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High Concentration of Spermine Induces the Dedifferentiation of Somatic Cells into Pluripotent Stem Cells 预览
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作者 Naofumi Shiomi 《生物医学工程(英文)》 2019年第2期92-110,共19页
Cancer tissues contain cancer stem cells (CSCs), which play important roles in cancer metastasis. However, the mechanisms through which cancer cells dedifferentiate into stem cells have not yet been elucidated. In thi... Cancer tissues contain cancer stem cells (CSCs), which play important roles in cancer metastasis. However, the mechanisms through which cancer cells dedifferentiate into stem cells have not yet been elucidated. In this study, the effects of high concentrations of polyamines produced in cancer cells on dedifferentiation were examined. The results showed that when normal human fibroblasts were cultured with high concentrations of spermine, the obtained polyamine-induced cells expressed alkaline phosphatase and marker proteins of pluripotent stem cells, although apoptosis occurred in most cells. In contrast, another polyamine-induced stem (PIS) cell line (Spe-2 PIS cells), obtained by culture in medium containing Rock, p53, and Bax inhibitors plus spermine, did not show signs of apoptosis. These Spe-2 PIS cells expressed marker proteins of pluripotent stem cells and differentiated into cardiomyocytes, brown adipocytes, and nerve cells. These results suggest that a high concentration of spermine, which often induces apoptosis in normal cells, has the capacity to dedifferentiate somatic cells into pluripotent stem cells and may be associated with the dedifferentiation of cancer cells, which continuously produce high concentrations of spermine. Moreover, the procedure to obtain Spe-2 PIS cells, which is simple and efficient, may have potential applications in regenerative medicine. 展开更多
关键词 POLYAMINE SPERMINE PLURIPOTENT STEM CELLS DEDIFFERENTIATION Cancer STEM CELLS Regenerative Medicine
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乳腺癌肿瘤干细胞及表面标志物的研究进展 预览
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作者 周飞 乔娜 +3 位作者 马爽 齐天源 张静 李锐 《医学综述》 2019年第20期4014-4018,共5页
在女性恶性肿瘤中乳腺癌的发病率居首位,具有发病率高、根治性差的特点。肿瘤干细胞与正常干细胞一样,具有不可控制的繁殖能力和不断自我更新完善的能力,有研究认为肿瘤干细胞在肿瘤的发生、复发以及转移中起到一定的作用,对乳腺癌肿瘤... 在女性恶性肿瘤中乳腺癌的发病率居首位,具有发病率高、根治性差的特点。肿瘤干细胞与正常干细胞一样,具有不可控制的繁殖能力和不断自我更新完善的能力,有研究认为肿瘤干细胞在肿瘤的发生、复发以及转移中起到一定的作用,对乳腺癌肿瘤干细胞及表面标志物进行研究,可以帮助人们从根本上认识乳腺癌的发病机制,并从机制入手寻求治疗的方法和预防的手段。相信随着科研的深入,针对乳腺癌肿瘤干细胞的治疗,必然会为广大乳腺癌患者带来福音。 展开更多
关键词 乳腺癌 肿瘤干细胞 乳腺癌肿瘤干细胞 表面标志物 治疗应用
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肿瘤干细胞的分离及耐双氧水模型的建立
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作者 刘庆喜 陈洪冉 +2 位作者 李惠 张同存 马文建 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1433-1438,共6页
目的从MCF-7细胞(人乳腺癌细胞)中培养、分离肿瘤干细胞(cancer stem cells,CST),并研究其对氧化性应激的敏感性。方法将MCF-7细胞在无血清悬浮成球培养基中进行成球悬浮培养,倒置相差显微镜观察细胞形态变化(以MCF-7细胞培养液培养的MC... 目的从MCF-7细胞(人乳腺癌细胞)中培养、分离肿瘤干细胞(cancer stem cells,CST),并研究其对氧化性应激的敏感性。方法将MCF-7细胞在无血清悬浮成球培养基中进行成球悬浮培养,倒置相差显微镜观察细胞形态变化(以MCF-7细胞培养液培养的MCF-7细胞作为对照)。取直径达100μm的CST细胞球(实验组)以及融合度达70%的MCF-7细胞(对照组),采用免疫细胞化学染色法检测CST标志物CD133的表达;取直径达150μm的第3代肿瘤球细胞,采用流式细胞仪检测其CD133阳性率;取直径达150μm的第2代肿瘤球细胞(实验组)以及相应代数的MCF-7细胞(对照组),采用50μmol/L H2O2损伤DNA 120 min,采用免疫细胞化学染色方法检测其DNA损伤标志物γH2AX表达。结果倒置相差显微镜观察示,MCF-7细胞最初形态以单细胞贴壁状态生长,经无血清悬浮成球培养基培养后细胞聚集生长,最后形成CST细胞球;而经MCF-7细胞培养液培养的对照MCF-7细胞呈伸展状贴壁生长,不能成球悬浮生长。荧光显微镜观察示,对照组MCF-7细胞CD133为阴性表达,而实验组肿瘤球CD133为阳性表达。流式细胞仪检测示,CST中CD133呈阳性表达,阳性率为92%。倒置荧光显微镜观察示,实验组CST肿瘤球经H2O2损伤120 min后,其γH2AX表达较对照组MCF-7细胞明显降低。结论无血清悬浮成球培养基能够从MCF-7肿瘤细胞系培养出成球生长的CST细胞,此类细胞具有很强的抗氧化损伤作用。 展开更多
关键词 肿瘤干细胞 靶向 抗癌药 乳腺癌细胞
维生素D 调控Wnt/β-catenin 信号通路抑制乳腺癌干细胞活性 预览
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作者 沙昱彤 黄家明 +5 位作者 卢珍萍 梁欢 征宗梅 杨学攀 施洪飞 朱明明 《中国癌症防治杂志》 CAS 2019年第4期297-302,共6页
目的探讨维生素D对乳腺癌干细胞活性的影响及其可能的作用机制。方法采用MTT法检测不同浓度(1 μmol/L、5 μmol/L、10 μmol/L和20 μmol/L)维生素D对乳腺癌SUM159细胞活力的影响,用无血清培养基悬浮培养富集乳腺癌干细胞CSCSUM159,分... 目的探讨维生素D对乳腺癌干细胞活性的影响及其可能的作用机制。方法采用MTT法检测不同浓度(1 μmol/L、5 μmol/L、10 μmol/L和20 μmol/L)维生素D对乳腺癌SUM159细胞活力的影响,用无血清培养基悬浮培养富集乳腺癌干细胞CSCSUM159,分析维生素D对乳腺癌干细胞活性的影响。Western blot和Real-time qPCR 分别检测乳腺癌干细胞标志物CD133、CD44、Oct-4、Nanog以及Wnt/β-catenin信号通路相关分子p-GSK-3β、β-catenin、c-Myc和cyclin-D1的表达。结果 MTT法检测结果显示,1 μmol/L、5 μmol/L、10 μmol/L和20 μmol/L维生素D均可显著抑制乳腺癌SUM159细胞的活力(P<0.01)。无血清悬浮培养可有效富集乳腺癌干细胞CSCSUM159。维生素D可使乳腺癌干细胞CSCSUM159的成球数量减少,且细胞成球大小较对照组小。Western blot和Real-time qPCR检测结果显示,维生素D干预后,乳腺癌干细胞CSCSUM159中CD133、CD44和Nanog的蛋白表达下调,Wnt/β-catenin信号通路相关分子p-GSK-3β、β-catenin和c-Myc蛋白表达及β-catenin、c-Myc和cyclin-D1 mRNA表达亦下调(P<0.05)。结论维生素D可抑制乳腺癌干细胞活性,可能与其调控Wnt/β-catenin信号通路活性有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 维生素D 肿瘤干细胞 WNT/Β-CATENIN信号通路
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miR-143在肝脏组织中的表达及调控机制 预览
5
作者 刘永庆 王成宏 童钟 《贵州医药》 CAS 2019年第8期1185-1189,共5页
目的探讨miR-143在肝癌组织中的表达及其调控机制。方法采用qRT-PCR实验用来检测肝癌组织与肝癌细胞系中的miR-143表达;慢病毒感染实验用来敲低或者过表达miR-143。流式细胞术检测CD133阳性的肿瘤干细胞比例。miRNA靶基因预测(Targetsc... 目的探讨miR-143在肝癌组织中的表达及其调控机制。方法采用qRT-PCR实验用来检测肝癌组织与肝癌细胞系中的miR-143表达;慢病毒感染实验用来敲低或者过表达miR-143。流式细胞术检测CD133阳性的肿瘤干细胞比例。miRNA靶基因预测(Targetscan)与荧光素酶报告基因实验用验证miR-143的靶基因。Westernblot实验用来检测SHP2-ERK1/2信号通路在肝癌干细胞干性维持中的作用。结果miR-143在肝癌组织与细胞系中皆呈低表达趋势(P<0.01)。敲低miR-143能够进一步促进肝癌细胞的恶性生物学行为,相反,过表达miR-143可以逆转此效应。miR-143的敲低可以显著提高肝癌细胞中干细胞的比例。这一效应是通过调控SHP2-ERK1/2信号通路来实现的。过表达miR-143可以显著降低肿瘤干细胞比例。结论miR-143通过调控SHP2-ERK1/2信号通路来调节肿瘤干细胞的比例进而调控肿瘤的恶性程度。 展开更多
关键词 肝癌 MIR-143 肿瘤干细胞 非受体蛋白酪氨酸磷酸酶11
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MicroRNA异常表达谱与前列腺癌的关系 预览
6
作者 李琦(综述) 徐佳 +1 位作者 温雪 尚晓泓(审校) 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第4期459-463,共5页
前列腺癌是男性泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤之一,其发病率日益增长,严重威胁着男性的健康。微小RNA(miRNAs)是一类由21~25个核苷酸组成的内源性、非编码单链RNA,通过与靶基因的mRNA结合发挥作用,从而调控细胞的整个代谢过程,如转移、... 前列腺癌是男性泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤之一,其发病率日益增长,严重威胁着男性的健康。微小RNA(miRNAs)是一类由21~25个核苷酸组成的内源性、非编码单链RNA,通过与靶基因的mRNA结合发挥作用,从而调控细胞的整个代谢过程,如转移、侵袭、炎性反应、细胞周期以及凋亡等。目前,miRNAs对前列腺癌等肿瘤疾病进程的调控及功能研究已成为生物医学最热门的研究领域之一。本文就miRNAs异常表达对前列腺癌所发挥作用的最新研究进展进行综合论述,为其进一步研究提供理论依据及思路。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 微小RNA 凋亡 上皮-间质转化 肿瘤干细胞
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与食管癌相关的癌症干细胞膜标志物的研究进展 预览 被引量:1
7
作者 沈绪光 师磊 曲昌发 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第1期154-157,共4页
食管癌发病率和死亡率在癌症中均位于前列。食管癌预后较差,尽管目前治疗手段不断进步,也是难治疗和治愈的恶性肿瘤之一。当前,针对食管肿瘤遗传学改变方面的研究正在逐步进行,包括分子机制、基因表达及肿瘤干细胞等的研究。本文就与食... 食管癌发病率和死亡率在癌症中均位于前列。食管癌预后较差,尽管目前治疗手段不断进步,也是难治疗和治愈的恶性肿瘤之一。当前,针对食管肿瘤遗传学改变方面的研究正在逐步进行,包括分子机制、基因表达及肿瘤干细胞等的研究。本文就与食管癌相关的癌症干细胞膜标志物的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 食管癌 癌症干细胞 基因 标志物
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食管癌干细胞的分离、培养及鉴定 预览
8
作者 杨婷 马磊 +1 位作者 蔡少青 梁宏开 《新疆医科大学学报》 CAS 2019年第4期467-471,共5页
目的以食管癌细胞株Eca109为实验材料,采用无血清法培养出球样细胞,在体外大量繁殖,运用多种方法鉴定其干细胞特性,为研究食管癌创造条件。方法在含10%小牛血清的细胞培养液中培养食管癌细胞株Eca109,传2~3代,后逐步降低细胞培养液中小... 目的以食管癌细胞株Eca109为实验材料,采用无血清法培养出球样细胞,在体外大量繁殖,运用多种方法鉴定其干细胞特性,为研究食管癌创造条件。方法在含10%小牛血清的细胞培养液中培养食管癌细胞株Eca109,传2~3代,后逐步降低细胞培养液中小牛血清的浓度,直至无血清,1周后收集悬浮生长的球样细胞,采用流式细胞仪分析细胞周期;免疫荧光法检测干细胞标记物亮氨酸丰富重复G蛋白偶联受体5重组蛋白(Lgr5)的表达;裸鼠致瘤实验检验球样细胞体内成瘤情况。结果Eca109细胞在无血清培养液中培养1周,在上清液中收集少量悬浮生长的球样细胞,进行消化、传代,得到大量悬浮生长的球样细胞。比较Eca109细胞和球样细胞的细胞周期,Eca109细胞有(28.89±6.34)%处于分裂期,(52.12±4.53)%处于分裂前期;球样细胞有(6.48±2.35)%处于分裂期,(77.19±4.52)%处于分裂前期,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。Eca109细胞Lgr5表达率为(22.67±3.62),而球样细胞中Lgr5的表达率均为100%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。裸小鼠成瘤实验发现,Eca109细胞无法在裸小鼠皮下成瘤,球样细胞只需2×10^4个即能成瘤,两者比较差异有统计学意义(P<0.05),且随着接种数目增多,瘤体体积也增大。结论逐步降低细胞培养液中小牛血清的浓度直至无血清条件,可驯化人食管癌细胞株Eca109繁殖出球样细胞,表现出肿瘤干细胞特性。 展开更多
关键词 食管癌 无血清培养 肿瘤干细胞
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Twist 在乳腺癌中的研究进展 预览
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作者 张翼 王坤 《循证医学》 2019年第5期312-317,共6页
Twist是高度保守的碱性螺旋⁃环⁃螺旋转录因子,在胚胎发育中起重要作用。Twist的表达参与乳腺癌的发生、发展、侵袭和转移。此外Twist在调节乳腺癌的血管生成、耐药以及肿瘤干细胞中也起到了重要的作用。深入研究Twist在乳腺癌侵袭和转... Twist是高度保守的碱性螺旋⁃环⁃螺旋转录因子,在胚胎发育中起重要作用。Twist的表达参与乳腺癌的发生、发展、侵袭和转移。此外Twist在调节乳腺癌的血管生成、耐药以及肿瘤干细胞中也起到了重要的作用。深入研究Twist在乳腺癌侵袭和转移中的作用机制,将有望为乳腺癌的诊断及治疗提供新的理论依据。 展开更多
关键词 乳腺癌 TWIST 上皮⁃间质转化 耐药 血管生成 肿瘤干细胞
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多柔比星通过Stat3-Oct-4/CD44途径诱导三阴性乳腺癌4T1细胞干性的产生 预览 被引量:1
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作者 钟瑾怡 成丛丛 +5 位作者 徐金媛 李雪松 张升 张宝刚 王丽华 史立宏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期360-364,共5页
目的:观察多柔比星对三阴性乳腺癌细胞干性的诱导作用并研究其作用机制。方法:用不同终浓度(0、0.05、0.1和0.5μmol/L)多柔比星培养细胞,观察细胞形态及存活情况,筛选出最适多柔比星浓度(0.1μmol/L)用于后续实验。小鼠乳腺癌4T1细胞... 目的:观察多柔比星对三阴性乳腺癌细胞干性的诱导作用并研究其作用机制。方法:用不同终浓度(0、0.05、0.1和0.5μmol/L)多柔比星培养细胞,观察细胞形态及存活情况,筛选出最适多柔比星浓度(0.1μmol/L)用于后续实验。小鼠乳腺癌4T1细胞和人乳腺癌MDA-MB-468细胞经多柔比星(0.1μmol/L)持续刺激4周后分别命名为4T1-DOX和MDA-MB-468-DOX细胞。通过成球实验观察细胞的干性,免疫荧光检测CD133的表达,流式细胞术检测CD44的表达,Western blot检测Stat3、p-Stat3和Oct-4的表达。结果:成球实验发现4T1-DOX细胞成球能力较4T1细胞显著增强,MDA-MB-468-DOX细胞成球能力较MDA-MB-468细胞也显著增强(P<0.05);免疫荧光结果显示CD133在4T1-DOX细胞的表达比4T1细胞明显增高(P<0.05);流式细胞术结果表明CD44在4T1-DOX中表达较4T1细胞显著增高(P<0.05);Western blot结果显示Oct-4及p-Stat3在4T1-DOX细胞中的蛋白水平增高(P<0.05),而总Stat3的表达量未见显著改变。以上结果表明在0.1μmol/L多柔比星持续诱导下4T1细胞干性特征明显增强。加入Stat3抑制剂WP1066后,CD44、Oct-4和p-Stat3的蛋白水平均下降(P<0.05)。结论:多柔比星通过激活Stat3-Oct-4信号通路,使三阴性乳腺癌细胞成球能力增强,4T1细胞干性标志物CD133及CD44表达增多,诱导乳腺癌细胞干性的产生。因此,Stat3-Oct-4通路可能成为三阴性乳腺癌治疗的新靶标。 展开更多
关键词 多柔比星 三阴性乳腺癌 肿瘤干细胞 Stat3/Oct-4信号通路
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槐耳清膏在人结肠癌HCT116细胞株中对肿瘤干细胞的作用研究
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作者 谢细琴 韩甜甜 +1 位作者 林丽珠 周京旭 《中医肿瘤学杂志》 2019年第4期49-54,48共7页
目的从人结肠癌细胞系HCT116中筛选鉴定肿瘤干细胞,观察分析其生物学特性,研究其耐药性以及了解槐耳清膏对肿瘤干细胞的抑制作用。方法通过无血清有限稀释法筛选肿瘤干细胞样克隆球,通过流式细胞术检测肿瘤干细胞标志物的阳性表达率和... 目的从人结肠癌细胞系HCT116中筛选鉴定肿瘤干细胞,观察分析其生物学特性,研究其耐药性以及了解槐耳清膏对肿瘤干细胞的抑制作用。方法通过无血清有限稀释法筛选肿瘤干细胞样克隆球,通过流式细胞术检测肿瘤干细胞标志物的阳性表达率和细胞周期,软琼脂集落形成实验以及药物干预实验来鉴定克隆球的肿瘤干性,通过CCK-8实验研究槐耳清膏对肿瘤干细胞的抑制作用。结果与HCT116细胞相比,克隆球细胞具有更高的成球率(43.2%vs 28.6%),肿瘤标志物CD133+CD44+占93.87%,处于静止期的克隆球细胞比例更高(77.18%vs 49.00%),表现出更强的耐药性;经无血清有限稀释法获得的细胞克隆球表现出明显的肿瘤干细胞特性,证明筛得的细胞即为肿瘤干细胞;槐耳清膏及氟尿嘧啶干预实验表明,肿瘤干细胞较原代细胞具有更强的耐药性,槐耳清膏对肿瘤干细胞均有抑制作用,且较氟尿嘧啶抑制作用强。结论:采用本实验方法可筛选得到肿瘤干细胞;槐耳清膏对肿瘤干细胞具有抑制作用可能更强,且不易产生耐药性。 展开更多
关键词 结肠癌 肿瘤干细胞 槐耳清膏 耐药性
胃癌循环肿瘤细胞干细胞特性的研究 预览
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作者 王宜文 李龙龙 +1 位作者 陆明 胡孔旺 《安徽医学》 2019年第1期1-4,共4页
目的通过检测胃癌循环肿瘤细胞(CTC)是否表达CD44,判断CD44^+CTC与胃癌预后关系,并探讨CD44^+CTC是否具有胃癌干细胞的某些特性。方法选择2013年8月至2015年10月就诊于安徽医科大学附属第一医院的60位胃癌患者(试验组),入院后第2天清晨... 目的通过检测胃癌循环肿瘤细胞(CTC)是否表达CD44,判断CD44^+CTC与胃癌预后关系,并探讨CD44^+CTC是否具有胃癌干细胞的某些特性。方法选择2013年8月至2015年10月就诊于安徽医科大学附属第一医院的60位胃癌患者(试验组),入院后第2天清晨抽取空腹静脉血5mL;选取同期体检中心30位健康志愿者为对照组,抽取清晨空腹静脉血5mL。采用密度梯度离心联合免疫磁性阴性富集及免疫荧光原位杂交法检测试验组和对照组CTC水平及CD44^+CTC。随访获得试验组患者术后生存情况,比较试验组CD44^-CTC患者和CD44^+CTC患者的预后。结果试验组CTC阳性率为73.3%(44/60),对照组未检测出。试验组有29例检测出CD44^+CTC,CD44^+CTC胃癌患者平均生存时间[(30.9±5.6)月]较CD44^-CTC患者[(36.8±4.6)月]短(P<0.05)。结论胃癌CTC可表达CD44,胃癌CD44^+CTC可能由于具有胃癌干细胞的某些特性而造成胃癌的不良预后。 展开更多
关键词 胃癌 循环肿瘤细胞 肿瘤干细胞 白细胞分化抗原44
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SIRT1在非小细胞肺癌TKIs获得性耐药中的调控作用 预览
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作者 李桂芳 原翔 +2 位作者 刘怡文 马名扬 孙江涛 《中国医药导报》 CAS 2019年第16期4-7,12共5页
目的分析组蛋白去乙酰化酶SIRT1在非小细胞肺癌干细胞样特性中的调控作用。方法通过流式细胞术在PC-9及PC-9-GR细胞系中检测肿瘤干细胞比例;采用CCK8法检测IC50;采用qPCR检测SIRT1 mRNA表达;采用Western blot法检测SIRT1蛋白表达;通过... 目的分析组蛋白去乙酰化酶SIRT1在非小细胞肺癌干细胞样特性中的调控作用。方法通过流式细胞术在PC-9及PC-9-GR细胞系中检测肿瘤干细胞比例;采用CCK8法检测IC50;采用qPCR检测SIRT1 mRNA表达;采用Western blot法检测SIRT1蛋白表达;通过细胞悬浮克隆成球实验检测不同组的细胞成球能力。结果成功建立了耐药细胞系PC-9-GR,PC-9-GR的IC50、ALDHbright肿瘤干细胞百分比、SIRT1蛋白表达以及SIRT1mRNA表达均高于PC-9(P <0.05);通过细胞悬浮克隆成球实验发现PC-9-GR成球能力显著高于PC-9(P <0.05),应用吉非替尼后,其成球能力较对照组差异无统计学意义(P> 0.05);应用SIRT1特异性抑制剂TV6及双药联合后,两组细胞株的成球能力均显著降低(P <0.05)。结论非小细胞肺癌-酪氨酸激酶抑制剂获得性耐药的产生与酪氨酸激酶抑制剂药物富集ALDH1+标记的肿瘤干细胞密切相关,而组蛋白去乙酰化酶SIRT1在维系这群肿瘤干细胞干性中发挥着重要作用,其抑制SIRT1对肿瘤干细胞的靶向,可能有助于延缓酪氨酸激酶抑制剂获得性耐药。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 受体酪氨酸激酶抑制剂 乙醛脱氢酶-1 SIRT1 肿瘤干细胞
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过表达Twist1促进结直肠癌SW620细胞获得多药耐药性及机制研究 预览
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作者 周隽敏 胡水清 文坤明 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期306-310,共5页
目的:探讨过表达Twist1对结直肠癌SW620细胞多药耐药性(MDR)的影响及其可能的机制。方法:利用过表达Twist1的慢病毒和阴性对照病毒转染结直肠癌SW620细胞,分别为实验组(SW620-Twist1)和对照组(SW620-NC),采用RT-qPCR和Western blot技术... 目的:探讨过表达Twist1对结直肠癌SW620细胞多药耐药性(MDR)的影响及其可能的机制。方法:利用过表达Twist1的慢病毒和阴性对照病毒转染结直肠癌SW620细胞,分别为实验组(SW620-Twist1)和对照组(SW620-NC),采用RT-qPCR和Western blot技术检测两组细胞Twist1基因及耐药基因ABCB1、ABCG2 mRNA和蛋白表达;CCK8法测定5-氟尿嘧啶(5-FU)和奥沙利铂(OXA)对两组细胞在24、48及72 h生长抑制率的影响;流式细胞仪检测两组细胞的肿瘤干细胞标记物CD133、CD44表达差异。结果:SW620-Twist1组与SW620-NC组相比,Twsit1基因mRNA和蛋白显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01),提示过表达Twist1基因的SW620细胞系构建成功;5-FU和OXA两种药物在48、72 h时对细胞的抑制率均明显降低(48 h,P<0.05;72 h,P<0.01);ABCB1、ABCG2基因mRNA及蛋白的表达量均明显升高(P<0.01);CD133及CD44表达量均显著增高(P<0.01)。结论:过表达Twist1可促进直肠癌SW620细胞耐药指标ABCB1、ABCG2表达,使肿瘤细胞获得MDR,该现象可能与促进干性获得有关。 展开更多
关键词 TWIST1 结直肠癌 多药耐药 肿瘤干细胞
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手术切除的结直肠癌组织中的肿瘤干细胞的培养及鉴定 预览
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作者 唐娜 周略 +2 位作者 成志强 邓永键 丁彦青 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期415-421,共7页
目的获得结直肠癌患者手术切除癌组织的肿瘤干细胞(CSC),培养并鉴定其干细胞特性。方法通过原代培养手术切除结直肠癌组织获得结直肠癌细胞,再通过有限稀释法和无血清培养法筛选结直肠癌CSC,软琼脂集落实验检测CSC和对照组人结直肠癌细... 目的获得结直肠癌患者手术切除癌组织的肿瘤干细胞(CSC),培养并鉴定其干细胞特性。方法通过原代培养手术切除结直肠癌组织获得结直肠癌细胞,再通过有限稀释法和无血清培养法筛选结直肠癌CSC,软琼脂集落实验检测CSC和对照组人结直肠癌细胞株SW480的增殖能力;用低数量级细胞裸鼠皮下成瘤实验,检测结直肠癌CSC和SW480的成瘤能力;并运用Western blot及免疫荧光方法,检测CSC和SW480的免疫表型。结果临床结直肠癌标本原代培养的CSC,加入血清培养可使CSC分化。软琼脂集落形成实验结果显示,原代培养的CSC克隆形成率为56.64%和54.45%,对照组人结直肠癌细胞株SW480的克隆形成率为4.41%,CSC与SW480集落形成率的差异具有统计学意义(P<0.01)。裸鼠皮下成瘤实验中,原代培养的CSC皮下注射500个细胞可形成皮下瘤,而SW480皮下注射500个细胞不形成皮下瘤。CSC表达CD133、CD44,不表达CK7;SW480细胞不表达CD133、CD44,表达CK7。结论原代培养的手术切除结直肠癌组织标本获得的肿瘤细胞,再行无血清培养可形成CSC,鉴定具有CSC的自我更新及分化能力。 展开更多
关键词 肿瘤干细胞 结直肠癌 原代培养
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类固醇激素在乳腺癌中的作用及对肿瘤干细胞的影响 预览
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作者 王宇(综述) 乔娟娟(综述) +2 位作者 张磊(综述) 刘四卫(综述) 杨树才(审校) 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2019年第5期466-470,共5页
类固醇激素尤其雌激素和孕激素在乳腺癌的发病、进展和治疗中起着重要作用。与此同时,大量的研究证实肿瘤干细胞在乳腺癌发生、进展和转移过程中也起着关键作用。在乳腺癌临床治疗中,尽管肿瘤细胞经过常规抗内分泌治疗后受到了明显的抑... 类固醇激素尤其雌激素和孕激素在乳腺癌的发病、进展和治疗中起着重要作用。与此同时,大量的研究证实肿瘤干细胞在乳腺癌发生、进展和转移过程中也起着关键作用。在乳腺癌临床治疗中,尽管肿瘤细胞经过常规抗内分泌治疗后受到了明显的抑制,但仅需少量的乳腺肿瘤干细胞(Breast cancer stem cells,BCSCs)存在,仍可维持肿瘤的再生长。以往大量的研究多集中在激素对正常乳腺发育及其与乳腺癌的相关性方面,最近,更多的研究观察激素对乳腺肿瘤干细胞活性影响,这为乳腺癌治疗和肿瘤干细胞研究开辟了新的方向。本文全面讨论类固醇激素(雌激素和孕激素)在乳腺癌中的作用及其对乳腺肿瘤干细胞的活性调节。 展开更多
关键词 乳腺癌 肿瘤干细胞 雌激素 孕激素
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印记基因IGF2在胰腺癌干细胞中的印记表达研究 预览
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作者 赵欣 刘晓亮 +1 位作者 韩薇 苏龙 《华中科技大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期149-153,共5页
目的研究印记基因IGF2在胰腺癌干细胞中的印记表达情况。方法利用流式细胞分选技术通过CD133抗体从胰腺癌细胞株ASPC分离出胰腺癌干细胞;流式细胞术检测分离前后CD133^+细胞的比例;采用无血清悬浮培养法富集胰腺癌干细胞;通过成球实验... 目的研究印记基因IGF2在胰腺癌干细胞中的印记表达情况。方法利用流式细胞分选技术通过CD133抗体从胰腺癌细胞株ASPC分离出胰腺癌干细胞;流式细胞术检测分离前后CD133^+细胞的比例;采用无血清悬浮培养法富集胰腺癌干细胞;通过成球实验、免疫荧光染色、流式细胞术测定肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)标志蛋白表达,以及通过软琼脂克隆形成实验等方法鉴定ASPC胰腺癌干细胞;以测序法分析IGF2在胰腺癌干细胞中的印记表达情况;应用qRT-PCR法研究胰腺癌干细胞中IGF2在基因水平上的表达;应用Western blot方法研究胰腺癌干细胞中IGF2在蛋白水平上的表达。结果利用流式细胞分选技术通过CD133抗体标记,从胰腺癌细胞ASPC中分离出胰腺癌干细胞,其可在干细胞培养液中成球培养,连续消化传代后仍保持与原代相同的形态特征;免疫荧光检测发现CSCs标志物CD133和乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)在胰腺癌干细胞表面持续阳性表达;软琼脂克隆形成实验显示CSCs的克隆形成能力增强;对分选前后肿瘤细胞CD133表达检测,显示超过90%的成球细胞为CD133阳性;通过测序法分析IGF2在胰腺癌干细胞中的印记表达情况,结果显示胰腺癌干细胞存在IGF2印记丢失(loss of imprinting,LOI),而与其对应的非干性肿瘤细胞(non-stem cancer cells,nSCCs)的印记状态为印记保持(maintance of imprinting,MOI);应用qRT-PCR法研究胰腺癌干细胞中IGF2在基因水平上的表达,结果显示与nSCCs相比,IGF2在CSCs中的表达明显升高;应用Western blot方法研究CSCs中IGF2在蛋白水平上的表达,结果显示与nSCCs相比,IGF2在CSCs中的表达明显升高。结论胰腺癌干细胞存在IGF2印记丢失,从而导致IGF2的高表达,IGF2印记丢失可能是胰腺癌干细胞的标志性特征之一。 展开更多
关键词 胰腺癌 肿瘤干细胞 IGF2 印记丢失
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肝癌干细胞表面标记物及靶向治疗的研究进展 预览 被引量:1
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作者 马睿玲 张秋菊 王新斌 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第8期1449-1453,共5页
肝癌是一种常常致命的恶性肿瘤,具有较高的复发率和化疗耐药性。癌症的主要恶性表现包括复发、转移和化疗耐药性,且都与肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)的存在有关。在过去的几十年中,CSCs已经在包括肝癌在内的许多肿瘤中被鉴定和... 肝癌是一种常常致命的恶性肿瘤,具有较高的复发率和化疗耐药性。癌症的主要恶性表现包括复发、转移和化疗耐药性,且都与肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)的存在有关。在过去的几十年中,CSCs已经在包括肝癌在内的许多肿瘤中被鉴定和确定。越来越多的证据揭示了许多肝癌干细胞(liver cancer stem cells,LCSCs)的生物学行为及其调控的机制。基于这些研究结果,LCSCs的根除是靶向治疗的目标之一。本综述重点介绍LCSCs表面标记物最新进展及其靶向治疗策略的发展。 展开更多
关键词 肝癌 肿瘤干细胞 靶向治疗
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miR-200c在甲状腺癌中的研究进展miR-200c在甲状腺癌中的研究进展 预览
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作者 张艳 吴晨光 《中国医药导报》 CAS 2019年第9期56-58,63共4页
miRNA是一类内源性的非编码小分子RNA,具有高度保守性,参与多种人类肿瘤的发生、发展,其中也包括甲状腺癌。与分化型甲状腺癌比较,未分化型甲状腺癌的预后较差,这可能与其有较高比例的肿瘤干细胞有关。miR-200c作为一个新发现的抑癌因子... miRNA是一类内源性的非编码小分子RNA,具有高度保守性,参与多种人类肿瘤的发生、发展,其中也包括甲状腺癌。与分化型甲状腺癌比较,未分化型甲状腺癌的预后较差,这可能与其有较高比例的肿瘤干细胞有关。miR-200c作为一个新发现的抑癌因子,可抑制甲状腺癌细胞的增殖,促进其凋亡,并可通过转化生长因子-β(TGF-β)通路、表皮生长因子受体(EGFR)通路等对上皮-间充质转化过程进行调控,而近期的研究发现,上皮-间充质转化是肿瘤干细胞形成的驱动力。因此,miR-200c可能成为难治性甲状腺癌治疗上的一个潜在靶点。本文就miR-200c在甲状腺癌的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 MIR-200C 甲状腺癌 上皮-间充质转化 肿瘤干细胞
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胃癌基础研究现状与展望 被引量:1
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作者 邹小明 朱彤 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期397-402,共6页
胃癌是死亡率极高的肿瘤之一,中国胃癌发病人数和死亡人数约占全球总数的一半。外科手术、放疗和化疗在胃癌治疗中存在着一定的局限性,无法显著提高胃癌患者的存活率。随着分子生物学、基因组学、表观遗传学等技术水平的不断发展,国内... 胃癌是死亡率极高的肿瘤之一,中国胃癌发病人数和死亡人数约占全球总数的一半。外科手术、放疗和化疗在胃癌治疗中存在着一定的局限性,无法显著提高胃癌患者的存活率。随着分子生物学、基因组学、表观遗传学等技术水平的不断发展,国内外研究人员在微小RNA(miRNA)、长链非编码RNA(lncRNA)、环状RNA(circRNA)、外泌体、肿瘤干细胞等领域取得了可喜的成就,不断推动着胃癌发生发展机制的研究以及胃癌个体化诊断治疗的发展。为此,本文对近年来胃癌基础和免疫治疗领域的现状进行总结。 展开更多
关键词 胃癌 分子生物学 表观遗传学 基因组学 体液活检 肿瘤干细胞 免疫治疗
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