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HAND2对脑微血管发育阶段周细胞增殖和迁移的影响
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作者 龚昌雄 张钦 +5 位作者 黄嘉诚 杨国强 袁俊杰 熊小檍 李芳菲 杨清武 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期200-206,共7页
目的探讨人脑原代微血管周细胞(HBVPs)和人肾脏原代微血管周细胞(HRVPs)差异表达基因及其对脑微血管周细胞迁移和增殖功能的影响。方法利用RNA-seq检测对HBVPs和HRVPs进行转录组测序,qPCR及Western blot检测HAND2 mRNA及蛋白水平,构建HA... 目的探讨人脑原代微血管周细胞(HBVPs)和人肾脏原代微血管周细胞(HRVPs)差异表达基因及其对脑微血管周细胞迁移和增殖功能的影响。方法利用RNA-seq检测对HBVPs和HRVPs进行转录组测序,qPCR及Western blot检测HAND2 mRNA及蛋白水平,构建HAND2基因的sh-RNA下调脑微血管周细胞HAND2表达,分别利用CCK-8检测HBVPs增殖活性和Transwell小室迁移实验检测迁移能力。结果 RNA-seq检测结果显示胚胎期HBVPs相对HRVPs有1 906个高表达基因,进一步的聚类分析发现这些基因可显著地聚类为4类功能富集的亚群;与血管发育密切相关的第Ⅱ群中HAND2在HBVPs中显著高表达(lg2FoldChange=11.93,P<0.05)。此外,qPCR和/或Western blot检测发现在小鼠胚胎第10.5天HAND2表达量较高,在第14.5天时最高,出生后几乎不表达(P<0.05),并且HAND2主要表达在HBVPs(P<0.05)。当sh-RNA下调HBVPs的HAND2表达后,发现其在24 h时迁移能力增强(P<0.05),48 h和72 h时增殖活性显著增加(P<0.05)。结论 HAND2对胚胎脑微血管发育和成熟期周细胞的增殖和迁移能力具有重要的调控作用。 展开更多
关键词 周细胞 转录组测序 HAND2 增殖 迁移
HAND2在子宫内膜癌中的表达及意义 预览
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作者 郭玉霞 《山西医科大学学报》 CAS 2018年第9期1097-1099,共3页
目的研究子宫内膜癌组织中心脏神经脊衍生物表达转录因子2(heart and neural crest derivatives-expressed transcript2,HAND2)的表达及意义。方法采用免疫组化方法检测86例子宫内膜样腺癌、30例子宫内膜不典型增生及28例正常子宫内... 目的研究子宫内膜癌组织中心脏神经脊衍生物表达转录因子2(heart and neural crest derivatives-expressed transcript2,HAND2)的表达及意义。方法采用免疫组化方法检测86例子宫内膜样腺癌、30例子宫内膜不典型增生及28例正常子宫内膜组织中HAND2蛋白的表达情况并分析其与临床病理的关系。结果 HAND2蛋白在28例正常子宫内膜组织、30例子宫内膜不典型增生组织及86例子宫内膜样腺癌组织中的表达呈下降趋势(89.3%,60.0%,34.9%),HAND2蛋白在正常子宫内膜组织、子宫内膜不典型增生组织及子宫内膜样腺癌组织间的表达差异有统计学意义(P〈0.05);HAND2蛋白在子宫内膜样腺癌组织中的表达与病理分期和肌层浸润有关(P〈0.05),与组织学分级及淋巴结转移情况无关(P〉0.05)。结论HAND2蛋白在子宫内膜样腺癌中表达下调可能与子宫内膜癌的发生发展有关。 展开更多
关键词 HAND2 子宫内膜癌 免疫组化
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PAX 2、β catenin及HAND2蛋白在子宫内膜增生症中的表达及其意义 预览 被引量:2
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作者 黄雪云 张丽华 +1 位作者 魏晓莹 王国庆 《东南大学学报:医学版》 北大核心 2017年第6期919-923,共5页
目的:探讨PAX 2、β catenin和HAND2蛋白在良性子宫内膜、不典型增生子宫内膜及高分化子宫内膜样腺癌中的表达水平及其在鉴别诊断中的作用。方法:收集19例单纯性增生子宫内膜、19例复杂性增生子宫内膜、22例复杂性伴不典型性增生子宫... 目的:探讨PAX 2、β catenin和HAND2蛋白在良性子宫内膜、不典型增生子宫内膜及高分化子宫内膜样腺癌中的表达水平及其在鉴别诊断中的作用。方法:收集19例单纯性增生子宫内膜、19例复杂性增生子宫内膜、22例复杂性伴不典型性增生子宫内膜和26例高分化子宫内膜样腺癌组织,采用免疫组织化学Envision法检测PAX 2、β catenin和HAND2蛋白的表达情况。另外收集12例增生期子宫内膜组织作为对照。结果:PAX 2和HAND2蛋白在良性增生性子宫内膜、不典型增生及子宫内膜样腺癌的阳性表达率明显下降(P〈0.05);但在不典型增生子宫内膜与高分化子宫内膜样腺癌组织之间的异常表达率差异无统计学意义(P〉0.05)。β catenin在不同类型子宫内膜病变中的异常表达率差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:PAX 2和HAND2异常表达可能是区别良性子宫内膜增生与肿瘤性子宫内膜增生的有用的标志物。 展开更多
关键词 子宫内膜增生 PAX 2 β CATENIN HAND2 免疫组化
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转录因子Hand2在妊娠期糖尿病胎鼠心脏发育过程中的表达 预览 被引量:1
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作者 吴瑕 黄婉仪 +4 位作者 韩莎莎 孙凤杰 徐婧 杨雪松 柳国胜 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1765-1771,共7页
目的:了解妊娠糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)母鼠胎鼠心脏发育过程中碱性螺旋-环-螺旋蛋白(basic helix-loop-helix,bHLH)转录因子Hand2表达的变化规律,探讨其在GDM胎鼠心脏发育异常中的作用机制。方法:114只成年雌... 目的:了解妊娠糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)母鼠胎鼠心脏发育过程中碱性螺旋-环-螺旋蛋白(basic helix-loop-helix,bHLH)转录因子Hand2表达的变化规律,探讨其在GDM胎鼠心脏发育异常中的作用机制。方法:114只成年雌性SD大鼠,空白对照组(n=24)、GDM组(n=30)、阴性对照组(n=30)及GDM+胰岛素干预组(n=30);空白对照组不予任何处理;GDM组腹腔注射2%链脲佐菌素(streptozotocin,STZ;每只40 mg/kg);阴性对照组腹腔注射等量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(STZ溶剂);GDM+胰岛素干预组在GDM建模成功后皮下注射中效胰岛素控制空腹血糖在正常范围。给药72 h后每天测血糖及体质量,各组分别于孕12 d(embryotic day 12,E12)、E15和E19剖取胎鼠心脏组织HE染色观察心脏组织病理变化,免疫组化检测Hand2蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测Hand2 mRNA的表达,Western blotting检测Hand2蛋白表达的变化。结果:各组Hand2蛋白的表达呈动态变化:E12可见表达,E15时表达增加,E19时Hand2蛋白表达最高,E12和E15 GDM组Hand2 mRNA及蛋白在胎鼠心肌细胞中的表达呈现下降趋势,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:妊娠糖尿病母鼠其胎鼠心脏发育异常的发生率明显升高;Hand2 mRNA及蛋白在妊娠糖尿病胎鼠E12和E15心脏表达水平明显下降,提示与GDM胎鼠心脏发育异常相关。 展开更多
关键词 Hand2 妊娠期糖尿病 心脏发育
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HAND2蛋白在先天性巨结肠肠壁肌间神经丛中的表达及意义 预览 被引量:1
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作者 刘鹏飞 秦克旺 +2 位作者 吴坤河 史浩 张磊 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1513-1515,共3页
目的研究HAND2蛋白在先天性巨结肠症患儿肠壁肌间神经丛的表达情况,探讨HAND2蛋白与先天性巨结肠发病的关系。方法应用免疫组化二步法染色检测46例先天性巨结肠患儿狭窄段、移行段、扩张段和正常段肠壁组织肌间神经丛中HAND2蛋白的表... 目的研究HAND2蛋白在先天性巨结肠症患儿肠壁肌间神经丛的表达情况,探讨HAND2蛋白与先天性巨结肠发病的关系。方法应用免疫组化二步法染色检测46例先天性巨结肠患儿狭窄段、移行段、扩张段和正常段肠壁组织肌间神经丛中HAND2蛋白的表达,用计算机图像分析软件(ImageProPlus6.0)计算HAND2蛋白在先天性巨结肠各段肠壁组织肌间神经丛的免疫组化阳性染色的平均光密度值。结果HAND2蛋白在先天性巨结肠患儿正常肠壁组织的肌间神经丛有阳性表达,多呈强阳性;环形肌及纵行肌亦有表达,多呈中等强度阳性。狭窄段肌间神经丛中,未见有阳性染色的神经节细胞,可见肌间神经纤维表达呈弱阳性或阴性;在移行段与扩张段肌间神经丛中,可见较多阳性表达肌间神经节或神经纤维。分别与移行段、扩张段及正常段比较,狭窄段的平均光密度明显降低,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论狭窄段肠壁肌间神经丛中HAND2蛋白表达量降低,HAND2蛋白表达改变可能是先天性巨结肠的发病因素之一。 展开更多
关键词 先天性巨结肠 HAND2 免疫组化 肌间神经丛
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转录因子HAND2在中国散发先天性心脏病患者中的突变情况研究 预览
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作者 沈磊 李晓峰 +2 位作者 申阿东 郭雅洁 李仲智 《山东医药》 CAS 2012年第40期20-22,共3页
目的探讨转录因子HAND2基因在先天性心脏病患者中的突变率及其基因型与先天性心脏病表型的相关性研究。方法选择131例先天性心脏病患儿作为实验对象,其心脏畸形与HAND2表达节段相关,同时选取250例健康儿童作为对照组,扩增其HAND2基... 目的探讨转录因子HAND2基因在先天性心脏病患者中的突变率及其基因型与先天性心脏病表型的相关性研究。方法选择131例先天性心脏病患儿作为实验对象,其心脏畸形与HAND2表达节段相关,同时选取250例健康儿童作为对照组,扩增其HAND2基因的外显子及侧翼内含子,并进一步测序检测突变情况。结果在编码区中,我们在实验组编码区中发现4例3种错义突变(P11R、S36N和V83L)及1例同义突变(H14H),这3种错义突变中的S36N在250例正常儿童对照组中也检测到1例,编码区的突变情况在两组问不存在统计学差异。在实验组7例患者的非转录区中还发现了3种不同的突变(+241A/G1例、+604A/G1例及+3237T/A5例),该3种突变在对照组中未检测到,其中+3237T/A突变在两组间存在统计学差异。结论HAND2基因可能在先心病患者的发病机制中发挥一定的作用。 展开更多
关键词 先天性心脏病 BHLH HAND2 转录因子 突变
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二氢叶酸还原酶基因在斑马鱼咽弓发育过程中作用的研究
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作者 孙淑娜 桂永浩 +2 位作者 蒋璆 钱林溪 宋后燕 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第2期145-153,共9页
叶酸缺乏可导致胚胎先天性发育异常,二氢叶酸还原酶是叶酸生物学作用通路中的关键因子,其功能阻抑将抑制叶酸生物学作用的发挥.咽弓是脊椎动物胚胎发育中头面部结构、心脏流出道等的共同前体.在模式生物斑马鱼中,利用基因表达阻抑以及... 叶酸缺乏可导致胚胎先天性发育异常,二氢叶酸还原酶是叶酸生物学作用通路中的关键因子,其功能阻抑将抑制叶酸生物学作用的发挥.咽弓是脊椎动物胚胎发育中头面部结构、心脏流出道等的共同前体.在模式生物斑马鱼中,利用基因表达阻抑以及过表达技术,探讨二氢叶酸还原酶基因(DHFR)在斑马鱼咽弓发育过程中的作用.石蜡切片以及软骨染色结果显示,DHFR表达阻抑导致斑马鱼咽弓以及腭发育明显异常,而DHFR过表达可部分挽救上述发育异常表型.TBX1和HAND2在咽弓发育中有重要作用.通过胚胎整体原位杂交以及Real-timePCR技术检测TBX1和HAND2表达水平.DHFR表达阻抑后TBX1和HAND2的表达降低,DHFR过表达可使TBX1和HAND2的表达增加.上述结果表明,DHFR在斑马鱼咽弓发育过程中扮演重要角色,DHFR通过影响TBX1和HAND2的表达而调控咽弓的形成和分化. 展开更多
关键词 二氢叶酸还原酶基因 咽弓 斑马鱼 TBX1 HAND2
斑马鱼hand2基因的克隆、抗体制备及分析 预览 被引量:6
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作者 朱婷 黄文 +6 位作者 王跃群 李永青 袁婺洲 莫小阳 万永奇 吴秀山 邓云 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2010年第1期 108-113,共6页
为利用斑马鱼动物模型进一步研究bHLH转录因子家庭重要成员hand2基因在心脏发育中的功能,采用生物信息学结合RT-PCR的方法获得了斑马鱼hand2基因.将所得片段插入原核表达载体pGEX-4T-1中,并通过IPTG诱导表达出GST-Hand2融合蛋白,经GST... 为利用斑马鱼动物模型进一步研究bHLH转录因子家庭重要成员hand2基因在心脏发育中的功能,采用生物信息学结合RT-PCR的方法获得了斑马鱼hand2基因.将所得片段插入原核表达载体pGEX-4T-1中,并通过IPTG诱导表达出GST-Hand2融合蛋白,经GST亲和层析法纯化后,免疫新西兰大白兔制备了多克隆抗体,利用western b lotting和免疫组化的方法对抗体进行分析.分析表明:斑马鱼hand2基因成熟肽编码区含有627 bp,编码208个氨基酸,与人Hand2蛋白的同源性达到83%;IPTG诱导表达后,表达的融合蛋白占菌体总蛋白的71%,经GST纯化获得SDS-PAGE电泳下单一条带.融合蛋白相对分子质量约为49 000.分析表明,制备的抗体具有很好的特异性. 展开更多
关键词 hand2 斑马鱼 原核表达 多克隆抗体
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Transcription factor HAND2 mutations in sporadic Chinese patients with congenital heart disease 被引量:1
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作者 SHEN Lei LI Xiao-feng +5 位作者 SHEN A-dong WANG Qiang LIU Cai-xia GUO Ya-jie SONG Zhen-jiang LI Zhong-zhi 《中华医学杂志:英文版》 SCIE CAS CSCD 2010年第13期1623-1627,共5页
基本 helix-loop-helix 抄写因素 HAND2 玩的背景在心脏的 morphogenesis.However 的一个必要角色,在同族的心疾病(CHD ) 和在 HAND2 遗传型和 CHD 显型之间的关联的 HAND2 变化的流行没广泛地被学习。我们在 131 个病人放大了 exons ... 基本 helix-loop-helix 抄写因素 HAND2 玩的背景在心脏的 morphogenesis.However 的一个必要角色,在同族的心疾病(CHD ) 和在 HAND2 遗传型和 CHD 显型之间的关联的 HAND2 变化的流行没广泛地被学习。我们在 131 个病人放大了 exons 和 HAND2 基因的 flanking intron 序列的方法与正确的室,流出道,大动脉的动脉或心脏的垫子的先天的缺点诊断了并且由 sequencing.Results 证实了变化包括三个错误感觉变化( P11R , S36N 和 V83L )的七个变化,一个 isonymous 变化( H14H )和在 untranslated 区域的三个变化( 241 A > G , 604C > T 和 3237T >一)从 131 个 patients.Both nonisonymous 变化在 12 被识别是 l 仅仅一个变化(S36N ) 在 250 正常健康控制被识别。3637T 的分发 > A 是是 2 groups.Conclusions HAND2 可以是的 differentbetween 的唯一的正确的室的狭窄的潜在的候选人基因,流出道。有 HAND2 变化的家庭历史的那些的进一步的学习将信服地帮助联系他们的遗传型到 CHD 的致病。 展开更多
关键词 先天性心脏病 基因突变 转录因子 患者 动脉血管 非编码区 转录激活 候选基因
利用质粒介导的miRNA-1-2抑制H9C2中Hand2蛋白的表达 预览 被引量:1
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作者 单志新 林秋雄 +4 位作者 邓春玉 周志凌 张绪超 符永恒 余细勇 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期 1559-1561,1567,共4页
目的构建人miRNA-1-2的真核表达载体,并检测其对大鼠成肌细胞H9C2中Hand2蛋白表达的抑制作用。方法用PCR法体外合成miRNA-1-2前体序列的DNA模板,并定向插入到发夹RNA(hairpinRNA)表达载体pSilencer-4-1-neo上。用脂质体法将构建正... 目的构建人miRNA-1-2的真核表达载体,并检测其对大鼠成肌细胞H9C2中Hand2蛋白表达的抑制作用。方法用PCR法体外合成miRNA-1-2前体序列的DNA模板,并定向插入到发夹RNA(hairpinRNA)表达载体pSilencer-4-1-neo上。用脂质体法将构建正确的重组质粒pSilencer-4-1/miRNA-1-2瞬时转染H9C2细胞,检测miRNA-1-2前体转录本(pre—miRNA-1-2)和miRNA-1靶基因Hand2(heart and neural crest derivatives expressed transcript 2)的表达。结果DNA测序表明重组质粒pSilencer-4-1/miRNA-1-2构建正确。pSilencer-4-1/miRNA-1-2转染的H9C2细胞中,pre-miRNA-1-2被有效表达,Hand2 mRNA表达无变化,Hand2蛋白表达被抑制。结论成功构建了miRNA-1-2的真核表达载体,由表达载体介导的miRNA—1能有效抑制Hand2蛋白的表达。 展开更多
关键词 miRNA-1 载体构建 Hand2 表达
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hand2基因对斑马鱼胚胎发育影响的实验研究 预览 被引量:3
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作者 孙淑娜 桂永浩 +2 位作者 宋后燕 蒋缪 王跃祥 《复旦学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期 325-329,共5页
目的观察hand2在斑马鱼胚胎内的表达情况,验证显微注射吗啡啉修饰的反义寡核苷酸(Morpholino oligonucleotides,MO)使hand2表达下调的有效性。观察hand2表达下调后斑马鱼胚胎发育的异常表型,初步探讨hand2在斑马鱼胚胎发育中的作... 目的观察hand2在斑马鱼胚胎内的表达情况,验证显微注射吗啡啉修饰的反义寡核苷酸(Morpholino oligonucleotides,MO)使hand2表达下调的有效性。观察hand2表达下调后斑马鱼胚胎发育的异常表型,初步探讨hand2在斑马鱼胚胎发育中的作用,为利用斑马鱼开展hand2的功能研究提供线索。方法采用胚胎整体原位杂交的方法观察hand2在斑马鱼胚胎内的表达情况。利用向斑马鱼受精卵显微注射MO的方法使hand2表达下调,并进行hand2表达下调的效率验证。将斑马鱼单细胞受精卵分为4组进行显微注射,即对照MO(ConM0)注射组、hand2MO注射组、hand2—GFPmRNA注射组和hand2—GFPmRNA+hand2MO注射组。在荧光显微镜下观察hand2-GFPmRNA注射组和hand2—GFPmRNA+hand2MO注射组的荧光表达情况以验证hand2表达下调的效率。在显微镜下观察hand2MO注射组斑马鱼胚胎的各器官发育情况并进行评定。结果hand2在斑马鱼胚胎的侧板中胚层、咽弓、心脏和鳍有较强表达。hand2—GFPmRNA注射组在8hpf(hours post fertilization)时胚胎有较强的荧光表达,而hand2-GFPmRNA+hand2 MO注射组胚胎几乎无荧光表达。与ConMO注射组相比,hand2MO注射组斑马鱼胚胎的心脏、血管、血细胞、鳍以及体节有明显的发育异常。结论向斑马鱼受精卵显微注射hand2MO的方法可有效的使hand2表达下调。hand2在斑马鱼胚胎的心脏、血管、血细胞、鳍以及体节的发育过程中有重要作用。 展开更多
关键词 hand2 斑马鱼 胚胎发育 吗啡啉修饰的反义核苷酸
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