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农杆菌介导薄皮甜瓜遗传转化体系建立 预览
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作者 栾非时 白晶 +5 位作者 朱子成 高鹏 刘识 吴川 樊超 吕双雪 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期11-18,共8页
以薄皮甜瓜“M15”和“M43”子叶节为外植体,研究激素浓度、卡那霉素浓度和消毒时间等对甜瓜子叶节再生及农杆菌介导遗传转化的影响。结果表明,诱导甜瓜子叶节不定芽分化最佳激素组合为0.5mg·L^-1 6-BA+0.05mg·L^-1 IAA,芽伸... 以薄皮甜瓜“M15”和“M43”子叶节为外植体,研究激素浓度、卡那霉素浓度和消毒时间等对甜瓜子叶节再生及农杆菌介导遗传转化的影响。结果表明,诱导甜瓜子叶节不定芽分化最佳激素组合为0.5mg·L^-1 6-BA+0.05mg·L^-1 IAA,芽伸长激素为0.05mg·L^-1 6-BA,生根激素为0.1mg·L^-1 IAA。农杆菌介导甜瓜转化最佳条件为预培养48h,OD600=0.6农杆菌菌液侵染15min,黑暗条件下共培养48~72h,头孢抑菌浓度500mg·L^-1,卡那霉素浓度75mg·L^-1。PCR检测卡那霉素抗性苗,验证外源基因已整合进入甜瓜基因组,“M15”和“M43”抗性植株阳性率分别为84.2%和77.4%。 展开更多
关键词 薄皮甜瓜 子叶节 再生 遗传转化
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濒危藏药材喜马拉雅紫茉莉组织培养初步研究 被引量:1
2
作者 刘兰 刘继 +5 位作者 张勇仓 次仁久米 苏嘉琪 洛桑索朗 罗布卓玛 赤列白觉 《微量元素与健康研究》 CAS 2018年第2期41-44,共4页
以濒危藏药材喜马拉雅紫茉莉为实验对象,初步建立了喜马拉雅紫茉莉的再生体系,为其种质资源保护和育种工作奠定了一定的理论基础。以常规方式诱导种子萌发,发现其萌发率低,而脱去外种皮后其种子萌发率可达100%。以无菌苗子叶节为外植体... 以濒危藏药材喜马拉雅紫茉莉为实验对象,初步建立了喜马拉雅紫茉莉的再生体系,为其种质资源保护和育种工作奠定了一定的理论基础。以常规方式诱导种子萌发,发现其萌发率低,而脱去外种皮后其种子萌发率可达100%。以无菌苗子叶节为外植体进行愈伤组织诱导,最佳激素组合为0.5 mg/L 6-BA+1.5mg/LNAA。以愈伤组织进行不定芽诱导,最佳激素组合为0.5 mg/L 6-BA+1.5 mg/L IAA及0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA。 展开更多
关键词 喜马拉雅紫茉莉 组织培养 不定芽 子叶节
菜豆子叶节诱导成苗技术初步研究 预览
3
作者 陈高 代祥德 +2 位作者 邵景杰 任三国 陈禅友 《江汉大学学报:自然科学版》 2018年第4期299-304,共6页
以"Bean white rice"菜豆为研究材料,研究了在MS培养基上添加不同生长素IBA和NAA以及细胞分裂素6-BA和KT对菜豆子叶节诱导不定芽和根的影响,并对菜豆组培再生苗进行炼苗和移植。研究结果表明:最佳芽诱导培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0... 以"Bean white rice"菜豆为研究材料,研究了在MS培养基上添加不同生长素IBA和NAA以及细胞分裂素6-BA和KT对菜豆子叶节诱导不定芽和根的影响,并对菜豆组培再生苗进行炼苗和移植。研究结果表明:最佳芽诱导培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT+1.0 mg/L IBA,不发芽分化系数平均达到2.89;最佳生根培养基为MS+0.1 mg/L IBA,生根率为100%;菜豆组培再生苗移栽后可以正常存活。 展开更多
关键词 菜豆 组织培养 子叶节 再生苗 炼苗移栽
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白玉龙火龙果不同外植体的离体培养 预览
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作者 谢志亮 曾光辉 +1 位作者 余宏傲 吴振旺 《南方农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第9期1635-1640,共6页
【目的】研究白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节的不定芽诱导及茎段增殖技术,为白玉龙火龙果的品种改良及快繁育苗提供技术支持。【方法】以白玉龙火龙果种子培育的无菌苗为材料,采用正交试验设计分析不同培养基、不同植物生长调节剂... 【目的】研究白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节的不定芽诱导及茎段增殖技术,为白玉龙火龙果的品种改良及快繁育苗提供技术支持。【方法】以白玉龙火龙果种子培育的无菌苗为材料,采用正交试验设计分析不同培养基、不同植物生长调节剂与浓度及其组合对白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节不定芽诱导及茎段增殖与生根的影响。【结果】白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节均能直接诱导不定芽发生。其中,16个正交处理均能诱导子叶节不定芽发生,其最优诱导培养基为WPM+0.50mg/LTDZ+0.50mg/LCPPU+0.05mg/L6-BA+1.0mg/LNAA,诱导率为87.1%~100.0%;子叶仅1个处理未能诱导出不定芽,最高诱导率为36.0%,其最优诱导培养基为1/2MS+0.50mg/LTDZ+0.05mg/LCPPU+2.00mg/L6-BA+0mg/LNAA;下胚轴仅5个处理能诱导出不定芽,最高诱导率仅3.0%,其最优诱导培养基为1/2MS+0.05mg/LTDZ+2.00mg/LCPPU+1.00mg/L6-BA+1.0mg/LNAA。茎段去顶处理有利于腋芽的诱导萌发,去顶处理的最大增殖系数为4.2,不去顶处理的最大增殖系数为3.1,其最优增殖培养基为WPM+0.50mg/L6-BA+0.05mg/LIBA。NAA处理能促进茎段生根,适宜的生根培养基为1/2MS+0.1~0.5mg/LNAA,生根率达100.0%。【结论】不同基本培养基、植物生长调节剂与浓度及其组合均能诱导白玉龙火龙果子叶、下胚轴和子叶节不定芽发生及茎段芽增殖和不定根产生。其中,不定芽诱导以子叶节最易诱导发生,其次为子叶,下胚轴较难;茎段芽增殖和不定根诱导均较容易。 展开更多
关键词 火龙果 离体培养 子叶 下胚轴 子叶节 不定芽诱导
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甘蓝型油菜带节子叶再生体系的建立及遗传转化应用 预览
5
作者 廖志强 王小武 +1 位作者 孙亮 魏志英 《中国农学通报》 2017年第34期40-45,共6页
优良再生体系的建立是农杆菌介导植物遗传转化的基础。本研究建立以甘蓝型油菜含部分子叶节的子叶为外植体的再生体系,该再生体系为:切取5日苗龄甘蓝型油菜含部分子叶节的带柄子叶为外植体,置于添加3 mg/L6-BA的MS基本培养基中培养5天... 优良再生体系的建立是农杆菌介导植物遗传转化的基础。本研究建立以甘蓝型油菜含部分子叶节的子叶为外植体的再生体系,该再生体系为:切取5日苗龄甘蓝型油菜含部分子叶节的带柄子叶为外植体,置于添加3 mg/L6-BA的MS基本培养基中培养5天,外植体再生出丛生不定芽,不定芽再生率为100%。基于新建立的带节子叶再生体系,通过农杆菌介导,成功地将用p FGC5941载体构建的Bn TFL1基因干扰载体转入甘蓝型油菜中,从播种到得到生根抗性苗,整个转化周期只需要60~70天,较传统甘蓝型油菜以不带节子叶为外植体100~130天的转化周期大大缩短。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 子叶节 子叶 再生体系 遗传转化
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RNA干扰高油GmPEPc基因转入大豆研究 被引量:1
6
作者 张原宇 董英山 +4 位作者 于盛竹 邢国杰 李桐 郑惠景 张玲 《大豆科学》 CSCD 北大核心 2017年第4期514-518,共5页
通过构建GmPEPc基因的植物RNAi双元表达载体,并通过农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化方法将控制油脂和蛋白合成途径的相关基因GmPEPc转入受体品种沈农9号中,通过抑制大豆内源GmPEPc基因的表达,增加油脂积累,从而获得高油的转基因大... 通过构建GmPEPc基因的植物RNAi双元表达载体,并通过农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化方法将控制油脂和蛋白合成途径的相关基因GmPEPc转入受体品种沈农9号中,通过抑制大豆内源GmPEPc基因的表达,增加油脂积累,从而获得高油的转基因大豆新品种。在大豆组织培养过程中,共切取大豆外植体407块,获得Tn代转化苗35株,转化率8.9%。通过对转基因后代中目的基因的整合及表达情况进行分子鉴定。获得23株T1代转基因后代,其中高抗草丁膦除草剂(喷施浓度300mg·mL-1)14株,通过PCR检测结果表明其中12株为PCR阳性;PCR和South—erR杂交检测表明,白鼢基因已经成功插入到转基因大豆植株基因组DNA中。对T1代测定结果显示,转基因大豆籽粒的平均含油量比对照高9.51%,平均蛋白质含量下降5.44%。这些研究结果为筛选高油脂含量的转基因大豆新株系提供了依据,为下一步高油新品种的选育提供了种质基础。 展开更多
关键词 大豆 转基因 PEPC RNA干扰 子叶节
南瓜子叶节再生体系的建立 预览 被引量:2
7
作者 张加一 刘霞 +1 位作者 胡芳芳 程永安 《中国瓜菜》 CAS 北大核心 2016年第5期5-7,10共4页
为建立南瓜子叶节再生体系,试验以‘上桔“金栗“银栗“贝栗灰“永安2号’和‘永安5号’共6个南瓜品种的子叶节为材料,以MS培养基为基本培养基,通过设置9种芽分化培养基,研究6-BA和IBA组合、KT对南瓜的子叶节诱导芽的影响。结果表明... 为建立南瓜子叶节再生体系,试验以‘上桔“金栗“银栗“贝栗灰“永安2号’和‘永安5号’共6个南瓜品种的子叶节为材料,以MS培养基为基本培养基,通过设置9种芽分化培养基,研究6-BA和IBA组合、KT对南瓜的子叶节诱导芽的影响。结果表明,1.0mg·L-1 6-BA和0.02mg·L-1 IBA质量浓度组合是6-BA与IBA浓度组合中不定芽诱导率最高的,为66.67%。在培养基中添加2mg·L-1和3mg·L-1的KT可以显著提高不定芽的诱导率;基因型不同南瓜的子叶节出芽率不同,其中南瓜品种‘银栗’最易诱导出芽,诱导率为93.75%,而‘上桔’的诱导率最低,诱导率为47.92%。试验得出南瓜子叶节诱导芽的最佳诱导培养基为MS+3mg·L-1 KT+1.0mg·L-1 6-BA+O.02mg·L-1IBA,平均诱导率为83.33%。 展开更多
关键词 南瓜 子叶节 再生体系
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甘蓝型油菜下胚轴一步不定芽再生培养及遗传转化应用 被引量:4
8
作者 廖志强 邬贤梦 +1 位作者 孙娟 官春云 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期793-799,共7页
本研究建立了以甘蓝型油菜下胚轴为外植体的一步不定芽再生培养和遗传转化体系。首先,以甘蓝型油菜中双11号含部分子叶节的下胚轴为外植体,从6-BA和NAA配比、AgNO3以及无菌苗苗龄等方面对影响油菜组织培养的因素进行了研究,建立了甘... 本研究建立了以甘蓝型油菜下胚轴为外植体的一步不定芽再生培养和遗传转化体系。首先,以甘蓝型油菜中双11号含部分子叶节的下胚轴为外植体,从6-BA和NAA配比、AgNO3以及无菌苗苗龄等方面对影响油菜组织培养的因素进行了研究,建立了甘蓝型油菜快速高频一步不定芽再生培养技术体系。该技术体系为,切取5 d苗龄含部分子叶节的下胚轴置于添加4 mg/L 6-BA的MS基本培养基中培养,5 d再生出不定芽,再生频率为100%。在此基础上,进行了甘蓝型油菜的遗传转化,成功地将用pFGC5941双元载体构建的BnTFL 1基因干扰载体转入中双11号中。整个转化过程中,芽的诱导生成只需5 d,接着完成抗性芽的PPT筛选需要30 d,整个转化周期从播种到得到生根抗性苗仅需大约70 d,而传统转化方法抗性芽的诱导筛选需要90 d,整个转化周期需要130 d左右,大大缩短了转化周期,简化了转化过程,提高了转化效率。 展开更多
关键词 油菜 下胚轴 子叶节 一步再生培养 遗传转化
光谱分布对大豆子叶节再生的影响 被引量:3
9
作者 问涛 焦学磊 +1 位作者 刘晓英 徐志刚 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期826-832,共7页
以辽鲜1号大豆品种为试材,研究了不同光谱分布对大豆子叶节再生的影响,为菜用大豆子叶节遗传转化受体体系的改进提供借鉴。以萌发7d的子叶节为外植体,依次接种于丛生芽诱导培养基、伸长培养基和生根培养基中,并且分别置于6种LED组... 以辽鲜1号大豆品种为试材,研究了不同光谱分布对大豆子叶节再生的影响,为菜用大豆子叶节遗传转化受体体系的改进提供借鉴。以萌发7d的子叶节为外植体,依次接种于丛生芽诱导培养基、伸长培养基和生根培养基中,并且分别置于6种LED组合光源中培育,以荧光灯作为对照。光密度设置为50μmol·m^-2·s^-1,光周期设置为12h·d^-1。结果表明:复合光谱中630nm红光会抑制丛生芽之间相互伸长,而660nm红光能显著缓解相互抑制作用,并且更有利于丛生芽形态生长、叶绿素合成和干物质积累以及生根苗形态生长、干物质积累和根系发育。添加绿光或黄光均抑制丛生芽相互之间的伸长,且添加黄光抑制更强,添加绿光可促进丛生芽的叶绿素合成、干物质积累及生根壮苗。 展开更多
关键词 大豆 光谱分布 子叶节 丛生芽 LED
农杆菌介导大豆子叶节遗传转化体系的优化 被引量:6
10
作者 翟锐 高乐 +4 位作者 丁雪妮 廖文林 郑明洁 陆智文 智海剑 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期768-775,共8页
利用农杆菌菌株EHAl05,对17个栽培大豆品种的大豆子叶节进行了侵染,从大豆基因型、氯气灭菌时间、外植体状态、菌株活力、侵染浓度、侵染时间、共培养时间等方面进行了优化。结果表明:氯气灭菌14~18h,可在不影响大豆种子活力的同... 利用农杆菌菌株EHAl05,对17个栽培大豆品种的大豆子叶节进行了侵染,从大豆基因型、氯气灭菌时间、外植体状态、菌株活力、侵染浓度、侵染时间、共培养时间等方面进行了优化。结果表明:氯气灭菌14~18h,可在不影响大豆种子活力的同时最大限度的减少污染;暗处理1d的外植体活力高于光照处理5~7d的外植体;菌液浓度(OD600nm)在0.8~1.0且侵染浓度OD600nm)为0.6~0.8时GUS瞬时表达率最高;适宜的侵染时间和共培养天数分圳为30min和4d。在上述优化研究基础上,形成一套综合的转基因体系,该体系的最高转化率可达3.33%。不同处理下的GUS瞬时表达率以及17个大豆品种的丛生芽诱导率综合评价显示,适宜转化的基因型为TL-1、HC-3、HC-6、Wil-liams82。 展开更多
关键词 大豆 子叶节 农杆菌中文 转基因体系优化
大豆科丰14子叶节遗传转化体系的优化
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作者 王伟 姚嘉龙 +4 位作者 熊鹤雯 吴志慧 王程 郭蓓 谢皓 《大豆科学》 CSCD 北大核心 2015年第3期389-393,共5页
科丰14是一个适应性较广的大粒型大豆品种,以农杆菌介导的子叶节法为转化途径,研究农杆菌侵染时间、6-BA浓度及培养基中添加硫代硫酸钠对转化率的影响,以建立适宜科丰14的子叶节遗传转化体系。结果表明:当农杆菌侵染外植体时间为15 mi... 科丰14是一个适应性较广的大粒型大豆品种,以农杆菌介导的子叶节法为转化途径,研究农杆菌侵染时间、6-BA浓度及培养基中添加硫代硫酸钠对转化率的影响,以建立适宜科丰14的子叶节遗传转化体系。结果表明:当农杆菌侵染外植体时间为15 min、丛生芽培养基中6-BA的浓度为1.50 mg·L-1时产生的丛生芽率最高,可达72.92%;在共培养基中加入1 mmol·L-1的硫代硫酸钠能有效防止外植体褐化,提高丛生芽率;利用GUS基因染色技术检测转化效果,表明在大豆常规转化体系的基础上,上述措施可提高科丰14的转化效率。 展开更多
关键词 科丰14 子叶节 遗传转化
大豆子叶节遗传转化体系优化及抗逆基因AtNHX5的转化研究 被引量:3
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作者 杨权 王月月 +5 位作者 刘炎光 蒋春志 张孟臣 张洪霞 张洁 王冬梅 《大豆科学》 CSCD 北大核心 2015年第2期205-211,共7页
以河北省优良大豆品种冀豆15、五星2号和NF-58的子叶节为受体材料,利用农杆菌介导法进行遗传转化,探讨了影响农杆菌侵染后子叶节不定芽诱导的因素。结果表明:以萌发6 d、4℃处理24 h的子叶节为外植体,农杆菌侵染后经超声波处理30 s、... 以河北省优良大豆品种冀豆15、五星2号和NF-58的子叶节为受体材料,利用农杆菌介导法进行遗传转化,探讨了影响农杆菌侵染后子叶节不定芽诱导的因素。结果表明:以萌发6 d、4℃处理24 h的子叶节为外植体,农杆菌侵染后经超声波处理30 s、共培养基中添加20 mg·L-1硝酸银,能够提高子叶节丛生芽诱导率,转化植株经草铵膦筛选以及PCR检测,T0代转化率达0.97%。利用该体系对大豆品种五星2号进行At NHX5基因的遗传转化,获得3株T0代RT-PCR检测阳性植株,且2-1号T1代阳性植株检测具有一定耐盐性,初步证明获得了转At NHX5基因的大豆新材料。 展开更多
关键词 大豆 子叶节 At NHX5基因 遗传转化 除草剂
农杆菌介导超高产大豆子叶节遗传转化研究 被引量:3
13
作者 贾钰莹 蒋滢 +2 位作者 赵强 谢甫绨 于翠梅 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期634-637,共4页
为建立一个大豆子叶节高效遗传转化体系用于大豆基因工程育种,以超高产大豆品种为材料,子叶节为外植体进行了遗传转化,研究了农杆菌侵染的菌液浓度、侵染时间、共培养基中乙酰丁香酮浓度及共培养时间等影响农杆菌转化的因素。结果表明... 为建立一个大豆子叶节高效遗传转化体系用于大豆基因工程育种,以超高产大豆品种为材料,子叶节为外植体进行了遗传转化,研究了农杆菌侵染的菌液浓度、侵染时间、共培养基中乙酰丁香酮浓度及共培养时间等影响农杆菌转化的因素。结果表明:适宜转化的侵染和共培养条件为侵染菌液浓度OD600=0.5,侵染时间30 min,共培养基含有乙酰丁香酮浓度200μmol·L^-1,共培养时间为3-4 d。并以此条件对不同基因型超高产大豆品种进行农杆菌转化,结果显示大豆基因型对农杆菌的敏感性存在显著性差异,以沈农9号最敏感,沈农12次之,中黄35最差。 展开更多
关键词 超高产大豆 根癌农杆菌 子叶节 转化
影响农杆菌介导大豆遗传转化的因素 预览
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作者 刘银 孔月琴 +2 位作者 唐慧 史秀岚 王幼平 《扬州大学学报:农业与生命科学版》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期71-75,共5页
以大豆子叶节为外植体,采用农杆菌介导的遗传转化方法,探讨农杆菌菌液浓度、侵染时间、抗氧化剂、表面活性剂Silwet L-77及草丁膦(PPT)筛选浓度等因素对大豆转化效率的影响。结果表明:适合大豆转化的农杆菌菌液浓度D600 mn为0.8... 以大豆子叶节为外植体,采用农杆菌介导的遗传转化方法,探讨农杆菌菌液浓度、侵染时间、抗氧化剂、表面活性剂Silwet L-77及草丁膦(PPT)筛选浓度等因素对大豆转化效率的影响。结果表明:适合大豆转化的农杆菌菌液浓度D600 mn为0.8,子叶节外植体侵染时间以30min为宜,外植体侵染后在含有25mg·L^-1 LA共培养基中暗培养3d有利于提高转化效率。此外,PPT筛选的适宜浓度为5mg·L^-1。根据大豆子叶节农杆菌转化特点,研究中采用了延迟筛选的方法。 展开更多
关键词 大豆 农杆菌 子叶节 转化 因素
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大豆子叶节再生体系的建立 预览 被引量:3
15
作者 刘银 史秀岚 +2 位作者 王静磊 刘琪迩 王幼平 《扬州大学学报:农业与生命科学版》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期68-72,共5页
以大豆子叶节作为外植体,研究不同基因型对丛生芽诱导的影响,筛选出丛生芽诱导率较高的大豆基因型小粒豆(东农50)。在此基础上,以小粒豆的子叶节为外植体,研究种子消毒方法、种子萌发及芽诱导阶段6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)对丛生芽诱导... 以大豆子叶节作为外植体,研究不同基因型对丛生芽诱导的影响,筛选出丛生芽诱导率较高的大豆基因型小粒豆(东农50)。在此基础上,以小粒豆的子叶节为外植体,研究种子消毒方法、种子萌发及芽诱导阶段6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)对丛生芽诱导的影响以及生根阶段吲哚丁酸(IBA)对生根的影响。在确定氯气消毒法作为适宜大豆种子消毒的方法的基础上,最终确定萌发培养阶段添加1.0mg.L-1 6-BA、芽诱导阶段添加1.67mg.L-1 6-BA、生根培养阶段添加1.0mg.L-1 IBA较宜。 展开更多
关键词 大豆 子叶节 丛生芽
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吉林47大豆子叶节遗传转化体系的优化 被引量:1
16
作者 孙昕 赵健如 +5 位作者 闫帆 姬长媛 杨旭光 李景文 王英 王庆钰 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期291-294,共4页
为检测不同基因型大豆对于根癌农杆菌的敏感性,使用携带pCAMBIA1301质粒(含GUS基因)的农杆菌EHA105对10个性状优良的大豆基因型进行侵染,共培养后进行GUS染色,筛选得到对根癌农杆菌较敏感的基因型吉林47、吉林35和绥农10号;而后以吉... 为检测不同基因型大豆对于根癌农杆菌的敏感性,使用携带pCAMBIA1301质粒(含GUS基因)的农杆菌EHA105对10个性状优良的大豆基因型进行侵染,共培养后进行GUS染色,筛选得到对根癌农杆菌较敏感的基因型吉林47、吉林35和绥农10号;而后以吉林47子叶节为外植体进行大豆遗传转化体系的优化,在重悬及共培养期间添加不同浓度巯基化合物,发现400 mg.L-1L-Cys、248 mg.L-1硫代硫酸钠和300 mg.L-1DTT组合对于褐化的抑制效果最好;对芽伸长阶段的关键激素GA3和IAA进行比较研究,得到最佳配比为1.0 mg.L-1GA3、0.5 mg.L-1IAA。 展开更多
关键词 吉林47 子叶节 褐化 芽伸长
农杆菌介导大豆未成熟子叶节的遗传转化 预览 被引量:1
17
作者 钟磊 王林红 +3 位作者 乔亚科 崔姗姗 纪展波 李桂兰 《河北科技师范学院学报》 CAS 2013年第1期1-4,共4页
以冀豆7号未成熟子叶节为转化受体,研究外植体取材时间、低温预处理、共培养温度及光照时间对农杆菌介导大豆转化抗性芽的影响。结果表明,以开花后60~66d进行外植体取材的子叶节产生的抗性芽数量较多;共培养温度26℃,光照时间24h/... 以冀豆7号未成熟子叶节为转化受体,研究外植体取材时间、低温预处理、共培养温度及光照时间对农杆菌介导大豆转化抗性芽的影响。结果表明,以开花后60~66d进行外植体取材的子叶节产生的抗性芽数量较多;共培养温度26℃,光照时间24h/d有利于抗性芽产生,而外植体4℃低温预处理不利于抗性芽产生。分析不同品种抗性芽诱导率发现,不同基因型未成熟子叶节抗性芽发生率不同,其中以豫豆22,冀豆7号和品系12的抗性芽诱导率较高。 展开更多
关键词 大豆 农杆菌介导 未成熟子叶节 抗性芽诱导
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一种发根农杆菌介导的大豆“组合”植株的高效创建方法与利用 预览
18
作者 何晓兰 张大勇 +4 位作者 易金鑫 徐照龙 刘晓庆 许玲 黄益宏 《江西农业学报》 2013年第10期20-22,26共4页
利用微型注射器注射含发根性Ri质粒载体的发根农杆菌K599茵液于大豆幼苗子叶节部位,然后在光照培养箱中培养,发根率高达90%,PCR检测阳性率高达100%;随后剪掉原有的根系,在营养液中培养成根部足够健壮的大豆“组合”植株;初步分... 利用微型注射器注射含发根性Ri质粒载体的发根农杆菌K599茵液于大豆幼苗子叶节部位,然后在光照培养箱中培养,发根率高达90%,PCR检测阳性率高达100%;随后剪掉原有的根系,在营养液中培养成根部足够健壮的大豆“组合”植株;初步分析了大豆一个ERF蛋白基因的抗、耐旱功能。本方法快速、简单、高效,为后续的大豆功能基因组学研究提供了重要的实验体系。 展开更多
关键词 发根农杆菌 注射 大豆 子叶节 组合植株
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苜蓿子叶节离体再生体系的建立 预览
19
作者 麻冬梅 王静 +2 位作者 金凤霞 郭林娜 许兴 《北方园艺》 CAS 北大核心 2013年第14期104-106,共3页
以苜蓿子叶节为外植体,以MS为基本培养基,研究了不同浓度激素对苜蓿离体再生体系中子叶节外植体分化、不定芽诱导、不定芽伸长及生根的影响,以期建立高效的苜蓿子叶节离体再生体系。结果表明:苜蓿子叶节再生最佳萌发培养基为MS;最佳诱... 以苜蓿子叶节为外植体,以MS为基本培养基,研究了不同浓度激素对苜蓿离体再生体系中子叶节外植体分化、不定芽诱导、不定芽伸长及生根的影响,以期建立高效的苜蓿子叶节离体再生体系。结果表明:苜蓿子叶节再生最佳萌发培养基为MS;最佳诱导培养基为MS+1.0mg/L 6-BA,诱导时间为7~10d;不定芽伸长的最佳培养基为MS+0.5mg/L 6-BA;最佳生根培养基为1/2MS+0.1mg/L IBA,15d即可生根。 展开更多
关键词 苜蓿 子叶节 丛生芽 再生体系
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影响大豆遗传转化主要因素及相关条件优化 预览 被引量:1
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作者 马晓丽 冯小锋 +2 位作者 杨清华 郁晓敏 朱丹华 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第6期1183-1188,共6页
以浙春3号,华春6号,0428三个大豆基因型的胚尖、子叶节和下胚轴为受体材料,运用农杆菌介导法转化GUS基因,通过对GUS基因瞬时表达率的比较,探讨大豆遗传转化的主要影响因素(基因型、外植体等),并进一步对遗传转化条件进行优化。... 以浙春3号,华春6号,0428三个大豆基因型的胚尖、子叶节和下胚轴为受体材料,运用农杆菌介导法转化GUS基因,通过对GUS基因瞬时表达率的比较,探讨大豆遗传转化的主要影响因素(基因型、外植体等),并进一步对遗传转化条件进行优化。结果表明:以胚尖为受体时,3个基因型的GUS基因瞬时表达率都很低,在丛生芽的再生部位没有瞬时表达。以下胚轴为受体时,萌发5 d,共培养3 d后,浙春3号、华春6号、0428在丛生芽再生部位的GUS瞬时表达率达到最高,分别为43.92%,54.45%,58.47%。而以子叶节为受体时,按照常规方法(萌发5 d),浙春3号、华春6号、0428分别在共培养5,4,4 d时,其丛生芽再生部位的GUS瞬时表达率最高,分别为23.05%,13.79%,4.78%;利用浙春3号对子叶节法的萌发时间进行了进一步的优化,发现萌发时间为3 d时在丛生芽再生部位的GUS瞬时表达率、芽诱导率较萌发5 d都有较大幅度的提高。 展开更多
关键词 大豆基因型 胚尖 子叶节 下胚轴 GUS瞬时表达率 芽诱导率
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