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缺氧缺血性脑损伤大鼠小肠黏膜屏障功能变化观察 预览
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作者 罗燕军 黄娟 许慧 《山东医药》 CAS 2019年第18期44-47,共4页
目的观察缺氧缺血性脑损伤(hypoxic -ischemic brain damage,HIBD)大鼠小肠黏膜屏障功能的变化,并探讨其机制。方法 90只SD大鼠随机分成正常组、假手术组和模型组,每组30只。模型组制备HIBD模型,假手术组大鼠仅予颈总动脉分离,正常组大... 目的观察缺氧缺血性脑损伤(hypoxic -ischemic brain damage,HIBD)大鼠小肠黏膜屏障功能的变化,并探讨其机制。方法 90只SD大鼠随机分成正常组、假手术组和模型组,每组30只。模型组制备HIBD模型,假手术组大鼠仅予颈总动脉分离,正常组大鼠不予手术。分别于造模后第1、7、21天取三组大鼠,摘除眼球取血,处死后取回肠末端肠段(每个时间点10只)。ELISA 法检测各组大鼠眼球血清D-乳酸(D-LA)、肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)。肠黏膜染色后显微镜下观察并记录小肠绒毛高度和隐窝深度;免疫荧光染色法测算肠黏膜跨膜蛋白Occludin、紧密连接蛋白ZO-1的积分光密度IOD值。结果 与正常组、假手术组比较,造模后第1、7、21天HIBD 组眼球血清D-LA、iFABP水平均升高,小肠绒毛高度和隐窝深度均降低,回肠末端Occludin、ZO-1的IOD值均降低( P 均< 0.05 )。造模后各时段HIBD组眼球血清D-LA、iFABP水平、小肠绒毛高度和隐窝深度及回肠末端Occludin、ZO-1的IOD值间比较差异均无统计学意义( P 均>0.05)。结论 HIBD大鼠眼球血清D-LA、iFABP水平升高,回肠末端肠绒毛高度和隐窝深度降低,可能与回肠末端组织Occludin、ZO-1表达降低有关。 展开更多
关键词 肠黏膜屏障 肠黏膜 小肠黏膜 回肠末端 缺血缺氧性脑病 D-乳酸 肠脂肪酸结合蛋白 跨膜蛋白 紧密连接蛋白
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电针对STZ-DM大鼠胰腺组织CHOP、PERK、ATF6、IREmRNA表达和蛋白含量的影响 预览
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作者 石菲菲 查必祥 +1 位作者 袁爱红 曹江鹏 《中医药临床杂志》 2019年第1期111-114,共4页
目的:探讨电针对STZ-DM大鼠机体胰腺组织CHOP、PERK、ATF6、IREmRNA表达和蛋白含量的影响。方法:通过高糖高脂饲料喂养并腹腔注射低剂量STZ制备DM大鼠模型,按RGB分层将造模成功的大鼠随机分为模型组、电针组和药物组,与空白组对照。干... 目的:探讨电针对STZ-DM大鼠机体胰腺组织CHOP、PERK、ATF6、IREmRNA表达和蛋白含量的影响。方法:通过高糖高脂饲料喂养并腹腔注射低剂量STZ制备DM大鼠模型,按RGB分层将造模成功的大鼠随机分为模型组、电针组和药物组,与空白组对照。干预治疗后监测大鼠RBG、检测胰腺组织CHOP、PERK、ATF6、IRE1mRNA表达及蛋白含量。结果:治疗前后进行对比,电针组和药物组大鼠RBG较前明显降低;干预治疗结束后,电针组和药物组大鼠RBG仍高于空白组,虽仍低于模型组,但无统计学差异。模型组CHOP、PERK、ATF6、IRE1mRNA表达与空白组相比均显著升高,蛋白含量也明显升高;电针组CHOP、PERK、ATF6、IRE1mRNA表达明显低于模型组,高于空白组,蛋白含量明显低于模型组,高于空白组;电针组CHOP、PERK、ATF6、IRE1mRNA表达和蛋白含量与药物组无统计学差异。结论:电针可通过下调内质网应激PERK、ATF6、IRE1mRNA表达和蛋白含量,进而减少CHOP激活,进而缓解STZ-DM大鼠胰腺组织ERS。 展开更多
关键词 糖尿病大鼠 电针 C/EBP同源蛋白 跨膜蛋白
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一种利用荧光蛋白mNeonGreen2鉴定EI24蛋白拓扑结构的方法
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作者 刘奇 徐平勇 袁琳 《生物化学与生物物理进展》 CSCD 北大核心 2018年第12期1280-1287,共8页
方便且精准地检测跨膜蛋白拓扑结构,尤其是跨膜片段的氨基(N-)和羧基(C-)端的朝向,有利于发现新的蛋白质与蛋白质之间的相互作用,并进一步揭示蛋白质重要的生物学功能.自组装荧光蛋白已被广泛用于观察蛋白质与蛋白质之间的相互作用、标... 方便且精准地检测跨膜蛋白拓扑结构,尤其是跨膜片段的氨基(N-)和羧基(C-)端的朝向,有利于发现新的蛋白质与蛋白质之间的相互作用,并进一步揭示蛋白质重要的生物学功能.自组装荧光蛋白已被广泛用于观察蛋白质与蛋白质之间的相互作用、标记细胞内源蛋白质并实现mRNA定位的可视化.本文扩展了自组装荧光蛋白的应用,将自组装荧光蛋白mNeonGreen2与定点标记技术相结合,以确定跨膜蛋白的拓扑结构.通过该方法,第一次清楚地证明了EI24的N端和C端均朝向细胞质方向.此外,该方法可用于确定定位于其他细胞器且结构尚未解析的跨膜蛋白的拓扑结构. 展开更多
关键词 mNeonGreen2 定点标记 跨膜蛋白 EI24
蛋白质转导4型-铜锌超氧物歧化酶融合蛋白在人星形胶质细胞中穿膜能力和保护作用的研究 被引量:2
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作者 孟丽华 薛荣亮 +2 位作者 杨毅猛 雷晓鸣 党莎杰 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2017年第8期682-687,共6页
目的观察蛋白质转导4型-铜锌超氧物歧化酶融合蛋白(protein transduetion domain4-Cu,Zn superoxidedismutase fusion protein, PTD4-Cu,Zn-SOD)能否穿膜进入人星形胶质细胞、能否减轻人星形胶质细胞的缺氧损伤。方法①Westem blot:... 目的观察蛋白质转导4型-铜锌超氧物歧化酶融合蛋白(protein transduetion domain4-Cu,Zn superoxidedismutase fusion protein, PTD4-Cu,Zn-SOD)能否穿膜进入人星形胶质细胞、能否减轻人星形胶质细胞的缺氧损伤。方法①Westem blot:从干预时间(15、30、60min)和干预浓度(0.5、1.0、2.0μmol/L)两个方面观察融合蛋白能否穿膜。②实验分组:制备细胞缺氧损伤模型,按完全随机法分为对照组、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)组(SOD组)和PTD442u,Zn-SOD组(PTD4-SOD组),对照组加DMEM(dulbecco’s modified eagle’s medium,DMEM)培养基(不含血清),其余两组分别加入含有Cu,Zn-SOD和PTD4-Cu,Zn-SOD终浓度为2μmol/L的DMEM培养基,三组干预时间均为1h,用AnnexinV/PI凋亡试剂盒流式测凋亡,观察融合蛋白能否减轻细胞缺氧损伤。结果①对照组各组未发现明显的蛋白条带,SOD组各个干预时间点(15、30、60min)与对照组比较,差异无统计学意义(P〉0.05);PTD4-SOD组在15、30min两个时间点与对照组比较,差异无统计学意义(P〉0.05);在干预60min时与对照组比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。②对照组各组未发现明显的蛋白条带,SOD组的各个剂量(0.5、1.0、2.0μmol/L)与对照组比较,差异无统计学意义(P〉0.05);PTD4-SOD组在0.5、1.0μmol/L两个浓度与对照组比较,差异无统计学意义(P〉0.05);在浓度为2μmol/L时与对照组比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。③对照组的凋亡率为(27.03±0.50)%,SOD组凋亡率为(23.29±0.58)%,和对照组比较,差异有统计学意义(P〈0.05);而PTD4-SOD组凋亡率为(12.06±0.19)%,与对照组比较,差异有统计学意义(P〈0.05);PTD4-SOD组和SOD组比较,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论①PTD4-Cu,Zn-SOD能进入体� 展开更多
关键词 超氧化物歧化酶 人星形胶质细胞 穿膜蛋白 凋亡
基于人工囊泡研究跨膜蛋白的结构和功能综述
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作者 徐磊 马金龙 《质量探索》 2017年第2期58-66,共9页
综述近年来利用脂质体人工囊泡对跨膜蛋白在结构和功能方面的研究成果和方法,分类介绍了合成多肽片段的实验方法、融膜多肽及细胞穿膜肽的融膜机理,并通过疏水片段整合跨膜蛋白结构及功能的研究方法。
关键词 脂质体 人工囊泡 跨膜蛋白 结构功能
BmMP54基因在家蚕组织的表达模式及与BmNPV多角体蛋白基因的融合表达分析 被引量:1
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作者 严婷婷 于滨 +2 位作者 潘海涛 舒建洪 张耀洲 《蚕业科学》 CSCD 北大核心 2017年第4期587-593,共7页
从家蚕蛹c DNA文库中筛选到一个403 bp的未知功能基因,将其命名为Bm MP54(Gen Bank登录号:DY231399.1)。该基因序列包含312 bp的开放阅读框,编码由103个氨基酸残基组成的蛋白质,生物信息学预测其含有2个跨膜区域,等电点及分子质量分... 从家蚕蛹c DNA文库中筛选到一个403 bp的未知功能基因,将其命名为Bm MP54(Gen Bank登录号:DY231399.1)。该基因序列包含312 bp的开放阅读框,编码由103个氨基酸残基组成的蛋白质,生物信息学预测其含有2个跨膜区域,等电点及分子质量分别为9.90和10.463 k D。将Bm MP54与家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)的多角体蛋白基因(Polh)融合后分别连接到原核表达载体p GEX-4T-1和家蚕杆状病毒表达系统转移载体p Fast BacTMHTB中构建重组质粒,并分别在大肠埃希菌BL21(DE3)和家蚕卵巢培养细胞(Bm N)中表达。原核表达的融合蛋白通过调节p H值、阴离子交换层析等纯化获得了65 k D的重组融合蛋白Polh-Bm MP54,通过Western blotting可在重组杆状病毒感染的Bm N细胞中检测到42 k D左右的Bm MP54重组蛋白,表明已按设计要求高效表达并纯化获得目的蛋白质。实时荧光定量PCR分析显示Bm MP54在家蚕5龄幼虫的气门和脂肪体组织中表达量最高,在表皮和头部的表达量最低。上述研究结果有利于后续探讨Bm MP54在家蚕生长发育过程中的生物学功能。 展开更多
关键词 家蚕MP54基因 跨膜蛋白 家蚕核型多角体病毒多角体蛋白基因 融合表达 实时荧光定量PCR 表达谱
AtTMEA418 plays important roles in pollen tube and vegetative growth in Arabidopsis
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作者 Xiao-Ying Dou Ke-Zhen Yang +4 位作者 Zhao-Xia Ma Li-Qun Chen Xue-Qin Zhang Jin-Rong Bai De Ye 《植物学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2016年第7期679-692,共14页
In flowering plants, pollen tube growth is essential for delivery of male gametes into the female gametophyte or embryo sac for double fertilization. Although many genes have been identified as being involved in the p... In flowering plants, pollen tube growth is essential for delivery of male gametes into the female gametophyte or embryo sac for double fertilization. Although many genes have been identified as being involved in the process, the molecular mechanisms of pollen tube growth remains poorly understood.In this study, we identified that the Arabidopsis Transmembrane Protein 18(AtT MEM18) gene played important roles in pollen tube growth. The AtT MEM18 shares a high similarity with the Transmembrane 18 proteins(TMEM18s) that are conserved in most eukaryotes and may play important roles in obesity in humans. Mutation in the AtT MEM18 by a Ds insertion caused abnormal callose deposition in the pollen grains and had a significant impact on pollen germination and pollen tube growth.AtT MEM18 is expressed in pollen grains, pollen tubes, root tips and other vegetative tissues. The pollen-rescued assays showed that the mutation in AtT MEM18 also caused defects in roots, stems,leaves and transmitting tracts. AtT MEM18-GFP was located around the nuclei. Genetic assays demonstrated that the localization of AtT MEM18 around the nuclei in the generative cells of pollen grains was essential for the male fertility.Furthermore, expression of the rice TMEM18-homologous protein(OsT MEM18) driven by LAT52 promoter could recover the fertility of the Arabidopsis attmem18 mutant. These results suggested that the TMEM18 is important for plant growth in Arabidopsis. 展开更多
关键词 ARABIDOPSIS male gametophyte PLANT POLLEN TMEM18 transmembrane protein
华支睾吸虫CsTMP630基因的克隆、表达及感染者抗体亚类分析 预览
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作者 苑林 钟伟国 +2 位作者 尹红玲 宋天章 胡旭初 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第21期3507-3510,共4页
目的:对华支睾吸虫跨膜蛋白63c基因进行克隆、表达,并通过感染者抗体亚类分析评价其免疫学诊断效果。方法:根据CsTMP63c(GenBank序列号:AF093242)基因序列,拼接其多个跨膜区片段。人工合成新基因CsTMP630,制备抗原免疫小鼠。检... 目的:对华支睾吸虫跨膜蛋白63c基因进行克隆、表达,并通过感染者抗体亚类分析评价其免疫学诊断效果。方法:根据CsTMP63c(GenBank序列号:AF093242)基因序列,拼接其多个跨膜区片段。人工合成新基因CsTMP630,制备抗原免疫小鼠。检测抗体效价,建立抗体检测系统,初步分析感染者针对DTMP630的特异性抗体亚类。结果:从CscDNA文库中筛选出CsTMP63c基因,全长2013bp,由大肠杆菌表达、纯化,得到分子量为38kD的重组蛋白。免疫大鼠后,抗体效价较低;感染者的抗体亚类分布以IgG4类为主,与各项常规生化和血液指标未发现有显著相关性。结论:CsTMP630在大肠杆菌中高效表达,具有较好的免疫原性。但血清诊断价值不理想。 展开更多
关键词 华支睾吸虫 跨膜蛋白 免疫应答
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基于分类器集成的跨膜蛋白两亲螺旋区域位置预测 预览 被引量:2
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作者 郜法启 於东军 沈红斌 《南京理工大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期431-437,共7页
为提高跨膜蛋白两亲螺旋区域(Amphipathic helices,AHs)预测的精度,基于蛋白质位置特异性得分矩阵、二级结构以及疏水矩,提出了一种新的衡量两亲性的螺旋周期性(Helix periodicity,HP)特征;利用Mem Brain预测器滤除跨膜区域片段并... 为提高跨膜蛋白两亲螺旋区域(Amphipathic helices,AHs)预测的精度,基于蛋白质位置特异性得分矩阵、二级结构以及疏水矩,提出了一种新的衡量两亲性的螺旋周期性(Helix periodicity,HP)特征;利用Mem Brain预测器滤除跨膜区域片段并使用下采样的方法,降低了AHs的搜索空间;在此基础上训练基于支持向量机(Support vector machine,SVM)的集成分类器用于AHs预测。为了客观评价AHs的预测性能,首次构建了领域内较为完备可用的标准数据集。在此数据集上的实验结果表明所提方法优于其他AHs预测方法。 展开更多
关键词 跨膜蛋白 两亲螺旋区域 位置特异性得分矩阵 疏水矩 分类器集成
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ADAM17在膜蛋白胞外结构域剪切机制中的作用
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作者 王超男 董洁 邵宁生 《医学分子生物学杂志》 CAS 2016年第6期345-349,共5页
ADAM17蛋白属于解聚素金属蛋白酶家族,是Ⅰ型多结构域跨膜蛋白,表达于多种组织及肿瘤细胞中。该蛋白是剪切跨膜蛋白胞外结构域的关键蛋白,对膜结合型蛋白的翻译后修饰及蛋白活性的产生具有重要的调节作用,与免疫反应、肿瘤的发生发... ADAM17蛋白属于解聚素金属蛋白酶家族,是Ⅰ型多结构域跨膜蛋白,表达于多种组织及肿瘤细胞中。该蛋白是剪切跨膜蛋白胞外结构域的关键蛋白,对膜结合型蛋白的翻译后修饰及蛋白活性的产生具有重要的调节作用,与免疫反应、肿瘤的发生发展、神经发育、病毒传播及衰老等过程密切相关。对ADAM17跨膜蛋白胞外段的剪切功能及其生物学意义进行深入研究,对相关疾病的诊断与治疗具有重要的理论与临床应用价值。 展开更多
关键词 ADAM17蛋白 跨膜蛋白 胞外剪切 翻译后修饰
植物锌铁转运蛋白ZIP家族的生物信息学分析 预览 被引量:2
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作者 傅明辉 陈肖丽 《广东农业科学》 2015年第1期124-127,132,F0003共6页
锌铁转运蛋白ZIP家族成员对于控制植物体内锌铁平衡具有非常重要的作用。采用生物信息的方法对植物锌铁转运蛋白序列结构、性质及分子进化进行分析预测,结果发现,该蛋白由226~459个氨基酸组成,是一个多次跨膜蛋白,多数成员定位干细胞质... 锌铁转运蛋白ZIP家族成员对于控制植物体内锌铁平衡具有非常重要的作用。采用生物信息的方法对植物锌铁转运蛋白序列结构、性质及分子进化进行分析预测,结果发现,该蛋白由226~459个氨基酸组成,是一个多次跨膜蛋白,多数成员定位干细胞质膜、叶绿体膜及液泡膜上,其分子进化历程与物种进化历程并不一致,提示该蛋白序列分歧时间较早。研究结果能够为该蛋白基因的克隆、结构和功能的进一步深入研究提供理论基础。 展开更多
关键词 锌铁转运蛋白 生物信息 跨膜蛋白 分子进化分析
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TnphoA and Its Use in Transposon Mutagenesis 预览
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作者 D. K. Das E. W. Nester 《微生物学(英文)》 2014年第1期15-19,共5页
TnphoA construct was derived from the transposon Tn5, which contained a kanamycin resistance gene flanked by two IS50 elements. This construct contains a version of the alkaline phosphatase gene with its signal sequen... TnphoA construct was derived from the transposon Tn5, which contained a kanamycin resistance gene flanked by two IS50 elements. This construct contains a version of the alkaline phosphatase gene with its signal sequence and promoter deleted, which will result in a blue colony phenotype on X-phos (5-bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate toluidine salt) containing media when secreted into the periplasm. This secretion can occur only if the TnphoA has been inserted into a gene with a signal sequence which directs that gene-product to leave the cytosol. Additionally, the transposon must be inserted into the correct orientation and the same reading frame as the gene has been inserted into. TnphoA’s transposition activity derives from that of this Tn5 transposon by a conservative mechanism in a relatively rare but highly regulated process. The phoA portion of the TnphoA construct came from Escherichia coli K12 where it coded for the periplasmic protein alkaline phosphatase. This enzyme must be secreted from the cytoplasm in order to demonstrate activity and its secretion is determined by the presence of a signal sequence at its amino-terminal end. TnphoA mutagenesis is the identification of new genes that code for transmembrane or secreted proteins. TnphoA is an extremely useful construct, which along with other derivatives of the transposon Tn5 is used extensively in transposon mutagenesis based genetic analysis. TnphoA will ensure its continued significance and prominence in the area of transposon mutagenesis. TnphoA has been used to isolate new chromosomal genes, whose products are secreted, as in the case of some virulence genes in Agrobacterium tumefaciens and symbiotic genes in Rhizobium meliloti. 展开更多
关键词 TnphoA MUTAGENESIS AGROBACTERIUM TUMEFACIENS TRANSPOSITION TRANSMEMBRANE PROTEINS Fusion PROTEINS Tranposase Protein
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Selective aggregation of membrane proteins by membrane-mediated interactions
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作者 LI Shuang Yang ZHANG Xian Ren WANG Wen Chuan 《中国科学:化学英文版》 SCIE EI CAS 2014年第12期1683-1689,共7页
有在细胞的膜的膜蛋白质的不同类型,并且他们中的大多数必须正确地为他们的细胞的功能集合进适当的簇。在这个工作,没有特定的蛋白质蛋白质吸引力,我们由消散的粒子动力学方法为不同的膜蛋白质的选择聚集建议物理机制。一个调停膜的... 有在细胞的膜的膜蛋白质的不同类型,并且他们中的大多数必须正确地为他们的细胞的功能集合进适当的簇。在这个工作,没有特定的蛋白质蛋白质吸引力,我们由消散的粒子动力学方法为不同的膜蛋白质的选择聚集建议物理机制。一个调停膜的相互作用可以与理想的混合,非理想的混合和膜蛋白质的不同类型的 demixing 导致不同蛋白质簇,取决于由那些蛋白质的膜变丑的类似的程度。 展开更多
关键词 相互作用 膜蛋白 过膜 介导 汇聚 动力学方法 蛋白质 细胞功能
Claudin蛋白在紧密连接中的作用机制及与疾病的关系 预览 被引量:4
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作者 邢晓辉 李力仙 +3 位作者 郭天林 梁里昂 贾玉龙 刘龙 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 2013年第23期229-231,共3页
Claudin蛋白是组成细胞间紧密连接的一种跨膜蛋白,它的功能主要是调节屏障结构的渗透性。细胞间紧密连接的稳定性与Claudin蛋白间及Claudin蛋白与其他紧密连接蛋白间复杂的相互作用有关。Claudin蛋白的转录及表达的调节机制有磷酸化、... Claudin蛋白是组成细胞间紧密连接的一种跨膜蛋白,它的功能主要是调节屏障结构的渗透性。细胞间紧密连接的稳定性与Claudin蛋白间及Claudin蛋白与其他紧密连接蛋白间复杂的相互作用有关。Claudin蛋白的转录及表达的调节机制有磷酸化、去磷酸化等。人类很多疾病与Claudin蛋白的突变有关,至今为止,关于Claudin蛋白的了解不仅停留在紧密连接的组成部分,更多的是其调节方式及其与疾病发生的关系等方面的研究。本文作者对Claudin蛋白的结构、作用方式、与临床疾病的关系及其未来研究的展望作一综述。 展开更多
关键词 紧密连接部 CLAUDIN OCCLUDIN 跨膜蛋白
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磷脂形状对生物膜自组织结构的影响 预览
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作者 周玲 《南通大学学报:自然科学版》 CAS 2013年第2期78-83,共6页
采用聚合物自洽场理论研究了构成生物膜的磷脂分子的形状对含有2个跨膜蛋白的生物膜自组织结构的影响.每个磷脂分子由一条疏水的尾巴和亲水的头构成,可以看作一根接有亲水头的高分子链.由系统自由能求极小,可以得到系统的平衡态构型.结... 采用聚合物自洽场理论研究了构成生物膜的磷脂分子的形状对含有2个跨膜蛋白的生物膜自组织结构的影响.每个磷脂分子由一条疏水的尾巴和亲水的头构成,可以看作一根接有亲水头的高分子链.由系统自由能求极小,可以得到系统的平衡态构型.结果发现,当磷脂分子具有头尾对称的柱状形状时,生物膜形成的是人们熟知的通常形态;而当磷脂分子头部比较大、整体形成锥形结构时,生物膜可以形成孔洞结构.随着2个跨膜蛋白之间距离的增加,生物膜会依次形成两孔洞、三孔洞和四孔洞.通过改变跨膜蛋白不同的疏水程度和磷脂分子头尾的体积比,构造出了生物膜结构形态的相图.这一发现对于理解蛋白质-磷脂膜的相互作用、生物膜的融合分裂以及脂质筏的形成等具有重要的意义. 展开更多
关键词 磷脂 生物膜 自组织 自洽场理论 跨膜蛋白
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尿酸钠结晶影响肾小管上皮细胞的紧密连接 预览 被引量:1
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作者 李慧娟 陈敢 +1 位作者 傅君舟 周姗姗 《中国组织工程研究》 CSCD 2013年第2期286-290,共5页
背景:目前研究来看,尿酸性结石与紧密连接蛋白及肾间质纤维化的关系仍未明确。目的:观察尿酸钠结晶对肾小管上皮细胞紧密连接的影响。方法:配制单钠尿酸钠晶体。将正常大鼠肾小管上皮细胞随机分为对照组和尿酸钠结晶组,分别用无血清... 背景:目前研究来看,尿酸性结石与紧密连接蛋白及肾间质纤维化的关系仍未明确。目的:观察尿酸钠结晶对肾小管上皮细胞紧密连接的影响。方法:配制单钠尿酸钠晶体。将正常大鼠肾小管上皮细胞随机分为对照组和尿酸钠结晶组,分别用无血清培养基和尿酸钠结晶进行培养。免疫荧光和RT-PCR方法检测24,48,72h紧密连接蛋白的表达。结果与结论:与对照组比较,尿酸钠结晶于不同时相刺激NRK-52E细胞后,紧密连接蛋白和mRNA表达下降(P〈0.05),72h时下降显著(P〈0.01),蛋白表达出现重新分布现象。说明尿酸钠结晶可破坏肾小管上皮细胞紧密连接蛋白的结构、功能及导致分布异常。 展开更多
关键词 组织构建 组织构建细胞学实验 尿酸钠结晶 紧密连接 紧密连接蛋白 肾小管上皮细胞 NRK-52E细胞 肾间质纤维化 高尿酸血症 跨膜蛋白 膜周蛋白 大鼠 组织构建图片文章
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真鲷虹彩病毒辽宁株跨膜蛋白(ORF049L)基因的克隆及表达 预览 被引量:4
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作者 孙志鹏 徐祥 +2 位作者 李强 叶仕根 李华 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期148-153,共6页
克隆了真鲷虹彩病毒辽宁株(RSIV-LN09)跨膜蛋白(ORF049L)基因,利用生物信息学方法,对该基因编码蛋白的跨膜区及B细胞抗原位点等特征进行了分析。随后将该序列连接至pET-28a表达载体中,成功构建了pET-28a-ORF049L原核表达质粒。... 克隆了真鲷虹彩病毒辽宁株(RSIV-LN09)跨膜蛋白(ORF049L)基因,利用生物信息学方法,对该基因编码蛋白的跨膜区及B细胞抗原位点等特征进行了分析。随后将该序列连接至pET-28a表达载体中,成功构建了pET-28a-ORF049L原核表达质粒。将表达质粒转化至B121(DE3)菌株后,经IPTG诱导获得大量携带组氨酸标签的融合蛋白。该融合蛋白经变性后采用镍层析柱进行亲和纯化,纯化蛋白再经SDS-PAGE和Western blot分析,确认获得了相对分子质量约为17000的高纯度重组蛋白His-049L。本研究结果为病毒跨膜蛋白单克隆抗体的制备及其功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 虹彩病毒 跨膜蛋白 原核表达
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神经系统中富亮氨酸重复序列跨膜蛋白的功能研究进展 被引量:3
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作者 徐刚 武明花 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第4期 314-318,共5页
富亮氨酸重复序列(leucine-rich repeat,LRR)是一种常见的蛋白质结构域.含有富亮氨酸重复序列的蛋白质简称LRR蛋白.LRR蛋白在真核生物和原核生物的细胞和组织中广泛分布,其定位的特异性以及与之相互作用蛋白质的复杂性,决定了LRR蛋白... 富亮氨酸重复序列(leucine-rich repeat,LRR)是一种常见的蛋白质结构域.含有富亮氨酸重复序列的蛋白质简称LRR蛋白.LRR蛋白在真核生物和原核生物的细胞和组织中广泛分布,其定位的特异性以及与之相互作用蛋白质的复杂性,决定了LRR蛋白功能的多样性.许多LRR蛋白相对特异性表达于神经系统,绝大多数在神经系统中高表达的LRR蛋白属于跨膜蛋白,它们主要作为细胞黏附分子或配体结合蛋白参与突触的形成、神经突起的生长发育、神经递质的转移和释放等神经系统正常生理活动.LRR蛋白的异常表达将会导致神经、精神系统疾病的发生. 展开更多
关键词 富亮氨酸重复序列 跨膜蛋白 神经系统 结构 功能
一种序列相关支持向量机的β桶状跨膜蛋白预测方法 预览 被引量:1
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作者 吴宏杰 吕强 +1 位作者 唐剑锋 钱培德 《计算机科学》 CSCD 北大核心 2012年第8期252-255,共4页
膜蛋白是一种具有重要生物功能的蛋白质,根据蛋白质的序列信息预测其是否属于β桶状跨膜蛋白是结构预测与功能分析的重要先导步骤,也是蛋白质预测领域中的一个挑战性问题。针对这两类问题,提取了208条β桶状跨膜蛋白序列的氨基酸位置与... 膜蛋白是一种具有重要生物功能的蛋白质,根据蛋白质的序列信息预测其是否属于β桶状跨膜蛋白是结构预测与功能分析的重要先导步骤,也是蛋白质预测领域中的一个挑战性问题。针对这两类问题,提取了208条β桶状跨膜蛋白序列的氨基酸位置与理化特征。利用支持向量机(SVM)进行了预测,结果表明二分类精度与相关系数分别达到了88.36%与0.7723。 展开更多
关键词 跨膜蛋白 支持向量机 β桶状
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J亚群禽白血病病毒跨膜蛋白gp37基因克隆与表达
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作者 王晓伟 刘青 +4 位作者 徐晴晴 蔡黎明 王真真 王桂花 成子强 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期 178-184,共7页
禽白血病病毒(ALV)跨膜蛋白(TM)在病毒-细胞融合过程中起关键作用,其蛋白内部存在的许多高度保守序列有可能成为抗病毒的重要靶点。对TM结构和功能的深入研究将为抗禽白血病病毒乃至其它反转录病毒相关制剂的研制提供科学的理论基... 禽白血病病毒(ALV)跨膜蛋白(TM)在病毒-细胞融合过程中起关键作用,其蛋白内部存在的许多高度保守序列有可能成为抗病毒的重要靶点。对TM结构和功能的深入研究将为抗禽白血病病毒乃至其它反转录病毒相关制剂的研制提供科学的理论基础。本研究通过PCR从本实验室分离的ALV-J山东汶上毒株获得表达TM的gp37基因,克隆连接pMD18-T载体并测序,从已构建的质粒pMD18-T-gp37中酶切回收gp37基因,构建重组转移载体pFastBacHTb-gp37。利用昆虫杆状病毒表达系统对gp37基因进行表达,通过间接免疫荧光和Western blot检测gp37基因表达产物,间接免疫荧光显示,重组杆状病毒感染的sf9细胞呈现明显的强阳性反应;Western blot分析,重组病毒感染的sf9细胞蛋白显示出约21kD的阳性条带。结果表明,gp37基因在sf9细胞内表达成功。 展开更多
关键词 J亚群禽白血病病毒 gp37基因 跨膜蛋白 真核表达
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