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鼠疫耶尔森菌抗菌素耐药性及其研究进展
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作者 王梅 唐新元 +1 位作者 杨永海 祁芝珍 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期922-926,共5页
目前,尚没有有效的疫苗来预防鼠疫,对付它的唯一办法是使用抗生素。氨基甙类抗生素-链霉素是世界卫生组织(WHO)推荐治疗鼠疫最有效的药物,特别是对肺鼠疫的治疗。自从20世纪40年代采用链霉素进行鼠疫的临床治疗以来,国内外也陆续出现了... 目前,尚没有有效的疫苗来预防鼠疫,对付它的唯一办法是使用抗生素。氨基甙类抗生素-链霉素是世界卫生组织(WHO)推荐治疗鼠疫最有效的药物,特别是对肺鼠疫的治疗。自从20世纪40年代采用链霉素进行鼠疫的临床治疗以来,国内外也陆续出现了自然界或实验室人工诱导耐链霉素鼠疫菌株和鼠疫菌耐药现象,鼠疫耐药性引起人们的广泛关注,现将中外学者们对鼠疫菌抗菌药物及耐药情况的研究进展做以下概述。虽然我国尚未发现对链霉素等传统治疗药物具有耐受性的鼠疫菌,但是监测发现存在着对传统治疗药物敏感性下降的现象,所以鼠疫菌耐药株的监测仍是一项经常性的工作。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森菌 素耐药性 链霉素
鼠疫耶尔森菌CAF-1基因的生物信息学分析及抗原表位预测
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作者 王姝懿 赵学亮 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第10期1141-1146,共6页
目的探讨鼠疫耶尔森菌CAF-1基因的组成结构及生物学功能。方法运用ProtScale,TMHMM Server,Signal P 3.0 Server,NetPhos3.0 Server,SOPMA,Swiss-mode和DNAStar等生物信息学软件分析鼠疫耶尔森菌CAF-1基因的氨基酸序列组成、理化性质、... 目的探讨鼠疫耶尔森菌CAF-1基因的组成结构及生物学功能。方法运用ProtScale,TMHMM Server,Signal P 3.0 Server,NetPhos3.0 Server,SOPMA,Swiss-mode和DNAStar等生物信息学软件分析鼠疫耶尔森菌CAF-1基因的氨基酸序列组成、理化性质、亲疏水性、信号肽、磷酸化位点、糖基化位点、二、三级结构和B、T细胞抗原表位等。结果 CAF-1是由170个氨基酸构成的富含苏氨酸的稳定亲水蛋白,相对分子质量为17.7×10~3,理论等电点为4.83,不含跨膜区且磷酸化程度较高。二级结构中β转角和无规则卷曲为主要结构原件,分别占41.18%和32.35%。同源建模显示,GMQE和QMEAN评估分值分别为0.90和0.76。抗原表位预测显示,该蛋白含有多个B细胞优势抗原表位和7个优势CTL表位。结论生物信息学预测CAF-1基因编码蛋白为稳定分泌蛋白和外膜蛋白,含有较多的B、T细胞抗原表位,具有较好的抗原性,可作为新型疫苗的潜在候选基因。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森菌 CAF-1基因 抗原表位 生物信息学
长期低温保藏野生型鼠疫耶尔森菌噬菌体的活性观察及分析
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作者 李存香 祁芝珍 +7 位作者 赵海红 戴瑞霞 张青雯 冯建萍 徐小青 金星 吴海生 金泳 《医学动物防制》 2019年第5期464-466,共3页
目的观察长期低温保藏野生型鼠疫耶尔森菌噬菌体的活性。方法采用液体法、点滴法和双层琼脂平皿法检测不同保藏时间野生型鼠疫耶尔森菌噬菌体的效价。结果分离自四川省石渠县的3株野生型鼠疫耶尔森菌噬菌体,于1998年采用液体法检测其效... 目的观察长期低温保藏野生型鼠疫耶尔森菌噬菌体的活性。方法采用液体法、点滴法和双层琼脂平皿法检测不同保藏时间野生型鼠疫耶尔森菌噬菌体的效价。结果分离自四川省石渠县的3株野生型鼠疫耶尔森菌噬菌体,于1998年采用液体法检测其效价分别为10-4、10-4、10-9,4℃保藏10年后采用点滴法测定3株鼠疫噬菌体,发现川4和川157不完全裂解,川212完全裂解,经过20年采用双层琼脂平板法测定其效价分别为10、10、104PFU/ml。分离自青海、西藏的9株鼠疫耶尔森菌噬菌体4℃保藏了10年,尽管效价降低了1~3个梯度,但仍以104~106PFU/ml的低效价状态存活。结论野生型鼠疫耶尔森菌噬菌体以赫氏肉汤作为保护介质,密封于普通安瓿内,4℃保藏10~20年仍然具有较低的活性。该悬液保藏方法操作简便、有效且成本低廉,适合于实验室和野外鼠疫检测工作时培养和保藏鼠疫耶尔森菌噬菌体。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森菌 保藏 活性
鼠疫耶尔森菌YopJ蛋白的基因密码子优化及异源表达纯化
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作者 郭一星 杨银龙 +6 位作者 马玥 岳盈盈 宋楠楠 王玮玮 贾海红 李翠玲 李冰清 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第9期1058-1061,1080共5页
目的优化鼠疫耶尔森菌YopJ蛋白基因密码子并在大肠埃希菌中进行异源表达纯化。方法依据大肠埃希菌密码子偏好性对鼠疫耶尔森菌YopJ基因进行全基因序列优化,并设计引物。分别以密码子优化前后的鼠疫耶尔森菌YopJ蛋白的基因为模板,将包含Y... 目的优化鼠疫耶尔森菌YopJ蛋白基因密码子并在大肠埃希菌中进行异源表达纯化。方法依据大肠埃希菌密码子偏好性对鼠疫耶尔森菌YopJ基因进行全基因序列优化,并设计引物。分别以密码子优化前后的鼠疫耶尔森菌YopJ蛋白的基因为模板,将包含YopJ(22aa-288aa)和YopJ(22aa-250aa)的基因片段连接到载体pGI01中。重组质粒转化到大肠埃希菌BL21菌株中,扩大培养后,IPTG诱导目的蛋白表达。提取大肠埃希菌表达蛋白并使用镍离子柱进行纯化。结果鼠疫耶尔森菌YopJ密码子优化前YopJ(22aa-288aa)及YopJ(22aa-250aa)在大肠埃希菌内表达水平较低,密码子优化后YopJ(22aa-288aa)及YopJ(22aa-250aa)在大肠埃希菌内大量表达可溶性YopJ蛋白。结论对鼠疫耶尔森菌YopJ蛋白进行基因密码子优化能够提高其在大肠埃希菌内的表达量。获得的鼠疫耶尔森菌YopJ蛋白具有可溶性,为进一步研究其结构和功能奠定了基础。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森菌 YopJ蛋白 基因密码子优化 异源表达
单核苷酸多态性(SNP)分析在鼠疫菌基因分型中的应用 预览
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作者 孔进姣 石丽媛 王鹏 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1036-1040,共5页
鼠疫是一种人兽共患的烈性传染病,历史上曾给人类带来了巨大灾难,但是随着全基因测序的完成,我们对鼠疫有了更全面的了解,这为我们探寻引起其发生发展的因素提供了平台。本文通过对SNP分析的特征、应用条件及其在耶尔森氏鼠疫菌方面的... 鼠疫是一种人兽共患的烈性传染病,历史上曾给人类带来了巨大灾难,但是随着全基因测序的完成,我们对鼠疫有了更全面的了解,这为我们探寻引起其发生发展的因素提供了平台。本文通过对SNP分析的特征、应用条件及其在耶尔森氏鼠疫菌方面的研究进展进行综述,为今后鼠疫的暴发流行的追踪溯源研究提供相关信息,也为鼠疫的监测及防控提供理论依据。 展开更多
关键词 SNP 鼠疫耶尔森菌 基因分型
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青海省海北藏族自治州鼠疫耶尔森菌病原学分析及流行病学意义
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作者 吴海生 吴海莲 +7 位作者 杨晓艳 李存香 熊浩明 何建 李翔 徐小青 代瑞霞 张青雯 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 2019年第1期35-39,共5页
目的探讨青海省海北藏族自治州(海北州)鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)病原学特征及流行病学意义,为该地区的鼠疫防控提供科学依据。方法对1956-2011年间青海省海北州祁连、门源、海晏、刚察4县中分离的104株鼠疫菌进行生化糖醇类试验、毒力因子... 目的探讨青海省海北藏族自治州(海北州)鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)病原学特征及流行病学意义,为该地区的鼠疫防控提供科学依据。方法对1956-2011年间青海省海北州祁连、门源、海晏、刚察4县中分离的104株鼠疫菌进行生化糖醇类试验、毒力因子检测、毒力判定、质粒分析及细菌差异区段(DFR)分型等研究。结果根据生化分型指标,104株菌株中有73株为青藏高原型,25株为祁连山型,6株与青海省鼠疫自然疫源地生态型不一致,所有菌株均携带分子质量为6×10~6、45×10~6、52×10~6的质粒,74.04%(77/104)的鼠疫菌含有4个毒力因子,98.51%(66/67)的鼠疫菌为强毒株。DFR分型有6个基因组型,其中8型有75株,44型20株,5型6株,6型、7型和11型各1株。结论青海省海北州分离的鼠疫菌具备青藏高原鼠疫病原体特性,生态类型复杂,鼠疫菌毒力强,需加强该地区鼠疫的监测、防控和宣传力度。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森菌 病原学 流行病学 海北藏族自治州
河北省康保县2017年分离的3株鼠疫菌株基因分型及流行病学分析
7
作者 王海峰 周松 +4 位作者 刘合智 刘晓伟 杨顺林 杜国义 史献明 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 2019年第1期40-42,共3页
目的研究河北省康保县2017年分离的3株鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)的基因型及遗传特征。方法采取水煮法和试剂盒提取法分别对2017年在康保县分离的3株鼠疫菌提取DNA,根据文献报道,选择pMT1和22个差异区段(DFR)位点,经过PCR扩增,琼脂糖凝胶电... 目的研究河北省康保县2017年分离的3株鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)的基因型及遗传特征。方法采取水煮法和试剂盒提取法分别对2017年在康保县分离的3株鼠疫菌提取DNA,根据文献报道,选择pMT1和22个差异区段(DFR)位点,经过PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳后分析其基因型别。结果 3株鼠疫菌的目标条带为DFR02~05、DFR08~11、DFR14、DFR19~22和p MT1,均缺少DFR01、06、07、12、13和15~18,经比对其基因型为G20。结论 2017年河北省鼠疫疫源地分离的3株鼠疫菌株基因型别均为G20,不同于以往分离的G17型,新基因型的出现为进一步研究菌株的遗传特征和流行病学特征提供了依据。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森菌 流行特征 基因分型
抗鼠疫耶尔森菌F1抗原单克隆抗体对小鼠的被动免疫保护作用 预览
8
作者 吴智远 焦磊 +6 位作者 徐兵 辛有全 常娅莉 张青雯 祁芝珍 卜培英 王秉翔 《微生物学免疫学进展》 2018年第1期7-13,共7页
目的研究抗鼠疫耶尔森菌F1抗原单克隆抗体(单抗)被动免疫BALB/c小鼠后的抗鼠疫保护效果,确认鼠疫抗体治疗依据,探索鼠疫免疫学治疗的评价手段。方法将BALB/c小鼠随机分组,用不同剂量的抗鼠疫耶尔森菌F1抗原单抗4C6和2D2分别进行免疫,... 目的研究抗鼠疫耶尔森菌F1抗原单克隆抗体(单抗)被动免疫BALB/c小鼠后的抗鼠疫保护效果,确认鼠疫抗体治疗依据,探索鼠疫免疫学治疗的评价手段。方法将BALB/c小鼠随机分组,用不同剂量的抗鼠疫耶尔森菌F1抗原单抗4C6和2D2分别进行免疫,再分别用不同剂量的鼠疫强毒菌攻击,通过小鼠的存活率和存活时间,判定F1单抗免疫小鼠被动保护其抵抗鼠疫强毒菌攻击的有效性和剂量相关性。结果在14 d的观察期内,在100.0 MLD鼠疫强毒菌攻击下,4C6单抗400.0μg组、200.0μg组、100.0μg组、50.0μg组和25.0μg组小鼠的存活率分别为100%、83%、50%、50%和0%,平均存活时间分别为15.00 d、14.67 d、13.00 d、13.50 d和9.67 d;2D2单抗400.0μg组、200.0μg组、100.0μg组、50.0μg组、25.0μg组小鼠的存活率分别为83%、50%、50%、33%和0%,平均存活时间分别为14.83 d、13.33 d、12.67 d、12.33 d和8.00 d。在10.0 MLD鼠疫强毒菌攻击下,4C6单抗50.0μg组、25.0μg组和12.5μg组小鼠的存活率分别为83%、83%和17%,平均存活时间分别为14.17 d、14.50 d、9.83 d;2D2单抗50.0μg组、25.0μg组、12.5μg组小鼠的存活率分别为100%、33%和33%,平均存活时间分别为15.00 d、12.33d和11.67 d。2.0 MLD和1.0 MLD攻击的未免疫对照组小鼠全部死亡,平均存活时间分别为6.1 d和6.7 d。F1抗原单抗的免疫剂量与小鼠的平均存活时间和存活率有比较明显的相关性(P〈0.05)。结论用抗鼠疫耶尔森菌F1抗原单抗被动免疫小鼠,在受到鼠疫强毒菌攻击时,对小鼠具有免疫保护作用。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森菌 鼠疫耶尔森菌F1抗原 单克隆抗体 被动免疫保护
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一株分离自丽江野鼠疫源地鼠疫噬菌体裂解特性的研究 被引量:2
9
作者 钟佑宏 赵丹妮 +8 位作者 段存娟 张海鹏 丁奕博 谭红丽 石丽媛 钟国梁 李柳琴 李伟 王鹏 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第8期839-842,共4页
目的测定一株分离自丽江野鼠鼠疫疫源地鼠巢土的野生型鼠疫噬菌体(命名为LJ-7)的裂解谱,分析LJ-7的裂解能力及特点。方法采用双层平板法观察LJ-7对248株菌(包括10株云南鼠疫耶尔森菌、1株鼠疫疫苗株EV76、6株假结核耶尔森菌、37株致... 目的测定一株分离自丽江野鼠鼠疫疫源地鼠巢土的野生型鼠疫噬菌体(命名为LJ-7)的裂解谱,分析LJ-7的裂解能力及特点。方法采用双层平板法观察LJ-7对248株菌(包括10株云南鼠疫耶尔森菌、1株鼠疫疫苗株EV76、6株假结核耶尔森菌、37株致病小肠结肠炎耶尔森菌、17株非致病小肠结肠炎耶尔森菌、100株大肠埃希菌和77株其他菌株)在28℃、37℃及18℃3种温度时的裂解能力。结果 LJ-7对10株云南鼠疫耶尔森菌、1株鼠疫疫苗株EV76及1株弗氏志贺菌有裂解作用;对其余236株菌均不裂解。在37℃时LJ-7较鼠疫诊断噬菌体裂解性高,而在28℃时LJ-7较鼠疫诊断噬菌体裂解性低。结论 LJ-7在28℃、37℃及18℃时均能裂解鼠疫耶尔森菌,对弗氏志贺菌也有裂解性作用。表明LJ-7裂解细菌谱较宽,在不依赖鼠疫菌的情况下可由其他细菌提供营养而存在,它的发现对我国鼠疫疫源地环境微生态学和流行病学研究具有重要意义。 展开更多
关键词 野生鼠疫 鼠疫耶尔森菌 弗氏志贺 裂解谱
大肠杆菌htrA突变株构建及其在鼠疫拟菌颗粒疫苗制备中的应用
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作者 李璐 刘万兵 +4 位作者 周亚洲 纪宇欣 周冬生 杨瑞馥 王效义 《军事医学》 CSCD 北大核心 2018年第7期539-544,共6页
目的基于乳酸乳球菌和鼠疫耶尔森菌F1抗原,制备鼠疫拟菌颗粒疫苗。方法基于λ-Red一步重组技术,构建BL-21大肠杆菌htr A基因缺失突变株;将鼠疫菌F1抗原基因和PA基因克隆至p ET-28a(+)质粒中构建F1-PA融合蛋白表达载体,将此载体分别导入... 目的基于乳酸乳球菌和鼠疫耶尔森菌F1抗原,制备鼠疫拟菌颗粒疫苗。方法基于λ-Red一步重组技术,构建BL-21大肠杆菌htr A基因缺失突变株;将鼠疫菌F1抗原基因和PA基因克隆至p ET-28a(+)质粒中构建F1-PA融合蛋白表达载体,将此载体分别导入到BL-21大肠杆菌野生株和其htr A基因缺失突变株中构建F1-PA融合蛋白表达菌株;SDS-PAGE电泳分析F1-PA融合蛋白表达;镍柱亲和层析纯化包涵体蛋白,梯度稀释透析法复性F1-PA融合蛋白;乳酸乳球菌经热酸处理制备拟菌颗粒;革兰染色和透射电镜分析拟菌颗粒的形态;拟菌颗粒分别与F1-PA融合蛋白或F1蛋白共孵育制备拟菌颗粒疫苗。结果 F1-PA融合蛋白在大肠杆菌野生株和htr A缺失突变株中均以包涵体形式表达。拟菌颗粒对F1-Pa融合蛋白的吸附能力明显高于对F1蛋白的吸附能力。F1-PA融合蛋白在大肠杆菌htr A突变株中的表达量明显高于在野生株中的表达量。结论大肠杆菌htr A突变株用于表达F1-PA融合蛋白优于野生株。借助于肽聚糖锚钩蛋白,可将鼠疫菌F1抗原结合到乳酸乳球菌拟菌颗粒上制备鼠疫拟菌颗粒疫苗。 展开更多
关键词 乳酸乳球 颗粒疫苗 鼠疫耶尔森菌 F1抗原 大肠杆htrA突变株
银川市1970-2014年鼠疫自然疫源地调查结果分析
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作者 高斌 张涛 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 2018年第6期654-656,共3页
目的分析1970-2014年银川市动物鼠疫调查数据,为该地区鼠疫的防控提供科学指导。方法长爪沙鼠调查采用坑式布夹法,夜行鼠调查采用5 m夹线法;鼠体蚤的调查,采取梳检鼠体表方法;病原学检测采用剖检鼠类脏器并取肝、脾组织压印培养方法;设... 目的分析1970-2014年银川市动物鼠疫调查数据,为该地区鼠疫的防控提供科学指导。方法长爪沙鼠调查采用坑式布夹法,夜行鼠调查采用5 m夹线法;鼠体蚤的调查,采取梳检鼠体表方法;病原学检测采用剖检鼠类脏器并取肝、脾组织压印培养方法;设计表格,收集1970-2014年鼠疫相关调查数据和资料,建立银川市动物鼠疫调查数据库。结果1970-2014年银川市共抽样调查样方4 043 hm^2,捕获鼠类6369只,各年平均密度在0.10~3.34只/hm^2之间,沙鼠年平均密度为1.58只/hm^2;夜行鼠调查共布放鼠夹164 394夹次,捕获鼠类13 572只,平均捕获率为8.26%,各年平均捕获率在2.17%~12.13%之间,年际间夜行鼠数量变化幅度较大。共梳检鼠体25 038只,染蚤鼠7 000只,平均染蚤率为27.96%,平均蚤指数为0.98。长爪沙鼠体蚤数量变化幅度较大,呈波浪式起伏,蚤指数波动在0.09~2.84之间。44年来共分离鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)44株,其中动物检菌37株,媒介蚤分离鼠疫菌7株。间接血凝试验检测动物血清5 453份,检出阳性血清15份。结论银川市沙鼠鼠疫疫源地仅局限分布在兴庆区通贵乡和月牙湖乡,特别是月牙湖乡仍以长爪沙鼠和子午沙鼠为优势鼠种,鼠体蚤仍然以同形客蚤指名亚种为优势蚤种,鼠疫自然疫源性长期存在。 展开更多
关键词 银川市鼠疫自然疫源地 数据库 长爪沙鼠 蚤指数 鼠疫耶尔森菌
西藏自治区鼠疫自然疫源地鼠疫耶尔森菌耐药及耐消毒剂基因的研究 被引量:1
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作者 何建 杨晓艳 +9 位作者 李胜 靳娟 张琪 辛有全 金泳 熊浩明 杨汉青 魏柏青 代瑞霞 祁芝珍 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 2018年第1期61-63,67共4页
目的调查西藏自治区鼠疫自然疫源地是否存在耐药及耐消毒剂的鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)菌株,为鼠疫的临床治疗提供准确信息。方法根据美国国立生物技术信息中心公布的耐氨基糖苷类链霉素StrA和StrB基因,耐β-内酰胺类抗菌药物TEM、SHV和CT... 目的调查西藏自治区鼠疫自然疫源地是否存在耐药及耐消毒剂的鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)菌株,为鼠疫的临床治疗提供准确信息。方法根据美国国立生物技术信息中心公布的耐氨基糖苷类链霉素StrA和StrB基因,耐β-内酰胺类抗菌药物TEM、SHV和CTX-M基因,耐磺胺类药物Sul1、Sul2和Sul3基因序列,耐消毒剂耐药QacEdeltalsul1基因,分别在每个基因上设计1对引物,逐一对分离自西藏自治区鼠疫自然疫源地的鼠疫菌DNA进行PCR检测。结果阴性对照和阳性对照成立,355株鼠疫菌的PCR检测结果均为阴性,未发现耐链霉素、耐磺胺类药物及耐β-内酰胺类抗菌药物和耐消毒剂菌株。结论西藏自治区鼠疫自然疫源地鼠疫菌尚未出现耐药及耐消毒剂菌株。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森菌 西藏自治区 耐药基因 耐消毒剂基因
利用差异区段分型方法对沙鼠型鼠疫菌和鼠疫菌EV76疫苗株进行鉴定
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作者 王海峰 周松 +3 位作者 李玉贵 白雪薇 孙睿 胡乐乐 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 2018年第5期436-438,共3页
目的利用差异区段(DFR)基因分型方法鉴别沙鼠型鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)和鼠疫菌EV76疫苗株。方法采取水煮法对2015年内蒙古自治区杭锦旗、2013年宁夏回族自治区银川市和2003年河北省康保县分离的6株沙鼠型鼠疫菌和鼠疫菌EV76疫苗株提... 目的利用差异区段(DFR)基因分型方法鉴别沙鼠型鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)和鼠疫菌EV76疫苗株。方法采取水煮法对2015年内蒙古自治区杭锦旗、2013年宁夏回族自治区银川市和2003年河北省康保县分离的6株沙鼠型鼠疫菌和鼠疫菌EV76疫苗株提取DNA,引物选用文献报道中的22个差异区段和pMT1,PCR扩增经琼脂糖凝胶电泳后分析其基因型别。结果沙鼠型鼠疫菌DFR基因型分别为G11、G17和G20。G11缺失位点为DFR01、06、07、13、15、16和17,G17缺失位点较G11增加DFR18,G20缺失位点较G17增加DFR12;鼠疫菌EV76疫苗株的缺失位点则为DFR01、02、04和10。结论利用DFR基因分型方法能快速区分沙鼠型鼠疫菌和鼠疫菌EV76疫苗株,可避免工作中因菌苗污染而造成分离到鼠疫菌的假象,鼠疫菌株基因型别的鉴定可以快速追溯疫情来源。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森菌 鼠疫EV76疫苗株 差异区段 基因分型
鼠疫耶尔森菌重要功能蛋白caf 1抗原表位的精细定位
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作者 郭荣 阿布力米提·莫明 +1 位作者 刘希佳 孙素荣 《疾病预防控制通报》 2018年第4期8-10,33共4页
目的完成鼠疫耶尔森氏菌重要功能蛋白caf 1的精细线性抗原表位鉴定。方法利用DNA重组技术获得重组蛋白rcaf 1,免疫新西兰兔制备抗rcaf 1多克隆抗体;使用DNA Star-protean软件及生物网站http://www.cbs.dtu.dk/services/Signal P/预测rc... 目的完成鼠疫耶尔森氏菌重要功能蛋白caf 1的精细线性抗原表位鉴定。方法利用DNA重组技术获得重组蛋白rcaf 1,免疫新西兰兔制备抗rcaf 1多克隆抗体;使用DNA Star-protean软件及生物网站http://www.cbs.dtu.dk/services/Signal P/预测rcaf 1的抗原表位,并通过基因工程技术获得连接KLH载体蛋白的多肽;使用ELISA方法鉴定预测的精细抗原表位。结果对鼠疫耶尔森氏菌重要功能蛋白caf 1预测的精细线性抗原表位,经ELISA法检测,其中多肽片段P1为弱阳性、P2为阳性,具有较好的免疫原性。结论针对鼠疫耶尔森菌重要功能蛋白caf 1抗原表位的预测是准确的,为鼠疫潜在诊断靶点及新型疫苗的选择提供了可靠依据。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森菌 CAF 1蛋白 抗原表位 定位
两种基因分型方法在河北省鼠疫耶尔森菌基因分型中的应用研究
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作者 王海峰 张懿晖 +3 位作者 杨晓燕 刘溢洋 牛艳芬 刘广 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 2018年第6期564-566,575共4页
目的分析河北省鼠疫疫源地分离的鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)基因型别和遗传变异特征。方法采取水煮法对康保县1972-2017年分离的鼠疫菌提取DNA,利用已有文献报道的多位点可变数目串联重复序列(MLVA)和差异区段(DFR)两种分型方法,经过PCR扩增... 目的分析河北省鼠疫疫源地分离的鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)基因型别和遗传变异特征。方法采取水煮法对康保县1972-2017年分离的鼠疫菌提取DNA,利用已有文献报道的多位点可变数目串联重复序列(MLVA)和差异区段(DFR)两种分型方法,经过PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳和序列分析后确定被测菌株的基因型别。结果河北省分离的鼠疫菌MLVA基因分型一致,并确定了串联重复序列位点的重复数目;DFR基因型为G17和G20。G17型主要缺失DFR1、6、7、13、15、16、17、18,G20型主要缺失DFR1、6、7、12、13、15、16、17、18。结论河北省鼠疫疫源地分离的鼠疫菌株遗传特征比较稳定,2017年动物间疫情是邻近地区的疫情蔓延还是当地菌株的遗传变异,需要进一步研究。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森菌 差异区段 多位点串联重复序列 基因分型
四川省新龙县鼠疫耶尔森菌差异区段分型研究
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作者 祁腾 梁莹 +4 位作者 杨军 罗隆泽 李帆 汪立茂 李伟 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 2018年第5期442-444,共3页
目的对四川省新龙县分离的鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)开展差异区段(DFR)分型研究,为鼠疫研究提供科学依据。方法选取新龙县和其他5个鼠疫县分离的鼠疫菌16株,按鼠疫菌DFR分型方法,使用23个DFR和pMT1的扩增引物,对被试菌株DNA进行PCR扩增... 目的对四川省新龙县分离的鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)开展差异区段(DFR)分型研究,为鼠疫研究提供科学依据。方法选取新龙县和其他5个鼠疫县分离的鼠疫菌16株,按鼠疫菌DFR分型方法,使用23个DFR和pMT1的扩增引物,对被试菌株DNA进行PCR扩增,采用BioNumerics 6.6软件进行分型,确定新龙县鼠疫菌DFR基因型。结果石渠县鼠疫菌菌株聚为第1类,为Genomovar14型;新龙县鼠疫菌DFR基因型与德格、巴塘、理塘、雅江县相同,聚为第2类,均为Genomovar05型。结论新龙县分离到的鼠疫菌基因型为Genomovar05型,新龙县鼠疫自然疫源地属于青藏高原喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地的一部分。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森菌 差异区段 新龙县
5种干粉培养基对鼠疫耶尔森菌生长的影响
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作者 冯建萍 郭文涛 +7 位作者 杨建国 李存香 赵海红 金星 辛有全 金丽霞 熊浩明 祁芝珍 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 2018年第3期303-304,共2页
目的观察不同干粉培养基对鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)的生长作用,筛选优质干粉培养基。方法分别按照5种干粉培养基(赫氏培养基、营养琼脂、亚硫酸钠琼脂基础、溶血琼脂基础和赫金格尔干粉培养基)说明制作培养基,倾注平皿。将0.1 ml鼠疫... 目的观察不同干粉培养基对鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)的生长作用,筛选优质干粉培养基。方法分别按照5种干粉培养基(赫氏培养基、营养琼脂、亚硫酸钠琼脂基础、溶血琼脂基础和赫金格尔干粉培养基)说明制作培养基,倾注平皿。将0.1 ml鼠疫菌悬液涂布于制备好的平皿中,于28℃48 h培养后进行活菌计数,观察鼠疫菌在5种干粉培养基中的生长效果。结果鼠疫菌在赫氏培养基、营养琼脂、亚硫酸钠琼脂基础培养基中的生长情况相互间差异无统计学意义(P〉0.05);在溶血琼脂基础、赫金格尔干粉培养基组间差异无统计学意义(P〉0.05);鼠疫菌在溶血琼脂基础和赫金格尔干粉培养基中的生长效果优于赫氏培养基、营养琼脂和亚硫酸钠琼脂基础培养基,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 5种干粉培养基均可用于鼠疫菌的分离培养,但溶血琼脂基础干粉和赫金格尔干粉培养基中鼠疫菌的生长效果优于其他3种干粉培养基。 展开更多
关键词 干粉培养基 鼠疫耶尔森菌 效果评价
河北省鼠疫自然疫源地鼠疫耶尔森菌变异性研究进展 被引量:1
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作者 史献明 杜国义 +9 位作者 王治宇 杨顺林 王海峰 周松 刘冠纯 谢树军 姚剑坤 崔树学 杨建明 张懿晖 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 2018年第1期100-102,共3页
在河北省鼠疫自然疫源地流行初期分离的鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)毒力较强,脱氮能力稳定,质粒种类丰富,但在流行末期分离的鼠疫菌往往毒力较弱,脱氮能力不稳定,质粒易缺失。鼠疫菌的形态学在自然界中存在较大差异。该文通过探讨河北省鼠... 在河北省鼠疫自然疫源地流行初期分离的鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)毒力较强,脱氮能力稳定,质粒种类丰富,但在流行末期分离的鼠疫菌往往毒力较弱,脱氮能力不稳定,质粒易缺失。鼠疫菌的形态学在自然界中存在较大差异。该文通过探讨河北省鼠疫菌的生物学、生化、质粒和毒力变异情况,揭示鼠疫静息期存在的机制。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森菌 变异性 河北省
青藏高原喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地鼠疫耶尔森菌遗传特征分析
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作者 王宇萌 梁莹 +8 位作者 张恩民 马娜 申小娜 蔡虹 张志凯 夏连续 梁未丽 代瑞霞 李伟 《疾病监测》 CAS 2018年第6期457-462,共6页
目的研究青藏高原喜马拉雅鼠疫疫源地那曲和比如地区鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)菌株的分子分型特征,确定具有该分型特征的鼠疫菌在青藏高原鼠疫疫源地的分布情况。方法应用板块重排、差异区段分析、间区规律短回文重复、多位点可变数目串... 目的研究青藏高原喜马拉雅鼠疫疫源地那曲和比如地区鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)菌株的分子分型特征,确定具有该分型特征的鼠疫菌在青藏高原鼠疫疫源地的分布情况。方法应用板块重排、差异区段分析、间区规律短回文重复、多位点可变数目串联重复序列分析方法对分离自青藏高原地区、四川省、云南省的98株鼠疫菌进行分析。结果那曲和比如地区的鼠疫菌菌株中第57~60板块的排列方式与测序菌株Z176003一致,在其他实验菌株中未发现该重排特征。结论分离自那曲和比如的鼠疫菌菌株具有独特的分子分型特征,该特征在本地区的菌株中普遍存在,且菌株多态性持续分化。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森菌 遗传特征分析 青藏高原 那曲地区
鼠疫耶尔森菌pla抗原基因芯片检测法的验证
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作者 王照 王铁峰 关心 《中国地方病防治杂志》 北大核心 2017年第9期989-990,共2页
目的检验鼠疫耶尔森菌pla抗原基因芯片检测法的准确性。方法针对鼠疫耶尔森菌pPCP1质粒上pla抗原基因中保守性片段,设计合成探针,制备尼龙膜基因芯片,用于检测在镇赉国家级鼠疫监测点采集到的达乌尔黄鼠肺、肝、肾样本154份,然后用鼠疫c... 目的检验鼠疫耶尔森菌pla抗原基因芯片检测法的准确性。方法针对鼠疫耶尔森菌pPCP1质粒上pla抗原基因中保守性片段,设计合成探针,制备尼龙膜基因芯片,用于检测在镇赉国家级鼠疫监测点采集到的达乌尔黄鼠肺、肝、肾样本154份,然后用鼠疫caf1基因PCR扩增法复检基因芯片阳性样品。结果基因芯片共检测出18份样本呈阳性反应,而caf1基因PCR法却发现这些样品均为阴性。结论在鼠疫耶尔森菌pPCP1质粒上的pla抗原基因不易用于鼠疫耶尔森菌的特异性检测,该抗原可同其它特异性抗原联合应用,提高检测的准确性。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森菌 pPCP1质粒 pla抗原 F1抗原 caf1基因
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