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差速离心、密度梯度离心、超滤离心技术在骨髓间充质干细胞外泌体提取中的应用对比观察 预览
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作者 罗靖莹 贺宏丽 +2 位作者 郭阳 黄玮玮 黄晓波 《山东医药》 CAS 2019年第12期48-52,共5页
目的观察差速离心、密度梯度离心、超滤离心技术在骨髓间充质干细胞(BMSCs)外泌体提取中的应用,筛选外泌体最佳离心提取方法。方法取BMSCs培养48 h后收集细胞上清,平均分成A、B、C组,分别使用差速离心技术、密度梯度离心技术、超滤离心... 目的观察差速离心、密度梯度离心、超滤离心技术在骨髓间充质干细胞(BMSCs)外泌体提取中的应用,筛选外泌体最佳离心提取方法。方法取BMSCs培养48 h后收集细胞上清,平均分成A、B、C组,分别使用差速离心技术、密度梯度离心技术、超滤离心技术提取外泌体;记录各组外泌体提取时间;采用负染色技术观察各组外泌体形态;使用纳米颗粒跟踪分析仪测算各组外泌体浓度及大小;采用BCA法测定外泌体总蛋白浓度;采用Western blotting法检测各组外泌体表面标志蛋白CD9、CD63、Alix。将肺微血管内皮细胞(PMVECs)分成5组,EC组上室加入PMVECs及培养基;LPS组上室加入PMVECs及含LPS的培养基(构建内皮细胞损伤模型);A、B、C组上室加入方法同LPS组,下室分别加入A、B、C组外泌体;采用葡聚糖渗漏实验检测外泌体内皮细胞通透性(观察外泌体对内皮细胞的修复作用),以内皮细胞通透指数表示。结果 A、B、C组的外泌体的提取时间分别为(180±8)、(203±10)、(40±5) min,A、B组外泌体的提取时间与C组相比,P均<0. 05。各组外泌体均为大小不等的椭圆形或圆形的膜性结构,边界清晰,但仅A组外泌体可见到典型的杯状结构。A、B、C组的外泌体浓度分别为(4. 46±0. 38)×10^8/m L、(5. 11±0. 16)×10^8/m L、(2. 18±0. 17)×10^8/m L,A、B组与C组外泌体浓度相比,P均<0. 05。A、B、C组的外泌体大小均为20~100 nm。A、B组外泌体总蛋白浓度及CD63、Alix的相对表达量均显著高于C组(P均<0. 05)。A、B、C、LPS、EC组的内皮细胞通透指数分别为2. 17±0. 15、1. 77±0. 32、2. 37±0. 42、2. 93±0. 15、1. 00±0. 00,A、B、C、LPS组的内皮细胞通透指数与EC组相比,P均<0. 05;A、B组的内皮细胞通透指数与LPS组相比,P均<0. 05。结论密度梯度离心技术虽耗时较长,但提取的外泌体纯度、浓度较高,对内皮细胞的修复作用较强,可以作为科研和临床研究的首选外泌体离� 展开更多
关键词 外泌体 外泌体提取方法 差速离心技术 密度梯度离心技术 超滤离心技术 间充质干细胞 骨髓间充质干细胞 肺微血管内皮细胞
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树突细胞源性外泌体在免疫治疗中应用的研究进展
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作者 何鑫 任伟宏 +4 位作者 桑锋 邓博文 荣昊 刘朝阳 郭慧玲 《中华实用诊断与治疗杂志》 2019年第4期406-409,共4页
外泌体是体液中广泛分布的纳米级生物活性胞外囊泡,其携带母体细胞物质,介导细胞间信息交流,参与对靶细胞功能的调节。树突细胞源性外泌体是由树突细胞分泌的直径为30~150 nm的囊泡,可执行树突细胞的抗原处理与提呈功能。树突细胞源性... 外泌体是体液中广泛分布的纳米级生物活性胞外囊泡,其携带母体细胞物质,介导细胞间信息交流,参与对靶细胞功能的调节。树突细胞源性外泌体是由树突细胞分泌的直径为30~150 nm的囊泡,可执行树突细胞的抗原处理与提呈功能。树突细胞源性外泌体通过对T细胞、自然杀伤细胞、树突细胞进行调节,发挥免疫抑制与活化效应,并可用于自身免疫性疾病、损伤组织修复、器官移植、肿瘤、感染等疾病的治疗。本文就树突细胞源性外泌体的免疫调节作用及其应用的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 树突细胞 外泌体 树突细胞源性外泌体 免疫调节 免疫治疗
干细胞源外泌体修复神经损伤的研究现状
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作者 朱佳敏 刘玉梅 +3 位作者 张自强 李晓宁 张昊恺 曹雨露 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第13期1413-1416,共4页
神经损伤在临床中较为常见,探索有效修复损伤神经的方法已经成为近年来的研究热点。干细胞源外泌体(SC-exosomes)内含多种生物活性物质。干细胞能发挥各种组织修复作用主要依赖于其分泌的外泌体。本文就SC - exosomes的生物学特性及其... 神经损伤在临床中较为常见,探索有效修复损伤神经的方法已经成为近年来的研究热点。干细胞源外泌体(SC-exosomes)内含多种生物活性物质。干细胞能发挥各种组织修复作用主要依赖于其分泌的外泌体。本文就SC - exosomes的生物学特性及其对神经损伤修复的影响做一综述。 展开更多
关键词 干细胞 外泌体 神经损伤 干细胞源外泌体
Renca细胞来源的外泌体活化髓源抑制性细胞对细胞毒性T细胞的抑制效应
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作者 徐浩语 王和西 +1 位作者 黎楠 张尧 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期923-930,共8页
目的探讨Renca细胞来源的外泌体(exosomes)活化的髓源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells, MDSCs)对肾癌抗原特异性细胞毒性T细胞(cytotoxic lymphocytes, CTLs)体外增殖和杀伤效应的抑制作用。方法超速离心法从Renca细胞无... 目的探讨Renca细胞来源的外泌体(exosomes)活化的髓源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells, MDSCs)对肾癌抗原特异性细胞毒性T细胞(cytotoxic lymphocytes, CTLs)体外增殖和杀伤效应的抑制作用。方法超速离心法从Renca细胞无血清上清液中提取出exosomes,流式细胞术检测exosomes对MDSCs的活化效应。分离并培养小鼠树突状细胞(dendritic cells, DCs)和CD8+T细胞,制备DCs活化的肾癌抗原特异性CTLs。磁珠分选exosomes活化的MDSCs,羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFSE)荧光染色和流式细胞术检测MDSCs对CTLs增殖的抑制作用。将MDSCs、CTLs和Renca细胞体外共培养,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)释放实验检测exosomes活化的MDSCs对CTLs杀伤效应的抑制作用。结果 Renca细胞来源的exosomes有效地诱导了MDSCs的聚集,成功制备了DCs并获得了DCs诱导的肾癌抗原特异性CTLs。与exosomes活化的MDSCs共培养后的CTLs其增殖指数和杀伤率明显低于与未活化的MDSCs共培养后的CTLs和单独的CTLs(P<0.05)。结论 Renca细胞来源的exosomes活化的MDSCs抑制了肾癌抗原特异性CTLs的体外增殖和杀伤效应,可能在肾癌免疫逃逸中扮演重要作用。 展开更多
关键词 Renca细胞 EXOSOMES MDSCS CTLS 抑制效应
非小细胞肺癌外泌体研究进展
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作者 冷远秀 陈芳 罗清 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2019年第6期437-442,共6页
目的外泌体是一种能被大多数细胞分泌的细胞外微小膜泡,含有多种生物活性分子,如蛋白质、微小RNA(microRNA,miRNA)和长链非编码RNA(long-chain non-coding RNAs,lncRNAs),在肿瘤发生发展中起重要的作用.本研究探讨外泌体在非小细胞肺癌(... 目的外泌体是一种能被大多数细胞分泌的细胞外微小膜泡,含有多种生物活性分子,如蛋白质、微小RNA(microRNA,miRNA)和长链非编码RNA(long-chain non-coding RNAs,lncRNAs),在肿瘤发生发展中起重要的作用.本研究探讨外泌体在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的研究进展,更新外泌体在NSCLC中的理解.方法应用PubMed及中国知网数据库检索系统,以“外泌体、肺癌”为关键词,检索2005-2018年的相关文献,共检索到中文文献61篇,英文文献171篇.纳入标准:外泌体与肺癌相关性的科学研究.根据纳入标准分析文献47篇.结果外泌体作为细胞间质物质和信息交流的工具,通过不同机制促进肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移转移及血管形成.此外,外泌体能预测肿瘤对放化疗的敏感性和作为治疗过程中的疗效监测指标及药物递送的介质,还能进一步提高对NSCLC的诊断和预后的判断.结论 NSCLC相关的外泌体与肿瘤发生、放化疗抵抗和转移有关,还可以作为NSCLC诊断、预后、监测和治疗的新型生物标志物. 展开更多
关键词 外泌体 非小细胞肺癌 肿瘤来源外泌体 综述文献
间充质干细胞来源外泌体对皮肤组织修复作用的研究进展
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作者 骆瑜 王娟 彭友俭 《中华创伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期860-864,共5页
间充质干细胞(MSCs)因具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点,在皮肤创面修复中发挥重要作用。外泌体中含有蛋白质和RNA等成分,具有抗肿瘤免疫、促血管新生等生理功能。不同MSCs来源的外泌体在皮肤创... 间充质干细胞(MSCs)因具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点,在皮肤创面修复中发挥重要作用。外泌体中含有蛋白质和RNA等成分,具有抗肿瘤免疫、促血管新生等生理功能。不同MSCs来源的外泌体在皮肤创面作用的机制不同,笔者从皮肤损伤传统治疗方法、外泌体的生物学性能、MSCs来源的外泌体对皮肤创面修复的作用机制、MSCs来源的外泌体在其他疾病中的作用机制等方面将不同MSCs来源的外泌体在皮肤组织修复相关领域的研究进展进行综述,为临床提高该领域创面修复水平提供参考。 展开更多
关键词 间充质干细胞 外泌体 皮肤创面修复
唾液外泌体在头颈恶性肿瘤中的研究进展
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作者 肖茂春 刘淑云 +1 位作者 杨烨 殷泽登 《国际耳鼻咽喉头颈外科杂志》 2019年第1期14-18,共5页
唾液外泌体是细胞通过主动分泌作用产生并排出胞外的圆形杯状囊泡,其内含有大量信息分子,参与和调节多种信号通路,在细胞间的信息交流以及物质传递方面发挥着极其重要的作用。唾液外泌体不仅可作为疾病诊断的标记物,还可能作为药物载体... 唾液外泌体是细胞通过主动分泌作用产生并排出胞外的圆形杯状囊泡,其内含有大量信息分子,参与和调节多种信号通路,在细胞间的信息交流以及物质传递方面发挥着极其重要的作用。唾液外泌体不仅可作为疾病诊断的标记物,还可能作为药物载体应用于疾病的治疗。本文主要就现阶段唾液外泌体的研究进展及其在头颈恶性肿瘤中的作用进行综述。 展开更多
关键词 唾液 外泌体 头颈部肿瘤
去卵巢大鼠血清来源外泌体促进原代成骨细胞的增殖 预览
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作者 高坤 朱文秀 +5 位作者 李亨 刘伟东 李全 余伟吉 王立新 曹亚飞 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第7期985-989,共5页
背景:骨代谢过程中,成骨细胞的数量和功能的变化影响骨的生物学特性,外泌体能够通过细胞间的传递进行信号传递,具有促进细胞增殖、分化的潜能。目的:探讨骨质疏松大鼠血清中外泌体的性质及其对成骨细胞的作用。方法:32只成年健康雌性SD... 背景:骨代谢过程中,成骨细胞的数量和功能的变化影响骨的生物学特性,外泌体能够通过细胞间的传递进行信号传递,具有促进细胞增殖、分化的潜能。目的:探讨骨质疏松大鼠血清中外泌体的性质及其对成骨细胞的作用。方法:32只成年健康雌性SD大鼠,24h新生SD大鼠若干只用于原代成骨细胞分离培养,实验动物由广东省医学动物实验中心提供。①建立去卵巢骨质疏松大鼠模型,以假手术组大鼠为对照组。通过ExoQuick提取对照组和骨质疏松大鼠血清中外泌体,用电镜、nanosight、Westernblotting进行鉴定;②取对数期的原代成骨细胞接种于96孔细胞培养板中,接种浓度为2×10^4/孔。实验分为空白对照、外泌体对照组、骨质疏松外泌体组,分别加入DPBS、正常血清外泌体和骨质疏松血清外泌体,100μL/孔,CO2培养箱培育1d,采用四甲基偶氮唑盐比色法检测成骨细胞的增殖;酶联免疫吸附试验法检测外泌体中血管内皮生长因子的浓度。结果与结论:①成功提取大小在100nm以下外泌体颗粒;②蛋白定量检测12周组外泌体蛋白质量浓度最高;不同时间点外泌体颗粒数12周组略高,但未见明显差异;③骨质疏松大鼠血清来源外泌体与空白对照组及正常外泌体组相比较,明显促进成骨细胞的增殖,且外泌体内血管内皮生长因子升高;④结果说明,骨质疏松大鼠血清中外泌体能够促进成骨细胞的增殖。 展开更多
关键词 骨质疏松 外泌体 成骨细胞 血管内皮生长因子 组织构建 血管内皮生长因子类 组织工程
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细胞外囊泡及其在疾病诊疗中的应用
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作者 黄琳 王殿冰 +1 位作者 顾宁 张先恩 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第19期2025-2036,共12页
细胞外囊泡(extracellular vesicles, EVs)是细胞分泌的一种脂质囊泡,尺寸介于30~5000 nm.通过不同的发生机理, EVs可以形成微囊泡体(microvesicles)、凋亡小体(apoptotic bodies)和外泌体(exosomes)等.它们通过携带母细胞的不同脂质、... 细胞外囊泡(extracellular vesicles, EVs)是细胞分泌的一种脂质囊泡,尺寸介于30~5000 nm.通过不同的发生机理, EVs可以形成微囊泡体(microvesicles)、凋亡小体(apoptotic bodies)和外泌体(exosomes)等.它们通过携带母细胞的不同脂质、蛋白质和核酸等活性成分来靶向附近或远端细胞,在细胞的信息交流及生理病理过程中均具有重要作用. EVs在生物体系内广泛存在,其生物学功能也越来越多地被认识,或许正在成为一个“细胞外囊泡生物学”领域.对EVs性质的认识也促进了相关应用研究,涉及疾病诊断、治疗和药物运送等.本文重点阐述了EVs的生物起源、生物组成、生物学特性、生物学功能、制备和表征手段,并针对EVs在疾病诊疗中的应用所面临的问题开展讨论.可以预期,对EVs形成和调控机理的深入认识,一方面有助于我们更好地理解EVs的生物学功能、异质性和功能多样性;另一方面有可能基于这些知识来解决EVs开发应用中的瓶颈问题. 展开更多
关键词 细胞外囊泡 药物运送载体 外泌体 纳米材料 肿瘤标志物
外泌体在结直肠癌中的研究进展 预览
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作者 李在明 魏正强 《医学信息》 2019年第3期42-44,共3页
近年来,由于对外泌体的不断认识和了解,研究外泌体已成为当下的热点,外泌体是细胞分泌的一种纳米级囊泡结构,可来源于机体正常细胞及肿瘤细胞,在血液、唾液、尿液、母乳等多种体液中均有分布,其参与许多生物学和病理学过程,主要是由于... 近年来,由于对外泌体的不断认识和了解,研究外泌体已成为当下的热点,外泌体是细胞分泌的一种纳米级囊泡结构,可来源于机体正常细胞及肿瘤细胞,在血液、唾液、尿液、母乳等多种体液中均有分布,其参与许多生物学和病理学过程,主要是由于它们在细胞间通讯作用,源自结直肠癌(CRC)细胞的外泌体与肿瘤发生、进展、转移、预后等相关。本文就外泌体在结直肠癌中的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 结直肠癌 外泌体 标志物 肿瘤微环境
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川崎病体外研究现状 预览
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作者 郑小兰 吴刚 +2 位作者 张怡 华益民 周开宇 《中华妇幼临床医学杂志(电子版)》 CAS 2019年第4期468-471,共4页
川崎病(Kawasaki disease)是一种主要发生在5岁以下婴幼儿的全身中小动脉血管炎,是发达国家儿童获得性心脏病的最常见病因。临床对于川崎病的发病机制迄今尚未阐明。随着近年分子生物学技术的发展,对川崎病的研究取得很大进步。笔者拟... 川崎病(Kawasaki disease)是一种主要发生在5岁以下婴幼儿的全身中小动脉血管炎,是发达国家儿童获得性心脏病的最常见病因。临床对于川崎病的发病机制迄今尚未阐明。随着近年分子生物学技术的发展,对川崎病的研究取得很大进步。笔者拟从基因组学、蛋白质组学、外泌体3个方面,对川崎病的体外研究现状进行阐述。 展开更多
关键词 黏膜皮肤淋巴结综合征 冠状动脉瘤 基因组学 蛋白质组学 外泌体 免疫球蛋白类 静脉内 儿童
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外泌体在气道慢性疾病中作用机制的研究进展
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作者 王玉秀 冯婷婷 +2 位作者 陈众众 顾建军 闵凌峰 《国际呼吸杂志》 2019年第11期874-880,共7页
慢性阻塞性肺疾病和哮喘作为世界范围内两大主要的慢性气道炎症性疾病,其发病率在世界范围内持续上升。其主要病理表现为气道慢性炎症反应以及气道重塑,具体作用机制仍是目前需要进一步攻破的难题,近年来研究显示外泌体作为细胞间以及... 慢性阻塞性肺疾病和哮喘作为世界范围内两大主要的慢性气道炎症性疾病,其发病率在世界范围内持续上升。其主要病理表现为气道慢性炎症反应以及气道重塑,具体作用机制仍是目前需要进一步攻破的难题,近年来研究显示外泌体作为细胞间以及细胞与环境之间主要的信号传递工具之一,其在气道慢性炎症性疾病发生、发展中有非常重要的作用,可能为气道慢性炎症性疾病诊治提供新的思路,本文将就外泌体在气道慢性炎症性疾病作用机制研究进展进行综述。 展开更多
关键词 外泌体 肺疾病 慢性阻塞性 哮喘 气道重塑 慢性气道炎症性疾病 慢性气道炎症
外泌体在类风湿性关节炎发病机制中的研究进展 预览
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作者 邓雷弘 龚芸 +1 位作者 黄晓林 巢海潮 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期556-561,共6页
外泌体是细胞主动分泌的一种直径30~100 nm的囊泡状小体,其内容物含有蛋白质、脂质及RNA等多种成分。外泌体参与介导细胞间的通讯,参与炎症反应、细胞增殖与分化、组织修复、免疫信号通路转导及应激反应等体内多种生理及病理进程。大量... 外泌体是细胞主动分泌的一种直径30~100 nm的囊泡状小体,其内容物含有蛋白质、脂质及RNA等多种成分。外泌体参与介导细胞间的通讯,参与炎症反应、细胞增殖与分化、组织修复、免疫信号通路转导及应激反应等体内多种生理及病理进程。大量研究显示外泌体可以调节、维持自身免疫性疾病,尤其是类风湿性关节炎的发生与进展,其可能是类风湿性关节炎新的诊断标志物及潜在的治疗载体。 展开更多
关键词 外泌体 自身免疫性疾病 类风湿性关节炎
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循环外泌体检测在胰腺癌临床早期诊断的研究新进展
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作者 王媛媛 丁宇 +4 位作者 谭钺洸 毛娟 朱玲 丁克祥 戴萌 《国际老年医学杂志》 2019年第2期111-115,共5页
胰腺癌是一种高度致命的恶件肿瘤,缺乏早期临床诊断的高敏感和高特异的标记物胰腺癌患者外泌体町以由外周循环血中分离获得,含有大量信息物质,如磷脂酰肌醇聚糖-1 (GPC1)、外泌体衍生DNA的K-ras突变、微小RNA (miRNA)以及最新发现的循环... 胰腺癌是一种高度致命的恶件肿瘤,缺乏早期临床诊断的高敏感和高特异的标记物胰腺癌患者外泌体町以由外周循环血中分离获得,含有大量信息物质,如磷脂酰肌醇聚糖-1 (GPC1)、外泌体衍生DNA的K-ras突变、微小RNA (miRNA)以及最新发现的循环RNA ( circRNA)d等,可为早期发现和诊断胰腺癌提供依据。外泌体的检测目前只是一个辅助诊断或者互补检测指标,随着对外泌体分子生物学功能研究的深入,在临床上提高其对胰腺癌检测的特异性、敏感件、精确件和可重复性,外泌体有望成为胰腺癌临床早期诊断和精确诊断的重要标记分子。 展开更多
关键词 胰腺癌 外泌体 检测 早期诊断 研究进展
寄生虫来源的外泌体研究进展 预览
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作者 倪爱心 麻慧 陈继兰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期909-917,共9页
外泌体是体内多种细胞分泌的一种囊泡,包含蛋白质、脂质和核酸等物质,发挥信号传导、免疫调控、代谢物清除及凝血等功能。外泌体可能是细胞间信息传递的重要纽带,寄生虫与宿主间存在复杂的信息交流,寄生虫可以通过分泌外泌体将生物活性... 外泌体是体内多种细胞分泌的一种囊泡,包含蛋白质、脂质和核酸等物质,发挥信号传导、免疫调控、代谢物清除及凝血等功能。外泌体可能是细胞间信息传递的重要纽带,寄生虫与宿主间存在复杂的信息交流,寄生虫可以通过分泌外泌体将生物活性物质转移到宿主细胞中,调控宿主免疫,介导寄生虫的免疫逃逸。以外泌体作为药物载体,可以阻断寄生虫在宿主细胞内的转移或增强宿主的免疫能力,为寄生虫病的预防和治疗提供新的契机,进而打破目前化学合成药物在畜禽生产中滥用的现状,减少药物残留,提高畜产品质量安全。笔者综述了外泌体的形成、组分以及不同寄生虫来源外泌体的生物学作用,以期为畜禽养殖业中以外泌体作为研究切入点的寄生虫病的诊断和治疗奠定基础。 展开更多
关键词 寄生虫 外泌体 寄生机制 免疫应答
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外泌体介导的肿瘤化疗耐药研究进展
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作者 张如月 周玉冰 +2 位作者 杨哲 郭金秀 李朵璐 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期594-600,共7页
化疗是肿瘤的主要治疗方法之一,在控制肿瘤进展方面发挥着重要作用。然而,化疗药物的长期应用通常会诱导肿瘤细胞对药物产生耐药性,从而导致治疗失败和疾病进展。因此,肿瘤耐药的机制及耐药预防或逆转策略一直是肿瘤治疗研究的热点问题... 化疗是肿瘤的主要治疗方法之一,在控制肿瘤进展方面发挥着重要作用。然而,化疗药物的长期应用通常会诱导肿瘤细胞对药物产生耐药性,从而导致治疗失败和疾病进展。因此,肿瘤耐药的机制及耐药预防或逆转策略一直是肿瘤治疗研究的热点问题。外泌体(exosomes)是机体细胞分泌的一种直径在40-100 nm之间的小球形囊泡,携带多种生物活性小分子(DNA、ncRNA、mRNA、蛋白质等),参与细胞微环境的调节,从而调控体内多种生理和病理活动。近年来研究表明,外泌体作为细胞-细胞间耐药信号传递的媒介,在肿瘤化疗耐药、转移及免疫逃逸等方面发挥重要作用。本文对外泌体在肿瘤耐药发生中的作用及机制进行综述,旨在为肿瘤耐药的预防或治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 外泌体 肿瘤 肿瘤微环境 耐药性
外泌体的不同染色方法效果比较 预览
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作者 朱艳 张雷 +2 位作者 周晨明 闫静 孟丽 《河北医科大学学报》 CAS 2019年第9期1068-1071,共4页
目的通过用四氧化锇、磷钨酸、钼酸铵和醋酸双氧铀4种染液分别对外泌体负染色,并对染色效果进行观察和对比分析,以期选出对外泌体染色效果最好的负染液。方法用差速离心法提取外泌体后,采用漂浮法分别用四氧化锇、磷钨酸、钼酸铵、醋酸... 目的通过用四氧化锇、磷钨酸、钼酸铵和醋酸双氧铀4种染液分别对外泌体负染色,并对染色效果进行观察和对比分析,以期选出对外泌体染色效果最好的负染液。方法用差速离心法提取外泌体后,采用漂浮法分别用四氧化锇、磷钨酸、钼酸铵、醋酸双氧铀4种不同染液对外泌体进行负染色,透射电镜观察,从外泌体的杯托状或圆盘状结构清晰度、膜边缘锐利与否、染色背景干净程度、反差效果等方面对比4种染液的效果。结果四氧化锇的染色背景出现大量泡状结构,外泌体结构不明显。磷钨酸对外泌体的染色效果不如醋酸双氧铀和钼酸铵,外泌体的胞膜边缘不清晰,染色背景有杂质。钼酸铵对外泌体的染色效果也较好,其囊泡的膜结构较清楚,外泌体的杯托状结构可较清楚见到,但是反差较弱。醋酸双氧铀染色下,外泌体典型的杯托状或圆盘状结构清晰可见,膜边缘锐利,染色背景干净,反差效果佳。结论醋酸双氧铀对外泌体的染色效果最好,是最合适的负染染液。 展开更多
关键词 外泌体 负染色 透射电镜
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Extracellular vesicles in the diagnosis and treatment of central nervous system diseases 预览
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作者 Alisa A.Shaimardanova Valeriya V.Solovyeva +3 位作者 Daria S.Chulpanova Victoria James Kristina V.Kitaeva Albert A.Rizvanov 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2020年第4期586-596,共11页
Extracellular vesicles,including exosomes and microvesicles,play a fundamental role in the activity of the nervous system,participating in signal transmission between neurons and providing the interaction of central n... Extracellular vesicles,including exosomes and microvesicles,play a fundamental role in the activity of the nervous system,participating in signal transmission between neurons and providing the interaction of central nervous system with all body systems.In many neurodegenerative diseases,neurons pack toxic substances into vesicles and release them into the extracellular space,which leads to the spread of misfolded neurotoxic proteins.The contents of neuron-derived extracellular vesicles may indicate pathological changes in the central nervous system,and the analysis of extracellular vesicle molecular content contributes to the development of non-invasive methods for the diagnosis of many central nervous system diseases.Extracellular vesicles of neuronal origin can be isolated from various biological fluids due to their ability to cross the blood-brain barrier.Today,the diagnostic potential of almost all toxic proteins involved in nervous system disease pathogenesis,specificallyα-synuclein,tau protein,superoxide dismutase 1,FUS,leucine-rich repeat kinase 2,as well as some synaptic proteins,has been well evidenced.Special attention is paid to extracellular RNAs mostly associated with extracellular vesicles,which are important in the onset and development of many neurodegenerative diseases.Depending on parental cell type,extracellular vesicles may have different therapeutic properties,including neuroprotective,regenerative,and anti-inflammatory.Due to nano size,biosafety,ability to cross the blood-brain barrier,possibility of targeted delivery and the lack of an immune response,extracellular vesicles are a promising vehicle for the delivery of therapeutic substances for the treatment of neurodegenerative diseases and drug delivery to the brain.This review describes modern approaches of diagnosis and treatment of central nervous system diseases using extracellular vesicles. 展开更多
关键词 biomarkers cell-mediated therapy central nervous system diseases DIAGNOSIS EXOSOMES extracellular RNAs extracellular vesicles MICRORNAS MICROVESICLES neurodegenerative diseases
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间充质干细胞外泌体:眼部给药的可选择载体
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作者 谢若天 张晓敏 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期211-214,共4页
间充质干细胞(MSC)广泛应用于包括眼科在内的多种疾病治疗研究。近年研究表明,MSC外泌体具有与MSC类似的生物学功能,可替代MSC用于多种疾病治疗。外泌体是一类纳米级的具有脂质双分子层结构的小囊泡,可以介导细胞与细胞之间信号传导,发... 间充质干细胞(MSC)广泛应用于包括眼科在内的多种疾病治疗研究。近年研究表明,MSC外泌体具有与MSC类似的生物学功能,可替代MSC用于多种疾病治疗。外泌体是一类纳米级的具有脂质双分子层结构的小囊泡,可以介导细胞与细胞之间信号传导,发挥多种生物学功能。由于外泌体特殊的生物学结构,可穿越生物屏障,因而有望作为药物载体实现靶向运输,成为眼部给药的可选择载体。 展开更多
关键词 间质干细胞 外泌体 药物载体 综述
外泌体参与卵巢癌患者对化疗耐药的研究进展 预览
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作者 沈夏梦 吕卫国 《浙江大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期116-120,共5页
患者对化疗药物耐药是晚期卵巢癌患者治疗失败的主要原因之一。外泌体可能通过作为细胞排出化疗药物的途径、通过其携带耐药相关核酸、蛋白质等内容物及通过中和抗体类药物等方式促进卵巢癌患者对化疗药物耐药的发生和发展。本文阐述了... 患者对化疗药物耐药是晚期卵巢癌患者治疗失败的主要原因之一。外泌体可能通过作为细胞排出化疗药物的途径、通过其携带耐药相关核酸、蛋白质等内容物及通过中和抗体类药物等方式促进卵巢癌患者对化疗药物耐药的发生和发展。本文阐述了外泌体与卵巢癌患者对化疗药物耐药的相关性、外泌体参与耐药的作用机制及其临床价值,以期为卵巢癌患者对化疗药物耐药机制研究、临床诊断和干预提供新的思路。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤/药物疗法 药物耐受性 外泌体 综述
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