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不同方法制备的4型肺炎球菌多糖-白喉类毒素结合物的免疫原性比较
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作者 李鑫 任涛 +2 位作者 唐秀丽 题靖 杨朝晖 《国际生物制品学杂志》 CAS 2019年第2期53-56,共4页
目的比较以1-氰基-4-二甲氨基吡啶四氟硼酸盐(1-cyano-4-dimethylamino pyridine tetrafluoroborate,CDAP)和溴化氰(cyanogen bromide,CNBr)为活化剂制备的4型肺炎球菌多糖(type 4 pneumococcal polysaccharide,PS4)-白喉类毒素(diphthe... 目的比较以1-氰基-4-二甲氨基吡啶四氟硼酸盐(1-cyano-4-dimethylamino pyridine tetrafluoroborate,CDAP)和溴化氰(cyanogen bromide,CNBr)为活化剂制备的4型肺炎球菌多糖(type 4 pneumococcal polysaccharide,PS4)-白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)结合物(PS4-DT)原液的免疫原性。方法分别以CDAP或CNBr为活化剂,各制备1批PS4-DT原液,并对原液的相关质量指标进行检测。分别用2种PS4-DT原液,间隔2周皮下注射NIH小鼠3次,末次免疫1周后采集血清,用ELISA检测血清抗体水平,比较不同方法制备的2种PS4-DT原液的免疫原性。结果 2种PS4-DT原液的主要质量指标均符合相关规定的要求,结合PS4的含量分别为257.1和203.1 μg/ml。2种PS4-DT原液均可与PS4抗血清发生特异性反应。抑制ELISA检测显示,2种PS4-DT原液对PS4抗血清的抑制率均达到100%。2种PS4-DT原液免疫小鼠产生的抗PS4抗体水平相近,抗体几何平均滴度分别为970.06和844.49。结论不同种方法制备的2种PS4-DT原液在小鼠中的免疫原性相似,且均可诱导小鼠产生较高水平的抗体。 展开更多
关键词 链球菌 肺炎 多糖类 细菌 白喉类毒素
凝胶过滤层析纯化白喉类毒素工艺的优化
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作者 何岩 张明华 +5 位作者 邓海清 段霄 李硕航 杨朝晖 刘建凯 郑海发 《国际生物制品学杂志》 CAS 2018年第2期53-57,共5页
【摘要】目的通过定制设计优化白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)层析纯化工艺。方法将经硫酸铵沉淀的精制DT原液浓缩后分别用Sepharose4FF(4FF)和SephaerylS-300(S-300)凝胶过滤层析进行进一步纯化。根据定制设计,将上样体积... 【摘要】目的通过定制设计优化白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)层析纯化工艺。方法将经硫酸铵沉淀的精制DT原液浓缩后分别用Sepharose4FF(4FF)和SephaerylS-300(S-300)凝胶过滤层析进行进一步纯化。根据定制设计,将上样体积、样品浓度、洗脱流速、层析介质设为实验因子,将层析载量、纯度、收率设为响应值,建立数学模型,确定凝胶过滤层析的最优层析参数,并对实验结果进行工艺验证。结果定制设计的实验结果显示,8-300凝胶过滤层析纯化的DT纯度和收率均高于4FF凝胶过滤层析。进一步分析确定,8-300凝胶过滤层析的最佳参数为:上样体积2.5%,样品浓度45mg/ml,洗脱流速45cm/h。当以最佳参数进行S-300凝胶过滤层析纯化时,层析工艺的验证结果符合预期。结论8-300比4FF更适宜作为DT纯化工艺的凝胶层析介质。 展开更多
关键词 白喉类毒素 色谱法 凝胶 研究设计
第三批吸附白喉类毒素国家标准品的制备和标定
3
作者 谭亚军 杨邦玲 +9 位作者 肖詹荣 潘海龙 田霖 刘亚丽 张建灵 曲芙莲 董国霞 晁哲 侯启明 马霄 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2017年第9期977-980,985共5页
目的建立第三批吸附白喉类毒素国家标准品,用于效价测定。方法选用白喉疫苗生产菌株(PW8,CMCC38007),经复苏传代和产毒培养后,收获白喉毒素,采用先精制后脱毒的方法获得精制白喉类毒素原液,再加入氢氧化铝吸附后分装冻干,作为备选品... 目的建立第三批吸附白喉类毒素国家标准品,用于效价测定。方法选用白喉疫苗生产菌株(PW8,CMCC38007),经复苏传代和产毒培养后,收获白喉毒素,采用先精制后脱毒的方法获得精制白喉类毒素原液,再加入氢氧化铝吸附后分装冻干,作为备选品。按《中国药典》三部(2010版)要求对原液和冻干品进行检定。以WHO国际标准品(07/216)和中国国家标准品(002)为标准,采用小鼠Vero细胞法在3个实验室进行协作标定。结果该批标准品的各项检测指标均符合国家标准品的规定;经协作标定,获得的20个效价单位标定结果合并统计后几何均值为289.3 IU/ml,95%可信区间为276.0~303.2;同时用WHO国际标准品(07/216)和中国国家标准品(002)进行标定比较,两者差异无统计学意义(P〉0.05);标准品效价稳定性考核结果证明,我国白喉类毒素国家标准品在保存期内效价稳定。结论所制备的标准品各项指标均符合要求,其效价定为289.3 IU/支,可作为第三批吸附白喉类毒素国家标准品用于效价测定。 展开更多
关键词 白喉类毒素 国家标准品 效价测定
破伤风类毒素和白喉类毒素原液的质量分析 被引量:1
4
作者 王珣 张伟平 +6 位作者 张娜 薄晓菲 吴丽洁 马晓宇 张萍 肖詹蓉 孙玉杰 《国际生物制品学杂志》 CAS 2016年第6期261-264,共4页
目的 分析破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)和白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)原液的细菌内毒素含量、单体与多聚体之比以及游离氨基数.方法 取TT和DT原液各10批,用凝胶法、高效液相色谱法及三硝基苯磺酸法分别检测原液的细菌内... 目的 分析破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)和白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)原液的细菌内毒素含量、单体与多聚体之比以及游离氨基数.方法 取TT和DT原液各10批,用凝胶法、高效液相色谱法及三硝基苯磺酸法分别检测原液的细菌内毒素、单体和多聚体以及游离氨基.结果 各10批TT、DT原液的细菌内毒素含量均值分别为1.14和0.35 EU/Lf.TT原液的单体平均含量为72.1%,是多聚体的3倍;DT原液的单体平均含量为88.9%,是多聚体的8倍.脱毒后,每个TT蛋白分子含游离氨基数均值为43.5,比破伤风毒素减少约60%;每个DT蛋白分子含游离氨基数均值为9.9,比白喉毒素减少约75%.10批TT、DT的单体与多聚体含量之比以及游离氨基数的批间一致性较好(变异系数:1.59%~16.26%).结论 细菌内毒素含量、单体与多聚体之比以及游离氨基数检测指标可用于对TT、DT生产过程的控制以及批间一致性的监控. 展开更多
关键词 破伤风类毒素 白喉类毒素 内毒素类 单体 氨基
白喉类毒素酶联免疫检测法的建立及初步应用 预览
5
作者 张霖阳 杨冰 +3 位作者 王珣 张娜 赵俊 王玲 《微生物学免疫学进展》 2016年第2期45-49,共5页
目的建立测定吸附无细胞百白破联合疫苗中白喉类毒素酶联免疫检测(ELISA)方法,并进行验证及初步应用。方法以高效价兔抗DT多克隆抗体和相应酶标抗体建立双抗体夹心ELISA法,确定线性范围同时验证该方法的重复性和特异性等确定检测限度... 目的建立测定吸附无细胞百白破联合疫苗中白喉类毒素酶联免疫检测(ELISA)方法,并进行验证及初步应用。方法以高效价兔抗DT多克隆抗体和相应酶标抗体建立双抗体夹心ELISA法,确定线性范围同时验证该方法的重复性和特异性等确定检测限度,并初步应用。结果 DT含量在0-0.0160 Lf/m L范围内反应曲线线性关系良好(r〉0.99)。该方法与破伤风类毒素(Tetanus toxoid,TT)、百日咳毒素(Pertussis toxin,PT)、百日咳丝状血凝素(Filamantous hemagglutinin,FHA)与黏着素(Pertactin,Prn)无明显交叉反应,重复性好、特异性较强,精密度及准确度验证均符合常规质控要求,通过验证确定的准确检测范围为0.000 8-0.016 0 Lf/m L;检测限度为0.000 8 Lf/m L。该方法对DT抗原进行了吸附率的检测,同时检测了10批白喉类毒素原液与《中华人民共和国药典》三部2010年版规定的絮状单位检测方法进行对比,变异系数低于20%。结论建立了白喉类毒素双抗体夹心ELISA检测方法,为吸附无细胞百白破联合疫苗生产过程中白喉类毒素含量的质量控制提供了有效技术手段。 展开更多
关键词 白喉类毒素 酶联免疫吸附试验 吸附无细胞百白破联合疫苗
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吸附无细胞百白破联合疫苗中白喉类毒素的质量分析 被引量:2
6
作者 曲芙莲 晁哲 +5 位作者 吴杰 朱小农 袁良玉 马霄 潘海龙 谭亚军 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第22期2572-2574,共3页
目的:对成都生物制品研究所有限责任公司2007-2013年生产的吸附无细胞百白破联合疫苗中白喉类毒素的原液和成品的关键质量属性进行分析。方法:建立了白喉类毒素趋势分析和实验室间对比分析的方法。结果:及时发现了白喉类毒素的质量... 目的:对成都生物制品研究所有限责任公司2007-2013年生产的吸附无细胞百白破联合疫苗中白喉类毒素的原液和成品的关键质量属性进行分析。方法:建立了白喉类毒素趋势分析和实验室间对比分析的方法。结果:及时发现了白喉类毒素的质量和生产过程中发生的问题及偏差,确定了产生问题和偏差的影响因素。结论:证明了成都公司白喉类毒素生产和检定过程的稳定性,白喉类毒素的质量是稳定的。 展开更多
关键词 趋势分析 实验室间对比分析 白喉类毒素
脑膜炎球菌多糖-白喉类毒素(CRM197)结合物中游离多糖含量检测方法的建立及验证 被引量:2
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作者 朱涛 朱婉玉 +2 位作者 宇学峰 毛慧华 邵忠琦 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第4期402-405,410共5页
目的 建立一种脑膜炎球菌多糖-白喉类毒素(CRM197)结合物中游离多糖含量的检测方法,并进行验证。方法 根据脱氧胆酸钠(sodium deoxycholate,NaDC)在酸性条件下可沉淀蛋白的原理,分别对标准蛋白溶液和CRM197蛋白溶液进行酸沉淀处理,... 目的 建立一种脑膜炎球菌多糖-白喉类毒素(CRM197)结合物中游离多糖含量的检测方法,并进行验证。方法 根据脱氧胆酸钠(sodium deoxycholate,NaDC)在酸性条件下可沉淀蛋白的原理,分别对标准蛋白溶液和CRM197蛋白溶液进行酸沉淀处理,考察其蛋白沉淀效果;向脑膜炎球菌多糖-白喉类毒素结合物中标加多糖衍生物,计算加标回收率,验证方法的准确性;分别采用NaDC沉淀法处理脑膜炎球菌多糖-白喉类毒素(A、C、Y、W135群)结合物,检测其游离多糖含量,试验重复6次,验证方法的重复性;向标准蛋白溶液中标加不同浓度的NaDC溶液,验证NaDC对蛋白检测的干扰,考察方法的耐用性。结果 不同浓度的标准蛋白溶液经NaDC沉淀法处理后,蛋白浓度在100-300μg/ml范围内,沉淀中蛋白回收率在90%-110%之间,蛋白浓度大于300μg/ml的样品回收率显著降低;4种脑膜炎球菌多糖-CRM197结合物标加多糖衍生物后,再经NaDC沉淀法处理后的游离多糖含量回收率均在80%-110%之间;4种脑膜炎球菌多糖-CRM197结合物6次检测结果的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均〈15%;当溶液中NaDC的浓度不高于2%时,对蛋白检测无干扰。结论NaDC沉淀法准确性、重复性和耐用性良好,可用于脑膜炎球菌多糖-白喉类毒素结合物中游离多糖含量的测定。 展开更多
关键词 脑膜炎球菌多糖 白喉类毒素 结合物 游离多糖 脱氧胆酸钠
不同粒径氢氧化铝佐剂对白喉类毒素免疫效果的影响 预览 被引量:6
8
作者 槐丽苹 刘辉 +3 位作者 张楠 孙俊峰 王云英 魏辉 《微生物学免疫学进展》 2011年第3期15-17,共3页
研究不同粒径的氢氧化铝[Al(OH)3]对白喉类毒素的吸附效果,用于指导疫苗生产,提高疫苗质量。用透射电镜测得的不同粒径的Al(OH)3分别吸附白喉类毒素及用絮状单位测定法和疫苗效价测定法对其吸附效果作比较,并经统计学处理。试验结果显示... 研究不同粒径的氢氧化铝[Al(OH)3]对白喉类毒素的吸附效果,用于指导疫苗生产,提高疫苗质量。用透射电镜测得的不同粒径的Al(OH)3分别吸附白喉类毒素及用絮状单位测定法和疫苗效价测定法对其吸附效果作比较,并经统计学处理。试验结果显示,粒径为210nm的Al(OH)3对白喉类毒素吸附效果及对白喉疫苗效力的免疫增强作用明显好于粒径600nm的Al(OH)3。实验证实,Al(OH)3佐剂的粒径大小与白喉类毒素的吸附效果及疫苗的免疫原性密切相关。 展开更多
关键词 氢氧化铝 粒径 白喉类毒素 免疫效果
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白喉类毒素ELISA检测方法的建立及初步应用 被引量:1
9
作者 刘朝阳 景辉 +3 位作者 陈艳红 张斌 马相虎 朱金华 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2011年第8期977-979,共3页
目的建立白喉类毒素双抗体夹心ELISA检测方法,并进行验证及初步应用。方法以马抗白喉类毒素血清作为包被抗体,HRP标记的白喉絮状反应抗毒素作为酶标抗体,建立白喉类毒素双抗体夹心ELISA检测方法,并对该方法进行重复性、特异性验证、最... 目的建立白喉类毒素双抗体夹心ELISA检测方法,并进行验证及初步应用。方法以马抗白喉类毒素血清作为包被抗体,HRP标记的白喉絮状反应抗毒素作为酶标抗体,建立白喉类毒素双抗体夹心ELISA检测方法,并对该方法进行重复性、特异性验证、最佳线性范围和检测限确定及初步应用。结果经验证,该方法重复性好,特异性强,白喉类毒素含量在0.976 5~125.000 0 ng/ml之间时线性关系良好,检测限为7.812 ng/ml,该方法检测了3批白喉类毒素原液,与动物实验结果基本相符。结论已建立了白喉类毒素双抗体夹心ELISA检测方法,可用于检测白喉类毒素的含量和抗原性。 展开更多
关键词 白喉类毒素 酶联免疫吸附测定
多价肺炎链球菌荚膜多糖结合物对小鼠免疫应答的影响
10
作者 任克明 陈晓航 +4 位作者 张轶 刘爱萍 陈美华 王剑虹 沈荣 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第8期792-794,共3页
目的探讨多价肺炎链球菌荚膜多糖结合物对小鼠免疫应答的影响。方法分别用单一载体(破伤风类毒素)和混合载体(破伤风类毒素和白喉类毒素)作为多糖结合物的载体蛋白,制备5~9价肺炎链球菌荚膜多糖结合物,免疫NIH小鼠,采用间接ELIS... 目的探讨多价肺炎链球菌荚膜多糖结合物对小鼠免疫应答的影响。方法分别用单一载体(破伤风类毒素)和混合载体(破伤风类毒素和白喉类毒素)作为多糖结合物的载体蛋白,制备5~9价肺炎链球菌荚膜多糖结合物,免疫NIH小鼠,采用间接ELISA法测定免疫小鼠血清中抗荚膜多糖特异性IgG抗体水平。结果多价肺炎链球菌荚膜多糖结合物的免疫效果优于相应的单价结合物;随着结合物配制价数的增高,小鼠的免疫应答能力趋于下降;多价结合物中使用两种载体能缓解此现象,但载体含量过高时,依然会抑制免疫应答。结论多价肺炎链球菌荚膜多糖结合物免疫小鼠后,随着载体剂量的增高,会出现载体诱导的表位抑制现象,使小鼠的免疫应答反应减弱。两种载体蛋白同时使用能缓解此现象。 展开更多
关键词 肺炎链球菌荚膜多糖 结合物 破伤风类毒素 白喉类毒素 免疫应答 表位抑制
不同纯度、剂量白喉类毒素对迟发型超敏反应的影响 预览
11
作者 魏辉 槐丽萍 +3 位作者 郭红 朱威 施维 史华新 《微生物学免疫学进展》 2008年第1期 24-26,共3页
研究不同剂量及不同白喉类毒素纯度引起的迟发型超敏反应的状况,用于指导疫苗的生产,提高疫苗的质量。以豚鼠为动物模型,采用迟发型超敏试验法,对原制白喉类毒素、精制白喉类毒素、纯化精制白喉类毒素、高纯度的精制白喉类毒素的剂量与... 研究不同剂量及不同白喉类毒素纯度引起的迟发型超敏反应的状况,用于指导疫苗的生产,提高疫苗的质量。以豚鼠为动物模型,采用迟发型超敏试验法,对原制白喉类毒素、精制白喉类毒素、纯化精制白喉类毒素、高纯度的精制白喉类毒素的剂量与超敏反应试验。试验结果表明,注射白喉类毒素剂量的大小与超敏反应成正相关,与纯度成负相关。剂量越大,超敏反应越强;纯度越高,超敏反应愈弱。 展开更多
关键词 白喉类毒素 剂量 纯度 超敏反应
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伤寒Vi多糖、白喉、破伤风联合疫苗初探 预览 被引量:1
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作者 程惠蓉 冯洁 陈锐钢 《国外医学:预防.诊断.治疗用生物制品分册》 2004年第6期 241-245,共5页
目的制备成人及青少年用吸附伤寒Vi多糖、白喉、破伤风联合疫苗,观察伤寒Vi多糖含量、白喉及破伤风效价.方法按设计的配方,将白喉、破伤风类毒素加入佐剂中吸附后,再加入伤寒Vi多糖,要求配制的吸附伤寒Vi多糖、白喉、破伤风联合疫苗每... 目的制备成人及青少年用吸附伤寒Vi多糖、白喉、破伤风联合疫苗,观察伤寒Vi多糖含量、白喉及破伤风效价.方法按设计的配方,将白喉、破伤风类毒素加入佐剂中吸附后,再加入伤寒Vi多糖,要求配制的吸附伤寒Vi多糖、白喉、破伤风联合疫苗每人用剂量0.5ml伤寒Vi多糖含量≥30μg,白喉类毒素效价≥2IU,破伤风类毒素效价≥40IU.结果三组配方试验样品每人用剂量0.5ml伤寒Vi多糖含量均低于30μg,白喉类毒素效价3.127IU~5.911IU,破伤风类毒素效价7.784IU~23.976IU.除白喉类毒素效价达到要求外,伤寒Vi多糖含量及破伤风类毒素效价未达到要求.结论初探试验表明,试验的联合疫苗存在抗原干扰,伤寒Vi多糖含量及破伤风类毒素效价下降. 展开更多
关键词 伤寒Vi多糖 白喉类毒素 破伤风类毒素 效价 联合疫苗
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氨—碘酸盐介质中白喉类毒素的平行催化氢波 预览 被引量:2
13
作者 刘利民 过玮 严峰 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期 4-7,共4页
在 0.4 mol/L NH3-NH4Cl (pH 8.31)介质中,白喉类毒素(DT)于-1.89V(vs. SCE)处产生的极谱催化氢波可被碘酸钾进一步催化,峰电流明显增大,但峰电位不变,产生一种氢的新动力波,建议称其为平行催化氢波.在 0.4 mol/L NH3-NH4Cl (pH 8.31)-5... 在 0.4 mol/L NH3-NH4Cl (pH 8.31)介质中,白喉类毒素(DT)于-1.89V(vs. SCE)处产生的极谱催化氢波可被碘酸钾进一步催化,峰电流明显增大,但峰电位不变,产生一种氢的新动力波,建议称其为平行催化氢波.在 0.4 mol/L NH3-NH4Cl (pH 8.31)-5.0×10-3 mol/L KIO3 介质中,DT平行催化氢波的二阶导数峰电流与其浓度在 0.2 μg/mL~1.0 μg/mL 内呈线性关系,可用于生物制品中DT含量的测定. 展开更多
关键词 氨-碘酸盐介质 白喉类毒素 蛋白质 生物制品 测定 极谱催化氢波 碘酸钾 平等催化氢波
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絮状试验用白喉和破伤风类毒素标准的国际协作试验 预览 被引量:1
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作者 俞永平 梁宝华 +1 位作者 董联珠 徐锡荣 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1991年第2期78-80,共3页
按照国际协作试验计划,本试验用 Ramon 絮状试验方法标化了絮状试验用白喉类毒素和破伤风类毒素国际标准各一批,推荐品即 DIFT 和 TEFT。本试验室标定结果与由13个实验室参加的国际协作标定结果几乎相同。以 DIFT 和 TEFT 为标准,用 Le... 按照国际协作试验计划,本试验用 Ramon 絮状试验方法标化了絮状试验用白喉类毒素和破伤风类毒素国际标准各一批,推荐品即 DIFT 和 TEFT。本试验室标定结果与由13个实验室参加的国际协作标定结果几乎相同。以 DIFT 和 TEFT 为标准,用 Levine-Wyman 的试管絮状试验法和火箭电泳测定了几批白喉类毒素和破伤风类毒素的 Lf,其结果可与 Ramon 方法测定结果相比,证明火箭电泳可用于定量测定类毒素(或毒素)的絮状单位。 展开更多
关键词 白喉类毒素 破伤风类毒素 絮状标准类毒素
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不同蛋白载体制备A、C、Y、W135群四价脑膜炎球菌多糖结合疫苗的免疫原性
15
作者 佟巍 孙晓东 +2 位作者 刘建斌 尹珊珊 刘建凯 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第2期121-124,128共5页
目的探讨以破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)及白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)为载体的A、C、Y、W135群四价脑膜炎球菌多糖结合疫苗的免疫原性。方法将A、C、Y、W135群流脑多糖经溴化氰(CNBr)活化后,以1,6己二酰肼(1,6-a... 目的探讨以破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)及白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)为载体的A、C、Y、W135群四价脑膜炎球菌多糖结合疫苗的免疫原性。方法将A、C、Y、W135群流脑多糖经溴化氰(CNBr)活化后,以1,6己二酰肼(1,6-adipic acid dihydrazide,ADH)作为衍生剂制备相应的衍生物,分别与,TT及DT在碳二亚胺[N-(3-Dimethylami-nopropyl)-N’-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDAC]作用下结合,经Sepharose4FF凝胶层析纯化后,加入冻干保护剂进行冻干,制备成A、C、Y、W135群四价脑膜炎球菌多糖结合疫苗。用两种蛋白载体疫苗分别按1及2.5μg两个剂量(各型多糖的含量为1和2.5μg)免疫小鼠,经腹部皮下注射,于0及14d各免疫1次,于首次免疫后第28天经静脉采血,分离血清,ELISA法检测血清各型抗体水平。结果1及2.5斗g两个剂量组的阳转率均高于80%,2.5txg免疫组的阳转率优于1txg免疫组;总体上来说,以TT为蛋白载体结合疫苗的阳转率高于以DT为载体的结合疫苗,对A和W135群脑膜炎球菌多糖结合疫苗较明显。结论以1Tr及DT为载体制备的A、C、Y、W135群四价脑膜炎球菌多糖结合疫苗均具有良好的免疫原性,TT略优于DT。 展开更多
关键词 脑膜炎球菌多糖结合疫苗 蛋白载体 破伤风类毒素 白喉类毒素 免疫原性
不同氢氧化铝佐剂和吸附方式对无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗免疫效果的影响
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作者 粱疆莉 顾琴 +5 位作者 高娜 马艳 姬秋彦 史荔 孙明波 衡燮 《中华微生物学和免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第9期697-701,共5页
目的 研究不同氢氧化铝佐剂含量、两种吸附方式以及不同厂家氢氧化铝佐剂对无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗(DTaP-sIPV)免疫效果的影响.方法 用0.42 mg/ml、0.47 mg/ml、0.52 mg/ml终浓度的铝吸附相同剂量的百白破5种抗原,用... 目的 研究不同氢氧化铝佐剂含量、两种吸附方式以及不同厂家氢氧化铝佐剂对无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗(DTaP-sIPV)免疫效果的影响.方法 用0.42 mg/ml、0.47 mg/ml、0.52 mg/ml终浓度的铝吸附相同剂量的百白破5种抗原,用顺序吸附和分别吸附两种方式吸附抗原,使用进口和自制氢氧化铝,比较各抗原的吸附率、各抗原抗体水平以及百日咳、破伤风、白喉疫苗效价.结果 0.52 mg/ml铝含量组吸附率最高,0.42 mg/ml铝含量组吸附率最低;顺序吸附和分别吸附两种吸附方式没有明显差异;使用进口氢氧化铝佐剂和自制氢氧化铝佐剂组分抗体反应各有不同,差异无统计学意义.结论 0.52 mg/ml铝含量、自制氢氧化铝佐剂和分别吸附的方式适用于DTaP-sIPV疫苗的制备. 展开更多
关键词 DTaP—sIPV 吸附率 疫苗效价 抗百日咳毒素抗体 抗丝状血凝素抗体 抗百日 咳粘着素抗体 抗白喉类毒素抗体 抗破伤风类毒素抗体
广西壮族自治区2013年健康人群白喉抗体水平调查 被引量:5
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作者 梁亮 马宇燕 +4 位作者 韦敬航 邓丽丽 韦一知 钟革 刘巍 《中国疫苗和免疫》 北大核心 2016年第2期175-179,共5页
目的了解广西2013年健康人群白喉抗体水平及其变化趋势,为预防控制白喉策略提供参考。方法在广西5个县采集0~60岁健康人群血清标本,利用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测白喉抗体。结果 2013年共采集... 目的了解广西2013年健康人群白喉抗体水平及其变化趋势,为预防控制白喉策略提供参考。方法在广西5个县采集0~60岁健康人群血清标本,利用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测白喉抗体。结果 2013年共采集健康人群血清标本3 191份,白喉抗体阳性率81.13%,中位数抗体浓度(Median Antibody Concentration,MAC)为0.046IU/ml。5个县白喉抗体阳性率在69.97%~90.47%之间(χ~2=104.99,P〈0.001),MAC在0.029IU/ml~0.068 IU/ml之间(H=112.90,P〈0.001)。各年龄组白喉抗体阳性率在75.34%(11~20岁组)~86.76%(51~60岁组)之间(χ~2=57.01,P〈0.001),MAC在0.032IU/ml(0~10岁组)~0.111IU/ml(31~40岁组)之间(H=144.78,P〈0.001)。男、女性白喉抗体阳性率分别为82.00%和80.51%(χ~2=1.13,P=0.287),MAC分别为0.051IU/ml和0.042IU/ml(U=1 155 974.50,P=0.001)。结论白喉抗体血清学调查结果可反映当地儿童免疫规划工作情况,预测广西近几年不会发生白喉流行,需对白喉抗体水平较低的地区和年龄组进行强化免疫以进一步巩固白喉免疫屏障;同时应严格按照含白喉类毒素疫苗接种程序对适龄儿童进行全程接种,防止出现某些剂次疫苗漏种的现象。 展开更多
关键词 白喉 抗体 酶联免疫吸附试验 含白喉类毒素疫苗
伤寒Vi多糖与不同载体蛋白制备的结合物的特性分析
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作者 吴凯 樊会兰 +6 位作者 赵志宏 周燕美 金栋 白梅 包南艳 陈瑾 李生迪 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第5期456-460,共5页
目的比较以白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)和重组铜绿假单胞菌外毒素A(recombinant Pseudomonas aeruginosa exotoxin A,r EPA)为载体蛋白,分别与伤寒Vi多糖(typhoid Vi polysaccharide,STVi)偶联的结合物的理化特性、抗原性... 目的比较以白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)和重组铜绿假单胞菌外毒素A(recombinant Pseudomonas aeruginosa exotoxin A,r EPA)为载体蛋白,分别与伤寒Vi多糖(typhoid Vi polysaccharide,STVi)偶联的结合物的理化特性、抗原性及免疫效应。方法分别以DT、r EPA为载体蛋白,以己二酰肼(adipyl dihydrazide,ADH)为连接剂,使Vi多糖与载体蛋白共价偶联制备多糖蛋白结合物STVi-DT和STVi-r EPA,检测其理化特性指标、抗原性,再将其于0、14、28 d免疫NIH小鼠,经眼眶采血,分离血清,采用间接ELISA法检测小鼠血清抗体水平,分析其免疫原性、免疫记忆效应及免疫持久性。结果 STVi-DT、STVi-r EPA理化特性指标相似。STVi-DT针对STVi、DT抗血清均具有明显抗原性,而针对r EPA抗血清无抗原性,STVi-r EPA针对STVi、r EPA抗血清均具有明显抗原性,而针对DT抗血清无抗原性。Vi多糖和Vi多糖蛋白结合物均具有动物免疫原性,STVi蛋白结合物较STVi具有更强的免疫原性,STVi-DT的动物免疫原性试验结果略优于STVi-r EPA;免疫2剂STVi-DT和STVi-r EPA后,小鼠血清GMT明显升高,且STViDT组明显高于STVi-r EPA组(P〈0.05),具有较强的免疫记忆效应;免疫STVi-DT和STVi-r EPA后,小鼠血清GMT随免疫剂次增加和时间延长持续升高,直至稳定在一定水平,免疫持久性较好。结论 STVi-DT、STVi-r EPA理化特性相似,均具有显著的免疫原性、免疫记忆效应及免疫持久性,而STVi-DT免疫原性、免疫记忆效应更强。 展开更多
关键词 伤寒Vi多糖 白喉类毒素 铜绿假单胞菌外毒素A 载体蛋白
Polarographic immunoassay coupled with catalytic amplification of labeled copper ions
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作者 宋俊峰 赵明仁 +1 位作者 过玮 王建秀 《中国科学:化学英文版》 SCIE EI CAS 1997年第6期561-567,共7页
A new approach of polarographlc immunoassay based on the catalytic amplification of the labeled metal ions and the polarographlc detection of the catalytic product was developed.In this approach,the copper ions used... A new approach of polarographlc immunoassay based on the catalytic amplification of the labeled metal ions and the polarographlc detection of the catalytic product was developed.In this approach,the copper ions used as the catalyst for substrate conversion instead of natural enzyme were labeled to model antigen diphtheria toxoid (DT) through the bifunctional chelating reagent diethylenetriamine pentaacetic acid (DTPA).After heterogeneous competitive imrnunoreaction,the oxidation of substrate o-phenylenediatnine (OPD) was catalyzed by the labeled copper ions to generate an electroactive product 2,3-diammophenazine (DAP); subsequently,the product DAP was detected with linear-sweep polarography The proposed assay can determine the concentration in the range of 10-1 000 ng/mL of DT,two orders of magnitude more sensitive than those based on the direct detection of the metal ion labels The proposed immunoassay can be applied to detecting various proteins of interest. 展开更多
关键词 DIPHTHERIA TOXOID (DT) copper CATALYTIC AMPLIFICATION IMMUNOASSAY linear-sweep POLAROGRAPHY
应用皮内多点攻毒法检测吸附精制白喉类毒素效价 预览
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作者 肖锡岭 史翠凤 姜柏涛 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1990年第2期81-84,共4页
将待检吸白类与参考标准品免疫动物后进行皮内攻毒,记录得分结果进行量反应平行线分析,其可靠性测验结果表明,剂间与回归项变异皆十分显著;偏离平行项、二次曲线、反二次曲线项以及试品间项变异皆不显著。这说明3批待检吸白类与参考标... 将待检吸白类与参考标准品免疫动物后进行皮内攻毒,记录得分结果进行量反应平行线分析,其可靠性测验结果表明,剂间与回归项变异皆十分显著;偏离平行项、二次曲线、反二次曲线项以及试品间项变异皆不显著。这说明3批待检吸白类与参考标准品的剂量反应回归,是平行直线关系。所检定的3批吸白类效价分别为55.47、56.74和47.06IU/0.5ml,皆超过了WHO规程规定的30IU/0.5 ml的水平。以上事实说明,WHO所推荐的皮内多点攻毒法检测吸白类效价,方法是可靠的和敏感的。 展开更多
关键词 吸白类效价检测 皮内攻毒法 量反应平行线分析
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