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福建省2019年上半年规模化猪场猪瘟、蓝耳病和伪狂犬病抗体检测及分析 预览
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作者 雷宇 艾启青 +4 位作者 周利锋 宋庆庆 刘玉梅 刘燕 林琳 《福建畜牧兽医》 2019年第5期10-12,共3页
为了解2019年上半年福建省规模化猪场猪瘟、蓝耳病和伪狂犬病的免疫情况,对福建省不同地区46个规模猪场的2636份血清样本进行ELISA检测及分析。结果表明,猪瘟抗体阳性率为72.38%,阻断率为69.42%;伪狂犬病gE抗体阳性率为30.73%;免疫蓝耳... 为了解2019年上半年福建省规模化猪场猪瘟、蓝耳病和伪狂犬病的免疫情况,对福建省不同地区46个规模猪场的2636份血清样本进行ELISA检测及分析。结果表明,猪瘟抗体阳性率为72.38%,阻断率为69.42%;伪狂犬病gE抗体阳性率为30.73%;免疫蓝耳病疫苗猪场的阳性率为85.87%,未免疫蓝耳病疫苗猪场的阳性率为55.96%。通过该项试验,为福建省规模化猪场猪瘟、蓝耳病和伪狂犬病的防控提供数据参考和科学依据。 展开更多
关键词 猪瘟 蓝耳病 伪狂犬病 阳性率 ELISA
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某规模化猪场伪狂犬病抗体检测与分析 预览
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作者 孙伟民 《福建畜牧兽医》 2019年第5期26-28,共3页
目的:为了掌握规模化猪场伪狂犬病野毒感染情况,减少伪狂犬病所造成的经济损失,以及规模化猪场应当采取的有效防疫措施。方法:采用ELISA法对某规模化猪场7~12月份的经产母猪和后备猪进行伪狂犬病抗体检测。结果:该猪场的伪狂犬病阳性率... 目的:为了掌握规模化猪场伪狂犬病野毒感染情况,减少伪狂犬病所造成的经济损失,以及规模化猪场应当采取的有效防疫措施。方法:采用ELISA法对某规模化猪场7~12月份的经产母猪和后备猪进行伪狂犬病抗体检测。结果:该猪场的伪狂犬病阳性率为21.26%,是伪狂犬病野毒阳性场。结论:该猪场在检测出伪狂犬病抗体呈阳性后,采取了一系列措施,从而控制了疫情的发生。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 ELISA gE抗体 检测
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福建省某规模化猪场猪瘟免疫情况的研究报告 预览
3
作者 姚少玲 《福建畜牧兽医》 2019年第2期21-22,共2页
应用爱德士猪瘟抗体检测试剂盒对福建省某规模化猪场60头仔猪、15头母猪血液样品(其中20日龄仔猪血液样品30份、50日龄仔猪血液样品30份)进行猪瘟抗体水平检测,以了解该猪场的猪瘟免疫情况。
关键词 猪瘟 ELISA 抗体检测
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基质金属蛋白酶-2在非小细胞肺癌血清及组织中的表达 预览
4
作者 赵天源 常延河 +1 位作者 王颖 任燕 《临床肺科杂志》 2019年第1期79-83,共5页
目的探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase,MMP-2)在非小细胞肺癌(nonsmallcelllungcancer,NSCLC)血清及癌组织中的表达及其与转移和预后的关系。方法(1)用ELISA法检测85例NSCLC患者和20例肺良性病变患者血清中MMP-2的表达;(2... 目的探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase,MMP-2)在非小细胞肺癌(nonsmallcelllungcancer,NSCLC)血清及癌组织中的表达及其与转移和预后的关系。方法(1)用ELISA法检测85例NSCLC患者和20例肺良性病变患者血清中MMP-2的表达;(2)用免疫组织化学方法检测85例NSCLC患者和20例肺良性病变患者组织中MMP-2的表达;(3)NSCLC患者术后5年生存期调查。结果(1)肺癌组(实验组)术前血清MMP-2水平(529.23±57.16)ng/mL显著高于肺癌组术后(260.45±24.21)ng/mL和对照组(242.16±30.43)ng/mL(P<0.05);肺癌组(实验组)术前血清MMP-2水平与肿瘤直径大小、肿瘤病理类型、肿瘤临床分期、以及淋巴结转移情况有显著相关性(P<0.05);(2)肺癌组(实验组)癌组织中MMP-2阳性率为55.29%,其表达与肿瘤直径大小、病理类型、临床分期、是否有淋巴结转移有明显相关性(P<0.05);(3)肺癌组MMP-2蛋白表达阳性者其血清MMP-2水平显著高于肺癌组MMP-2蛋白表达阴性者的血清MMP-2水平(P<0.05);(4)血清高表达MMP-2肺癌患者术后5年生存率(2.33%)显著低于低表达MMP-2肺癌患者(7.14%)(P<0.01)。结论血清中MMP-2水平与癌组织中MMP-2蛋白的表达基本一致,MMP-2可能在肿瘤浸润和转移过程中起着促进作用。 展开更多
关键词 MMP-2 非小细胞肺癌 ELISA 免疫组织化学
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青霉素类抗生素广谱性酶联免疫分析方法的建立 预览
5
作者 刘伟怡 刘凤银 +4 位作者 江海超 王宇 刘佳 邹红丽 穆洪涛 《生物化工》 2019年第1期52-55,59共5页
为了建立青霉素类抗生素广谱性酶联免疫分析方法,本文通过活泼酯法将青霉素G(PEN)合成人工抗原PEN-BSA和PEN-OVA,将PEN-BSA免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,研究了同源包被与异源包被模式及ELISA各影响因素对检测灵敏度的影响,并考察了... 为了建立青霉素类抗生素广谱性酶联免疫分析方法,本文通过活泼酯法将青霉素G(PEN)合成人工抗原PEN-BSA和PEN-OVA,将PEN-BSA免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,研究了同源包被与异源包被模式及ELISA各影响因素对检测灵敏度的影响,并考察了此方法对测定牛奶中青霉素类抗生素残留的适用性。结果表明:制备的PEN多克隆抗体效价高达10^-5,测定8种青霉素类抗生素几乎无交叉反应,以CAR-OVA为异源包被原具有较高的灵敏性,最低可检测浓度为2.22μg/mL,检测限为0.14μg/mL。以1、10、100μg/mL作为加标浓度,添加回收率范围为74.0%~106.3%,变异系数小于0.21%。 展开更多
关键词 青霉素类抗生素 广谱性 多克隆抗体 异源包被 ELISA
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马波沙星单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的初步建立
6
作者 赵贵山 林梦舟 +4 位作者 李辛洁 宋炎博 侯珂 汝晓飞 王捍东 《畜牧与兽医》 北大核心 2019年第7期100-106,共7页
马波沙星(MBF)是一种氟喹诺酮类抗菌药。本试验利用碳二亚胺法合成马波沙星免疫原和包被原,经紫外分光光度法、SDS-PAGE和免疫学方法,鉴定人工抗原合成成功。通过免疫小鼠和单克隆抗体技术,获得2株可分泌马波沙星抗体的杂交瘤细胞株(5G2... 马波沙星(MBF)是一种氟喹诺酮类抗菌药。本试验利用碳二亚胺法合成马波沙星免疫原和包被原,经紫外分光光度法、SDS-PAGE和免疫学方法,鉴定人工抗原合成成功。通过免疫小鼠和单克隆抗体技术,获得2株可分泌马波沙星抗体的杂交瘤细胞株(5G2和7H5),并将建筑细胞注入小鼠的腹腔内,获得腹水型单克隆抗体。经过纯化和ELISA鉴定,结果表明5G2株单克隆抗体的效价较高,达1.28×10^5,其单抗亚型是IgG2b,轻链是Kappa。经ELISA方法优化了最佳封闭液和抗原抗体的最佳工作浓度,当MBF药物浓度在100~5000pg/mL时,有良好的线性关系,线性方程y=0.3798x-0.6613,R^2=0.9872,IC50=1.029pg/mL,LOD=45.13pg/mL,LOQ=322.59pg/mL。 展开更多
关键词 马波沙星 人工抗原 ELISA 单克隆抗体
基于黄芪甲苷单克隆抗体的ELISA检测方法的建立
7
作者 于生兰 徐加兵 欧阳臻 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期322-326,共5页
目的建立黄芪甲苷的酶联免疫分析(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测方法。方法以制备的黄芪甲苷单克隆抗体为基础,选择其最佳工作浓度,建立黄芪甲苷间接竞争ELISA法,并用该方法检测黄芪饮片中的黄芪甲苷含量。结果该方法... 目的建立黄芪甲苷的酶联免疫分析(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测方法。方法以制备的黄芪甲苷单克隆抗体为基础,选择其最佳工作浓度,建立黄芪甲苷间接竞争ELISA法,并用该方法检测黄芪饮片中的黄芪甲苷含量。结果该方法线性范围为39~1 830 ng·mL-1,组内和组间差异均≤10%,平均加样回收率为102.7%(n=6)。采用该方法检测黄芪饮片中黄芪甲苷的含量,所得结果与HPLC法基本一致。结论建立了黄芪甲苷的ELISA检测方法,可为黄芪饮片及其制品的质量控制提供方法补充。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 单克隆抗体 ELISA 质量控制
慢性乙肝患者外周血HMGB1、IL-17与HBV-DNA相关性分析 预览
8
作者 李宁侠 董恒利 +1 位作者 王海东 陈长生 《中国现代医药杂志》 2019年第6期13-15,共3页
目的了解在慢性乙肝患者中HMGB1、IL-17表达水平与HBV-DNA载量相关性。方法 2016年6月~2017年1月期间随机从临床选取126例慢性乙型肝炎患者,分别通过实时荧光PCR仪和酶联免疫吸附法(ELISA)测定HBV-DNA、HMGB1、IL-17水平。结果 HBV-DNA... 目的了解在慢性乙肝患者中HMGB1、IL-17表达水平与HBV-DNA载量相关性。方法 2016年6月~2017年1月期间随机从临床选取126例慢性乙型肝炎患者,分别通过实时荧光PCR仪和酶联免疫吸附法(ELISA)测定HBV-DNA、HMGB1、IL-17水平。结果 HBV-DNA检测,56例<1.0E+3IU/ml,53例≥1.0E+3IU/ml且<1.0E+7IU/ml,17例≥1.0E+7IU/ml;HMGB1水平(0.89±2.11)ng/ml;IL-17水平(2.44±7.75)ng/L;HMGB1与IL-17之间相关系数0.889,P<0.05;HMGB1与HBV-DNA之间相关系数0.093,P>0.05。结论 HMGB1与IL-17之间有相关性,HMGB1与HBVDNA之间无相关性。 展开更多
关键词 HMGB1 IL-17 HBV-DNA ELISA
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副结核分支杆菌MAP0862蛋白的表达及临床应用 预览
9
作者 解晓莉 孙阳阳 +5 位作者 程凯慧 楚会萌 张亮 王基隆 杨美 杨宏军 《山东农业科学》 2019年第2期111-116,共6页
本研究以腹泻牛粪便基因组DNA为模板,扩增MAP0862基因,构建重组表达载体pET-30a(+)-MAP0862和pEGX-6P-1-MAP0862,通过原核表达系统表达His-MAP0862和GST-MAP0862蛋白,经纯化后制备兔源高免血清,建立ELISA特异性检测方法,最后将纯化蛋白... 本研究以腹泻牛粪便基因组DNA为模板,扩增MAP0862基因,构建重组表达载体pET-30a(+)-MAP0862和pEGX-6P-1-MAP0862,通过原核表达系统表达His-MAP0862和GST-MAP0862蛋白,经纯化后制备兔源高免血清,建立ELISA特异性检测方法,最后将纯化蛋白和ELISA方法用于牛副结核病临床样品检测,并对检测数据进行分析。结果表明,以MAP0862蛋白为检测原建立的ELISA检测方法在临床样品检测中具有较高的特异性和敏感性,说明MAP0862蛋白适用于副结核病抗体检测。本研究建立的ELISA检测方法可有效检测临床样品中副结核病的感染。 展开更多
关键词 副结核病 MAP0862蛋白 ELISA 副结核分枝杆菌
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ECLIA与ELISA法检测献血者HBsAg、抗-HCV和HIV抗原/抗体的一致性分析
10
作者 陈少彬 何子毅 +6 位作者 刘泽民 陈庆恺 王庆 黄素媛 余霖 魏润葵 车嘉琳 《中国输血杂志》 CAS 2019年第7期650-653,共4页
目的探讨电化学发光免疫分析法(ECLIA)在献血者血液检测中的应用模式。方法以2016年12月—2017月11月东莞市中心血站33 493(人)份献血者血液标本为研究对象,先用ELISA法:分别用2种不同厂家的HBs Ag试剂(B1和B2)、抗-HCV试剂(C1和C2)和HI... 目的探讨电化学发光免疫分析法(ECLIA)在献血者血液检测中的应用模式。方法以2016年12月—2017月11月东莞市中心血站33 493(人)份献血者血液标本为研究对象,先用ELISA法:分别用2种不同厂家的HBs Ag试剂(B1和B2)、抗-HCV试剂(C1和C2)和HIV抗原/抗体试剂(I1和I2)检测2遍;2017年7月前主要挑选任1次ELISA(试剂)检测结果为'S/CO≥0. 3'的标本做ECLIA检测(挑选模式),7月后所有标本平行检测(不挑选模式),分析ECLIA与ELISA(试剂)检测结果的一致性;比较ECLIA'挑选模式'和'不挑选模式'中ELISA无反应性标本(S/CO<0. 9)的ECLIA阳性检出率,评价ECLIA作为补充检测模式的效果。结果 ECLIA与2种ELISA(试剂)检测献血者3项血液学指标结果一致性与阳性检出率:HBs Ag一致性极好(К≥0. 9),阳性率分别为2. 894%(322/11 127)与2. 642%(B1:294/11 127)、3. 020%(B2:336/11 127)(P>0. 05);抗-HCV一致性较高(К>0. 6),阳性率分别为0. 395%(67/16 978)与同为0. 224%(C1和C2相同:38/16 978)(P<0. 01);HIV抗原/抗体一致性较差(0. 3<К<0. 4),阳性率分别为0. 499%(69/13 837)与0. 238%(I1:33/13 837)、0. 289%(I2:40/13 837)(P<0. 01)。ECLIA'不挑选'与'挑选'2种检测模式的阳性率比较:HBs Ag为0. 07%(4/5 678) vs 0. 441%(22/4 988)(P<0. 01),抗-HCV为0. 169%(28/16 528) vs 1. 176%(4/340)(P <0. 01),HIV抗原/抗体为0. 377%(51/13 542) vs 0. 649%(1/154)(P>0. 05)。结论在献血者血液筛查中,ECLIA与ELISA的HBs Ag和抗-HCV检测结果一致性好,HIV抗原/抗体的结果一致性较差;'挑选模式'中HBs Ag和抗-HCV的ECLIA阳性检出率较高,ECLIA的应用模式有待进一步研究。 展开更多
关键词 电化学发光免疫分析法 ELISA 献血者 血液筛查模式 HBSAG 抗-HCV HIV抗原/抗体
全自动加样仪加样时间差对ELISA检测结果的影响 预览
11
作者 虞莉 范恩勇 徐胜春 《扬州大学学报:农业与生命科学版》 CAS 北大核心 2019年第3期86-89,共4页
STAR加样仪加样以48个4混定值质控血清作为标本进行HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP检测,每次加样后人为暂停5min再加第2次,依次类推,在人为干预下,6排标本的先后加样时间差分别为25、20、15、10、5、0min,加样后按要求进入FAME全自动酶... STAR加样仪加样以48个4混定值质控血清作为标本进行HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP检测,每次加样后人为暂停5min再加第2次,依次类推,在人为干预下,6排标本的先后加样时间差分别为25、20、15、10、5、0min,加样后按要求进入FAME全自动酶免分析仪检测,以探讨全自动加样仪加样时间差对ELISA法检测结果的影响。结果表明:HBsAg、Ani-HCV、Ani-HIV项目加样时间差为5、10mm的检测结果吸光度/判定阈值(D/CO)较0min结果无显著差异,而间隔为15、20及25min与0min结果D/CO均有显著差异;Anti-TP检测结果与加样时间差关系不明显。为保证检测结果的准确性,采供血机构在进行经血传染疾病的检测时,应尽量缩短加样时间及孵育前的等待时间并尽量控制在10min以内。 展开更多
关键词 血清 ELISA 全自动加样仪 加样时间差
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芥菜抗芜菁花叶病毒种质资源的鉴定与评价 预览
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作者 杨媛 蔡丽 +2 位作者 刘淑晶 姚培杰 万正杰 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期65-72,共8页
对33份不同变种的芥菜种质资源材料(大头芥4份、笋子芥1份、茎瘤芥3份、分蘖芥6份、大叶芥11份、结球芥2份、长柄芥1份、籽用芥1份、宽柄芥菜4份)进行人工机械摩擦接种,通过病情调查和抽薹期ELISA检测,最终筛选出9份抗病毒病材料。在病... 对33份不同变种的芥菜种质资源材料(大头芥4份、笋子芥1份、茎瘤芥3份、分蘖芥6份、大叶芥11份、结球芥2份、长柄芥1份、籽用芥1份、宽柄芥菜4份)进行人工机械摩擦接种,通过病情调查和抽薹期ELISA检测,最终筛选出9份抗病毒病材料。在病情调查中,17Y-7V、17Y-36V病情指数都为0,表现为免疫,其ELISA鉴定DP/DN比值小于2.1,分别为1.38、1.97,呈阴性;17Y-13V、17Y-20V、17Y-21V、17Y-31V、17Y-33V、17Y-34V、17Y-35V病情指数分别为2.86、5.33、2.00、8.00、5.93、5.71、2.00,表现为高抗,其ELISA鉴定DP/DN比值分别为1.12、0.89、1.60、0.93、0.78、0.81、1.33,均小于2.1,呈阴性。 展开更多
关键词 芥菜 病毒病 抗性鉴定 TUMV ELISA
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无偿献血者中HIV阳性者的病毒载量分析
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作者 赵俊鹏 常乐 +4 位作者 郭飞 张路 姬慧敏 姜心怡 王露楠 《中国输血杂志》 CAS 2019年第3期217-221,共5页
目的分析无偿献血者艾滋病病毒(HIV)阳性标本的病毒载量水平及无偿献血人群HIV的携带状态,为评估无偿献血人群HIV感染风险提供依据。方法收集2016—2018年国内25家血站HIV筛查反应性(R)的血浆标本683(人)份,根据HIV反应性类型分为ELISA... 目的分析无偿献血者艾滋病病毒(HIV)阳性标本的病毒载量水平及无偿献血人群HIV的携带状态,为评估无偿献血人群HIV感染风险提供依据。方法收集2016—2018年国内25家血站HIV筛查反应性(R)的血浆标本683(人)份,根据HIV反应性类型分为ELISA双试剂反应性组(ELISA R-R)、核酸检测(NAT)反应性组(NAT R),ELISA单试剂反应性组(ELISA R-NR),使用电化学发光试剂法做HIV抗原抗体检测,使用核酸定量试剂做HIV RNA定量检测,核酸定量检测低于检测下限(80 IU/mL)的标本以WB法确认。结果本组无偿献血者筛查R标本中,1)HIV确认阳性率为27.1%(185/683),确认阳性样本ELISA R-R标本占89.2%(165/185),ELISA NR-NR+NAT-R占8.1%(15/185),ELISA R-NR占2.7%(5/185),3(种)组病毒载量(IU/mL)分别集中在104.605±0.047、103.472±0.328和105.196±0.655(P<0.05);HIV窗口期标本病毒载量(IU/mL)>105者占20.0%(4/20),其中2例来自ELISA R-NR组,2例来自NAT R组;30.0%(6/20)为104者,其中2例来自ELISA R-NR组,2例来自NAT R组;其余50.0%(10/20)为101—103者,其中1例来自ELISA R-NR组,剩余9例来自NAT R组。2)在HIV确认阳性者中发现3名疑似HIV精英控制者(ECs)。结论我国无偿献血者中HIV ELISA R-R感染者病毒载量较抗原抗体窗口期感染者高;HIV窗口期感染者中多为低载量病毒感染者。疑似HIV ECs的发现揭示我国无偿献血人群HIV感染状态日益复杂多样化,需要加强对血液筛查实验室检测质量的管理,探究更合理的HIV筛查策略。 展开更多
关键词 艾滋病病毒(HIV) 无偿献血者 酶联免疫吸附试验(ELISA) 病毒载量 核酸检测(NAT) HIV精英控制者(ECs)
单个B细胞制备CRP单克隆抗体及其ELISA检测体系的初步建立 预览 被引量:1
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作者 林骏 山云 +3 位作者 刘谦 王晓炜 王洪涛 刘尧 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期69-73,共5页
目的:用单个B细胞抗体制备技术结合Exip293真核表达系统制备hs-CRP单克隆抗体。方法:用重组CRP蛋白免疫小鼠,荧光标记探针和流式分选技术分离出表达CRP单克隆抗体的单个B细胞,通过PCR方法扩增出编码CRP单克隆抗体蛋白的轻重链核酸序列... 目的:用单个B细胞抗体制备技术结合Exip293真核表达系统制备hs-CRP单克隆抗体。方法:用重组CRP蛋白免疫小鼠,荧光标记探针和流式分选技术分离出表达CRP单克隆抗体的单个B细胞,通过PCR方法扩增出编码CRP单克隆抗体蛋白的轻重链核酸序列并构建重组质粒,质粒转染到Expi 293细胞中制备出单克隆抗体蛋白。结果:用间接ELISA法筛选出两个具有良好特异性的单克隆抗体20#,22#,将这两个抗体配对并建立ELISA双抗体夹心检测方法,CRP浓度在15~250 ng/ml范围内有较好的检测线性(y=0.003x-0.035 8,R 2=0.997 4),精密度分析的批内变异系数CV为6.7%~9.37%,批间变异系数为8.52%~9.10%,平均回收率为98%,与临床血清检测值具有良好的相关性,达到CRP检测要求。结论:本研究所用的单个B细胞分离分选方法结合Expi 293真核表达系统在制备单克隆抗体方面具有省时、高效、特异性好、灵敏度高的特点,具有很好的应用价值。 展开更多
关键词 单个B细胞 CRP 单克隆抗体 真核表达系统 ELISA
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红花蜂花粉多糖I对H22-荷瘤小鼠的抑瘤作用
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作者 陈路燕 褚珊珊 左绍远 《亚太传统医药》 2019年第6期9-12,共4页
目的:探讨红花蜂花粉多糖Ⅰ(PBPCⅠ)对小鼠肝癌H22实体瘤的抑制作用。方法:对肝癌H22实体瘤模型给予不同剂量的PBPCⅠ,采用ELISA法检测血清中IL-1α、IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-2、VEGF的含量,剥离瘤块,取脾脏及胸腺,称质量,计算抑瘤率... 目的:探讨红花蜂花粉多糖Ⅰ(PBPCⅠ)对小鼠肝癌H22实体瘤的抑制作用。方法:对肝癌H22实体瘤模型给予不同剂量的PBPCⅠ,采用ELISA法检测血清中IL-1α、IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-2、VEGF的含量,剥离瘤块,取脾脏及胸腺,称质量,计算抑瘤率与脏器指数。H&E染色法检测肿瘤细胞生长情况、肿瘤细胞形态及肿瘤细胞凋亡等指标。结果:与模型组相比,CTX组和PBPCⅠ低、中、高剂量组对小鼠H22肝癌的抑瘤率分别为67.93%、 33.48%、45.69%、57.86%。PBPCⅠ低、中、高剂量组能显著提高荷瘤小鼠体质量、免疫器官指数,并明显升高荷瘤小鼠血清中IFN-γ、IL-2、TNF-α含量,降低血清IL-1α、IL-6、VEGF含量。H&E染色发现不同浓度的PBPCⅠ均能使肝癌肿瘤细胞凋亡。结论:PBPCⅠ对H22荷瘤小鼠具有抑瘤作用,其作用可能与调节机体免疫功能有关。 展开更多
关键词 红花蜂花粉多糖I H22-荷瘤小鼠 抑瘤作用 免疫器官 ELISA
基于鲤疱疹病毒3型ORF65基因的DNA疫苗对建鲤鱼苗的免疫保护研究 预览
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作者 李盈 刘振兴 +6 位作者 马艳平 曹俊明 马江耀 郝乐 梁志凌 柯浩 李玉谷 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期122-126,共5页
为开发针对鲤疱疹病毒3 型(Cyprinid herpesvirus 3,CyHV-3)[又称为锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV)]的DNA 疫苗,该研究将CyHV-3 ORF65 插入pEGFP-N1,构建pEGFP-ORF65 重组质粒,通过转染实验与活体成像实验证实pORF65-EGFP 融合蛋白... 为开发针对鲤疱疹病毒3 型(Cyprinid herpesvirus 3,CyHV-3)[又称为锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV)]的DNA 疫苗,该研究将CyHV-3 ORF65 插入pEGFP-N1,构建pEGFP-ORF65 重组质粒,通过转染实验与活体成像实验证实pORF65-EGFP 融合蛋白可以在建鲤(Cyprinus carpio var. Jian)体外、体内表达;重组质粒按照3 μg·尾^-1 的剂量尾柄肌肉注射免疫10 g 左右的建鲤鱼苗,免疫3 次,ELISA 检测表明pEGFP-ORF65 免疫后可以显著提高血清特异性抗体水平;攻毒实验显示,CyHV-3 攻毒21 d 后,PBS 组、pEGFP-N1 组和pEGFPORF65组的建鲤成活率分别为25%、30%和90%,攻毒建鲤的成活率显著提高(P<0.01)。该研究为ORF65 作为DNA 疫苗靶基因应用于CyHV-3 的防控提供了依据。 展开更多
关键词 鲤疱疹病毒3型 锦鲤疱疹病毒 ORF65 DNA疫苗 ELISA
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雷公藤甲素微乳凝胶对CIA大鼠T细胞相关因子调节作用研究 预览
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作者 管咏梅 张建林 +4 位作者 刘佳 余雅婷 金晨 陈丽华 朱卫丰 《世界中医药》 CAS 2019年第7期1635-1638,共4页
目的:观察雷公藤甲素微乳凝胶(TP-MBGs)外用对CIA大鼠T细胞相关因子表达水平的影响,以探究其治疗类风湿性关节炎的作用机制。方法:将56只CIA模型大鼠随机分成空白组、模型组、基质组、TP灌胃组、TP微乳高剂量组、TP-MBGs高、中、低剂量... 目的:观察雷公藤甲素微乳凝胶(TP-MBGs)外用对CIA大鼠T细胞相关因子表达水平的影响,以探究其治疗类风湿性关节炎的作用机制。方法:将56只CIA模型大鼠随机分成空白组、模型组、基质组、TP灌胃组、TP微乳高剂量组、TP-MBGs高、中、低剂量组,给药28 d后处理,采用ELISA法检测各组大鼠皮肤(CD1α、IgA)、血清(IFN-γ、IL-6、TNF-α、ColⅡ、IL-10)及滑膜细胞上清液(IL-1、PGE 2、TNF-α)中相关细胞因子的表达水平。结果:与空白对照组比较,模型组皮肤中CD1α、血清中IFN-γ、IL-6、TNF-α和滑膜细胞上清液中IL-1、PGE 2、TNF-α的表达水平明显升高;与模型组比较,TP-MBGs中剂量组血清中的TNF-α及IL-6、滑膜细胞上清液中的IL-1及TNF-α表达水平显著降低;TP-MBGs高剂量组皮肤中CD1α、血清中的TNF-α及IFN-γ、滑膜细胞上清液中的IL-1及TNF-α的表达水平显著降低。结论:雷公藤甲素微乳凝胶外用治疗类风湿性关节炎,可能通过调节皮肤免疫功能及抑制相关细胞因子的分泌,从而起到局部及全身治疗作用。 展开更多
关键词 TP-MBGs CIA模型 RA T细胞相关因子 调节作用 ELISA 经皮给药 机制
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猪圆环病毒3型感染BALB/c小鼠的实验观察 预览
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作者 张超林 刘攀 +10 位作者 沈萌 王妍 王娟 颜世君 严权斌 邓均华 孙哲 郭小参 王同燕 李向东 田克恭 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期353-358,共6页
目的研究猪圆环病毒3型(porcine circovirus3,PCV3)对BALB/c小鼠的感染情况。方法将雌性BALB/c小鼠分为两组,实验组感染PCV3组织毒,对照组接种同样剂量的PBS。感染后每天观察小鼠状态,并在第0,3,7,11和14天采血进行荧光定量PCR检测和EL... 目的研究猪圆环病毒3型(porcine circovirus3,PCV3)对BALB/c小鼠的感染情况。方法将雌性BALB/c小鼠分为两组,实验组感染PCV3组织毒,对照组接种同样剂量的PBS。感染后每天观察小鼠状态,并在第0,3,7,11和14天采血进行荧光定量PCR检测和ELISA检测。实验结束后,对所有动物进行安乐死和剖检,对心脏、肝、脾、肺、肾、脑和淋巴结取样进行荧光定量PCR检测,并制片进行组织病理学检查。选择PCR检测阳性组织进行PCV3CAP基因测序分析。结果PCV3组织毒感染小鼠不引起明显的临床症状和病理变化。病毒可在感染早期的血清中检测到,病毒含量最高的器官是肝脏和脾脏,PCV3感染小鼠后核酸序列未发生变化。随着感染时间的增加血清中抗体水平逐渐升高。结论PCV3可以感染BALB/c小鼠,并在小鼠体内增殖。本研究结果为猪圆环病毒3型致病性的研究以及防控提供了参考。 展开更多
关键词 猪圆环病毒3型 BALB/C小鼠 感染 荧光定量PCR ELISA 组织病理学
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应用ELISA检测注射用重组人促血小板生成素模拟肽-Fc融合蛋白中卡那霉素残留量
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作者 常翠云 崔颖 +1 位作者 李晓然 齐连权 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期328-332,共5页
目的:建立灵敏度更高的ELISA方法检测卡那霉素残留量并进行方法学验证,用于重组生物制品的质量控制。方法:采用直接竞争ELISA方法,样品中残留的卡那霉素将和酶标抗原竞争酶标板上预包被的卡那霉素抗体,用3,3,5,5-四甲基联苯胺(TMB)底物... 目的:建立灵敏度更高的ELISA方法检测卡那霉素残留量并进行方法学验证,用于重组生物制品的质量控制。方法:采用直接竞争ELISA方法,样品中残留的卡那霉素将和酶标抗原竞争酶标板上预包被的卡那霉素抗体,用3,3,5,5-四甲基联苯胺(TMB)底物显色,样品吸光值与残留卡那霉素的含量成负相关,用酶标仪进行检测并用Ridasoft Win分析软件进行分析。结果:此方法灵敏度高,在0.2~3.0 ng·mL-1范围内spline拟合良好,且平行复孔RSD小于10%;方法精密度良好,加标回收率在80%~120%之间。应用该方法对1批注射用重组人促血小板生成素模拟肽-Fc融合蛋白(简称TMP-Fc)成品的卡那霉素残留量进行测定,结果表明,每瓶TMP-Fc(250μg)卡那霉素残留量小于0.2 ng。结论:该方法具有灵敏度高、操作便捷、检测迅速等特点,可以用于重组生物制品中卡那霉素残留量的质量控制。 展开更多
关键词 ELISA 卡那霉素 残留量 重组生物制品 质量控制 TMP-Fc
土霉素完全抗原的制备及ELISA检测方法的建立 预览
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作者 曹金博 胡骁飞 +6 位作者 王耀 李燕虹 曹夕丹 邢云瑞 孙亚宁 邓瑞广 张改平 《食品与机械》 北大核心 2019年第9期77-83,共7页
为制备土霉素(Oxytetracycline,OTC)完全抗原,获得免疫学特性良好的土霉素鼠源多抗血清并建立OTC免疫学检测方法,采用重氮化法在OTC分子上引入羧基,进而利用改进碳二亚胺法将其与载体蛋白偶联制备完全抗原,通过红外扫描、紫外扫描和凝... 为制备土霉素(Oxytetracycline,OTC)完全抗原,获得免疫学特性良好的土霉素鼠源多抗血清并建立OTC免疫学检测方法,采用重氮化法在OTC分子上引入羧基,进而利用改进碳二亚胺法将其与载体蛋白偶联制备完全抗原,通过红外扫描、紫外扫描和凝胶电泳鉴定其偶联效果,然后将完全抗原免疫BLAB/c小鼠获得多抗血清(pAb)并对其免疫学特性进行鉴定,通过优化条件建立OTC间接竞争ELISA检测方法。结果表明,偶联效果良好,免疫的4只小鼠多抗血清效价均达到1 12 800;4只小鼠多抗血清均有抑制效果,其中2号小鼠产生的多抗血清效果最佳,基于该多抗血清建立的OTC间接竞争ELISA检测方法半数抑制浓度(IC 50)为32.92 ng/mL,检测限(LOD)为1.3 ng/mL,牛奶样品中添加回收率在84.70%~87.45%,与金霉素、四环素的交叉反应率分别为5.27%,4.10%,与其他竞争物交叉反应率<0.4%。该试验成功合成了OTC完全抗原,获得了免疫学特性良好的OTC多抗血清,并建立了OTC免疫学检测方法。 展开更多
关键词 土霉素 完全抗原 多抗血清 ELISA
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