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Bacillus cereus胶原蛋白酶功能基因分析与结构预测 预览
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作者 刘丽莉 代晓凝 +2 位作者 陈珂 孟圆圆 郝威铭 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期29-35,共7页
以一株降解骨胶原蛋白的菌种蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)MBL13-U作为出发菌种,通过对菌全基因组测序,针对胶原蛋白酶功能基因进行了定位和结构预测。结果表明,从全基因组序列中得到胶原蛋白酶的功能基因序列长度为2916bp;该功能基因... 以一株降解骨胶原蛋白的菌种蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)MBL13-U作为出发菌种,通过对菌全基因组测序,针对胶原蛋白酶功能基因进行了定位和结构预测。结果表明,从全基因组序列中得到胶原蛋白酶的功能基因序列长度为2916bp;该功能基因中α螺旋占总氨基酸的37.1%,β转角占12.8%,无规则卷曲占26.0%,且该酶的三维结构预测为镊子状结构。将胶原蛋白酶基因转入大肠杆菌宿主菌株BL21,构建出工程菌pET30a-ColM13/BL21。对工程菌所产的重组蛋白酶ColM13酶解Ⅰ型骨胶原蛋白的结构进行分析表明,酶解作用使骨胶原蛋白产生多肽和大量游离氨基酸,其微观结构发生显著变化,表明ColM13在工程菌中已成功表达。 展开更多
关键词 蜡样芽孢杆菌MBL13-U 胶原蛋白酶 克隆与表达 结构预测
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一种简易高效的大鼠原代肝细胞分离方法 预览
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作者 张秀莉 郭红云 +3 位作者 张永东 王涛 梁涛 苏海翔 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第9期1469-1472,共4页
目的:寻找一种简易高效的大鼠原代肝细胞分离方法。方法:在Seglen两步胶原酶灌注法的基础上加以改进,按门静脉灌注法分离培养大鼠肝细胞,重复10次分离肝细胞实验,观察各项指标结果。采用胰酶、Ⅳ型胶原酶经门静脉灌注,大鼠肝脏肝门部结... 目的:寻找一种简易高效的大鼠原代肝细胞分离方法。方法:在Seglen两步胶原酶灌注法的基础上加以改进,按门静脉灌注法分离培养大鼠肝细胞,重复10次分离肝细胞实验,观察各项指标结果。采用胰酶、Ⅳ型胶原酶经门静脉灌注,大鼠肝脏肝门部结构、肝上及肝下腔静脉封闭保留胶原酶消化分离获取肝细胞,经80目和200目的筛网依次过滤细胞后,细胞悬液分别以1000、500、300r/min离心各5min以纯化肝细胞,以台盼蓝排染法测定细胞活性,HE染色鉴定肝细胞纯度。结果:平均每只成年Wistar雄性大鼠可以获得(1.53±0.31)×10^8个肝细胞,平均获得肝细胞活率可达到94.63%,平均获得肝细胞纯度为96.7%。结论:本实验介绍的方法简便易行,且肝细胞产量较高,活力好,纯度高,适宜在一般条件的实验室推广和应用。 展开更多
关键词 肝细胞 原代培养 胶原酶 胰酶
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柚皮苷对牙本质中胶原酶活性的影响 预览
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作者 刘正雅 余昊翰 +3 位作者 许荣宸 余凡 陈吉华 李芳 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2018年第7期373-377,共5页
目的:检测柚皮苷(Ng)对游离型和牙本质结合型胶原酶活性的影响.方法:用荧光定量法检测125、250、500μg/mLNg对游离型胶原酶活性的影响.制备牙本质胶原样本24个,随机分为3组(n=8):去离子水处理组(空白组);500μg/mLNg处理组,2... 目的:检测柚皮苷(Ng)对游离型和牙本质结合型胶原酶活性的影响.方法:用荧光定量法检测125、250、500μg/mLNg对游离型胶原酶活性的影响.制备牙本质胶原样本24个,随机分为3组(n=8):去离子水处理组(空白组);500μg/mLNg处理组,2g/L氯已定处理组;各组分别处理10min后,将牙本质胶原样本分别置于老化液中15d,检测胶原的干重变化、羟脯氨酸释放量.另制备牙本质片6个,经100g/LH3PO4处理60s后,随机分为2组(n=3),实验组为500μg/mLNg处理10min;空白组不做任何处理,用原位明胶酶实验评估Ng对牙本质结合型胶原酶活性的影响.结果:500μg/mLNg的酶抑制率(83.17%)高于125、250μg/LNg;500μg/LNg处理老化15d后的牙本质胶原样本,其胶原干重丢失比例、羟脯氨酸释放量均显著低于空白组(P〈0.05);原位明胶酶实验结果显示,500μg/mLNg处理后的样本荧光释放量显著低于空白组(P〈0.05).结论:500μg/mLNg对游离型和牙本质结合型胶原酶均有抑制作用. 展开更多
关键词 柚皮苷(Ng) 胶原酶 牙本质胶原
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肺孢子菌肺炎的致病因子纤维连接蛋白作为蛇毒胶原蛋白酶作用位点的预测 预览
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作者 张雪薇 李锴 +2 位作者 邹晓毅 陆合 张静 《中国人兽共患病学报》 CSCD 北大核心 2018年第9期769-773,共5页
目的 分析和预测纤维连接蛋白与胶原蛋白具有功能相似性,从而预测蛇毒胶原蛋白酶可以水解破坏纤维连接蛋白。方法 利用NCBI,BLAST,ProtParam,ExPAsy,BioEdit,TMHMM,Signalp3.0,COILS,SWISS-MODEL等生物信息学软件对纤维连接蛋白的序列,... 目的 分析和预测纤维连接蛋白与胶原蛋白具有功能相似性,从而预测蛇毒胶原蛋白酶可以水解破坏纤维连接蛋白。方法 利用NCBI,BLAST,ProtParam,ExPAsy,BioEdit,TMHMM,Signalp3.0,COILS,SWISS-MODEL等生物信息学软件对纤维连接蛋白的序列,理化性质,疏水性,跨膜区,空间结构等进行分析和预测。结果 纤维连接蛋白与胶原蛋白具有功能相似性,两者有共同的保守结构域。构成纤维连接蛋白的氨基酸中苏氨酸所占比例最高,而甲硫氨酸所含比例最低。纤维连接蛋白在0-50位氨基酸之间有一个疏水区,在2200-2300位氨基酸之间有一个亲水区。通过信号肽软件分析,预测纤维连接蛋白为分泌蛋白,存在信号肽,可能在跨膜运输中起信号识别作用,其分泌通路为s型。纤维连接蛋白的第231-270位氨基酸之间是个高度保守的结构功能域。结论 纤维连接蛋白和胶原蛋白的结构功能具有相似性,可以预测蛇毒胶原蛋白酶能够水解破坏纤维连接蛋白。 展开更多
关键词 肺孢子菌肺炎 纤维连接蛋白 胶原蛋白酶 生物信息学 蛇毒
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外源胶原酶对牛肉嫩度的影响 预览
5
作者 李殿鑫 刘智钧 杨承鸿 《肉类工业》 2018年第8期41-45,共5页
嫩度是肉最为重要的食用品质,与肌原纤维蛋白、结缔组织、肌间脂肪以及肌肉持水性紧密相关。研究从鲜活鲫鱼中提取到一种胶原酶粗酶,首先研究了pH值、盐浓度、胶原酶添加量对胶原酶活性的影响:接着以pH值、盐浓度、胶原酶添加量为三... 嫩度是肉最为重要的食用品质,与肌原纤维蛋白、结缔组织、肌间脂肪以及肌肉持水性紧密相关。研究从鲜活鲫鱼中提取到一种胶原酶粗酶,首先研究了pH值、盐浓度、胶原酶添加量对胶原酶活性的影响:接着以pH值、盐浓度、胶原酶添加量为三个因子,分别设定三个水平,以剪切力为测定指标进行L9(3^3)正交设计,研究其对牛肉嫩度的影响。研究结果表明:胶原酶最适pH值为6.5、最适盐浓度为0.2mol/L、胶原酶添加量与酶促反应速度呈正相关关系;胶原酶添加量、盐浓度对牛肉嫩度有显著影响,因子影响排序为胶原酶添加量〉盐浓度〉pH值;正交设计最适条件为pH值6.5、盐浓度4.1%、酶添加量0.3%。 展开更多
关键词 胶原酶 提取 牛肉 嫩度
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B.cereus MBL13-U产牛骨胶原蛋白酶工艺优化 预览
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作者 刘丽莉 李丹 +2 位作者 杨陈柳 梁严予 李玉 《河南科技大学学报:自然科学版》 北大核心 2018年第1期68-72,8-9共6页
为了获得能够高效降解牛骨胶原蛋白的新型胶原蛋白酶,以蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus MBL13-U)为出发菌种,以胶原蛋白酶活力为检测指标,对影响发酵的4个因素(菌种接种量、发酵温度、p H、发酵时间)进行单因素试验。通过四元二次正交旋... 为了获得能够高效降解牛骨胶原蛋白的新型胶原蛋白酶,以蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus MBL13-U)为出发菌种,以胶原蛋白酶活力为检测指标,对影响发酵的4个因素(菌种接种量、发酵温度、p H、发酵时间)进行单因素试验。通过四元二次正交旋转组合试验,确定了B.cereus MBL13-U菌株发酵制备胶原蛋白酶的最佳工艺。当菌种接种量4%(体积分数)、发酵温度35℃、初始p H6.4、发酵时间46 h时,胶原蛋白酶活力达(92.31±1.13)U/m L。将其作用于牛骨胶原蛋白,通过扫描电子显微镜对酶解过程中的牛骨胶原蛋白进行结构分析。分析结果表明:酶解破坏了牛骨胶原蛋白原本完整的表面结构,使其所含的Ⅰ型胶原蛋白更多地暴露在表面,加快水解。 展开更多
关键词 BACILLUS CEREUS MBL13-U 发酵 胶原蛋白酶 工艺优化 牛骨胶原蛋白
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不同胶原酶对中国供者胰岛分离作用的比较
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作者 刘尧娟 邹家琦 +7 位作者 王贯乔 王乐 刘腾丽 王树森 王智平 裴广辉 王金山 沈中阳 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期720-724,共5页
目的对国际用于人胰岛制备的两种胶原酶(Serva NB1胶原酶和VitacyteGOLD胶原酶)在中国供者胰岛分离中的效果进行比较。探讨适合中国人的胰岛分离方法。方法入选17例供者胰腺均来自死亡后器官捐献,其中12例使用Serva NB1胶原酶消化,5例使... 目的对国际用于人胰岛制备的两种胶原酶(Serva NB1胶原酶和VitacyteGOLD胶原酶)在中国供者胰岛分离中的效果进行比较。探讨适合中国人的胰岛分离方法。方法入选17例供者胰腺均来自死亡后器官捐献,其中12例使用Serva NB1胶原酶消化,5例使用Vitacyte GOLD胶原酶消化。在百级层流实验室中进行胰腺分离,经过修整,分别应用不同胶原酶充分灌注,利用Ricordi方法消化并记录消化时间,利用连续密度梯度法纯化胰岛,然后检测胰岛产率、活性和葡糖糖刺激的胰岛素分泌能力,以评估分离胰岛的数量和质量。结果Vitacyte GOLD胶原酶比Serva NB1胶原酶所需的消化时间更短(P<0.05)。纯化后直径在50~100 μm之间的胰岛,Vitacyte GOLD胶原酶组明显多于ServaNB1胶原酶组(P<0.05),直径在251~300 μm、301~350 μm之间的胰岛,Vitacyte GOLD胶原酶组明显少于ServaNB1胶原酶组(P<0.05)。两种胶原酶分离获得总胰岛数量差异无统计学意义(P>0.05)。两种胶原酶分离胰岛的活性检测和GSI结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论Serva NB1胶原酶和Vitacyte GOLD胶原酶均可用于临床分离制备中国人胰岛。 展开更多
关键词 胰岛移植 胰岛分离 胶原酶
幽门螺杆菌定植因子HpPrtC胶原蛋白酶的异源表达及其功能活性研究
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作者 赵慧琳 吴玉龙 +6 位作者 荣倩玉 徐正 丁雲飞 张玉梅 乔媛媛 李波清 季晓飞 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第9期958-962,共5页
目的异源表达幽门螺杆菌HpPrtC胶原蛋白酶,并检测其对胶原蛋白的降解活性。方法根据幽门螺杆菌基因组信息中编号hp0169基因的序列设计引物,PCR扩增HpPrtC基因的核苷酸序列,经NdeI和XhoI酶切后构建原核表达载体pET-22b(+)-HpPrtC,转化... 目的异源表达幽门螺杆菌HpPrtC胶原蛋白酶,并检测其对胶原蛋白的降解活性。方法根据幽门螺杆菌基因组信息中编号hp0169基因的序列设计引物,PCR扩增HpPrtC基因的核苷酸序列,经NdeI和XhoI酶切后构建原核表达载体pET-22b(+)-HpPrtC,转化至E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达后采用亲和层析法纯化重组蛋白,通过检测重组酶处理胶原蛋白后L-亮氨酸的产生量表征其胶原蛋白降解活性。结果 HpPrtC基因编码422个氨基酸,与已知PrtC家族蛋白酶氨基酸序列比对最高相似性〈40%。克隆HpPrtC基因连接入表达质粒pET-22b(+),将测序正确的表达质粒pET-22b(+)-HpPrtC转化至感受态细胞BL21(DE3),经IPTG诱导表达相对分子质量约为47×10^3的可溶性蛋白,与预期相符。经亲和层析纯化后的重组蛋白酶降解热变性I型胶原蛋白(可溶、不可溶)和天然I型胶原蛋白的活性分别为922.2±36.2、1168.8±65.6和674.0±13.4,与幽门螺杆菌培养液中胶原蛋白酶对可溶热变性I型胶原蛋白、不可溶热变性I型胶原蛋白和天然I型胶原蛋白活性分别为205.6±21.5、228.4±19.3和123.2±14.5一致。结论幽门螺杆菌定植因子HpPrtC为胶原蛋白酶。通过大肠埃希菌异源表达的重组HpPrtC蛋白具有胶原蛋白酶解活性,为探索该酶在幽门螺杆菌感染定植中的作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 胶原蛋白酶 异源表达 胶原蛋白
两种脱矿液在粘接前表面处理牙本质时的脱矿动力学曲线比较及其对胶原酶解的影响
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作者 寇婷婷 熊宇 +3 位作者 崔岳 蔡江文 朱璨 周继祥 《第三军医大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第12期1155-1160,共6页
目的比较37%磷酸和17% EDTA对人牙本质的脱矿效率,并评价不同脱矿时间对人牙本质中Ⅰ型胶原基质降解速率的影响。方法制取等量人牙本质粉,分别以37%磷酸(Pi)与17% EDTA脱矿处理0 s(对照组)、10 s、15 s、30 s、60 s、120 s、72 h... 目的比较37%磷酸和17% EDTA对人牙本质的脱矿效率,并评价不同脱矿时间对人牙本质中Ⅰ型胶原基质降解速率的影响。方法制取等量人牙本质粉,分别以37%磷酸(Pi)与17% EDTA脱矿处理0 s(对照组)、10 s、15 s、30 s、60 s、120 s、72 h后离心荡洗。检测计算两种脱矿液的脱矿效率及胶原溶脱率并绘制动力学曲线。1 g/L Ⅰ型胶原酶溶液300 μL酶解样本沉淀,于1、7 d用羟脯胺酸(HYP)试剂盒测定并绘制胶原降解变化趋势图。利用Pearson相关系数分析脱矿总量与胶原溶脱、酶解1 d胶原降解量、酶解7 d胶原降解量及增量之间的相关性。结果磷酸组15 s即脱矿显著,胶原溶脱30 s明显增高(P〈0.05),胶原降解量各时间点差异无统计学意义,降解增量15 s开始降低(P〈0.05),脱矿量与胶原溶脱量及降解增量呈显著相关(r=0.864,r=-0.713,P〈0.05)。EDTA组30 s明显脱矿,胶原溶脱较少,且120s内各时间点差异无统计学意义,胶原降解量30 s达峰值,随后各时间点胶原降解量明显降低(P〈0.05),降解增量60s开始降低(P〈0.05),脱矿量与胶原溶脱量呈显著相关(r=0.894,P〈0.05)。结论磷酸脱矿效率迅速、高效,胶原溶脱率较高,稳定性较好;EDTA脱矿效率缓慢、持续,胶原溶脱率较低,稳定性尚可。临床进行牙本质粘结前表面处理牙本质时,以37%磷酸酸蚀10~15 s或17% EDTA表面处理60~90 s为较合理。 展开更多
关键词 酸蚀 脱矿 胶原酶解 动力学曲线 牙本质
计算机断层扫描术引导下靶点低温等离子联合胶原酶治疗腰椎间盘突出症的疗效分析
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作者 赵丽 王立奎 朱本藩 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2018年第9期836-840,共5页
目的探讨CT引导下低温等离子射频消融术联合胶原酶治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。方法对58例腰椎间盘突出症患者行CT引导下靶点低温等离子射频消融术合并胶原酶治疗。采用VAS评分标准及MacNab评定标准评估手术前后疼痛程度的变化,记... 目的探讨CT引导下低温等离子射频消融术联合胶原酶治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。方法对58例腰椎间盘突出症患者行CT引导下靶点低温等离子射频消融术合并胶原酶治疗。采用VAS评分标准及MacNab评定标准评估手术前后疼痛程度的变化,记录术后恢复时间和疼痛缓解时间以及术后疼痛缓解的相关危险因素分析。结果所有患者均穿刺成功,且术后未出现神经损伤、椎间盘感染,无脊髓、血管脏器损伤等并发症。术后行6个月定期随访,术后2周VAS评分平均3分;术后1个月VAS评分平均2.6分,与术后2周比较差异有统计学意义(P〈0.05);术后3个月达到稳定状态,VAS评分平均1.3分,与术后2周比较差异有统计学意义(P〈0.05);术后6个月VAS评分平均1.2分,与术后3个月比较无明显改善,差异无统计学意义(P〉0.05)。MacNab评估结果为优的患者共30例(51.7%),评价结果为良的患者共15例(25.8%),评价结果为可的患者共8例(15.5%),评价结果为差的患者共5例(7%),优良率达到89.7%。结论多种微创技术联合治疗腰椎间盘突出症安全有效,值得临床推广应用。 展开更多
关键词 低温等离子消融术 胶原酶 腰椎间盘突出症 计算机断层扫描术
Modified insulin-like growth factor 1 containing collagen-binding domain for nerve regeneration 预览
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作者 Jian-an Li Chang-fu Zhao +5 位作者 Shao-jun Li lun Zhang Zhen-hua Li Qiao Zhang Xiao-yu Yang Chun-fang Zan 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2018年第2期298-303,共6页
关键词 神经生长 生长因素 骨胶原 胰岛素 绑定 新生 IGF-1 修改
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经皮椎间孔镜技术联合胶原酶治疗包容型腰椎间盘突出症的临床疗效 预览
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作者 占新华 赵椰枫 +3 位作者 章恺 钟园 许伟凡 王鸥 《中国医药指南》 2018年第28期3-4,共2页
目的评价经皮椎间孔镜技术联合胶原酶治疗包容型腰椎间盘突出症的临床疗效。方法收集2015年1月至2017年1月在我院行经皮椎间孔镜联合胶原酶治疗的单节段包容型腰椎间盘突出症患者67例,随机分为单纯椎间孔镜组和联合胶原酶组。用视觉模... 目的评价经皮椎间孔镜技术联合胶原酶治疗包容型腰椎间盘突出症的临床疗效。方法收集2015年1月至2017年1月在我院行经皮椎间孔镜联合胶原酶治疗的单节段包容型腰椎间盘突出症患者67例,随机分为单纯椎间孔镜组和联合胶原酶组。用视觉模拟评分法(VAS)及MacNab标准进行评价并比较两组治疗效果。结果两组患者手术后1日的VAS评分与术前比较差异有显著性(P<0.05),但两组在术后6个月的VAS评分比较差异有显著性(P<0.05),两组术后12个月的VAS评分差异有显著性(P<0.05),表现为联合组较单纯组疗效明显。按照改良MacNab疗效评定标准,联合胶原酶组治疗后12个月的优良率为82%,与单纯椎间孔镜组比较差异有显著性(P<0.05)。结论经皮椎间孔镜联合胶原酶和单纯经皮椎间孔镜治疗包容型腰椎间盘突出症均有效果,前者远期效果更佳。 展开更多
关键词 经皮椎间孔镜技术 胶原酶 腰椎间盘突出症
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单纯胶原酶与胶原酶联合臭氧治疗腰椎间盘突出症的临床对照研究 被引量:2
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作者 陈建卫 李晓冰 +2 位作者 宫卫东 张鹏 吴智群 《实用放射学杂志》 北大核心 2017年第5期742-745,共4页
目的 探讨单纯胶原酶溶解术与胶原酶联合臭氧治疗腰椎间盘突出症(LDH)临床疗效的差异.方法 采用随机双盲对照研究,将100例LDH患者分成2组,单纯治疗组即单纯盘外胶原酶溶解术,联合治疗组即盘外胶原酶溶解术联合盘内臭氧注射,分别在术... 目的 探讨单纯胶原酶溶解术与胶原酶联合臭氧治疗腰椎间盘突出症(LDH)临床疗效的差异.方法 采用随机双盲对照研究,将100例LDH患者分成2组,单纯治疗组即单纯盘外胶原酶溶解术,联合治疗组即盘外胶原酶溶解术联合盘内臭氧注射,分别在术后多个时间点观察2组患者的NRS值变化及Macnab评分,分析2种治疗的疗效差异.结果 单纯治疗组50例患者中, 3例失访,联合治疗组50例患者中,2例失访,2例因疗效不佳分别于术后3月及6月行手术治疗.通过分析2组患者术前、术后的NRS值变化及Macnab评分对比,2组术后近期及远期的疗效差异无统计学意义(P>0.05);2组患者术后症状均较术前改善,疗效与术后恢复时间呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05).结论 单纯胶原酶溶解术与胶原酶联合臭氧治疗LDH均具有显著疗效,2组治疗方式疗效差异无统计学意义. 展开更多
关键词 胶原酶 臭氧 腰椎间盘突出症
蜡样芽孢杆菌胶原酶基因colR75E在毕赤酵母中的重组表达
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作者 张真 李晔 +2 位作者 张西轩 胡双艳 阮海华 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期807-817,共11页
【目的】利用毕赤酵母真核表达系统表达蜡样芽孢杆菌胶原酶Col R75E,寻找一种安全、稳定的方式体外制备具有高活性的胶原酶。【方法】以蜡样芽孢杆菌R75E基因组DNA为模板,采用PCR法扩增胶原酶col R75E基因,构建p PICZαA/col R75E重组质... 【目的】利用毕赤酵母真核表达系统表达蜡样芽孢杆菌胶原酶Col R75E,寻找一种安全、稳定的方式体外制备具有高活性的胶原酶。【方法】以蜡样芽孢杆菌R75E基因组DNA为模板,采用PCR法扩增胶原酶col R75E基因,构建p PICZαA/col R75E重组质粒,将该质粒线性化后电转化至毕赤酵母X-33菌株,诱导其表达并对表达条件进行优化。将表达后的酵母发酵液上清通过硫酸铵沉淀、脱盐处理及亲和层析纯化步骤获得高纯度重组Col R75E胶原酶。利用胶原酶活力测定、SDS-PAGE电泳、胶原酶谱、I型胶原蛋白及不同底物蛋白降解产物电泳等方法对重组胶原酶Col R75E的活性及底物特异性进行分析。【结果】毕赤酵母中最佳表达重组胶原酶Col R75E的条件为p H 6.0,甲醇终浓度为2.5%,诱导时间72 h,诱导后的蛋白经SDS-PAGE、胶原酶谱以及I型胶原蛋白降解产物电泳分析发现,毕赤酵母中表达的重组胶原酶分子量符合预期,蛋白纯度超过95%,具有较好的胶原蛋白水解活性并测得其比活力为4.977 U/mg。该酶对I型胶原蛋白表现出较好的专一性,但是对牛血清白蛋白、酪蛋白及溶菌酶蛋白没有水解活性。【结论】利用毕赤酵母真核表达系统能够获得高活性的蜡样芽孢杆菌胶原酶Col R75E,为该胶原酶广泛应用于医疗、食品等工业领域奠定了理论和方法基础。 展开更多
关键词 蜡样芽孢杆菌 胶原酶 毕赤酵母 I型胶原蛋白
盐酸米诺四环素软膏对龈沟液中胶原酶的影响 预览
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作者 季育 姚旭飞 《中国生化药物杂志》 CAS 2017年第7期211-212,215共3页
目的探讨盐酸米诺四环素软膏对龈沟液中胶原酶的影响。方法选取2015年1月~2016年12月于丽水市中医院诊治的慢性牙周炎患者60例作为研究对象,将患者以其干预方式分为2组,每组30例。对照组用超声洁治+碘甘油治疗,观察组用超声洁治+盐酸... 目的探讨盐酸米诺四环素软膏对龈沟液中胶原酶的影响。方法选取2015年1月~2016年12月于丽水市中医院诊治的慢性牙周炎患者60例作为研究对象,将患者以其干预方式分为2组,每组30例。对照组用超声洁治+碘甘油治疗,观察组用超声洁治+盐酸米诺四环素软膏治疗;比较2组患者各项实验数据。结果观察组患者治疗后龈沟液量、菌斑指数、探诊深度、附着丧失等指标变化情况优于对照组,组间比较差异有统计学意义(P〈0.05);观察组患者临床治疗效果(93.3%)优于对照组(73.3%),组间比较差异有统计学意义(P〈0.05);观察组患者不良反应发生率(10.0%)低于对照组(26.7%),组间比较差异有统计学意义(P〈0.05)。结论盐酸米诺四环素软膏可影响龈沟液中胶原酶水平,治疗慢性牙周炎的临床效果显著。 展开更多
关键词 盐酸米诺四环素软膏 龈沟液 胶原酶
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CT引导下靶点射频联合盘内小剂量胶原酶注射治疗颈椎间盘突出症的临床应用 预览
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作者 于刚 黄增丽 +1 位作者 王峰 李勇 《国际医药卫生导报》 2017年第21期3327-3330,共4页
目的探讨CT引导下靶点射频联合盘内小剂量胶原酶注射在治疗颈椎间盘突出症中的临床疗效,并评定此种方法的优越性及临床应用价值。方法选取颈椎间盘突出症患者108例,随机分为以靶点射频热凝治疗的射频组及以靶点射频热凝联合盘内小剂... 目的探讨CT引导下靶点射频联合盘内小剂量胶原酶注射在治疗颈椎间盘突出症中的临床疗效,并评定此种方法的优越性及临床应用价值。方法选取颈椎间盘突出症患者108例,随机分为以靶点射频热凝治疗的射频组及以靶点射频热凝联合盘内小剂量胶原酶注射治疗的联合组,按照颈椎病JOA标准计算并记录治疗前与治疗后1周、1个月、3个月、6个月JOA评分,并对两组患者的临床治疗效果进行比较分析。结果治疗后1周、1个月、3个月、6个月时JOA评分均较术前显著改善,联合组较射频组疼痛评分显著提高。治疗后6个月,射频组的优良率为83.3%(45/54),联合组的优良率为90.7%(49/54)。结论CT引导下靶点射频联合盘内小剂量胶原酶注射治疗颈椎间盘突出症提高了射频热凝的准确性和成功率,其疗效明显优于单一微创治疗,值得临床推广应用。 展开更多
关键词 颈椎间盘突出症 射频 热凝术 靶点 胶原酶 CT引导
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小鼠肝脏弹性蛋白免疫荧光染色方法优化 预览 被引量:1
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作者 王欢 赵文姗 +2 位作者 陈巍 黄涛 杨爱婷 《临床和实验医学杂志》 2017年第21期2081-2084,共4页
目的探讨肝脏弹性蛋白(ELN)免疫荧光染色方法的优化,改善肝脏ELN染色效果。方法小鼠肝脏冰冻切片,分别进行常规和优化的免疫荧光染色。优化方法分别是ELN抗体结合蛋白前孵育透明质酸酶(HAase)或/和胶原酶(COLase)。观察小鼠肝脏EL... 目的探讨肝脏弹性蛋白(ELN)免疫荧光染色方法的优化,改善肝脏ELN染色效果。方法小鼠肝脏冰冻切片,分别进行常规和优化的免疫荧光染色。优化方法分别是ELN抗体结合蛋白前孵育透明质酸酶(HAase)或/和胶原酶(COLase)。观察小鼠肝脏ELN免疫荧光染色效果,并统计ELN阳性面积与肝脏面积比值。结果小鼠肝脏冰冻切片经常规和孵育COLase免疫荧光染色均未见明显ELN阳性面积。孵育HAase可在肝脏血管部位见少量不连续的ELN阳性着色。联合孵育HAase和COLase后ELN阳性面积明显增加,主要见于肝动脉、门静脉和周围的细胞间质内。结论 HAase和COLase联合孵育可显著改善小鼠肝脏ELN免疫荧光染色效果。 展开更多
关键词 小鼠 肝脏 弹性蛋白 透明质酸酶 胶原酶 免疫荧光染色
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Therapeutic applications of collagenase(metalloproteases): A review
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作者 Hamzeh Alipour Abbasali Raz +1 位作者 Sedigheh Zakeri Navid Dinparast Djadid 《亚太热带生物医学杂志:英文版》 CAS 2016年第11期975-981,共7页
Non-invasive therapeutic methods have recently been used in medical sciences. Enzymes have shown high activity at very low concentrations in laboratories and pharmaceutical,enabling them to play crucial roles in diffe... Non-invasive therapeutic methods have recently been used in medical sciences. Enzymes have shown high activity at very low concentrations in laboratories and pharmaceutical,enabling them to play crucial roles in different biological phenomena related to living organism, especially human medicine. Recently, using the therapeutic methods based on non-invasive approaches has been emphasized in medical society. Researchers have focused on producing medicines and tools reducing invasive procedures in medical.Collagenases are proteins which catalyze chemical processes and break the peptide bonds in collagen. Collagen may be generated more than the required amount or produced in unsuitable sites or may not degrade after a certain time. In such cases, using an injectable collagenase or its ointment can be helpful in collagen degradation. In both in vitro and in vivo tests, it has been revealed that collagenases have several therapeutic properties in wound healing, burns, nipple pain and some diseases including intervertebral disc herniation, keloid, cellulite, lipoma among others. This review describes the therapeutic application of collagenase in medical sciences and the process for its production using novel methods, paving the way for more effective and safe applications of collagenases. 展开更多
关键词 ENZYME Therapeutic application COLLAGENASE NON-INVASIVE METALLOPROTEINASE
胶原酶溶盘术治疗体会 预览
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作者 张本国 《上海医药》 CAS 2016年第17期3-4,18共3页
胶原酶溶盘术治疗颈、腰椎间盘突出症具有方法简便、效果可靠等特点。本文简要介绍胶原酶溶盘术的治疗方法、适应证、注意事项和需向患者解释的问题等治疗体会。
关键词 胶原酶 胶原酶溶盘术 微创治疗
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臭氧联合胶原酶对腰椎间盘突出症的临床应用 预览 被引量:1
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作者 王建国 《中外医疗》 2016年第7期98-100,共3页
目的探究和分析臭氧联合胶原酶注射治疗腰椎间盘突出症疗效及价值。方法研究对象为随机选取2013年1月—2015年1月期间该院收治的腰椎间盘突出症患者40例,随按照随机数字表法分为研究组、对照组各20例。对照组采用开窗腰椎间盘摘除术,研... 目的探究和分析臭氧联合胶原酶注射治疗腰椎间盘突出症疗效及价值。方法研究对象为随机选取2013年1月—2015年1月期间该院收治的腰椎间盘突出症患者40例,随按照随机数字表法分为研究组、对照组各20例。对照组采用开窗腰椎间盘摘除术,研究组采用臭氧联合胶原酶注射治疗,对比两组治疗前后生化指标水平变化及并发症发生情况。结果经臭氧联合胶原酶注射治疗后,研究组患者TXB2(35.43±7.24),IL-IP(0.14±0.05),TNFα(0.88±0.22),与治疗前相比均显著好转,且优于对照组,差异有统计学意义(P〈0.05)。治疗后,对照组患者并发马尾综合征2例,椎间盘炎2例,伤口感染3例;研究组患者仅1例出现伤口感染患者,在并发症发生率方面明显优于对照组(P〉0.05)。结论臭氧联合胶原酶注射疗法治疗腰椎间盘突出症效果显著,且并发症少,治疗安全,患者依从性好,是腰椎间盘突出症的有效治疗手段。 展开更多
关键词 腰椎间盘突出症 臭氧 胶原酶
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