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内皮祖细胞条件培养基对间充质干细胞向内皮细胞分化的影响 预览
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作者 韩欢欢 郭黎姣 +5 位作者 杨雄峰 周青 姜慧娇 王小艺 陈雪玲 吴向未 《石河子大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第2期229-236,共8页
目的探讨体外小鼠内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)条件培养基(CM)对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向内皮细胞(endothelial cells,ECs)分化的影响。方法全骨髓贴壁法和差速贴壁法提取培养MSCs和EPCs,流式细... 目的探讨体外小鼠内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)条件培养基(CM)对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向内皮细胞(endothelial cells,ECs)分化的影响。方法全骨髓贴壁法和差速贴壁法提取培养MSCs和EPCs,流式细胞术检测MSCs和EPCs表面标记物,双荧光染色和体外成管实验对EPCs进行功能鉴定。将MSCs分为0%EPCs-CM组(对照组)、25%EPCs-CM组和50%EPCs-CM组。qRT-PCR检测各组CD31、vWF、eNOS的mRNA表达水平。体外成管实验检测各组细胞的体外成管能力;免疫荧光检测各组MSCs CD31、CD34表达情况;对各组上清中的NO进行检测。结果流式细胞术结果显示,第3代MSCs高表达Sca-1,低表达CD34、CD11b;EPCs高表达CD34、CD133和VEGFR2,可吞噬Dil-AC-LDL和结合UEA-1。在基质胶上可形成管腔样结构。qRT-PCR显示3周时50%EPCs-CM组CD31、vWF、eNOS表达(2.28±0.25, 1.76±0.71,8.27±1.65),较对照组显著升高( P <0.05)。50%EPCs-CM组MSCs可体外形成管腔样结构;免疫荧光显示50%EPCs-CM组MSCs CD31和CD34的表达明显高于对照组。对照组细胞与实验组细胞上清液中NO的含量(8.81+3.41,20.93±9.47)μmol/L,差异显著( t =3.96, P <0.05)。结论 EPCs-CM能提高MSCs体外成管能力,并促进MSCs向ECs分化。 展开更多
关键词 内皮祖细胞 间充质干细胞 条件培养基 分化 内皮细胞
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血管外膜细胞生物学特性及对造血干/祖细胞的支持作用 预览
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作者 杨小萍 郑波 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第29期4728-4734,共7页
背景:血管外膜细胞广泛分布于全身的毛细血管和微血管的管壁,是血管周围微环境的重要核心组成成分。它们可以为其他细胞的生长繁殖提供支持作用以及调节机体的免疫状态和免疫防御等。近年来越来越多研究显示,血管外膜细胞是间充质干细... 背景:血管外膜细胞广泛分布于全身的毛细血管和微血管的管壁,是血管周围微环境的重要核心组成成分。它们可以为其他细胞的生长繁殖提供支持作用以及调节机体的免疫状态和免疫防御等。近年来越来越多研究显示,血管外膜细胞是间充质干细胞的前体细胞,其通过细胞接触或旁分泌效应调节造血干细胞的行为并支持造血。目的:就血管外膜细胞的分布、功能以及对造血干/祖细胞的支持作用作一综述。方法:以“pericyte,perivascular cell,hematopoietic stem/progenitor cells”以及“血管外膜细胞,间充质干细胞,周细胞,造血干/祖细胞”为检索词,检索PubMed数据库、CNKI数据库及万方数据库2008至2018年间相关文献,并纳入64篇文献进行综述。结果与结论:血管外膜细胞是间充质干细胞的前体细胞,具有与间充质干细胞相似的生物学特性,表达间充质干细胞的表面标记物,并具有向成骨、成脂及成软骨细胞等分化的潜能,且可调节造血干细胞行为并支持造血。 展开更多
关键词 血管外膜细胞 造血干/祖细胞 间充质干细胞 周细胞 内皮细胞 造血 国家自然科学基金
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内皮细胞蛋白C受体在造血干细胞中作用的研究进展
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作者 王夕妍 杨仁池 《国际输血及血液学杂志》 CAS 2019年第3期259-263,共5页
内皮细胞蛋白C受体(EPCR)是蛋白C抗凝系统成分之一,在抗凝调节、细胞保护等方面具有重要意义。研究发现,EPCR是造血干细胞(HSC)的表面标志物之一,可被用于HSC的分选、纯化。EPCR可通过蛋白酶活化受体(PAR)1信号通路等途径,参与HSC及其... 内皮细胞蛋白C受体(EPCR)是蛋白C抗凝系统成分之一,在抗凝调节、细胞保护等方面具有重要意义。研究发现,EPCR是造血干细胞(HSC)的表面标志物之一,可被用于HSC的分选、纯化。EPCR可通过蛋白酶活化受体(PAR)1信号通路等途径,参与HSC及其微环境的调节,介导HSC在骨髓中的保留和造血功能重建。笔者拟就EPCR在HSC分选及纯化中的应用,以及EPCR对于HSC的调节作用及其相关机制的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 内皮细胞 造血干细胞 蛋白酶活化受体1 内皮细胞蛋白C受体 蛋白C 活化蛋白C
二巯基丁二酸修饰的Fe3O4纳米颗粒对人血管内皮细胞的作用研究 预览
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作者 杜丽帆 张宇 +4 位作者 杨爱云 温涛 刘健 孟洁 许海燕 《北京生物医学工程》 2019年第3期221-226,共6页
目的研究二巯基丁二酸修饰的Fe3O4纳米颗粒(dimercaptosuccinic acid-magnetite nanoparticles,DMSA-Fe3O4)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)功能的影响。方法利用动态光散射法表征DMSA-Fe3O4的粒径... 目的研究二巯基丁二酸修饰的Fe3O4纳米颗粒(dimercaptosuccinic acid-magnetite nanoparticles,DMSA-Fe3O4)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)功能的影响。方法利用动态光散射法表征DMSA-Fe3O4的粒径及表面电荷;采用普鲁士蓝染色、邻二氮菲铁定量和透射电镜观察方法研究HUVECs对DMSA-Fe3O4的摄取规律;利用细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测DMSA-Fe3O4对内皮细胞活性的影响;通过酶联免疫吸附试剂盒测定DMSA-Fe3O4对内皮细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)分泌量的影响。结果HUVECs能够大量吞噬DMSA-Fe3O4,其吞噬量具有孵育时间和剂量依赖性;短时间内所测剂量范围DMSA-Fe3O4对细胞活性无显著影响,但长时间高剂量条件使细胞活性明显降低。此外,在高剂量DMSA-Fe3O4暴露下(200μg/mL),内皮细胞分泌VEGF的量约为对照组的3倍。结论DMSA-Fe3O4易于被HUVECs吞噬;高浓度DMSA-Fe3O4与HUVECs长时间培养使细胞活性降低,并刺激内皮细胞分泌VEGF。 展开更多
关键词 FE3O4纳米颗粒 内皮细胞 吞噬 血管内皮生长因子
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血液透析治疗对血中microRNA-92a的影响 预览
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作者 王蕊 尚粉青 +3 位作者 叶玉兰 惠玲玲 郭瑄 王慧 《临床肾脏病杂志》 2019年第4期236-239,260共5页
目的探讨血液透析治疗对血清中microRNA-92a的去除效果及其损伤内皮细胞功能的机制。方法收集西安高新医院长期透析治疗的慢性肾病患者,分别收集透析前、透析后6 h左右血清,测定其中miR-92a含量变化,同时测定BUN、Scr及hsCRP水平变化。... 目的探讨血液透析治疗对血清中microRNA-92a的去除效果及其损伤内皮细胞功能的机制。方法收集西安高新医院长期透析治疗的慢性肾病患者,分别收集透析前、透析后6 h左右血清,测定其中miR-92a含量变化,同时测定BUN、Scr及hsCRP水平变化。培养的内皮细胞给予慢性肾脏病患者透析前后血清刺激,观察miR-92a及其靶基因eNOS表达变化。结果透析前后血清中miR-92a含量(1.48±0.24 vs 1.20±0.18,P=0.356)及hsCRP(7.6±2.4 vs 7.5±3.1,P=0.862)水平无显著差异。而透析治疗可显著降低血清中BUN(26.4±8.8 vs 8.3±2.3,P<0.01)、Scr(926.3±178.1 vs 312.3±141.2,P<0.01)水平。进一步体外细胞实验RT-PCR检测证实与健康人血清相比,慢性肾脏病患者透析前后血清均可促使培养的脐静脉内皮细胞miR-92a表达增加(P<0.01),RT-PCR及Western Blot检测证实其靶基因eNOS表达均显著降低(P<0.01),内皮细胞功能受损。结论血液透析治疗前后血清中miR-92a下降不明显,miR-92a可致内皮细胞eNOS表达减少,这可能是透析治疗虽然能维持肾脏功能但是无法避免其心血管并发症发生的部分原因。 展开更多
关键词 血液透析 microRNA-92a 内皮细胞 高敏C反应蛋白 内皮型一氧化氮合酶
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长链非编码RNA Beta2.7通过上调eNOS/NO通路影响内皮细胞功能 预览
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作者 叶楠 龚辉 王昕 《复旦学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期459-465,共7页
目的探索在内皮细胞中调控内皮型—氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)表达及其磷酸化的长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)分子及其对内皮细胞功能的影响。方法培养原代小鼠主动脉内皮细胞,构建LncRNA-Beta2.... 目的探索在内皮细胞中调控内皮型—氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)表达及其磷酸化的长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)分子及其对内皮细胞功能的影响。方法培养原代小鼠主动脉内皮细胞,构建LncRNA-Beta2.7过表达质粒、LincRNA-p21干扰质粒、LncRNA-ANRIL干扰质粒、LncRNA-H19过表达质粒,通过慢病毒载体实现稳定转染。稳定转染后,收集内皮细胞及其培养基上清,PCR检测eNOSmRNA表达水平,Western blot检测eNOS、p-eNOS表达水平,还原比色法检测细胞内及培养基上清的NO含量;稳定转染的内皮细胞通过划痕实验和小管形成实验验证LncRNA对内皮细胞功能的影响。结果过表达LncRNA-Beta2.7上调内皮细胞eNOSmRNA与蛋白的表达水平,且p-eNOS/eNOS比值保持不变;过表达LncRNA-Beta2.7后,内皮细胞NO分泌增多,其划痕愈合速率以及在形成血管过程中的分支数和小管总长度均显著升高。而其余3种LncRNA的作用并不显著。结论LncRNA-Beta2.7在内皮细胞中通过上调eNOS的表达激活eNOS/NO信号通路,增强血管内皮功能。 展开更多
关键词 内皮型-氧化氮合酶(eNOS) 长链非编码RNA Beta2.7(LncRNA-Beta2.7) 内皮细胞
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内皮间质转分化在心肌纤维化中的研究进展 预览
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作者 尹玉洁 张倩 +1 位作者 旷湘楠 贾振华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期12-16,共5页
内皮间质转分化是内皮细胞在多种因素作用下紧密连接丢失,逐步丧失内皮特异性标记物表达,并获得间质细胞或肌成纤维细胞表型表达及其运动和收缩特性的一种生物过程。不仅在心脏和血管生长发育中发挥重要作用,也参与了心、肺、肾等重要... 内皮间质转分化是内皮细胞在多种因素作用下紧密连接丢失,逐步丧失内皮特异性标记物表达,并获得间质细胞或肌成纤维细胞表型表达及其运动和收缩特性的一种生物过程。不仅在心脏和血管生长发育中发挥重要作用,也参与了心、肺、肾等重要器官纤维化变性过程,可能成为慢性心力衰竭心肌纤维化防治的关键病理环节。该文将对内皮间质转分化在心肌纤维化中的作用及研究进展进行综述。 展开更多
关键词 慢性心力衰竭 心肌纤维化 内皮间质转分化 内皮细胞 信号通路 转化生长因子Β
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回转模拟失重对共培养体系血管内皮细胞Notch3信号通路相关蛋白表达的影响 预览
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作者 潘益凯 李程飞 +6 位作者 孟欣 高原 石菲 赵疆东 杨长斌 孙喜庆 王永春 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第3期269-273,278共6页
目的:探讨模拟失重条件下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)和人主动脉平滑肌细胞(HASMCs)共培养的细胞模型体系中HUVECs的Notch3信号通路相关蛋白表达。方法:分别取HUVECs和HASMCs,分为正常重力组和模拟失重组,共培养48h时,观察HUVECs形态;提... 目的:探讨模拟失重条件下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)和人主动脉平滑肌细胞(HASMCs)共培养的细胞模型体系中HUVECs的Notch3信号通路相关蛋白表达。方法:分别取HUVECs和HASMCs,分为正常重力组和模拟失重组,共培养48h时,观察HUVECs形态;提取两组HUVECs细胞的总蛋白,采用Westernblot技术检测Notch3、Jagged1、c-Src和RBP-Jκ蛋白表达。结果:共培养48h时,正常重力组HUVECs细胞呈现为多角形、以“铺路石”样紧密排列,模拟失重组HUVECs则多为圆形、边角变钝;与正常重力组比较,模拟失重组HUVECs中Notch通路相关蛋白Notch3、Jagged1、c-Src及RBP-Jκ的表达显著降低(P<0.05)。结论:模拟失重可引起共培养模型中HUVECs细胞Jagged1和Notch3的蛋白表达降低,其机制可能与c-Src表达降低有关。 展开更多
关键词 失重模拟 内皮细胞 平滑肌细胞 共培养 NOTCH3
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腺苷激酶小干扰RNA修饰的角膜内皮细胞诱导调节性T细胞的增生和分泌 预览
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作者 张万红 焦惠英 +1 位作者 阮燕飞 刘元真 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期337-341,共5页
目的探讨腺苷激酶(ADK)小干扰RNA(siRNA)修饰的角膜内皮细胞诱导调节性T细胞(Treg)增生和分泌的作用。方法取第3~5代人角膜内皮细胞,实验分为转染组和未转染组,转染组采用Lipofectamine■ 3000将FAM-ADK siRNA转染进入角膜内皮细胞,采... 目的探讨腺苷激酶(ADK)小干扰RNA(siRNA)修饰的角膜内皮细胞诱导调节性T细胞(Treg)增生和分泌的作用。方法取第3~5代人角膜内皮细胞,实验分为转染组和未转染组,转染组采用Lipofectamine■ 3000将FAM-ADK siRNA转染进入角膜内皮细胞,采用高效液相色谱法检测各组中腺苷的质量浓度。实验分为对照组[转染对照siRNA]、雷帕霉素组(转染对照siRNA后培养液中加入10 ng/ml雷帕霉素)和ADK siRNA组(转染ADK siRNA后培养液中加入10 ng/ml雷帕霉素),采用TUNEL染色检测细胞凋亡比例;采用流式细胞术检测内皮细胞表面细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)和E-选择素的表达。实验分为单独培养组(单纯淋巴细胞培养)、共培养组(淋巴细胞与角膜内皮细胞共培养)和ADK siRNA组(淋巴细胞与ADK siRNA转染的角膜内皮细胞共培养),流式细胞术检测各组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的比例;ELISA法检测各组上清液中白细胞介素-10(IL-10)和转化生长因子-β(TGF-β)的质量浓度。结果流式细胞术检测结果显示,95.1%的角膜内皮细胞表达siRNA,转染组上清液中腺苷的质量浓度为(38.020±6.658)ng/ml,较对照组的(1.663±0.581)ng/ml明显升高,差异有统计学意义(t=5.437,P=0.006)。TUNEL染色结果显示,雷帕霉素组角膜内皮细胞平均凋亡率较对照组明显升高,ADK siRNA组角膜内皮细胞平均凋亡率较雷帕霉素组明显降低,差异均有统计学意义(t=3.763,P=0.020;t=4.405,P=0.012)。流式细胞术检测结果显示,ADK siRNA组ICAM-1、VCAM-1和E-选择素的平均荧光强度分别为4.060±1.179、3.600±1.234和5.223±1.734,明显弱于对照组的11.600±2.427、11.030±2.291和24.270±4.332,差异均有统计学意义(t=2.794,P=0.049;t=2.857,P=0.046;t=4.081,P=0.015)。单独培养组、共培养组和ADK siRNA组淋巴细胞中Treg细胞比例总体比较,差异有统计学意义(F=12.890,P=0.007),其中ADK siRNA组淋巴细胞中Treg细胞的比例较共� 展开更多
关键词 腺苷激酶 角膜移植 内皮细胞 调节性T细胞
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氧化应激损伤后的内皮细胞对瓣膜间质细胞生长的调控 预览
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作者 吴昊 李宁 +5 位作者 龚德军 夏翠萍 李芹 陶婧 刘晓红 徐志云 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第5期1144-1146,共3页
目的建立过氧化氢介导的瓣膜内皮细胞(ECs)氧化应激(OS)模型,探讨OS作用下ECs和间质细胞(VICs)之间的相互作用关系。方法不同浓度过氧化氢(H2O2)处理ECs不同时间后,收集OS-ECs上清;上清作用于VICs,通过检测细胞增殖、凋亡、分化及存活率... 目的建立过氧化氢介导的瓣膜内皮细胞(ECs)氧化应激(OS)模型,探讨OS作用下ECs和间质细胞(VICs)之间的相互作用关系。方法不同浓度过氧化氢(H2O2)处理ECs不同时间后,收集OS-ECs上清;上清作用于VICs,通过检测细胞增殖、凋亡、分化及存活率,验证OS-ECs上清对VICs生长有一定影响。结果随着处理时间的延长,ECs和VICs均有不同程度受损。其中,50μmol/L H2O2处理ECs,OS-ECs上清可稳定VICs生长状态。结论 50μmol/L H2O2处理ECs并收集上清,作用于VICs是建立OS细胞模型的最佳条件。ECs对VICs有一定程度的保护作用。 展开更多
关键词 氧化应激 内皮细胞 间质细胞
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过表达微小RNA-199b维持人诱导多能干细胞分化的内皮细胞表型的研究
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作者 钱昕 倪其泓 +6 位作者 邓昊昱 杨硕菲 王韦仑 陈佳佺 路灿 王晗 张岚 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期997-1000,共4页
目的过表达人诱导多能干细胞分化的内皮细胞(hiPSC-EC)中微小RNA(miRNA,miR)-199b-5p,探讨miR-199b-5p对hiPSC-EC传代过程中hiPSC-EC表型转换的影响。方法利用流式细胞术鉴定hiPSC-EC第1代(P1)、第5代(P5)和第10代(P10)内皮细胞表面标志... 目的过表达人诱导多能干细胞分化的内皮细胞(hiPSC-EC)中微小RNA(miRNA,miR)-199b-5p,探讨miR-199b-5p对hiPSC-EC传代过程中hiPSC-EC表型转换的影响。方法利用流式细胞术鉴定hiPSC-EC第1代(P1)、第5代(P5)和第10代(P10)内皮细胞表面标志CD31和CD34,将hiPSC-EC分为两组,利用慢病毒分别将过表达miR-199b-5p质粒和空白对照质粒转染hiPSC-EC,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测过表达miR-199b-5p组和空白对照组中miR-199b-5p的表达水平,流式细胞技术鉴定hiPSC-EC过表达组和空白对照组P10细胞表面标志CD31和CD34。应用GraphPadPrism7统计软件分析,数据以均值±标准差(Mean±SD)表示,采用t检验分析过表达组和对照组miR-199b-5p的转录水平和成管数目。结果流式细胞技术检测发现hiPSC-EC在P1~P10传代过程中内皮细胞表面标志CD31和CD34逐渐下降,P188.69%CD31^+/69.57%CD34^+,P568.84%CD31^+/36.90%CD34^+,P1041.66%CD31^+/19.29%CD34^+,FQ-PCR显示miR-199b-5p在hiPSC-ECP1~P10传代过程中显著下降(F=18.190,P<0.01),差异有统计学意义。利用慢病毒载体实现hiPSC-EC过表达miR-199b-5p后,hiPSC-EC在传代过程中内皮细胞表型转换显著被抑制,miR-199b-5p过表达组P1074.33%CD31^+/58.56%CD34^+,对照组P1046.30%CD31^+/38.07%CD34^+。结论miR-199b-5p在hiPSC-EC传代过程中显著下降,miR-199b-5p过表达能够维持传代过程中hiPSC-EC的表型。 展开更多
关键词 微小RNA-199b 诱导多能干细胞 内皮细胞 表型转换
4',5,7-三羟基异黄酮对LPS同时诱导的THP-1细胞向HAEC细胞迁移的影响 预览
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作者 周雪冰 《基层医学论坛》 2019年第17期2374-2376,共3页
目的探讨4',5,7-三羟基异黄酮对脂多糖(LPS)同时诱导的人单核细胞(THP-1)向人主动脉内皮细胞(HAEC)迁移能力的影响。方法用不同浓度4',5,7-三羟基异黄酮预处理两种细胞30min,然后用LPS同时作用两种细胞4h,Transwell迁移实验检测... 目的探讨4',5,7-三羟基异黄酮对脂多糖(LPS)同时诱导的人单核细胞(THP-1)向人主动脉内皮细胞(HAEC)迁移能力的影响。方法用不同浓度4',5,7-三羟基异黄酮预处理两种细胞30min,然后用LPS同时作用两种细胞4h,Transwell迁移实验检测THP-1细胞向HAEC细胞的迁移能力;将THP-1细胞加入到HAEC细胞中共培养1h,用酶联免疫吸附法检测共培养细胞培养液上清中MCP-1蛋白的浓度。结果加入不同浓度4',5,7-三羟基异黄酮预处理两种细胞30min后,THP-1细胞的迁移数量及共培养细胞上清液中MCP-1含量和细胞MCP-1mRNA的表达水平与LPS组比较均呈浓度依赖性减少(P<0.01)。结论LPS可诱导THP-1细胞与HAEC细胞迁移且促进MCP-1表达;4',5,7-三羟基异黄酮预处理后可明显抑制LPS诱导的THP-1细胞向HAEC细胞的迁移,并明显降低THP-1细胞与HAEC细胞MCP-1的表达。 展开更多
关键词 4' 5 7-三羟基异黄酮 脂多糖 人单核细胞 人主动脉内皮细胞 迁移
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能量代谢异常与动脉粥样硬化
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作者 彭文夕 蔡国鼎 +2 位作者 陈金娜 吴鹏 危当恒 《生命的化学》 CAS CSCD 2019年第2期273-278,共6页
能量代谢即细胞对供能物质的利用和ATP生成的过程。动脉粥样硬化(atherosclerosis, As)为慢性炎症性病理过程,近年来的研究表明,能量代谢异常影响内皮细胞功能、平滑肌细胞增殖、巨噬细胞的极化等生物学过程,进一步影响As病变进程。深... 能量代谢即细胞对供能物质的利用和ATP生成的过程。动脉粥样硬化(atherosclerosis, As)为慢性炎症性病理过程,近年来的研究表明,能量代谢异常影响内皮细胞功能、平滑肌细胞增殖、巨噬细胞的极化等生物学过程,进一步影响As病变进程。深入探讨能量代谢异常与As病变之间的关系及其调控机制,将可能为As的有效防治提供新的靶点和治疗策略。 展开更多
关键词 代谢异常 线粒体 动脉粥样硬化 内皮细胞 平滑肌细胞 巨噬细胞
体外培养乳牙牙髓干细胞向血管内皮细胞定向分化的实验研究 预览
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作者 刘琼 文军 +1 位作者 吴小明 钱虹 《中国现代医学杂志》 CAS 2019年第1期29-34,共6页
目的研究体外培养乳牙牙髓干细胞向血管内皮细胞的定向分化。方法选取南方医科大学口腔医院29例健康儿童的滞留乳牙,在4h内进行乳牙牙髓干细胞的原代提取。采用免疫磁珠分选法进行细胞分选,并对分选出的细胞进行特定的血管内皮细胞定向... 目的研究体外培养乳牙牙髓干细胞向血管内皮细胞的定向分化。方法选取南方医科大学口腔医院29例健康儿童的滞留乳牙,在4h内进行乳牙牙髓干细胞的原代提取。采用免疫磁珠分选法进行细胞分选,并对分选出的细胞进行特定的血管内皮细胞定向诱导。对乳牙牙髓干细胞及血管内皮细胞定向诱导后的细胞进行镜下形态观察、血管生成实验,以及免疫表型鉴定。结果镜下形态观察显示,经过血管内皮定向诱导的乳牙牙髓干细胞呈典型血管内皮细胞的形态特征;血管生成实验表明,经过血管内皮定向诱导的乳牙牙髓干细胞可呈现明显的血管样结构;免疫表型鉴定显示经过血管内皮定向诱导的乳牙牙髓干细胞血管内皮细胞表面抗原呈阳性。结论乳牙牙髓干细胞可定向分化为血管内皮细胞。 展开更多
关键词 干细胞 内皮细胞 细胞分化 血管生成实验 免疫表型
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TRPC、ORAI1和NCX三种钙调控蛋白在血管平滑肌细胞与血管内皮细胞中表达的差异 预览
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作者 季一楠 杨丽霞 +4 位作者 刘蓓 杨淑娟 林庆铿 杜贵芳 郭瑞威 《昆明医科大学学报》 CAS 2019年第2期13-17,共5页
目的 研究TRPC、ORAI1和NCX三种钙调控蛋白在血管平滑肌细胞、内皮细胞中表达的差异。方法 通过实时荧光RT-PCR和Western blot分别检测了TRPC(TRPC1、TRPC3、TRPC4、TRPC5和TRPC6)、ORAI1和NCX(NCX1和NCX2)钙调控蛋白在血管平滑肌细胞... 目的 研究TRPC、ORAI1和NCX三种钙调控蛋白在血管平滑肌细胞、内皮细胞中表达的差异。方法 通过实时荧光RT-PCR和Western blot分别检测了TRPC(TRPC1、TRPC3、TRPC4、TRPC5和TRPC6)、ORAI1和NCX(NCX1和NCX2)钙调控蛋白在血管平滑肌细胞与血管内皮细胞中的mRNA和蛋白表达水平。结果 TRPC6、ORAI1在血管内皮细胞中mRNA和蛋白表达水平均高于血管平滑肌细胞;TRPC4、TRPC5和NCX2在血管平滑肌细胞中的mRNA和蛋白表达水平均高于在血管内皮细胞,尤其是TRPC4、TRPC5在蛋白表达水平差异有统计学意义(P<0.01)。结论 通过差异性表达分析筛选出内皮细胞中高表达的TRPC6、ORAI1和平滑肌细胞中高表达的TRPC4、TRPC5,可能通过选择性钙通道蛋白的调控,从而抑制平滑肌细胞增殖和促进再内皮化,为动脉粥样硬化的预防和治疗、血管支架植入后再狭窄的发生发展提供理论依据。 展开更多
关键词 钙调控蛋白 内皮细胞 平滑肌细胞
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桃红四物汤干预外周血内皮祖细胞数量与功能增加的时间剂量效应 预览
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作者 王小斌 蒋红心 +3 位作者 屈长宏 吴冬梅 张荣生 徐斌 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第9期1354-1358,共5页
背景:近期研究表明,桃红四物汤能减轻血管内皮细胞的损伤和维持其正常的分泌功能,而内皮祖细胞对内皮损伤后的修复有促进作用,因而设想桃红四物汤可能通过改善内皮祖细胞的功能活性及增加其数量来保护内皮功能。目的:观察桃红四物汤对... 背景:近期研究表明,桃红四物汤能减轻血管内皮细胞的损伤和维持其正常的分泌功能,而内皮祖细胞对内皮损伤后的修复有促进作用,因而设想桃红四物汤可能通过改善内皮祖细胞的功能活性及增加其数量来保护内皮功能。目的:观察桃红四物汤对人外周血内皮祖细胞功能活性和数量的影响。方法:从健康人外周血中分离培养内皮祖细胞,将内皮祖细胞分为对照组和桃红四物汤低、中、高质量浓度组,在体外培养24 h以观察量效关系,同时桃红四物汤高质量浓度组培养6,12,24,48 h以观察时效关系。倒置相差显微镜下计数内皮祖细胞数量,通过MTT比色法、黏附能力和Boyden小室观察内皮祖细胞的增殖、黏附和迁移能力。结果与结论:①桃红四物汤干预组内皮祖细胞增殖、黏附和迁移能力明显高于对照组,并与质量浓度呈一定的量效关系,高质量浓度组最为显著(P<0.01);②桃红四物汤高质量浓度组内皮祖细胞增殖、黏附和迁移能力的增加呈时间依赖关系,干预24 h时最为显著(P<0.01);③结果表明,桃红四物汤可增加内皮祖细胞数量并改善其功能,高质量浓度干预24 h时效果最佳。 展开更多
关键词 内皮祖细胞 桃红四物汤 内皮祖细胞增殖 细胞迁移 细胞黏附 中草药 内皮细胞 细胞增殖 细胞粘附 细胞运动 组织工程
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miR-106b-5p在调节内皮细胞基因表达谱中的作用 预览
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作者 张静 李素芳 +1 位作者 陈红 宋俊贤 《北京大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期221-227,共7页
目的:评估miR-106b-5p对内皮细胞基因表达谱的影响。方法:对动脉粥样硬化组( n =9)及对照组( n =9)血浆中miRNAs表达谱进行筛查,采用共表达网络分别对两组样本全体miRNAs 的共表达模式进行分析。选取从两组网络中得到的共表达地位差异... 目的:评估miR-106b-5p对内皮细胞基因表达谱的影响。方法:对动脉粥样硬化组( n =9)及对照组( n =9)血浆中miRNAs表达谱进行筛查,采用共表达网络分别对两组样本全体miRNAs 的共表达模式进行分析。选取从两组网络中得到的共表达地位差异最为显著的miR-106b-5p进一步研究,通过转染miR-106b-5p mimics上调人脐静脉内皮细胞的miR-106b-5p表达水平,筛查转染后差异基因表达谱,并进一步通过日本京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)信号转导通路数据库对差异基因富集的信号通路进行分析。结果:动脉粥样硬化组患者血浆中miRNAs的共表达模式(140个节点,1 154条连接线)与对照组(140个节点,612条连接线)相比存在明显差异,在过表达miR-106b-5p后人脐静脉内皮细胞有746个基因水平发生了显著变化(组间差异倍数≥1.5,芯片错误发现率<0.01),主要包括磷脂酰肌醇-3激酶(phosphoinositide 3-kinase, PI3K )/蛋白激酶B(protein kinase B, PKB ,又称Akt)信号通路、哺乳动物雷帕霉素受体蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR )信号通路、转化生长因子-β(transforming growth factor-β, TGF-β)信号通路、酪氨酸激酶-信号转导及转录激活因子信号通路(janus kinase / signal transducer and activator of transcription, Jak-STAT )信号通路、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF )信号通路、toll样受体(toll-like receptor, TLR )信号通路、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF )信号通路等20个信号通路。结论:动脉粥样硬化患者血浆中miRNAs共表达模式发生了显著变化,其中共表达地位差异最为显著的miR-106b-5p可靶向调节血管内皮细胞多个信号通路。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 微RNAS 转录组 内皮细胞
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天然牛磺酸对肝硬化门静脉高压大鼠门静脉血流动力学及内皮细胞的影响 预览
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作者 文彬 赵晓芳 +4 位作者 陈然 杨义维 黎莹莹 梁健 邓鑫 《广西医学》 CAS 2019年第2期202-205,共4页
目的探讨天然牛磺酸对肝硬化门静脉高压(PHT)大鼠门静脉系统血流动力学及内皮细胞的影响。方法建立肝硬化PHT大鼠模型。将45只肝硬化PHT大鼠随机分为对照组、结合牛磺酸组(A组)及天然牛磺酸组(B组),每组15只。A组给予结合牛磺酸灌胃,B... 目的探讨天然牛磺酸对肝硬化门静脉高压(PHT)大鼠门静脉系统血流动力学及内皮细胞的影响。方法建立肝硬化PHT大鼠模型。将45只肝硬化PHT大鼠随机分为对照组、结合牛磺酸组(A组)及天然牛磺酸组(B组),每组15只。A组给予结合牛磺酸灌胃,B组给予天然牛磺酸灌胃,对照组给予等量0.9%氯化钠溶液灌胃。21d后,比较3组大鼠门静脉血流量(PVF)、门静脉压力(PVP)、门静脉阻力(PVR)、平均动脉压(MAP)以及肝脏血流灌注量(HPV)水平,并在超微电镜下观察门静脉内皮细胞超微结构。结果A组及B组PVP、PVR、PVF均低于对照组(均P<0.05);对照组、A组、B组MAP、HPV水平依次升高(P<0.05)。电镜下可见对照组门静脉内皮细胞变性或脱落,基底膜完整性遭破坏,A组及B组内皮细胞结构完整,B组基底膜正常。结论天然牛磺酸可减轻肝硬化门脉高压大鼠门静脉压力,改善效应内皮细胞的超微结构,且其效果优于结合牛磺酸。 展开更多
关键词 肝硬化 门静脉高压 天然牛磺酸 结合牛磺酸 血流动力学 内皮细胞 大鼠
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替米沙坦对同型半胱氨酸诱导内皮细胞炎症损伤及对p38MAPK通路的影响
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作者 吴刚 袁华兵 陈腊梅 《中国药师》 CAS 2019年第5期809-813,共5页
目的:探讨替米沙坦对同型半胱氨酸诱导内皮细胞炎症损伤及对p38MAPK通路的影响。方法:设MS^-1内皮细胞组(MS^-1内皮细胞)、同型半胱氨酸组(5 mg·L^-1同型半胱氨酸+MS^-1内皮细胞)、替米沙坦组(5 mg·L^-1同型半胱氨酸+50 mg... 目的:探讨替米沙坦对同型半胱氨酸诱导内皮细胞炎症损伤及对p38MAPK通路的影响。方法:设MS^-1内皮细胞组(MS^-1内皮细胞)、同型半胱氨酸组(5 mg·L^-1同型半胱氨酸+MS^-1内皮细胞)、替米沙坦组(5 mg·L^-1同型半胱氨酸+50 mg·L^-1替米沙坦+MS^-1内皮细胞),培养结束后,检测各组细胞活力和凋亡率、G1期水平、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达水平、p-p38MAPK mRNA及蛋白水平、半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、半胱氨酸蛋白酶-6(caspase-6)、半胱氨酸蛋白酶-9(caspase-9)蛋白表达水平。结果:与MS^-1内皮细胞组比较,同型半胱氨酸组和替米沙坦组活力、G1期水平显著降低(P<0.05);凋亡率、IL-2、IL-6、TNF-α蛋白水平、p-p38MAPK mRNA及蛋白水平、caspase-3、caspase-6、caspase-9蛋白水平显著升高(P<0.05)。与同型半胱氨酸组比较,替米沙坦组活力、G1期水平显著升高(P<0.05);凋亡率、IL-2、IL-6、TNF-α蛋白水平、p-p38MAPK mRNA及蛋白水平、caspase-3、caspase-6、caspase-9蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论:替米沙坦对同型半胱氨酸诱导的内皮细胞炎症损伤具有保护作用,其机制与替米沙坦抑制p38MAPK炎症信号通路的激活及抑制内皮细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 替米沙坦 同型半胱氨酸 内皮细胞 炎症损伤 P38MAPK
NF-κB p65对OX-LDL处理的内皮祖细胞增殖活性的影响及机制研究 预览
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作者 刘洁 罗展雄 陈祖平 《中国现代医学杂志》 CAS 2019年第13期25-30,共6页
目的研究核因子κB p65(NF-кB p65)对氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)处理的内皮祖细胞增殖活性的影响及机制。方法分离培养人内皮祖细胞,用OX-LDL细胞培养液培养后,分别用实时荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blotting检测细胞中NF-κBp... 目的研究核因子κB p65(NF-кB p65)对氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)处理的内皮祖细胞增殖活性的影响及机制。方法分离培养人内皮祖细胞,用OX-LDL细胞培养液培养后,分别用实时荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blotting检测细胞中NF-κBp65 mRNA及蛋白水平。用NF-κB p65 siRNA慢病毒感染内皮祖细胞,给予OX-LDL处理以后,qRT-PCR和Western blotting检测干扰效果。MTT检测内皮祖细胞的增殖活性,流式细胞术检测内皮祖细胞的凋亡变化,Western blotting检测细胞中活化的Caspase-3、Caspase-9蛋白水平,用比色法检测细胞裂解液中的超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。结果OX-LDL处理可以诱导内皮祖细胞中NF-κB p65表达上调。NF-κB p65 siRNA慢病毒可以下调OX-LDL条件下内皮祖细胞中NF-кBp65的表达水平。OX-LDL处理后的内皮祖细胞的增殖活性降低,细胞凋亡率升高,细胞中活化的Caspase-3、Caspase-9蛋白水平也升高,细胞中SOD活性降低,MDA含量升高(P<0.05)。敲低NF-κB p65后的内皮祖细胞经OX-LDL诱导后,细胞增殖活性有所升高,细胞凋亡率降低,细胞中活化的Caspase-3、Caspase-9蛋白水平降低,SOD活性升高,MDA含量降低(P<0.05)。结论敲低NF-κB p65能够降低OXLDL诱导的氧化应激及细胞凋亡,提高内皮祖细胞增殖活性。 展开更多
关键词 心血管疾病 内皮细胞 氧化性应激 NF-ΚBP65 细胞增殖 细胞凋亡
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