表达。Western blot检测结果显示Slr1501重组蛋白特异性表达。本试验结果为进一步研究该基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 集胞藻6803 乙酰基转移酶 slr1501 原核表达 基因功能
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矮牵牛RCW基因的克隆及功能分析
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作者 袁欣 符真珠 +8 位作者 王利民 张晶 董晓宇 张泰然 高杰 蒋卉 王慧娟 李艳敏 张和臣 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期40-45,共6页
花色是植物的重要性状,其形成受多种因素影响。为了进一步解析矮牵牛花瓣呈色的分子机制,我们以生物信息分析、基因克隆、基因表达分析、基因沉默等技术,在矮牵牛中克隆和鉴定了一个影响花瓣呈色的基因RCW。不同矮牵牛组织中进行表达分... 花色是植物的重要性状,其形成受多种因素影响。为了进一步解析矮牵牛花瓣呈色的分子机制,我们以生物信息分析、基因克隆、基因表达分析、基因沉默等技术,在矮牵牛中克隆和鉴定了一个影响花瓣呈色的基因RCW。不同矮牵牛组织中进行表达分析表明,该基因在雄蕊、雌蕊、花瓣、叶片、根、茎、萼片中都表达,但是在花瓣中的表达随着花瓣发育逐渐增强;并且受到AN1、AN11、PH3等转录因子的调控。在矮牵牛品种M1×V30中进行RNAi沉默RCW基因的表达,其花瓣中的pH值与对照相比明显降低,花瓣呈现更深的紫色。对RCW编码的蛋白进行亚细胞定位发现其位于内质网、高尔基的膜系统上,表明其可能参与pH相关蛋白的转运过程。因此,RCW基因在矮牵牛花瓣细胞中的功能,主要是通过参与pH相关蛋白的转运,调控花瓣液泡中的pH环境,从而影响花瓣的呈色过程。本研究为全面揭示矮牵牛花瓣呈色的分子机制提供了重要依据,并为今后通过分子育种手段改变植物花色提供了理论基础。 展开更多
关键词 转录因子 基因功能 矮牵牛 呈色
ADRB2、GLCCI1、FCER2基因多态性与小儿哮喘治疗效果以及患儿肺功能的关系 预览
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作者 叶冬梅 李明 张泉 《当代医学》 2019年第24期11-15,共5页
目的探讨哮喘患儿ADRB2、GLCCI1、FCER2基因多态性与小儿哮喘治疗效果以及肺功能检测结果的关系。方法收集2016年11月至2018年6月期间本院收治的哮喘患儿为研究对象,跟踪随访其治疗效果以及最新一次的肺功能检测结果,并按照相关定义分... 目的探讨哮喘患儿ADRB2、GLCCI1、FCER2基因多态性与小儿哮喘治疗效果以及肺功能检测结果的关系。方法收集2016年11月至2018年6月期间本院收治的哮喘患儿为研究对象,跟踪随访其治疗效果以及最新一次的肺功能检测结果,并按照相关定义分为不同的临床转归组,比较各目标SNP基因型在组间分布的差异。结果rs1042713位点在各遗传模型下基因型的分布差异均无统计学意义;rs37973位点,在加性模型以及显性模型下,不同治疗结局间基因型的分布差异有统计学意义(P<0.05),加性模型下,每当有一个等位基因发生突变,治疗效果不良反应发生率将变为原来的11.8倍,显性模型下GG基因型的患儿发生治疗结果不良的风险是GA以及AA基因型患儿的18.20倍;rs28364072位点,加性模型与隐性模型下不同治疗结局间基因型的分布差异均有统计学意义,加性模型下每当有一个等位基因发生突变,其治疗效果不良反应发生率将变为原来的0.15倍。rs1042713位点GG基因型的患者发生肺功能异常的风险仅为GA与AA基因型的0.32倍,rs37973位点基因型在不同遗传模型下与不同肺功能检测结果患者间分布差异无统计学意义。rs28364072位点基因型在加性模型、显性模型下目标SNP的各基因型在不同肺功能检测结果的患者间分布差异具有统计学意义,在加性模型下,每当有一个等位基因发生突变,其肺功能异常的发生风险将变为原来的12.6倍。结论GLCCI1基因、FCER2基因多态性与哮喘患儿药物治疗效果相关,ADRB2、FCER2基因多态性与哮喘患儿肺功能转归有关。 展开更多
关键词 小儿哮喘 基因多态性 治疗效果 肺功能
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slnN基因在盐霉素生物合成中的调控功能分析
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作者 朱振洪 李函 李永泉 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期632-641,共10页
【目的】研究盐霉素生物合成基因簇上游潜在调控基因slnN的功能。【方法】本实验利用遗传操作技术,分别对白色链霉菌出发菌株Streptomyces albus BK3-25中的slnN基因进行敲除和过表达,然后利用抑菌圈实验和发酵实验,分别检测不同衍生菌... 【目的】研究盐霉素生物合成基因簇上游潜在调控基因slnN的功能。【方法】本实验利用遗传操作技术,分别对白色链霉菌出发菌株Streptomyces albus BK3-25中的slnN基因进行敲除和过表达,然后利用抑菌圈实验和发酵实验,分别检测不同衍生菌株中盐霉素生物合成产量的变化。同时利用qRT-PCR分析衍生菌株与原始出发菌株之间的结构基因表达差异。【结果】结果表明在slnN基因缺失株(slnNDM)中,盐霉素的表达水平提高了35%左右;而在slnN基因过表达株(slnNOE)中,盐霉素产量下降达43%左右。qRT-PCR分析进一步发现slnN基因缺失,会引起slnO和slnA1基因的上调;而slnN基因过表达后,一方面会下调slnO与slnA1基因的表达,另一方面引起slnT1、slnF基因上调。【结论】本研究证实slnN基因对盐霉素的生物合成具有明显的负调控作用,其机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 白色链霉菌 盐霉素 生物合成 slnN基因 调控功能
RNAi在害虫防治中应用的重要进展及存在问题 预览
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作者 胡少茹 关若冰 +1 位作者 李海超 苗雪霞 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期506-515,共10页
RNAi是目前最有可能应用于害虫绿色防控的新技术。2017年6月,美国环境署(EPA)批准了国际上第一例表达昆虫双链RNA(dsRNA)的抗虫转基因玉米MON87411,掀起了利用RNAi技术进行害虫防治研究新的热潮。但是,目前RNAi在害虫防治中的应用还存... RNAi是目前最有可能应用于害虫绿色防控的新技术。2017年6月,美国环境署(EPA)批准了国际上第一例表达昆虫双链RNA(dsRNA)的抗虫转基因玉米MON87411,掀起了利用RNAi技术进行害虫防治研究新的热潮。但是,目前RNAi在害虫防治中的应用还存在一些问题,例如有效靶标基因筛选和应用策略,鳞翅目昆虫对RNAi的敏感性以及双链RNA在环境中的稳定性等等。本文系统总结了RNA干扰现象发现20年来,该技术在害虫防治领域的研究及应用概况,并对RNAi技术应用的可行性、应用方法、存在问题和目前的一些解决办法进行了比较详细的综述。通过对近期研究结果的综合分析发现,dsRNA进入某些鳞翅目昆虫中肠或血淋巴后,被相关核酸酶降解可能是其RNAi效率较低的首要原因。通过对dsRNA进行脂质体修饰,纳米粒子包埋可以在一定程度上解决dsRNA降解的问题,进而提高RNAi效率。 展开更多
关键词 RNA干扰 害虫防治 基因功能 双链RNA 脂质体 纳米粒子
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