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SOX6在膀胱癌发生发展中的作用及相关机制 预览
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作者 付真睿 盛飞 +3 位作者 张昌文 常泰浩 陈仕洋 乔宝民 《天津医科大学学报》 2019年第4期373-377,共5页
目的:研究SOX6在膀胱癌中的表达特征,并探讨其在膀胱癌中发挥的生物学效应及相关机制。方法:利用免疫组化检测膀胱癌组织和癌旁组织中的SOX6的表达,蛋白印记(Western blot)及荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测SOX6在膀胱癌细胞(T24、BIU-87... 目的:研究SOX6在膀胱癌中的表达特征,并探讨其在膀胱癌中发挥的生物学效应及相关机制。方法:利用免疫组化检测膀胱癌组织和癌旁组织中的SOX6的表达,蛋白印记(Western blot)及荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测SOX6在膀胱癌细胞(T24、BIU-87、EJ、5637)和正常膀胱上皮细胞(SV-HUC-1)中表达情况。通过SOX6高表达质粒和空载质粒分别转染膀胱癌细胞(EJ、5637),使用Transwell方法检测两组细胞的侵袭能力,采用划痕实验检测迁移能力,Western blot法检测E-cadherin和Vimentin的表达,使用CCK-8实验检测两组细胞的增殖能力,流式细胞术检测凋亡情况,并研究对膀胱癌细胞的蛋白酶体活性的影响。结果:与癌旁组织和正常膀胱上皮细胞相比,膀胱癌组织和细胞中SOX6的表达显著下降,在细胞EJ和5637尤其明显。与对照组对比,转染SOX6高表达质粒的EJ 和5637膀胱癌细胞的迁移、侵袭、增殖能力减弱,凋亡增加,上皮间质转化能力减弱,同时蛋白酶体活性显著降低。结论:SOX6在膀胱癌中作为抑癌基因发生作用,通过降低蛋白酶体活性来抑制膀胱癌的发展。 展开更多
关键词 膀胱癌 SOX6 上皮间质转化 20s蛋白酶体
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独活寄生汤含药血清通过调控SOX6对体外软骨细胞表型的影响
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作者 吴雪华 曹岐新 +2 位作者 徐俊涛 程昊 王小军 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期935-939,共5页
目的研究大鼠独活寄生汤含药血清对体外软骨细胞表型稳定性,SOX6及培养基中细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达的影响。方法取大鼠股骨头软骨帽,提取软骨细胞,并在体外单层传代培养。培养体系为含高、中、低浓度的独活寄生汤含药血清及... 目的研究大鼠独活寄生汤含药血清对体外软骨细胞表型稳定性,SOX6及培养基中细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达的影响。方法取大鼠股骨头软骨帽,提取软骨细胞,并在体外单层传代培养。培养体系为含高、中、低浓度的独活寄生汤含药血清及生理盐水血清,通过免疫组织化学分析软骨细胞表型Ⅱ型胶原的变化及SOX6表达分布,通过Western blot及ELISA检测SOX6、CollagenⅡ、Aggrecan及IL-1β、IL-6、TNF-α表达的变化。结果不同浓度的独活寄生汤含药血清均可对体外培养的软骨细胞产生增殖促进作用,并能增加Ⅱ型胶原稳定其软骨表型;其中以中浓度最为显著(P<0.01);与生理盐水血清组相比,独活寄生汤含药血清可以增加SOX6在细胞核的分布,而且能抑制培养基中细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达水平。结论独活寄生汤含药血清可以上调体外软骨细胞SOX6及抑制炎症因子的表达以稳定软骨细胞的表型。 展开更多
关键词 独活寄生汤 软骨细胞 转录因子SOX6
miR-499-5p干预对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的影响 预览 被引量:1
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作者 吴丽梦 李恩 +4 位作者 周小翠 郭小宏 王蒙 赵英杰 汪涛 《郑州大学学报:医学版》 北大核心 2018年第5期614-618,共5页
目的:探究miR-499-5p在大鼠心肌梗死后心肌细胞凋亡中的作用和相关机制。方法:80只大鼠随机分为假手术组、心肌梗死组(AMI组)、AMI+miR-499-5p mimics组(干预组)、AMI+scramble-NC组(阴性对照组)。TUNEL法检测心肌细胞凋亡;qR... 目的:探究miR-499-5p在大鼠心肌梗死后心肌细胞凋亡中的作用和相关机制。方法:80只大鼠随机分为假手术组、心肌梗死组(AMI组)、AMI+miR-499-5p mimics组(干预组)、AMI+scramble-NC组(阴性对照组)。TUNEL法检测心肌细胞凋亡;qRT-PCR检测Sox6 mRNA表达;Western blot分析Sox6、Bax、Bcl-xl蛋白表达;超声心动图评估心功能;荧光素酶报告实验检测miR-499-5p是否靶向调控Sox6 3’非编码区。结果:与假手术组比较,AMI组心肌细胞凋亡率增高,Sox6 mRNA和蛋白及Bax蛋白表达增高,Bcl-xl蛋白表达降低,EF值和FS值均降低(P均〈0.05);与阴性对照组、AMI组比较,干预组心肌细胞凋亡率、Sox6 mRNA和蛋白及Bax蛋白表达降低,Bcl-xl蛋白表达增高,EF、FS值增加(P均〈0.05)。荧光素酶报告实验提示miR-499-5p特异性调控Sox6 3’末端非编码序列。结论:miR-499-5p可能通过靶向抑制Sox6的表达来抑制心肌细胞凋亡,最终改善心功能。 展开更多
关键词 miR-499-5p 心肌梗死 凋亡 Sox6 BAX BCL-XL 大鼠
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microRNA-499通过靶向调节SOX6抵抗缺氧诱导的神经细胞损伤
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作者 孙小琴 任玲 +3 位作者 孙阳阳 钟祖凌 袁利邦 巩固 《神经解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第1期53-59,共7页
目的:探讨microRNA-499(miR-499)在缺氧诱导的PCI2细胞损伤中的作用及其调控机制。方法:将PCI2细胞随机分为:对照(control)组、缺氧(hypoxia)组、miR-499过表达(miR-499mimic+hypoxia)组、mimic阴性对照(mimic—NC+hypoxi... 目的:探讨microRNA-499(miR-499)在缺氧诱导的PCI2细胞损伤中的作用及其调控机制。方法:将PCI2细胞随机分为:对照(control)组、缺氧(hypoxia)组、miR-499过表达(miR-499mimic+hypoxia)组、mimic阴性对照(mimic—NC+hypoxia)组、SOX6过表达(miR-499mimic+pcDNA3.1-SOX6+hypoxia)组和SOX6阴性对照(miR-499mimic+pcDNA3.1+hypoxia)组。MTr试剂检测细胞活力;乳酸脱氢酶(1acticdehydrogenase,LDH)试剂盒检测LDH漏出量;流式细胞术检测细胞凋亡;荧光素酶活性检测测定miR-499和SOX6的靶向关系;Western Blot检测SOX6的蛋白表达。结果:与对照组相比,缺氧组的miR-499表达下调,细胞活性降低,LDH漏出量增加,细胞凋亡率提高;与缺氧组相比,miR-499过表达组的细胞活性提高,LDH漏出量减少,细胞凋亡率降低。MiR-499直接靶向SOX6,SOX6过表达能够逆转miR-499过表达的作用。结论:MiR-499过表达能够通过直接靶向SOX6来抵抗缺氧诱导的PCI2细胞损伤,提高细胞活力,减少LDH漏出量,并降低细胞凋亡率。 展开更多
关键词 microRNA-499 脑缺血 缺氧 神经细胞损伤 SOX5
微小RNA-199b-3p靶向调控SOX6的表达及其对结肠癌细胞SW620增殖和凋亡的影响 预览 被引量:1
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作者 凌斌勋 阿斯木古丽·阿不都克里木 蔡云 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2017年第6期505-510,共6页
目的 探讨微小RNA-199b-3p(miR-199b-3p)靶向调控SOX6的表达及其对结肠癌细胞SW620增殖及凋亡的影响。方法 采用Lipofectamine脂质体法将miR-199b-3p抑制剂及阴性对照(NC)转染至SW620细胞并分为抑制剂组和NC组,同时以未转染的SW620... 目的 探讨微小RNA-199b-3p(miR-199b-3p)靶向调控SOX6的表达及其对结肠癌细胞SW620增殖及凋亡的影响。方法 采用Lipofectamine脂质体法将miR-199b-3p抑制剂及阴性对照(NC)转染至SW620细胞并分为抑制剂组和NC组,同时以未转染的SW620细胞作对照。采用实时荧光定量PCR(QPCR)法检测3组miR-199b-3p的表达以评价转染效果,MTT法和AnnexinⅤ-FITC/PI流式细胞术检测转染后的增殖活性及凋亡率,QPCR和Western blotting检测各组凋亡相关基因(Bax和caspase-3)及SOX6的mRNA和蛋白水平,构建含有野生型及突变型SOX6-3’UTR的荧光报告基因质粒并采用双荧光素酶报告实验验证miR-199b-3p对SOX6的靶向调控作用。结果 QPCR检测显示,转染48 h后抑制剂组的miR-199b-3p的表达水平为0.526±0.034,低于未转染组的1.009±0.064和NC组的0.960±0.057,差异有统计学意义(P〈0.05);与其余两组相比,抑制剂组转染24、48、72 h后的SW620细胞的增殖活性均降低(P〈0.05);抑制剂组的凋亡率为(37.533±1.459)%,高于未转染组的(6.101±0.663)%和NC组的(8.753±1.061)%,差异均有统计学意义(P〈0.05);抑制剂组SW620细胞的SOX6、Bax、caspase-3 mRNA和蛋白表达水平均高于未转染组和NC组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。双荧光素酶报告基因实验表明miR-199b-3p可显著抑制野生型SOX6-3’UTR的荧光荧光素酶活性,而对突变型质粒转染细胞的荧光素酶活性并无影响。结论 miR-199b-3p可靶向调控SOX6的表达,且下调miR-199b-3p表达可抑制SW620细胞的增殖并诱导凋亡,为结肠癌的治疗提供潜在的分子治疗靶点。 展开更多
关键词 结肠癌 微小RNA-199-3p(miR-199b-3p) SOX6 增殖 凋亡
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SOX6基因3'UTR区野生型和突变型重组质粒的构建与鉴定
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作者 郭燕 朱东丽 +2 位作者 张燕 闫菡 杨铁林 《现代生物医学进展》 CAS 2016年第22期4201-4206,共6页
目的:构建含单核苷酸多态性(SN P)位点rs1 065024的SO X 6基因3'U T R双荧光素酶报告基因载体,并用生物信息学软件预测与rs1 065024位点区域相结合的mi R N A,为进一步研究此SN P位点的功能及mi R N A与SO X 6基因3'U T R区之间的... 目的:构建含单核苷酸多态性(SN P)位点rs1 065024的SO X 6基因3'U T R双荧光素酶报告基因载体,并用生物信息学软件预测与rs1 065024位点区域相结合的mi R N A,为进一步研究此SN P位点的功能及mi R N A与SO X 6基因3'U T R区之间的关系奠定基础。方法:提取人全血基因组D N A,以基因组D N A为模板,通过PC R扩增含SN P位点在内的SO X 6基因3'U T R片段,经过胶回收纯化后,将回收的目的片段插入双荧光素酶报告基因载体p M IR-R E PO R T中,再经D H 5a转化扩增,挑单克隆进行菌落PC R并进行质粒提取,对质粒进行双酶切鉴定,最后进行D N A测序鉴定。针对SN P进行定点突变,构建出野生型和突变型重组质粒,并用生物信息学软件预测出与SN P位点相结合的mi R N A。结果:经单菌落质粒测序验证显示带有T碱基的SO X 6基因3'U T R重组质粒p M IR-R E PO R T-3'U T R-T构建成功;经定点突变,成功将p M IR-R E PO R T-3'U T R-T质粒转变为p M IR-R E PO R T-3'U T R-C,经比对未引入任何其他突变;生物信息学预测显示,rs1 065024位点位于mi R-1 90b、mi R-1 90a-5p、mi R-451 b、mi R-4791与SO X 6基因3'U T R的结合区域,其多态的改变可以影响mi R N A与m R N A的结合效率。结论:本研究成功构建了含SN P位点rs1 065024的p M IR-R E PO R T-SO X 6-3'U T R野生型和突变型重组质粒,为今后SO X 6基因3'U T R的SN P位点的功能及mi R N A与SO X 6基因3'U T R区之间的关系研究奠定基础。 展开更多
关键词 SO X 6基因 单核苷酸多态性 3'非编码区 双荧光素酶报告基因 微小R N A
SOX6和SOX9基因转染对人原发性骨关节炎关节软骨间充质祖细胞增殖和成软骨分化的调控作用 预览 被引量:2
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作者 刘军 王洪伟 +5 位作者 陈语 于海龙 王琪 杨会峰 马骏雄 项良碧 《局解手术学杂志》 2014年第5期477-481,共5页
目的:观察SOX6和SOX9基因转染对原发性OA关节软骨MPCs的促增殖、分化作用,为通过调控关节软骨MPCs以防治原发性OA提供理论依据。方法分别以pAdTrack-CMV-SOX6、SOX9腺病毒穿梭质粒构建SOX6、SOX9基因,并感染原发性OA关节软骨MPCs,比较... 目的:观察SOX6和SOX9基因转染对原发性OA关节软骨MPCs的促增殖、分化作用,为通过调控关节软骨MPCs以防治原发性OA提供理论依据。方法分别以pAdTrack-CMV-SOX6、SOX9腺病毒穿梭质粒构建SOX6、SOX9基因,并感染原发性OA关节软骨MPCs,比较基因感染组和未感染组成软骨诱导分化后TB、Ⅱ型胶原以及Ⅱ型胶原mRNA表达的变化。结果SOX6和SOX9能够分别稳定感染OA关节软骨MPCs;经二者分别感染的关节软骨MPCs成软骨诱导分化后,其TB染色、Ⅱ型胶原染色呈强阳性表达,未基因感染细胞为弱阳性着色;SOX6基因感染原发性OA关节软骨MPCs的Ⅱ型胶原mRNA表达量为未基因感染细胞的3.8倍(P〈0.01),SOX9基因为未感染细胞的5.15倍(P〈0.01)。结论构建的SOX6、SOX9基因序列与基因库报道序列完全一致;SOX6和SOX9能稳定感染原发性OA关节软骨MPCs,并显著促进感染细胞成软骨分化;提示通过适宜浓度的bF-GF、TGF-β1对原发性OA关节软骨MPCs的作用及SOX6和SOX9基因感染,可能具有促进原发性OA关节软骨损伤修复的作用。 展开更多
关键词 骨关节炎 间充质祖细胞 SOX6 SOX9
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A genome-wide association analysis implicates SOX6 as a candidate gene for wrist bone mass
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作者 Shawn LEVY 《中国科学:生命科学英文版》 SCIE CAS 2010年第9期1065-1072,共8页
Osteoporosis is a highly heritable common bone disease leading to fractures that severely impair the life quality of patients.Wrist fractures caused by osteoporosis are largely due to the scarcity of wrist bone mass.... Osteoporosis is a highly heritable common bone disease leading to fractures that severely impair the life quality of patients.Wrist fractures caused by osteoporosis are largely due to the scarcity of wrist bone mass.Here we report the results of a genome-wide association study (GWAS) of wrist bone mineral density (BMD).We examined ~500000 SNP markers in 1000 unrelated homogeneous Caucasian subjects and found a novel allelic association with wrist BMD at rs11023787 in the SOX6 (SRY (sex determining region Y)-box 6) gene (P=9.00×10-5).Subjects carrying the C allele of rs11023787 in SOX6 had significantly higher mean wrist BMD values than those with the T allele (0.485:0.462 g cm-2 for C allele vs.T allele carriers).For validation,we performed SOX6 association for BMD in an independent Chinese sample and found that SNP rs11023787 was significantly associated with wrist BMD in the Chinese sample (P=6.41×10-3).Meta-analyses of the GWAS scan and the replication studies yielded P-values of 5.20×10-6 for rs11023787.Results of this study,together with the functional relevance of SOX6 in cartilage formation,support the SOX6 gene as an important gene for BMD variation. 展开更多
关键词 OSTEOPOROSIS GWAS SOX6 SNPS WRIST BMD
全基因组关联分析显示SOX6为影响腕部骨密度的候选基因 被引量:1
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作者 谭丽君 刘荣 +10 位作者 雷署丰 潘蓉 杨铁林 阎函 培育芳 杨芳 张峰 潘峰 张银萍 LEVY Shawn 邓红文 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2010年第8期685-693,共9页
骨质疏松症是一种高度遗传且极易导致骨折的骨骼疾病,它严重损害患者的生活质量.因骨质疏松而导致的手腕骨折,很大程度是由于手腕部位的骨量低.本研究在1000个不相关的白人中采用Affymetix 500K芯片扫描了500000个SNPs,运用全基因组关... 骨质疏松症是一种高度遗传且极易导致骨折的骨骼疾病,它严重损害患者的生活质量.因骨质疏松而导致的手腕骨折,很大程度是由于手腕部位的骨量低.本研究在1000个不相关的白人中采用Affymetix 500K芯片扫描了500000个SNPs,运用全基因组关联分析(GWAS),发现SOX6为影响手腕骨密度的一个新的基因,SOX6基因中rs11023787与手腕部骨密度关联,P值为9.00×10-5.SOX6基因中,rs11023787 C等位基因携带者的手腕骨密度显著高于T等位基因携带者(C等位基因vs.T等位基因携带者:0.485g/cm2vs.0.462g/cm2).为进一步验证该结果,在中国人群中检测了SOX6基因与骨密度的关联并发现,rs11023787与手腕骨密度显著关联(P=6.41×10-3).对GWAS与验证结果进行荟萃分析,得到联合P值为5.20×10-6,SOX6基因参与软骨形成过程.本结果提示,SOX6基因是影响骨密度变异的重要基因. 展开更多
关键词 骨质疏松症 全基因组关联分析 SOX6 单核苷酸多态性 手腕骨密度
SOX9、L—SOX5、SOX6及Ⅱ型胶原在青少年特发性脊柱侧凸患者顶椎终板软骨的共表达及意义 被引量:3
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作者 马兆龙 邱勇 +3 位作者 朱锋 朱泽章 王守丰 吴波 《中国脊柱脊髓杂志》 CSCD 2008年第8期 621-626,I0001,共7页
目的:观测SOX9、L—SOX5、SOX6及Ⅱ型胶原在青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis,AIS)患者顶椎终板软骨中的表达,探讨其与AIS发生、发展的关系。方法:12例AIS患者,每例在前路手术时截取顶椎终板软骨1份,每份... 目的:观测SOX9、L—SOX5、SOX6及Ⅱ型胶原在青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis,AIS)患者顶椎终板软骨中的表达,探讨其与AIS发生、发展的关系。方法:12例AIS患者,每例在前路手术时截取顶椎终板软骨1份,每份标本均包含凸侧与凹侧。切片行HE染色观察其组织细胞形态;行免疫组织化学染色,应用病理图像分析系统观测凸侧与凹侧的SOX9、L—SOX5、SOX6及Ⅱ型胶原表达的阳性细胞数和累积光密度(IOD),并计算这4个因子表达的相关性。结果:HE染色显示终板软骨有类似四肢长骨骺板样软骨内成骨组织形态.与凹侧比较凸侧显示了更强的软骨细胞活性。凸侧SOX9、L—SOX5、SOX6及Ⅱ型胶原表达的阳性细胞数和前三者的IOD值均明显大于凹侧,差异均有显著性(P〈0.05),凸侧Ⅱ型胶原表达的IOD值与凹侧比较无显著性差异(P〉0.05),4个因子表达的阳性细胞数之间的相关系数为0.46-0.91(P〈0.05),IOD之间为0.64~0.98(P〈0.05),均呈正性相关。结论:AIS患者顶椎凸侧与凹侧终板软骨的组织形态学及SOX9、L—SOX5、SOX6和Ⅱ型胶原的表达均存在差异,其可能是脊柱不同部位间机械应力差异下的继发性变化:4个因子的共表达异常触发AIS的可能性小。 展开更多
关键词 青少年特发性脊柱侧凸 软骨内成骨 SOX9 L—SOX5 SOX6 Ⅱ型胶原
SOX5、SOX6基因在豚鼠耳蜗中的表达及意义 预览
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作者 袁虎 韩东一 +1 位作者 郭维 王秋菊 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2006年第1期 40-42,60,共4页
目的探讨SOX5、SOX6基因在豚鼠耳蜗中的表达及该基因对耳蜗发育的影响与作用。方法活体解剖取出豚鼠耳蜗、肝脏、脑、肾脏和心脏等组织,应用Primer 5.0软件设计SOX5、SOX6引物。使用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polym... 目的探讨SOX5、SOX6基因在豚鼠耳蜗中的表达及该基因对耳蜗发育的影响与作用。方法活体解剖取出豚鼠耳蜗、肝脏、脑、肾脏和心脏等组织,应用Primer 5.0软件设计SOX5、SOX6引物。使用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT—PCR)法检测SOX5、SOX6基因的表达情况。结果SOX5基因在不同组织中均有表达,耳蜗中的表达相对较弱。SOX5和SOX6基因均在耳蜗组织表达。结论SOX5、SOX6基因的表达具有一定的组织特异性,两者均在耳蜗中的表达提示SOX5、SOX6基因对耳蜗的骨性组织发育可能存在一定作用。 展开更多
关键词 基因表达 逆转录-聚合酶链反应 SOX5 SOX6 耳蜗
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MiR-96靶向调控Sox6促进小鼠β细胞胰岛素合成与分泌 预览
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作者 杨靖 吴丽 +5 位作者 周灵芝 赵志波 项孙敏 颜斌 吕运成 肖新华 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第2期196-200,共5页
目的探索miR-96对小鼠胰岛β细胞胰岛素合成与分泌的影响及其作用机制。方法将小鼠胰岛β细胞系(MIN6细胞)分为四组,通过脂质体LipfectamineTM2000介导将miR-96 mimics、mimicsNC、miR-96 inhibitor、inhibitor NC瞬时转染至4组细胞,荧... 目的探索miR-96对小鼠胰岛β细胞胰岛素合成与分泌的影响及其作用机制。方法将小鼠胰岛β细胞系(MIN6细胞)分为四组,通过脂质体LipfectamineTM2000介导将miR-96 mimics、mimicsNC、miR-96 inhibitor、inhibitor NC瞬时转染至4组细胞,荧光定量PCR和ELISA方法分别检测Ins1、Ins2mRNA的表达及细胞上清液中的胰岛素浓度,生物信息学分析miR-96与Sox6 3--UTR的结合关系,荧光素酶报告基因检测miR-96与Sox6的结合情况,Western blot检测Sox6蛋白水平。结果与对照组比较,miR-96 mimics能增加葡萄糖刺激下MIN6细胞胰岛素的合成与分泌(P<0.01),而miR-96 inhibitor可下调胰岛素的合成与分泌(P<0.01)。miR-96与Sox6 3--UTR的553-561位点结合。过表达miR-96可显著抑制Sox6荧光素酶活性及MIN6细胞中Sox6蛋白的表达。结论miR-96靶向沉默Sox6进而促进β细胞胰岛素的合成与分泌。 展开更多
关键词 miR-96 Sox6基因 胰岛素 胰岛Β细胞
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miR-1269a在食管癌组织中的表达及其对KYSE30细胞恶性生物学行为的影响
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作者 魏思思 李晓亚 +4 位作者 董佩 戴素丽 张璁 赵连梅 单保恩 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期623-631,共9页
目的:探讨miR-1269a在食管癌组织中的表达及其对KYSE30细胞恶性生物学行为的影响,并研究其可能的作用机制。方法:选取90例在河北医科大学第四医院通过手术切除的食管癌组织标本,并收集正常食管永生化上皮细胞和食管癌细胞系,应用qPCR实... 目的:探讨miR-1269a在食管癌组织中的表达及其对KYSE30细胞恶性生物学行为的影响,并研究其可能的作用机制。方法:选取90例在河北医科大学第四医院通过手术切除的食管癌组织标本,并收集正常食管永生化上皮细胞和食管癌细胞系,应用qPCR实验检测癌组织和细胞系miR-1269a的表达水平。将miR-1269a的mimics和inhibitor分别转染食管癌细胞KYSE30后,用MTS、Transwell和克隆形成实验分别检测miR-1269a对KYSE30细胞增殖、侵袭、迁移和克隆形成能力的影响。通过生物信息学软件预测miR-1269a的靶基因,并通过WB实验和双荧光素酶报告基因实验验证miR-1269a对靶基因的调控作用。转染SOX6质粒后,采用MTS、Transwell和克隆形成实验分别检测SOX6对KYSE30细胞的增殖、侵袭、迁移和克隆形成能力的影响,并利用回复实验进一步验证结果。结果:食管癌组织中miR-1269a的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05);与正常食管上皮细胞相比,食管癌细胞系中miR-1269a的表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。miR-1269a mimics转染组KYSE30细胞的增殖、侵袭、迁移和克隆形成能力显著高于mimics NC组(P<0.05或P<0.01);inhibitor转染组KYSE30细胞的增殖、侵袭、迁移和克隆形成能力显著低于inhibitor NC组(P<0.05或P<0.01)。miR-1269a可与SOX6的3’UTR区相结合,且过表达miR-1269a后,KYSE30细胞的SOX6表达水平和荧光素酶报告基因的活性均显著降低(P<0.05)。回复实验表明,高表达miR-1269a可以促进食管癌细胞增殖、侵袭和迁移(P<0.05或P<0.01),同时高表达SOX6后,miR-1269a的促进作用出现部分逆转。结论:miR-1269a在食管癌组织和细胞系中表达上调,能够促进KYSE30细胞的增殖、迁移、侵袭和克隆形成等恶性生物学行为,其机制可能是通过抑制靶基因SOX6实现的。 展开更多
关键词 食管癌 miR-1269a KYSE30细胞 SOX6基因 增殖 迁移 侵袭
Sox6基因调控鸡骨骼肌分化和肌纤维类型的研究
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作者 张梓豪 林树带 +1 位作者 黄幸 张细权 《中国家禽》 北大核心 2019年第9期8-14,共7页
本实验室前期研究发现一个拷贝数变异区域与鸡的重要经济性状显著相关,并且该区域与Sox6编码区域重叠,提示Sox6基因对骨骼肌生长发育具有调控作用。研究首先采用RTqPCR分析Sox6基因在不同胚龄隐性白母鸡的胸肌和腿肌中的表达情况和表达... 本实验室前期研究发现一个拷贝数变异区域与鸡的重要经济性状显著相关,并且该区域与Sox6编码区域重叠,提示Sox6基因对骨骼肌生长发育具有调控作用。研究首先采用RTqPCR分析Sox6基因在不同胚龄隐性白母鸡的胸肌和腿肌中的表达情况和表达差异。接着在原代成肌细胞中过表达Sox6基因,通过RT-qPCR、免疫荧光和HE染色观察Sox6对原代成肌细胞的肌纤维类型调控情况和分化的影响。结果表明,Sox6 mRNA表达量在不同胚龄的胸肌和腿肌上的表达趋势相近,但在胸肌上的表达量高于腿肌,并且在E14、E17和7W时,胸肌表达量显著高于腿肌(P<0.05),提示Sox6可能对快肌起到重要作用。原代成肌细胞上面过表达Sox6后定量快慢肌特异基因发现Sox6能够促进MyH1B,抑制sMyHC1的表达;免疫荧光和HE染色观察发现Sox6能够促进成肌细胞的分化和肌管的形成,从而证明了Sox6对骨骼肌的分化和肌纤维类型调控具有一定的作用。 展开更多
关键词 Sox6基因 骨骼肌 分化 肌纤维类型
微小RNA-3677靶向调控SOX6表达及对肝癌细胞增殖和凋亡的影响 预览
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作者 黄高 畅庚云 +3 位作者 吴定国 陆开艺 杨志坚 文明波 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2019年第10期880-885,共6页
目的探讨微小RNA-3677(miR-3677)对SRY盒转录因子6(SOX6)表达的靶向调控作用及其对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法采用癌症多组学和临床数据库LinkedOmics分析TCGA数据库中has-miR-3677表达与肝癌临床病理特征和预后的关系。脂质体法... 目的探讨微小RNA-3677(miR-3677)对SRY盒转录因子6(SOX6)表达的靶向调控作用及其对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法采用癌症多组学和临床数据库LinkedOmics分析TCGA数据库中has-miR-3677表达与肝癌临床病理特征和预后的关系。脂质体法向肝癌细胞SMMC7721转染miR-3677抑制剂(Inhibitor组)和阴性对照(NC组),并以未转染的细胞为空白对照,采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测miR-3677水平,MTT法和AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术分别检测增殖和凋亡情况,双荧光素酶报告基因实验验证miR-3677对SOX6的靶向调控作用,QPCR和Western blotting检测SOX6、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)水平。结果miR-3677表达与临床分期和T分期有关,其中miR-3677表达随分期的升高而呈上升趋势(P<0.05);预后方面,miR-3677低表达者的总生存期较高表达者延长(P<0.05)。Inhibitor组的miR-3677水平为0.374±0.038,低于空白对照组的1.039±0.042和NC组的1.107±0.316(P<0.05);与空白对照组和NC组相比,Inhibitor组转染24~48 h后的细胞增殖活力降低(P<0.05);Inhibitor组的凋亡率为(11.241±1.235)%,高于空白对照组的(3.578±0.598)%和NC组的(4.216±0.823)%,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-3677模拟物可降低SOX6野生型3’端非翻译区的荧光素酶活性,而对突变型的荧光素酶活性无影响。与空白对照组和NC组比较,Inhibitor组SOX6、caspase-3的mRNA和蛋白水平均升高,而Bcl-2的mRNA和蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);空白对照组和NC组上述指标的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论下调miR-3677可抑制SMMC7721细胞的增殖能力并诱导凋亡,可能通过靶向SOX6来发挥促癌作用,有望成为肝癌防治的潜在靶点。 展开更多
关键词 肝癌 微小RNA-3677(miR-3677) 增殖 凋亡 SRY盒转录因子6(SOX6)
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过表达SOX6基因对卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡的影响及其机制 预览 被引量:1
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作者 刘恩令 周玉秀 +5 位作者 王立群 李君 陈梅 张冬红 蔡朝辉 陈俊臣 《山东医药》 2018年第20期39-41,共3页
目的探讨过表达SOX6基因对卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法将体外培养的卵巢癌SKOV3细胞随机分为两组,通过特异性重组质粒pc DNA3.1-SOX6转染建立稳定过表达SOX6基因的SKOV3细胞作为实验组,空载体pc-DNA3.1-mock转染的SK... 目的探讨过表达SOX6基因对卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法将体外培养的卵巢癌SKOV3细胞随机分为两组,通过特异性重组质粒pc DNA3.1-SOX6转染建立稳定过表达SOX6基因的SKOV3细胞作为实验组,空载体pc-DNA3.1-mock转染的SKOV3细胞作为对照组。采用酶标仪测定两组450 nm波长处的光密度(OD)值作为细胞活性指标,采用Edu荧光染色法检测两组细胞增殖率,采用Hoechst33342细胞染色法检测细胞凋亡率,采用Western blotting法检测PTEN、蛋白激酶B(Akt)及p-Akt蛋白表达。结果实验组及对照组OD450值分别为2.1±0.1、4.3±0.5,细胞增殖率分别为(13.2±2.2)%、(43.3±4.2)%,细胞凋亡率分别为(15.2±3.2)%、(5.2±1.4)%,组间比较P均〈0.05。与对照组比较,实验组PTEN蛋白表达升高,p-Akt蛋白表达降低,组间比较P均〈0.05。两组Akt蛋白表达比较P〉0.05。结论过表达SOX6基因能够抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移并促进细胞凋亡;其机制可能是抑制PTEN/Akt信号通路激活。 展开更多
关键词 卵巢癌 细胞增殖 细胞凋亡 SOX6基因
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SoxD家族基因与肿瘤发生发展关系的研究进展 预览 被引量:1
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作者 陈路遥 张旭 《解放军医学院学报》 CAS 2016年第10期1103-1105,F0003共4页
Sox基因家族是一类具有高度保守序列的转录因子编码基因,其D亚族中主要成员Sox5和Sox6参与调控胚胎发育、神经生长、软骨形成等生长发育过程。近年来关于SoxD亚族与肿瘤的研究逐渐增多,显示SoxD亚族在不同肿瘤类型中发挥着促癌或抑癌的... Sox基因家族是一类具有高度保守序列的转录因子编码基因,其D亚族中主要成员Sox5和Sox6参与调控胚胎发育、神经生长、软骨形成等生长发育过程。近年来关于SoxD亚族与肿瘤的研究逐渐增多,显示SoxD亚族在不同肿瘤类型中发挥着促癌或抑癌的作用;同时D家族成员的表达差异还可以用于鉴别诊断或作为肿瘤预后的分子标记物。本文介绍SoxD亚族中Sox5和Sox6基因结构及功能,并重点阐述两者在肿瘤发生发展中的意义及相关研究进展。 展开更多
关键词 Sox5基因 Sox6基因 肿瘤
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pcDNA3.1(+)-SOX6真核表达载体构建及在KYSE-30细胞的表达
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作者 汤虹 秦艳茹 +5 位作者 李少梅 王莉莉 朱辉 何振 关新元 王启鸣 《医药论坛杂志》 2015年第3期33-35,共3页
目的构建人性别决定区Y盒6(SOX6)基因真核表达载体并观察其在KYSE30细胞内的表达。方法将人SOX6c DNA克隆到真核表达载体pc DNA3.1(+)中,经酶切和测序证实后,以Lipofectamine2000介导转染KYSE30细胞,应用RT-PCR和western blot鉴定S... 目的构建人性别决定区Y盒6(SOX6)基因真核表达载体并观察其在KYSE30细胞内的表达。方法将人SOX6c DNA克隆到真核表达载体pc DNA3.1(+)中,经酶切和测序证实后,以Lipofectamine2000介导转染KYSE30细胞,应用RT-PCR和western blot鉴定SOX6在细胞内的表达。结果 SOX6 c DNA为2358bp的片段,重组质粒pc DNA3.1(+)-SOX6经EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切后产生的2400bp和5400bp的片段,DNA测序证实酶切产生的2400bp片段的碱基序列与人类SOX6 c DNA完全一致。将其转染至KYSE30后,RT-PCR和western blot的结果显示SOX6能在真核细胞中正确表达。结论成功的构建了pc DNA3.1(+)-SOX6重组质粒,为后续的研究奠定基础。 展开更多
关键词 SOX6基因 真核表达 重组质粒 转染
Sox6基因和Col2a1在大鼠bMSCs体外成软骨分化中表达及其意义 被引量:1
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作者 钱晓伟 谭湘陵 +1 位作者 张贤 蔡建平 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第19期2240-2243,F0002共5页
目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(bMSCs)成软骨分化中Sox6基因和Ⅱ型胶原a1(C012a1)表达水平的变化及其意义。方法2个月龄SD大鼠分离bMSCS,置含15%胎牛血清的DMEM/F12(1:1)培养基中培养。传至第3代后,细胞分为诱导组和未诱导... 目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(bMSCs)成软骨分化中Sox6基因和Ⅱ型胶原a1(C012a1)表达水平的变化及其意义。方法2个月龄SD大鼠分离bMSCS,置含15%胎牛血清的DMEM/F12(1:1)培养基中培养。传至第3代后,细胞分为诱导组和未诱导组,诱导组在培养基中添加含转化生长因子p1(TGF-β1)的诱导剂,分别在诱导后3、6、12、24h、3、7和14d提取细胞总RNA,逆转录成cDNA,荧光定量PCR法检测Sox6基因和Col2αl基因的表达。同时应用细胞免疫化学法检测诱导14d的Col2αl的表达。结果与未诱导组细胞比较,bMSCs在TGF-β1的诱导下,形态上发生软骨样细胞变化;诱导后6h,Sox6基因的表达上升6.3倍(P〈O.01),随后迅速下降,3—14d维持在4.O-4.7倍水平;C012αl基因的表达量在诱导后3d达1.9倍,7d和14d分别达14.3和35.8倍(P〈O.01)。诱导组可见大量Ⅱ型胶原阳性细胞。结论bMSCs在体外可以分化为软骨样细胞,Sox6基因在bMSCs的成软骨分化的早期和晚期都发挥了一定的作用。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 成软骨分化 Ⅱ型胶原α1 Sox6基因
Sox蛋白在软骨内成骨中的作用 预览 被引量:3
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作者 储沨婷(综述) 唐国华 沈刚(审校) 《国外医学:口腔医学分册》 2006年第2期 136-138,共3页
颅颌面骨成骨的方式有膜内成骨和软骨内成骨两种.Sox9、L-Sox5和Sox6在软骨组织的发生和发育中具有十分重要的作用。Sox9促进间充质细胞凝集,L-Sox5和Sox6使间充质细胞进一步分化为成软骨细胞.Sox9具有转录激活结构域,直接调控转录... 颅颌面骨成骨的方式有膜内成骨和软骨内成骨两种.Sox9、L-Sox5和Sox6在软骨组织的发生和发育中具有十分重要的作用。Sox9促进间充质细胞凝集,L-Sox5和Sox6使间充质细胞进一步分化为成软骨细胞.Sox9具有转录激活结构域,直接调控转录,L-Sox5和Sox6缺少转录激活结构域。可能是作为构型蛋白,促成蛋白质-DNA复合体的形成,起到增强转录的作用。本文主垂时这3种Sox蛋白在软骨肉成骨中的作用及其机制进行综述. 展开更多
关键词 Sox5蛋白 Sox6蛋白 Sox9蛋白 软骨内成骨 转录调控
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