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Renca细胞来源的外泌体活化髓源抑制性细胞对细胞毒性T细胞的抑制效应
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作者 徐浩语 王和西 +1 位作者 黎楠 张尧 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期923-930,共8页
目的探讨Renca细胞来源的外泌体(exosomes)活化的髓源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells, MDSCs)对肾癌抗原特异性细胞毒性T细胞(cytotoxic lymphocytes, CTLs)体外增殖和杀伤效应的抑制作用。方法超速离心法从Renca细胞无... 目的探讨Renca细胞来源的外泌体(exosomes)活化的髓源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells, MDSCs)对肾癌抗原特异性细胞毒性T细胞(cytotoxic lymphocytes, CTLs)体外增殖和杀伤效应的抑制作用。方法超速离心法从Renca细胞无血清上清液中提取出exosomes,流式细胞术检测exosomes对MDSCs的活化效应。分离并培养小鼠树突状细胞(dendritic cells, DCs)和CD8+T细胞,制备DCs活化的肾癌抗原特异性CTLs。磁珠分选exosomes活化的MDSCs,羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFSE)荧光染色和流式细胞术检测MDSCs对CTLs增殖的抑制作用。将MDSCs、CTLs和Renca细胞体外共培养,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)释放实验检测exosomes活化的MDSCs对CTLs杀伤效应的抑制作用。结果 Renca细胞来源的exosomes有效地诱导了MDSCs的聚集,成功制备了DCs并获得了DCs诱导的肾癌抗原特异性CTLs。与exosomes活化的MDSCs共培养后的CTLs其增殖指数和杀伤率明显低于与未活化的MDSCs共培养后的CTLs和单独的CTLs(P<0.05)。结论 Renca细胞来源的exosomes活化的MDSCs抑制了肾癌抗原特异性CTLs的体外增殖和杀伤效应,可能在肾癌免疫逃逸中扮演重要作用。 展开更多
关键词 Renca细胞 EXOSOMES MDSCS CTLS 抑制效应
Novel exosome-targeted T-cell-based vaccine counteracts T-cell anergy and converts CTL exhaustion in chronic infection via CD40L signaling through the mTORC1 pathway
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作者 Rong Wang Aizhang Xu +4 位作者 Xueying Zhang Jie Wu Andrew Freywald Jianqing Xu Jim Xiang 《中国免疫学杂志:英文版》 SCIE CAS CSCD 2017年第6期529-545,共17页
CD8 <sup>+</sup> 细胞毒素的 T 淋巴细胞(CTL ) 疲劳是为在长期的传染疾病的无效病毒消除的一个主要问题。我们产生了新奇 ovalbumin (卵) 特定的 OVA-Texo 和导致治疗学的免疫的 HIV 特定的 Gag-Texo 疫苗。在长期的感染... CD8 <sup>+</sup> 细胞毒素的 T 淋巴细胞(CTL ) 疲劳是为在长期的传染疾病的无效病毒消除的一个主要问题。我们产生了新奇 ovalbumin (卵) 特定的 OVA-Texo 和导致治疗学的免疫的 HIV 特定的 Gag-Texo 疫苗。在长期的感染估计他们的治疗学的效果,我们由与表示卵的侵入人体气管粘膜的病菌 AdVova 感染 C57BL/6 老鼠的 i.v 开发了一个新长期的感染模型。在长期的 AdVova 感染期间,老鼠 CTL 被发现房间死亡 protein-1 (PD-1 ) 和淋巴细胞激活 gene-3 (LAG-3 ) 到禁止的分子规划了的快车,证明在 T 房间增长, IFN- 生产和 cytolytic 的重要缺乏完成机能上地精疲力尽并且。天真的 CD8 <sup>+</sup> T 房间 upregulated 禁止的 PD-ligand 1 (PD-L1 ) , B 淋巴细胞和 T 淋巴细胞衰减器和 T 房间联系变应力缺乏的分子(圣盘和痒) 当时下面调整在在有长期的感染的老鼠的刺激之上的 proliferative 反应。显著地, OVA-Texo 疫苗抵抗了 T 房间变应力缺乏并且变换了 CTL 疲劳。后者与(i) 被联系为 CTL 功能的一个标记的 upregulation, diacetylated histone-H3 (diAcH3 ) ,(ii ) CTL,宿主 DC 的发生独立人士或 CD4 <sup>+</sup> T 细胞的四折的增加,并且(iii ) CTL IFN- 生产和 cytotoxicity 的恢复。在 vivo OVA-Texo-stimulated CTL upregulated mTORC1 的活动小径相关的分子 Akt, S6, eIF4E 和 T 赌注,和有一个 mTORC1 禁止者的 CTL 的处理, rapamycin,显著地在 CTL 减少了 OVA-Texo-induced 增加。有趣地,发信号的 OVA-Texo-mediated CD40L 在观察免疫学的效果起了一个关键作用。重要地, Gag-Texo 疫苗在长期的感染导致了作呕特定的治疗学的免疫。因此,这研究应该为人的免疫不全在新治疗学的疫苗的发展有严肃的影响病毒(HIV-1 ) 感染。 展开更多
关键词 CD40L CTLS 慢性感染 信号通路 T细胞 细胞毒性T淋巴细胞 疫苗 衰竭
猪免疫口蹄疫灭活疫苗后外周血细胞亚群变化的研究 预览 被引量:1
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作者 张柳 冯霞 +3 位作者 靳野 祁淑芸 张晓霞 马军武 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第4期1012-1016,共5页
为了解动物在注射口蹄疫灭活疫苗后机体免疫状态的变化情况,本试验选取口蹄疫阴性猪进行疫苗免疫,利用流式细胞术检测方法来测定外周血中免疫细胞亚群的变化。结果显示,树突状细胞在免疫后能够快速产生应答,在24h内其含量出现明显升高;... 为了解动物在注射口蹄疫灭活疫苗后机体免疫状态的变化情况,本试验选取口蹄疫阴性猪进行疫苗免疫,利用流式细胞术检测方法来测定外周血中免疫细胞亚群的变化。结果显示,树突状细胞在免疫后能够快速产生应答,在24h内其含量出现明显升高;B细胞和Th细胞含量在免疫后第10天都出现了明显升高,且两者之间的变化存在着高度相关性,而抗体水平的变化情况与这两种细胞含量的变化也高度相关;细胞毒性T细胞含量在免疫后也出现升高。这说明灭活疫苗免疫动物后不仅可以激活机体的体液免疫应答反应,产生高水平抗体,发挥免疫保护作用,更重要的是能够在短时间内激发机体的固有免疫应答,同时能够激活细胞免疫应答,全方位发挥免疫保护作用。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 TH细胞 CTL细胞 B细胞 树突状细胞
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肿瘤溶解综合征 预览 被引量:3
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作者 杨阳 陈公琰 《肿瘤代谢与营养电子杂志》 2016年第2期88-90,共3页
肿瘤溶解综合征(tumor lysis syndrome,TLS)在20 世纪80 年代由Cohen LF 等人首先提出,是指肿瘤细胞自发或者在化疗药物的作用下短期快速溶解,使细胞内的物质及其代谢产物迅速释放入血,导致严重的代谢紊乱,临床特征主要为高钾血... 肿瘤溶解综合征(tumor lysis syndrome,TLS)在20 世纪80 年代由Cohen LF 等人首先提出,是指肿瘤细胞自发或者在化疗药物的作用下短期快速溶解,使细胞内的物质及其代谢产物迅速释放入血,导致严重的代谢紊乱,临床特征主要为高钾血症,高尿酸血症、高磷血症、低钙血症和心律失常及急性肾衰竭[1-4]。TLS 在血液系统的恶性肿瘤中较常见,如B 细胞型急性淋巴母细胞白血病(acutelymphoblastic leukemia,ALL)及Burkitt 淋巴瘤,在实体瘤中偶可发生于小细胞肺癌,晚期乳腺癌等。TLS 分为临床型肿瘤溶解综合征(clinical tumor lysissyndrome, CTLS)及实验室型肿瘤溶解综合征(laboratorytumor lysis syndrome, LTLS)两种类型。 展开更多
关键词 肿瘤溶解综合征 急性淋巴母细胞白血病 BURKITT CTLS 高钾血症 COHEN 高尿酸血症 急性肾衰竭
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基于压缩感知的分布式MIMO成像雷达网格失配问题研究 预览 被引量:1
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作者 张海龙 陆广华 +1 位作者 于慧 王东进 《现代雷达》 CSCD 北大核心 2015年第12期49-53,共5页
在基于压缩感知的分布式多输入多输出( MIMO)成像雷达系统中,若成像目标不在事先划分的网格点上,即存在网格失配( Off-Grid)偏差时,成像结果将急剧恶化,文中针对该问题,分别在Off-Grid偏差一阶和二阶近似下提出了行之有效的解决方... 在基于压缩感知的分布式多输入多输出( MIMO)成像雷达系统中,若成像目标不在事先划分的网格点上,即存在网格失配( Off-Grid)偏差时,成像结果将急剧恶化,文中针对该问题,分别在Off-Grid偏差一阶和二阶近似下提出了行之有效的解决方法. 文中首先建立了系统存在Off-Grid偏差时的回波模型,在理想划分网格点的基础上,将Off-Grid偏差看作未知数,分别进行一阶和二阶Taylor展开,建立扰动模型,分析Off-Grid偏差对成像结果的影响,最后给出了一种采用欠定系统局灶解法( FOCUSS)和约束总体最小二乘( CTLS)方法联合估计目标位置和散射系数的算法. 与传统的基于压缩感知的成像方法相比,文中所提出的算法能够很好地解决网格失配问题,提高目标的反演精度. 计算机仿真结果验证了所提方法的有效性. 展开更多
关键词 分布式多输入多输出雷达 压缩感知 网格失配 欠定系统局灶解法 约束总体最小二乘
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加 IL-15 和 IL-21 的人工的介绍抗原的房间高效地导致黑瘤特定的细胞毒素的 CD8+CD28+ T 淋巴细胞回答
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作者 Xia Yu Jian He +11 位作者 Sodaly Mongkhoune Yi Peng Yuan Xie Jing Su Su-Fang Zhou Xiao-Xun Xie Guo-Rong Luo Yuan Fang Xi Li Nuo Zhou Yong-Xiang Zhao Xiao-Ling Lu 《亚太热带医药杂志:英文版》 SCIE 2013年第6期467-472,共6页
【正】Objective:To develop a novel artificial antigen-presenting system for efficiently inducing melanoma-specific CD8<sup>+</sup>CD28<sup>+</sup> cytotoxic T lymphocyte(CTL) responses.Metho... 【正】Objective:To develop a novel artificial antigen-presenting system for efficiently inducing melanoma-specific CD8<sup>+</sup>CD28<sup>+</sup> cytotoxic T lymphocyte(CTL) responses.Methods:Cell-sized Dynabeads? M-450 Epoxy beads coated with H-2K<sup>b</sup>:Ig-TRP2<sub>(</sub>1811<sub>1</sub>1K<sub> </sub>and anti-CD28 antibody were used as artificial antigen-presenting cells(aAPCs) lo induce melanoma-specific CD8*CD28’ CTL responses with the help of IL-2I and IL-I5.Dimer staining,proliferation,ELISPOT,and cytotoxicity experiments were conducted to evaluate the frequency and activity of induced CTLs.Results:Dimer staining demonstrated that the new artificial antigen-presenting system efficiently induced melanoma TRP2-specific CD8CD28' CTLs.Proliferation and ELISPOT assays indicated that the induced CTLs rapidly proliferate and produce increased IFN- y under the slimulalion of H-2K:Ig-TRP2-aAPCs,TL-15,and IL-21.In addition,cytoloxicily experiments showed lhat induced CTLs have specific killing activity of target cells.Conclusions:The new artificial antigen-presenting system including aAPCs plus IL-21 and IL-15 can induce a large number of antigen-specific CD8<sup>+</sup>CD28<sup>+</sup> CTLs against the melanoma.Our study provides evidence for a novel adoptive immunotherapy against tumors. 展开更多
关键词 IL-21 IL-15 Artificial antigen-presenting TRP2-specific CD8~+CD28~+ CTLS
A novel T cell-based vaccine capable of stimulating long-term functional CTL memory against B 16 melanoma via CD40L signaling
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作者 Yufeng Xie Lu Wang +3 位作者 Andrew Freywald Mabood Qureshi Yue Chen Jim Xiang 《中国免疫学杂志:英文版》 SCIE CAS CSCD 2013年第1期72-77,共6页
antitumor 疫苗的最终的目标是开发记忆 CD8 <sup>&#x0002B;</sup> 细胞毒素的 T 淋巴细胞(CTL ) ,它是 antitumor 免疫的批评调停人。我们以前证明 ovalbumin (卵) 特定的 CD4 <sup>&#x0002B;</sup>... antitumor 疫苗的最终的目标是开发记忆 CD8 <sup>&#x0002B;</sup> 细胞毒素的 T 淋巴细胞(CTL ) ,它是 antitumor 免疫的批评调停人。我们以前证明 ovalbumin (卵) 特定的 CD4 <sup>&#x0002B;</sup> T 基于房间(OVA-T <sub > 用搏动卵的树枝状的房间产生的 EXO </sub>) 疫苗(DC <sub > 卵 </sub>)-released exosomes (EXO <sub > 卵 </sub>) 经由 IL-2 和 costimulatory CD80 发信号刺激 CTL 回答。估计另外的 costimulatory 小径的潜在的参与并且为存储器 CTL 开发定义 costimulation 的关键成分,我们首先使免疫野类型(WT ) 有 WT CD4 <sup>&#x0002B;</sup> OVA-T <sub 的 C57BL/6 和基因大美人鼠标 > EXO </sub> 房间或 OVA-T <sub > 有各种各样的分子的缺乏的 EXO </sub> 房间。我们然后估计了卵特定主要并且召回 CTL 回答使用 PE-H-2K <sup > 由流动 cytometry 染色的 b </sup>/OVA<sub>257-264</sub> tetramer 和 FITC-anti-CD8 抗体。我们也对表示卵的 B16 黑瘤房间线 BL6-10 <sub 检验了 antitumor 免疫 > 卵 </sub> 。我们表明了那 CD4 <sup>&#x0002B;</sup> OVA-T <sub > EXO </sub> 房间与 DC <sub 相比刺激了更有效的 CTL 回答 > 卵 </sub> 。由估计主要并且在与 OVA-T <sub 使免疫的老鼠的召回 CTL 回答 > EXO </sub> 或与 OVA-T <sub > 缺乏 costimulatory 分子 CD40L, 4-1BBL 或 OX40L 的 EXO </sub> ,我们证明这些 costimulatory 信号为由 OVA-T <sub 的 CTL priming 是非必需的 > EXO </sub> 。有趣地, CD40L,然而并非 4-1BBL 或 OX40L,对 BL6-10 <sub 在功能的存储器 CTL 的开发起一个关键作用 > 卵 </sub> 肿瘤。总的来说,这个工作建议能够经由 CD40L 发信号刺激长期的功能的 CTL 记忆的一支新奇 CD4 <sup>&#x0002B;</sup> T 基于房间的疫苗可以代表一条新奇、有效途径到 antitumor 种痘。 展开更多
关键词 CD40L CTLS 肿瘤疫苗 刺激信号 黑色素瘤 T细胞 基础 内存
一种基于最小化广义Rayleigh商的无源定位算法研究 预览 被引量:7
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作者 徐征 曲长文 +1 位作者 王昌海 李炳荣 《电子学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第12期2446-2450,共5页
为改善只测角尢源定位的性能,提出了一种基于最小化广义Rayleigh商的无源定位算法.该算法利用扰动观测矩阵和扰动观测向量的乘性结构,将约束总体最小二乘问题转化为最小化广义Raylejgh商问题,从而只需对一对矩阵束进行广义特征值分... 为改善只测角尢源定位的性能,提出了一种基于最小化广义Rayleigh商的无源定位算法.该算法利用扰动观测矩阵和扰动观测向量的乘性结构,将约束总体最小二乘问题转化为最小化广义Raylejgh商问题,从而只需对一对矩阵束进行广义特征值分解即可求得全局最优定位解.仿真结果表明所提算法性能稳健且计算量较小,定位收敛精度逼近克拉美罗限(CRLB),远优于最小二乘(LS)算法和总体最小二乘(TLS)算法,实用性强. 展开更多
关键词 无源定位 广义Rayleigh商 约束总体最小二乘 广义特征值分解 克拉美罗限
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CD40L刺激的DC疫苗抗结肠癌作用的体外研究 被引量:2
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作者 吴雨岗 何宋兵 +1 位作者 汪良 李德春 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期223-227,共5页
为研究CD40配体(CD40L)刺激的负载肿瘤抗原的树突状细胞(DC)活化的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对结肠癌细胞的体外杀伤作用。应用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱... 为研究CD40配体(CD40L)刺激的负载肿瘤抗原的树突状细胞(DC)活化的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对结肠癌细胞的体外杀伤作用。应用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导培养外周血DC,并对其形态、表型及功能进行鉴定。冻融法获取结肠癌细胞抗原并联合rshCD40L刺激DC,激活自体T淋巴细胞,制备特异性CTL,MTT法检测对结肠癌细胞的体外杀伤作用。ELISA法检测γ干扰素(IFNγ-)分泌情况。结果显示,外周血单个核细胞(PBMC)经细胞因子诱导后具有典型的DC形态,高表达MHCⅡ类分子(67.70%±6.22%)、CD80(63.32%±5.49%)、CD86(70.61%±6.61%)、CD40(44.30%±1.35%)、CD1a(57.65%±3.23%),具有极强的激发MLR的能力。CD40L刺激的负载结肠癌抗原DC激活的CTL表现出对结肠癌细胞的特异性杀伤作用,产生高水平的IFN-γ,且与未经CD40L刺激的DC疫苗相比有显著性差异(P〈0.05);未负载结肠癌抗原DC刺激的CTL对结肠癌细胞无杀伤作用。结果表明,应用细胞因子从人外周血中诱导出的DC负载结肠癌抗原后,激活的CTL在体外对结肠癌细胞能产生特异性杀伤作用,联合CD40L能增强其CTL的杀伤作用。 展开更多
关键词 CD40L 树突状细胞 结肠癌 细胞毒T淋巴细胞
Use of Dentritic Cells Pulsed with HLA-A2-restricted MAGE-A1 Peptide to Generate Cytotoxic T Lymphocytes against Malignant Glioma 预览
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作者 石浩军 姜晓兵 +2 位作者 付朋 周毅 卢小玲 《华中科技大学学报:医学英德文版》 SCIE CAS 2010年第5期678-682,共5页
This study developed a novel approach of targeting malignant glioma with pMAGE-A1278-286-specific cytotoxic T lymphocytes (CTLs) induced from the peripheral blood mononuclear cells of healthy donors by multiple stimu... This study developed a novel approach of targeting malignant glioma with pMAGE-A1278-286-specific cytotoxic T lymphocytes (CTLs) induced from the peripheral blood mononuclear cells of healthy donors by multiple stimulations with human leukocyte antigen (HLA)-A2-restricted pMAGE-A1278-286 peptide-pulsed dentritic cells.Cytotoxic assays were performed by the colorimetric CytoTox 96 assay to analyze cytotoxic activity of the induced CTLs against various target cells.The induced CTLs showed approximately 45% specific lysis against T2pMAGE-A1278-286 (pMAGE-A1278-286 peptide pulsed T2 cells) and U251 (HLA-A2+, MAGE-A1+) at an effector:target ratio of 40:1, and approximately 5% cytolysis against T2pHIV, A172 (HLA-A2-, MAGE-A1+), K562 and T2 cells without being pulsed with peptide at any effector:target ratio.The specific killing activity of the induced CTLs against T2pMAGE-A1278-286 and U251 was much more obvious than in any other control group (P【0.05).The cytotoxic activity against the T2pMAGE-A1278-286 and U251 was significantly eliminated by anti-HLA class Ⅰ mAb W6/32.These results suggest that pMAGE-A1278-286 epitope may serve as a surrogate tumor antigen target of specific immunotherapy for treating HLA-A2 patients with malignant glioma. 展开更多
关键词 IMMUNOTHERAPY GLIOMA MAGE-A1 CTLS
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基于无线传感器网络的TDOA-CTLS定位算法研究 被引量:3
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作者 王森 白文乐 《微电子学与计算机》 CSCD 北大核心 2010年第4期149-152,共4页
节点位置的确定是无线传感器网络的应用基础.为了提高传感器网络节点定位的精度,利用转移矩阵和观测矩阵噪声之间的关系,采用约束总体最小二乘算法求解时差定位问题.通过将定位问题转化为一个约束总体最小二乘问题,然后又将有约束问题... 节点位置的确定是无线传感器网络的应用基础.为了提高传感器网络节点定位的精度,利用转移矩阵和观测矩阵噪声之间的关系,采用约束总体最小二乘算法求解时差定位问题.通过将定位问题转化为一个约束总体最小二乘问题,然后又将有约束问题等价为无约束的问题,利用Newton算法进行迭代求解.最后计算机仿真结果验证了该算法的有效性. 展开更多
关键词 定位跟踪 约束总体最小二乘 时差定位 无线传感器网络
基于约束总体最小二乘算法的全极化散射中心参数估计 预览 被引量:1
12
作者 刘涛 黄高明 +1 位作者 王雪松 肖顺平 《电子学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第9期 1913-1918,共6页
本文以散射中心的指数衰减和模型(Damped Exponentials,DE)为基础将全极化散射中心的参数提取问题转化为全极化信息融合的约束总体最小二乘(Constrained Total Least Squares,CTLS)算法问题,据此计算出全部散射中心的距离参数和类... 本文以散射中心的指数衰减和模型(Damped Exponentials,DE)为基础将全极化散射中心的参数提取问题转化为全极化信息融合的约束总体最小二乘(Constrained Total Least Squares,CTLS)算法问题,据此计算出全部散射中心的距离参数和类型参数,然后利用最小二乘法求解全极化测量方程,得到每个散射中心的复幅度信息,从而获得每个散射中心的散射矩阵,其中散射矩阵与类型参数是密切相关的.然后分析了其中参数估计的精度问题,针对极化通道噪声方差的不同提出了相应的改进算法.最后进行了仿真,并与单极化散射中心估计参数作了对比,结果证实了该方法的有效性,为雷达极化信息与散射中心的有效融合提供了新方法. 展开更多
关键词 约束总体最小二乘(CTLS) 全极化散射中心 指数衰减和模型
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TGF-β不敏感前列腺癌特异性CTLs的制备及其抗癌作用 预览
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作者 杨阔 徐勇 +3 位作者 曹现祥 张婷 于明杰 畅继武 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期 458-463,共6页
目的:制备TGF-β不敏感前列腺癌特异性CTLs,观察其对前列腺癌的治疗作用。方法:分离前列腺癌患者外周血单个核细胞,体外诱导DCs;制备该患者前列腺癌肿瘤抗原,冲击DCs后诱导肿瘤特异性CTLs;用携带TβRⅡDNglytk基因的慢病毒感染... 目的:制备TGF-β不敏感前列腺癌特异性CTLs,观察其对前列腺癌的治疗作用。方法:分离前列腺癌患者外周血单个核细胞,体外诱导DCs;制备该患者前列腺癌肿瘤抗原,冲击DCs后诱导肿瘤特异性CTLs;用携带TβRⅡDNglytk基因的慢病毒感染肿瘤特异性CTLs;Western blotting检测TβRⅡDNglytk感染后CTLs对TGF-β的敏感性。分别以TGF-β敏感和不敏感CTLs治疗小鼠前列腺癌移植瘤,比较其疗效。结果:前列腺癌组织抗原冲击后DCs诱导的肿瘤特异性CTLs生长速度快于未冲击DCs组(P〈0.01),其活化状态标志CD25的表达显著高于对照CTLs(P〈0.01)。TβRⅡDNglytk慢病毒感染使肿瘤特异性CTLs对TGFβ敏感性减弱。TGFβ不敏感的CTLs可显著抑制荷瘤鼠前列腺癌的生长(P〈0.01)。结论:成功制备的TGF-β不敏感前列腺癌特异性CTLs对小鼠前列腺移植瘤有明显的治疗作用,为前列腺癌免疫治疗奠定了一定的实验基础。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 TGF—β 慢病毒 CTLS 树突状细胞
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前列腺酸性磷酸酶--结肠癌主动免疫治疗新靶点 预览
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作者 王毅 王芳 +5 位作者 赵宏宇 王阳 周余来 原田守 山田亮 伊东恭悟 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第18期1804-1807,共4页
目的探讨前列腺酸性磷酸酶(PAP)作为结肠癌主动免疫治疗新靶点的可能性。方法分别用RT-PCR方法和Western blot方法检测结肠癌细胞系中PAPmRNA和PAP蛋白的表达水平;免疫组织化学方法检测结肠癌肿瘤组织中的PAP蛋白的表达水平。利用PA... 目的探讨前列腺酸性磷酸酶(PAP)作为结肠癌主动免疫治疗新靶点的可能性。方法分别用RT-PCR方法和Western blot方法检测结肠癌细胞系中PAPmRNA和PAP蛋白的表达水平;免疫组织化学方法检测结肠癌肿瘤组织中的PAP蛋白的表达水平。利用PAP表位肽对结肠癌患者的PBMCs进行体外诱导,ELISA法检测PAP特异性IFN-γ分泌水平;51Cr释放法检测CTLs的细胞毒活性。结果3种结肠癌细胞(colo201,colo 205和colo 320)表达PAPmRNA和PAP蛋白,结肠癌组织中PAP呈阳性表达。从3/5个结肠癌患者的PBMCs中诱导出PAP多肽特异性CTLs,CTLs的细胞毒活性依赖于CD8+的T淋巴细胞。结论PAP可能成为结肠癌特异性免疫治疗的新靶点。 展开更多
关键词 前列腺酸性磷酸酶 结肠癌 CTLS
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DC活化淋巴细胞对自体乳腺癌细胞的杀伤作用 预览
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作者 张喜梅 周福祥 +4 位作者 吴建平 徐禹 谢丛华 陈焕朝 周云峰 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期 457-459,共3页
目的探讨负载自体抗原DC诱导的CTLs对自体乳腺癌细胞的杀伤作用。方法以负载自体癌细胞抗原的DCs体外诱导CTLs,用ELISA法检测IFN-γ和IL-12的表达水平,用LDH法检测CTL对自体癌细胞的杀伤作用。结果负载自体抗原DC组IFN-γ和1L-12的浓... 目的探讨负载自体抗原DC诱导的CTLs对自体乳腺癌细胞的杀伤作用。方法以负载自体癌细胞抗原的DCs体外诱导CTLs,用ELISA法检测IFN-γ和IL-12的表达水平,用LDH法检测CTL对自体癌细胞的杀伤作用。结果负载自体抗原DC组IFN-γ和1L-12的浓度高于未致敏DC组、抗原组及单核细胞对照组(P〈0.05),且负载抗原DC组所刺激的CTLs的杀伤作用也强于未致敏DC组、抗原组及单核细胞组(P〈0.01)及对照的MCF-7组和HT-29组(P〈0.01)。结论肿瘤裂解物致敏DC可持续刺激特异性CTLs从而可在体外杀伤乳腺癌患者的自体肿瘤细胞,说明肿瘤抗原致敏的DC疫苗对于治疗残留的和(或)对化疗耐药乳腺癌可能是适合的,因而有可能成为标准的补救措施。 展开更多
关键词 乳腺癌 树突状细胞 细胞毒性T细胞
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应用四聚体酶联免疫斑点法和细胞内细胞因子染色法检测HIV-1感染者体内特异性细胞毒性T淋巴细胞的研究 预览
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作者 褚福亮 徐东平 +2 位作者 金磊 高福 王福生 《中国艾滋病性病》 CAS 2007年第1期 7-10,41,共5页
目的应用四聚体(tetramer)、酶联免疫斑点法(ELISPOT)和细胞内细胞因子染色(ICCS)方法研究HIV-1感染者细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)的数量和功能。方法应用三种tetramer检测14例HLA-A2阳性的HIV-1感染者外周血中特异性CTLs的频率,... 目的应用四聚体(tetramer)、酶联免疫斑点法(ELISPOT)和细胞内细胞因子染色(ICCS)方法研究HIV-1感染者细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)的数量和功能。方法应用三种tetramer检测14例HLA-A2阳性的HIV-1感染者外周血中特异性CTLs的频率,同时采用SL9(SLYNTVATL)体外冲击HIV-1感染者的外周血单核细胞(PBMCs)。通过EL/SPOT和ICCS方法检测产生卜干扰素(IFN—γ)的CTLs,初步分析特异性CTLs在HIV-1感染中的作用。结果Tetramer SL9、IV9和Y19检测出的特异性CTLs占CDs^+T细胞的百分比范围分别为0.06%~3.27%,0.05%~0.57%和0.09%~0.66%;其检出阳性率分别为11/14、10/14和5/7。ELISPOT和ICCS检测的产生IFN-γ的细胞近似,但远低于tetramer检测出的病毒特异性CTLs的数量。结论Tetramer可以敏感地检测出特异性CTLs。ELISPOT和ICCS则是研究CTLs功能的重要手段。联合使用三种方法可以更准确地评价HIV-1感染者体内CTLs的特征及其临床意义。 展开更多
关键词 艾滋病病毒 细胞毒性T淋巴细胞 四聚体 酶联免疫斑点法 细胞内细胞因子染色
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树突状细胞活化的CTLs对神经胶质瘤的体外杀伤作用研究 被引量:4
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作者 孟庆海 宫安静 李洛 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2005年第7期 427-431,共5页
目的研究负载肿瘤抗原的树突状细胞(DCs)活化的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)对神经胶质瘤细胞的体外杀伤效应,探讨其用于临床治疗的可行性.方法体外原代培养胶质瘤细胞,冻融法获取胶质瘤细胞抗原,联合应用粒细胞/巨噬细胞集落刺激因... 目的研究负载肿瘤抗原的树突状细胞(DCs)活化的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)对神经胶质瘤细胞的体外杀伤效应,探讨其用于临床治疗的可行性.方法体外原代培养胶质瘤细胞,冻融法获取胶质瘤细胞抗原,联合应用粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素-4和肿瘤坏死因子-α等,对人外周血单核细胞进行体外诱导来获取DCs并负载肿瘤抗原,激活自体T淋巴细胞,制备特异性CTLs,MTT法检测对胶质瘤细胞的体外杀伤效应.结果负载胶质瘤抗原的DCs激活的CTLs对胶质瘤的杀伤作用显著高于对K562细胞的杀伤作用(P<0.01),并且杀伤活性随着效靶比的增加而增加;负载胶质瘤抗原的DCs激活的CTLs对胶质瘤的杀伤活性明显高于未经胶质瘤抗原致敏的DCs刺激的CTLs对胶质瘤的杀伤作用(P<0.01).结论联合应用细胞因子从人外周血中诱导出的DCs负载胶质瘤抗原后,激活的CTLs在体外对胶质瘤细胞能产生高效而特异的杀伤作用,为临床应用DCs瘤苗奠定基础. 展开更多
关键词 CTLS 树突状细胞活化 粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子 作用研究 特异性细胞毒性T淋巴细胞 肿瘤坏死因子-α 人外周血单核细胞 体外杀伤效应 神经胶质瘤细胞 白细胞介素-4 杀伤作用 体外原代培养 MTT法检测 K562细胞 肿瘤抗原
抗原致敏树突状细胞诱导CTLs杀伤HL-60细胞作用研究 预览 被引量:1
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作者 黄仁魏 周蓓 +4 位作者 李旭东 何易 林桂真 王东宁 林东军 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2004年第6期 351-353,共3页
目的探讨树突状细胞(DC)在体外诱导针对白血病细胞的CTLs杀伤活性.方法用IL-4和GM-CSF培养正常人外周血DC,以HL-60细胞裂解液致敏DC,再与淋巴细胞共孵育,激活T淋巴细胞,用LDH释放法测定致敏DC诱导杀伤性细胞对HL-60细胞的杀伤活性.结果... 目的探讨树突状细胞(DC)在体外诱导针对白血病细胞的CTLs杀伤活性.方法用IL-4和GM-CSF培养正常人外周血DC,以HL-60细胞裂解液致敏DC,再与淋巴细胞共孵育,激活T淋巴细胞,用LDH释放法测定致敏DC诱导杀伤性细胞对HL-60细胞的杀伤活性.结果外周血单个核细胞经体外扩增培养出可见树突状形状的DC,流式细胞仪检测细胞表面CD1α及CD86表达阳性,CD14表达阴性.混合淋巴细胞反应(MLR)观察DC刺激的异体淋巴细胞增殖明显较对照组高,两者比较有显著性差异(n=15,P<0.01).在效靶比为20∶1时,抗原致敏的DC诱导的杀伤性T细胞对HL-60细胞的杀伤率是39.9%±21.5%,直接以抗原刺激的T细胞的杀伤率是26.3%±15.6%.两组比较差异有非常显著性(n=16,P<0.001).效靶比为2∶1时,抗原致敏的DC诱导的杀伤性T细胞对靶细胞就有明显的杀伤作用,随着效靶比增加,杀伤作用增强.实验组和对照组不同效靶比杀伤率比较,差异有非常显著性(n=16,P<0.001).结论 DC在体外经HL-60细胞裂解液抗原致敏后,可诱导产生对HL-60细胞有特异性杀伤作用的效应细胞,杀伤HL-60细胞,且随效靶比的增加,杀伤力增强. 展开更多
关键词 树突状细胞 CTLS HL-60细胞
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扩展最小二乘准则的最小化算法 预览
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作者 谢逸明 李静 《导航》 2002年第1期107-117,共11页
“扩展最小二乘”(XLS)准则是一种广义的最小二乘法,通过正确的加权和均衡,XLS能够把模型误差和测量误差区分开发来。从“伪线性模型”的角度出发,我们可以得到两个使XLS准则最小化的迭代算法:其一是直接的“交替坐标”的最小化... “扩展最小二乘”(XLS)准则是一种广义的最小二乘法,通过正确的加权和均衡,XLS能够把模型误差和测量误差区分开发来。从“伪线性模型”的角度出发,我们可以得到两个使XLS准则最小化的迭代算法:其一是直接的“交替坐标”的最小化方法;另一种是现有的约束总体最小二乘(CTLS)法的扩展,这两个算法都能够采取不同的实施方案,以满足不同的应用场合时的收敛速度,计算量和精度上的不同要求,XLS准则可应用于许多常用的工程估计问题,例如,根据有噪声的输入/输出的测量来辩识存在外来噪声的自回归系统(ARX)或者是根据有噪声的测量来估计AR过程的参数。 展开更多
关键词 自回归模型 TLS 约束总体最小二乘 CTLS 结构总体最小二乘 STLS 扩展总体最小二乘 XLS 最小化算法
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γ射线诱导癌细胞凋亡致敏树突状细胞后的免疫应答 被引量:1
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作者 吴刚 顾红光 +1 位作者 韩本立 裴雪涛 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期 13-16,共4页
目的观察树突状细胞(DCs)从γ射线诱导的凋亡胆管癌细胞获取抗原后,抗肿瘤免疫应答及对胆管癌细胞的特异性免疫杀伤效果.方法用粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)加白介素-4(IL-4)从人外周血分化、诱导DCs,γ射线在体外诱导培养的人胆管... 目的观察树突状细胞(DCs)从γ射线诱导的凋亡胆管癌细胞获取抗原后,抗肿瘤免疫应答及对胆管癌细胞的特异性免疫杀伤效果.方法用粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)加白介素-4(IL-4)从人外周血分化、诱导DCs,γ射线在体外诱导培养的人胆管癌细胞凋亡,将DCs、T淋巴细胞和凋亡胆管癌细胞共培养,同时设计不同类型肿瘤细胞(坏死胆管癌细胞及培养胆管癌细胞)作对照,7 d后,分离、富集DCs、T淋巴细胞进行免疫应答及肿瘤细胞杀伤试验.结果与凋亡胆管癌细胞共培养之DCs可以有效提呈胆管癌细胞抗原,有强烈的免疫应答,刺激的细胞毒T淋巴细胞(CTLs)特异性地杀伤胆管癌细胞.结论γ射线诱导癌细胞凋亡可以致敏rhGM-CSF加rhIL-4从人外周血单核细胞诱导、扩增出的DCs并产生显著的杀伤胆管癌细胞的免疫反应,可望成为特异性免疫治疗肿瘤的一条新途径. 展开更多
关键词 Γ射线 树突状细胞 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 白细胞介素4 癌细胞凋亡 肿瘤主动特异性免疫治疗 细胞毒T淋巴细胞
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