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GSK-3β抑制剂通过wnt/β-catenin调控OPG在DKD大鼠肾组织中作用
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作者 周谊霞 杨文晴 +2 位作者 李龙 于燕妮 夏菁 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期738-741,共4页
目的探讨糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)对糖尿病肾病(DKD)大鼠肾组织中骨保护素(OPG)相关通路的调控作用及意义。方法将大鼠随机分为对照组、模型组和氯化锂干预组。考马斯亮蓝法检测大鼠24h尿蛋白;肾脏组织切片进行苏木素-伊红染色,观... 目的探讨糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)对糖尿病肾病(DKD)大鼠肾组织中骨保护素(OPG)相关通路的调控作用及意义。方法将大鼠随机分为对照组、模型组和氯化锂干预组。考马斯亮蓝法检测大鼠24h尿蛋白;肾脏组织切片进行苏木素-伊红染色,观察大鼠肾脏病理改变;RT-qPCR及免疫组化检测各组大鼠肾组织中β-catenin和OPG的mRNA及蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠血糖水平[(22.63±2.08)mmol/L]及24h蛋白尿[(154.17±20.65)g]明显升高,肾组织病理变化明显;与模型组比较,氯化锂干预组大鼠血糖水平[(17.98±1.09)mmol/L]及24h蛋白尿[(107.2±31.15)g]明显降低,大鼠肾组织病理改变减轻;与对照组比较,模型组、氯化锂干预组大鼠肾细胞胞浆内β-catenin表达量[分别为(2.2±0.31)、(2.0±0.20)]明显升高(P<0.05);与对照组比较,模型组大鼠肾组织中OPG/RANKLmRNA表达量(0.6±0.06)降低;与模型组比较,氯化锂干预组大鼠肾组织中OPG/RANKLmRNA表达量(1.6±0.12)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论氯化锂可减轻大鼠糖尿病肾病改变,缓解糖尿病肾病进程,其机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路,升高OPG表达有关。 展开更多
关键词 糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β) 氯化锂 糖尿病肾病(DKD) 骨保护素(OPG) WNT/Β-CATENIN 信号通路
肿瘤抑制因子DACT2在神经胶质瘤细胞上皮间质转化中的作用机制 预览
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作者 卢雅丽 万宏军 +2 位作者 王琳 刘君星 王翀 《西安交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期387-392,共6页
目的探讨肿瘤抑制因子β-连环蛋白抑制基因2(DACT2)对神经胶质瘤细胞上皮间质转化的影响及潜在机制。方法以神经胶质瘤细胞U87、U251、A172和SHG44为研究对象,5-Aza处理后RT-PCR检测细胞中DACT2基因表达,甲基化特异PCR法(MSP)检测细胞中... 目的探讨肿瘤抑制因子β-连环蛋白抑制基因2(DACT2)对神经胶质瘤细胞上皮间质转化的影响及潜在机制。方法以神经胶质瘤细胞U87、U251、A172和SHG44为研究对象,5-Aza处理后RT-PCR检测细胞中DACT2基因表达,甲基化特异PCR法(MSP)检测细胞中DACT2启动子甲基化状态,Western blot检测细胞中DACT2蛋白表达;构建过表达DACT2的U87细胞株,并用Westernblot进行验证。Transwell实验检测细胞迁移侵袭能力,Western blot检测细胞中上皮间质标记物E-cadherin、Vimentin、MMP2及Wnt/β-cadherin通路蛋白active-β-cadherin、p-β-cadherin和total β-cadherin的表达变化。结果5-Aza处理后4株细胞中均观察到DACT2基因表达,而未处理的U87和U251细胞中无DACT2基因表达,A172和SHG44细胞中DACT2有微弱表达。U87和U251细胞中DACT2启动子区完全甲基化,而A172和SHG44细胞中部分甲基化。U87和U251细胞中DACT2蛋白和mRNA表达低于A172和SHG44细胞(P<0.05)。转染pcDNA3.1-DACT2载体后,U87细胞中DACT2表达显著增加(P<0.05),过表达DACT2的U87细胞构建成功。过表达DACT2能抑制U87细胞上皮间质转化、侵袭迁移并阻断Wnt/β-catenin通路激活(P<0.05)。结论神经胶质瘤细胞中DACT2启动子呈高度甲基化状态,外源过表达DACT2能够促进胶质瘤细胞U87上皮间质转化和侵袭迁移,其机制可能与DACT2调控Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 β-连环蛋白抑制基因2(DACT2) 上皮间质转化 WNT/Β-CATENIN通路
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富血小板血浆与脉冲电磁场联合应用治疗骨关节炎:理论与临床研究的进展 预览
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作者 向小娜 余曦 +3 位作者 刘岩 蒋红英 何成奇 何红晨 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第30期4868-4874,共7页
背景:骨关节炎是影响人类健康最常见的关节疾患之一,最新的诊疗指南写入物理治疗与关节腔内注射,其中脉冲电磁场治疗与富血小板血浆注射治疗极具潜力,但作用机制及其能否联合使用促进骨关节炎患者康复尚不清楚。目的:总结目前脉冲电磁... 背景:骨关节炎是影响人类健康最常见的关节疾患之一,最新的诊疗指南写入物理治疗与关节腔内注射,其中脉冲电磁场治疗与富血小板血浆注射治疗极具潜力,但作用机制及其能否联合使用促进骨关节炎患者康复尚不清楚。目的:总结目前脉冲电磁场联合富血小板血浆注射治疗骨关节炎的相关基础研究带来的理论进展,以及临床应用研究现状。方法:以“Wnt,β-catenin,NF-κB,TLRs,PEMFs,PRP,platelet-rich plasma,OA,osteoarthritis”为关键词,检索了2009至2019年EMbase,Medline,CENTRAL以及万方数据库中相关文献。初检得到文章448篇,筛选后对其中49篇文章进行分析。结果与结论:①脉冲电磁场增加细胞中Ca^2+浓度改变膜电位,可能引起细胞死亡,也可能在骨形成点沉积、加速骨与软骨的形成;脉冲电磁场对髓核细胞分泌白细胞介素1和肿瘤坏死因子α有抑制作用;②富血小板血浆中有非活性的多种生长因子存在,可帮助软骨分化,从而达到保护关节的作用,同时降低了体液和细胞免疫反应;富血小板血浆中的炎症调节因子抑制软骨细胞核因子通路激活的炎症反应,从而抑制白细胞介素1介导的无菌性炎症因子的表达和软骨基质的降解;③Toll样受体介导骨髓细胞分化能影响骨代谢,激活的Wnt/β-连环蛋白信号通路可减少骨吸收,同时增加骨形成,Wnt/β-连环蛋白信号传导的介质和下游效应子在骨关节炎中增加;④上述研究证实,目前研究发现两者联合治疗骨关节炎的可能机制包括:共同抑制白细胞介素1及肿瘤坏死因子α等炎症因子表达,通过Wnt/β-连环蛋白信号通路协同促进血管内皮生长因子分泌、可能共同调控Toll样受体表达,但尚无研究对比富血小板血浆注射治疗与脉冲电磁场在骨关节炎的疗效,未来除对两者作用机制的研究之外,或许可以将两者结合应用于骨关节炎患者。 展开更多
关键词 WNT 骨代谢 脉冲电磁场 富血小板血浆 血管内皮生长因子 骨关节炎 Wnt/β-连环蛋白 细胞核因子通路 Toll样受体 综述
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微小RNA-452通过Wnt/β-连环蛋白对胃癌细胞上皮-间充质转化的影响
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作者 李东亮 李志猛 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1590-1593,共4页
目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-452对胃癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响及分子机制.方法收集我院经手术切除的胃癌组织和癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析miR-452 mRNA表达水平;培养胃癌细胞SGC-7901,通过转染mi... 目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-452对胃癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响及分子机制.方法收集我院经手术切除的胃癌组织和癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析miR-452 mRNA表达水平;培养胃癌细胞SGC-7901,通过转染miR-452模型物miR-452(miR-452组),采用Transwell分析细胞的EMT;采用生物信息学软件和双荧光素酶报告基因分析miR-452的靶基因变化;采用蛋白质印迹法(Western blot)分析EMT相关的标志物水平以及miR-452介导的信号通路.结果与癌旁组织(1.10±0.20)比较,胃癌组织中miR-452 mRNA表达水平(3.07±0.31)显著增加,差异有统计学意义(t=3.912,P<0.05).与对照组细胞(75.19±9.11)比较,miR-452组细胞迁移能力(171.34±14.56)显著增加,差异均有统计学意义(t=3.109,P<0.05).miR-452组细胞侵袭数量生物信息学和双荧光素酶报告基因显示糖原合成酶激酶3β(GSK3β)是miR-452的靶基因.与对照组细胞[(1.12±0.18)、(1.10±0.22)]比较,miR-452组细胞GSK3β表达水平(0.22±0.10)和磷酸化β-连环蛋白(p-β-catenin)蛋白水平(0.25±0.10)显著下调,差异有统计学意义(t=4.011、3.994,P<0.05).与对照组细胞[(0.51±0.10)、(0.22±0.09)、(0.19±0.10)]比较,miR-452组细胞EMT标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)水平(0.10±0.05)显著下调,N-cadherin和波形蛋白(Vimentin)蛋白表达水平[(0.59±0.12)、(0.55±0.11)]显著增加,差异有统计学意义(t=2.812、2.981、2.911,P<0.05).结论miR-452可靶向下调GSK3β水平,激活Wnt/β-catenin信号通路,促进胃癌细胞EMT发生. 展开更多
关键词 微小RNA-452 胃癌 糖原合成酶激酶3Β Wnt/β-连环蛋白 上皮-间充质转化
海参脑苷脂对前脂肪细胞分化的抑制作用及机制 预览
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作者 王美玲 刘亚轩 +3 位作者 黎晨曼 刘媛媛 符萌 王静凤 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第9期152-158,共7页
目的:探究海参脑苷脂在3T3-L1小鼠脂肪细胞增殖以及分化过程中发挥的作用,并研究其具体机理。方法:运用噻唑蓝法探究海参脑苷脂在3T3-L1细胞正常生长过程中发挥的作用;并通过乳酸脱氢酶实验探究海参脑苷脂对前脂肪细胞是否存在毒性作用... 目的:探究海参脑苷脂在3T3-L1小鼠脂肪细胞增殖以及分化过程中发挥的作用,并研究其具体机理。方法:运用噻唑蓝法探究海参脑苷脂在3T3-L1细胞正常生长过程中发挥的作用;并通过乳酸脱氢酶实验探究海参脑苷脂对前脂肪细胞是否存在毒性作用;诱导3T3-L1细胞为成熟细胞,采用油红O染色法以及测定成熟脂肪细胞中甘油三酯的含量来探究海参脑苷脂是否会改变脂肪细胞的脂质积累情况;反转录荧光实时定量聚合酶链式反应(reverse transcriptionreal-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)测定过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activatedreceptor gamma,PPARγ)、CCAAT/增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPα)以及Wnt/β-catenin通路相关基因的表达水平。通过Western blotting法测定β-catenin蛋白向核内转移的情况。结果:海参脑苷脂能极显著抑制3T3-L1细胞的增殖以及分化(P<0.01),且对细胞无毒性作用。qRT-PCR结果显示,海参脑苷脂可极显著抑制脂肪细胞PPARγ和C/EBPα以及Wnt/β-catenin通路相关基因的表达(P<0.01)。Western blotting结果表明,海参脑苷脂可以极显著提高脂肪细胞核内β-catenin蛋白的表达水平(P<0.01)。结论:海参脑苷脂可以明显地抑制3T3-L1细胞的增殖以及分化,产生这种效果的机理和转录因子PPARγ、C/EBPα以及Wnt/β-catenin通路相关。 展开更多
关键词 海参脑苷脂 3T3-L1细胞 分化 WNT/Β-CATENIN
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HOXA4调控Wnt/β-catenin信号通路对裸鼠移植胶质瘤的抑制作用 预览
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作者 周海霞 侯力键 +3 位作者 王正明 田宇 韩亮 李密馥 《吉林大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期474-478,I0001共6页
目的:建立人胶质瘤荷瘤裸鼠模型,探讨HOXA4对胶质瘤U251细胞体内生长的影响以及对Wnt/β-catenin信号通路的调控作用及其机制。方法:采用慢病毒转染,建立胶质瘤U251细胞稳转同源异型盒基因A4 (HOXA4)siRNA细胞系(si-HOXA4)和稳转空载体... 目的:建立人胶质瘤荷瘤裸鼠模型,探讨HOXA4对胶质瘤U251细胞体内生长的影响以及对Wnt/β-catenin信号通路的调控作用及其机制。方法:采用慢病毒转染,建立胶质瘤U251细胞稳转同源异型盒基因A4 (HOXA4)siRNA细胞系(si-HOXA4)和稳转空载体阴性对照U251细胞系(si-NC)。取对数生长期U251、si-NC和si-HOXA4细胞接种于BALB/c裸鼠颈背部皮下,建立荷瘤裸鼠模型,命名为对照组、si-NC组和si-HOXA4组。观察各组裸鼠成瘤情况并绘制肿瘤生长曲线;培养21d处死裸鼠后剥离肿瘤组织,测量肿瘤体积和质量;qRT-PCR法检测各组裸鼠肿瘤组织中HOXA4、CTNNB1和Gsk3βmRNA相对表达量;免疫组织化学(IHC)法检测各组裸鼠肿瘤组织中HOXA4、β-catenin、Gsk3β、CyclinD1和P53蛋白表达水平。结果:si-HOXA4组裸鼠肿瘤体积和质量小于si-NC组和对照组(P<0.05);si-HOXA4组裸鼠肿瘤组织中HOXA4mRNA相对表达量和HOXA4蛋白表达水平低于其他2组(P<0.05);与si-NC组和对照组比较,si-HOXA4组裸鼠肿瘤组织中CTNNB1mRNA相对表达量降低(P<0.05),β-catenin和CyclinD1蛋白表达水平亦降低(P<0.05),但Gsk3β和P53蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:抑制人胶质瘤U251细胞HOXA4表达可在体内通过Wnt/β-catenin信号通路调控CyclinD1和P53蛋白的表达,从而抑制荷瘤裸鼠肿瘤的生长。 展开更多
关键词 胶质瘤 同源异型盒基因A4 WNT/Β-CATENIN 信号通路 裸鼠 细胞周期蛋白D1 P53蛋白
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miR-144-3p通过靶向FZD4阻断Wnt/β-catenin通路抑制肝癌Huh-7细胞的恶性生物学行为
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作者 黄健 黄海欣 +1 位作者 黄东宁 覃莉 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CSCD 北大核心 2019年第10期1101-1106,共6页
目的:探讨miR-144-3p通过阻断卷曲受体4(FZD4)/Wnt/β-catenin信号通路对肝癌Huh-7细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其作用机制。方法:收集2012年3月至2017年7月在柳州市工人医院手术切除的18例肝癌患者的癌组织及相应的癌旁组织标本,以及... 目的:探讨miR-144-3p通过阻断卷曲受体4(FZD4)/Wnt/β-catenin信号通路对肝癌Huh-7细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其作用机制。方法:收集2012年3月至2017年7月在柳州市工人医院手术切除的18例肝癌患者的癌组织及相应的癌旁组织标本,以及肝癌细胞系Huh-7、SMMC7721和MHCC97和人正常肝上皮细胞株THLE-3,用qPCR检测肝癌组织及细胞系中miR-144-3p的表达水平。将miR-144-3p mimics/inhibitor和FZD4敲降载体转染至Huh-7细胞中,用CCK-8、Transwell、划痕愈合实验和Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测Huh-7细胞的增殖、迁移和凋亡水平。用双荧光素酶报告基因验证miR-144-3p和FZD4的靶向关系。结果:在肝癌组织和细胞系中miR-144-3p均呈低表达(P<0.05或P<0.01)。过表达miR-144-3p可显著抑制Huh-7细胞增殖、迁移并诱导细胞凋亡(均P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证明miR-144-3p靶向作用FZD4并下调其表达水平。体外实验进一步证实,过表达miR-144-3p靶向FZD4并阻断Wnt/β-catenin通路,进而抑制Huh-7细胞增殖、迁移和促进细胞凋亡(均P<0.01)。结论:miR-144-3p通过阻断FZD4/Wnt/β-catenin通路抑制肝癌Huh-7细胞的恶性生物学行为,为肝癌诊断或治疗提供了潜在分子靶点。 展开更多
关键词 肝癌 HUH-7细胞 miR-144-3p 卷曲受体4 WNT/Β-CATENIN 增殖 迁移 凋亡
RUNX3通过Wnt/β-catenin通路抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移与侵袭 预览
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作者 魏瑜 马东慎 +2 位作者 向臣希 陈诚 刘慧 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期509-513,共5页
目的探讨人类RUNT相关转录因子3(RUNX3)对乳腺癌细胞的抑癌作用,分析其对Wnt/β-catenin通路的调控机制。方法在乳腺癌细胞中RUNX3过表达或敲减后,通过CCK-8实验评估细胞增殖能力;通过划痕、Transwell实验评估细胞迁移和侵袭能力;通过... 目的探讨人类RUNT相关转录因子3(RUNX3)对乳腺癌细胞的抑癌作用,分析其对Wnt/β-catenin通路的调控机制。方法在乳腺癌细胞中RUNX3过表达或敲减后,通过CCK-8实验评估细胞增殖能力;通过划痕、Transwell实验评估细胞迁移和侵袭能力;通过免疫共沉淀和Western blot法检测RUNX3对Wnt/β-catenin通路的调控作用。结果与对照组相比,过表达RUNX3后的乳腺细胞增殖能力、细胞迁移和侵袭能力均明显降低,敲减RUNX3后上述指标显著增高。在乳腺癌细胞中,RUNX3能够与β-catenin结合抑制Wnt/β-catenin通路下游靶基因Cyclin D1和c-Myc的表达。结论 RUNX3能够在体外通过抑制Wnt/β-catenin通路而抑制乳腺癌细胞活性,并揭示了RUNX3抑制乳腺癌的新机制,提示其可能成为Wnt通路相关乳腺癌的潜在靶点。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 增殖 迁移 侵袭 RUNX3 WNT/Β-CATENIN
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赖氨酸甲基转移酶SETD6在肿瘤发生发展中的研究进展 预览
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作者 周慧 陈攀 +2 位作者 许静 陈孝 陈杰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1054-1057,共4页
甲基化酶SET家族是治疗肝癌、乳腺癌、非小细胞肺癌等肿瘤潜在的基因靶点,近年来,其重要家族成员赖氨酸甲基转移酶SETD6的功能及作用引起人们的关注。SETD6不仅能够提高肿瘤细胞的生存、增殖及迁移能力,还能维持胚胎干细胞的自我更新、... 甲基化酶SET家族是治疗肝癌、乳腺癌、非小细胞肺癌等肿瘤潜在的基因靶点,近年来,其重要家族成员赖氨酸甲基转移酶SETD6的功能及作用引起人们的关注。SETD6不仅能够提高肿瘤细胞的生存、增殖及迁移能力,还能维持胚胎干细胞的自我更新、维持干细胞特性。其机制与SETD6通过甲基化PAK4蛋白激活Wnt/β-catenin通路,以及影响和调控NF-κB通路相关联。该文综述了SETD6在肿瘤发生、发展中的功能及其相关的分子基础、信号通路等研究,探讨其作为治疗肿瘤新靶点的应用前景。 展开更多
关键词 SETD6 SET 肿瘤 信号通路 PKA4 WNT/Β-CATENIN NF-ΚB
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ZNF436在胃癌中的表达及调控WNT/β-catenin对胃癌细胞迁移及侵袭的影响 预览
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作者 秦文 赵楠楠 +1 位作者 韩永焕 徐亚君 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2019年第3期222-227,共6页
目的探讨锌指蛋白ZNF436在人胃癌细胞系和组织中的相对表达,及ZNF436对胃癌细胞MKN-28迁移和侵袭的影响和机制。方法以人胃癌细胞系,胃癌、配对癌旁组织和正常人胃组织为研究对象;实时定量PCR和免疫组织化学法分析ZNF436在胃癌细胞系,... 目的探讨锌指蛋白ZNF436在人胃癌细胞系和组织中的相对表达,及ZNF436对胃癌细胞MKN-28迁移和侵袭的影响和机制。方法以人胃癌细胞系,胃癌、配对癌旁组织和正常人胃组织为研究对象;实时定量PCR和免疫组织化学法分析ZNF436在胃癌细胞系,胃癌、配对癌旁组织和正常人胃组织中的相对表达;在线数据分析ZNF436的表达与预后关系;ZNF436-siRNA(实验组)、NC-siRNA(对照组)质粒转染人胃癌MKN028细胞,转染后48 h实时定量PCR验证ZNF436的敲降效率,Transwell实验分析敲降ZNF436后对实验组细胞迁移和侵袭影响;裸鼠转移瘤实验验证ZNF436体内对细胞转移的影响;免疫蛋白印迹实验验证ZNF436对WNT/β-catenin信号通路的影响。结果与正常胃上皮细胞系相比,ZNF436在人胃癌细胞系中高表达( P <0.001);同时与癌旁组织和正常人胃组织相比,ZNF436在胃癌组织中高表达( P <0.001);在线数据发现ZNF436的表达与胃癌的预后有关( P =0.0028);ZNF436基因表达越高,患者预后越差( P <0.001);与对照组相比,实验组细胞的迁移和侵袭能力明显受到抑制( P <0.001);实验组中裸鼠转移瘤的瘤大小和体积明显低于实验组( P < 0.001);低表达ZNF436后,WNT/β-catenin信号通路及其下游细胞因子明显受到抑制。结论ZNF436作为潜在癌基因在人胃癌组织中表达上调,通过促进WNT/β-catenin信号通路参与胃癌的进程。 展开更多
关键词 胃癌 ZNF436 癌基因 迁移 侵袭 WNT/Β-CATENIN
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LRP6调控经典Wnt信号通路作用于阿霉素诱导的心肌细胞损伤 预览
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作者 梁莉莹 路静 刘培庆 《中山大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期503-509,共7页
【目的】探究LRP6和经典Wnt/β-catenin信号通路在阿霉素心肌病中的作用及其机制。【方法】采用阿霉素(Dox)刺激H9C2细胞12h,在细胞水平上建立阿霉素心肌病模型;12只SD大鼠分为两组(各6只),腹腔分别注射生理盐水和Dox,在动物水平上建立... 【目的】探究LRP6和经典Wnt/β-catenin信号通路在阿霉素心肌病中的作用及其机制。【方法】采用阿霉素(Dox)刺激H9C2细胞12h,在细胞水平上建立阿霉素心肌病模型;12只SD大鼠分为两组(各6只),腹腔分别注射生理盐水和Dox,在动物水平上建立阿霉素心肌病;Westernblot和qPCR检测相应蛋白和mRNA表达水平变化;通过转染siRNA靶向沉默LRP6表达;采用罗丹明123、Hoechst和Mitotracker染色分别检测线粒体膜电位、细胞核固缩以及线粒体肿胀;通过流式细胞技术检测凋亡比率变化。【结果】在细胞及动物水平上,成功建立阿霉素心肌病模型;Dox引起LRP6的mRNA和蛋白水平下降;敲低LRP6加重阿霉素引起的心肌细胞凋亡和线粒体损伤;Dox和沉默LRP6均下调β-catenin,激活β-catenin可以逆转阿霉素造成的心肌损伤。【结论】Dox通过诱导LRP6表达下调,抑制了经典Wnt/β-catenin信号通路,从而引起心肌细胞凋亡和线粒体损伤。 展开更多
关键词 LRP6 阿霉素 心肌病 WNT/Β-CATENIN 凋亡 线粒体
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DKK-1在大鼠牙囊细胞体外的表达作用研究 预览
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作者 颜露 袁晓娟 +2 位作者 左婕 盛丽 刘奕杉 《口腔医学》 CAS 2019年第10期902-906,共5页
目的观察Wnt/β-catenin通路的抑制因子DKK-1(Dickkopf-1)在牙囊细胞中的表达,探究在牙囊细胞成骨向分化形成过程中DKK-1的特异性表达机制,探讨其与牙齿萌出和颌骨生长发育的相关性。方法采用酶消化法分离培养牙囊细胞并纯化。将牙囊细... 目的观察Wnt/β-catenin通路的抑制因子DKK-1(Dickkopf-1)在牙囊细胞中的表达,探究在牙囊细胞成骨向分化形成过程中DKK-1的特异性表达机制,探讨其与牙齿萌出和颌骨生长发育的相关性。方法采用酶消化法分离培养牙囊细胞并纯化。将牙囊细胞分为两组,对照组:普通α-MEM培养基培养,实验组:α-MEM+成骨诱导液培养。分别培养5 d后,采用免疫细胞化学法观察DKK-1的表达分布;分别培养10、20 d后采用Western Blot检测DKK-1、β-catenin、Runx2的蛋白表达水平。结果免疫组化显示DKK-1在实验组表达较对照组减弱。Western Blot检测结果示实验组Wnt通路的关键因子DKK-1条带蛋白表达明显下调,β-catenin蛋白及成骨相关蛋白Runx2的表达明显上调,培养时间越长实验结果与对照组区别越明显。结论 Wnt通路DKK-1在牙囊细胞中有表达且受成骨分化影响,体现Wnt/β-catenin通路中DKK-1的抑制作用,研究结果将为牙齿萌出和颌骨生长发育形成机制提供实验依据。 展开更多
关键词 DKK-1 牙囊细胞 WNT/Β-CATENIN 成骨细胞 破骨细胞
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lncRNA BCAR4通过调节Wnt/β-catenin信号通路对胃癌发生发展的影响 预览
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作者 黄鸥翔 施烯 崔静 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第22期3954-3959,共6页
目的:探讨lncRNA BCAR4通过调节Wnt/β-catenin信号通路调控胃癌细胞的增殖和凋亡。方法:通过实时定量PCR法检测lncRNA BCAR4在胃癌组织和胃癌细胞中的表达;免疫组化方法分析胃组织中c-myc和cyclin D1蛋白的表达;通过MTT、克隆形成和流... 目的:探讨lncRNA BCAR4通过调节Wnt/β-catenin信号通路调控胃癌细胞的增殖和凋亡。方法:通过实时定量PCR法检测lncRNA BCAR4在胃癌组织和胃癌细胞中的表达;免疫组化方法分析胃组织中c-myc和cyclin D1蛋白的表达;通过MTT、克隆形成和流式细胞术分别检测lncRNA BCAR4对胃癌细胞SGC7901增殖和凋亡的影响,并通过Western blot法检测lncRNA BCAR4敲除前后对SGC7901细胞中c-myc、cyclin D1蛋白以及Wnt/β-catenin信号通路的影响。结果:相比于癌旁组织以及胃黏膜上皮细胞,lncRNA BCAR4在人胃癌组织和胃癌细胞中表达显著升高(P<0.01);同时,c-myc和cyclin D1蛋白的表达在胃癌组织和胃癌细胞中也有所增加,尤其在SGC7901胃癌细胞中上调最为显著(P<0.01);lncRNA BCAR4敲除能够显著降低细胞活力,促进细胞凋亡(P<0.01)。lncRNA BCAR4敲除能够显著抑制Wnt/β-catenin信号通路的活化(P<0.01),进而降低其下游增殖相关蛋白c-myc和cyclin D1的表达(P<0.01)。结论:降低lncRNA BCAR4能够通过抑制Wnt/β-catenin信号通路的活化,从而降低下游c-myc和cyclin D1蛋白表达,导致胃癌细胞的增殖抑制,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 胃癌 lncRNA BCAR4 WNT/Β-CATENIN C-MYC CYCLIN D1
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中医药靶向干预Wnt/β-catenin信号通路治疗胃癌的研究进展 预览
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作者 余莹 胡玲 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期471-476,共6页
该文从中药单体、中药复方两方面对中医药将Wnt/β-catenin信号通路作为胃癌治疗靶点的相关理论及研究进展作一综述,并就现阶段Wnt/β-catenin信号通路治疗胃癌的中医药研究现状提出问题与思考,以期为中医药靶向干预该信号通路治疗胃癌... 该文从中药单体、中药复方两方面对中医药将Wnt/β-catenin信号通路作为胃癌治疗靶点的相关理论及研究进展作一综述,并就现阶段Wnt/β-catenin信号通路治疗胃癌的中医药研究现状提出问题与思考,以期为中医药靶向干预该信号通路治疗胃癌的科研工作提供一定启发,并为临床抗胃癌中医药的应用提供参考依据. 展开更多
关键词 WNT/Β-CATENIN 中医 胃癌 研究进展
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地龙提取液对结肠炎相关性结肠癌Wnt/β-catenin信号通路的影响
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作者 杨德芳 孙可丰 +1 位作者 韩莹 张岩 《中国中西医结合消化杂志》 CAS 2019年第1期25-30,共6页
[目的]探讨地龙提取液对结肠炎相关性结肠癌疗效及其作用机制。[方法]小鼠随机分为空白组、模型组、地龙提取液(低、中、高剂量组)和美沙拉嗪组,并采用AOM/DSS法复制结肠炎相关性结肠癌癌前病变动物模型。治疗结束后分别测量各组小鼠胸... [目的]探讨地龙提取液对结肠炎相关性结肠癌疗效及其作用机制。[方法]小鼠随机分为空白组、模型组、地龙提取液(低、中、高剂量组)和美沙拉嗪组,并采用AOM/DSS法复制结肠炎相关性结肠癌癌前病变动物模型。治疗结束后分别测量各组小鼠胸腺、脾脏及结肠的质量,并光镜下观察结肠组织病理学改变,免疫印迹法检测结肠组织中Wnt/β-catenin信号通路中相关蛋白的表达。[结果]地龙提取液能够显著增加小鼠胸腺的质量和结肠长度(P<0.05),减少脾脏和结肠质量(P<0.05),降低AOM/DSS诱导小鼠的成瘤率(P<0.05),改善CAC小鼠结肠组织的病理学形态;此外,地龙提取液能够显著减少CAC小鼠结肠组织中Wnt3a、phospho-GSK-3β、β-catenin、c-Myc、cyclin-D1蛋白表达(P<0.05),增加APC、Axin1、GSK-3β、phospho-β-catenin、Bcl-2蛋白的表达(P<0.05)。[结论]地龙提取液能够预防结肠炎后结肠癌的发生与发展,其作用机制是通过抑制Wnt/β-catenin信号通路的活化实现的。 展开更多
关键词 地龙提取液 结肠炎相关性结肠癌 wnt/βcatenin 信号通路
miRNA-31靶向SFRP1介导Wnt/β-catenin信号通路对人胃癌细胞生物学特性的调控作用 预览
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作者 沈二栋 翁洁 +5 位作者 文芳 肖佳 罗盘 谢王踢 粟钰淇 黄辉云 《肿瘤药学》 CAS 2019年第4期578-585,共8页
目的探讨miR-31靶向SFRP1调控Wnt/β-catenin信号通路及其在胃癌增殖、迁移和侵袭过程中的作用。方法收集300例胃癌患者的癌组织及癌旁5 cm的正常组织标本作为研究对象。实时定量PCR(qRT-PCR)法比较胃癌组织及癌旁正常组织中miR-31的表... 目的探讨miR-31靶向SFRP1调控Wnt/β-catenin信号通路及其在胃癌增殖、迁移和侵袭过程中的作用。方法收集300例胃癌患者的癌组织及癌旁5 cm的正常组织标本作为研究对象。实时定量PCR(qRT-PCR)法比较胃癌组织及癌旁正常组织中miR-31的表达水平,免疫组化法检测SFRP1蛋白表达水平。在人胃癌细胞系MKN45中转染miR-31过表达和抑制剂、SFRP-1过表达质粒及siRNA,Western blotting法检测SFRP1和β-catenin表达,CCK8法检测细胞增殖水平。Transwell法检测细胞体外迁移和侵袭能力。Luciferase荧光素酶报告基因法检测Wnt/β-catenin通路活化情况。结果胃癌组织及其细胞系MKN45中miR-31表达水平明显上调,SFRP1阳性表达率降低(P<0.05)。体外转染miR-31 inhibitor可抑制MKN45细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.05);转染miR-31 mimic可抑制SFRP1表达,促进β-catenin表达,从而促进细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。结论miR-31在胃癌组织中呈高表达,可抑制SFRP1表达,激活Wnt/β-catenin通路,从而抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 miR-31 SFRP1 WNT/Β-CATENIN 胃癌 MKN45 增殖 迁移 侵袭
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有氧运动介导lincRNA-ROR靶向Wnt/β-catenin信号通路对脑缺血后神经血管单元的机制研究 预览
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作者 张宇 陈伟 +1 位作者 毛海峰 陈嘉勤 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2019年第2期47-53,共7页
为检测lincRNA-ROR在脑缺血后脑组织中的基因表达,并探讨有氧运动干预下lincRNA-ROR通过Wnt/β-catenin通路对脑缺血后神经血管单元的改善作用机制,构建慢性脑缺血模型小鼠20只,随机分成有氧运动跑台组(TM)和模型组(M),并设假手术组(SO)... 为检测lincRNA-ROR在脑缺血后脑组织中的基因表达,并探讨有氧运动干预下lincRNA-ROR通过Wnt/β-catenin通路对脑缺血后神经血管单元的改善作用机制,构建慢性脑缺血模型小鼠20只,随机分成有氧运动跑台组(TM)和模型组(M),并设假手术组(SO),每组10只。通过神经行为学评估、ELISA酶联免疫法、Nissl染色及qRT-PCR技术研究有氧运动介导下小鼠脑缺血后神经血管单元的变化。神经行为学评估显示构模小鼠脑组织损伤得分显著增加(P<0.01);运动干预后,脑组织损伤得分M>TM>SO。M组血清中NSE和S100B含量显著增加(P<0.01);TM组BDNF含量上升(P<0.01)。M组脑组织神经元结构出现大面积损伤,核固缩、空泡、核深染严重,TM组优于M组。相比M组,TM组中Wnt5a和β-catenin mRNA表达上升;GSK-3β及lincRNA-ROR mRNA明显下降(P<0.01)。说明有氧运动干预能抑制linc-ROR高表达,促进Wnt/β-catenin信号通路发挥调控作用,调节神经元分化和微血管发生,缓解或减轻缺血后脑损伤症状。 展开更多
关键词 有氧运动 长链非编码RNA WNT/Β-CATENIN 脑缺血 神经血管单元
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Wnt/β-连环蛋白信号通路在哺乳动物毛囊发育中的调控作用 预览
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作者 李凡 陈晓阳 +1 位作者 杨国雨 李福昌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期2186-2194,共9页
毛囊是哺乳动物皮肤上重要附属结构,是控制被毛生长最重要的器官。毛囊发育主要包括毛囊形态发生以及毛囊再生。Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路在毛囊发育中起重要作用,引起学者及研究机构的广泛关注。本文综述了Wnt/β-catenin... 毛囊是哺乳动物皮肤上重要附属结构,是控制被毛生长最重要的器官。毛囊发育主要包括毛囊形态发生以及毛囊再生。Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路在毛囊发育中起重要作用,引起学者及研究机构的广泛关注。本文综述了Wnt/β-catenin信号通路调节机制和核内激活,Wnt/β-catenin对毛囊形态发生和毛囊再生的调控作用以及成骨细胞抑制因子(Dkk)和营养物质对毛囊发育的调控作用。为Wnt/β-catenin信号通路调控哺乳动物毛囊发育的研究提供借鉴。 展开更多
关键词 毛囊 WNT/Β-CATENIN 形态发生 再生 Dkk
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肾衰泄浊汤及组方对UUO大鼠Wnt4/β-catenin信号通路作用的影响
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作者 沈金峰 黄伟 +1 位作者 罗富里 晏子友 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第7期1637-1641,I0024-I0028共10页
目的:基于Wnt/β-catenin信号通路探讨肾衰泄浊及组方抗肾间质纤维化的作用机制及肾间质纤维化中医本虚标实的病机。方法:将72只SD大鼠根据体质量随机分为模型组、假手术组、肾衰泄浊汤组、祛邪方组、补虚方组及贝那普利组,每组12只,采... 目的:基于Wnt/β-catenin信号通路探讨肾衰泄浊及组方抗肾间质纤维化的作用机制及肾间质纤维化中医本虚标实的病机。方法:将72只SD大鼠根据体质量随机分为模型组、假手术组、肾衰泄浊汤组、祛邪方组、补虚方组及贝那普利组,每组12只,采用单侧输尿管梗阻(UUO)动物模型。模型复制成功后,肾衰泄浊汤组、祛邪方组、补虚方组分别按照肾衰泄浊汤及其组方比例配制,浓缩剂灌胃给药,贝那普利组大鼠给贝那普利灌胃,模型组及空白组大鼠均予生理盐水灌胃,分别于术后7、14 d处死大鼠。检测24 h尿蛋白定量,血清肌酐、尿素氮水平,免疫组化检测Wnt4、β-catenin、E-cadherin含量,原位杂交检测Wnt4、β-catenin mRNA表达。结果:与假手术相比,同时期模型组大鼠24 h尿蛋白定量升高(P<0.05),与模型组相比,经各组治疗后24 h尿蛋白定量减少(P<0.05);与假手术相比,模型组血尿素氮、血清肌酐均升高(P<0.05),与模型组相比,经各组治疗后血尿素氮、清肌酐均有所下降(P<0.05);与假手术组相比,同时期模型组Wnt4、β-catenin表达升高(P<0.05),E-cadherin表达下降。与同时期模型组相比,各治疗组Wnt4、β-catenin表达下降(P<0.05),E-cadherin表达升高(P<0.05),肾衰泄浊汤组优于其他组(P<0.05)。与假手术组相比,同时期模型组及各治疗组Wnt4mRNA、β-cateninmRNA表达升高(均P<0.05),与模型组相比,各治疗组Wnt4mRNA、β-cateninmRNA表达下降(均P<0.05),尤以肾衰泄浊汤组效果最好。结论:肾衰泄浊汤及其组方可能是通过抑制Wnt4/β-catenin信号通路,达到改善肾功能,延缓肾间质纤维化的进展,且肾间质纤维化中医病机为本虚标实。 展开更多
关键词 肾间质纤维化 肾衰泄浊汤 WNT/Β-CATENIN
抑癌基因DKK2抑制儿童肾母细胞瘤细胞增殖的机制研究 预览 被引量:1
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作者 袁桂霞 李岩 +2 位作者 冯婉琪 夏小娟 李旭 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2019年第1期14-20,共7页
目的探讨WNT信号通路调控因子DKK2在儿童肾母细胞瘤细胞和组织中的表达,及对儿童肾母细胞瘤细胞SK-NEP-1增殖的影响,并初步探讨其作用机制。方法通过RT-PCR、qRT-PCR和免疫蛋白印迹实验分析DKK2在儿童肾母细胞瘤细胞系和组织中的相对表... 目的探讨WNT信号通路调控因子DKK2在儿童肾母细胞瘤细胞和组织中的表达,及对儿童肾母细胞瘤细胞SK-NEP-1增殖的影响,并初步探讨其作用机制。方法通过RT-PCR、qRT-PCR和免疫蛋白印迹实验分析DKK2在儿童肾母细胞瘤细胞系和组织中的相对表达;将DKK2过表达的SK-NEP-1细胞设定为实验组(DKK2组),空白对照质粒组设定为对照组(Vector组),分别转染pcDNA3.1(+)-Flag-DKK2质粒(实验组)和pcDNA3.1(+)-Flag-Vector质粒(对照组)至SK-NEP-1细胞系,RT-PCR和免疫蛋白印迹实验验证DKK2的过表达;通过CCK-8实验和细胞克隆实验分析DKK2对细胞增殖的影响;流式细胞周期和凋亡实验验证DKK2过表达对细胞增殖的作用机制;裸鼠成瘤实验验证DKK2体外对细胞增殖的影响;通过qRT-PCR、WB及免疫组化分析DKK2对细胞增殖抑制的作用机制。结果与正常肾上皮组织相比,DKK2 mRNA在儿童肾母细胞瘤细胞和组织中的中表达明显下调,差异具有统计学意义(P<0.001);与对照组相比(100%),转染后24、48、72h实验组细胞活性受到明显的抑制(P<0.05),同时实验组细胞克隆形成明显受到抑制(31.11±2.14)%(P<0.05);流式细胞实验发现,与对照组相比,实验组细胞明显阻滞于G1期(P<0.001),实验组中细胞凋亡率明显升高(P<0.001);与对照组相比,过表达DKK2后裸鼠肿瘤和体积大小明显降低(P<0.001);过表达DKK2后,active-β-catenin及下游的基因受到了明显抑制。结论DKK2在人皮肤肾母细胞瘤组织中表达下调,可能通过拮抗Wnt/β-catenin信号通路参与肾母细胞瘤的机制。 展开更多
关键词 儿童肾母细胞瘤 DKK2 抑癌基因 细胞增殖 WNT/Β-CATENIN
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