期刊文献+
共找到2,442篇文章
< 1 2 123 >
每页显示 20 50 100
不同区域氧浓度在结肠癌细胞上皮间质转换-间质上皮转换过程中的作用 预览
1
作者 雷星 陈熹 +1 位作者 赵琳 单涛 《安徽医药》 CAS 2019年第9期1765-1768,I0002共5页
目的探讨原发灶(低氧)及归巢部位(常氧或轻度高氧)氧浓度差异在上皮间质转换(EMT)-间质上皮转换(MET)过程的作用。方法首先用差异氧浓度培养肿瘤细胞,以光镜,激光共聚焦显微镜观察肿瘤细胞形态变化。Transwell小室和划痕实验分别检测结... 目的探讨原发灶(低氧)及归巢部位(常氧或轻度高氧)氧浓度差异在上皮间质转换(EMT)-间质上皮转换(MET)过程的作用。方法首先用差异氧浓度培养肿瘤细胞,以光镜,激光共聚焦显微镜观察肿瘤细胞形态变化。Transwell小室和划痕实验分别检测结肠癌细胞侵袭能力及迁移能力。RT?PCR检测钙黏附蛋白E(E?cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达量情况。结果低氧环境下结COLO 205细胞较常氧及轻度高氧组明显发生EMT转换,降低E?cadherin表达,增强Vimentin表达;并相应伴随迁移、侵袭能力升高。结论原发灶(低氧)及归巢部位(常氧或轻度高氧)的氧浓度差异是介导EMT?MET过程的重要因素。 展开更多
关键词 上皮间质转换 间质上皮转换 细胞低氧 结肠癌 钙黏附蛋白E 波形蛋白
在线阅读 下载PDF
沉默S100A4基因对乳腺癌上皮间质转换的影响 预览
2
作者 李丽春 陈瑶 +1 位作者 付梅 何谦 《西南国防医药》 CAS 2019年第6期650-654,共5页
目的观察沉默人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞中钙结合蛋白S100A4基因对上皮间质转换(EMT)的影响。方法采用蛋白免疫印迹法(Western blot)和荧光实时定量(RT-PCR)检测S100A4在人乳腺癌组织中的表达情况。用RNA干扰技术将针对S100A4和非... 目的观察沉默人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞中钙结合蛋白S100A4基因对上皮间质转换(EMT)的影响。方法采用蛋白免疫印迹法(Western blot)和荧光实时定量(RT-PCR)检测S100A4在人乳腺癌组织中的表达情况。用RNA干扰技术将针对S100A4和非特异性阴性对照序列的siRNA转染至人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞,采用RT-PCR和Western blot方法检测EMT相关分子(E-cadherin, N-cadherin、Snail和Slug)的表达在沉默组和对照组中的表达水平。结果成功建立S100A4基因沉默的人乳腺癌MCF-7和MAD-231细胞模型;二者细胞中N-cadherin、Snail和Slug表达水平降低,而Ecadherin表达水平上调。结论 S100A4通过调节EMT过程,促进乳腺癌的侵袭和迁移,其可能成为乳腺癌治疗新的靶标分子。 展开更多
关键词 S100A4基因 乳腺癌 上皮间质转换 基因沉默 EMT相关蛋白
在线阅读 下载PDF
miR-194-5p在微流控芯片筛选的肺癌间质表型亚系的作用
3
作者 王洁 于敏 方瑾 《解剖科学进展》 2019年第4期442-445,449共5页
目的分析肺癌间质表型亚系A3细胞中上皮间质转化(EMT)相关的miR-194-5p鉴定、分析及其靶基因功能富集的生物学过程和信号通路。方法使用微流控芯片筛选母系肺癌A549细胞获得间质表型亚系A3细胞,利用miRCURYTM芯片筛选差异性表达的miRNA... 目的分析肺癌间质表型亚系A3细胞中上皮间质转化(EMT)相关的miR-194-5p鉴定、分析及其靶基因功能富集的生物学过程和信号通路。方法使用微流控芯片筛选母系肺癌A549细胞获得间质表型亚系A3细胞,利用miRCURYTM芯片筛选差异性表达的miRNA。利用MTT、Transwell实验检测miR-194-5p对亚系细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。应用Miranda、MiRBase、TargetScan数据库和DAVID在线软件对miR-194-5p进行靶基因预测及相关信号通路、生物学功能富集分析。结果成功筛选获得具有间质表型亚系A3细胞,与母系A549细胞相比,在A3亚系中miR-194-5p的表达水平显著下调,转染miR-194-5pmimics后细胞迁移和侵袭能力发生显著降低但增殖未受影响;转染miR-194-5pinhibitor后细胞的迁移和侵袭能力增强。miR-194-5p的48个靶基因主要在蛋白质结合等生物学过程中起作用,信号通路显著富集于TGF-β等EMT相关信号转导通路。结论从微流控芯片获得的间质表型细胞亚系成功筛选EMT相关miRNA,其中miR-194-5p抑制肺癌EMT进程,是潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 上皮间质转化 肺癌间质表型亚系 生物信息学 miR-194 微流控芯片
miR-10b通过下调KLF10促进高糖诱导的肾小管上皮细胞EMT 预览
4
作者 张黎黎 吕军 +5 位作者 杨荟 付莎 李劲高 黄蓉 宛霞 徐安平 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1254-1260,共7页
目的:探讨微小RNA-10b(miR-10b)在高糖诱导的肾小管上皮细胞上皮-间充质转化(EMT)中的作用及相关机制。方法:通过RT-qPCR法分析2型糖尿病合并肾纤维化患者肾组织中miR-10b的表达量;利用高糖刺激人肾小管上皮细胞HK-2建立EMT模型,RT-qPC... 目的:探讨微小RNA-10b(miR-10b)在高糖诱导的肾小管上皮细胞上皮-间充质转化(EMT)中的作用及相关机制。方法:通过RT-qPCR法分析2型糖尿病合并肾纤维化患者肾组织中miR-10b的表达量;利用高糖刺激人肾小管上皮细胞HK-2建立EMT模型,RT-qPCR法检测miR-10b在EMT不同阶段的表达水平。在HK2细胞中分别转染miR-10b模拟物(mimic)和抑制物(inhibitor) 24 h后,再给予高糖刺激,相差显微镜观察细胞形态学改变,Western blot法检测纤连蛋白(fibronectin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)等EMT标志蛋白的表达。通过在线数据库miRBase对miR-10b的作用靶点进行预测,并利用双萤光素酶报告基因实验进行验证。结果:与癌旁正常肾组织相比,2型糖尿病合并肾纤维化患者肾组织中miR-10b的表达明显增加(P<0.01)。在高糖刺激诱导的HK-2细胞EMT中,miR-10b的表达呈现时间依赖性上调(P<0.01)。转染miR-10b inhibitor可抑制高糖诱导的HK-2细胞形态学改变以及EMT标志蛋白fibronectin、SLUG、N-cadherin和SNAI1表达的上调。在线数据库预测KLF10的3’-UTR可以与miR-10b结合,该结果被双萤光素酶报告基因实验证实。同时,KLF10过表达可以逆转高糖诱导的肾小管上皮细胞的形态学改变以及fibronectin和N-cadherin等EMT标志蛋白。进一步研究显示,miR-10b是通过抑制KLF10表达,从而激活TGF-β/Smad3通路发挥作用。结论:miR-10b可通过下调KLF10表达促进高糖诱导的肾小管上皮细胞EMT。 展开更多
关键词 微小RNA-10b 上皮-间充质转化 KLF10 肾小管上皮细胞 TGF-β/Smad3信号通路
在线阅读 免费下载
JNK/AP-1信号通路在百草枯诱导肺泡上皮细胞间充质转变中的作用
5
作者 朱晨笛 郭慕真 +2 位作者 李颖颖 武坷鑫 黄敏 《环境与职业医学》 CSCD 北大核心 2019年第1期17-25,共9页
[目的]探讨c-jun氨基末端激酶(JNK)/转录因子激活蛋白-1(AP-1)信号通路在百草枯致大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞间发生上皮-间充质转变(EMT)中的作用。[方法]体外培养大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞RLE-6TN,终浓度0、25、50、100、200、300、400μmol/L... [目的]探讨c-jun氨基末端激酶(JNK)/转录因子激活蛋白-1(AP-1)信号通路在百草枯致大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞间发生上皮-间充质转变(EMT)中的作用。[方法]体外培养大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞RLE-6TN,终浓度0、25、50、100、200、300、400μmol/L百草枯处理细胞24 h,终浓度200μmol/L百草枯分别处理细胞0、12、24、36、48、60、72 h,倒置相差显微镜观察细胞形态学的改变;四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞相对存活率,确定剂量和时间-效应关系;流式细胞仪Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell小室法检测细胞侵袭能力;免疫荧光、免疫印迹法(Western blot)分别检测上皮标志蛋白E-cad、ZO-1和间质标志蛋白FSP-1、α-SMA表达水平;Western blot检测JNK/p-JNK、c-jun/p-c-jun、c-fos/p-c-fos蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测AP-1的转录活性,评估百草枯对JNK信号通路的激活作用。[结果] 200μmol/L百草枯诱导细胞由卵圆形或多边形的上皮细胞变成长梭形的间质细胞,细胞间连接消失,且时间越长形态学改变越明显。与对照组相比,100、200、300、400μmol/L百草枯染毒组的细胞存活率明显降低(P <0.05),200μmol/L百草枯诱导细胞不同时间(24、36、48、60、72 h)的细胞存活率明显降低(P <0.05)。200μmol/L百草枯诱导细胞不同时间(12、24、36 h):细胞凋亡率随诱导时间的延长而增加,尤其36 h诱导组的细胞凋亡率较对照组明显升高,差异有统计学意义(P <0.05);细胞迁移指数、侵袭细胞数均明显升高(P <0.05);上皮细胞标记蛋白E-cad、ZO-1表达下调,且下调的趋势随时间延长更加明显(P <0.05);间质细胞标记蛋白FSP-1、α-SMA表达随时间的延长逐渐升高(P <0.05);与对照组相比,100、200、300μmol/L百草枯染毒可诱导p-JNK、p-c-jun、p-c-fos蛋白表达明显上调;200、300μmol/L百草枯染毒组较对照组比较,AP-1转录活性明显升高,差异 展开更多
关键词 百草枯 Ⅱ型肺泡上皮细胞 上皮-间充质转变 JNK信号通路 AP-1
蚓激酶对转化生长因子-β1诱导的人肾小管上皮细胞Src激酶及黏着斑激酶表达的影响
6
作者 魏晓露 李月红 李国霞 《国际中医中药杂志》 2019年第8期847-851,共5页
目的观察蚓激酶对TGF-β1诱导人肾小管上皮细胞a-平滑肌肌动蛋白(a-smooth muscle actin, a-SMA)、纤维连接蛋白(fibronectin, FN)、黏着斑激酶(focal adhesion kinase, FAK)和Src家族蛋白酪氨酸激酶表达的影响。方法将人肾小管上皮细... 目的观察蚓激酶对TGF-β1诱导人肾小管上皮细胞a-平滑肌肌动蛋白(a-smooth muscle actin, a-SMA)、纤维连接蛋白(fibronectin, FN)、黏着斑激酶(focal adhesion kinase, FAK)和Src家族蛋白酪氨酸激酶表达的影响。方法将人肾小管上皮细胞按随机数字表法分为正常组,模型组,贝那普利组及蚓激酶低、中、高剂量组。除正常组外,其余各组加入10 μg/ml的TGF-b1溶液进行干预,30 min后,贝那普利组加入盐酸贝那普利10 μmol/L进行干预,蚓激酶低、中、高剂量组分别加入蚓激酶30、60、120 U/ml进行干预。培养24 h后,采用Western blot法和荧光定量PCR检测a-SMA、FN、FAK和Src激酶蛋白及基因表达。结果与模型组比较,蚓激酶低、中、高剂量组a-SMA[(0.84±0.14)、(0.72±0.08)、(0.69±0.05)比(1.24±0.03)]、FN[(0.59±0.09)、(0.55±0.11)、(0.44±0.08)比(0.83±0.18)]、FAK[(0.94±0.04)、(0.79±0.05)、(0.70±0.02)比(1.29±0.07)]、Src激酶[(0.87±0.20)、(0.78±0.15)、(0.71±0.11)比(1.23±0.01)]蛋白表达降低(P<0.05),a-SMA mRNA[(3.13±0.62)、(2.76±0.14)、(2.15±0.33)比(4.12±0.32)]、FN mRNA[(3.08±0.34)、(2.78±0.17)、(2.49±0.11)比(4.34±0.06)]、FAK mRNA [(1.73±0.23)、(1.63±0.36)、(1.57±0.27)比(2.61±0.59)]、Src激酶mRNA[(2.11±0.17)、(1.78±0.25)、(1.71±0.22)比(2.78±0.47)]表达降低(P<0.05)。结论蚓激酶可通过调节TGF-b1诱导的人肾小管上皮细胞FAK、Src激酶的表达,减少a-SMA、FN生成,从而阻抑肾纤维化的发展。 展开更多
关键词 纤维化 蚓激酶 A-平滑肌肌动蛋白 src-族激酶类 上皮-间质转分化 上皮细胞
来氟米特通过调节ESRP1的水平促进肺组织纤维化的机制研究 预览
7
作者 刘冬 赖伟男 《解放军医药杂志》 CAS 2019年第11期11-14,共4页
目的探究来氟米特(LEF)通过调节上皮细胞剪接调节蛋白(ESRP1)的水平促进肺组织纤维化的机制。方法将人肺上皮细胞BEAS-2B随机分为对照组、LEF组、ESRP1+LEF组和ESRP1组。使用细胞转染技术上调ESRP1的水平,在5 mg/L的LEF条件下培养48 h... 目的探究来氟米特(LEF)通过调节上皮细胞剪接调节蛋白(ESRP1)的水平促进肺组织纤维化的机制。方法将人肺上皮细胞BEAS-2B随机分为对照组、LEF组、ESRP1+LEF组和ESRP1组。使用细胞转染技术上调ESRP1的水平,在5 mg/L的LEF条件下培养48 h。使用免疫荧光染色检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)。分别使用Western blot和RT-qPCR检测蛋白和mRNA的水平。结果 LEF组ESRP1的mRNA和蛋白的水平显著低于对照组,且ESRP1+LEF组的ESRP1的表达水平显著低于LEF组(P<0.05)。各组细胞的活力比较差异物统计学意义(P>0.05)。对照组α-SMA表达水平很低,并且可看出细胞轮廓为椭圆形。LEF组的α-SMA的荧光强度高于对照组,ESRP1组的α-SMA的荧光强度低于对照组,ESRP1+LEF组的α-SMA相对荧光强度高于ESRP1组(P<0.05)。与对照组比较,LEF组α-SMA水平升高,E-cadherin水平降低(P<0.05)。ESRP1组的α-SMA低于对照组,E-cadherin高于对照组(P<0.05)。与ESRP1组比较,ESRP1+LEF组α-SMA水平升高,E-cadherin水平降低(P<0.05)。结论 LEF可能通过抑制ESRP1的水平,促进α-SMA的表达而抑制E-cadherin的水平,促进肺上皮细胞向间质细胞转化,引起肺纤维化。 展开更多
关键词 肺纤维化 来氟米特 上皮细胞剪接调节蛋白 上皮-间充质转化 Α平滑肌肌动蛋白
在线阅读 免费下载
PM2.5长期暴露诱导对人支气管上皮细胞上皮间质转化行为的影响 预览
8
作者 陆润泽 崔健 +1 位作者 张程程 李晓波 《厦门大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期516-525,共10页
为探讨PM_(2.5)诱导人支气管上皮(HBE)细胞发生的慢性损害作用,用0,100,500μg/mL的PM2.5分别处理HBE细胞多代后,经细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测发现暴露组的细胞活性较对照组显著增强.进而选择细胞活性差异最大的一组观察PM2.5长期暴露... 为探讨PM_(2.5)诱导人支气管上皮(HBE)细胞发生的慢性损害作用,用0,100,500μg/mL的PM2.5分别处理HBE细胞多代后,经细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测发现暴露组的细胞活性较对照组显著增强.进而选择细胞活性差异最大的一组观察PM2.5长期暴露对HBE细胞形态、功能和上皮间质转化标志物分子水平的影响,结果显示:暴露组细胞发生形态变化,周期较对照组表现为G1期阻滞,但凋亡率未出现明显改变;与对照组相比,暴露组细胞的克隆数目和迁移能力存在浓度依赖性的增加;暴露组细胞中上皮标志物的表达水平下调,而间质标志物的表达水平上调.此外,将长期暴露的HBE细胞(P35)经裸鼠尾静脉注射入体内21d后,高剂量暴露注射组的小鼠肺组织出现肺泡炎症,但未观察到肿瘤细胞定植.采用动物全身动态暴露系统对小鼠进行21d的PM2.5吸入染毒后,应用微计算机断层扫描(Micro-CT)和苏木精-伊红(HE)组织染色技术观察到小鼠肺部出现PM2.5颗粒沉积和炎症改变,且部分肺组织中存在纤维增生与黏液栓阻塞.综上可知,PM2.5暴露可诱导正常HBE细胞发生功能改变,使其具备一定的上皮-间质转化特征. 展开更多
关键词 PM2.5 支气管上皮细胞 上皮间质转化
在线阅读 免费下载
一种结肠癌干细胞上皮-间质转化分层模型的建立和验证 预览
9
作者 李鹏 马晓莹 +3 位作者 李小嘉 金文琪 丁旭枫 郭修田 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期100-110,共11页
背景与目的:肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSC)是肿瘤中具有干细胞特性的一类细胞,同时具有自我更新能力及多向分化潜能。CSC在肿瘤转移过程中起着重要作用。上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)与恶性肿瘤浸润、转... 背景与目的:肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSC)是肿瘤中具有干细胞特性的一类细胞,同时具有自我更新能力及多向分化潜能。CSC在肿瘤转移过程中起着重要作用。上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)与恶性肿瘤浸润、转移及与肿瘤患者预后紧密联系。本研究以CSC是否经EMT为标准,建立一种新型结肠癌干细胞EMT分层模型,以评价不同活性物质对不同分型的结肠癌干细胞表型的影响。并用当下研究成熟的抑癌基因miR-139-5p及其靶向抑制的转录因子4(transcription factor 4,TCF4)蛋白验证上述模型的可行性,为临床研究提供理论依据。方法:以CD44和细胞上皮黏附分子/上皮特异性抗原(epithelial cell adhesion molecule/epithelial specific antigen,EpCAM/ESA)为结肠癌干细胞标志物,采用流式细胞术分选皮下移植瘤中CD44+ESA+、CD44+ESA-细胞亚群和转移瘤中CD44+ESA+、CD44+ESA-细胞亚群,分别命名为Epi-S、Epi-P、pEMT-S和pEMT-P,亲本细胞株HCT116作为后续实验的阴性对照;验证分选后不同细胞亚群的多药耐药性、克隆形成能力以及干性转录因子SOX2、OCT4和EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、vimentin的表达情况;检测miR-139-5p过表达、TCF4敲低对Epi-P和pEMT-P以及TCF4过表达对Epi-S和pEMT-S CSC侵袭能力与EMT标志分子E-cadherin、N-cadherin和vimentin蛋白的影响。结果:相较于HCT116亲本细胞株,Epi-S、Epi-P、pEMT-S和pEMT-P共4种CSC分型均对奥沙利铂(oxaliplatin,LOHP)和氟尿嘧啶(fluorouracil,5-FU)产生了不同程度的抗性;干性相关转录因子OCT4和SOX2在4种CSC分型中表达均升高,与亲本细胞株相比,差异有统计学意义(P<0.05);上皮相关标志物E-cadherin、N-cadherin和vimentin在4种CSC分型中表达均升高,与亲本细胞株相比,差异有统计学意义(P<0.05);过表达miR-139-5p或敲低TCF4均能抑制Epi-P和pEMT-P结肠癌干细胞亚型的侵袭能力(P<0.01);在表型稳定未经历EMT的上皮亚系Epi 展开更多
关键词 结肠癌干细胞 CD44 上皮细胞黏附分子 上皮-间质转化
在线阅读 下载PDF
上皮间充质转化在后囊膜下混浊中的研究进展 预览
10
作者 于童 王静 张劲松 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2019年第8期1309-1312,共4页
白内障是我国首位致盲性眼病,也是世界上多数国家致盲的主要原因,目前手术是唯一有效的治疗方法。而后囊膜下混浊即后发性白内障(PCO)是白内障术后常见的并发症,也是导致术后视力下降的主要原因。研究表明,术后残留的晶状体上皮细胞(LE... 白内障是我国首位致盲性眼病,也是世界上多数国家致盲的主要原因,目前手术是唯一有效的治疗方法。而后囊膜下混浊即后发性白内障(PCO)是白内障术后常见的并发症,也是导致术后视力下降的主要原因。研究表明,术后残留的晶状体上皮细胞(LECs)发生上皮间充质转化(EMT)在PCO的发生发展中起到了重要的作用。本文主要概述了近些年来EMT在PCO中的研究进展。 展开更多
关键词 白内障 上皮间充质转化 后发性白内障 晶状体上皮细胞
在线阅读 下载PDF
表皮生长因子对乳腺癌细胞上皮-间质转化的影响及钙蛋白酶的介导作用 预览
11
作者 金爱 王宏键 王旭东 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第4期412-417,共6页
目的:观察表皮生长因子(EGF)对人乳腺癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响,探讨钙蛋白酶(Calpain)在其中的作用。方法:常规培养雌激素受体(ER)阳性乳腺癌细胞MCF-7和ER阴性MDA-MB-231细胞,EGF诱导EMT并适时加入Calpain抑制剂Calpeptin预处理... 目的:观察表皮生长因子(EGF)对人乳腺癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响,探讨钙蛋白酶(Calpain)在其中的作用。方法:常规培养雌激素受体(ER)阳性乳腺癌细胞MCF-7和ER阴性MDA-MB-231细胞,EGF诱导EMT并适时加入Calpain抑制剂Calpeptin预处理;划痕实验观察细胞迁移能力,蛋白印迹实验检测细胞FN和E-cadherin蛋白表达。结果:EGF(50μg/L)处理24 h和48 h均显著增加MCF-7和MDA-MB-231细胞迁移(P<0.01);EGF处理24 h、48 h、72 h时均能诱导MCF-7和MDA-MB-231细胞FN表达上调和E-cad表达下调(P<0.01),在48 h时具有最佳诱导效应;Calpeptin(10μmol/L)预处理能显著抑制EGF诱导的MCF-7和MDA-MB-231细胞迁移(P<0.01);48 h时, Calpeptin预处理能显著抑制EGF诱导的MCF-7和MDA-MB-231细胞FN表达上调和E-cad表达下调(P<0.01)。结论:EGF能诱导乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞EMT和迁移,该效应可能与Calpain的介导作用相关。 展开更多
关键词 表皮生长因子 钙蛋白酶 乳腺肿瘤 上皮-间质转化 迁移
在线阅读 下载PDF
16HBE细胞上皮间质转化模型建立以及麻黄甘草药对对其影响 预览
12
作者 姚露 魏盼 +4 位作者 王思齐 袁为远 王霄彤 郑劼 洪敏 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期284-289,共6页
目的 体外诱导人支气管上皮细胞(16HBE)上皮间质转化(EMT)最适条件摸索以及探讨麻黄甘草对EMT的影响。方法 以16HBE细胞株为研究对象,分别给予转化生长因子β1(TGF-β1)单一刺激以及血清饥饿联合刺激,运用Western blot法检测上皮及间质... 目的 体外诱导人支气管上皮细胞(16HBE)上皮间质转化(EMT)最适条件摸索以及探讨麻黄甘草对EMT的影响。方法 以16HBE细胞株为研究对象,分别给予转化生长因子β1(TGF-β1)单一刺激以及血清饥饿联合刺激,运用Western blot法检测上皮及间质特征性蛋白的表达。运用免疫荧光检测E-Cadherin和N-Cadherin胞内表达分布情况。运用qPCR检测上皮及间质特征性基因的表达水平。血清饥饿联合TGF-β1刺激,给予麻黄甘草药对干预,Western blot法检测上皮及间质特征性蛋白的表达水平。结果 TGF-β1可诱导16HBE细胞由结构规则、质密均匀的鹅卵石状向纺锤体状转化。TGF-β1单独刺激可诱导16HBE细胞N-Cadherin、α-SMA蛋白表达升高,对E-Cadherin、ZO-1蛋白表达未见明显影响。而当细胞密度为15%时,血清饥饿联合TGF-β1可诱导16HBE细胞N-Cadherin、α-SMA、Vimentin、CollagenⅠ蛋白、基因水平升高以及E-Cadherin、ZO-1蛋白、基因水平降低,并且ECadherin蛋白分布紊乱,上皮结构破坏。血清饥饿联合TGF-β1刺激,麻黄甘草药对可抑制NCadherin、α-SMA的表达,并恢复ECadherin蛋白的表达,对ZO1无明显影响。结论 血清饥饿联合TGF-β1能体外诱导16HBE细胞建立稳定可重复的EMT模型,可用于体外研究哮喘发生EMT相关机制。麻黄甘草药对一定程度上可抑制16HBE细胞EMT过程。 展开更多
关键词 人支气管上皮细胞 上皮间质转化 TGF-β1 血清饥饿 药对
在线阅读 下载PDF
ESRPs在上皮间质转化中的作用及其调控机制研究进展 预览
13
作者 王白鹤 孙建方 《中国麻风皮肤病杂志》 2019年第2期115-119,共5页
上皮-间质转化(EMT)是将极化上皮细胞转化为具有间充质细胞的过程,它由EMT相关转录因子调节,同时还在转录后水平受可变剪接调控。本文对上皮剪接调节蛋白(ESRPs)在EMT进程中的作用及其调控机制研究进行综述。
关键词 上皮间质转化 上皮剪接调节蛋白 可变剪接
在线阅读 下载PDF
整合素连接激酶在缺氧晶状体上皮细胞中的表达变化及其对细胞上皮-间充质转化的影响 预览 被引量:1
14
作者 朱艳 朱玉广 +4 位作者 曹智 滕兴波 孙海霞 刘宪金 杨伟舟 《山东医药》 CAS 2019年第8期29-32,共4页
目的 观察整合素连接激酶(ILK)在缺氧晶状体上皮细胞(HLECs)中的表达变化及其对细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法 体外培养HLEC-B3,以不同浓度CoCl 2培养液进行干预,CCK-8法筛选最佳的CoCl 2作用浓度。以100 μmol/L的CoCl 2作用于... 目的 观察整合素连接激酶(ILK)在缺氧晶状体上皮细胞(HLECs)中的表达变化及其对细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法 体外培养HLEC-B3,以不同浓度CoCl 2培养液进行干预,CCK-8法筛选最佳的CoCl 2作用浓度。以100 μmol/L的CoCl 2作用于HLECs建立缺氧模型,分别于缺氧0、6、12、24、48 h时以 Western blotting法检测HLECs中的ILK。将HLECs分为CoCl 2组、ILK抑制剂组、对照组,其中CoCl 2组和ILK抑制剂组加入100 μmol/L的CoCl 2制作缺氧模型,ILK抑制剂组用ILK特异性抑制剂QLT0267(10 nmol/L)预处理1 h,对照组常规培养。三组继续培养24 h后采用Western blotting法检测细胞中的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和纤维连接蛋白(FN),采用实时荧光定量PCR法检测α-SMA、FN mRNA。结果 缺氧6、12、24、48 h时ILK蛋白相对表达量均增高,其中缺氧12、24 h时ILK蛋白相对表达量高于缺氧6、48 h时( P 均<0.05)。CoCl 2组细胞中α-SMA、FN蛋白相对表达量高于对照组,ILK抑制剂组细胞中α-SMA、FN蛋白相对表达量低于CoCl 2组( P 均<0.01)。CoCl 2组细胞中α-SMA、FN mRNA相对表达量高于对照组,ILK抑制剂组细胞中α-SMA、FN mRNA相对表达量低于CoCl 2组( P 均<0.01)。结论 CoCl 2诱导的缺氧HLECs中ILK表达增高;抑制ILK表达后,HLECs中EMT标志蛋白表达下调,EMT过程受到抑制。 展开更多
关键词 整合素连接激酶 晶状体上皮细胞 上皮-间充质转化 Α-平滑肌肌动蛋白 纤维连接蛋白 氯化钴
在线阅读 下载PDF
上皮性卵巢癌组织miR-320a表达对SKOV3细胞增殖和侵袭性影响
15
作者 余俊 李晓兰 张青冬 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2019年第14期1026-1030,1035共6页
目的miR-320a作为微小RNA(micro RNA,miRNA)类型之一,在多种恶性肿瘤组织中表达异常,与肿瘤发生、进展及预后关系密切。本研究分析卵巢上皮性癌组织中miR-320a表达,并探讨上调人卵巢癌SKOV3细胞中miR-320a表达对癌细胞增殖和侵袭力的衫... 目的miR-320a作为微小RNA(micro RNA,miRNA)类型之一,在多种恶性肿瘤组织中表达异常,与肿瘤发生、进展及预后关系密切。本研究分析卵巢上皮性癌组织中miR-320a表达,并探讨上调人卵巢癌SKOV3细胞中miR-320a表达对癌细胞增殖和侵袭力的衫响。方法选取2015-02-02-2018-03-21在湖北省中医院妇产科收治的94例患者的上皮性卵巢癌组织,选取同期42例正帯卵巢组织标本。实时荧光定量PCR检測上皮性卵巢癌和正常卵巢组织中miR-320a表达。培养SKOV3细胞并分为miR-320a模拟组、阴性对照组和空白组。实时荧光定量PCR检测细胞中miR-320a表达,MTT法和克隆形成实验检测细胞增殖力,Transwell法检测细胞侵袭力,蛋白质印迹法检测细胞中E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白表达。结果卵巢癌组织中miR-320a相对表达量为0.51±0.09,低于正常卵巢组织的1.00±0.05,差异有统计学意义,t=32.448,P<0.001。上皮性卵巢癌组织中miR-320a表达量在FIGO分期(t=4.450,P<0.001)、分化程度(t=2.348,P=0.021)和有无淋巴结转移(t=3.728,P<0.001)方面比较,差异有统计学意义。miR-320a模拟组细胞中miR-320a相对表达量高于阴性对照组和空白组,差异有统计学意义,F=223.704,P<0.001。MTT实验结果显示,3组细胞活力均值间差异有统计学意义,F组间=7 259.713,P<0.001;miR-320a模拟组抑制细胞活性高于其他2组。克隆形成实验结果显示,miR-320a模拟组细胞克隆数低于阴性对照组和空白组,差异有统计学意义,F=975.124,P<0.001;miR-320a模拟组侵袭细胞数低于阴性对照组和空白组,差异有统计学意义,F=124.195,P<0.001;miR-320a模拟组细胞中E-cadherin蛋白相对表达量高于阴性对照组和空白组,差异有统计学意义,F=152.673,P<0.001;而N-cadherin和Vimentin蛋白相对表达量低于阴性对照组和空白组,差异有统计学意义,F值分别为55.251,62.054,均P<0.001。结论miR-320a在上皮性卵巢癌组织中呈低表达,且与肿瘤发� 展开更多
关键词 卵巢上皮性癌 miR-320a 细胞增殖 细胞侵袭 上皮-间质转化
Tim-3在肝癌细胞上皮间质转化及转移中的作用机制 预览
16
作者 林华鹏 段艳飞 +1 位作者 马长林 乔森 《中国现代普通外科进展》 CAS 2019年第9期673-677,682,共6页
目的:探讨Tim-3与肝癌细胞发生上皮间质转化(EMT)的关系及对肝癌细胞侵袭和转移能力的影响。方法:培养正常肝细胞L02和肝癌细胞SMMC-7721,RT-PCR检测Tim-3表达差异,将SMMC-7721分为3组,对照组:未接受转染的SMMC-7721;实验组转染Tim-3 si... 目的:探讨Tim-3与肝癌细胞发生上皮间质转化(EMT)的关系及对肝癌细胞侵袭和转移能力的影响。方法:培养正常肝细胞L02和肝癌细胞SMMC-7721,RT-PCR检测Tim-3表达差异,将SMMC-7721分为3组,对照组:未接受转染的SMMC-7721;实验组转染Tim-3 siRNA细胞低表达Tim-3;阳性对照组转染PEX-3-hTim-3过表达质粒细胞高表达Tim-3。应用RT-PCR、Western blot检测3组肝癌细胞Tim-3及EMT相关基因:E-cadherin、N-cadherin、MMP-9、Twistl、Slug、Snail、Smad mRNA和蛋白的表达。通过Transwell小室侵袭实验检测3组肝癌细胞迁移和侵袭能力改变;分析Tim-3表达与EMT相关基因表达的相关性。结果:(1)与正常肝细胞L02比较;Tim-3在肝癌细胞中高表达(P<0.05);(2)RTPCR和Western bolt结果提示,实验组上皮标志物E-cadherin表达较对照组明显上升(P<0.05),而间质标志物N-cadherin、MMP-9、Twistl、Snail、Slug、Smad表达较对照组下降(P<0.05),提示EMT受到抑制;阳性对照组中E-cadherin表达较对照组下降(P<0.05),N-cadherin、MMP-9、Twist1、Snai1、Slug、Smad表达较对照组上升(P<0.05),促进了肝癌EMT;(3)Transwell迁移实验中,实验组与对照组和阳性对照组相比较,肝癌细胞迁移和侵袭细胞数明显减少,3组之间比较差异均有统计学意义(P<0.05),实验说明Tim-3表达水平的改变,影响肝癌的迁移和侵袭性;(4)Tim-3的表达与EMT标志物的表达做相关性分析显示,Tim-3的表达与E-cadherin的表达呈负相关(P<0.05),与N-cadherin、MMP-9、Twist1、Snai1、Slug、Smad的表达呈正相关(P<0.05)。结论:Tim-3是肝癌细胞EMT的潜在诱导者,抑制Tim-3的表达,同时抑制肝癌细胞EMT的发生,肝癌细胞迁移和侵袭能力下降。因此,Tim-3有望成为今后的临床抗肿瘤药物新的治疗靶点用于改善和评估患者预后。 展开更多
关键词 肝癌细胞 上皮间质转化 T细胞免疫球蛋白及黏蛋白分子3 上皮型钙黏附蛋白 神经型钙黏附蛋白
在线阅读 下载PDF
转化生长因子β1通过赖氨酰氧化酶调控低氧诱导的大鼠支气管上皮细胞间充质转化 预览
17
作者 夏晓东 彭燕平 +1 位作者 雷丹 陈伟谦 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2247-2254,共8页
目的:探讨转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)是否通过赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)参与低氧诱导的大鼠支气管上皮细胞间充质转化。方法:24只SD大鼠随机均分为常氧组、低氧组以及低氧+β-氨基丙腈(β-aminopr... 目的:探讨转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)是否通过赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)参与低氧诱导的大鼠支气管上皮细胞间充质转化。方法:24只SD大鼠随机均分为常氧组、低氧组以及低氧+β-氨基丙腈(β-aminopropionitrile,β-APN)组。体外培养大鼠支气管上皮细胞,分为常氧组、TGF-β1组、TGF-β1+SB431542(TGF-β1受体拮抗剂)组、低氧组、低氧+SB431542组以及低氧+β-APN组。比色法测定并计算胶原蛋白交联,免疫组织化学法和Western blot检测大鼠支气管上皮细胞TGF-β1、LOX、E-钙黏蛋白(E-cadherin)以及波形蛋白(vimentin)的蛋白表达。结果:在大鼠动物模型中,低氧组支气管上皮细胞TGF-β1、LOX、vimentin蛋白表达以及胶原交联均明显高于常氧组,但E-cadherin蛋白表达则明显弱于常氧组,低氧对vimentin、E-cadherin蛋白表达以及胶原交联的影响均能被β-APN所逆转。离体细胞实验显示,常氧组大鼠支气管上皮细胞为铺路石状形态,TGF-β1组和低氧组大鼠支气管上皮细胞形态逐渐向梭形上皮间充质细胞转化,而β-APN能逆转大鼠支气管上皮间充质细胞转化。TGF-β1能诱导大鼠支气管上皮细胞LOX蛋白表达,呈浓度依赖性,并被SB431542所阻断。与常氧组比较,低氧组离体培养的大鼠支气管上皮细胞TGF-β1、LOX和vimentin表达及胶原交联明显升高,SB431542能明显下调TGF-β1或低氧诱导的大鼠支气管上皮细胞LOX和vimentin的表达及胶原交联;TGF-β1组和低氧组离体培养的大鼠支气管上皮细胞E-cadherin表达减弱,SB431542能逆转TGF-β1或低氧培养的大鼠支气管上皮细胞E-cadherin的表达。结论:TGF-β1介导LOX表达,促进低氧诱导的大鼠支气管上皮细胞间充质转化。 展开更多
关键词 低氧 支气管上皮细胞 转化生长因子Β1 赖氨酰氧化酶 上皮-间充质转化
在线阅读 免费下载
RhoGDI2调控PI3K/Akt信号通路促进气道上皮间质转化研究 预览
18
作者 陈秀楠 刘华 《交通医学》 2019年第6期560-564,共5页
目的:探讨PI3K/Akt信号通路活化在RhoGDI2诱导的气道上皮-间质转化(EMT)中的作用.方法:体外培养人气道上皮细胞16HBE,通过质粒转染过表达RhoGDI2,然后加入PI3K抑制剂LY294002,荧光显微镜观察质粒转染后不同时间的细胞形态变化,评估转染... 目的:探讨PI3K/Akt信号通路活化在RhoGDI2诱导的气道上皮-间质转化(EMT)中的作用.方法:体外培养人气道上皮细胞16HBE,通过质粒转染过表达RhoGDI2,然后加入PI3K抑制剂LY294002,荧光显微镜观察质粒转染后不同时间的细胞形态变化,评估转染效率.Western blot法检测RhoGDI2、EMT标记蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Snail)以及PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达水平.结果:细胞转染36小时后荧光表达量达到高峰,转染效率70%~80%.转染组RhoGDI2表达量明显高于正常组和空载组,证明转染成功(P<0.001);转染组PI3K、Akt及p-Akt表达较正常组、空载组明显升高(P<0.001),表明PI3K/Akt信号通路被激活.PI3K抑制组PI3K(P<0.01)、Akt(P<0.05)及p-Akt(P<0.01)表达量较转染组明显下降,说明PI3K/Akt信号通路被成功抑制.与正常组、空载组比较,转染组E-cadherin表达明显减少(P<0.001),N-cadherin(P<0.01)、Snail(P<0.001)表达明显升高,差异均有统计学意义,表明RhoGDI2可以促进气道上皮细胞间质转化;与转染组比较,LY294002抑制组E-cadherin蛋白表达明显升高(P<0.001),N-cadherin(P<0.05)、Snail(P<0.001)表达明显降低,差异均有统计学意义,表明阻断PI3K/Akt信号通路可有效控制EMT过程.结论:RhoGDI2可以通过调控PI3K/Akt信号通路促进气道上皮-间质转化. 展开更多
关键词 气道上皮细胞 上皮-间质转化 RhoGDI2 PI3K/AKT信号通路
在线阅读 下载PDF
脂多糖刺激巨噬细胞获得的外泌体促进TGF-β1诱导的人A549细胞上皮间质转化
19
作者 尤学红 郭媛媛 +1 位作者 刘晓明 马春燕 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期673-681,共9页
目的探索炎性环境下巨噬细胞来源外泌体对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的肺脏上皮间质转化(EMT)的影响。方法采用透射电镜鉴定外泌体形态,Western blot法检测外泌体特异性标志物肿瘤易感基因101(TSG101)、附属蛋白质凋亡关联基因α相... 目的探索炎性环境下巨噬细胞来源外泌体对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的肺脏上皮间质转化(EMT)的影响。方法采用透射电镜鉴定外泌体形态,Western blot法检测外泌体特异性标志物肿瘤易感基因101(TSG101)、附属蛋白质凋亡关联基因α相互作用蛋白X(ALIX)、CD81、CD9蛋白及外泌体不含有的钙连蛋白(calnexin)对THP-1巨噬细胞来源的外泌体进行鉴定。利用TGF-β1诱导肺泡上皮A549细胞发生EMT,比较脂多糖(LPS)刺激和未刺激THP-1细胞来源外泌体对A549细胞间质化特征的影响。结果成功建立TGF-β1诱导A549细胞发生EMT模型和获得THP-1巨噬细胞来源的外泌体。与未经LPS处理巨噬细胞来源外泌体比较,LPS刺激THP-1细胞来源的外泌体能显著促进TGF-β1诱导A549细胞EMT,包括显著下调上皮钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平,上调波形蛋白(vimentin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TGF-β1/SMAD家族成员2/3(Smad2/3)通路Smad2/3蛋白和磷酸化的Smad2/3(p-Smad2/3)和1型胶原蛋白(Col1)等细胞间质化相关的信号蛋白表达。结论LPS刺激巨噬细胞来源的外泌体通过激活TGF-β/Smad2/3信号,上调A549细胞中vimentin、α-SMA和Col1等细胞间质化相关蛋白的表达,促进A549细胞发生EMT。 展开更多
关键词 巨噬细胞 外泌体(exosome) 肺脏上皮细胞 上皮间质转化(EMT) 转化生长因子β1
ILEI在肾间质纤维化中的表达变化 预览
20
作者 赵兴 马天娇 罗钢 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期910-914,共5页
目的通过观察白细胞介素样的上皮-间质转分化诱导因子(ILEI)在单侧输尿管梗阻(UUO)模型及经转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导后肾小管上皮-间质转分化(EMT)过程中的表达变化,探讨ILEI是否参与肾间质纤维化的形成。方法选取24只SPF级健康... 目的通过观察白细胞介素样的上皮-间质转分化诱导因子(ILEI)在单侧输尿管梗阻(UUO)模型及经转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导后肾小管上皮-间质转分化(EMT)过程中的表达变化,探讨ILEI是否参与肾间质纤维化的形成。方法选取24只SPF级健康雄性小鼠,分为假手术组、UUO模型7 d组和UUO模型14 d组,采用单侧输尿管结扎方法制作小鼠肾间质纤维化模型。Masson染色观察小鼠肾间质纤维化中胶原蛋白的表达情况,免疫组织化学染色法观察肾组织中ILEI蛋白的表达。使用TGF-β1诱导肾小管上皮细胞(HK-2细胞),倒置显微镜观察HK-2细胞的形态学变化。Western blotting检测各组细胞在TGF-β1的作用下ILEI蛋白的表达情况。结果与假手术组比较,UUO模型7 d组小鼠肾组织中ILEI表达量明显增多(P<0.05),UUO模型14 d组ILEI表达量较UUO模型7 d组下降(P<0.05)。TGF-β1诱导HK-2细胞发生EMT后,其细胞形态向成纤维细胞转化,ILEI的表达量较未添加TGF-β1的正常对照组明显增加,作用72 h后ILEI表达量较作用24和48 h时下降(P<0.05)。结论ILEI在肾间质纤维化过程中表达量发生变化,可能在肾间质纤维化过程中扮演重要角色。 展开更多
关键词 肾间质纤维化 上皮-间质转分化 转化生长因子-Β1 白细胞介素样的上皮-间质转分化诱导因子
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 123 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈
新型冠状病毒肺炎防控与诊疗专栏