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CD137-CD137L信号通过CaM-CaN通路调控小鼠血管平滑肌细胞NFATc1表达 预览 被引量:1
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作者 刘俊 邵晨 +4 位作者 陈蕊 仲威 李波 王中群 严金川 《江苏大学学报:医学版》 CAS 2017年第2期114-117,共4页
目的:探讨CD137-CD137L信号是否通过钙调蛋白-钙调神经磷酸酶(Calmodlin-Calcineurin,CaM-CaN)通路调控小鼠血管平滑肌细胞活化T细胞核因子c1(nuclear factor of activated T cells c1,NFATc1)的表达。方法:采用改良组织贴块法原... 目的:探讨CD137-CD137L信号是否通过钙调蛋白-钙调神经磷酸酶(Calmodlin-Calcineurin,CaM-CaN)通路调控小鼠血管平滑肌细胞活化T细胞核因子c1(nuclear factor of activated T cells c1,NFATc1)的表达。方法:采用改良组织贴块法原代培养小鼠血管平滑肌细胞。实验分两部分,第一部分细胞分组:对照组、CD137刺激组(激动型CD137抗体10μg/m L)和CD137抑制组(抑制型CD137抗体10μg/m L预孵30 min后+激动型CD137抗体10μg/m L);第2部分细胞分组:对照组、CD137刺激组(激动型CD137抗体10μg/m L)、si CaM组(si-CaM+CD137刺激组)和si CaN组(si-CaN+CD137刺激组)。分别采用蛋白质印迹和RT-PCR检测平滑肌细胞CaM、CaN及NFATc1的蛋白和mRNA表达水平。结果:(1)蛋白质印迹和RT-PCR结果显示,与对照组相比,CD137刺激组小鼠平滑肌细胞CaM、CaN及NFATc1表达明显升高(P〈0.05);与CD137刺激组相比,CD137抑制组CaM、CaN及NFATc1表达显著降低(P〈0.05)。(2)通过si-RNA技术分别沉默CaM和CaN后,与CD137刺激组相比,si CaM组CaM、CaN及NFATc1表达水平明显降低(P〈0.05);si CaN组的CaM无明显改变(P〉0.05),而CaN及NFATc1表达明显降低(P〈0.05)。结论:CD137-CD137L信号可能通过CaM-CaN通路调控NFATc1的表达。 展开更多
关键词 钙调蛋白 钙调神经磷酸酶 活化T细胞核因子c1 CD137-CD137L
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microRNA-124-2在CD137-CD137L信号通路调控小鼠血管平滑肌细胞活化T细胞核因子C1表达中的作用 被引量:2
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作者 刘阳 严金川 +3 位作者 仲威 徐良洁 梁潇 王中群 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2016年第1期13-17,共5页
目的探讨micro RNA-124-2在CD137-CD137L信号通路调控小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)活化T细胞核因子C1(NFATc1)表达中的作用。方法小鼠血管平滑肌细胞采用组织贴块法原代培养,细胞中micro RNA-124-2表达采用RT-PCR法检测;应用脂质体转... 目的探讨micro RNA-124-2在CD137-CD137L信号通路调控小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)活化T细胞核因子C1(NFATc1)表达中的作用。方法小鼠血管平滑肌细胞采用组织贴块法原代培养,细胞中micro RNA-124-2表达采用RT-PCR法检测;应用脂质体转染技术将micro RNA-124-2的模拟物(mimic)和抑制物(inhibitor)转染至小鼠VSMC内,细胞中NFATc1 m RNA及蛋白表达采用实时荧光定量PCR及Western blot方法检测;应用双荧光素酶报告检测micro RNA-124-2对NFATc1-3'UTR的作用。结果 anti-CD137特异性刺激CD137-CD137L轴后,平滑肌细胞micro RNA-124-2表达较对照组降低(0.29±0.13比1.00±0.00,P〈0.05),而anti-CD137L特异性阻断CD137-CD137L轴后,细胞中micro RNA-124-2表达较对照组增加(3.42±0.17比1.00±0.00,P〈0.05);与阴性对照组相比,升高或下调micro RNA-124-2的表达均可逆转CD137-CD137L轴对NFATc1的作用;双荧光素酶报告系统显示micro RNA-124-2对NFATc1-3'UTR有抑制作用(0.283±0.011比1.294±0.143,P〈0.001)。结论 CD137-CD137L受体-配体轴可以通过调控micro RNA-124-2进而影响NFATc1的表达。 展开更多
关键词 微小RNA CD137-CD137L 血管平滑肌细胞 活化T细胞核因子C1
Pristane诱导狼疮模型鼠共刺激分子的表达变化 被引量:1
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作者 王芳 吴俊英 +1 位作者 吴正中 张弛 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期324-330,共7页
探讨共刺激分子在Pristane诱导狼疮鼠体内的表达变化及意义。采用6~8周龄雌性BALB/c鼠单次腹腔注射0.5ml Pristane,对照组注射0.5ml PBS。通过尿蛋白试纸法检测尿蛋白含量;ELISA法检测外周血自身抗体(抗ds-DNA、南Sm/RNP)含量... 探讨共刺激分子在Pristane诱导狼疮鼠体内的表达变化及意义。采用6~8周龄雌性BALB/c鼠单次腹腔注射0.5ml Pristane,对照组注射0.5ml PBS。通过尿蛋白试纸法检测尿蛋白含量;ELISA法检测外周血自身抗体(抗ds-DNA、南Sm/RNP)含量;HE染色评估病理学损伤;流式细胞术检测小鼠外周血、脾脏淋巴细胞表面共刺激分子CD28、CD40L/D40、CDl37/CDl37I。的表达;免疫组织化学法检测小鼠组织中共刺激分子CD28、CD40L、CDl37的表达。实验结果点示:与对照组小鼠相比,模型组小鼠出现多种SLE样临床症状和体征;模型组小鼠外周血和脾脏淋巴细胞表面共刺激分jCD28,一个月时表达增高,后逐渐下降至低于正常对照组(P〈0.05);CD40三个月时表达升高,六个月时表达降低至于正常对照组(P〈0.05),而CD40I。的表达变化无统计学意义(P〉0.05);CDl37/CDl37L三个月时表达增高并维持高表达状态至处死(P〈O.05);狼疮鼠肺组织中共刺激分子CD28、CD40L和CDl37呈现高表达状态,其他组织中变化并不明显。以上结果提示,Pristane诱导狼疮鼠体内共刺激分子表达发生异常变化,可能与其疾病的发生发展有密切关系,为临床治疗系统性红斑狼疮提供了研究基础。 展开更多
关键词 狼疮鼠 共刺激分子 CD28 CD40L CD40 CDl37 CDl37l
CD137/CD137L在抗感染免疫中的作用 预览 被引量:1
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作者 江虹 《健康研究》 CAS 2012年第2期 155-157,共3页
CD137/CD137L是一种T细胞共刺激分子,近些年的研究表明它们在细菌、病毒等抗感染免疫方面起重要作用。文章就CD137/CD137L的结构和功能、以及其在抗感染性疾病的研究进展作一综述。
关键词 CD137/CD137L 抗感染免疫 细菌 病毒
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CD137/CD137L在抗病毒免疫中作用的研究进展 被引量:1
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作者 江虹 黄茵 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期 1161-1163,共3页
病毒持续感染常导致抗原特异性T细胞功能损害,病毒则可逃避免疫监视以致不能被清除。CD137/CD137L是除CD28/B7以外另一对具有多种活性的T细胞共刺激分子,在抗病毒免疫中有重要调节功能,尤其对增强和维持CD8+T细胞应答起关键作用。近年... 病毒持续感染常导致抗原特异性T细胞功能损害,病毒则可逃避免疫监视以致不能被清除。CD137/CD137L是除CD28/B7以外另一对具有多种活性的T细胞共刺激分子,在抗病毒免疫中有重要调节功能,尤其对增强和维持CD8+T细胞应答起关键作用。近年研究表明,CD137/CD137L在抗病毒免疫治疗中具有潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 CD137/CD137L 4-1BB/4-1BBL 抗病毒免疫 免疫治疗
CD137-CD137L信号通过TRAF6/JNK/AP-1通路调控小鼠血管平滑肌细胞活化T细胞核因子c1表达 被引量:2
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作者 徐源 王中群 +5 位作者 仲威 邵晨 李波 刘俊 李晓阳 严金川 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2017年第1期7-12,共6页
目的探讨CD137-CD137L信号是否通过肿瘤坏死因子受体相关因子6/c-Jun氨基末端激酶/活化蛋白1(TRAF6/JNK/AP-1)途径调控小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)活化T细胞核因子c1(NFATc1)的表达。方法采用组织块原代培养小鼠VSMC,第3-5代细胞用... 目的探讨CD137-CD137L信号是否通过肿瘤坏死因子受体相关因子6/c-Jun氨基末端激酶/活化蛋白1(TRAF6/JNK/AP-1)途径调控小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)活化T细胞核因子c1(NFATc1)的表达。方法采用组织块原代培养小鼠VSMC,第3-5代细胞用于实验。VSMC分为6组:对照组、CD137刺激组、CD137抑制组、siTRAF6干预组、siJNK干预组、siAP-1干预组。Western blot检测各组TRAF6、磷酸化JNK(p-JNK)、磷酸化AP-1(p-AP-1)、NFATc1蛋白表达水平。免疫荧光法检测各组TRAF6、p-JNK、p-AP-1、NFATc1荧光表达。结果 (1)与对照组相比,CD137刺激组(CD137-CD137L信号激活)TRAF6、p-JNK、p-AP-1、NFATc1蛋白表达水平明显升高(P〈0.05);与CD137刺激组相比,CD137抑制组(CD137-CD137L信号抑制)TRAF6、p-JNK、p-AP-1、NFATc1蛋白表达水平明显降低(P〈0.05)。(2)采用siRNA技术分别沉默TRAF6、JNK、AP-1后,与CD137刺激组相比,siTRAF6干预组TRAF6、p-JNK、p-AP-1、NFATc1表达明显减少(P〈0.05);siJNK干预组TRAF6表达无改变,而p-JNK、p-AP-1、NFATc1表达明显减少(P〈0.05);siAP-1干预组TRAF6、p-JNK表达无明显改变,而p-AP-1、NFATc1表达明显减少(P〈0.05)。(3)免疫荧光检测显示:CD137刺激组TRAF6、p-JNK、p-AP-1、NFATc1荧光表达量升高(P〈0.05);CD137抑制组TRAF6、p-JNK、p-AP-1、NFATc1荧光表达量明显降低(P〈0.05);siTRAF6干预组、siJNK干预组、siAP-1干预组TRAF6、p-JNK、p-AP-1、NFATc1荧光表达量与上述蛋白表达结果一致。结论 CD137-CD137L信号可通过TRAF6/JNK/AP-1通路影响NFATc1的表达。 展开更多
关键词 CD137-CD137L信号 肿瘤坏死因子受体相关因子6 c-Jun氨基末端激酶 活化蛋白1 活化T细胞核因子c1 血管平滑肌细胞
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