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FoxO1和FoxO3a在老龄急性心肌梗死小鼠心肌中的表达
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作者 安尼瓦尔·阿不里孜 李继红 +3 位作者 黄定 刘成 戴远辉 黄莺 《中华实用诊断与治疗杂志》 2019年第9期853-856,共4页
目的探讨老龄急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)小鼠心肌组织转录因子叉头框蛋白O(forkhead box protein O,FoxO)1、FoxO3a蛋白及氧化应激指标表达变化。方法3月龄小鼠12只,随机分为低龄观察组、低龄对照组各6只;18月龄小... 目的探讨老龄急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)小鼠心肌组织转录因子叉头框蛋白O(forkhead box protein O,FoxO)1、FoxO3a蛋白及氧化应激指标表达变化。方法3月龄小鼠12只,随机分为低龄观察组、低龄对照组各6只;18月龄小鼠12只,随机分为老龄观察组、老龄对照组各6只。低龄观察组、老龄观察组结扎左前降支制备AMI模型,低龄对照组、老龄对照组仅开胸不结扎冠状动脉。造模成功后24h,应用血流动力学检测仪检测4组小鼠血流动力学指标;处死小鼠取心肌组织,采用Western blot法检测FoxO1和FoxO3a蛋白相对表达量,ELISA法检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)、一氧化氮(nitric oxide,NO)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)水平及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性。结果造模成功后24h,低龄对照组、老龄对照组、低龄观察组、老龄观察组左心室舒张压[(70.7±3.1)、(62.3±2.1)、(58.3±3.5)、(49.3±1.5)mm Hg]、左心室内压最大上升速率[(3 050.3±90.3)、(2 584.0±68.4)、(2 142.3±99.0)、(1 813.7±57.1)mm Hg/s]、左心室内压最大下降速率[(3 846.7±124.6)、(3 434.7±66.7)、(2 045.7±79.8)、(1 798.3±69.7)mm Hg/s]、FoxO1相对表达量(0.62±0.02、0.39±0.03、0.32±0.02、0.23±0.01)、FoxO3a蛋白相对表达量(0.62±0.01、0.43±0.03、0.36±0.02、0.23±0.02)及SOD活性[(363.91±11.13)、(266.40±11.33)、(219.05±6.80)、(103.52±10.18)u/mL]、T-AOC[(4.59±0.38)、(3.92±0.31)、(2.79±0.16)、(2.05±0.17)u/mg]依次降低(P<0.05),NO[(12.08±0.51)、(14.56±0.45)、(24.49±0.32)、(31.62±0.40)μmol/L]、ROS[(35.69±1.06)、(44.64±1.54)、(105.56±1.09)、(131.75±2.62)u/mL]及MDA水平[(161.32±4.17)、(288.52±15.71)、(412.86±5.10)、(709.00±10.73)μmol/L]依次升高(P<0.05);低龄观察组、老龄观察组心率[(402.7±14.6)、(361.3±9.5)次/min]较低龄对照组[(482.0±23.6)次/min]、老龄对照组[(444.3±11.0)次/min]慢(P 展开更多
关键词 急性心肌梗死 FOXO1 FOXO3A 氧化应激
FOXOs转录因子在心脏疾病治疗中的研究进展 预览
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作者 李晓霞 吕俊利 +1 位作者 张春莹 郭会彩 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期306-309,共4页
心脏疾病发病率高、死亡率高,严重影响人类健康,其中以缺血性心脏病和心肌肥厚最为常见。转录因子FOXOs可以通过对抗氧化应激、促进细胞凋亡和自噬等作用保护心脏组织,在心脏疾病的治疗中发挥着重要作用。该文综述了FOXOs在心脏疾病中... 心脏疾病发病率高、死亡率高,严重影响人类健康,其中以缺血性心脏病和心肌肥厚最为常见。转录因子FOXOs可以通过对抗氧化应激、促进细胞凋亡和自噬等作用保护心脏组织,在心脏疾病的治疗中发挥着重要作用。该文综述了FOXOs在心脏疾病中的作用以及信号通路,FOXOs作为心脏疾病治疗的潜在靶点,为心脏疾病的治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 FOXOs FOXO1 FOXO3 信号通路 缺血性心肌病 心脏肥厚
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miR-144/451通过干扰14-3-3ζ/AKT/ROS正反馈通路抑制ROS的产生 预览
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作者 王婷 李斐 +2 位作者 许蕾 杭筱 郁多男 《扬州大学学报:农业与生命科学版》 CAS 北大核心 2019年第4期60-64,共5页
利用miR-144/451小分子RNA基因敲除小鼠分离骨髓有核红细胞,使用流式细胞术、定量PCR和Western blot等方法证明miR-144/451是否通过干扰14-3-3ζ/AKT/ROS正反馈通路抑制超氧化活性氧簇(ROS)的产生。结果表明:miR-144/451敲除小鼠呈现小... 利用miR-144/451小分子RNA基因敲除小鼠分离骨髓有核红细胞,使用流式细胞术、定量PCR和Western blot等方法证明miR-144/451是否通过干扰14-3-3ζ/AKT/ROS正反馈通路抑制超氧化活性氧簇(ROS)的产生。结果表明:miR-144/451敲除小鼠呈现小细胞性溶血性贫血,可能是miR-144/451敲后除引起14-3-3ζ增高,而14-3-3ζ增高可引起轻度AKT磷酸化,从而引起Foxo3入核障碍;ROS水平增高,进而激活AKT磷酸化,且ROS促AKT磷酸化程度比14-3-3ζ更强,从而加强14-3-3ζ与Foxo3的结合,引起Foxo3进一步出核,形成正反馈调节机制;ROS水平进一步增高,导致红细胞凋亡加速,小鼠呈现贫血症状。 展开更多
关键词 小鼠 miR-144/451 超氧化活性氧簇 14-3-3ζ Foxo3 AKT 红细胞
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Foxo3a蛋白表达水平、Foxp3^+百分比与慢性乙型肝炎患者病情的相关性分析 预览
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作者 赵毅 甘雪梅 +3 位作者 李远勤 谢春燕 左永清 谭奇亮 《广西医科大学学报》 CAS 2019年第2期277-281,共5页
目的:探讨Foxo3a蛋白表达水平、Foxp3~+百分比(CD4~+CD25~+Foxp3~+/CD4~+CD25~+)与慢性乙型肝炎(CHB)患者病情的相关性。方法:选择2013年1月至2016年1月四川省达州市中心医院感染内科收治的176例CHB患者为观察组,根据病情分为轻度组、... 目的:探讨Foxo3a蛋白表达水平、Foxp3~+百分比(CD4~+CD25~+Foxp3~+/CD4~+CD25~+)与慢性乙型肝炎(CHB)患者病情的相关性。方法:选择2013年1月至2016年1月四川省达州市中心医院感染内科收治的176例CHB患者为观察组,根据病情分为轻度组、中度组、重度组;并以同期的100例健康体检者为对照组。检测各组血清HBV-DNA病毒载量及血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBil)水平,并检测外周血Foxp3~+百分比及Foxo3a蛋白的表达。采用Pearson相关性分析方法分析Foxo3a表达、Foxp3~+百分比与患者病情的相关性。结果:观察组HBV-DNA病毒载量,血清ALT、AST、TBil水平,CD4~+CD25~+Foxp3~+/CD4~+CD25~+和Foxo3a蛋白表达水平均显著高于对照组,且随着病情加重上述指标均显著升高(均P<0.05)。经Pearson相关性分析CD4~+CD25~+Foxp3~+/CD4~+CD25~+、Foxo3a蛋白分别与HBV、ALT、AST、TBil含量呈正相关关系(均P<0.05)。结论:Foxo3a蛋白表达、CD4~+CD25~+Foxp3~+/CD4~+CD25~+与CHB患者HBV感染及肝功能损害呈正相关关系,可作为临床检测指标。 展开更多
关键词 Foxo3a蛋白 Foxp3^+百分比 慢性乙型肝炎 肝功能
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氧化应激条件下FoxO3a通过调控BNIP3影响滋养细胞自噬及凋亡
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作者 丁燕子 张玉瑢 +3 位作者 代延朋 邢金芳 王亮 袁恩武 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2019年第3期161-165,共5页
目的:探讨氧化应激条件下叉头框转录因子O3a(FoxO3a)参与人绒毛外滋养细胞自噬与凋亡的分子机制。方法:用葡萄糖氧化酶(GO)构建人绒毛外滋养细胞株HTR-8/SVneo的氧化应激模型并经FoxO3a特异性siRNA处理,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞... 目的:探讨氧化应激条件下叉头框转录因子O3a(FoxO3a)参与人绒毛外滋养细胞自噬与凋亡的分子机制。方法:用葡萄糖氧化酶(GO)构建人绒毛外滋养细胞株HTR-8/SVneo的氧化应激模型并经FoxO3a特异性siRNA处理,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测滋养细胞ROS和凋亡水平,荧光定量PCR法检测FoxO3a和BNIP3的mRNA水平,Western blot法检测FoxO3a、BNIP3和自噬相关蛋白LC3、Beclin1、p62蛋白表达水平。结果:与对照组相比,GO处理后细胞增殖活性下降,细胞内ROS含量增加,细胞内FoxO3a的mRNA和蛋白水平明显增高,FoxO3a磷酸化蛋白水平降低,自噬相关蛋白LC3II/LC3I、Beclin-1增强,p62蛋白水平降低(P<0.05),凋亡增加(P<0.05)。与阴性siRNA转染组相比,沉默FoxO3a后FoxO3a和BNIP3的mRNA和蛋白表达均明显降低,自噬相关蛋白LC3II/LC3I降低,p62蛋白表达增加(P<0.05),Beclin-1蛋白表达变化不明显(P>0.05),细胞凋亡减少(P<0.05)。结论:在GO诱导的氧化应激下,FoxO3a可通过调控BNIP3诱导滋养细胞自噬和凋亡。 展开更多
关键词 氧化应激 滋养细胞 FOXO3A BNIP3 自噬 凋亡
六味地黄颗粒对肾阴虚高龄不孕患者IVF结局及卵巢颗粒细胞的影响 预览
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作者 吴海萃 张建伟 +3 位作者 冯帅 薛明玥 张楠 侯森 《山东中医杂志》 2019年第6期523-529,共7页
目的:观察六味地黄颗粒对肾阴虚不孕患者体外受精(IVF)结局及卵巢颗粒细胞PI3K、pAkt和FoxO3a的影响。方法:66例接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的高龄(≥35岁)肾阴虚不孕患者,随机分为治疗组和安慰剂组,每组33例。两组患者除接受相... 目的:观察六味地黄颗粒对肾阴虚不孕患者体外受精(IVF)结局及卵巢颗粒细胞PI3K、pAkt和FoxO3a的影响。方法:66例接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的高龄(≥35岁)肾阴虚不孕患者,随机分为治疗组和安慰剂组,每组33例。两组患者除接受相同的促排卵方案治疗外,治疗组与安慰剂组分别在IVF前接受六味地黄颗粒或安慰剂治疗3个月经周期,评估肾阴虚证候积分的变化,并观察获卵数、2PN受精率、成胚率和临床妊娠率。在取卵日收集卵泡液,提取颗粒细胞,观察颗粒细胞凋亡率,并通过qRT-PCR和Western Blot技术检测颗粒细胞中的PI3K、pAkt和FoxO3a的mRNA及蛋白表达水平。结果:治疗组肾阴虚证候评分从(14.82±1.16)分下降至(7.87±1.32)分,而安慰剂组变化不明显,两组评分比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组患者卵巢颗粒细胞凋亡率与安慰剂组相比,明显降低(P<0.05)。治疗组的成胚率和临床妊娠率(57.35%和46.63%)均优于安慰剂组(48.48%和24.24%),差异有统计学意义(P<0.05)。两组之间的获卵数没有差异。与安慰剂组相比,2PN受精率变化没有统计学意义。与安慰剂组相比,治疗组PI3K和pAkt的mRNA和蛋白表达水平明显升高,FoxO3a表达下降。结论:对于接受IVF-ET的高龄肾阴虚证不孕患者,补肾中药可以缓解临床肾阴虚症状,提高成胚率及临床妊娠率,其机制可能与通过调节颗粒细胞中PI3K、pAkt和FoxO3a的表达来改善卵母细胞发育微环境、抑制颗粒细胞凋亡及提高卵母细胞质量有关。 展开更多
关键词 六味地黄颗粒 高龄不孕 肾阴虚 PI3K PAKT FOXO3A 体外受精-胚胎移植
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连翘苷经PI3K/Akt信号通路干预肾细胞癌的机制研究
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作者 吴林斌 吴元肇 +2 位作者 李晓丹 陈立 黄来剑 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期2377-2382,共6页
目的探讨连翘苷抑制人肾细胞腺癌786-0细胞生长、迁移及侵袭的作用机制。方法体外培养786-0细胞,在其中加入不同浓度连翘苷进行干预。MTT法检测细胞生存活力,AO/EB法检测细胞凋亡,划痕实验与Transwell实验分别考察细胞迁移、侵袭能力。W... 目的探讨连翘苷抑制人肾细胞腺癌786-0细胞生长、迁移及侵袭的作用机制。方法体外培养786-0细胞,在其中加入不同浓度连翘苷进行干预。MTT法检测细胞生存活力,AO/EB法检测细胞凋亡,划痕实验与Transwell实验分别考察细胞迁移、侵袭能力。Western blotting法检测细胞内PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、FOXO3a、p-FOXO3a、p21、p27、Fasl、Bim、MMP-2及MMP-9蛋白表达情况。结果连翘苷可有效抑制肾癌细胞生长、促进凋亡,干扰细胞周期,上调p21、p27、Fasl及Bim表达水平,与对照组比较差异明显(P<0.05、0.01);与对照组比较,不同浓度连翘苷可明显抑制肾癌细胞迁移与侵袭,减少MMP-2、MMP-9合成(P<0.05、0.01);同时连翘苷能明显抑制PI3K、Akt、FOXO3a磷酸化(P<0.05、0.01),且呈浓度依赖性。结论连翘苷可通过PI3K/Akt信号通路调控786-0细胞凋亡与细胞周期、抑制肾癌细胞生长;同时连翘苷经PI3K/Akt通路可有效削弱肾癌细胞迁移与侵袭能力。 展开更多
关键词 连翘苷 肾细胞癌 PI3K AKT FOXO3A
GClnc1通过SIRT3/FOXO3/SOD2信号通路促进胃癌细胞SGC7901的增殖和迁移
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作者 卢丽琴 付晓红 宋慧东 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期673-677,共5页
目的探究lncRNA GClnc1是否通过SIRT3/FOXO3/SOD2调控胃癌细胞增殖和迁移。方法通过转染慢病毒的方法,在人胃癌细胞SGC7901中分别过表达和沉默GClnc1,采用Western blot和qRT-PCR检测SIRT3/FOXO3/SOD2 mRNA和蛋白水平的改变;在过表达GCl... 目的探究lncRNA GClnc1是否通过SIRT3/FOXO3/SOD2调控胃癌细胞增殖和迁移。方法通过转染慢病毒的方法,在人胃癌细胞SGC7901中分别过表达和沉默GClnc1,采用Western blot和qRT-PCR检测SIRT3/FOXO3/SOD2 mRNA和蛋白水平的改变;在过表达GClnc1的同时分别沉默SIRT3/FOXO3/SOD2,采用CCK-8检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力。结果过表达GClnc1可以上调SIRT3/FOXO3/SOD2的mRNA和蛋白水平(P<0.05),并增强SGC7901细胞的增殖[(1.00±0.14)vs(1.79±0.21),P<0.05]和迁移能力(10.87±0.76 vs 16.53±2.25,P<0.05),而沉默GClnc1则降低SIRT3/FOXO3/SOD2的mRNA和蛋白水平(P<0.05),并减少细胞增殖(1.00±0.14 vs 0.62±0.13,P<0.05)和迁移能力(10.87±0.76 vs 6.46±0.89,P<0.01)。沉默SIRT3/FOXO3/SOD2可以消除过表达GClnc1对细胞增殖和迁移能力的促进作用。结论GClnc1通过激活SIRT3/FOXO3/SOD2信号通路促进SGC7901细胞增殖和迁移。 展开更多
关键词 GClnc1 胃癌 SITR3 FOXO3 SOD2
SIRT3、FOXO3a和E-cadherin在非小细胞肺癌中的相关性研究
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作者 田亮 郭楠 +3 位作者 苗志刚 孔彦 李鲲鹏 张楠 《智慧健康》 2019年第16期48-50,共3页
目的探讨SIRT3,FOXO3a和E-cadherin在非小细胞肺癌中的相关性。方法采用免疫组化方法分别检测130例NSCLC和癌旁组织三者蛋白的表达,分析与NSCLC大小、组织学类型、分化级别、淋巴结转移等临床病理资料间的相关性。结果癌组织分化越低,SI... 目的探讨SIRT3,FOXO3a和E-cadherin在非小细胞肺癌中的相关性。方法采用免疫组化方法分别检测130例NSCLC和癌旁组织三者蛋白的表达,分析与NSCLC大小、组织学类型、分化级别、淋巴结转移等临床病理资料间的相关性。结果癌组织分化越低,SIRT3表达越高,而FOXO3a和E-cadherin蛋白呈低表达。结论三者可能协同促进NSCLC浸润和转移,三者联合检测有助于临床判定预后。 展开更多
关键词 SIRT3 FOXO3A E-CADHERIN 非小细胞肺癌
FOXO3a在上皮性卵巢肿瘤中的表达及其与临床病理特征的相关性 预览
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作者 陈莉萍 曹婷 +2 位作者 李素芬 罗莉 杨鹰 《西部医学》 2019年第5期670-673,678共5页
目的探讨叉头转录因子(Forkhead box O3,FOXO3a)在上皮性卵巢肿瘤中的表达及其与临床病理特征的相关性。方法选取2014年1月~2017年6月我院妇科收治的87例上皮性卵巢肿瘤患者,按照不同的病理类型分为两组,其中良性上皮卵巢肿瘤组织47例... 目的探讨叉头转录因子(Forkhead box O3,FOXO3a)在上皮性卵巢肿瘤中的表达及其与临床病理特征的相关性。方法选取2014年1月~2017年6月我院妇科收治的87例上皮性卵巢肿瘤患者,按照不同的病理类型分为两组,其中良性上皮卵巢肿瘤组织47例为良性组,恶性上皮卵巢肿瘤组织40例为恶性组,选取同期45例正常卵巢上皮组织作为正常组,采用实时定量荧光PCR(Real-Time PCR)法测定FOXO3a、凋亡蛋白Bim在不同恶性程度的肿瘤以及正常上皮卵巢组织中的mRNA表达情况,采用免疫组化检测FOXO3a以及凋亡蛋白Bim、P-AKT蛋白在不同组织中的表达情况。结果 FOXO3a在mRNA中表达情况组间比较差异无统计学意义( P >0.05);上皮组织恶性程度越高,Bim的相对表达量就越低,组间比较差异均有统计学意义( P <0.05);FOXO3a和Bim及p-AKT蛋白表达在正常组、良性组、恶性组中的表达依次降低,且组间比较差异均有统计学意义( P <0.05),p-AKT蛋白在正常组、良性组、恶性组中的表达依次升高,且组间比较差异均有统计学意义( P <0.05);FOXO3a与患者年龄、FIGO分期、组织学类型、淋巴结转移无关( P >0.05),与组织分化程度相关( P <0.05);卵巢上皮组织中FOXO3a与Bim蛋白表达水平呈负相关( P <0.05),FOXO3a与p-AKT表达水平呈正相关( P <0.05)。结论 FOXO3a在上皮性卵巢癌中的表达与卵巢组织恶性程度的发展相关,FOXO3a的功能再次活化有望成为肿瘤靶向治疗的重要方法。 展开更多
关键词 FOXO3A 上皮性卵巢癌 恶性程度 病理特征
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FoxO3基因与膀胱癌临床病理特征及预后的相关性 预览
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作者 杨晗杰 刘各亮 刘波 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2019年第1期58-62,共5页
目的探讨FoxO3在膀胱癌中的表达及其与患者预后和临床病理特征的相关性。方法收集111例膀胱癌患者的癌组织及癌旁正常组织标本,采用实时定量PCR、免疫组织化学方法和Westernblot法检测FoxO3的表达。分析FoxO3与膀胱癌临床病理特征的相... 目的探讨FoxO3在膀胱癌中的表达及其与患者预后和临床病理特征的相关性。方法收集111例膀胱癌患者的癌组织及癌旁正常组织标本,采用实时定量PCR、免疫组织化学方法和Westernblot法检测FoxO3的表达。分析FoxO3与膀胱癌临床病理特征的相关性。对FoxO3进行Kaplan-Meier法生存分析。采用Cox比例风险模型分析影响预后的独立因素。结果FoxO3基因的mRNA和蛋白在膀胱癌组织中的表达均低于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。膀胱癌淋巴结转移组的FoxO3蛋白的阳性率显著低于无淋巴结转移组(P<0.05)。TNM分期中Tis~T1浅表性膀胱癌组FoxO3蛋白的阳性率显著低于T2~T3浸润性膀胱癌组。组织学分型中高级别组的FoxO3蛋白阳性率显著低于低级别组(P<0.05)。膀胱癌组织中FoxO3蛋白表达与疾病的恶化程度呈正相关(P<0.05)。FoxO3蛋白表达阴性、淋巴结转移是膀胱癌患者预后不良的危险因素。结论FoxO3蛋白表达在膀胱癌组织中显著低表达,其阴性表达是膀胱癌患者预后不良的危险因素。 展开更多
关键词 FoxO3 膀胱癌 临床病理特征 预后 淋巴结转移
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FOXO3a与MMP?9在子宫肌瘤中的表达及意义
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作者 张杭 刘富君 +2 位作者 单青 张琳瑛 肖芬球 《热带医学杂志》 CAS 2019年第2期170-173,180,262共6页
目的观察叉头基因-转录因子3a(FOXO3a)与基质金属蛋白酶-9(MMP?9)在子宫肌瘤中的表达情况,探讨二者在子宫肌瘤中的临床意义。方法选取65例子宫肌瘤患者的术后子宫肌瘤组织及正常子宫组织标本,利用和MMP?9基因表达水平,免疫组织化学法检... 目的观察叉头基因-转录因子3a(FOXO3a)与基质金属蛋白酶-9(MMP?9)在子宫肌瘤中的表达情况,探讨二者在子宫肌瘤中的临床意义。方法选取65例子宫肌瘤患者的术后子宫肌瘤组织及正常子宫组织标本,利用和MMP?9基因表达水平,免疫组织化学法检测FOXO3a和MMP?9蛋白表达,分析FOXO3a和MMP?9表达与子宫肌瘤患者临床病理特征的关系。结果与肌瘤旁组织相比,FOXO3a和MMP?9 mRNA在子宫肌瘤组织中表达差异有统计学意义(P<0.05);子宫肌瘤组织中FOXO3a阳性检出率明显低于正常肌瘤旁组织(P<0.05),MMP?9阳性检出率明显高于正常肌瘤旁组织(P<0.05);FOXO3a和MMP?9的表达与患者的年龄、体质指数(BMI)、肌瘤数量及有无乳腺疾病均不具有相关性,差异无统计学意义(P>0.05),与患者经期状况、肌瘤直径明显相关(P<0.05);子宫肌瘤组织中FOXO3a和MMP?9之间呈明显负相关性(r=-0.668,P<0.05)。结论 FOXO3a和MMP?9在子宫肌瘤组织中均异常表达,可能参与调控子宫肌瘤的发生发展等过程,为在临床上靶向治疗子宫肌瘤提供一定的参考方法。 展开更多
关键词 子宫肌瘤 FOXO3A MMP?9
慢性血栓栓塞性肺动脉高压患者血管平滑肌细胞中FoxO3a和MMP2表达升高 预览
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作者 王峰 甄雅楠 +3 位作者 刘晓鹏 林凡 刘鹏 温见燕 《基础医学与临床》 CSCD 2019年第5期652-656,共5页
目的研究FoxO3a及MMP2在慢性血栓栓塞性肺动脉高压(CTEPH)中的表达和作用。方法收集CTEPH患者20例,选取5例清洁手术标本,原代培养得到患者肺动脉血管平滑肌细胞(VSMCs);利用供体肺动脉主干作为对照,原代培养得到正常肺动脉VSMCs。免疫... 目的研究FoxO3a及MMP2在慢性血栓栓塞性肺动脉高压(CTEPH)中的表达和作用。方法收集CTEPH患者20例,选取5例清洁手术标本,原代培养得到患者肺动脉血管平滑肌细胞(VSMCs);利用供体肺动脉主干作为对照,原代培养得到正常肺动脉VSMCs。免疫组织化学染色及Western blot检测血管组织及VSMCs中FoxO3a和MMP2表达。结果疾病组FoxO3a的积分吸光度值( IA )为:3 269±338,显著高于对照组的420±46( P <0.01);疾病组和对照组的MMP2的 IA 分别为4 936±521、1 799±139( P <0.01);FoxO3a 和MMP2在疾病组表达较对照组明显升高( P <0.05)。结论 CTEPH患者肺血管中FoxO3a和MMP2高表达,这两种信号分子可能参与了CTEPH血管重塑的过程。 展开更多
关键词 慢性血栓栓塞性肺动脉高压 FOXO3A MMP2 血管平滑肌细胞
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miR-96靶向调控NF-κB/miR-155/FOXO3a信号通路对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响
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作者 梅浩砚 牛惠惠 《中国煤炭工业医学杂志》 2019年第5期513-517,共5页
目的研究miR-96靶向调控NF-κB/miR-155/FOXO3a信号通路对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法经慢病毒转染沉默肝癌HepG2细胞miR-96蛋白表达,通过WST-8实验测定细胞的生长曲线,流式细胞术检测基因沉默后HeGp2的凋亡情况,Western blot... 目的研究miR-96靶向调控NF-κB/miR-155/FOXO3a信号通路对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法经慢病毒转染沉默肝癌HepG2细胞miR-96蛋白表达,通过WST-8实验测定细胞的生长曲线,流式细胞术检测基因沉默后HeGp2的凋亡情况,Western blot分析沉默miR-96表达对肝癌细胞FOXO3a、miR-155、IKB、NF-kB、Ki67、PCNA、VEGF、Bcl-2、Bad、cleaved-caspase-3蛋白表达的影响。结果慢病毒转染后可获得遗传稳定的HepG2-miR-96-shRNA细胞系,WST-8细胞生长结果显示:与对照组比较,HepG2-miR-96-shRNA细胞的增殖能力显著降低(P <0.05);流式细胞术检测发现:HepG2-miR-96-shRNA细胞凋亡数量明显提升(P<0.05);Western blot结果提示:沉默miR-96蛋白表达后,促凋亡蛋白Bad,cleaved-caspase-3、FOXO3a及NF-κB蛋白的表达量显著增加,抑凋亡蛋白Bcl-2、miR-155、IkB及VEGF表达量明显降低。结论 miR-96通过靶向调控NF-κB/miR-155/FOXO3a信号通路抑制肝癌HepG2细胞凋亡,促进细胞增殖。 展开更多
关键词 miR-96 靶向调控 NF-κB信号通路 FOXO3A 细胞凋亡
FOXO3A对全身照射小鼠造血系统辐射损伤的影响 预览
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作者 王玉全 李程程 +7 位作者 苏路路 管博文 卢延华 关菲菲 荣利 王小春 孟爱民 樊飞跃 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第9期10-16,共7页
目的利用FOXO3A基因敲除小鼠探讨FOXO3A在造血系统电离辐射(ionizing radiation,IR)损伤中的影响。方法FOXO3A^-/-小鼠和WT小鼠(FVB/N)分为野生型小鼠对照组(WT组),FOXO3A^-/-小鼠对照组(FOXO3A^-/-组),野生型小鼠照射组(WT+IR),FOXO3A^... 目的利用FOXO3A基因敲除小鼠探讨FOXO3A在造血系统电离辐射(ionizing radiation,IR)损伤中的影响。方法FOXO3A^-/-小鼠和WT小鼠(FVB/N)分为野生型小鼠对照组(WT组),FOXO3A^-/-小鼠对照组(FOXO3A^-/-组),野生型小鼠照射组(WT+IR),FOXO3A^-/-小鼠照射组(FOXO3A^-/-+IR)四组,分别接受假照射和4 Gy X射线全身照射(total body irradiation,TBI),剂量率为0.9 Gy/min。接受TBI后14 d检测FOXO3A^-/-小鼠和WT小鼠脏器指数、外周血和骨髓细胞计数,骨髓细胞分型,造血祖细胞(HPCs)粒细胞巨噬细胞集落形成单位(colony forming unit-granulocyte and macrophage,CFU-GM)形成能力,观察FOXO3A基因敲除对造血系统辐射损伤的影响。结果生理情况下,FOXO3A^-/-小鼠骨髓有核细胞计数下降,HPCs比例升高(P<0.05);小鼠接受4 Gy X射线TBI后14 d,FOXO3A基因敲除会加重电离辐射诱导的HPCs和造血干细胞(HSCs)比例下降,但也会抑制辐射诱导的骨髓有核细胞数下降和造血祖细胞CFU-GM形成能力减退。结论FOXO3A基因敲除破坏造血系统稳态维持,加重TBI小鼠HPCs和HSCs的辐射损伤,对造血细胞辐射敏感性产生一定的影响。FOXO3A在造血系统电离辐射损伤中的调节作用以及能否作为防治损伤的靶点还有待进一步研究。 展开更多
关键词 电离辐射 FOXO3A 造血干细胞 造血祖细胞 活性氧 DNA损伤应答 小鼠
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miRNA-1236通过靶向FOXO3a调控结直肠癌细胞增殖的作用及机制研究 预览
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作者 孙宇 朱琳 +7 位作者 刘祯璐 杨明 余贞 孙静 王妍 蒋雨含 李红岩 孙辉 《中华结直肠疾病电子杂志》 2019年第4期383-389,共7页
目的探讨miRNA-1236对结直肠癌细胞增殖的作用及其相关机制。方法通过实时定量PCR检测转染miR-1236后miRNA-1236的表达,使用CCK-8以及克隆形成方法检测转染miRNA-1236后HCT116细胞的活性,ki67方法检测转染miRNA-1236后HCT116细胞增殖能... 目的探讨miRNA-1236对结直肠癌细胞增殖的作用及其相关机制。方法通过实时定量PCR检测转染miR-1236后miRNA-1236的表达,使用CCK-8以及克隆形成方法检测转染miRNA-1236后HCT116细胞的活性,ki67方法检测转染miRNA-1236后HCT116细胞增殖能力的变化,生物信息方法筛选miR-1236的潜在靶基因FOXO3a。Luciferase报告检测miRNA-1236与FOXO3a的结合位点,通过实时定量PCR方法检测转染miRNA-1236后FOXO3a基因的变化;通过免疫组化的方法检测结直肠癌患者组织中FOXO3a的表达,通过western blot检测低表达miRNA-1236后HCT116细胞中FOXO3a、PCNA以及Bax蛋白的变化。通过TCGA数据库检测FOXO3a基因在结直肠癌患者癌-癌旁,不同肿瘤阶段与不同性别中的表达。结果本研究发现高表达miRNA-1236后HCT116细胞活性相对于阴性对照组明显增加,而低表达miRNA-1236后活性降低。低表达miRNA-1236后HCT116细胞增殖能力相对于阴性对照组明显降低。生物信息学预测miR-1236与FOXO3a有潜在的结合位点。采用Western blot以及逆转录实时定量PCR验证,过表达miRNA-1236后FOXO3a表达相对于阴性对照组明显降低,而低表达miRNA-1236后,FOXO3a表达明显升高,同时luciferase结果显示,FOXO3a是miRNA-1236的靶基因。并且,FOXO3a在结直肠癌症组织中明显降低。结论miR-1236通过靶向FOXO3a的表达调节结直肠癌细胞HCT116增殖,同时为miR-1236成为诊断、预防以及治疗结直肠癌的生物学标记物提供理论基础。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 miR-1236 FOXO3A 增殖
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FOXO3在肺癌组织与肺癌干细胞中的表达特征及其与肺癌分化转移的相关性分析 预览
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作者 李莉红 梁晶 白璐 《临床和实验医学杂志》 2019年第14期1519-1522,共4页
目的 分析FOXO3在肺癌组织与肺癌干细胞中的表达特征及其与肺癌分化转移的相关性。方法 回顾性分析105例肺癌患者的临床资料,并以35例正常肺组织标本进行对照分析。分别采用免疫组织化学法、Western blot及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)... 目的 分析FOXO3在肺癌组织与肺癌干细胞中的表达特征及其与肺癌分化转移的相关性。方法 回顾性分析105例肺癌患者的临床资料,并以35例正常肺组织标本进行对照分析。分别采用免疫组织化学法、Western blot及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对肺癌组织和正常肺组织中FOXO3的表达情况进行检测,并用Western blot和RT-PCR法对肺癌干细胞中FOXO3蛋白和mRNA表达水平进行检测,同时比较不同病理类型、分化程度及是否伴有淋巴结转移的肺癌患者FOXO3蛋白表达情况。结果 免疫组织化学法检测发现,FOXO3蛋白主要定位于细胞质和细胞间质中,且低表达于不同病理类型的肺癌组织。Western blot检测发现,肺癌组织中FOXO3蛋白表达水平较正常肺组织显著下调( P <0.01);肺癌干细胞中FOXO3蛋白表达水平较正常肺组织亦显著下调( P <0.01)。RT-PCR检测发现,肺癌组织中FOXO3 mRNA相对表达量较正常肺组织显著降低( P <0.01);肺癌干细胞中FOXO3 mRNA相对表达量较正常肺组织亦显著降低( P <0.01)。不同病理类型的肺癌患者FOXO3蛋白阳性率的比较,差异无统计学意义( P >0.05);未分化+低分化、伴有淋巴结转移的患者FOXO3蛋白阳性率较中分化+高分化、无淋巴结转移者显著降低( P <0.05)。结论 肺癌组织与肺癌干细胞中FOXO3具有低表达的特点,并且其与肺癌分化程度和淋巴结转移存在密切关系,FOXO3有望成为临床治疗肺癌患者的新型靶点,具有潜在的研究价值。 展开更多
关键词 肺癌 干细胞 FOXO3 免疫组织化学法 分化 转移
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白藜芦醇对前列腺增生上皮细胞系BPH-1氧化应激及凋亡的作用 预览
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作者 李超 胡万里 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2019年第3期222-226,共5页
目的探究白藜芦醇(Resveratrol)在前列腺增生上皮细胞系BPH-1中的作用及可能的机制。方法用不同浓度的白藜芦醇处理BPH-1细胞,处理24h后用MTT法、流式细胞术等方法测不同白藜芦醇对BPH-1的作用,Western blot测定不同浓度白藜芦醇作用后... 目的探究白藜芦醇(Resveratrol)在前列腺增生上皮细胞系BPH-1中的作用及可能的机制。方法用不同浓度的白藜芦醇处理BPH-1细胞,处理24h后用MTT法、流式细胞术等方法测不同白藜芦醇对BPH-1的作用,Western blot测定不同浓度白藜芦醇作用后相关蛋白的表达及改变,探究其作用可能的机制。结果白藜芦醇处理BPH-1细胞24h及48h后,细胞生长明显受抑制,且呈浓度、时间依赖性;流式细胞术显示随着浓度的增加,细胞的凋亡率及活性氧(ROS)均增加,细胞周期分析显示白藜芦醇可以诱导细胞发生S期阻滞;Western blot显示白藜芦醇作用24h后,FOXO3显著降低,且浓度越高FOXO3降低越明显,FOXO3下游Catalase呈下降趋势,凋亡相关蛋白Caspase 3、Bcl2、Bcl2-XL也出现相应改变。免疫荧光提示30μmol/L白藜芦醇处理24h后FOXO3蛋白发生核转移。结论白藜芦醇可以抑制前列腺增生上皮细胞系BPH-1的增殖并促进其凋亡,其机制可能是白藜芦醇抑制了FOXO3的表达,促进FOXO3蛋白入核,抑制Catalase蛋白表达,使细胞清除活性氧能力下降,导致活性氧蓄积,触发凋亡相关蛋白而诱导细胞发生凋亡,并且白藜芦醇可以诱导BPH-1细胞发生S期阻滞,具体机制有待进一步探究。 展开更多
关键词 前列腺增生 白藜芦醇 FOXO3 细胞凋亡 细胞周期阻滞
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FOXO3A基因敲除小鼠繁殖鉴定及骨髓造血干细胞表型初步分析 预览
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作者 王玉全 李程程 +4 位作者 苏路路 管博文 卢延华 孟爱民 樊飞跃 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第1期41-46,共6页
目的繁育和鉴定FOXO3A基因敲除小鼠,选育的FOXO3A基因敲除杂合型小鼠用于保种,纯合型小鼠用于实验。初步分析FOXO3A基因敲除对小鼠造血细胞表型的影响,为后续FOXO3A基因对造血细胞损伤的调节研究奠定基础。方法杂合型雌鼠与野生型雄鼠交... 目的繁育和鉴定FOXO3A基因敲除小鼠,选育的FOXO3A基因敲除杂合型小鼠用于保种,纯合型小鼠用于实验。初步分析FOXO3A基因敲除对小鼠造血细胞表型的影响,为后续FOXO3A基因对造血细胞损伤的调节研究奠定基础。方法杂合型雌鼠与野生型雄鼠交配,选育出杂合型雌鼠和杂合型雄鼠,采用一雄一雌或一雄两雌同笼合养方式进行繁育获得纯合型小鼠;繁育的幼鼠剪趾标号,剪尾提取基因组DNA,采用PCR方法进行基因型鉴定,鉴定获得100bp/186bp两条条带的为杂合型小鼠(FOXO3A+/-),鉴定获得186bp条带的为纯合型小鼠(FOXO3A-/-),鉴定获得100bp条带的为野生型小鼠(FOXO3A+/+,WT);采用流式细胞术对鉴定出的野生型和纯合型小鼠进行骨髓细胞分型分析。结果FOXO3A基因敲除小鼠已成功繁殖鉴定,子代基因敲除纯合型小鼠与杂合型小鼠长势正常,与野生型FVB/N小鼠相比外观、生长发育未见明显差异;已得到一定数量的纯合型小鼠用于后续实验;骨髓细胞计数结果显示,FOXO3A基因敲除纯合型小鼠骨髓有核细胞计数与野生型小鼠相比[(6.167±1.424)vs.(10±1.732)],未见明显差异(P=0.1625);流式分析结果显示:FOXO3A基因敲除小鼠骨髓中造血祖细胞(lin-scal-1-ckit+,HPC)比例明显升高(P<0.05),造血干细胞(lin-scal-1+ckit+,HSC)比例没有明显差异;造血干细胞和造血祖细胞数目未发现有明显差异(P>0.05)。结论经基因型鉴定已成功获得FOXO3A基因敲除小鼠。初步探讨FOXO3A基因敲除对小鼠骨髓细胞计数及分型未见明显影响,FOXO3A基因敲除对小鼠造血细胞的影响需要进一步的实验加以证明。 展开更多
关键词 FOXO3A 基因敲除小鼠 PCR 流式细胞术
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FOXO3抑制膀胱癌细胞生长的体外实验研究 预览
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作者 何笑凯 康郑军 柴蕴珠 《癌症进展》 2019年第7期784-787,共4页
目的研究叉头框转录因子O3(FOXO3)对膀胱癌细胞生长的影响及机制。方法将人膀胱癌T24细胞转染FOXO3-pcDNA3.1 和pcDNA3.1,分别记为FOXO3 组、Vector 组,将没有转染的T24 细胞记为对照组。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测FOXO3 mRNA表... 目的研究叉头框转录因子O3(FOXO3)对膀胱癌细胞生长的影响及机制。方法将人膀胱癌T24细胞转染FOXO3-pcDNA3.1 和pcDNA3.1,分别记为FOXO3 组、Vector 组,将没有转染的T24 细胞记为对照组。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测FOXO3 mRNA表达情况,蛋白质印迹(Western blot)法检测FOXO3 蛋白表达情况,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,Western blot 法检测β-链蛋白(β-catenin)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达情况。结果 Vector组细胞中FOXO3mRNA和蛋白相对表达量与对照组比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);FOXO3 组细胞中FOXO3 mRNA和蛋白相对表达量均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。Vector 组细胞光密度(OD)值、细胞克隆数目与对照组比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);FOXO3 组细胞OD值、细胞克隆数目均低于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。Vector 组细胞中β-catenin、p-AKT、AKT蛋白相对表达量与对照组比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);FOXO3 组细胞中AKT 蛋白相对表达量与对照组比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);FOXO3 组细胞中β-catenin、p-AKT蛋白相对表达量均低于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论 FOXO3能够在体外抑制膀胱癌细胞生长,下调β-catenin 和p-AKT 蛋白表达。 展开更多
关键词 膀胱癌 FOXO3 克隆 增殖
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