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脂筏在柯萨奇病毒A组16型感染RD细胞中的作用
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作者 李兴志 李鹏飞 +9 位作者 刘昕旸 程丽鑫 郑亮 张雅婷 沈玉江 武雪宁 徐嘉欣 王显赫 张华 曹宏伟 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第6期665-670,共6页
目的探究脂筏在柯萨奇病毒A组16型(CA16)感染RD细胞中的作用。方法使用胆固醇抑制剂甲基-β-环糊精(MβCD)驱散细胞膜胆固醇并破坏脂筏,分别采用RT-PCR和Western blot技术,在mRNA以及蛋白质水平检测MβCD处理对于CA16病毒感染RD细胞的... 目的探究脂筏在柯萨奇病毒A组16型(CA16)感染RD细胞中的作用。方法使用胆固醇抑制剂甲基-β-环糊精(MβCD)驱散细胞膜胆固醇并破坏脂筏,分别采用RT-PCR和Western blot技术,在mRNA以及蛋白质水平检测MβCD处理对于CA16病毒感染RD细胞的影响。在RD细胞感染不同时间使用MβCD处理,并检测其对CA16病毒感染的影响。MβCD处理后,使用添加外源胆固醇的方式对细胞膜胆固醇进行补充,观察CA16病毒感染的变化。通过Western blot检测CA16感染后宿主细胞Akt磷酸化水平的变化,以及MβCD处理对宿主细胞Akt磷酸化的影响。结果 MβCD以剂量依赖方式抑制CA16病毒对RD细胞的感染,MβCD处理浓度为2.5、5、7.5、10 mmol/L时CA16 VP1的mRNA水平和蛋白质水平表达均出现降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。在感染前1 h使用MβCD处理CA16 VP1 mRNA和蛋白质水平的表达分别降低了(84.23±3.70)%和(81.80±5.09)%,与未做处理的对照组相比具有统计学意义(P<0.05)。在MβCD处理后添加200、300、400μg/ml的外源胆固醇,VP1 mRNA水平的表达恢复了(26.63±7.69)%、(77.06±6.91)%、(91.36±12.09)%,VP1蛋白质水平的表达恢复了(28.71±8.27)%、(51.14±5.82)%、(58.14±7.35)%,且VP1表达与MβCD单独处理相比差异均具有统计学意义(P<0.05)。CA16感染30 min时pAkt表达上升了(91.86±27.14)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。CA16感染MβCD预处理过的细胞pAkt未发生显著变化(P>0.05)。结论脂筏在CA16病毒感染RD细胞与激活PI3K/Akt通路中起重要作用。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒A组16 脂筏 胆固醇
2011-2017年浙江省金华市手足口病流行特征分析
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作者 庞志峰 金祝平 +1 位作者 章光明 陈梦安 《疾病监测》 CAS 2019年第1期53-56,共4页
目的分析2011—2017年浙江省金华市手足口病流行特征,为制定手足口病防控策略提供依据。方法采用描述流行病学方法,对手足口病疫情资料和病原学检测结果进行分析。结果 2011—2017年浙江省金华市累计报告手足口病88 157例,其中轻症病例8... 目的分析2011—2017年浙江省金华市手足口病流行特征,为制定手足口病防控策略提供依据。方法采用描述流行病学方法,对手足口病疫情资料和病原学检测结果进行分析。结果 2011—2017年浙江省金华市累计报告手足口病88 157例,其中轻症病例88 123例,重症病例34例,死亡14例,年均发病率232.09/10万。手足口病流行呈'隔年高发'和'年度双高峰'的特征,4—7月和10—12月为高发时间。地区间发病差异较大,城市发病率是农村的1.66~2.12倍。病例以≤5岁儿童为主(96.10%),高发年龄段为1~3岁,97.06%的重症病例和所有死亡病例为≤3岁儿童,男女发病率比例为1.47∶1,职业分布以散居儿童(69.60%)和幼托儿童(28.14%)为主。采集轻症病例标本3 789份,采样率为4.30%,其中2 126份病毒核酸阳性,阳性率为56.11%,肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型、其他肠道病毒分别占24.60%、18.77%和56.63%。重症和死亡病例EV71的构成比分别为82.35%和92.86%。结论手足口病在浙江省金华市广泛分布,季节性和人群差异明显。应加强重点人群、高发季节和重点区域的防控,进一步推进≤3岁儿童疫苗接种。需对现有监测方案进行调整,增加采样数量、采样频次和病原学检测项目。 展开更多
关键词 手足口病 流行特征 病原学监测 肠道病毒71型 柯萨奇病毒A组16
2009-2017年江苏省手足口病病原谱及柯萨奇A16型的分子流行病学研究 预览
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作者 嵇红 鲍倡俊 +3 位作者 祁贤 霍翔 胡建利 樊欢 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期113-119,共7页
目的描述2009-2017年江苏省手足口病(HFMD)病原谱及柯萨奇A16型(CVA16)的流行病学、基因变异及遗传进化特征。方法对2009-2017年江苏省手足口病发病资料和病原学检测情况进行统计分析,选取120株CVA16病毒分离株进行VP1区全长基因序列测... 目的描述2009-2017年江苏省手足口病(HFMD)病原谱及柯萨奇A16型(CVA16)的流行病学、基因变异及遗传进化特征。方法对2009-2017年江苏省手足口病发病资料和病原学检测情况进行统计分析,选取120株CVA16病毒分离株进行VP1区全长基因序列测定,并对核苷酸及氨基酸序列进行同源性比较及系统进化分析。结果2009-2017年江苏省共报告手足口病1013771例。其中,手足口病肠道病毒阳性病例37389例,主要病原构成为EV71(39.85%)和CVA16(30.13%);重症病例中,以EV71为主要病原,CVA16及其他肠道病毒引起的重症病例较少。CVA16在每年的3~7月和9~11月出现流行高峰,主要感染1~4岁年龄段儿童,男性比例高于女性。江苏省地区流行的CVA16毒株属于B1a亚型和B1b亚型,其中B1b亚型为优势流行基因亚型。120株CVA16病毒分离株VP1区核苷酸及编码氨基酸序列同源性分别为87.5%~100%、97%~100%。结论2009-2017年,江苏省地区流行的CVA16具有明显的时间、人群分布特征;120株CVA16分离株属于B1a亚型和B1b亚型。CVA16分离株核苷酸序列变异较大,但氨基酸同源性较高,推断存在一定的同义突变。 展开更多
关键词 手足口病 柯萨奇病毒A组16 流行病学 遗传特征
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2013—2017年大理州手足口病患儿病原学分析 预览
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作者 段飞云 陈晓明 陈冉 《检验医学》 CAS 2019年第7期583-586,共4页
目的了解2013—2017年大理州手足口病患儿病原学特征,为手足口病防控提供依据。方法收集2013—2017年大理州各医疗机构手足口病患儿的流行病学数据及其咽拭或粪便样本2 873份,按照年度、样本类型、患儿性别及年龄和检出地区及月份分组... 目的了解2013—2017年大理州手足口病患儿病原学特征,为手足口病防控提供依据。方法收集2013—2017年大理州各医疗机构手足口病患儿的流行病学数据及其咽拭或粪便样本2 873份,按照年度、样本类型、患儿性别及年龄和检出地区及月份分组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测临床样本中的肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A16型(CoxA16)及其他肠道病毒(EV)。结果2 873份临床样本中,各组EV71、CoxA16、其他EV比较差异均有统计学意义(χ2值分别为893.68、121.18、41.07、354.25、240.33,P<0.05)。3~5岁组EV71和CoxA16检出率最高,分别为25.1%和23.3%。EV71主要在春季被检出,而CoxA16、其他EV则集中在夏季被检出;男性与女性患儿之间其他EV、EV71和CoxA16检出率差异均无统计学意义(χ2=2.66,P>0.05)。结论强化病原监测是防控手足口病的科学手段。 展开更多
关键词 手足口病 实时荧光定量聚合酶链反应 肠道病毒71型 柯萨奇病毒A16
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手足口病柯萨奇病毒A组16型VP1基因遗传变异
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作者 王杨 李祎 +4 位作者 彭传梅 王佳 付晓野 陈婉婷 高辉 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 2019年第3期163-166,共4页
目的探讨柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16, CV-A16)分离株VP1基因变异情况。方法选择2015年1月至2017年6月昆明地区手足口病(hand, foot, and mouth disease,HFMD)CV-A16阳性患者160例,采用实时荧光PCR检测患者粪便标本中的CV-A1... 目的探讨柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16, CV-A16)分离株VP1基因变异情况。方法选择2015年1月至2017年6月昆明地区手足口病(hand, foot, and mouth disease,HFMD)CV-A16阳性患者160例,采用实时荧光PCR检测患者粪便标本中的CV-A16病毒核酸,对CV-A16阳性样本进行反转录PCR扩增VP1基因,扩增阳性产物进行测序和序列比对,分析同源性并确定其所属基因亚型,构建种系遗传进化发育树,并进行同源建模。结果160株CV-A16毒株均为B2亚型。CV-A16毒株与福建省、北京市、南京市等地区CV-A16型流行毒株遗传距离为0.76,与马来西亚流行毒株的遗传距离为0.78,与澳大利亚流行毒株的遗传距离为1.86。同源建模发现CV-A16 VP1基因的氨基酸序列发生了G227R突变。结论CV-A16毒株3年间未发生大的基因遗传变异,毒株亲缘关系与国内北京市、福建省等地区和马来西亚地区分离毒株的遗传距离近,与澳大利亚地区的流行毒株遗传距离远。 展开更多
关键词 手足口病 柯萨奇病毒A组16 VP1基因 系统发育树 同源建模
CV-A16疫苗候选株 K168-8Ac 低温连续传代效果的评价
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作者 谢天宏 宋霞 +7 位作者 杨婷 李华 龙润乡 岳磊 张也 何鑫 王正鑫 谢忠平 《中国病毒病杂志》 CAS 2019年第2期130-134,共5页
目的通过对柯萨奇A组16型(coxsackievirus A16,CV-A16)K168-8Ac毒株低温连续传代后的生长稳定性和免疫原性进行评价,为柯萨奇A组16型减毒疫苗的研究提供指导。方法用本科室筛选的CV-A16疫苗候选株K168-8Ac在KMB17细胞上32℃连续传代到... 目的通过对柯萨奇A组16型(coxsackievirus A16,CV-A16)K168-8Ac毒株低温连续传代后的生长稳定性和免疫原性进行评价,为柯萨奇A组16型减毒疫苗的研究提供指导。方法用本科室筛选的CV-A16疫苗候选株K168-8Ac在KMB17细胞上32℃连续传代到第80代(P80),从中选取8个代次的病毒P35、P40、P50、P60、P64、P66、P69、P80,分别进行感染性滴度检测,然后用这8个代次的病毒原液分别免疫BALB/c小鼠,初次免疫后60 d进行加强免疫,于初次免疫后28 d、60 d及加强免疫后7 d、21 d进行采血;同时选取第80代的病毒进行10倍系列稀释至10-7,分别用原液和10倍系列稀释的8个稀释度的病毒(即7.75 lgCCID50/ml~1.75 lgCCID50/ml)免疫BALB/c小鼠,初次免疫后第28天进行加强免疫,于初次免疫后28 d、加强免疫后7 d、加强免疫后21 d采血,用体外微量细胞病变法进行中和抗体效价检测。结果 K168-8Ac毒株在32℃条件下在KMB17细胞上连续传代后,8个代次的病毒均有较高的感染性滴度,感染性滴度在7.37 lgCCID50/ml~7.75 lgCCID50/ml间波动(平均为7.56 lgCCID50/ml),表明其增殖特性较稳定。8个代次的病毒免疫小鼠后抗体效价及抗体阳转率之间差异均无统计学意义,初次免疫28 d(一次免疫)中和抗体效价GMT仅为1∶27.1(1∶11~1∶64),但初次免疫60 d时GMT比初次免疫28 d增长了2.0倍,达到1∶54.3;加强免疫后7 d、21 d GMT为1∶422.0和1∶1 140.0,分别比初次免疫28 d增长了15.6倍及42.1倍。用P80的病毒以7.75 lgCCID50~1.75 lgCCID50的剂量免疫小鼠,其中和抗体效价随感染剂量的降低而降低;初次免疫后第28天,7.75 lgCCID50及6.75 lgCCID50两个病毒剂量的中和抗体效价GMT分别为1∶32及1∶14,而5.75 lgCCID50以下的剂量全部阴性;加强免疫后7 d及21 d,病毒含量低至4.75 lgCCID50的GMT仍能达到1∶11,但低于3.75 lgCCID50则为阴性,加强免疫后7 d及21 d,平均中和效价均小于1∶4;P80的病毒初次免疫后第28天加� 展开更多
关键词 柯萨奇病毒A组16 疫苗 低温传代 感染性滴度 中和抗体效价
柯萨奇病毒A16型手足口病与IL-1β、IL-1RN及TNF-α单核苷酸多态性的相关性
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作者 李亚萍 张欣 +4 位作者 丁石梅 任建文 李梅 邓慧玲 党双锁 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期390-394,共5页
目的探讨炎性细胞因子白介素(IL)-1β、IL-1RN及TNF-α单核苷酸多态性与柯萨奇病毒A16型(CA16)感染手足口病(HFMD)的相关性。方法以西安交通大学第二附属医院和西安市儿童医院感染科收住的83例CA16 HFMD患儿及健康儿童201例为研究对象,... 目的探讨炎性细胞因子白介素(IL)-1β、IL-1RN及TNF-α单核苷酸多态性与柯萨奇病毒A16型(CA16)感染手足口病(HFMD)的相关性。方法以西安交通大学第二附属医院和西安市儿童医院感染科收住的83例CA16 HFMD患儿及健康儿童201例为研究对象,采用SNPscanTM多重SNP技术检测上述样本IL-1β rs16944、rs1143627,IL-1RN rs315952、rs9005及TNF-α rs1800629、rs1799964位点的基因分型。结果284例CA16感染患儿及健康对照儿童,IL-1RN rs315952 C等位基因的患病风险升高(C vs.T:OR=1.268,95% CI:1.043~1.542),IL-1RN rs9005 A等位基因患病风险降低(A vs.G:OR=0.763,95% CI:0.616~0.946),而IL-1β rs16944、rs1143627及TNF-α rs1800629、rs1799964的单核苷酸多态性与CA16 HFMD患病风险无明显相关性。结论IL-1RN rs315952、rs9005单核苷酸多态性与CA16型 HFMD患病风险相关联。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒A16 白介素-1Β 白细胞介素1受体拮抗剂 肿瘤坏死因子-α 单核苷酸多态性 患病风险
2007-2014年浙东某沿海地区手足口病流行病学及病原学特征分析 被引量:1
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作者 叶冬仙 张幼萍 《中国农村卫生事业管理》 2018年第2期181-185,共5页
目的:分析2007-2014年浙东沿海地区北仑区手足口病流行特征。方法:从国家疾病监测信息报告管理系统获取北仑区2007-2014年手足口病资料,运用描述流行病学方法进行分析。对咽拭子标本采用RT-PCR扩增基因序列测定,并进行分析。结果:200... 目的:分析2007-2014年浙东沿海地区北仑区手足口病流行特征。方法:从国家疾病监测信息报告管理系统获取北仑区2007-2014年手足口病资料,运用描述流行病学方法进行分析。对咽拭子标本采用RT-PCR扩增基因序列测定,并进行分析。结果:2007-2014年北仑区共报告7 522例,报告重症25例,无死亡病例,年均发病率为249.08/10万。2007-2014年年均发病率呈指数增长。〈5岁占所有发病人数的94.30%,年龄分布呈现双峰模式,1岁-组为最好发年龄段,在3岁-组发病率出现一个次高峰。男性患者多于女性,散居儿童最多,占63.25%,成人的手足口病发病例数逐渐上升。发病具有明显的季节性。2007年-2010年发病呈单峰分布,即5-7月份为高峰。2011年-2014年,发病呈双峰分布,5-7月份为第一个高峰,在9月-11月又迎来第二个高峰。重症病例患者均为小于5岁的儿童,EV 71阳性者占84.00%。2008年-2011年手足口病优势病原菌以EV 71为主(62.28%),2012年-2013年以肠道通用性病毒及柯萨奇A 16型占主要比例(80.72%),2014年则以EV 71和柯萨奇A 6型病毒为主(71.95%)。结论:北仑区手足口病疫情处于高流行态势,〈5岁的散居儿童是主要发病人群,季节呈双峰分布,非EV71病毒与EV71病毒交替成为手足口病的优势病原菌,但EV7l病毒仍是重症手足口病的优势病原菌。 展开更多
关键词 手足口病 流行特征 肠道病毒71型 柯萨奇病毒A 16 柯萨奇病毒A 6型
柯萨奇病毒A组16型病毒株VP1基因序列测定及进化分析研究 预览
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作者 李小平 吴亦栋 +3 位作者 周俊 周林福 樊凯 钱苗苗 《中国全科医学》 北大核心 2018年第5期546-550,共5页
目的 通过检测分析2015年杭州市柯萨奇病毒A组16型(CA16)病毒株VP1区核苷酸序列,掌握杭州市CA16的流行情况及种系进化关系,为手足口病的预防和治疗提供支持,同时为CA16疫苗株的选择提供依据。方法 收集2015年杭州市儿童医院256例临床资... 目的 通过检测分析2015年杭州市柯萨奇病毒A组16型(CA16)病毒株VP1区核苷酸序列,掌握杭州市CA16的流行情况及种系进化关系,为手足口病的预防和治疗提供支持,同时为CA16疫苗株的选择提供依据。方法 收集2015年杭州市儿童医院256例临床资料齐全且临床诊断为手足口病患儿的粪便或咽拭子,利用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增CA16病毒株VP1区核苷酸序列(约1 020 bp),测序后利用DNASTAR和Primer Premier 5.0进行序列比对分析,并用Mega 3.1软件建立检测样本VP1区序列与GenBank上CA16参考毒株VP1核苷酸序列的系统发育树。结果 共分离到80株CA16阳性病毒。序列比对分析结果显示,CA16分离株的核苷酸同源性为90.8%~100.0%,氨基酸同源性为99.5%~100.0%。系统发育树分析结果显示,17株CA16全部属于B1基因亚型,并且同时存在B1a和B1b两个进化分支,其中4株属于B1a亚型,13株属于B1b亚型。结论 2015年杭州市CA16病毒株属于B1基因亚型,与国内外某些地区手足口病病原学及分子进化研究结果一致,有望成为疫苗候选株作进一步研究。 展开更多
关键词 手足口病 柯萨奇病毒感染 柯萨奇病毒A组16 VP1 系统进化分析
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WS588-2018手足口病诊断
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作者 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 《中国病毒病杂志》 CAS 2018年第6期427-433,共7页
前言本标准第6章为强制性条款,其余为推荐性条款.本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.本标准起草单位:首都医科大学附属北京地坛医院、中国疾病预防控制中心、首都医科大学附属北京儿童医院、中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所.
关键词 手足口病 人肠道病毒71型(EV-A71) 柯萨奇病毒A组16型(CV-A16) 诊断标准
不同形式CA16病毒颗粒的分离鉴定与免疫原性初步分析
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作者 郭会杰 鲁卫卫 +5 位作者 郝春生 马淑花 刘少华 张为庆 赵中翔 李秀玲 《中国新药杂志》 CSCD 北大核心 2018年第15期1731-1736,共6页
目的:制备不同形式的CA16病毒颗粒,并对其免疫原性进行初步分析。方法:采用蔗糖密度梯度超速离心法和阴离子交换层析法,将CA16病毒进行分离纯化,收集相应组分,测定各组分抗原、蛋白含量,并进行SDS-PAGE、Western Blot、电镜鉴定。将... 目的:制备不同形式的CA16病毒颗粒,并对其免疫原性进行初步分析。方法:采用蔗糖密度梯度超速离心法和阴离子交换层析法,将CA16病毒进行分离纯化,收集相应组分,测定各组分抗原、蛋白含量,并进行SDS-PAGE、Western Blot、电镜鉴定。将分离到的不同病毒颗粒组分分别免疫小鼠,于0,14和28 d腹腔注射接种3次,末次免疫后14 d眼眶采血、分离血清。采用微量细胞病变抑制法检测血清中抗CA16病毒中和抗体效价。结果:CA16病毒液经超速离心和阴离子交换层析后,可分离得到2种形式的病毒颗粒:EP和FP。电镜下EP表现为空心颗粒、FP为实心颗粒。SDS-PAGE结果显示:EP可见VP0,VP1,VP3蛋白条带;FP可见VP1,VP2,VP4蛋白条带。EP,FP免疫小鼠后,均可诱导产生针对CA16病毒的中和抗体,但EP诱导产生的中和抗体效价远低于FP,两者间具有统计学差异。结论:体外培养的CA16病毒存在EP和FP 2种病毒颗粒形式,二者均具有免疫原性,但FP高于EP。 展开更多
关键词 CA16病毒 病毒颗粒 免疫原性
2015年昆明市柯萨奇病毒A16型VP1区基因特征分析 被引量:1
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作者 文婕 王鹏飞 +1 位作者 李秀芳 曹霞 《中华疾病控制杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期607-612,共6页
目的 研究昆明市2015-2016年手足口病患儿肠道病毒分子流行病学及探讨柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CVA16)VP1基因遗传变异与其时间和空间分布模式的相关性。方法 采集患儿的咽拭子和肛拭子样本,采用逆转录聚合酶链式反应分... 目的 研究昆明市2015-2016年手足口病患儿肠道病毒分子流行病学及探讨柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CVA16)VP1基因遗传变异与其时间和空间分布模式的相关性。方法 采集患儿的咽拭子和肛拭子样本,采用逆转录聚合酶链式反应分子鉴定法分别扩增肠道病毒71型和CVA16的VP1基因全长,随机选取2015年9份CVA16阳性样本进行测序并与数据库参考株构建系统进化树。对不同年份来源的CVA16病毒株间遗传距离与分离年份时间进行相关性和回归分析,并分析不同地理群体间的遗传距离与地理距离的相关性(Mantel检测)。结果 采样年度中大多数患儿为CVA16感染(咽拭子和肛拭子检出率分别为29.41%和15.69%),其与肠道病毒71型感染的比率分别为2.5∶1和2.0∶1。VP1基因系统进化分析显示9株CVA16昆明分离株均属于B基因型B1b亚型,且进一步划分成两个亚簇;种系进化及统计学分析显示VP1基因变异与时间推移和地理距离均具有正相关关系(均有P〈0.05)。结论 2015年昆明市9株CVA16分离株为新生成的变异毒株,提示CVA16在昆明存在一定的地域流行特点。 展开更多
关键词 手足口病 柯萨奇病毒A16 VP1区 基因特征 系统进化分析
我国柯萨奇病毒A组16型抗原标准品的协作标定和适用性研究
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作者 毛群颖 高帆 +9 位作者 王泽鋆 李秀玲 高强 安文琪 杨二霞 卞莲莲 杜瑞晓 崔博沛 徐苗 梁争论 《中国病毒病杂志》 CAS 2018年第6期481-486,共6页
目的建立第一代国家柯萨奇病毒A组16型(CV-A16)抗原标准品,用于CV-A16疫苗的抗原含量检测.方法由中国食品药品检定研究院(中检院)牵头,联合我国主要的CV-A16灭活疫苗研发单位,共计6个实验室,采用协标试剂盒,分别对两个相同、编盲设置的... 目的建立第一代国家柯萨奇病毒A组16型(CV-A16)抗原标准品,用于CV-A16疫苗的抗原含量检测.方法由中国食品药品检定研究院(中检院)牵头,联合我国主要的CV-A16灭活疫苗研发单位,共计6个实验室,采用协标试剂盒,分别对两个相同、编盲设置的候选CV-A16抗原标准品(A、B)进行CV-A16抗原含量协作标定.并且分别采用各实验室建立的CV-A16抗原检测试剂盒和各自工艺制备的CV-A16疫苗原液,以候选标准品为标准进行适用性研究.结果各实验室A/B相对抗原含量比为0.978~1.082(CV:6.2%~12.4%),表明各实验室检测结果准确、可靠.故将A、B结果合并分析.候选标准品(A、B)的几何均值为2194.5kU/ml,几何变异系数(geometric coefficient of variation,GCV)为11.0%,且协标结果呈正态分布,符合标准品研制要求.将候选标准品的抗原含量暂定为2000U/ml进行适用性研究,共3家实验室完成该研究,结果显示3个采用各自工艺制备的CV-A16原液,在各自建立的CV-A16检测试剂盒上均与候选标准品具有良好的线性和平行性,适用性良好.结论建立的候选标准品可作为CV-A16抗原标准品,赋值为2000U/ml,用于CV-A16疫苗的抗原含量检测. 展开更多
关键词 手足口病 柯萨奇病毒A组16 抗原含量 标准品
CV-A16疫苗的免疫原性评价方法研究
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作者 毛群颖 胡亚林 +5 位作者 孙一晟 高帆 邹强 卞莲莲 范昌发 梁争论 《中国病毒病杂志》 CAS 2018年第6期495-500,共6页
目的筛选可用于CV-A16疫苗免疫原性评价的最适实验动物及中和抗体检测毒株,为构建CV-A16疫苗免疫原性评价方法提供依据.方法采用CV-A16灭活疫苗免疫6种实验室常用动物BALB/c、ICR、NIH、KM鼠、豚鼠、SD大鼠以及对肠道病毒敏感的SCARB2-... 目的筛选可用于CV-A16疫苗免疫原性评价的最适实验动物及中和抗体检测毒株,为构建CV-A16疫苗免疫原性评价方法提供依据.方法采用CV-A16灭活疫苗免疫6种实验室常用动物BALB/c、ICR、NIH、KM鼠、豚鼠、SD大鼠以及对肠道病毒敏感的SCARB2-转基因小鼠和沙鼠,于一针和两针免疫后采血,分别用B基因型ZJ31/02、ZJ90/02、ZJ20/01毒株和A基因型原型株(G10)作为检测毒株进行CV-A16中和抗体应答水平研究.结果一针免疫后,全部组别的中和抗体应答水平均较低,ZJ31/02、ZJ90/02、ZJ20/01和G10检测的NTAb阳转率均值分别为51.3%(0~80%)、40.0%(0~70%)、12.5%(0~20%)和5.0%(0~20%);二针免疫后,抗体水平出现明显升高,阳转率均值分别为95.0%(80%~100%)、88.8%(70%~100%)、58.8%(0~100%)和65.0%(0~90%);GMTs均值分别为55.5、46.4、20.2和11.7.以ZJ31/02和ZJ90/02的检测结果最高,阳转率显著高于ZJ20/01(P<0.05).采用该两检测株检测时,KM鼠和SD大鼠的抗体应答最强,阳转率均可达90%,GMTs均高于100.结论CV-A16灭活疫苗二针免疫KM小鼠和SD大鼠可诱导较好的特异性中和抗体应答,可将ZJ31/02和ZJ90/02作为检测毒株,结合标准物质建立标准化CV-A16疫苗体内效力和免疫原性评价方法. 展开更多
关键词 手足口病 柯萨奇病毒A16 疫苗 中和抗体 体内效力
江苏某农村地区柯萨奇病毒A组16型感染所致疾病负担研究 预览
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作者 姚学君 李家学 +8 位作者 李靖欣 胡月梅 孟繁岳 金辉 甘正凯 张明磊 李大罕 张雪峰 朱凤才 《江苏预防医学》 CAS 2018年第4期368-370,377共4页
目的了解柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)所致疾病经济负担。方法采用问卷调查方式,对赣榆县可疑肠道病毒病监测系统发现的CA16感染病例进行调查,获得经济负担资料。结果共调查CA16感染病例299例,疾病造成的经济负担共计5... 目的了解柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)所致疾病经济负担。方法采用问卷调查方式,对赣榆县可疑肠道病毒病监测系统发现的CA16感染病例进行调查,获得经济负担资料。结果共调查CA16感染病例299例,疾病造成的经济负担共计585 691.17元,人均1 958.83元;人均直接、间接和无形负担分别为239.52、289.99、1 429.33元。有257例病例因病有不同程度失能,患儿失能调整生命年为0.164人年,人均负担强度为0.64人年/千人。结论在农村地区CA16感染所致疾病的疾病负担较重,积极防控CA16感染所致疾病具有较大社会效益和经济效益。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒A组16 疾病负担 手足口病 农村
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CV-A16对长爪沙鼠肌肉细胞的杀伤机理研究 预览
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作者 孙一晟 姚苹苹 +4 位作者 杨章女 徐芳 卢杭景 伍立志 朱函坪 《预防医学》 2018年第4期325-328,333共5页
目的研究柯萨奇病毒A组16型(CV-A16)对沙鼠原代肌肉细胞的杀伤机理,为阐明CV-A16的致病机理及沙鼠模型的进一步应用提供依据。方法采用胰蛋白酶/胶原酶双酶法构建沙鼠原代肌肉细胞模型,用不同感染剂量CV-A16感染细胞24 h,采用CCK-... 目的研究柯萨奇病毒A组16型(CV-A16)对沙鼠原代肌肉细胞的杀伤机理,为阐明CV-A16的致病机理及沙鼠模型的进一步应用提供依据。方法采用胰蛋白酶/胶原酶双酶法构建沙鼠原代肌肉细胞模型,用不同感染剂量CV-A16感染细胞24 h,采用CCK-8法检测细胞存活率,Hoechst 33258染色法检测细胞染色质变化,Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡比例,蛋白免疫印迹法检测Caspases家族蛋白、NF-κB通路相关蛋白及JNK激酶表达。结果感染复数(MOI)=0.50和1.00组细胞存活率分别为88.95%和64.05%,与阴性对照组(100.00%)比较,差异均有统计学意义(P<0.05),细胞存活率与MOI呈负相关(rs=-0.857,P=0.014);MOI=0.01、0.10和1.00组细胞凋亡比例分别为7.2%、21.8%和50.7%,细胞凋亡比例与MOI呈正相关(rs=1.000,P<0.001)。CV-A16感染后,Caspase-3和Caspase-8蛋白均被剪切激活,NF-κB通路相关蛋白IκBα、p65和p-p65表达均减少,JNK蛋白磷酸化水平增加。结论CV-A16可能通过抑制NF-κB通路和激活JNK激酶诱导沙鼠原代肌肉细胞凋亡。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒 细胞凋亡 沙鼠 机理
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甘肃省2013~2016年手足口病病原学监测分析 被引量:9
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作者 陈建华 张勇 +1 位作者 武海卓 于德山 《病毒学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期505-511,共7页
本研究对甘肃省2013~2016年手足口病病原监测结果进行分析,以了解甘肃省这几年病原谱的构成,主要病原的流行特点,为进一步做好手足口病防控工作提供依据。2013~2016年,甘肃省监测网络实验室对7 171份标本进行了核酸检测,对其中3373份阳... 本研究对甘肃省2013~2016年手足口病病原监测结果进行分析,以了解甘肃省这几年病原谱的构成,主要病原的流行特点,为进一步做好手足口病防控工作提供依据。2013~2016年,甘肃省监测网络实验室对7 171份标本进行了核酸检测,对其中3373份阳性标本开展了病毒分离培养,对得到的阳性分离株进行全长VP1区核苷酸序列测定及其分子特征分析。检测到核酸阳性标本4 314份,EV71为1 153份,占病原构成的27.73%,CVA16为1 452份,占33.66%,其他肠道病毒为1 709份,占39.62%。重症病例124例,阳性97例,其中EV71为23例,占病原构成的23.71%,CVA16为9例,占9.28%,其他肠道病毒为64例,占65.98%,EV71+CA16混合型为1例,占1.03%;死亡病例2例,均为EV71。2013年以其他肠道病毒为主要病原,占36.76%(347/944);2014年以CVA16为主,占52.83%(625/1 183);2015年和2016年均以其他肠道病毒为主,分别占57.04%(531/931)和48.25%(606/1 256)。分离到的病毒株除了EV71和CVA16,其他肠道病毒以CVA6、CVA10和CVA4为主。2013~2016年中,不同年份流行的病原不尽相同,不同地区流行的主要病原也存在地区差异。对流行的几种主要病原的VP1区分析结果表明:C4a基因亚型EV71在甘肃省仍然持续流行;CVA16的流行则是B1b基因亚型占据优势,B1a基因亚型逐渐消失;甘肃省流行的CVA6和CVA10与国内流行的毒株亲缘关系相近,且存在不同的传播链。 展开更多
关键词 手足口病(HFMD) 病原学监测 肠道病毒A组71型 柯萨奇病毒A组16 柯萨奇病毒A组6型 柯萨奇病毒A组10型 进化分析
柯萨奇病毒A组16型与小鼠病毒性心肌炎的关联性及其药物干预研究 预览 被引量:1
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作者 孔慧 都鹏飞 卢娟 《安徽医药》 CAS 2017年第9期1586-1589,共4页
目的 研究柯萨奇病毒A组16型(CVA16)与小鼠病毒性心肌炎的关联性,以及利巴韦林药物干预后的结果。方法 将获取的临床标本分离后在非洲绿猴肾细胞中进行大量培养,选用致病性强的一株进行纯化、鉴定,培养出有一定毒力的致病株,以腹腔注... 目的 研究柯萨奇病毒A组16型(CVA16)与小鼠病毒性心肌炎的关联性,以及利巴韦林药物干预后的结果。方法 将获取的临床标本分离后在非洲绿猴肾细胞中进行大量培养,选用致病性强的一株进行纯化、鉴定,培养出有一定毒力的致病株,以腹腔注射的方式感染刚出生的小鼠,小鼠共分为5组,每组10只,其中A组为正常对照组,B组为模型对照组,C组为低剂量的利巴韦林干预组,D组为中剂量的利巴韦林干预组,E组为高剂量的利巴韦林干预组,记录小鼠每日体质量、四肢活动情况、死亡情况,分别于感染后第3、7、11、15天获取小鼠的血清及心脏组织,采用酶联免疫吸附法(ELASA)试剂盒检测血清中的白细胞介素-6(IL-6),将心脏组织一部分用于病理切片,一部分用于提取RNA,进行反转录PCR(RT-PCR)实验。结果B组小鼠的血清IL-6值明显升高,与A组比较,差异有统计学意义,并且RT-PCR的结果表明病毒在感染后的小鼠心肌细胞中存在,同时病理切片中可见明显的心肌炎性病变,利巴韦林药物干预之后,D组小鼠的体质量、病理切片炎性病变好转。结论 CVA16与病毒性心肌炎的发生有一定关联性,一方面病原本身对心肌有损伤,另一方面免疫内环境也参与其中,利巴韦林在治疗CVA16有关的心肌炎中有一定的临床意义。 展开更多
关键词 病毒性心肌炎 柯萨奇病毒A组16 免疫内环境 白细胞介素-6 利巴韦林
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2015-2016年阜阳市柯萨奇病毒A16型分离株VP1区基因特征分析
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作者 卜戈 史永林 +4 位作者 赵蕾 孟昭倩 张威 郭国侠 李国兰 《热带医学杂志》 CAS 2017年第8期1016-1018,1108共4页
目的分析阜阳市柯萨奇病毒A16型(cvAl6)分离株VPl区基因特征。方法将2015-2016年阜阳市手足口病患儿cvAl6核酸阳性咽拭子标本,接种RD细胞分离病毒,出现细胞病变后用荧光定量PcR鉴定,鉴定阳性标本用RT-PCR扩增vPl区基因片段并进行... 目的分析阜阳市柯萨奇病毒A16型(cvAl6)分离株VPl区基因特征。方法将2015-2016年阜阳市手足口病患儿cvAl6核酸阳性咽拭子标本,接种RD细胞分离病毒,出现细胞病变后用荧光定量PcR鉴定,鉴定阳性标本用RT-PCR扩增vPl区基因片段并进行核苷酸序列测定。采用Mega6.06生物软件与国内外cVAl6毒株参考序列构建进化树,分析vPl区基因特征。结果26份cVAl6核酸阳性的咽拭子合格标本分离出10株cVAl6毒株,阳性率为38.46%;10株病毒VPl区基因亲缘性关系分析表明:2株cvAl6毒株为B1a亚型,8株为Blb亚型;B1a亚型毒株和广州2012年的cvAl6分离株同源性最高,核苷酸同源性为98.0%,B1b亚型毒株和深圳2013、2014年的分离株同源性最高,核苷酸同源性为99.0%。结论2015-2016年阜阳市分离的cVAl6流行毒株株为B1a亚型、B1b亚型,以B1b亚型为主。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒A组16 手足口病 VP1基因 B1基因型
2014-2015年湖北省手足口病肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型VP1基因特征 被引量:5
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作者 占建波 李静 +1 位作者 杨朝晖 詹发先 《疾病监测》 CAS 2017年第2期96-101,共6页
目的了解湖北省手足口病肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)的VP1基因特点,研究该省EV71和Cox A16的基因型别及分子进化特征。方法对2014 2015年湖北省26株EV71和27株Cox A16流行株的VP1基因测序,分析其同源性和遗传... 目的了解湖北省手足口病肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)的VP1基因特点,研究该省EV71和Cox A16的基因型别及分子进化特征。方法对2014 2015年湖北省26株EV71和27株Cox A16流行株的VP1基因测序,分析其同源性和遗传进化特征。结果 2014 2015年湖北省EV71和Cox A16流行株VP1核苷酸和蛋白氨基酸序列同源性均较高,EV71流行株的蛋白氨基酸和核苷酸序列同源性分别为97.6%-100.0%和92.3%-100.0%。Cox A16流行株的蛋白氨基酸和核苷酸序列同源性分别为96.6%-100.0%和92.3%-100.0%。EV71的VP1基因系统进化分析表明,湖北省流行的EV71与我国其他地区流行的EV71均位于一个大的分支上,均为C4基因型的C4a亚型。Cox A16流行株与B1b亚型代表株位于同一分支上,主要为B1b亚型。结论 2014 2015年湖北省EV71和Cox A16流行株分别为C4a亚型和B1b亚型,其核苷酸和氨基酸与国内外其他地区的手足口病病毒株均有较高同源性。 展开更多
关键词 肠道病毒71型 柯萨奇病毒A组16 VP1基因
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