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遗传神经网络与遗传算法优选黄芪皂苷微波提取工艺条件
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作者 黄鹏程 金伟锋 +4 位作者 万海同 李畅 陈建真 楼小红 何昱 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第16期3815-3823,共9页
目的基于中心组合试验设计(central-composite design,CCD),采用遗传神经网络(genetic neural network,GNN)和遗传算法(genetic algorithm,GA)优选黄芪皂苷类成分的微波提取工艺条件。方法构建黄芪皂苷的HPLC指纹图谱,选择含量较高的7... 目的基于中心组合试验设计(central-composite design,CCD),采用遗传神经网络(genetic neural network,GNN)和遗传算法(genetic algorithm,GA)优选黄芪皂苷类成分的微波提取工艺条件。方法构建黄芪皂苷的HPLC指纹图谱,选择含量较高的7种成分(黄芪皂苷I~V和异黄芪皂苷Ⅰ、Ⅱ),以峰面积代替质量浓度,将通过熵权法计算得到的综合得分作为评价指标。在单因素实验基础上,运用CCD开展实验,构建遗传神经网络以建立提取工艺条件与评价指标之间的定量关系,并通过遗传算法优选微波提取黄芪皂苷成分的最佳工艺参数,并与响应面法优化结果进行比较。结果通过GNN与GA获得的最佳提取工艺条件为提取时间260 s、提取功率695 W、乙醇体积分数50%、液料比21.5,7个皂苷成分的综合得分为1 432.584;响应面分析法获得最佳提取工艺条件为提取时间190 s、提取功率880 W、乙醇体积分数70%、料液比18.5,7个皂苷成分的综合得分为1 066.236;GNN与GA所获提取工艺条件可有效增加综合得分。结论通过熵权法以及遗传神经网络构建黄芪皂苷成分与微波提取工艺条件之间的数学模型是可行的,可为实现中药有效部位多成分提取、分离纯化的工艺优选提供一种新的模式。 展开更多
关键词 黄芪皂苷 微波提取工艺 多目标优选 遗传神经网络 遗传算法 黄芪皂苷Ⅴ 黄芪皂苷 黄芪皂苷Ⅲ 黄芪皂苷Ⅱ 黄芪皂苷Ⅰ 异黄芪皂苷Ⅰ 异黄芪皂苷Ⅱ
黄芪甲苷Ⅳ治疗溃疡性结肠炎模型大鼠的机制研究
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作者 郝蕾 吴阳 +4 位作者 李媛媛 乔菲 种楠 张伟 吴洁琼 《中华实用诊断与治疗杂志》 2019年第5期439-442,共4页
目的探讨黄芪甲苷Ⅳ(astragalosideⅣ, AsⅣ)对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)大鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α),结肠组织p-p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)蛋白、p38... 目的探讨黄芪甲苷Ⅳ(astragalosideⅣ, AsⅣ)对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)大鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α),结肠组织p-p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)蛋白、p38 MAPK mRNA表达的影响。方法 32只SD大鼠,随机分为AsⅣ组、柳氮磺吡啶(sulfasalazine, SASP)组、模型组、对照组各8只。AsⅣ组、SASP组、模型组饮用质量分数4%葡聚糖硫酸钠溶液7 d制备UC大鼠模型,对照组自由饮用纯水。造模成功后,AsⅣ组给予AsⅣ溶液20 mL/(kg·d)灌胃,SASP组给予SASP溶液25 mL/(kg·d)灌肠,模型组给予生理盐水20 mL/(kg·d)灌肠,均连续7 d;对照组不作任何处理。干预7 d后,评估4组大鼠疾病活动指数评分(disease activity index, DAI);麻醉后取腹主动脉血,采用ELISA法检测血清TNF-α水平;取血后处死大鼠,截取距离肛门2 cm以上结肠组织,HE染色后行病理检查评定组织学损伤评分,采用Western blot法检测p-p38 MAPK蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测p38 MAPK mRNA表达。结果干预7 d后,模型组、AsⅣ组、SASP组DAI评分[(5.50±1.38)、(3.17±1.21)、(2.83±1.67)分]、血清TNF-α水平[(248.17±7.85)、(186.33±11.90)、(208.67±8.38)μg/L]均高于对照组[0,(158.37±6.13)μg/L](P<0.05),模型组高于AsⅣ组、SASP组(P<0.05),AsⅣ组与SASP组比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组大鼠结肠黏膜完整,腺体存在,排列规律,可见隐窝结构,黏膜及黏膜下层无炎症细胞浸润;模型组大鼠结肠黏膜不完整,腺体紊乱,排列不规则或消失,黏膜及黏膜下层大量炎症细胞浸润;AsⅣ组与SASP组大鼠结肠黏膜修复,腺体存在,黏膜及黏膜下层炎症细胞明显减少;干预7 d后,模型组、AsⅣ组、SASP组组织学损伤评分[(3.86±0.64)、(2.29±0.88)、(1.86±0.83)分]均高于对照组(0)(P<0.05),模型组高于AsⅣ组、SASP组(P<0.05),AsⅣ组与SASP组比较差异无统计学意义(P>0.05);模型组p-p38 MAPK蛋白相对表� 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 黄芪甲苷 肿瘤坏死因子-Α 丝裂原活化蛋白激酶 大鼠
黄芪甲苷Ⅳ对溃疡性结肠炎大鼠的作用及其机制研究 被引量:1
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作者 臧凯宏 吴建军 +2 位作者 段海婧 马清林 任远 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期48-51,共4页
目的研究黄芪甲苷Ⅳ对溃疡性结肠炎(UC)大鼠的作用及其机制。方法用2,4,6-三硝基苯磺酸钠(TNBS)结肠灌注建立UC大鼠模型。按照体重将大鼠随机分为6组:正常组、模型组、对照组和低、中、高3个剂量实验组,每组10只。正常组与模型组给予0.5... 目的研究黄芪甲苷Ⅳ对溃疡性结肠炎(UC)大鼠的作用及其机制。方法用2,4,6-三硝基苯磺酸钠(TNBS)结肠灌注建立UC大鼠模型。按照体重将大鼠随机分为6组:正常组、模型组、对照组和低、中、高3个剂量实验组,每组10只。正常组与模型组给予0.5%CMC-Na灌胃;对照组给予柳氮磺胺吡啶300 mg·kg^-1灌胃;低、中、高3个剂量实验组分别灌胃黄芪甲苷Ⅳ 10,20,40mg·kg^-1,1次/天,连续8 d。收集结肠并测定组织中髓过氧化物酶(MPO)活性;用酶联免疫吸附法检测结肠肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)水平。结果正常组、模型组和低、中、高3个剂量实验组结肠组织MPO活性分别为(0.11±0.04),(4.66±1.22),(3.63±0.40),(3.30±0.68)和(2.85±0.57)U·mg^-1;这5组结肠组织TNF-α含量分别为(176.92±70.27),(478.96±91.27),(357.21±96.22),(328.37±99.24)和(287.09±87.57)pg·mg^-1;这5组结肠组织IL-1β水平分别为(402.59±37.58),(1045.83±213.59),(817.93±104.60),(772.18±146.94)和(717.42±82.44)pg·mg^-1。上述这3个指标:模型组与正常组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01);3个剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论黄芪甲苷Ⅳ可明显改善UC肠道病变,其作用与减轻炎症反应、提高黏膜屏障功能有关。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 溃疡性结肠炎 黏膜通透性 黏膜屏障
黄芪甲苷对高糖诱导肾小管上皮细胞凋亡及线粒体自噬相关蛋白表达的影响 被引量:2
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作者 刘新辉 《广州中医药大学学报》 CAS 2019年第2期251-255,共5页
【目的】探讨黄芪甲苷对高糖诱导肾小管上皮细胞凋亡及线粒体自噬相关蛋白表达的影响。【方法】将大鼠近端肾小管上皮细胞NRK-52E分为3组:正常对照组、高糖刺激组(给予葡萄糖30 mmol/L,作用48 h)及黄芪甲苷干预组(给予葡萄糖30 mmol/L... 【目的】探讨黄芪甲苷对高糖诱导肾小管上皮细胞凋亡及线粒体自噬相关蛋白表达的影响。【方法】将大鼠近端肾小管上皮细胞NRK-52E分为3组:正常对照组、高糖刺激组(给予葡萄糖30 mmol/L,作用48 h)及黄芪甲苷干预组(给予葡萄糖30 mmol/L刺激的同时加用黄芪甲苷100μmol/L,48 h)。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增殖能力;采用Westernblot法检测促凋亡蛋白cleaved-caspase-3及同源性磷酸酶张力蛋白诱导的激酶1(PINK1)/帕金蛋白(Parkin)介导的线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin、LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ的表达。【结果】黄芪甲苷可有效缓解高糖对细胞增殖的抑制作用(P <0.01)。高糖可上调NRK-52E细胞促凋亡蛋白cleaved-caspase-3,线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin的表达水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值(均P <0.01);而黄芪甲苷干预可显著下调上述促凋亡蛋白及线粒体自噬相关蛋白的表达(P <0.05或P <0.01)。【结论】黄芪甲苷可抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞NRK-52E的凋亡,减轻其由PINK1/Parkin介导的线粒体自噬。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 高糖 凋亡 线粒体自噬 肾小管上皮细胞 细胞培养
黄芪甲苷对肾缺血再灌注损伤模型大鼠Th1/Th2平衡的调节作用
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作者 苏妍妍 李红艳 +2 位作者 张云芳 李静纯 肖洁 《国际中医中药杂志》 2019年第7期728-734,共7页
目的探讨黄芪甲苷对大鼠肾缺血再灌注损伤的免疫保护作用机制。方法将大鼠按随机数字表分为正常对照组、假手术组、模型组、黄芪甲苷组,每组6只。黄芪甲苷组大鼠腹腔注射黄芪甲苷100 mg/kg,其余各组大鼠腹腔注射等体积生理盐水,给药30 ... 目的探讨黄芪甲苷对大鼠肾缺血再灌注损伤的免疫保护作用机制。方法将大鼠按随机数字表分为正常对照组、假手术组、模型组、黄芪甲苷组,每组6只。黄芪甲苷组大鼠腹腔注射黄芪甲苷100 mg/kg,其余各组大鼠腹腔注射等体积生理盐水,给药30 min后,模型组、黄芪甲苷组制备肾缺血再灌注损伤模型。造模后24 h处死大鼠,测定血尿肌酐、尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin, NGAL)、肾脏损伤分子-1(kidney injury molecule 1, KIM-1)水平;采用ELISA法检测血清Th1型细胞因子(TNF-α、IFN-γ、IL-2)和Th2型细胞因子(IL-4、IL-5、IL-10)水平。采用Western blot法及PCR法检测肾组织中TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-5、IL-10蛋白及基因水平,采用HE染色观察各组大鼠肾脏病理学改变,采用TUNEL染色观察各组大鼠肾组织凋亡情况,采用免疫组化法检测肾组织CD20蛋白的表达。结果与模型组比较,黄芪甲苷组SCr[(58.74±9.44)μmol/L比(85.03±23.48)μmol/L]降低(P<0.05),肌酐清除率[(0.81±0.13)ml/min比(0.37±0.08)ml/min]升高(P<0.05),尿NGAL[(579.34±11.70) pg/ml比(827.60±14.48)pg/ml]、KIM-1[(105.06±2.10)pg/ml比(151.67±3.06)pg/ml]水平下降(P<0.05);肾小管上皮细胞凋亡率[(14.36±1.36)%比(28.63±2.03)%]降低(P<0.05);血清TNF-α[(361.44±9.66) pg/ml比(515.93±10.61)pg/ml]、IFN-γ[(64.11±1.21)pg/ml比(93.51±2.15)pg/ml]、IL-2[(388.33±1.21)pg/ml比(557.82±15.29)pg/ml]、IL-4[(60.89±1.21)pg/ml比(95.56±2.75)pg/ml]、IL-5[(94.02±2.81)pg/ml比(147.07±3.50)pg/ml]、IL-10[(52.62±2.51)pg/ml比(78.22±3.24)pg/ml]水平降低(P<0.01);肾组织TNF-α mRNA[(1.89±0.59)比(2.87±0.97)]、IFN-γ mRNA[(3.11±1.02)比(5.98±1.52)]、IL-2 mRNA[(1.68±0.44)比(4.09±1.65)]、IL-4 mRNA[(2.41±0.81)比(4.69±1.62)]、IL-5 mRNA[(1.56±0.19)比(2.92±0.55)]、IL-10 mRNA[(1.45±0.14)比(2.85±0.32)]表达降低(P<0.01)。黄芪甲苷组IL-4/IFN-γ比值基本恢复至假手术组水� 展开更多
关键词 再灌注损伤 黄芪甲苷 TH1-TH2平衡 抗原 CD20 大鼠
黄芪甲苷对乌头碱诱导的斑马鱼心脏损伤保护作用的研究
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作者 石亚楠 王佑华 +2 位作者 李强 姚磊 符德玉 《中医药导报》 2019年第7期26-28,共3页
目的:探讨不同浓度的黄芪甲苷对乌头碱诱导的斑马鱼心脏损伤的保护作用。方法:挑选受精后发育正常的48 h斑马鱼胚胎,用30 mg/L的乌头碱溶液药浴,同时给予10、25、40μg/m L的黄芪甲苷溶液,观察斑马鱼的心率、心脏形态以及静脉窦-动脉球(... 目的:探讨不同浓度的黄芪甲苷对乌头碱诱导的斑马鱼心脏损伤的保护作用。方法:挑选受精后发育正常的48 h斑马鱼胚胎,用30 mg/L的乌头碱溶液药浴,同时给予10、25、40μg/m L的黄芪甲苷溶液,观察斑马鱼的心率、心脏形态以及静脉窦-动脉球(SV-BA)距离的变化,观察黄芪甲苷对其心脏损伤的保护作用。结果:30 mg/L的乌头碱溶液处理24 h可致斑马鱼心率加快、心包水肿、SV-BA间距延长。25、40μg/m L黄芪甲苷溶液能降低斑马鱼的心率,减轻斑马鱼心包水肿的程度。结论:黄芪甲苷对乌头碱诱导的斑马鱼心脏损伤具有一定的保护作用,且呈剂量依赖性。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 斑马鱼 乌头碱 心脏损伤 心率
黄芪甲苷对缺血性急性肾损伤大鼠模型长链非编码RNA表达谱的影响
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作者 王雅珍 代继桓 +2 位作者 毛根祥 武庆 王国付 《中国基层医药》 CAS 2019年第6期687-692,共6页
目的研究采用长链非编码RNAs(LncRNAs)测序技术筛选黄芪甲苷(AS-IV)干预急性肾损伤(AKI)大鼠过程中肾组织相关LncRNAs的变化.方法选取雄性SD大鼠8只,采用随机数字表法分成两组,AKI模型组(组1):4只大鼠进行缺血再灌注(I/R)处理;AS-IV预... 目的研究采用长链非编码RNAs(LncRNAs)测序技术筛选黄芪甲苷(AS-IV)干预急性肾损伤(AKI)大鼠过程中肾组织相关LncRNAs的变化.方法选取雄性SD大鼠8只,采用随机数字表法分成两组,AKI模型组(组1):4只大鼠进行缺血再灌注(I/R)处理;AS-IV预处理组(组2):4只大鼠I/R处理前7 d分别进行AS-IV灌胃处理,I/R处理24 h后取肾组织,提取总RNA并进行质量检测,合格后进行测序实验,以差异倍数(组1/组2)≥2且P≤0.05为纳入标准,检测AKI模型组和AS-IV预处理组中的LncRNAs差异表达谱,并对差异LncRNAs进行基因本体论(GO)分析和通路(Pathway)分析,从而了解LncRNAs参与的生物学功能.结果两组相比,差异表达的LncRNAs共232条,其中127条表达上调,105条表达下调.发现341条mRNA表达出现差异性变化,其中178条表达上升和163条表达下降.通过GO分析获得mRNA参与的细胞生物过程、细胞组件和分子功能,LncRNAs共表达的mRNA主要参与核小体组装、染色质组装或分解、核小体组织、DNA构象变化、蛋白质-DNA复合物组装等生物过程,参与的细胞组件包括核小体、蛋白质-DNA复合物、核染色质、染色质和核核小体等成分,体现了蛋白质异源二聚反应活性、蛋白二聚化活性、DNA结合活性和核酸结合活性等分子功能.细胞通路分析LncRNAs共表达的mRNAs所参与的信号通路主要涉及到系统性红斑狼疮途径、酒精代谢途径、病毒致癌机制等,共同调控着黄芪甲苷保护AKI的生物学进程.结论 AKI模型组和AS-IV预处理组大鼠肾组织中存在差异表达的LncRNAs,生物学功能和通路分析提示这些差异表达LncRNAs可能参与黄芪甲苷改善AKI的作用机制. 展开更多
关键词 黄芪甲苷 急性肾损伤 再灌注损伤 5'非翻译区 长链非编码RNA 干预性研究 疾病模型 动物 大鼠 Sprague-Dawley
正交试验优化逆萎康的水提工艺 预览
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作者 曹淑君 王辉明 +3 位作者 刘洪玲 张翠萍 凌勇 孙向红 《中国药业》 CAS 2019年第5期21-24,共4页
目的优选逆萎康的最佳提取工艺。方法采用L9(3^4)正交试验方法,以雪胆总皂苷、黄芪甲苷含量为指标,考察提取次数、提取时间及固液比因素对逆萎康提取效果的影响,优选提取工艺。结果逆萎康的最佳工艺条件为提取2次,提取1h,固液比12倍。... 目的优选逆萎康的最佳提取工艺。方法采用L9(3^4)正交试验方法,以雪胆总皂苷、黄芪甲苷含量为指标,考察提取次数、提取时间及固液比因素对逆萎康提取效果的影响,优选提取工艺。结果逆萎康的最佳工艺条件为提取2次,提取1h,固液比12倍。结论该提取工艺操作简便、准确,可为逆萎康颗粒剂的制备提供参考。 展开更多
关键词 逆萎康 雪胆总皂苷 黄芪甲苷 正交试验 提取工艺
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超高效液相色谱-质谱联用法测定柏子养心丸中6种成分的含量
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作者 李秀明 徐建 《中南药学》 CAS 2019年第5期710-713,共4页
目的建立超高效液相色谱-质谱联用法(UPLC-MS)测定柏子养心丸中五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲、五味子酯甲、3,6’-二芥子酰基蔗糖和黄芪甲苷6种成分的含量。方法色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相... 目的建立超高效液相色谱-质谱联用法(UPLC-MS)测定柏子养心丸中五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲、五味子酯甲、3,6’-二芥子酰基蔗糖和黄芪甲苷6种成分的含量。方法色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液,采用梯度洗脱,体积流量为0.3 mL·min-1。质谱采用电喷雾离子源,选择离子监测模式进行正离子扫描。结果 6种成分在测定浓度范围内均具有良好的线性关系,加样回收率在97.8%~98.7%。结论该方法专属性强、灵敏度高、重复性好,可用于柏子养心丸的质量控制。 展开更多
关键词 超高效液相色谱-质谱联用法 柏子养心丸 五味子甲素 五味子乙素 五味子醇甲 五味子酯甲 3 6’-二芥子酰基蔗糖 黄芪甲苷
HPLC法测定芪胶升白胶囊中黄芪甲苷的含量 预览
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作者 冯亮 《北方药学》 2019年第9期1-3,共3页
目的:建立测定芪胶升白胶囊中黄芪甲苷含量的高效液相色谱法。方法:用DAD检测器以黄芪甲苷为对照品对芪胶升白胶囊中的黄芪甲苷进行HPLC分析,色谱柱:Agilent Eclipse XDB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈-水(45∶55),检测波长... 目的:建立测定芪胶升白胶囊中黄芪甲苷含量的高效液相色谱法。方法:用DAD检测器以黄芪甲苷为对照品对芪胶升白胶囊中的黄芪甲苷进行HPLC分析,色谱柱:Agilent Eclipse XDB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈-水(45∶55),检测波长为203nm,流速:0.7mL·min^-1,柱温:30℃,进样量:20μL,外标法测定。结果:黄芪甲苷线性范围为0.05392~0.5392mg·mL^-1,浓度与峰面积线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率为99.02%,RSD为0.61%(n=6)。结论:该法简便,快速,重复性好,可用于芪胶升白胶囊中黄芪甲苷的含量测定;同时应重视样品前处理方法对含量测定的影响。 展开更多
关键词 芪胶升白胶囊 黄芪甲苷 HPLC法 含量测定
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黄芪皂苷生物合成对短期水分变化的响应
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作者 韦赫 程林 +2 位作者 吴培 韩梅 杨利民 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期441-447,共7页
以一年生盆栽膜荚黄芪为材料,探究水分变化对膜荚黄芪根中总皂苷、黄芪甲苷含量及关键酶基因表达量的影响。测定其黄芪甲苷、总皂苷含量,采用实时荧光定量PCR分析黄芪皂苷合成途径中8个关键酶乙酰辅酶A乙酰基转移酶(AATC)、3-羟基-3-甲... 以一年生盆栽膜荚黄芪为材料,探究水分变化对膜荚黄芪根中总皂苷、黄芪甲苷含量及关键酶基因表达量的影响。测定其黄芪甲苷、总皂苷含量,采用实时荧光定量PCR分析黄芪皂苷合成途径中8个关键酶乙酰辅酶A乙酰基转移酶(AATC)、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶(HMGS)、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)、异戊二烯焦磷酸异构酶(IDI)、法尼基焦磷酸合酶(FPS)、鲨烯合酶(SS)、鲨烯环氧酶(SE)、环阿尔庭烷合酶(CAS)基因表达量。结果表明,随着土壤水分的下降,黄芪甲苷及总皂苷含量呈增加趋势,在第15天达到最高,分别为1.46,6.80 mg·g-1;膜荚黄芪中8个关键酶基因对水分调控的响应方式各不相同,AACT,IDI,SS基因呈现先升高后降低再升高,复水后降低的变化趋势,HMGS,HMGR,FPS基因呈现持续增加复水后下降的趋势,而SE,CAS基因呈现先增加再降低,复水后继续降低的趋势。相关性分析显示,处理组HMGR基因与总皂苷含量呈极显著正相关,CAS基因与总皂苷含量呈显著负相关;FPS,SE,CAS基因与黄芪甲苷含量呈极显著负相关系。因此,HMGR,FPS,SE,CAS基因在水分调控下对黄芪皂苷含量调控作用明显,是主要调控基因。处理第15天,黄芪甲苷和总皂苷总量达到最高,可以定为最佳采收期。 展开更多
关键词 膜荚黄芪 水分调控 黄芪甲苷 荧光定量PCR 基因表达
黄芪和当归的主要活性成分配伍促进衰老造血干细胞增殖作用的研究 被引量:1
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作者 朱嘉欢 黄小平 邓常清 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期111-119,共9页
目的探讨黄芪和当归的主要活性成分黄芪甲苷、芒柄花素、毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷和阿魏酸配伍对衰老造血干细胞(HSCs)增殖的影响,并从细胞周期调控研究其作用机制。方法以三丁基过氧化氢(T-BHP)构建小鼠HSCs衰老模型,研究不同质量浓度... 目的探讨黄芪和当归的主要活性成分黄芪甲苷、芒柄花素、毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷和阿魏酸配伍对衰老造血干细胞(HSCs)增殖的影响,并从细胞周期调控研究其作用机制。方法以三丁基过氧化氢(T-BHP)构建小鼠HSCs衰老模型,研究不同质量浓度5种活性成分对HSCs衰老和增殖的影响,寻找可促进细胞增殖的主要活性成分。在此基础上,采用正交试验研究5种活性成分配伍对HSCs衰老和增殖的影响,寻找5种活性成分促进细胞增殖的合理配伍。最后,采用HSCs衰老模型,制备黄芪-当归1∶1配伍含药血浆,设立对照组、模型组、空白血浆组、阿魏酸组、黄芪甲苷组、芒柄花素组、毛蕊异黄酮组、毛蕊异黄酮苷组、活性成分配伍组、黄芪-当归1∶1含药血浆组,药物作用于衰老细胞,以SA-β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色法测定HSCs衰老率,CCK-8法测定细胞增殖率,流式细胞术检测细胞周期分布,Western blotting法检测Cyclin D1、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)蛋白表达。结果阿魏酸、黄芪甲苷、芒柄花素均可显著促进衰老HSCs增殖和降低细胞衰老率,而毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷单独应用对HSCs增殖和细胞衰老率无显著影响。正交试验发现,以阿魏酸、芒柄花素和黄芪甲苷为基础因子,毛蕊异黄酮和毛蕊异黄酮苷为次要因子进行配伍的5种活性成分组合促细胞增殖和降低细胞衰老率的作用最强。阿魏酸、黄芪甲苷、芒柄花素、活性成分配伍、含药血浆均可降低细胞衰老率,使G0/G1期细胞减少,G2/M+S期细胞增加,并使Cyclin D1和CDK4蛋白表达增强。以上效应以活性成分配伍组和含药血浆组最强。结论黄芪和当归的主要活性成分阿魏酸、黄芪甲苷和芒柄花素对衰老HSCs具有促增殖和改善衰老作用,而毛蕊异黄酮和毛蕊异黄酮苷单用时并无明显的作用。当5种活性成分配伍后对衰老HSCs的促增殖作用最强,� 展开更多
关键词 造血干细胞 阿魏酸 黄芪甲苷 芒柄花素 毛蕊异黄酮 毛蕊异黄酮苷 黄芪 当归 细胞周期蛋白D1 细胞周期蛋白依赖性激酶
黄芪甲苷对缺血缺氧性脑血管内皮损伤作用的研究进展 预览
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作者 杜澍金(综述) 高维娟(审校) 《重庆医学》 CAS 2019年第21期3720-3723,共4页
黄芪甲苷是中药黄芪的主要活性单体,具有免疫调节、抗炎、抗凋亡、神经保护、血管重构等多种药理作用,临床上常用于治疗缺血性脑血管疾病。大多数脑血管疾病都是由于血管内皮损伤、通透性增加所致,因此积极控制损伤因素,保护血管内皮功... 黄芪甲苷是中药黄芪的主要活性单体,具有免疫调节、抗炎、抗凋亡、神经保护、血管重构等多种药理作用,临床上常用于治疗缺血性脑血管疾病。大多数脑血管疾病都是由于血管内皮损伤、通透性增加所致,因此积极控制损伤因素,保护血管内皮功能,改善损伤引起的血管屏障的破坏,对脑血管疾病的防治有重要作用。综合近期的研究,就血管内皮的损伤机制及黄芪甲苷对其保护作用进行综述,以期进行进一步研究,并为其在临床脑血管疾病中的应用提供指导。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 内皮 血管 通透性 内皮屏障
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黄芪甲苷调控Nrf2/Bach1/HO-1信号通路抑制缺氧复氧诱导的H9c2心肌细胞损伤
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作者 杨萍 周玉平 +2 位作者 常秀春 王凤 李高文 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期2331-2337,共7页
研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对缺氧复氧诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用及其机制。将H9c2心肌细胞缺氧培养12 h再复氧培养8 h复制心肌细胞缺氧复氧损伤(H/R)模型,AS-Ⅳ干预后检测活性氧(ROS)的产生,细胞活力,细胞上清SOD,MDA... 研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对缺氧复氧诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用及其机制。将H9c2心肌细胞缺氧培养12 h再复氧培养8 h复制心肌细胞缺氧复氧损伤(H/R)模型,AS-Ⅳ干预后检测活性氧(ROS)的产生,细胞活力,细胞上清SOD,MDA,IL-6,TNF-α等指标水平,以评估AS-Ⅳ的干预效应;进一步通过蛋白印记试验观察AS-Ⅳ对Nrf2,Bach1,HO-1蛋白表达的影响;最后通过siRNA方法敲低HO-1基因表达观察其对AS-Ⅳ干预效应的逆转作用。结果显示,与H/R模型组比较,H/R+AS-Ⅳ组细胞活力显著提高(P<0.01),细胞内ROS显著减少(P<0.01),细胞上清MDA,hs-CRP,TNF-α含量显著减少(P<0.01),SOD含量显著增加(P<0.01);细胞HO-1蛋白表达显著增加(P<0.01),细胞核蛋白Nrf2表达显著增多(P<0.01),细胞核蛋白Bach1表达显著减少(P<0.01);预先采用脂质体转染HO-1 siRNA至H9c2细胞,敲低HO-1的表达后,可部分逆转AS-Ⅳ的上述效应。该研究结果提示,AS-Ⅳ对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤具有显著的保护作用,其机制与调控Nrf2/Bach1/HO-1信号通路有关。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 H9C2心肌细胞 缺氧/复氧 Nrf2/Bach1/HO-1信号通路
miR-21在黄芪甲苷保护ox-LDL诱导的内皮细胞炎症损伤过程中的作用 预览
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作者 常方圆 冯泽瑞 +1 位作者 许迎春 张秋霞 《分子诊断与治疗杂志》 2019年第4期276-282,309共8页
目的探讨miR-21在黄芪甲苷保护氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)炎症损伤中的作用及其机制。方法将体外培养的HUVEC分为对照组(未干预)、模型组(以100μmol/L ox-LDL作用24 h)、治疗-低剂量(L)组、治疗-中剂量... 目的探讨miR-21在黄芪甲苷保护氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)炎症损伤中的作用及其机制。方法将体外培养的HUVEC分为对照组(未干预)、模型组(以100μmol/L ox-LDL作用24 h)、治疗-低剂量(L)组、治疗-中剂量(M)组和治疗-高剂量(H)组,其中治疗-L、M和H组细胞以100μmol/L ox-LDL作用24 h后,分别加入10、20和40 mg/L的黄芪甲苷作用2 h。MTT法检测细胞的存活率,ELISA法检测细胞上清液中炎症相关因子TNF-α、IL-6和NF-κB的含量,RT-PCR检测细胞内miR-21和TLR4 mRNA的表达,Western blot检测TLR4蛋白的表达。双荧光素酶报告基因实验检测miR-21和TLR4的靶向关系。转染miR-21模拟物和抑制剂构建miR-21过表达和低表达的HUVEC株,观察miR-21对HUVEC炎症因子分泌和TLR4表达的影响;同时,在给予40 mg/L的黄芪甲苷治疗的基础上,观察转染miR-21抑制剂下调miR-21表达对黄芪甲苷作用下HUVEC炎症因子的影响。结果与对照组相比,模型组、治疗-L组、治疗-M组和治疗-H组细胞存活率和细胞中miR-21表达显著降低,而细胞上清液中TNF-α、IL-6和NF-κB的含量以及细胞中TLR4 mRNA、蛋白的表达显著升高(P<0.05);与模型组相比,治疗-L组、治疗-M组和治疗-H组细胞存活率和miR-21表达逐渐升高,而TNF-α、IL-6和NF-κB的含量以及TLR4 mRNA、蛋白的表达逐渐降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实TLR4是miR-21的潜在靶基因。miR-21过表达降低HUVEC内炎症因子的分泌和TLR4的表达,反之,则促进HUVEC内炎症因子的分泌和TLR4的表达;下调miR-21表达后可逆转黄芪甲苷对HUVEC炎症因子的调控。结论黄芪甲苷可减轻ox-LDL诱导的HUVEC炎症损伤,其作用机制可能与上调miR-21靶向抑制TLR4表达有关。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 人脐静脉内皮细胞 炎症损伤 MIR-21 TLR4
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黄芪甲苷含量测定方法的优化及对不同产地、不同等级黄芪中黄芪甲苷含量分析
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作者 曹庆伟 杜鹃 +5 位作者 罗晋平 张瑞 李科 李爱平 刘月涛 秦雪梅 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第13期2813-2819,共7页
建立一种快速、准确的黄芪甲苷含量测定方法,通过测定87批不同产地及不同等级黄芪药材中黄芪甲苷含量,对不同产地黄芪甲苷含量限度采用ROC曲线分析,同时结合化学计量学对不同等级黄芪甲苷含量进行比较。采用HPLC-ELSD测定,使用Vensil MP... 建立一种快速、准确的黄芪甲苷含量测定方法,通过测定87批不同产地及不同等级黄芪药材中黄芪甲苷含量,对不同产地黄芪甲苷含量限度采用ROC曲线分析,同时结合化学计量学对不同等级黄芪甲苷含量进行比较。采用HPLC-ELSD测定,使用Vensil MP C18色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水(32∶68)为流动相,流速1 m L·min-1,柱温25℃,ELSD参数:气体流速2. 5 L·min-1,漂移管加热温度105℃,增益值4. 0。结果表明改进方法在样品前处理中不仅避免了耗材质量不稳定导致回收率不高问题,而且测定值高于药典方法,具有节省时间、重复性好等特点。ROC曲线分析表明山西仿野生芪特等、一等黄芪甲苷含量与甘肃移栽芪无明显差异,二等、三等、四等黄芪甲苷含量显著高于甘肃移栽芪。等级比较结果表明山西仿野生芪黄芪甲苷含量与等级呈显著负相关,而甘肃移栽芪无相关性。该研究为黄芪质量等级标准提供研究基础。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 含量测定 方法优化 质量等级标准
黄芪甲苷对盐酸多柔比星损伤心肌细胞的保护作用及其机制研究
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作者 梁丽英 刘欢 +1 位作者 张永琴 陈晶 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第17期1868-1871,共4页
目的探讨黄芪甲苷对盐酸多柔比星(DOX)损伤心肌细胞的保护作用及其机制。方法体外培养大鼠心肌细胞(H9C2细胞),用慢病毒表达系统,在H9C2心肌细胞内过表达或干扰微小RNA-21(miR-21)。将细胞分为6组:正常组、模型组、miR-21过表达组、miR... 目的探讨黄芪甲苷对盐酸多柔比星(DOX)损伤心肌细胞的保护作用及其机制。方法体外培养大鼠心肌细胞(H9C2细胞),用慢病毒表达系统,在H9C2心肌细胞内过表达或干扰微小RNA-21(miR-21)。将细胞分为6组:正常组、模型组、miR-21过表达组、miR-21干扰组、miR-21过表达加黄芪甲苷组和miR-21干扰加黄芪甲苷组。除正常组外,其余各组用DOX 10μg·mL-1造模24 h。然后,miR-21过表达加黄芪甲苷组、miR-21干扰加黄芪甲苷组均加入160μg·mL-1黄芪甲苷作用于细胞72 h。用流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率;以实时定量-聚合酶链反应检测miR-21和程序性细胞凋亡因子4(PDCD4)的表达。结果正常组、模型组、miR-21过表达组、miR-21干扰组、miR-21过表达加黄芪甲苷组和miR-21干扰加黄芪甲苷组的细胞凋亡率分别为(6. 01±0. 95)%,(24. 65±2. 28)%,(21. 49±1. 90)%,(29. 06±2. 13)%,(12. 52±1. 46)%和(20. 62±1. 89)%;上述这6组miR-21的表达(相对表达量)分别为1. 09±0. 10,0. 43±0. 10,0. 96±0. 30,0. 49±0. 20,1. 66±0. 30和1. 08±0. 38;上述这6组的PDCD4表达(相对表达量)分别为1. 02±0. 10,2. 19±0. 28,1. 57±0. 08,2. 45±0. 46,0. 95±0. 18和1. 61±0. 39。模型组与正常组相比,上述指标的差异均有统计学意义(P <0. 05,P <0. 01);miR-21过表达组和miR-21过表达加黄芪甲苷组与模型组比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P <0. 05);miR-21干扰加黄芪甲苷组与模型组比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论黄芪甲苷可保护损伤心肌细胞,其机制可能是上调miR-21的表达、靶向调控PDCD4,从而抑制心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 心肌细胞 微小RNA-21 程序性细胞凋亡因子4 细胞凋亡
黄芪甲苷对肺纤维化小鼠α-SMA、Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达影响 被引量:1
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作者 黄霂晗 韩佳 +5 位作者 徐昌君 欧江琴 林昶 刘杨 丁倩 杨长福 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2019年第1期47-50,共4页
目的:观察黄芪甲苷对肺纤维小鼠肺组织α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达的影响,并初步探讨黄芪甲苷对小鼠肺纤维化抑制作用的机制。方法:通过于气管内滴注博来霉素(10mL/kg)建立肺纤维化模型,空白组为正常饲养的小鼠,假手... 目的:观察黄芪甲苷对肺纤维小鼠肺组织α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达的影响,并初步探讨黄芪甲苷对小鼠肺纤维化抑制作用的机制。方法:通过于气管内滴注博来霉素(10mL/kg)建立肺纤维化模型,空白组为正常饲养的小鼠,假手术组用生理盐水代替。造模后的C57bl/6小鼠随机分成空白组(正常饲养)、模型组(博来霉素造模+0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃)、假手术组(生理盐水造模+0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃)、黄芪甲苷组(博来霉素造模+黄芪甲苷灌胃)和阳性对照地塞米松组(博来霉素造模+地塞米松灌胃),分别于第14天和第28天处死小鼠后取肺组织,行HE染色和Masson染色,观察小鼠肺组织肺纤维化程度,碱性水解法检测小鼠肺组织内羟脯氨酸的含量,免疫组织化学染色法检测小鼠肺组织α-SMA的表达,免疫蛋白印记法检测小鼠肺组织α-SMA、COL1、COL3的表达。结果:与空白组、假手术组相比,模型组肺纤维化分级较高,肺组织炎症反应明显,羟脯氨酸含量明显升高(P<0.05)。与模型组相比,黄芪甲苷组内的羟脯氨酸含量降低(P<0.05),肺组织内α-SMA、COL1、COL3的表达减少(P<0.05),地塞米松组的表达降低不明显(P>0.05)。结论:黄芪甲苷对肺纤维化的干预作用明显,其机制可能与减少成纤维细胞的生成和抑制胶原蛋白的沉积有关。 展开更多
关键词 肺纤维化 黄芪甲苷 Α-平滑肌动蛋白 羟脯氨酸 胶原蛋白
黄芪甲苷调控自噬抑制缺氧缺糖/复氧复糖HT22细胞凋亡 预览
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作者 张怡 靳晓飞 +4 位作者 周晓红 董贤慧 张颖 于文涛 高维娟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期519-524,共6页
目的 探讨黄芪甲苷通过调控自噬,对缺氧缺糖/复氧复糖HT22细胞凋亡的影响。方法 将HT22细胞随机分为正常组(Control)、模型组(Model)、溶剂对照组(DMSO)、黄芪甲苷组(AS-IV)、黄芪甲苷组加正常细胞组(AS-IV+N)、黄芪甲苷加自噬抑制剂组(... 目的 探讨黄芪甲苷通过调控自噬,对缺氧缺糖/复氧复糖HT22细胞凋亡的影响。方法 将HT22细胞随机分为正常组(Control)、模型组(Model)、溶剂对照组(DMSO)、黄芪甲苷组(AS-IV)、黄芪甲苷组加正常细胞组(AS-IV+N)、黄芪甲苷加自噬抑制剂组(AS-IV+3-MA)、自噬抑制剂组(3-MA)、自噬激活剂组(Rapa)。除正常组外,其余各组细胞均在缺氧缺糖6h后复氧复糖。镜下观察细胞形态,CCK-8法检测细胞存活率,LDH法检测细胞损伤,免疫荧光染色检测细胞凋亡。结果 与正常组比较,模型组细胞胞体突触减少,细胞皱缩,细胞间连接减少;细胞存活率明显降低,LDH漏出率、Bax/Bcl-2明显升高(P<0.01)。与模型组比较,AS-IV组、Rapa组细胞存活率明显升高,LDH漏出率、Bax/Bcl-2明显降低(P<0.01);3-MA组细胞存活率明显降低,Bax/Bcl-2明显升高(P<0.01);AS-IV+3-MA组无明显差异。结论 黄芪甲苷可通过激活自噬,抑制缺氧缺糖/复氧复糖HT22细胞凋亡。 展开更多
关键词 缺氧缺糖/复氧复糖 自噬 细胞凋亡 黄芪甲苷 HT22细胞 脑缺血/再灌注损伤
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黄芪甲苷对2型糖尿病肾病大鼠肾组织PI3K/Akt/FoxO1信号调控的影响 被引量:3
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作者 马可可 鞠营辉 +2 位作者 陈清青 李维祖 李卫平 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期74-81,共8页
目的:研究黄芪甲苷对2型糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及其对磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/叉头框转录因子O亚族1(FoxO1)信号的调控作用,探讨黄芪甲苷保护2型糖尿病肾病的机制。方法:6周高糖高脂饮食后,给予链脲佐菌素(STZ)... 目的:研究黄芪甲苷对2型糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及其对磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/叉头框转录因子O亚族1(FoxO1)信号的调控作用,探讨黄芪甲苷保护2型糖尿病肾病的机制。方法:6周高糖高脂饮食后,给予链脲佐菌素(STZ)一次性腹腔注射(35 mg·kg^-1)建立2型糖尿病大鼠模型,随机分为正常组,模型组,黄芪甲苷(20,40,80 mg·kg^-1)组及盐酸二甲双胍(阳性药)组。连续给药8周后检测各组大鼠体质量,肾脏指数,血糖,24 h尿蛋白,尿微量白蛋白,尿肌酐,血肌酐及血尿素氮含量的变化;苏木素-伊红(HE)染色观察肾脏组织病理形态学变化;马松(Masson)三色染色观察胶原表达水平;过碘酸六胺银(PASM)染色观察基底膜的变化;免疫组化检测磷酸化FoxO1(p-FoxO1)蛋白表达;蛋白质免疫印迹法(Western blot)分析PI3K/Akt/FoxO1信号蛋白及自噬标记蛋白PI3K,微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅰ/Ⅱ,B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)/腺病毒E1B 19 k Da相互作用蛋白3(BNIP3),Beclin1,p-Akt,Akt表达水平。结果:与正常组比较,模型组肾小球基底膜增厚,细胞外基质增多,系膜扩张,胶原蛋白显著增加,PI3K/Akt/FoxO1信号增强(P <0. 01),自噬活性减弱(P <0. 01);与模型组比较,黄芪甲苷中、高剂量肾脏组织病变明显改善,明显抑制肾组织PI3K,Akt及FoxO1磷酸化水平(P <0. 05,P <0. 01),同时增强自噬反应,上调BNIP3,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1的表达(P <0. 05,P <0. 01)。结论:黄芪甲苷可能通过抑制PI3K/Akt/FoxO1信号增加肾组织细胞自噬活性,减缓了2型糖尿病肾病的发展进程。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 黄芪甲苷 磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/叉头框转录因子O亚族1(FoxO1)信号通路 自噬
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