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H9N2亚型禽流感病毒NA和M2基因的克隆与表达
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作者 郝珊珊 郑阳 +4 位作者 余远楠 张则 蔡佳希 宗嫚嫚 冯秀丽 《畜牧与兽医》 北大核心 2019年第5期121-127,共7页
旨在分别构建NA蛋白和M2蛋白的重组质粒,并进行表达鉴定。采用PCR扩增了H9N2分离株A/chicken/Shandong/LY1/2017毒株的NA基因和M2基因。同源性分析证实,这2个基因序列与目前流行毒株的基因同源性很高。将NA基因克隆至pcold1原核表达载体... 旨在分别构建NA蛋白和M2蛋白的重组质粒,并进行表达鉴定。采用PCR扩增了H9N2分离株A/chicken/Shandong/LY1/2017毒株的NA基因和M2基因。同源性分析证实,这2个基因序列与目前流行毒株的基因同源性很高。将NA基因克隆至pcold1原核表达载体,将M2基因克隆至pET28a原核表达载体,成功构建了pcold1-NA和pET28a-M2重组质粒,并成功表达出相应的融合蛋白。然后对表达的融合蛋白进行纯化,并采用免疫印迹验证其免疫反应性。本试验为进一步研究H9N2亚型禽流感病毒致病机制及检测技术奠定了基础。 展开更多
关键词 H9N2禽流感病毒 NA基因 M2基因 原核表达
糖基化影响H9N2亚型禽流感病毒在小鼠体内复制能力和对α-2,6唾液酸受体的亲和性
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作者 谭刘刚 鲁梅 +7 位作者 黄庆华 艾武 亓丽红 吴家强 崔宁 黄艳艳 杨少华 许传田 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期88-92,125共6页
利用反向遗传操作技术验证了H9N2亚型禽流感病毒流行株(A/Chicken/Shandong/903,简称903)HA蛋白200和295位氨基酸糖基化可以影响病毒对α-2,6唾液酸受体的亲和性,同时也能影响病毒在小鼠体内复制能力。固相ELISA结果显示,突变病毒N200Q(... 利用反向遗传操作技术验证了H9N2亚型禽流感病毒流行株(A/Chicken/Shandong/903,简称903)HA蛋白200和295位氨基酸糖基化可以影响病毒对α-2,6唾液酸受体的亲和性,同时也能影响病毒在小鼠体内复制能力。固相ELISA结果显示,突变病毒N200Q(N→Q)和N295Q(N→Q)都能降低病毒对α-2,6唾液酸受体的亲和性。荧光定量结果显示,突变病毒N295Q主要在小鼠肺脏、脾脏和肾脏中复制(M基因拷贝分别为903野毒的56,64,39倍);而突变病毒N200Q主要在小鼠肾脏中复制(M基因拷贝分别为903野毒的936倍)。本试验为阐明H9N2亚型流感病毒跨种间传播的分子机制提供依据。 展开更多
关键词 反向遗传 糖基化 H9N2禽流感病毒 跨种传播
2017年河北省蛋鸡养殖场H9N2亚型禽流感病毒的遗传演化和抗原性分析
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作者 张义冉 王贞 +2 位作者 孙怡朋 刘长清 刘金华 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1803-1811,共9页
【背景】H9N2亚型禽流感病毒在鸡群中广泛流行,引起巨大损失。【目的】了解河北省蛋鸡养殖场H9N2亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)的基因序列和抗原性的变异情况,为该病原的科学防控提供理论依据。【方法】于2017年从河北省... 【背景】H9N2亚型禽流感病毒在鸡群中广泛流行,引起巨大损失。【目的】了解河北省蛋鸡养殖场H9N2亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)的基因序列和抗原性的变异情况,为该病原的科学防控提供理论依据。【方法】于2017年从河北省部分蛋鸡养殖场分离鉴定出7株H9N2亚型AIV,对其HA基因进行序列测定,并进行遗传演化、关键氨基酸位点及抗原性分析。【结果】7株分离毒株HA基因同源性在95.5%-97.2%之间;与2016年前的流行毒株相比,分离病毒HA裂解位点均为典型低致病性AIV特征,在受体结合区域出现变异,潜在糖基化位点无明显差异;抗原分析结果显示分离毒株与早期分离株相比抗原性发生了变异,形成了新的抗原群;抗原性相关位点分析显示,分离毒株在9个位点发生了较为明显的突变,可能是导致抗原性变异的分子基础。【结论】河北省蛋鸡养殖场H9N2亚型AIV中的流行毒株在关键功能区发生基因突变,并且抗原性发生变异,提示应持续监测H9N2亚型AIV的遗传变异情况,并及时更换疫苗株。 展开更多
关键词 蛋鸡养殖场 H9N2亚型AIV 分离鉴定 遗传演化 抗原性变异
蝙蝠流感病毒与H9N2亚型禽流感病毒M蛋白的免疫原性比较研究 预览
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作者 黄敏 刘宸瑞 +10 位作者 滕巧泱 刘芹防 李雪松 陈鸿军 车广胜 任超超 崔宏锐 闫大为 周伟光 李泽君 杨健美 《中国动物传染病学报》 北大核心 2018年第3期7-15,共9页
为比较新发蝙蝠流感病毒H17N10亚型与禽流感病毒H9N2亚型的M蛋白(包括M1和M2蛋白)的免疫原性,分别构建两种亚型流感病毒M1、M2的原核表达载体和真核表达载体,利用前期反向遗传学技术拯救获得两种重组病毒感染MDCK细胞,并分别与相应的... 为比较新发蝙蝠流感病毒H17N10亚型与禽流感病毒H9N2亚型的M蛋白(包括M1和M2蛋白)的免疫原性,分别构建两种亚型流感病毒M1、M2的原核表达载体和真核表达载体,利用前期反向遗传学技术拯救获得两种重组病毒感染MDCK细胞,并分别与相应的单抗或多抗进行免疫印迹和免疫荧光鉴定。结果显示,两种亚型病毒的M1蛋白的原核表达产物均与M1多抗反应,均不与2株M1单抗反应;拯救的两种重组病毒感染细胞后及其M1蛋白的真核表达产物均与M1的单抗5F2反应,不与单抗3G8及M1的多抗反应,两种亚型的结果一致;而两种亚型的M2蛋白通过与单抗和多抗反应,出现了不一致的结果,M2的单抗仅与蝙蝠流感病毒M2的原核表达产物反应,不与H9N2禽流感病毒M2的原核表达产物反应,M2的多抗则反之;且M2的多抗仅与H9N2禽流感M2的真核表达产物以及拯救病毒反应,均不与蝙蝠流感病毒M2的真核表达产物及拯救病毒反应。本研究证实这两种亚型流感病毒的M2蛋白之间确实存在免疫原性的差异,并且筛选到了可以区分蝙蝠流感病毒和禽流感病毒的M2抗体,为进一步研究流感病毒M蛋白相关的生物学机制提供了基础。 展开更多
关键词 蝙蝠流感病毒 H9N2亚型禽流感病毒 M蛋白 免疫原性
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2016—2017年华东地区活禽市场7株H9N2禽流感病毒遗传进化分析 预览
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作者 蒋大秀 马静 +3 位作者 王晓泉 胡顺林 刘晓文 刘秀梵 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第8期1789-1796,共8页
活禽市场的家禽,特别是水禽在禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)的演化、维持和扩散过程中起重要作用,因此对活禽市场进行长期不间断的流行病学监测非常重要。2016年10月至2017年9月,每月定期采集华东地区某活禽市场家禽喉头和... 活禽市场的家禽,特别是水禽在禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)的演化、维持和扩散过程中起重要作用,因此对活禽市场进行长期不间断的流行病学监测非常重要。2016年10月至2017年9月,每月定期采集华东地区某活禽市场家禽喉头和泄殖腔棉拭子,并接种10日龄SPF鸡胚,测定鸡胚尿囊液HA效价,取阳性尿囊液进行HI试验分型,应用RT-PCR对该样品进行全基因PCR并测序,利用DNASTAR、MEGA6.0分析序列,并绘制系统发生树。结果共采集样品1 178份,来自127群,H9N2AIV阳性样品100份。从水禽中分离到H9N2AIV 7株,对7株病毒全基因组进行测序和遗传进化分析,不同基因片段均存在不同的遗传进化趋势。活禽市场水禽体内携带的7株H9N2AIV与当前家禽优势流行基因型一致,因此对活禽市场家禽中循环存在的AIV进行的定期监测,对了解潜在的流行株的演化和出现有重要作用。 展开更多
关键词 活禽市场 H9N2禽流感病毒 监测 遗传进化
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H9N2亚型禽流感荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用
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作者 杨玲玲 牛凯 +2 位作者 王涛 常维山 刘玉庆 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2017年第8期39-42,287,288共6页
为了研究H9N2亚型禽流感病毒(AIV)在家禽体内各个器官的分布,试验针对H9N2亚型AIV的HA基因设计1对特异性引物,同时设计1对扩增内参基因β-actin的引物,以阳性重组质粒作为标准品做标准曲线,建立荧光定量RT-PCR检测方法,并对人工感染H... 为了研究H9N2亚型禽流感病毒(AIV)在家禽体内各个器官的分布,试验针对H9N2亚型AIV的HA基因设计1对特异性引物,同时设计1对扩增内参基因β-actin的引物,以阳性重组质粒作为标准品做标准曲线,建立荧光定量RT-PCR检测方法,并对人工感染H9N2的SPF雏鸡气管、胸腺、肺脏、肝脏、脾脏、肾脏、肠等器官进行3次重复检测。结果表明:该法线性关系R值均在0.99以上,检测极限均为10拷贝质粒DNA,比RT-PCR灵敏100倍以上;特异性好,批内和批间重复性试验变异系数均小于1%。通过比较各器官HA相对表达量,得出肠和胰腺中HA相对表达量最高,腺胃次之,脾脏、肝脏、胸腺、法氏囊中含量也比较高,气管、肺脏、肾脏中含量较低,其中肾脏含量最低。说明研究建立的H9N2亚型禽流感病毒荧光定量RT-PCR方法灵敏度高,特异性强。 展开更多
关键词 H9N2亚型禽流感病毒 HA基因 RT-PCR 检测 病毒分布
不同来源H9N2亚型禽流感病毒血凝素蛋白生物学分析 预览
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作者 乔乔 谭福燕 +2 位作者 熊红叶 余克花 刘金辉 《南昌大学学报:医学版》 CAS 2016年第5期24-29,43共7页
目的 对不同来源的H9N2亚型禽流感病毒血凝素蛋白进行生物信息学比较分析,以找出重要的生物信息学数据。方法 从Genebank的基因数据库中获取18株H9N2亚型禽流感病毒H9血凝素蛋白的核苷酸和氨基酸序列,运用Clustal X,Bioedit等国际通用... 目的 对不同来源的H9N2亚型禽流感病毒血凝素蛋白进行生物信息学比较分析,以找出重要的生物信息学数据。方法 从Genebank的基因数据库中获取18株H9N2亚型禽流感病毒H9血凝素蛋白的核苷酸和氨基酸序列,运用Clustal X,Bioedit等国际通用软件进行氨基酸和核苷酸的序列比对,计算核苷酸及氨基酸的同源性。在线软件Antheprot分析二级结构。结果 H9型血凝素蛋白编码框架长约1683bp,编码含560个氨基酸的多肽。18株H9N2亚型禽流感病毒血凝素基因同源率为90.6%~99.8%,血凝素蛋白的氨基酸同源率为93.0%~99.4%,多肽序列中有84个变异位点,变异率为15.03%。血凝素蛋白A1和A2裂解序列为位于aa333-aa341的PSRSSR↓GLF序列;其中1株出现A334T变异,另一株则出现R335G变异。H9血凝素蛋白富含潜在α螺旋(25%~27%),β折叠(29%~32%),β转角(25%~27%)及无规则卷曲(17%~19%)等结构;H9型血凝素蛋白受体结合位点是由R100、W161、T163、N191、198(A/V/T)、L202、Y203位氨基酸残基折叠构成。结论 H9N2亚型禽流感病毒血凝素蛋白重要功能结构域的序列和空间结构相对保守稳定。 展开更多
关键词 H9N2亚型禽流感病毒 血凝素蛋白 生物信息学 蛋白结构
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H9N2亚型禽流感病毒血凝素蛋白分子特征分析及其对小鼠致病力的研究 预览
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作者 黄蓉 梁威 +2 位作者 刘纪园 王爱荣 柴同杰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期443-450,共8页
旨在了解H9N2禽流感病毒(AIV)山东分离株血凝素(HA)的遗传变异情况及其对哺乳动物的致病性。对5株H9N2AIV山东分离株的HA蛋白的分子特征进行了分析,并以BABL/c小鼠为模型评价其致病性。结果表明:5株AIV均属于CK/Beijing谱系,其中2株病... 旨在了解H9N2禽流感病毒(AIV)山东分离株血凝素(HA)的遗传变异情况及其对哺乳动物的致病性。对5株H9N2AIV山东分离株的HA蛋白的分子特征进行了分析,并以BABL/c小鼠为模型评价其致病性。结果表明:5株AIV均属于CK/Beijing谱系,其中2株病毒的HA具有人样受体结合特征(Leu234),3株病毒具有禽样受体结合特征(Gln234)。裂解位点分析表明,5株病毒均具有低致病性AIV特征;个别病毒的潜在糖基化位点存在增加或缺失现象。攻毒BABL/c小鼠后,2株病毒能够在小鼠肺部复制,病理切片显示间质性肺炎病变,通过免疫组化染色在细支气管上皮细胞检测到病毒。研究表明,H9N2亚型AIV在进化过程中HA基因及其编码的蛋白存在一定的差异性,且5株山东分离株中有2株具备感染哺乳动物的能力。该试验结果为从分子水平上深入研究H9N2亚型AIV HA蛋白氨基酸位点与跨种传播的关系提供了理论依据。 展开更多
关键词 H9N2禽流感病毒 血凝素蛋白 小鼠 致病性
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蛋鸡感染 H9N2 AIV 后输卵管不同部位病毒的分布及病理组织学观察 预览 被引量:1
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作者 陈占莉 曹晓蕾 +6 位作者 唐超 江跃德 黄晶晶 李涛 王秋珍 伍成奇 王晶钰 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第11期56-61,共6页
为探索 H9N2 AIV感染蛋鸡致输卵管功能异常的机理,对蛋鸡感染 H9N2亚型 AIV后输卵管不同部位病毒载量与病理变化进行检测与观察。以 H9N2亚型 AIV 人工感染非免疫蛋鸡,在感染后3、5、7 d 分别采取鸡输卵管组织,real-time PCR 检测感... 为探索 H9N2 AIV感染蛋鸡致输卵管功能异常的机理,对蛋鸡感染 H9N2亚型 AIV后输卵管不同部位病毒载量与病理变化进行检测与观察。以 H9N2亚型 AIV 人工感染非免疫蛋鸡,在感染后3、5、7 d 分别采取鸡输卵管组织,real-time PCR 检测感染鸡输卵管组织中 AIV 病毒载量,同时 HE 染色后观察病理组织学变化。结果表明,real-time PCR 从鸡输卵管膨大部、峡部、子宫部和阴道部均检出了禽流感病毒,其中以膨大部和子宫部病毒载量最高,分别达5.27×104拷贝/μL±3.55×103拷贝/μL 和5.52×10 4拷贝/μL±3.14×103拷贝/μL。组织病理学观察发现蛋鸡感染 H9N2亚型 AIV 后输卵管膨大部、峡部和子宫部病变明显。观察到上皮细胞脱落坏死,炎性细胞浸润腺体,腺体间隙变大甚至溶解,腺体组织充血出血。本研究证实蛋鸡感染 H9N2亚型 AIV 后输卵管组织中 AIV 病毒载量与其病理变化存在明显的正相关。 展开更多
关键词 鸡输卵管 H9N2 亚型禽流感病毒 病理变化 病毒载量
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H9N2亚型禽流感病毒NS1基因真核表达载体的构建及其在293细胞瞬时表达 被引量:1
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作者 董永军 王丽荣 贺会利 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1235-1238,1243共5页
在293细胞中瞬时表达A/Chicken/Henan/1001/2010(H9N2)NS1基因蛋白,并对表达蛋白活性进行测定。试验利用PCR技术从NS1-T载体质粒上扩增NS1基因,将其克隆至pCAGGS载体,构建重组质粒NS1-pCAGGS;经酶切和测序鉴定正确后,重组质粒NS1-pCA... 在293细胞中瞬时表达A/Chicken/Henan/1001/2010(H9N2)NS1基因蛋白,并对表达蛋白活性进行测定。试验利用PCR技术从NS1-T载体质粒上扩增NS1基因,将其克隆至pCAGGS载体,构建重组质粒NS1-pCAGGS;经酶切和测序鉴定正确后,重组质粒NS1-pCAGGS与脂质体按照一定比例混合后转染293细胞,用间接免疫荧光方法对瞬时表达细胞进行荧光信号反应。结果显示,禽流感NS1基因可以很好地在293细胞中瞬时表达,具有良好的反应原性。 展开更多
关键词 H9N2亚型禽流感病毒 NS1基因 真核表达载体 瞬时表达
H9N2亚型禽流感病毒的序列分析及对哺乳动物致病力研究 预览 被引量:5
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作者 王金良 李旭勇 +4 位作者 范俊 郭晶 邓国华 施建忠 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期663-665,共3页
为研究H9N2亚型禽流感病毒(ArV)对哺乳动物的致病力,本研究选取了2009年-2010年从我国南方地区分离到的6株H9N2AIV,测定分析了其基因组序列及在小鼠体内的复制能力。HA基因分析显示:6株病毒均属于A/CK/BJ/94谱系,HA均含有人样... 为研究H9N2亚型禽流感病毒(ArV)对哺乳动物的致病力,本研究选取了2009年-2010年从我国南方地区分离到的6株H9N2AIV,测定分析了其基因组序列及在小鼠体内的复制能力。HA基因分析显示:6株病毒均属于A/CK/BJ/94谱系,HA均含有人样受体结合位点Leu^226。PB2基因分析表明,6株H9N2AIV分离株均具有AIV低致病力的分子特征(Glu^627和Asp^701)。对BALB/c小鼠感染试验显示:感染组无任何临床症状及增重;病毒仅局限于小鼠呼吸道复制。本研究结果有助于全面了解近年我国H9N2 AIV分子进化情况,并对评估H9N2 AIV对哺乳动物的潜在威胁提供参考。 展开更多
关键词 H9N2亚型禽流感病毒 小鼠 复制
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H9亚型禽流感病毒SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR法检测方法的建立 预览 被引量:1
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作者 徐守振 尹燕博 《青岛农业大学学报:自然科学版》 2013年第3期195-199,共5页
RT-PCR扩增H9亚型禽流感病毒(AIV(H9))的HA基因保守片段,将其克隆到pMD18-T载体,经测序验证正确作为阳性质粒.以阳性质粒为标准品,建立SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR的标准曲线.结果表明,该方法灵敏性可达74.3copies/μL,且特异性好... RT-PCR扩增H9亚型禽流感病毒(AIV(H9))的HA基因保守片段,将其克隆到pMD18-T载体,经测序验证正确作为阳性质粒.以阳性质粒为标准品,建立SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR的标准曲线.结果表明,该方法灵敏性可达74.3copies/μL,且特异性好、重复性佳.SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR方法为H9亚型禽流感的病原的快速诊断和病毒的定量分析提供重要手段. 展开更多
关键词 H9亚型禽流感病毒 HA基因 SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR
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禽多杀性巴氏杆菌、H9亚型禽流感二联灭活疫苗研制及免疫效力试验 预览 被引量:2
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作者 张敬峰 李银 +6 位作者 韩凯凯 刘宇卓 赵冬敏 黄欣梅 游园 周小波 谢星星 《江西农业学报》 2012年第10期127-129,共3页
采用鸡胚共同增殖禽多杀性巴氏杆菌和H9亚型禽流感病毒的方法制备的抗原中含巴氏杆菌数≥4×10^10CFU/mL、H9亚型禽流感病毒含量≥10^9.38EID50/mL,经灭活后制备3批二联灭活疫苗并进行了相关检验。结果表明,所研制的3批二联疫... 采用鸡胚共同增殖禽多杀性巴氏杆菌和H9亚型禽流感病毒的方法制备的抗原中含巴氏杆菌数≥4×10^10CFU/mL、H9亚型禽流感病毒含量≥10^9.38EID50/mL,经灭活后制备3批二联灭活疫苗并进行了相关检验。结果表明,所研制的3批二联疫苗的物理性状、无菌检验以及安全检验均符合相关质量标准;用3批疫苗分别免疫试验鸡和试验鸭,21d后对禽多杀性巴氏杆菌免疫保护率均为90%以上,对H9亚型禽流感免疫保护率均为85%以上。 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌 H9亚型禽流感 灭活疫苗
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5株H9N2亚型禽流感病毒血凝素蛋白分子特征分析和豚鼠间传播能力的评估 预览 被引量:3
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作者 桑晓宇 高玉伟 +12 位作者 李林 丁洁 朱晓文 张钊伟 于志君 张坤 程凯慧 冯娜 刘红 王铁成 杨松涛 黄耕 夏咸柱 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期 92-95,共4页
为研究H9N2亚型禽流感病毒(AIV)在哺乳动物间的传播能力,本研究以豚鼠冯模型评价了5株H9N2亚型AⅣ在豚鼠体内的复制能力和水平传播能力,并分析了5株病毒血凝素(HA)蛋白的分子特征。结果表明,5株病毒均属于CK/Beijing谱系,其中... 为研究H9N2亚型禽流感病毒(AIV)在哺乳动物间的传播能力,本研究以豚鼠冯模型评价了5株H9N2亚型AⅣ在豚鼠体内的复制能力和水平传播能力,并分析了5株病毒血凝素(HA)蛋白的分子特征。结果表明,5株病毒均属于CK/Beijing谱系,其中2株病毒的HA具有人样受体特(Lys^226),2株病毒具有禽样受体特征(G1n^226),而A/Chicken/JN/Li-2/2010(H9N2)株在该位点的氨基酸残基为苯丙氨酸(Phe^226)。裂解位点分析表明,5株病毒均具有低致病性AIV特征。个别病毒的潜在糖基化位点存在增加或缺失现象。、感染试验表明,5株病毒均能够在豚鼠呼吸道复制。并且在鼻甲骨处复制稳定,平均病毒滴度为2.0lLogEID50/mL-4.5LogEID50/mL...传播试验表明,所有病毒株的人工接种豚鼠的鼻洗液中均能够检测到病毒,最长排毒期为接毒后第8d,而接触组脉鼠鼻洗液中未检测到病毒。本研究表明,5株H9N2亚型AIV均属于CK/Beijing谱系,部分病毒株的HA蛋白已具备人样受体结合特征,并且关键氨基酸位点(226位)处出现新的突变。5株病毒均能够在豚鼠呼吸道复制并通过上呼吸道排毒,但不能在豚鼠间同群传播。 展开更多
关键词 H9N2亚型禽流感病毒 豚鼠 传播 血凝素
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H9N2亚型禽流感病毒不同流行株抗原性和免疫原性的比较研究 预览 被引量:4
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作者 王新卫 杨大光 +1 位作者 王川庆 王泽霖 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期 1584-1590,共7页
为研究H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的变异情况,采用交叉HI试验、细胞中和试验和攻毒保护试验对1998-2008年间分离到的25株H9N2AIV的抗原性和免疫原性进行了研究。结果显示,依据不同毒株与Hp株免疫产生HI抗体的结果可将25个毒株分为3类,第... 为研究H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的变异情况,采用交叉HI试验、细胞中和试验和攻毒保护试验对1998-2008年间分离到的25株H9N2AIV的抗原性和免疫原性进行了研究。结果显示,依据不同毒株与Hp株免疫产生HI抗体的结果可将25个毒株分为3类,第1类HI效价4.0log2~5.0log2的为12#、17#、18#;第2类毒株HI效价6.0log2~7.0log2的为2#、21#、5#、22#、11#、25#、15#、16#;其余毒株的HI效价为7.0log2~8.0log2。这证实不同H9N2AIV流行毒株间的抗原性有差异。选取代表性的8株H9N2AIV毒株进行中和试验,结果显示其抗原相关性在0.42~0.84。除了3#与14#、11#与17#的抗原性有明显差异外(相关性R值分别为0.46、0.42),其余毒株间的抗原性无明显差异或仅有较小的差异。抗原性不同的H9N2AIV株对Hp株免疫鸡的攻毒保护试验显示Hp株能够对抗原性有差异的攻毒株(10#、12#、17#)产生有效保护(9/10),联合攻毒试验结果显示Hp毒株免疫鸡可抗其他毒株(9#+15#和16#+17#)的联合攻击,保护率9/10以上。以上结果显示,H9N2AIV Hp株与多数流行毒株间在免疫原性上无明显差异,H9N2AIV多数流行毒株间的免疫原性没有发生根本改变。 展开更多
关键词 H9N2亚型禽流感病毒 抗原性 免疫原性
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6株H9N2禽流感病毒分子进化及对小鼠的致病性 被引量:3
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作者 朱雯迎 许传田 +7 位作者 张秀美 鲁梅 胡北侠 颜世敢 杨少华 李建亮 任海松 崔言顺 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1180-1183,共4页
2009年从山东不同地区的规模化肉鸡场中分离到6株H9N2亚型流感病毒,对其分子特征进行分析,发现6株病毒可以分为2个不同的基因型,并且其中一个基因型是CK/SH/F/98(H9N2)和CK/SH/Y2/2008(H9N2)的重组病毒。为阐明H9N2流感病毒对哺乳... 2009年从山东不同地区的规模化肉鸡场中分离到6株H9N2亚型流感病毒,对其分子特征进行分析,发现6株病毒可以分为2个不同的基因型,并且其中一个基因型是CK/SH/F/98(H9N2)和CK/SH/Y2/2008(H9N2)的重组病毒。为阐明H9N2流感病毒对哺乳动物致病性,分别以106 EID50剂量攻毒6周龄BALB/c雌性小鼠,6株病毒都能在小鼠肺脏中复制,而且2株病毒能在攻毒7d后引起小鼠死亡。结果表明,H9N2亚型流感病毒对哺乳动物毒力有增强趋势。 展开更多
关键词 H9N2亚型禽流感病毒 分子进化 致病性
不同H9N2亚型禽流感病毒株致病力的比较试验
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作者 王新卫 柴丽娜 王泽霖 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期 1702-1705,共4页
参照NDV评价毒力的方法对1998—2008年间收集的25株H9N2AIV的致病性进行了比较研究。结果显示,25株H9N2AIV不同毒株间致病性有较大差异,大致分为3类:致病性偏强、致病性中等和致病性较弱。从中选出致病力有差异的8个毒株进行了1日龄雏... 参照NDV评价毒力的方法对1998—2008年间收集的25株H9N2AIV的致病性进行了比较研究。结果显示,25株H9N2AIV不同毒株间致病性有较大差异,大致分为3类:致病性偏强、致病性中等和致病性较弱。从中选出致病力有差异的8个毒株进行了1日龄雏鸡脑内接种指数(ICPI)、6周龄鸡静脉接种指数(IVPI)以及8周龄SPF鸡人工感染排毒试验,结果证明大部分毒株ICPI和IVPI基本上为0,排毒散毒的高峰期在攻毒后第5天到第6天。在25个毒株中,3#和12#表现出了比较高的致病性,不仅其EID50值最高(分别为10-8.8/0.2mL和10-8.8/0.2mL)、ELD50值最高(分别为10-7.9/0.2mL和10-8.7/0.2mL),而且鸡胚平均死亡时间也最短(分别为66.5,69h)。3#、12#还出现了1日龄雏鸡脑内接种指数(分别为0.238,0.437)和6周鸡静脉内接种指数(分别为0.34,0.51)。在8周龄SPF鸡人工感染排毒试验中3#和12#毒株的排毒量大,排毒时间也明显长于其他毒株(第2~9天)。以上试验结果表明我国H9N2AIV不同毒株致病性有明显差异,呈多态性,致病性偏强的毒株造成鸡群较高的死亡率。 展开更多
关键词 H9N2禽流感病毒 致病力
用红细胞吸附释放法纯化H9N2亚型禽流感病毒 预览
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作者 步卫东 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第S1期178-179,共2页
制备50%的红细胞悬液,将H9N2禽流感病毒尿囊液(HA≤29)采用鸡红细胞吸附释放法进行纯化,然后分别将纯化的病毒液及弃去的上清进行血凝试验测定。结果表明,使用50%的鸡红细胞悬液基本能将病毒吸附完全,HA效价提高23倍。因此鸡红细胞吸... 制备50%的红细胞悬液,将H9N2禽流感病毒尿囊液(HA≤29)采用鸡红细胞吸附释放法进行纯化,然后分别将纯化的病毒液及弃去的上清进行血凝试验测定。结果表明,使用50%的鸡红细胞悬液基本能将病毒吸附完全,HA效价提高23倍。因此鸡红细胞吸附释放法是一种经济实用、操作简便,并有较高纯化效率的方法。 展开更多
关键词 H9N2禽流感病毒 红细胞
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两种免疫增强剂对肉鸡H9N2禽流感病毒感染的保护试验 预览 被引量:2
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作者 许家荣 李臻兴 +1 位作者 尚月丽 许俊才 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第20期 10690-10691,10713,共3页
[目的]研究囊素肽和中草药添加剂——抗感康对肉鸡预防H9N2禽流感病毒感染的保护效果。[方法]选择120羽1日龄AA鸡,随机分为3组,即中草药组、囊素肽组和对照组,40只/组。中草药组从1日龄起饲喂添加有0.1%抗感康的混合饲料;囊素组在13日... [目的]研究囊素肽和中草药添加剂——抗感康对肉鸡预防H9N2禽流感病毒感染的保护效果。[方法]选择120羽1日龄AA鸡,随机分为3组,即中草药组、囊素肽组和对照组,40只/组。中草药组从1日龄起饲喂添加有0.1%抗感康的混合饲料;囊素组在13日龄时颈部皮下注射囊素肽0.4ml;对照组在13日龄颈部皮下注射0.85%灭菌生理盐水0.4ml,并观察鸡的临床表现。在1、7、18、27、35和45日龄时,记录采食量和体重,计算试验各阶段和全期平均日增重、采食量和料重比。[结果]囊素肽和抗感康能阻止H9N2禽流感病毒的水平传播,提高肉鸡抵抗力,并显著提高鸡的生产性能(P〈0.05)。[结论]囊素肽和抗感康能明显增强鸡的免疫力并提高鸡的生产性能。 展开更多
关键词 免疫增强剂 抗感康 囊素肽 H9N2禽流感病毒
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中国大陆H9N2亚型禽流感病毒HA基因遗传分析及抗原相关性研究 预览 被引量:5
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作者 岳华 汤承 +3 位作者 杨发龙 李明义 吴海燕 宫晓 《西南民族大学学报:自然科学版》 CAS 2010年第2期 200-205,共6页
为研究我国大陆H9N2亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因的分子进化及抗原相关性,本研究对来自15个省、市、自治区的34株H9N2亚型禽流感病毒的HA基因进行了测序及系统发育分析,并采用交叉血凝抑制试验及交叉攻毒保护试验对不同遗传分支下... 为研究我国大陆H9N2亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因的分子进化及抗原相关性,本研究对来自15个省、市、自治区的34株H9N2亚型禽流感病毒的HA基因进行了测序及系统发育分析,并采用交叉血凝抑制试验及交叉攻毒保护试验对不同遗传分支下毒株间抗原相关性进行了分析.结果表明,所有34个毒株HA基因均符合低致病性禽流感病毒的特征,但毒株间变异程度增加.系统发育分析表明,我国大陆H9N2亚型禽流感病毒主要分为三个系列,各系列内毒株没有明显的地区及时间特征.抗原相关性研究表明,不同遗传系列下的毒株其抗原相关性明显低于同一系列内部毒株间的抗原相关性,说明我国H9N2亚型禽流感病毒抗原性差异较大.此外,本研究同时筛选得到了用于制备多价苗的代表毒株. 展开更多
关键词 中国大陆 H9N2亚型禽流感病毒 血凝素基因 遗传分析 抗原相关性
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