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Ligustilide protects PC12 cells from oxygen-glucose deprivation/reoxygenation-induced apoptosis via the LKB1-AMPK-mTOR signaling pathway 预览
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作者 Dan-Yang Zhao Dong-Dong Yu +1 位作者 Li Ren Guo-Rong Bi 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2020年第3期473-481,共9页
Autophagy has been shown to have a protective effect against brain damage.Ligustilide(LIG)is a bioactive substance isolated from Ligusticum chuanxiong,a traditional Chinese medicine.LIG has a neuroprotective effect;ho... Autophagy has been shown to have a protective effect against brain damage.Ligustilide(LIG)is a bioactive substance isolated from Ligusticum chuanxiong,a traditional Chinese medicine.LIG has a neuroprotective effect;however,it is unclear whether this neuroprotective effect involves autophagy.In this study,PC12 cells were treated with 1×10^-5–1×10^-9 M LIG for 0,3,12 or 24 hours,and cell proliferation was evaluated using the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium(MTS)assay.Treatment with 1×10^-6 M LIG for 3 hours had the greatest effect on cell proliferation,and was therefore used for subsequent experiments.PC12 cells were pre-treated with 1×10^-6 M LIG for 3 hours,cultured in 95%N2/5%CO2 in Dulbecco’s modified Eagle’s medium without glucose or serum for 4 hours,and then cultured normally for 16 hours,to simulate oxygen-glucose deprivation/reoxygenation(OGD/R).Cell proliferation was assessed with the MTS assay.Apoptosis was detected by flow cytometry.The expression levels of apoptosis-related proteins,Bcl-2 and Bax,autophagy-related proteins,Beclin 1 and microtubule-associated protein l light chain 3B(LC3-II),and liver kinase B1(LKB1)-5′-adenosine monophosphate-activated protein kinase(AMPK)-mammalian target of rapamycin(mTOR)signaling pathway-related proteins were assessed by western blot assay.Immunofluorescence staining was used to detect LC3-II expression.Autophagosome formation was observed by electron microscopy.LIG significantly decreased apoptosis,increased Bcl-2,Beclin 1 and LC3-II expression,decreased Bax expression,increased LC3-II immunoreactivity and the number of autophagosomes,and activated the LKB1-AMPK-mTOR signaling pathway in PC12 cells exposed to OGD/R.The addition of the autophagy inhibitor 3-methyladenine or dorsomorphin before OGD/R attenuated the activation of the LKB1-AMPK-mTOR signaling pathway in cells treated with LIG.Taken together,our findings show that LIG promotes autophagy and protects PC12 cells from apoptosis induced by 展开更多
关键词 AMPK apoptosis autophagy Bax Bcl-2 BECLIN 1 LC3-II LIGUSTILIDE mTOR PC12 cells
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HIF1α和Beclin1在成年牦牛脑组织中的表达与分布
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作者 拜占春 崔燕 +3 位作者 余四九 马俊兴 何俊峰 张倩 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1878-1884,共7页
中枢神经系统是机体各器官活动的重要调节系统,而脑作为主要部分在畜体生长及适应低氧环境过程中发挥重要作用。为了探讨成年牦牛(Bos grunniens)脑组织适应低氧过程中低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α, HIF1α)和酵母ATG... 中枢神经系统是机体各器官活动的重要调节系统,而脑作为主要部分在畜体生长及适应低氧环境过程中发挥重要作用。为了探讨成年牦牛(Bos grunniens)脑组织适应低氧过程中低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α, HIF1α)和酵母ATG6同系物Beclin1的表达及其之间的相互关系,本研究利用qRT-PCR、ELISA及免疫组织化学技术,对HIF1α和Beclin1的表达与分布进行研究。q RT-PCR和ELISA结果显示,HIF1α和Beclin1的mRNA和蛋白水平在成年牦牛海马组织最高,然后依次为大脑皮质、四叠体、延髓及小脑。免疫组织化学染色结果显示,HIF1α和Beclin1阳性产物主要分布于细胞质;在大脑皮质多集中于锥体细胞类神经元,在海马位于分子层、颗粒层及多形细胞层的神经元,在四叠体、延髓集中表达于神经元;另外,HIF1α和Beclin1在小脑浦肯野氏细胞有分布,在颗粒层和分子层有少量细胞表达。上述研究结果提示,海马和大脑皮质可能对缺氧具有易感性;HIF1α可能促进Beclin1表达,从而提高脑组织对低氧的适应能力,具体机制有待深入研究。本研究为深入探讨高原牦牛脑组织的适应性机制提供了基础资料。 展开更多
关键词 牦牛 脑组织 低氧诱导因子1α(HIF1α) BECLIN1
种植体周围炎对牙龈中组织蛋白酶B表达影响的实验研究
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作者 顾舒扬 阎旭 +5 位作者 张馨文 谢艳婷 葛鑫 赵宁宁 田思睿 赵宝红 《中国实用口腔科杂志》 CAS 2019年第4期216-221,共6页
目的组织蛋白酶B(Cathepsin B,CatB)是一种能在许多慢性炎症进展中发挥重要作用的溶酶体半胱氨酸蛋白酶,本研究旨在观察牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)感染后的人单核细胞系THP-1中和种植体周围炎患者的牙龈组织中CatB... 目的组织蛋白酶B(Cathepsin B,CatB)是一种能在许多慢性炎症进展中发挥重要作用的溶酶体半胱氨酸蛋白酶,本研究旨在观察牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)感染后的人单核细胞系THP-1中和种植体周围炎患者的牙龈组织中CatB表达量与炎症及自噬的关系。方法 P.g感染人单核细胞系THP-1细胞后,用CatB抑制剂CA-074Me处理THP-1细胞,Western blot对比CA-074Me处理前后CatB、自噬相关蛋白Beclin-1、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达情况。取志愿者正常牙龈组织和种植体周围炎患者的牙龈组织,分别制作冰冻切片后对CatB、Beclin-1和TNF-α进行免疫荧光染色,并提取蛋白采用Western blot检测CatB、Beclin-1和TNF-α在牙龈组织中的表达情况。结果经P.g感染的THP-1细胞中CatB、Beclin-1、TNF-α和IL-1β的表达量均增高,且这些指标在CatB抑制剂的作用下降低;种植体周围炎患者的牙龈组织中,CatB、Beclin-1和TNF-α的表达量均明显高于正常牙龈组织。结论 P.g感染的人单核细胞和种植体周围炎患者牙龈组织中CatB的表达增高,且这一变化与自噬及促炎因子的分泌相关。 展开更多
关键词 种植体周围炎 组织蛋白酶B CatB BECLIN-1 肿瘤坏死因子-α TNF-α 白介素-1β IL-1β
平喘颗粒对哮喘大鼠肺组织Beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白表达的影响 预览
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作者 张碧海 蒋鹏娜 《中国中医药科技》 CAS 2019年第2期176-180,共5页
目的:通过测定Beclin-1和LC3-Ⅱ的表达,探讨平喘颗粒对哮喘大鼠自噬的抑制机理。方法:随机将30只Wistar大鼠分为3组,正常组、模型组、平喘颗粒组,每组10只。在第2次致敏后第4天开始给予给与中药药液灌胃。平喘颗粒组按体质量给予平喘颗... 目的:通过测定Beclin-1和LC3-Ⅱ的表达,探讨平喘颗粒对哮喘大鼠自噬的抑制机理。方法:随机将30只Wistar大鼠分为3组,正常组、模型组、平喘颗粒组,每组10只。在第2次致敏后第4天开始给予给与中药药液灌胃。平喘颗粒组按体质量给予平喘颗粒溶液1 mL/100 g灌胃,激发阶段则每次激发前1h灌胃;正常组与模型组均予等量生理盐水灌胃。各组均于末次激发24 h后处死,取肺组织,光镜下观察肺组织的病理学改变。采用免疫组化SP法检测肺组织Beclin-1和LC3-Ⅱ的表达。结果:平喘颗粒组和模型组大鼠肺组织Beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白表达均高于正常组,差异有统计学意义(P<0.01);平喘颗粒组Beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白的表达较模型组明显受到抑制,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:平喘颗粒能减轻哮喘后的炎症反应,并且可抑制细胞自噬信号通路,从而保护肺部组织细胞,减轻哮喘发作。 展开更多
关键词 平喘颗粒 自噬 Beclin-1(BECN1基因) LC3-Ⅱ(微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ) 大鼠
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EBSS饥饿人鼻咽癌CNE-2细胞株诱导自噬的机制研究 预览
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作者 刘芮吟 吴梦鸽 +3 位作者 曾汶 张睿 李诗琴 费继敏 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第1期30-35,共6页
目的:观察饥饿状态下永生化正常鼻咽上皮NP69细胞、鼻咽癌CNE-2细胞的自噬变化及自噬与凋亡的相互作用,为Baf-A1在鼻咽癌中的应用前景提供证据。方法:EBSS溶液替代DMEM溶液在NP69和CNE-2细胞中制造体外饥饿环境,Baf-A1抑制细胞自噬。应... 目的:观察饥饿状态下永生化正常鼻咽上皮NP69细胞、鼻咽癌CNE-2细胞的自噬变化及自噬与凋亡的相互作用,为Baf-A1在鼻咽癌中的应用前景提供证据。方法:EBSS溶液替代DMEM溶液在NP69和CNE-2细胞中制造体外饥饿环境,Baf-A1抑制细胞自噬。应用Western blot及透射电镜检测细胞自噬,MTT检测细胞存活率,qRT-PCR检测mRNA表达。结果:与NP69细胞相比,EBSS制造的饥饿环境显著促进CNE-2细胞发生自噬,处理24时后出现大量细胞凋亡,100 nmol/L Baf-A1抑制细胞自噬可延缓饥饿诱导的细胞凋亡。qRT-PCR检测结果:EBSS作用下,LKB1、AMPK、ULK1、Beclin1、ATG5 mRNA水平均显著上升(P<0.05)。结论:EBSS通过LKB1/AMPK/mTOR通路显著诱导CNE-2细胞自噬的发生。 展开更多
关键词 鼻咽癌 自噬 饥饿 LC3 LKB1 BECLIN1
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N-乙酰半胱氨酸对脓毒症大鼠急性肺损伤的影响及其与自噬的关系 预览
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作者 蔡江红 杨国辉 《山东医药》 CAS 2019年第17期40-43,共4页
目的 观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脓毒症大鼠急性肺损伤的影响,并分析其与自噬的关系。方法 取24只雄性大鼠,随机分为假手术组、模型组、NAC组和3-甲基腺嘌呤(3-MA)干预组。采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备脓毒症模型,假手术组仅取出盲肠,... 目的 观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脓毒症大鼠急性肺损伤的影响,并分析其与自噬的关系。方法 取24只雄性大鼠,随机分为假手术组、模型组、NAC组和3-甲基腺嘌呤(3-MA)干预组。采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备脓毒症模型,假手术组仅取出盲肠,不结扎、穿孔。NAC组于术后1、4、8、12、16、20h分别给予NAC20mg/kg皮下注射,3-MA干预组于术后1h给予自噬抑制剂3-MA10mg/kg腹腔注射;3-MA干预组、假手术组、模型组、NAC组各时间点用等量生理盐水皮下注射。24h后测算肺组织湿/干比重(W/D)评价肺水肿程度,采用HE染色观察肺组织病理变化,ELISA法测定肺组织中TNF-α、IL-6水平,Western blotting法检测肺组织自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、Beclin-1表达,qRT-PCR法检测肺组织LC3Ⅱ、Beclin-1 mRNA表达。结果 与假手术组比较,模型组肺组织W/D增加,肺损伤评分升高,肺组织中TNF-α、IL-6表达升高,肺组织中LC3Ⅱ、Beclin-1蛋白及mRNA表达升高(P均<0.05);与模型组比较,NAC组肺组织W/D下降,肺损伤评分降低,肺组织中TNF-α、IL-6表达下降,肺组织中LC3Ⅱ、Beclin-1蛋白及mRNA表达下降(P均<0.05)。3-MA干预组上述指标与NAC组比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 NAC能够减轻脓毒症所致急性肺损伤引起的肺水肿,抑制肺组织炎症反应;其机制可能是通过抑制自噬来发挥肺保护作用。 展开更多
关键词 脓毒症 急性肺损伤 N-乙酰半胱氨酸 自噬 3-甲基腺嘌呤 微管相关蛋白1轻链3Ⅱ BECLIN-1
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右美托咪啶对重症脓毒症患者炎性因子和凋亡因子及自噬相关蛋白的影响
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作者 田香 邓德传 邓群艳 《中华实用诊断与治疗杂志》 2019年第11期1120-1123,共4页
目的探讨右美托咪啶对重症脓毒症患者肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、自噬蛋白5(autophagy protein 5,Atg5),自噬基因Beclin-1、caspase-3、caspase-8... 目的探讨右美托咪啶对重症脓毒症患者肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、自噬蛋白5(autophagy protein 5,Atg5),自噬基因Beclin-1、caspase-3、caspase-8、核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)表达的影响。方法重症脓毒症患者176例,随机分为脓毒症组和右美托咪啶组各88例,同期住院非脓毒症患者88例为对照组。右美托咪啶组在进入ICU 10min内给予负荷剂量右美托咪啶1μg/kg,之后0.2~2.5μg/(kg·h)静脉泵注;脓毒症组未应用镇静剂或止痛剂;对照组不应用任何药物。入ICU后24h采集静脉血,采用实时荧光定量PCR法检测3组TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA相对表达量;采用Western blot法检测LC3-Ⅱ、Atg5和Beclin-1蛋白表达;采用ELISA法检测caspase-3、caspase-8及NF-κB水平。结果脓毒症组、右美托咪啶组、对照组TNF-αmRNA相对表达量(2.57±0.13、1.12±0.09、0.84±0.06)、IL-1βmRNA相对表达量(3.78±0.26、1.53±0.15、1.25±0.17)和IL-6mRNA相对表达量(4.38±0.37、2.05±0.26、1.86±0.22)依次降低(P<0.05);脓毒症组、右美托咪啶组、对照组LC3-Ⅱ蛋白相对表达量(0.37±0.05、0.96±0.13、1.13±0.18)、Atg5蛋白相对表达量(1.08±0.12、3.09±0.33、3.46±0.37)和Beclin-1蛋白相对表达量(0.87±0.11、2.03±0.25、2.58±0.26)依次增高(P<0.05);脓毒症组、右美托咪啶组、对照组caspase-3(3.24±0.25、1.56±0.17、1.13±0.11)、caspase-8(3.08±0.32、1.26±0.12、0.95±0.13)和NF-κB(2.37±0.25、1.14±0.11、0.64±0.12)水平依次降低(P<0.05)。结论右美托咪啶可抑制重症脓毒症患者血清炎性因子表达,增加自噬因子表达,降低凋亡因子和NF-κB表达,可能有益于重症脓毒症的治疗。 展开更多
关键词 重症脓毒症 右美托咪啶 肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-1β 白细胞介素-6 LC3-Ⅱ Atg5 BECLIN-1 caspase-3 CASPASE-8 核因子-κB
丙炔苯丙胺对帕金森病模型大鼠结肠自噬相关蛋白Beclin1及LC3表达的影响 预览
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作者 毕树立 成小华 +1 位作者 刘昊 刘斌 《疑难病杂志》 CAS 2019年第7期723-727,共5页
目的观察丙炔苯丙胺对帕金森病(PD)模型大鼠肠功能障碍、自噬相关蛋白Beclin1及微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达的影响,探讨丙炔苯丙胺对PD肠功能障碍的治疗作用及可能机制。方法2013年1月-2017年10月唐山市开平医院与华北理工大学附属医... 目的观察丙炔苯丙胺对帕金森病(PD)模型大鼠肠功能障碍、自噬相关蛋白Beclin1及微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达的影响,探讨丙炔苯丙胺对PD肠功能障碍的治疗作用及可能机制。方法2013年1月-2017年10月唐山市开平医院与华北理工大学附属医院合作实验。选取健康SD大鼠72只按随机数字表法分为假手术组(n=24)、帕金森病模型组(模型组,n=24)、丙炔苯丙胺干预组(干预组,n=24),后2组采用颈背部皮下注射鱼藤酮制备PD模型,而后模型组大鼠每日生理盐水灌胃,干预组予丙炔苯丙胺0.5 mg/kg灌胃。分别于4 d、8 d各取大鼠12只采用免疫组化法和蛋白印迹法检测结肠Beclin1和LC3的表达水平,并测定1 h粪便排出量及含水率。结果与假手术组比较,模型组4 d、8 d结肠Beclin1、LC3阳性细胞及蛋白表达均增加,1 h粪便排出量及含水率均减少(4 d:t/P=-28.614/0.000、-28.472/0.000、-21.561/0.000、-92.225/0.000、86.986/0.000、26.175/0.000。8 d:t/P=-24.523/0.000、-15.922/0.000、-26.262/0.000、-72.051/0.000、16.288/0.000、23.270/0.000);与模型组比较,干预组4 d、8 d结肠Beclin1、LC3阳性细胞及蛋白表达均减少,1 h粪便排出量及含水率均增加(4 d:t/P=8.254/0.000、7.572/0.000、11.846/0.000、43.157/0.000、-12.137/0.000、-7.727/0.000。8 d:t/P=18.981/0.000、8.480/0.000、21.154/0.000、63.285/0.000、-21.597/0.000、-17.980/0.000);与干预4 d组比较,干预8 d组大鼠结肠Beclin1、LC3阳性细胞及蛋白表达均明显减少,1 h粪便排出量及含水率显著增加(t/P=47.432/0.000、46.778/0.000、18.048/0.000、5.801/0.002、-7.045/0.001、-4.183/0.009)。结论丙炔苯丙胺可改善PD大鼠肠功能障碍,其作用机制可能与其抑制结肠过度自噬有关。 展开更多
关键词 丙炔苯丙胺 帕金森病 结肠 自噬 BECLIN1 微管相关蛋白1轻链3 大鼠
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自噬在声动力疗法抑制C6胶质瘤细胞增殖中的作用
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作者 王来藏 李晨光 +5 位作者 谢晨 邵正凯 李建华 李俞辰 王雪峰 张伟光 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第19期3616-3620,3652,共6页
目的:探讨自噬在血卟啉单甲醚(Hematoporphyrin monomethyl ether,HMME)介导的声动力疗法(Sonodynamic therapy,SDT)抑制C6胶质瘤细胞增殖中的作用。方法:选取对数期生长的C6胶质瘤细胞并随机分为四组:对照组(未予处理)、超声组(单独超... 目的:探讨自噬在血卟啉单甲醚(Hematoporphyrin monomethyl ether,HMME)介导的声动力疗法(Sonodynamic therapy,SDT)抑制C6胶质瘤细胞增殖中的作用。方法:选取对数期生长的C6胶质瘤细胞并随机分为四组:对照组(未予处理)、超声组(单独超声照射)、HMME组(单独加入HMME)、SDT组(超声照射+HMME)。透射电镜观察SDT处理的C6胶质瘤细胞中自噬体数量的改变。应用qRT-PCR和免疫印迹分析SDT处理对C6胶质瘤细胞中的LC3、Beclin1、Bcl-2 m RNA及蛋白表达水平的影响。MTT检测C6胶质瘤细胞的活力变化。结果:透射电子显微镜显示SDT组自噬体数量较对照组明显增多。SDT组C6胶质瘤细胞中微管相关蛋白1轻链3 (Microtubule associated protein 1 light chain 3, LC3)、Beclin1 m RNA和蛋白水平高于对照组,B细胞淋巴瘤-2(B cell lymphoma-2, Bcl-2) m RNA和蛋白水平低于对照组。与对照组相比,SDT组C6胶质瘤细胞存活率从0 h至6 h逐渐下降,从12 h至72 h逐渐升高。3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)+SDT、氯喹(Chloroquine,CQ)+SDT处理后C6胶质瘤细胞存活率较SDT组明显降低。结论:SDT可能通过诱导自噬抑制C6胶质瘤细胞增殖。 展开更多
关键词 自噬 声动力疗法 C6胶质瘤细胞 微管相关蛋白1轻链3 BECLIN1
自噬相关基因Beclin1和LC3与子宫内膜异位症的研究进展 预览
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作者 孔志伟 姚婷婷 《医学综述》 2019年第21期4166-4173,共8页
子宫内膜异位症(EMs)是具有类似恶性肿瘤临床行为学特征的常见妇科良性病变,治疗较困难,复发率高。目前,EMs的发病机制尚不清楚,可能与机体自噬异常以及多种疾病的发生发展相关。自噬相关基因Beclin1和微管相关蛋白1轻链3(LC3)可对哺乳... 子宫内膜异位症(EMs)是具有类似恶性肿瘤临床行为学特征的常见妇科良性病变,治疗较困难,复发率高。目前,EMs的发病机制尚不清楚,可能与机体自噬异常以及多种疾病的发生发展相关。自噬相关基因Beclin1和微管相关蛋白1轻链3(LC3)可对哺乳动物细胞自噬的调节发挥重要作用,EMs中存在自噬异常,异位子宫内膜可能存在自噬活性改变或特定自噬基因的减少、缺失、变异以及蛋白质表达异常,但目前关于EMs中Beclin1和LC3表达的研究较少,且研究结果尚不统一。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 自噬 BECLIN1 微管相关蛋白1轻链3
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自噬相关蛋白在2型糖尿病大鼠胰腺组织中的变化 预览
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作者 杨雯雯 魏巍 张丽 《新疆医科大学学报》 CAS 2019年第6期739-742,747共5页
目的通过动物实验探讨细胞自噬与糖尿病的可能相关性。方法将6只SPF级雄性SD大鼠适应性喂养3 d,随机分成正常组和模型组;正常组喂以常规饲料,模型组给予高糖高脂饲料,喂养4周;4周后隔夜空腹给予模型组大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)30 mg/... 目的通过动物实验探讨细胞自噬与糖尿病的可能相关性。方法将6只SPF级雄性SD大鼠适应性喂养3 d,随机分成正常组和模型组;正常组喂以常规饲料,模型组给予高糖高脂饲料,喂养4周;4周后隔夜空腹给予模型组大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg,1周后再次腹腔注射30 mg/kg,正常组注射相应体积的生理盐水。模型组STZ注射4周后大鼠禁食,剪尾取血,测量空腹血糖(FBG),FBG>7.8 mmol/L为糖尿病诊断标准。模型构建成功后处死正常组和模型组,取胰腺组织采用蛋白免疫印迹法检测自噬基因微管相关蛋白1轻链3(LC3)、自噬相关蛋白7(Atg7)和自噬相关蛋白Beclin-1和P62蛋白(sequestosome-1蛋白)表达水平,采用免疫组织化学法检测LC3和Beclin-1蛋白表达量。结果与正常组相比,WB法检测提示模型组大鼠胰腺组织LC3、Atg7和Beclin-1表达量增加(t=-39.984,-39.049,-59.157,P均<0.01),P62蛋白表达水平较正常组明显降低(t=90.466,P<0.01),免疫组织化学法检测提示LC3和Beclin-1蛋白表达量均增加(t=14.561,7.342,P均<0.01)。结论细胞自噬功能的紊乱可能导致糖尿病的发生。 展开更多
关键词 糖尿病 自噬基因微管相关蛋白1轻链3(LC3) 自噬相关蛋白7(Atg7) 自噬相关蛋白Beclin-1
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Beclin-1、P62、LC3B在肺炎链球菌感染小鼠肺部中的表达变化
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作者 陈晓丽 幸宇 +3 位作者 廖礼超 张文芳 张知博 邓世雄 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期746-751,共6页
目的:探讨自噬相关蛋白Beclin-1、P62及微管相关蛋白轻链3B(microtubule-associated protein light chain 3B,LC3B)在肺炎链球菌感染小鼠肺部中的表达及意义。方法:生长至对数生长期的肺炎链球菌标准株D39用无菌PBS调节浓度为1.5×1... 目的:探讨自噬相关蛋白Beclin-1、P62及微管相关蛋白轻链3B(microtubule-associated protein light chain 3B,LC3B)在肺炎链球菌感染小鼠肺部中的表达及意义。方法:生长至对数生长期的肺炎链球菌标准株D39用无菌PBS调节浓度为1.5×109CFU/mL,采用鼻滴的方法对50只SPF级雌性Balb/c鼠(6~8周,16~20 g)进行处理,分别在感染后0、6、12、24、48 h收集Balb/c小鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)及肺组织,瑞氏-吉姆萨染色进行BALF细胞计数,HE染色观察肺组织病理学改变,Western blot检测自噬相关蛋白Beclin-1、P62、LC3B在肺组织中的表达水平,免疫荧光观察LC3B在肺组织中的表达情况。结果:HE染色显示,小鼠鼻饲肺炎链球菌后12 h及24 h后肺组织内出现大量炎症细胞浸润。BALF中总细胞数量及中性粒细胞数量于感染后6 h开始增高[(1.280±0.506)vs.(6.272±1.312),P=0.000;(0.000±0.000)vs.(3.456±1.308),P=0.000],在12 h时达到高峰[(1.280±0.506)vs.(19.456±0.997),P=0.000;(0.000±0.000)vs.(15.040±1.012),P=0.000],48 h后基本恢复正常水平[(1.280±0.506)vs.(3.520±0.933),P=0.005;(0.000±0.000)vs.(0.128±0.175),P=0.835]。Western blot结果显示:自噬相关蛋白Beclin-1于感染后6 h开始增加[(0.626±0.078)vs.(0.921±0.093),P=0.002],48 h时达到最高水平[(0.626±0.078)vs.(1.884±0.158),P=0.000];自噬相关蛋白P62于感染后6 h开始减少[(2.915±0.094)vs.(2.275±0.269),P=0.000],48 h时降低至最低水平[(2.915±0.094)vs.(1.178±0.142),P=0.000];自噬相关蛋白LC3B于感染后12 h开始升高[(0.747±0.197)vs.(1.429±0.318),P=0.006],24 h时达到高峰[(0.747±0.197)vs.(2.002±0.451),P=0.000],48 h后降低[(0.747±0.197)vs.(1.563±0.501),P=0.002]。免疫荧光显示:小鼠感染后12 h与24 h,肺组织中LC3B蛋白表达水平增加。结论:肺炎链球菌感染小鼠肺部后激活自噬的发生,且自噬在免疫调节过程中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 自噬 肺炎链球菌肺炎 BECLIN-1 P62 微管相关蛋白轻链3B
MEBT/MEBO对小鼠烧伤创面组织中K19表达的影响及作用机制 预览
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作者 李雄 彭浩 贺全勇 《中国烧伤创疡杂志》 2019年第1期24-33,共10页
目的探究烧伤创疡再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment, MEBT/MEBO)对烧伤创面组织中角蛋白19 (keratin 19, K19)表达的影响及可能的作用机制。方法选取15只健康雄性昆明小鼠,按照随机数表法随机选取... 目的探究烧伤创疡再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment, MEBT/MEBO)对烧伤创面组织中角蛋白19 (keratin 19, K19)表达的影响及可能的作用机制。方法选取15只健康雄性昆明小鼠,按照随机数表法随机选取5只作为对照组,10只建立深Ⅱ度烫伤模型后随机分为模型组与治疗组,其中治疗组小鼠创面采用湿润烧伤膏进行处理、模型组小鼠创面采用生理盐水进行处理、对照组小鼠背部脱毛后不做任何处理,1周后取皮肤或创面组织并通过免疫组织化学染色、蛋白质印迹(Western blot)及定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction, Q-PCR)等技术检测自噬相关蛋白Beclin-1、LC3及K19的表达水平。结果治疗第1-7天,治疗组小鼠创面清洁,并始终保持湿润状态,且随着治疗时间的延长逐渐呈现上皮化状态;模型组小鼠创面逐渐加深,并出现感染征象。治疗1周后,免疫组织化学染色法及Western blot法检测结果显示,3组小鼠皮肤或创面组织中Beclin-1、LC3及K19表达水平对比,治疗组>模型组>对照组,P均<0.01,差异具有统计学意义;除Western blot法检测结果显示治疗组与模型组小鼠创面组织中LC3表达水平对比,P>0.05外,其余各检测结果均显示小鼠皮肤或创面组织中Beclin-1、LC3及K19表达水平两两对比,P<0.01,差异具有统计学意义。Q-PCR技术检测结果显示,3组小鼠皮肤或创面组织中K19 mRNA表达水平对比,治疗组>模型组>对照组,P <0.01,差异具有统计学意义;3组小鼠皮肤或创面组织中K19mRNA表达水平两两对比,P均<0. 01,差异具有统计学意义。结论 MEBT/MEBO促进烧伤创面愈合可能与增加创面组织中K19的表达有关,而诱导自噬相关蛋白的高表达可能是其具体机制之一。 展开更多
关键词 烧伤创疡再生医疗技术 烧伤 创面 角蛋白19 自噬相关蛋白 LC3 Beclin-1
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头穴透刺法对急性期脑出血大鼠脑组织Beclin1和BNIP3L蛋白表达的影响 预览
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作者 邹伟 刘鹏 +2 位作者 于学平 戴晓红 于婷婷 《中国中医急症》 2019年第6期950-953,共4页
目的通过对急性期脑出血模型大鼠进行头穴透刺法干预,观察脑组织自噬蛋白Beclin1和BNIP3L的表达情况。方法选用雄性SD大鼠90只随机分为假手术组、模型组、3-MA组、针刺组、针刺+3-MA组,每组再分为6h、1d和7d3个亚组,每个亚组各6只。脑... 目的通过对急性期脑出血模型大鼠进行头穴透刺法干预,观察脑组织自噬蛋白Beclin1和BNIP3L的表达情况。方法选用雄性SD大鼠90只随机分为假手术组、模型组、3-MA组、针刺组、针刺+3-MA组,每组再分为6h、1d和7d3个亚组,每个亚组各6只。脑出血模型为自体血注入法,头穴透刺选择百会穴透曲鬓穴。造模成功后各组进行神经功能评分测定,并在各自时间点取材,采用免疫化分析法观察脑组织内Beclin1和BNIP3L的表达。结果头穴透刺法可以降低急性期脑出血模型动物的神经功能评分,并随着时间递减7d达到最低。Beclin1和BNIP3L在大鼠脑出血后6h表达开始增多,7d达高峰。针刺组各时间点阳性细胞数均比模型组高(P<0.05)。针刺组与针刺+3-MA组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论头穴透刺法能够提高Beclin1和BNIP3L蛋白的表达,促进急性期脑出血后脑组织自噬水平,减轻脑出血后的继发性损伤,达到减轻神经功能缺损的目的。 展开更多
关键词 脑出血 头针 BECLIN1 BNIP3L 大鼠
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基于Bcl-2/Beclin-1复合体探讨黄连素对脑缺血再灌注损伤大鼠模型的保护作用 预览
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作者 丁实 赵学荣 +5 位作者 李宝群 赵亮 周健 毕红东 庞冲 郭娜娜 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期651-657,共7页
目的基于B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)/Beclin-1复合体研究黄连素对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。方法 SPF级SD大鼠108只,按照随机数字表法分为假手术组(sham组)、模型组(I/R)、黄连素低、中、高剂量组(BBR-L、BBR-M、BBR-H),... 目的基于B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)/Beclin-1复合体研究黄连素对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。方法 SPF级SD大鼠108只,按照随机数字表法分为假手术组(sham组)、模型组(I/R)、黄连素低、中、高剂量组(BBR-L、BBR-M、BBR-H),尼莫地平预处理组(NMDP组),造模后对大鼠进行神经功能评分;TTC染色观察大鼠脑梗死面积;HE染色观察大鼠脑组织病理学变化;RT-PCR法检测脑组织中Bcl-2、caspase-3、Bax mRNA的表达;Western blot检测脑皮质中Bcl-2、caspase-3、Bax、Beclin-1蛋白表达水平。结果 I/R组 6、24、48 h3个时间点的神经功能评分均显著高于Sham组,24 h的神经功能评分最高;与模型组比较,BBR处理组和NMDP组24、48 h的神经功能缺损评分显著降低( P<0.05);与Sham组比较,I/R组梗死面积百分比、细胞坏死比例显著升高,与I/R组比较,BBR治疗组和NMDP组显著减少( P<0.05);与Sham组比较,I/R组Bcl-2、caspase-3、Bax mRNA和蛋白水平均显著升高;与I/R组比较,BBR治疗组和NMDP组Bcl-2 mRNA和蛋白水平均显著升高,caspase-3、Bax mRNA和蛋白水平均显著降低;与Sham组比较,I/R组Bcl-2/Bax比值显著降低;与I/R组比较,各治疗组Bcl-2/Bax比值均显著上升,且呈剂量依赖性升高;与Sham组比较,I/R组Beclin-1蛋白水平及Bcl-2/Beclin-1比值升高( P<0.05);与I/R组比较,BBR组和NMDP组Beclin-1蛋白水平显著升高( P<0.05),Bcl-2/Beclin-1比值均降低,且BBR-M组、BBR-H组、NMDP组Bcl-2/Beclin-1无显著差异。结论黄连素对大鼠脑缺血再灌注损伤具有神经保护作用,其可通过调节自噬蛋白与凋亡蛋白的水平,使自噬达到合适水平,发挥神经保护作用。 展开更多
关键词 SD大鼠 BCL-2 BECLIN-1 脑缺血再灌注
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二苯乙烯苷减轻小鼠急性脑缺血再灌注后的氧化应激损伤及其对自噬的影响 预览
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作者 张奇龙 薛威 +3 位作者 徐博涵 唐虹 江勤 董六一 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第8期1232-1236,共5页
目的 研究小鼠急性脑缺血再灌注损伤(CIRI)后二苯乙烯苷(TSG)对自噬作用的影响及其神经保护作用。方法 雄性昆明种小鼠100只,随机分为假手术组、模型组和TSG低、中、高剂量组(3、6、12 mg/kg)。采用双侧颈总动脉结扎法建立急性脑缺血再... 目的 研究小鼠急性脑缺血再灌注损伤(CIRI)后二苯乙烯苷(TSG)对自噬作用的影响及其神经保护作用。方法 雄性昆明种小鼠100只,随机分为假手术组、模型组和TSG低、中、高剂量组(3、6、12 mg/kg)。采用双侧颈总动脉结扎法建立急性脑缺血再灌注模型,缺血2 h再灌注24 h,于缺血和再灌注前尾静脉注射给药各1次。断头取脑检测脑组织含水量,采用试剂盒检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)含量,HE染色检测小鼠脑组织病理变化,蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白的表达。结果 与模型组比较,TSG组脑皮层神经元的病理性损伤较轻,神经元数量增加,形态改善,核固缩减轻;TSG中、高剂量组显著降低脑组织含水量及MDA的含量,并可显著升高血清中SOD活性(P <0. 01),TSG高剂量组亦可显著抑制自噬相关基因Atg6 (Beclin1)和微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅱ/Ⅰ)蛋白的表达(P <0. 05)。结论 TSG对小鼠急性CIRI具有很好的神经保护作用,作用机制可能与抑制CIRI中自噬激活有关。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 二苯乙烯苷 自噬 BECLIN1 LC3-Ⅱ/Ⅰ
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大麻素2型受体对癫痫持续状态大鼠海马CA1区自噬相关蛋白LC3、Beclin-1表达的影响
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作者 吴琼 袁裕钧 王华 《中国小儿急救医学》 CAS 2019年第7期486-491,共6页
目的建立癫痫持续状态(status epilepticus,SE)大鼠模型,探讨大麻素2型受体(canna-binoid receptor type 2,CB2R)对自噬相关蛋白LC3、Beclin-1 表达的影响.方法 SD大鼠随机分为4组:对照组,癫痫组( Epilepsy 组),CB2R 激动剂 JWH-133 组(... 目的建立癫痫持续状态(status epilepticus,SE)大鼠模型,探讨大麻素2型受体(canna-binoid receptor type 2,CB2R)对自噬相关蛋白LC3、Beclin-1 表达的影响.方法 SD大鼠随机分为4组:对照组,癫痫组( Epilepsy 组),CB2R 激动剂 JWH-133 组(Epilepsy +JWH-133 组),CB2R 拮抗剂AM630组(Epilepsy+AM630组).采用腹腔注射氯化锂-匹鲁卡品的方法建立SE模型.匹鲁卡品腹腔注射前1 h各组大鼠经侧脑室注射等量不同药物,对照组及Epilepsy组注射二甲基亚砜,Epilepsy+JWH-133组注射JWH-133,Epilepsy+AM630组注射AM630,在SE后24 h,观察各组大鼠癫痫症状学表现,采用HE 染色观察各组大鼠海马CA1 区神经元数量变化,应用双重免疫荧光和Western blot技术检测各组大鼠海马CA1区自噬相关蛋白LC3和Beclin-1表达的变化.结果大鼠癫痫症状学观察显示:对照组无明显癫痫发作,Epilepsy组大鼠的抽搐潜伏期为(13.50±0.61) min,抽搐强度评分为(4.33 ± 0.47)分;Epilepsy+JWH-133 组的抽搐潜伏期为( 19.33±0.42 ) min,较 Epilepsy 组明显延长( P <0.05);Epilepsy+JWH-133抽搐强度评分为(3.33 ± 0.59)分,较Epilepsy组低(P<0.05),而Epilepsy+AM630组的作用正好相反.HE染色结果显示:Epilepsy组大鼠海马CA1 区神经元数量明显减少,与Epilepsy组相比,Epilepsy+JWH-133组神经元数量明显增多(P<0.05),而Epilepsy+AM630组神经元数量明显减少(P<0.05).免疫荧光及蛋白印迹结果显示:LC3和Beclin-1主要表达在神经元,Epilepsy组大鼠各组LC3和Beclin-1的表达均比对照组升高(P<0.05),与Epilepsy组相比,Epilepsy+JWH-133组LC3和Beclin-1的表达升高更明显( P<0.05),而Epilepsy+AM630组的LC3和Beclin-1的表达降低(P<0.05).结论在SE后神经元损伤修复的早期阶段CB2R对海马神经元的自噬活动可能产生影响,暗示CB2R可能成为癫痫治疗的一个潜在靶点. 展开更多
关键词 癫痫持续状态 海马 2型大麻素受体 自噬 LC3 BECLIN-1
自噬相关蛋白在肝泡型包虫病中的表达及意义 预览
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作者 苏伟 赵明恩 +2 位作者 阳丹才让 樊海宁 王海久 《中国高原医学与生物学杂志》 CAS 2019年第3期184-188,共5页
目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian rapamycin,mTOR)、微管相关蛋白轻链3蛋白(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)及bcl-2同源结构域蛋白(bcl-2 homeodomainprotein,Beclin-1)等自噬相关蛋白在肝泡型包虫病... 目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian rapamycin,mTOR)、微管相关蛋白轻链3蛋白(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)及bcl-2同源结构域蛋白(bcl-2 homeodomainprotein,Beclin-1)等自噬相关蛋白在肝泡型包虫病组织中的表达水平,初步分析自噬与肝泡型包虫病之间的关系。方法收集肝泡型包虫病患者术后正常肝组织及边缘带样本,用免疫组织化学方法检测LC3、Beclin-1、mTOR在肝泡型包虫病边缘组织及正常肝组织的表达水平;用Tissue FAXS PLUS定量系统分析各个蛋白的表达强度。结果LC3、Beclin-1在泡型包虫病灶边缘组织表达水平高于正常肝组织(P<0.05);mTOR在泡型包虫病灶边缘肝组织中表达水平低于正常肝组织(P<0.001)。结论在肝泡型包虫病进展过程中,自噬可能参与其中。 展开更多
关键词 包虫病 自噬 LC3 BECLIN-1 MTOR
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胃癌组织中microRNA-148a-3p的表达及临床意义
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作者 张波 徐皓 池堂春 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2019年第1期86-89,93共5页
目的探究胃癌组织中microRNA-148a-3p的表达水平及其临床意义。方法随机选取行手术治疗的胃癌患者60例,采用qRT-PCR检测胃癌与癌旁组织中miR-148a-3p的表达水平,采用免疫组化检测胃癌组织中LC3与Beclin 1的表达,统计分析胃癌组织中miR-1... 目的探究胃癌组织中microRNA-148a-3p的表达水平及其临床意义。方法随机选取行手术治疗的胃癌患者60例,采用qRT-PCR检测胃癌与癌旁组织中miR-148a-3p的表达水平,采用免疫组化检测胃癌组织中LC3与Beclin 1的表达,统计分析胃癌组织中miR-148a-3p表达水平与临床病理特征及LC3、Beclin 1表达的相关性。采用脂质体法在SGC-7901细胞中转染miR-148a-3p并使用免疫荧光实验检测LC3的定位,Western blot检测LC3及Beclin1的表达量。结果胃癌组织中miR-148a-3p表达水平显著低于癌旁组织,并且与胃癌肿瘤大小、肿瘤淋巴结转移情况、临床分期具有相关性,且与LC3及Beclin 1的表达呈负相关。过表达miR-148a-3p后SGC-7901细胞中LC3荧光斑点的数量显著减少,并且LC3Ⅱ与LC3Ⅰ表达量的比值及Beclin1表达量均显著降低。结论 miR-148a-3p的低表达可能参与了胃癌的恶性演进,并且miR-148a-3p可能通过抑制细胞自噬发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 胃细胞癌 microRNA-148a-3p 自噬 BECLIN1
自噬相关蛋白Beclin-1在胃癌患者中表达意义的meta分析
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作者 武冰洁 李晓丽 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2019年第3期315-325,共11页
目的对自噬相关蛋白Beclin-1在胃癌组织中的表达及其与胃癌患者不同临床病理特征的相关性及其临床意义进行系统评价。方法计算机检索Cochrane Library、Springer Link、Web of Science、Embase、PubMed、中国知网、万方、维普等数据库... 目的对自噬相关蛋白Beclin-1在胃癌组织中的表达及其与胃癌患者不同临床病理特征的相关性及其临床意义进行系统评价。方法计算机检索Cochrane Library、Springer Link、Web of Science、Embase、PubMed、中国知网、万方、维普等数据库建库至2018年6月1日前公开发表的关于胃肿瘤组织中Beclin-1蛋白表达及其意义的研究,由2名研究者独立筛选和评价文献,提取相关数据后运用Review Manager 5.3及Stata 15.0软件进行meta分析。结果最终纳入10篇文献,共有胃癌患者1 402例。meta分析结果显示,Beclin-1蛋白表达阳性率在胃癌组织中明显低于非胃癌组织[OR=0.30,95%CI(0.13,0.72),P=0.007],其在胃癌TNM分期Ⅲ/Ⅳ期和有远处转移患者的胃癌组织中均明显低于Ⅰ/Ⅱ期者[OR=1.82,95%CI(1.03,3.20),P=0.04]和无远处转移者[OR=0.36,95%CI(0.20,0.63),P=0.000 4],其在胃癌组织中的表达与胃癌患者的性别、年龄、肿瘤大小、有无淋巴结转移、是否侵及浆膜层及肿瘤分化程度均无关(P>0.05);对存在异质性较大者进一步进行亚组分析结果显示,Beclin-1蛋白表达阳性率在有淋巴结转移、侵及浆膜层和低分化程度者的胃癌组织中均明显低于无淋巴结转移[OR=0.35,95%CI(0.22,0.57),P<0.000 1]、未侵及浆膜层组织[OR=0.56,95%CI(0.33,0.94),P=0.03]和中/高分化程度者[OR=0.29,95%CI(0.20,0.43),P<0.000 01]。结论自噬相关蛋白Beclin-1在胃癌组织中低表达且与肿瘤分期和远处转移有关,提示其可能不仅是胃癌发生的重要原因,也可能对胃癌的进展起调控作用。 展开更多
关键词 自噬 BECLIN-1 胃癌 META分析
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