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甜橙CsKT1的钾转运功能鉴定及其互作蛋白分析 被引量:1
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作者 吴娟娟 苑平 +2 位作者 李卫东 李先信 孔佑涵 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期215-226,共12页
植物K+的跨膜运输过程是由细胞膜上的钾转运蛋白介导的。分析甜橙基因组序列信息发现,甜橙CsKT1与拟南芥Shaker家族成员中的AKT1同源性最高,具有典型的Shaker钾通道特征。互补钾吸收缺陷酵母的试验结果显示,表达CsKT1的钾吸收缺陷酵母能... 植物K+的跨膜运输过程是由细胞膜上的钾转运蛋白介导的。分析甜橙基因组序列信息发现,甜橙CsKT1与拟南芥Shaker家族成员中的AKT1同源性最高,具有典型的Shaker钾通道特征。互补钾吸收缺陷酵母的试验结果显示,表达CsKT1的钾吸收缺陷酵母能在K+浓度为10、1和0.1 mmol·L-1的培养条件下生长。以‘冰糖橙’(Citrus sinensis L. Osbeck‘Bingtangcheng’)为试验材料,利用qRT-PCR方法检测到CsKT1在植株根部的表达量比冠部高,并且低钾(0.1mmol·L-1K+)胁迫处理24h时植株中CsKT1的转录水平无明显变化。亚细胞定位检测结果显示,CsKT1能定位到细胞质膜上。利用酵母双杂交试验发现,CsKT1蛋白C端能与拟南芥CIPK23互作,还能与甜橙CsCIPK7蛋白(与拟南芥CIPK23同源性最高)互作,同时甜橙CsCIPK7蛋白能与拟南芥CBL1蛋白互作;进一步的蛋白序列相似性分析结果显示,柑橘CBL家族有8个成员,其中CsCBL1与拟南芥CBL1、CBL9的同源性最高。这些结果说明,CsKT1是柑橘中的类AKT1钾转运蛋白。 展开更多
关键词 甜橙 转运蛋白 Cs KT1 AKT1 CBL/CIPK
缺氮对油菜养分吸收及钾吸收转运相关基因表达的影响 预览 被引量:1
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作者 徐子先 韩配配 +6 位作者 李银水 廖祥生 胡小加 谢立华 余常兵 廖星 秦璐 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期78-84,共7页
为进一步了解缺氮对油菜养分吸收的影响,以甘蓝型油菜中双11号为材料,采用营养液培养方法,设置正常供氮和缺氮两个处理,培养14d后收获,分析缺氮对油菜植株表型、生物量、植株养分含量及养分吸收相关基因表达的影响。结果表明,缺氮严重... 为进一步了解缺氮对油菜养分吸收的影响,以甘蓝型油菜中双11号为材料,采用营养液培养方法,设置正常供氮和缺氮两个处理,培养14d后收获,分析缺氮对油菜植株表型、生物量、植株养分含量及养分吸收相关基因表达的影响。结果表明,缺氮严重抑制油菜植株生长,地上部生物量显著减少,叶片瘦小、黄化,茎秆呈紫红色。缺氮促进油菜根系生长,植株根冠比增加。缺氮处理对油菜叶、茎、根中大量元素含量的影响有所不同,缺氮油菜叶、茎、根的氮浓度及氮含量都显著降低;油菜叶、茎的磷浓度在缺氮胁迫时显著增加,根的磷浓度显著降低,而茎和根的磷含量在缺氮胁迫时都显著降低,但叶片磷含量不受影响;油菜不同部位钾浓度和钾含量在缺氮胁迫时都显著降低,并且缺氮处理14d显著抑制油菜大部分钾通道蛋白基因以及3个根部特异钾转运蛋白基因的表达,说明缺氮对油菜钾吸收运转相关基因表达的影响,可能导致油菜植株钾含量的降低。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 缺氮 养分吸收 通道蛋白 转运蛋白
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甘蔗钾转运蛋白基因SsHAK2的克隆及表达特性分析 被引量:2
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作者 凌秋平 曾巧英 +4 位作者 胡斐 吴嘉云 樊丽娜 李奇伟 齐永文 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期378-385,共8页
甘蔗(Saccharum species hybrid)是最重要的糖料作物,由于其生育周期长,生物量大,对钾的需求量也大。南方是我国甘蔗的主要种植区域,由于土壤本身特性,有效钾含量低,限制了甘蔗的生产。因此,培育耐低钾甘蔗品种是提高甘蔗钾吸... 甘蔗(Saccharum species hybrid)是最重要的糖料作物,由于其生育周期长,生物量大,对钾的需求量也大。南方是我国甘蔗的主要种植区域,由于土壤本身特性,有效钾含量低,限制了甘蔗的生产。因此,培育耐低钾甘蔗品种是提高甘蔗钾吸收效率的有效途径之一。本研究以甘蔗品种新台糖22号为材料进行低钾胁迫处理,利用RT-PCR技术从其根系中克隆得到钾转运蛋白基因,命名为SsHAK2(GenBank登录号: KM98738)。该基因全长为2 798 bp,包含一个完整的2 352 bp的ORF,编码784个氨基酸,相对分子量为87.602 kD,等电点为8.85,预测其为碱性蛋白。SsHAK2苷酸序列包含了12个跨膜结构域(S1~S12),有80%的概率定位在细胞质膜上。同时,该基因还包含3个保守结构域,分别为钾转运蛋白结构域和氨基酸转运蛋白结构域。SsHAK2基因与玉米(Zea mays)、大麦(Hordeum vulgare)、水稻(Oryza sativa)等其他作物中HAK基因具有高度的同源性,一致的核苷酸比例在52%~95%。qPCR分析结果表明,在低钾、干旱和盐胁迫下,SsHAK2的表达都发生改变。在低钾胁迫条件下处理96 h,该基因相对表达量最大,约达到对照的1.70倍;在盐胁迫条件下处理48 h,该基因的相对表达量出现显著上调,96 h相对表达量最高,约为对照的4.37倍。在干旱胁迫12 h,该基因的相对表达量达到最高,约为对照的4.07倍。干旱胁迫处理24 h,该基因表达量约为对照的1.69倍。但是,在干旱胁迫24 到48 h过程中表达由下调转为上调。干旱胁迫48 h后,该基因的表达迅速下调,96 h时该基因表达量最低,约为对照表达量的1/4。qPCR分析结果表明该基因在低钾、干旱和盐胁迫下发挥重要的调控作用。本研究结果为进一步研究甘蔗钾吸收分子机制提供基础。 展开更多
关键词 甘蔗 转运蛋白 SsHAK2 基因克隆 基因表达
甘蔗ScHAK9基因克隆及表达分析
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作者 罗海斌 黄诚梅 +6 位作者 蒋胜理 曹辉庆 邓智年 吴凯朝 徐林 陆珍 魏源文 《植物遗传资源学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期731-739,共9页
KUP/HAK/KT家族基因在介导细胞内钾的积累及维持植物的生长发育中起重要作用,本研究以新台糖22号(ROC22)甘蔗为研究材料,采用同源克隆技术获得钾转运ScHAK9基因的完整编码序列(CDs),并利用生物信息学软件对蛋白质结构和功能进行预... KUP/HAK/KT家族基因在介导细胞内钾的积累及维持植物的生长发育中起重要作用,本研究以新台糖22号(ROC22)甘蔗为研究材料,采用同源克隆技术获得钾转运ScHAK9基因的完整编码序列(CDs),并利用生物信息学软件对蛋白质结构和功能进行预测分析,同时利用qPCR技术分析基因的组织特异性表达以及在不同干旱条件下的表达情况。结果表明,ScHAK9基因的cDNA完整编码区长度为2352 bp,编码783个氨基酸,属于碱性疏水蛋白,结构中包含了12个跨膜结构域,蛋白主要定位在细胞质膜上;蛋白质二级结构主要由α螺旋结构、无规则卷曲结构和扩展长链组成;系统发育树分析显示ScHAK9与玉米Zm HAK9基因同源性较高。qPCR分析结果表明,ScHAK9基因在不同组织间的相对表达量具有明显差异,叶片中表达最高,其次是茎,根系中表达最低,具有组织特异性;干旱胁迫可以诱导ScHAK9基因表达,其表达量随着胁迫程度加重表现出升高趋势,且在复水后才有所下降。初步推测该基因可能在甘蔗发育和抵御干旱胁迫中起着重要作用,本研究为进一步阐明ScHAK9的功能及作用机制奠定了分子基础。 展开更多
关键词 甘蔗 转运蛋白(HAK) 基因克隆 生物信息学分析 基因表达
甘蔗ScHAK10基因克隆及表达分析
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作者 罗海斌 蒋胜理 +6 位作者 黄诚梅 曹辉庆 邓智年 吴凯朝 徐林 陆珍 魏源文 《作物杂志》 北大核心 2018年第4期53-61,共9页
为探究甘蔗HAK基因家族中Sc HAK10基因的功能及干旱环境下的响应机制,利用同源克隆技术(homologous cloning)从新台糖22号中克隆得到Sc HAK10基因的完整编码序列,并对其进行生物信息学分析,同时采用q-PCR技术分析基因在不同组织以及... 为探究甘蔗HAK基因家族中Sc HAK10基因的功能及干旱环境下的响应机制,利用同源克隆技术(homologous cloning)从新台糖22号中克隆得到Sc HAK10基因的完整编码序列,并对其进行生物信息学分析,同时采用q-PCR技术分析基因在不同组织以及在不同干旱阶段的表达情况。结果表明,Sc HAK10基因编码区全长为2 433bp,编码810个氨基酸,相对分子量89.83k D,等电点(p I)为8.46,预测其为疏水碱性蛋白;核苷酸同源性分析表明Sc HAK10基因与玉米(Zea mays L.)、高粱[Sorghum bicolor(L.)Moench]等其他作物中HAK基因具有高度的同源性;该蛋白具有跨膜结构域,定位在细胞质膜上。蛋白质二级结构分析发现其主要由α螺旋(38.15%)、扩展长链(19.26%)和无规则卷曲(37.16%)组成;蛋白功能预测显示其与阳离子运输通道相关,有较大的概率显示其介入转录、信号传导、免疫应答等生物活动。q PCR表达分析显示,Sc HAK10基因在不同部位都有表达,叶片中的表达量最高,其次为茎,根系中的表达量最低。干旱胁迫下Sc HAK10基因受到诱导表达,表达水平根据胁迫程度的加深而呈现出先上调后下降的表达趋势,复水后,基因表达量降低。本研究为进一步阐明甘蔗Sc HAK10基因的功能及甘蔗耐旱调控相关分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 甘蔗 转运蛋白基因(HAK) 基因克隆 生物信息学分析 基因表达
转AlHAK1基因棉花耐盐能力分析 预览 被引量:1
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作者 车文利 张书玲 +7 位作者 吴立柱 杨国军 董丽君 杜环 高佳佳 刘晗 蒋肖 刘建凤 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期49-56,共8页
为了获得超表达獐茅Al HAK1基因棉花纯合系并验证其耐盐能力,对转Al HAK1基因T3代材料进行了PCR与RT-PCR鉴定,并在水培条件下研究了纯合系植株长势、根系形态参数、离子含量和相关抗氧化酶活性变化。结果表明在盐胁迫条件下,转基因植株... 为了获得超表达獐茅Al HAK1基因棉花纯合系并验证其耐盐能力,对转Al HAK1基因T3代材料进行了PCR与RT-PCR鉴定,并在水培条件下研究了纯合系植株长势、根系形态参数、离子含量和相关抗氧化酶活性变化。结果表明在盐胁迫条件下,转基因植株偏高,较野生型增加了16.5%,同时转基因植株根系形态参数总根长、比根长和根表面积分别增加了62.23%、40.02%和29.22%,而根的平均直径降低了22.22%,均达到了差异显著水平(P〈0.05)。此外,在盐胁迫条件下,转基因幼苗能维持根和叶中较高的K+含量,较低的Na+含量和较高的K+/Na+,其超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化酶(POD)活性均比野生型植株有所提高。该结果进一步表明供试外源Al HAK1基因在棉花中超表达,提高了转基因棉花耐盐能力,为培育适应盐渍化土壤环境下生长的棉花新品种提供重要的种质资源。 展开更多
关键词 转运蛋白基因(AlHAK1) 棉花 耐盐性 根系形态参数
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盐穗木钾转运蛋白基因HcKUP12的克隆及在盐胁迫下的表达分析 预览 被引量:4
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作者 杨中敏 王艳 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期499-506,共8页
利用RACE技术从盐生植物盐穗木(Halostachyscaspica)中克隆获得了一个钾离子转运体基因,经BLAST同源比对发现该基因与拟南芥钾离子转运蛋白AtKUP12基因最为相似,命名为HcKUP12。HcKUP12基因cDNA全长为2953bp,含有2544 bp的阅读框、... 利用RACE技术从盐生植物盐穗木(Halostachyscaspica)中克隆获得了一个钾离子转运体基因,经BLAST同源比对发现该基因与拟南芥钾离子转运蛋白AtKUP12基因最为相似,命名为HcKUP12。HcKUP12基因cDNA全长为2953bp,含有2544 bp的阅读框、262 bp的5′-UTR和147 bp的3′-UTR,编码847个氨基酸,分子质量为93.31 kD,理论等电点为7.19。利用实时荧光定量RT-PCR分析了HcKUP12基因在600 mmol/L NaCl处理下胁迫24 h的表达模式,结果显示该基因在盐胁迫下表达量显著增加,至处理24 h时达到最高(为对照的225倍),初步推测其可能是与盐穗木耐盐相关的一个候选基因。 展开更多
关键词 盐穗木 转运蛋白基因HcKUP12 克隆 盐胁迫 表达分析
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小麦高亲和性钾转运蛋白基因HKT1启动子克隆及序列分析 预览 被引量:1
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作者 李孟军 高欣娜 +7 位作者 傅晓艺 史占良 郭进考 李孟军 高欣娜 傅晓艺 史占良 郭进考 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2012年第B12期1-5,共5页
根据普通小麦HKT1 cDNA序列(GenBank登录号:U16709)设计基因特异引物,通过筛选矮败中国春BAC文库,获得含有HKT1基因组序列单克隆BAC。根据HKT1 5'-端已知序列设计测序引物,以单克隆BAC质粒为模板进行测序,序列经Sequencer软件拼接,... 根据普通小麦HKT1 cDNA序列(GenBank登录号:U16709)设计基因特异引物,通过筛选矮败中国春BAC文库,获得含有HKT1基因组序列单克隆BAC。根据HKT1 5'-端已知序列设计测序引物,以单克隆BAC质粒为模板进行测序,序列经Sequencer软件拼接,获得了HKT1基因起始密码子上游4 192 bp序列。用Neural Network PromoterPrediction(NNPP)软件分析此序列,预测存在9个转录起始点。PLACE软件分析表明,该序列具有启动子的基本元件TATA-box、CAAT-box,包含多个胁迫诱导元件,如盐诱导元件GAAAAA,抗冻、缺水、脱落酸、抗寒元件CANNTG和CCGAC等,伤害诱导元件TGACY,组织特异表达元件ACTTTA和ATATT等。HKT1启动子克隆表明,设计基因特异引物筛选BAC文库,通过以单克隆BAC质粒为模板直接测序获得基因启动子序列的方法是从普通小麦基因组中克隆基因启动子的一条切实可行的途径。 展开更多
关键词 小麦 高亲和性转运蛋白 启动子
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蓖麻耐盐基因RcKUP7克隆及分子特征分析 预览
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作者 张继星 丛娇娇 +1 位作者 耿学军 刘海臣 《内蒙古民族大学学报:自然科学版》 2018年第4期311-318,共8页
本试验以蓖麻叶片为材料, 克隆K+吸收蛋白基因RcKUP 7, 并对其进行生物信息学分析.结果显示,RcKUP 7基因开放阅读框 (OpenReadingFrame,ORF) 为2583 bp, 编码860个氨基酸, 蛋白分子量为95.149kD, pI值5.15.通过氨基酸组分分析得到含... 本试验以蓖麻叶片为材料, 克隆K+吸收蛋白基因RcKUP 7, 并对其进行生物信息学分析.结果显示,RcKUP 7基因开放阅读框 (OpenReadingFrame,ORF) 为2583 bp, 编码860个氨基酸, 蛋白分子量为95.149kD, pI值5.15.通过氨基酸组分分析得到含量最高的是亮氨酸 (Leu), 占该蛋白总摩尔质量的11.74%和分子质量的11.96%; 含量最低的氨基酸为色氨酸 (Trp), 其摩尔质量与分子质量分别占总蛋白的1.16%和1.84%.进行多重序列比对和系统发育树分析可得出与麻枫树、 木薯、 橡胶树亲缘性较近.通过保守区蛋白分析可以得出该蛋白为钾离子转运蛋白家族的-员.通过亲水疏水性分析, 可知该蛋白为疏水性蛋白.跨膜结构分析显示该蛋白具有10个蛋白跨膜结构, 是典型的跨膜蛋白, 并预测了该蛋白的三级结构. 展开更多
关键词 蓖麻 离子转运蛋白 基因克隆 分子特征分析
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利用子房滴注法获得转高亲和性钾离子转运蛋白基因(AlHAK1) 预览
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作者 刘灵娣 唐宏亮 +8 位作者 董丽君 张书玲 吴立柱 杜环 高佳佳 赵晓雅 刘晗 蒋肖 刘建凤 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2015年第1期9-15,共7页
棉花植株再生困难、基因型依赖性强和转化周期长等因素一直制约着棉花遗传转化的发展。本研究利用1种不依赖组织培养的转化方法,即子房滴注转化方法将獐茅高亲和性钾离子转运蛋白基因(AIHAK1)导入棉花基因组中。结果表明在1006株转... 棉花植株再生困难、基因型依赖性强和转化周期长等因素一直制约着棉花遗传转化的发展。本研究利用1种不依赖组织培养的转化方法,即子房滴注转化方法将獐茅高亲和性钾离子转运蛋白基因(AIHAK1)导入棉花基因组中。结果表明在1006株转化幼苗中有44株为卡那抗性植株,其中35株经PCR检测为阳性(T0代),转化率为3.5%。Southem与Northem杂交结果进一步表明外源基因已整合至棉花基因组中并在转录水平上表达。在提供外源0.05mmol·L-1K+水平下,T1转基因棉花叶片中K+含量约为对照植株的2倍.在根中约为野生型植株的1.5倍;而在2.5mmol·L-1K+的正常水平下,转基因棉花与野生型植株K+含量差异不明显。在50~200mmol·L-1NaC1胁迫条件下,转基因棉花的种子发芽率明显高于野生型植株.尤其是在150mmol·L-1NaC1胁迫条件下,转基因植株种子的发芽率是野生型的2.8倍左右。本研究为子房滴注转化体系在生产实践中的广泛应用提供了理论依据,并为培育适应土壤钾素匮乏及盐渍化环境下生长的棉花新品种提供了新的种质资源。 展开更多
关键词 棉花 子房滴注转化 离子转运蛋白 转基因植株 营养 盐胁迫
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三种盐生植物与三种甜土植物HKT1生物信息学比较分析
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作者 郭晓农 柴薇薇 +3 位作者 习思羽 郭鹏辉 柏家林 马忠仁 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第16期5263-5275,共13页
为研究三种盐生植物与三种甜土植物中高亲和性钾离子转运蛋白(HKT1)在结构和功能等方面的差异,本研究运用生物信息学方法预测并分析三种盐生植物与三种甜土植物HKT1的理化特性、氨基酸组成、亲/疏水性、N-糖基化位点、信号肽、跨膜结构... 为研究三种盐生植物与三种甜土植物中高亲和性钾离子转运蛋白(HKT1)在结构和功能等方面的差异,本研究运用生物信息学方法预测并分析三种盐生植物与三种甜土植物HKT1的理化特性、氨基酸组成、亲/疏水性、N-糖基化位点、信号肽、跨膜结构域及其同源进化关系等,对预测及分析数据进行分类对比,总结共性且筛选差异性。结果表明:三种盐生植物和三种甜土植物的HKT1氨基酸组成、亲/疏水性、N-糖基化位点差异不明显,但是信号肽、同源序列分析及多重序列比对分析存在明显的差异,上述差异可为改良和育种耐盐碱性基因工程作物提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 盐生植物 甜土植物 高亲和性离子转运蛋白(HKT1) 序列分析
蓖麻耐盐基因HKT的克隆及表达载体构建
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作者 丛娇娇 王晓宇 +3 位作者 李平 李惠根 张丽雪 张继星 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2018年第14期4648-4657,共10页
为挖掘蓖麻耐盐相关基因,以盐生植物蓖麻(Ricinus communis L.)叶片为材料。设计特异性引物,克隆高亲和性钾离子转运蛋白(high-affinity K+transporter,HKT)耐盐基因,并对其序列进行生物信息学分析。结果表明,该基因全长1 596 bp,... 为挖掘蓖麻耐盐相关基因,以盐生植物蓖麻(Ricinus communis L.)叶片为材料。设计特异性引物,克隆高亲和性钾离子转运蛋白(high-affinity K+transporter,HKT)耐盐基因,并对其序列进行生物信息学分析。结果表明,该基因全长1 596 bp,编码531个氨基酸,推测分子量为59.74 kD,等电点(pI)为9.32。多重序列比对和系统发育树分析表明该蛋白与木薯和橡胶树的同源性最高,分别为69.13%和67.03%,且与HKT1蛋白家族成员同源性较高,为S-G-G-G类型蛋白,推测该蛋白为HKT1类蛋白。二级结构预测蓖麻HKT蛋白有9个跨膜结构域,主要定位于内质网上,是典型的跨膜蛋白。根据蓖麻HKT基因序列设计带有Bam HⅠ和PstⅠ酶切位点的引物扩增出全长基因,用限制性内切酶Bam HⅠ和PstⅠ进行双酶切后与表达载体pCHF-3300连接。本研究成功构建了蓖麻HKT基因的表达载体,为进一步研究该基因的转化及功能验证提供参考。 展开更多
关键词 蓖麻 高亲和离子转运蛋白 基因克隆 生物信息学分析 表达载体
栽培型与野生型辣椒HAK/KUP/KT基因家族的进化分析 被引量:1
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作者 司伟娜 孙毅 李晓玉 《安徽农业大学学报》 CSCD 2018年第4期753-761,共9页
HAK/KUP/KT家族是一类重要的钾转运蛋白家族。利用生物信息学手段对栽培型及墨西哥野生型辣椒全基因组范围内的HAK/KUP/KT基因成员进行鉴定及分析,比较两者在数目、复制类型及组织表达模式等方面的差异。发现2种辣椒中HAK/KUP/KT家族... HAK/KUP/KT家族是一类重要的钾转运蛋白家族。利用生物信息学手段对栽培型及墨西哥野生型辣椒全基因组范围内的HAK/KUP/KT基因成员进行鉴定及分析,比较两者在数目、复制类型及组织表达模式等方面的差异。发现2种辣椒中HAK/KUP/KT家族成员分别为24和22个,且在染色体上呈不均衡分布。基因复制类型分析发现,HAK/KUP/KT家族成员中存在片段重复和串联重复,且纯化选择是该家族进化的主要动力。组织表达分析显示,辣椒HAK/KUP/KT基因间的表达模式存在差异,暗示辣椒HAK/KUP/KT家族成员在功能上的多样性,并为后续发掘有益的钾转运基因提供了重要的理论依据。 展开更多
关键词 辣椒基因组 HAK/KUP/KT离子转运蛋白家族 进化分析
鞘内注射布美他尼对大鼠急性疼痛行为及钠钾氯联合转运蛋白1表达的影响 预览 被引量:1
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作者 朱少飞 唐群新 《实用药物与临床》 CAS 2015年第3期272-276,共5页
目的探讨鞘内注射布美他尼对大鼠术后痛觉过敏形成的作用机制,为临床研究及应用提供理论参考。方法采用随机数字表法将大鼠分为对照组、注药组、手术组及实验组。采用热辐射法(热痛敏)、von Frey细丝法(机械痛敏)及疼痛累计评分法... 目的探讨鞘内注射布美他尼对大鼠术后痛觉过敏形成的作用机制,为临床研究及应用提供理论参考。方法采用随机数字表法将大鼠分为对照组、注药组、手术组及实验组。采用热辐射法(热痛敏)、von Frey细丝法(机械痛敏)及疼痛累计评分法(疼痛保护反应)观察、记录术前及术后2、4、6 h大鼠的行为学改变,采用免疫组化,荧光显微镜观察各组术后2、4、6 h背根神经节(DRG)的NKCC1表达,并行阳性细胞计数。结果手术组与实验组术后各时间点的热痛阈均降低(P〈0.05);实验组热痛阈明显高于手术组(P〈0.05)。注药组大鼠在注药后2 h的机械痛阈升高(P〈0.05),手术组大鼠的机械痛阈明显低于实验组(P〈0.05)。手术组与实验组术后疼痛累计评分均升高(P〈0.05),但手术组明显高于实验组(P〈0.05)。手术组及实验组在各时间点阳性细胞计数均明显增多(P〈0.01);组间比较,实验组的阳性细胞计数明显少于手术组(P〈0.01)。结论鞘内注射布美他尼能提高切口痛模型大鼠的热痛阈值及机械痛阈值,降低疼痛累计评分,减少切口痛模型大鼠DRG的NKCC1的表达,提示布美他尼对急性疼痛过敏的形成有抑制作用,其抗伤害作用可能与抑制NKCC1活动有关。NKCC1对急性痛觉过敏形成与维持起重要作用。 展开更多
关键词 布美他尼 氯联合转运蛋白1 急性疼痛 痛阈
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阳离子-氯离子联合转运蛋白在切开模型大鼠脊髓的表达 被引量:1
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作者 何雁冰 徐世元 宫庆娟 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2014年第9期816-820,共5页
目的 检测大鼠切开模型脊髓背角及背根节(dorsal root ganglion,DRG)的钠钾氯联合转运蛋白1(sodiumpotassium-chloride co-transporter 1,NKCC1)与钾氯联合转运蛋白2(potassium-chloride co-transporter 2,KCC2)的表达. 方法 30... 目的 检测大鼠切开模型脊髓背角及背根节(dorsal root ganglion,DRG)的钠钾氯联合转运蛋白1(sodiumpotassium-chloride co-transporter 1,NKCC1)与钾氯联合转运蛋白2(potassium-chloride co-transporter 2,KCC2)的表达. 方法 30只SD大鼠用随机数字表法随机分成对照组和切开后2h、2d、3d、7d组(每组6只),在吸入麻醉下制作切开模型或仅接受皮肤消毒.在相应时间点,在深麻醉下灌注、固定,取出L4~L5节段脊髓和双侧L5 DRG,用免疫组化方法测定NKCC1和KCC2蛋白表达. 结果 在正常大鼠,NKCC1在DRG表达,NKCC1及KCC2均在背角表达但以KCC2为主.切开后同侧DRG的NKCC1表达增加(P=0.010),与对照组阳性细胞数(18.0±2.8)比较,2 h(40.7±2.0)、2 d(54.7±9.8)、3 d(45.3±8.6)组的阳性细胞数显著增加(P=0.026,0.001,0.008);同侧脊髓背角NKCC1表达增加(P<0.001),与对照组(14.33±0.56)比较,2 h(31.00±1.32)、2d(50.33±1.80)、3 d(38.67±3.04)、7 d(32.33±0.21)组的阳性细胞数显著增加(均为P<0.01);同侧脊髓背角KCC2表达减少(P<0.01),与对照组(42.7±2.6)比较,2 h(18.0±3.5)、2 d(18.0±1.7)、3 d(23.3±1.5)、7 d(24.7±1.1)组的阳性细胞数显著减少(均为P<0.01). 结论 在大鼠切开模型,NKCC1在DRG及脊髓背角表达增加,KCC2在脊髓背角表达降低,提示NKCC1和KCC2参与了术后痛觉过敏形成机制,有希望成为术后疼痛治疗的新靶点. 展开更多
关键词 氯联合转运蛋白1 氯联合转运蛋白2 术后疼痛 痛觉过敏
鞘内注射布美他尼在大鼠足底切口痛模型中的镇痛作用 预览 被引量:2
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作者 何雁冰 徐世元 黄俊杰 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期463-466,共4页
目的:研究鞘内注射钠钾氯联合转运蛋白1抑制剂布美他尼在足底切口痛模型大鼠的镇痛效应。方法:成年雄性SD大鼠36只随机分成对照组和布美他尼组,在切开足底前经鞘内注入人工脑脊液20μl或布美他尼100μg/20μl。在切开前1 d至切开后6 ... 目的:研究鞘内注射钠钾氯联合转运蛋白1抑制剂布美他尼在足底切口痛模型大鼠的镇痛效应。方法:成年雄性SD大鼠36只随机分成对照组和布美他尼组,在切开足底前经鞘内注入人工脑脊液20μl或布美他尼100μg/20μl。在切开前1 d至切开后6 d分别进行疼痛累积评分、热痛阈及机械痛阈测定。结果:鞘内注射布美他尼降低大鼠切开后2 h至3 d的疼痛累积评分,增加伤口旁切开后2 h至6 d的热痛阈及切开后2 h至5 d的机械痛阈。结论:鞘内注射布美他尼可缓解足底切口痛模型大鼠的静息痛、热及机械性刺激的诱发痛,有希望成为新的术后镇痛方法。 展开更多
关键词 氯联合转运蛋白1 布美他尼 术后疼痛
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钠钾氯同向转运蛋白-1与脑水肿 被引量:2
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作者 黄林强 曾红科 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期318-320,共3页
脑水肿即水在大脑细胞内外病理性蓄积。脑水存在于脑室系统、蛛网膜下腔、细胞间隙、脑细胞4个相互影响的区域当中,大脑内环境轻微的变化就会使脑水重新分布或血脑屏障通透性发生变化而引起脑水肿。脑水肿在临床上非常常见,它作为继... 脑水肿即水在大脑细胞内外病理性蓄积。脑水存在于脑室系统、蛛网膜下腔、细胞间隙、脑细胞4个相互影响的区域当中,大脑内环境轻微的变化就会使脑水重新分布或血脑屏障通透性发生变化而引起脑水肿。脑水肿在临床上非常常见,它作为继发于如缺血缺氧性脑病、颅脑创伤等疾病最常见的并发症之一,是致残及导致死亡的重要原因。 展开更多
关键词 脑水肿 氯同向转运蛋白-1 布美他尼 神经元 星形胶质细胞 血管内皮细胞
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