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转植酸酶-抗菌肽融合基因水稻BPL9K的植酸酶活性分析
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作者 崔帅 王作平 +1 位作者 于江辉 肖国樱 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期3332-3339,共8页
本研究检测了转植酸酶-抗菌肽融合基因水稻BPL9K及其杂交组合种子的植酸酶活性。结果表明:(1) 3个转化体的植酸酶活性差异极显著(p<0.01),BPL9K-1植酸酶活性最高,平均为28.82 U/g,BPL9K-4次之,平均为25.77 U/g,BPL9K-2最低,平均为17.... 本研究检测了转植酸酶-抗菌肽融合基因水稻BPL9K及其杂交组合种子的植酸酶活性。结果表明:(1) 3个转化体的植酸酶活性差异极显著(p<0.01),BPL9K-1植酸酶活性最高,平均为28.82 U/g,BPL9K-4次之,平均为25.77 U/g,BPL9K-2最低,平均为17.11 U/g;各转化体的植酸酶活性均能稳定遗传;纯合体和杂合体间植酸酶活性差异不显著(p>0.05)。(2)植酸酶基因表达显著受遗传背景和栽培条件的影响,3个转化体盆栽的植酸酶活性均极显著高于大田(p<0.01);不同杂交组合的植酸酶活性差异显著(p<0.05),最高达到20.01 U/g,最低只有8.59 U/g。(3)常温储存6个月,BPL9K-1和BPL9K-2的植酸酶活性下降均不显著(p>0.05),但BPL9K-4的植酸酶活性均显著下降(p<0.05);常温贮存12个月,3个转化体的种子植酸酶活性均显著降低(p<0.05),但仍保持较高的植酸酶活性。证明在适宜条件下BPL9K可以进行较长时间的保存。本研究结果为高植酸酶活性水稻品种培育提供了技术支撑。 展开更多
关键词 植酸酶活性 栽培条件 遗传背景 常温贮存 转基因水稻
OsRhoGDI2过表达转基因水稻的筛选鉴定及外源基因拷贝数的初步分析 预览
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作者 杜京尧 尚飞 +1 位作者 王高华 梁卫红 《江苏农业科学》 2019年第14期50-54,共5页
水稻RhoGDP解离抑制基因OsRhoGDI2是从幼穗中分离出的功能未知基因.为鉴定该基因的功能,笔者所在实验室前期构建了植物过表达载体pCAMBIA1302-OsRhoGDI2-GFP,并对水稻进行了遗传转化.对OsRhoGDI2过表达转基因水稻T2代进行筛选和鉴定,采... 水稻RhoGDP解离抑制基因OsRhoGDI2是从幼穗中分离出的功能未知基因.为鉴定该基因的功能,笔者所在实验室前期构建了植物过表达载体pCAMBIA1302-OsRhoGDI2-GFP,并对水稻进行了遗传转化.对OsRhoGDI2过表达转基因水稻T2代进行筛选和鉴定,采用PCR技术鉴定转基因植株,采用半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR检测OsRhoGDI2在转基因水稻中的表达水平,结果显示,其中6个株系为过表达转基因植株,OsRhoGDI2表达水平上调1.69~13.35倍.为检测外源基因在转基因水稻中的拷贝数,分别以蔗糖磷酸合成酶基因SPS和潮霉素抗性基因HYG为内参基因和标记基因,采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术结合内参基因和标记基因的标准曲线进行分析,结果显示在所检测的6个转基因株系中,外源基因的拷贝数均为1,提示已经获得稳定遗传的OsRhoGDI2过表达转基因水稻,为后续OsRhoGDI2基因的功能研究奠定基础. 展开更多
关键词 OsRhoGDI2 转基因水稻 表达分析 拷贝数 外源基因
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抗虫转基因水稻检测技术研究综述 预览
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作者 向阳 《安徽农学通报》 2019年第10期15-18,共4页
近年来,随着抗虫转基因水稻研究的进一步发展,世界各地实验室在抗虫转基因水稻研究方面均有收获,抗虫转基因水稻检测随之成为众多科学家的关注点。该文综述了抗虫转基因水稻检测技术的研究进展,为进一步开展转基因水稻检测的研究工作提... 近年来,随着抗虫转基因水稻研究的进一步发展,世界各地实验室在抗虫转基因水稻研究方面均有收获,抗虫转基因水稻检测随之成为众多科学家的关注点。该文综述了抗虫转基因水稻检测技术的研究进展,为进一步开展转基因水稻检测的研究工作提供参考。 展开更多
关键词 抗虫Tail-PCR 转基因水稻 基因芯片 检测技术
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镉胁迫下转基因水稻对根际土壤微生物的影响 预览
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作者 李磊 韩成 +3 位作者 王宵宵 洪鑫 刘标 钟文辉 《江苏农业科学》 2019年第14期282-287,共6页
为了探究镉胁迫下转基因水稻对根际土壤微生物的影响,以抗虫转基因水稻华恢1号(HH1)及其亲本非转基因水稻明恢63(MH63)为研究材料,设置不同Cd^2+浓度(0、3.5、60.0、240.0 mg/kg)胁迫进行盆栽试验.结果表明:与Cd0相比,Cd3.5处理对水稻... 为了探究镉胁迫下转基因水稻对根际土壤微生物的影响,以抗虫转基因水稻华恢1号(HH1)及其亲本非转基因水稻明恢63(MH63)为研究材料,设置不同Cd^2+浓度(0、3.5、60.0、240.0 mg/kg)胁迫进行盆栽试验.结果表明:与Cd0相比,Cd3.5处理对水稻农艺性状无显著影响;Cd240.0处理显著降低了株高、产量;与Cd0处理相比,Cd60.0和Cd240.0处理下HH1水稻根际土壤细菌群落组成中Proteobacteria(变形菌门)、Acidobacteria(酸杆菌门)、Actinobacteria(放线菌门)的相对丰度显著降低;MH63水稻中Acidobacteria的相对丰度显著升高而Bacteroidetes(拟杆菌门)的相对丰度显著降低.Cd胁迫显著降低了水稻根际土壤细菌群落丰度及多样性.环境因子分析显示,Cd胁迫后水稻根际土壤pH值、总氮含量、铵态氮含量的变化是影响根际土壤细菌群落结构的主要原因. 展开更多
关键词 转基因水稻 细菌群落 根际土壤 镉胁迫
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过量表达盐芥TsIPK2基因增强转基因水稻耐盐性 预览
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作者 潘晓雪 胡明瑜 +4 位作者 蒋晓英 白文钦 官玲 吴红 雷开荣 《植物营养与肥料学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期741-747,共7页
【目的】本试验以野生型(WT)和转盐芥TsIPK2基因的水稻为材料,研究NaCl胁迫条件下过量表达TsIPK2基因对水稻植株抗盐胁迫能力的影响。【方法】取水稻材料种子和其3叶龄幼苗,分别在不同NaCl浓度(0、50、100、150、200mmol/L)下进行处理... 【目的】本试验以野生型(WT)和转盐芥TsIPK2基因的水稻为材料,研究NaCl胁迫条件下过量表达TsIPK2基因对水稻植株抗盐胁迫能力的影响。【方法】取水稻材料种子和其3叶龄幼苗,分别在不同NaCl浓度(0、50、100、150、200mmol/L)下进行处理。检测WT与过量表达TsIPK2基因水稻种子的发芽率、主根长和芽长、幼苗的丙二醛(MDA)和脯氨酸的含量,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性,以及与胁迫相关的5个基因的表达。【结果】在盐胁迫下,与野生型相比,转基因水稻具有更好的发芽率、主根长和芽长。野生型和转基因水稻两者的脯氨酸含量增加,转基因水稻的积累量显著高于野生型,但是转基因水稻MDA含量增加幅度小于野生型。野生型和转基因水稻幼苗SOD酶活性均增加,但转基因植株的酶活性显著高于野生型;二者POD酶活性呈现先升高后下降的趋势,但是二者活性没有显著的差别;转基因水稻的CAT活性也呈现先升高后下降的趋势,然而野生型水稻的CAT活性在盐胁迫下没有显著的变化。高盐处理后,野生型和转基因水稻的5个与胁迫相关的基因表达倍数都增加,与野生型相比,转基因水稻的OsP5CS1、OsSOD、OsCATB和OsLEA3的表达量显著升高,而OsPOX1基因的表达量变化不显著。【结论】过量表达TsIPK2基因能够通过增强水稻的渗透调节能力、抗氧化胁迫能力并调节胁迫相关基因的表达,以提高水稻的耐盐性。 展开更多
关键词 盐芥 TsIPK2基因 过量表达 盐胁迫 转基因水稻
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基于近红外光谱分析技术的转Bt基因水稻种子及其亲本快速鉴别方法 预览
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作者 林萍 高明清 陈永明 《江苏农业科学》 2019年第13期72-75,共4页
提出一种利用近红外光谱技术快速鉴别转Bt基因水稻种子及其亲本的新方法,采用近红外光谱仪获取转Bt基因的水稻种子克螟稻1号、克螟稻2号及其亲本秀水11的反射光谱特征曲线,采用ISOMAP流形降维法对采集到的光谱数据进行非线性降维,提取4... 提出一种利用近红外光谱技术快速鉴别转Bt基因水稻种子及其亲本的新方法,采用近红外光谱仪获取转Bt基因的水稻种子克螟稻1号、克螟稻2号及其亲本秀水11的反射光谱特征曲线,采用ISOMAP流形降维法对采集到的光谱数据进行非线性降维,提取45个特征波长,用于建模输入,利用最小二乘支持向量机方法建立光谱反射率值与类别值之间的预测模型。3种水稻种子样本数均为350个,共计1050个样本,将其分成900个训练集样本和150个预测集样本,预测准确率达94.67%。说明本研究提出的方法对于转Bt基因水稻种子及其亲本具有很好的分类和鉴别能力,且检测过程比传统理化检测手段简单,操作性强。该研究为今后转基因水稻种子及其亲本的快速无损检测提供了新的方法。 展开更多
关键词 转基因水稻 ISOMAP流形降维 最小二乘支持向量机 近红外光谱技术
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转基因水稻蛋白试纸条与PCR定性检测技术比较研究 预览
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作者 刘倩琪 《热带农业工程》 2019年第1期7-9,共3页
以现有的5个转基因水稻品系汕优63(TT51-1)、科丰6号(KF6)、Ⅱ优科丰6号(Ⅱ优KF6)、克螟稻(KMD)、M12为研究材料,分别采用PCR定性法和蛋白试纸条法2种方法进行检测,比较了2种方法的一致性、灵敏度、准确性,并明确了2种检测方法的适用范围。
关键词 转基因水稻 PCR定性检测技术 蛋白试纸条检测技术
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利用基因拆分技术培育耐草甘膦转基因水稻的研究 预览
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作者 董玉凤 王旭静 +2 位作者 宋亚亚 靳茜 王志兴 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期344-353,共10页
耐除草剂转基因水稻基因飘流可能产生的环境安全问题是人们关注的焦点之一,并已成为耐除草剂转基因水稻能否在我国生产上发挥效益的限制因素。基因拆分技术能够有效地控制转基因目标性状飘流,为培育耐除草剂转基因水稻提供新的途径和思... 耐除草剂转基因水稻基因飘流可能产生的环境安全问题是人们关注的焦点之一,并已成为耐除草剂转基因水稻能否在我国生产上发挥效益的限制因素。基因拆分技术能够有效地控制转基因目标性状飘流,为培育耐除草剂转基因水稻提供新的途径和思路。本研究将耐除草剂基因G2-aroA拆分成N端(EPSPSn,1~295aa)和C端(EPSPSc,296~435aa),分别与SspDnaE蛋白内含肽的N端(Intein-N)和C端(Intein-C)连接形成融合基因EPSPSn-In与Ic-EPSPSc,并分别通过农杆菌介导法转入受体材料中花11。Southern杂交证明转基因水稻En-12和Ec-22中外源基因为单拷贝插入。侧翼序列分析证明转基因水稻En-12和Ec-22中外源基因分别插入第2和第6染色体。利用四引物法筛选出转基因水稻En-12和Ec-22的纯合系,并通过有性杂交获得同时含有EPSPSn-In与Ic-EPSPSc的转基因水稻En×Ec。草甘膦抗性分析发现,单独含有1个基因片段的转基因水稻En-12和Ec-22不具有耐受草甘膦特性,而同时含有2个基因片段的转基因水稻En×Ec具有耐受草甘膦的特性,说明拆分后的2个蛋白片段在intein的介导下重新组装成完整有功能蛋白,并赋予转基因水稻耐受草甘膦的特性。转基因水稻En×Ec与含有完整G2-aroA转基因水稻G2-6相比,其耐受草甘膦的能力有所下降,但能够满足生产需求。本研究结果为利用基因拆分技术培育转基因耐草甘膦水稻提供了科学依据,同时也为利用基因工程手段培育转基因杂交稻提供了新的技术平台。 展开更多
关键词 耐草甘膦 转基因水稻 基因拆分技术
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狂犬病病毒G蛋白在水稻中的表达及遗传稳定性鉴定
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作者 申雪静 张二芹 +8 位作者 许倩茹 刘林科 万博 刘运超 孙亚宁 赵东 牛香香 邓瑞广 张改平 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期204-211,共8页
狂犬病病毒(Rabies virus, RV) G蛋白是唯一能激发机体产生细胞免疫,并诱导产生中和抗体的结构蛋白,也是狂犬病病毒中唯一糖基化的结构蛋白,此外还介导细胞融合、受体结合以及参与病毒的致病等。本研究将优化的狂犬病G基因(GenBank登录... 狂犬病病毒(Rabies virus, RV) G蛋白是唯一能激发机体产生细胞免疫,并诱导产生中和抗体的结构蛋白,也是狂犬病病毒中唯一糖基化的结构蛋白,此外还介导细胞融合、受体结合以及参与病毒的致病等。本研究将优化的狂犬病G基因(GenBank登录号:ABI53869.1)序列插入到中间载体pMP3上,成功构建中间载体pMP3-G,然后将中间载体pMP3-G和植物载体pCAMBIA1300通过双酶切、连接,成功地构建了植物表达载体pCAMBIA1300-G。挑选空白未转基因水稻(Oryza sativa)种子TP309消毒,在愈伤诱导培养基上31℃光照3 d,使其长出愈伤组织,用已经转入狂犬病G基因的根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105去侵染愈伤组织,并与愈伤组织共培养3 d,将狂犬病G基因导入水稻愈伤组织中。愈伤组织再经过潮霉素抗性筛选、分化、出芽、生根,获得313株植株,取313株植株的叶片通过十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyl trimethyl ammonium bromide, CTAB)法提取叶片基因组DNA,对其进行PCR扩增,经核酸胶进行初步鉴定,有79株为阳性,经过炼苗、种植共获得50株阳性表达植株。分别随机挑选50株阳性植株的种子,切半,标记,将不含胚乳的一半研磨,用提取液提取蛋白后通过抗原检测试纸条和Western blot检测,结果表明,G蛋白在转基因水稻种子中成功表达,且具有良好的反应原性。从50株阳性表达植株中挑选出高表达、反应原性最好的4个株系,将这4个株系T1代中与检测阳性结果相对应的含有胚乳的另一半种子进行组织培养种植,在植株移栽大田前后,再次用CTAB法提取T1代植株叶片基因组DNA,并以水稻的内源基因水稻淀粉分支酶基因(rice starch branching enzyme,RBE4)为内参基因,通过相对荧光定量PCR(relative fluorescence quantitative PCR)方法筛选阳性植株中的纯合植株,通过绝对荧光定量PCR(absolute real-time PCR)计算纯合植株的拷贝数,结果显示,132株植株中35株为� 展开更多
关键词 狂犬病病毒 G基因 转基因水稻 荧光定量 纯合子 拷贝数
双重数字PCR在转基因水稻检测中的应用 被引量:1
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作者 朱鹏宇 张亮亮 +3 位作者 杜智欣 王晨光 朱水芳 付伟 《植物检疫》 北大核心 2018年第4期52-56,共5页
本研究基于微滴式数字PCR(droplet Digital PCR,dd PCR)技术,针对转基因水稻Bt汕优63外源基因建立了双重数字PCR检测方法。该方法在常见的转基因品系中具有很好的特异性,转基因样品绝对定量检测范围为0.5%~100%,定量检测限可达0.5%... 本研究基于微滴式数字PCR(droplet Digital PCR,dd PCR)技术,针对转基因水稻Bt汕优63外源基因建立了双重数字PCR检测方法。该方法在常见的转基因品系中具有很好的特异性,转基因样品绝对定量检测范围为0.5%~100%,定量检测限可达0.5%、定性检出限可达0.05%。与目前的标准检测技术相比,双重数字PCR具有更低的定量检出限,可以更好的满足实际检测的需要。 展开更多
关键词 微滴数字PCR 转基因水稻 定量检测 拷贝数
利用Real-time PCR对4个转Bt基因水稻的非预期效应研究 预览
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作者 孙玥 王春雷 +5 位作者 欧阳林娟 周大虎 傅军如 朱昌兰 贺浩华 彭小松 《核农学报》 CSCD 北大核心 2018年第11期2107-2118,共12页
转基因水稻中外源基因的转入可能会形成新的代谢产物,造成农艺性状的改变等,这些均不利于农业生产的非预期效应。为探究转基因水稻是否存在非预期效应,本研究以江西农业大学选育的4个转Bt基因恢复系为试验材料,通过反向PCR扩增侧翼序列... 转基因水稻中外源基因的转入可能会形成新的代谢产物,造成农艺性状的改变等,这些均不利于农业生产的非预期效应。为探究转基因水稻是否存在非预期效应,本研究以江西农业大学选育的4个转Bt基因恢复系为试验材料,通过反向PCR扩增侧翼序列并比对,用216对SSR引物对供试材料进行全基因组背景分析,再以Real-time PCR检测外源基因插入位点上下游100 kb内所有基因表达差异,并对光合色素含量及9个主要农艺性状进行显著性分析。结果表明,cry1C侧翼序列片段大小为1 276bp,定位在水稻第11号染色体上,cry2A侧翼序列片段大小为948 bp,定位在水稻第12号染色体上;昌恢121T、昌恢891T、昌恢T025T、R205选T的遗传背景回复率分别为95.60%、88.43%、93.52%、94.44%;基因表达分析显示试验组和对照组在cry1C、cry2A插入位置上下游100 kb内所有侧翼基因的表达水平均无显著性差异;进一步调查发现,试验组和对照组的光合色素含量及9个农艺性状无显著性差异。综上,cry1C和cry2A插入水稻基因组没有改变侧翼100 kb内基因表达水平,且4个转基因水稻并未产生非预期效应。本研究结果为探究转基因水稻的非预期效应评价提供了一定的理论参考。 展开更多
关键词 转基因水稻 非预期效应 REAL-TIME PCR 侧翼序列 遗传背景回复率
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转基因水稻U41三引物检测方法的建立
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作者 张斌 阮颖 《基因组学与应用生物学》 CSCD 北大核心 2018年第3期1308-1314,共7页
对于研究转基因农作物来说,建立其检测方法至关重要。本研究利用TAIL-PCR法,获得了转基因水稻U41的右旁侧序列,结果显示T—DNA插入位点在水稻1号染色体第22013~22014之间。通过设计引物扩增左旁侧序列,建立了U41转化事件特异性检... 对于研究转基因农作物来说,建立其检测方法至关重要。本研究利用TAIL-PCR法,获得了转基因水稻U41的右旁侧序列,结果显示T—DNA插入位点在水稻1号染色体第22013~22014之间。通过设计引物扩增左旁侧序列,建立了U41转化事件特异性检测的方法,可以从含0.1%目的基因中扩增出529bp的特异性条带;还建立了三引物检测的方法,能快速和准确地鉴定U41的纯合株系。这些方法的建立,缩短了获得U41纯合体的时间,对U41的检测、研究和利用具有实用价值。 展开更多
关键词 纯合子鉴定 转基因水稻 三引物检测法 旁侧序列 事件特异性检测
水稻茉莉酸甲酯和白叶枯病菌诱导型启动子的克隆及功能鉴定 被引量:2
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作者 李甜甜 李丽丽 +1 位作者 陈利红 高利芬 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2018年第3期689-695,共7页
诱导型启动子能灵活、精确的调控外源基因的表达,推动了植物基因工程技术的发展。在前期研究中,我们发现了一个萜类合成酶基因LOC_Os02g36140,该基因的表达受茉莉酸甲酯(MeJA)诱导。在本研究中,我们通过PCR技术分离了该基因5'端的2 2... 诱导型启动子能灵活、精确的调控外源基因的表达,推动了植物基因工程技术的发展。在前期研究中,我们发现了一个萜类合成酶基因LOC_Os02g36140,该基因的表达受茉莉酸甲酯(MeJA)诱导。在本研究中,我们通过PCR技术分离了该基因5'端的2 272 bp启动子序列,命名为PRJA140,构建了PRJA140启动子驱动gusA基因表达的融合载体,转化水稻后对该基因的启动子活性进行分析。MeJA和白叶枯病菌处理转基因水稻后发现,和对照相比,转基因水稻根和叶片中GUS基因的表达明显上调,说明PRJA140启动子能被MeJA和白叶枯病菌诱导,是一个诱导型启动子。 展开更多
关键词 诱导型启动子 茉莉酸甲酯 白叶枯病菌 转基因水稻
转基因水稻品系‘Bt汕优63’微滴式数字PCR定量检测方法的建立 预览
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作者 陈雪娇 宗凯 +3 位作者 孙娟娟 李云飞 郑海松 姚剑 《中国农学通报》 2018年第6期131-136,共6页
为进一步提升转基因水稻的定量检测效率,推动转基因定量标识制度的实施,对转基因水稻品系‘Bt汕优63’成分进行微滴式数字PCR法定量检测研究。基于转基因水稻品系‘Bt汕优63’的外源插入片段和水稻蔗糖磷酸盐合成酶基因SPS,选择、设计... 为进一步提升转基因水稻的定量检测效率,推动转基因定量标识制度的实施,对转基因水稻品系‘Bt汕优63’成分进行微滴式数字PCR法定量检测研究。基于转基因水稻品系‘Bt汕优63’的外源插入片段和水稻蔗糖磷酸盐合成酶基因SPS,选择、设计和合成高效特异性的内外源基因引物探针,用于微滴式数字PCR法扩增‘Bt汕优63’的内源基因和品系特异序列。引物探针优化实验表明,SPS60-F/R/P和‘Bt汕优63’品系基因-F/R/P适用于dd PCR双通道法定量检测‘Bt汕优63’成分。准确度验证试验表明,测得值与标准值相近,偏差分别为0.03、0.15、0.15、0.03。测得值的SD介于0.08-0.48之间,RSD介于4.86%-15.10%之间,小于欧盟要求25%,准确度较好。本研究建立的转基因水稻品系‘Bt汕优63’微滴数字PCR定量检测方法简便高效、准确度高,可用于农产品和食品中转基因水稻‘Bt汕优63’成分的定量检测。 展开更多
关键词 微滴式数字PCR 双通道法 定量检测 转基因水稻 'Bt汕优63’
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中国与全球抗逆转基因水稻研究的可视化对比分析 预览
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作者 程景民 胡婧超 《中国农学通报》 2018年第14期149-154,共6页
为比较中国与全球抗逆转基因水稻研究状况及热点与趋势,采用可视化分析方法,以Web of Science核心数据库和CNKI数据库2001—2015年抗逆转基因水稻相关文献为样本,借助CitespaceⅢ软件对该研究的科学知识图谱进行可视化分析。就作者合作... 为比较中国与全球抗逆转基因水稻研究状况及热点与趋势,采用可视化分析方法,以Web of Science核心数据库和CNKI数据库2001—2015年抗逆转基因水稻相关文献为样本,借助CitespaceⅢ软件对该研究的科学知识图谱进行可视化分析。就作者合作来说,中国高产作者合作分散,如钱前、陈亮等独立作者较多,仅刘永胜、牛向丽等少数几人形成区域小规模合作;而对比全球,密集且形成了多个联系密切的作者合作网络;通过对比研究热点,共性为都注重本身技术及抗病、抗虫研究,而在中国还包括抗环境胁迫、抗除草剂基因等研究,更趋于多元化。中国在该领域应加强核心作者间的合作,加快资源整合与共享;并关注全球在该领域的最新研究,重视国际间合作,促进抗逆转基因水稻研究的快速发展。 展开更多
关键词 抗逆 转基因水稻 对比分析 CiteSpaceⅢ 研究热点
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XCRK基因在水稻与细菌性条斑病菌互作中的功能解析 预览
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作者 张玉霞 崔玉超 +2 位作者 李燕 周丹 陈亮 《厦门大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2018年第2期201-207,共7页
XCRK(Xoc-associated receptor-like kinase)基因是对水稻细菌性条斑病(bacterial leaf streak,BLS)致病菌侵染应答的差异蛋白质组学研究中发现的一个拟抗病基因.生物信息学分析显示该基因位于水稻的1号染色体上,编码一个含有322个氨基... XCRK(Xoc-associated receptor-like kinase)基因是对水稻细菌性条斑病(bacterial leaf streak,BLS)致病菌侵染应答的差异蛋白质组学研究中发现的一个拟抗病基因.生物信息学分析显示该基因位于水稻的1号染色体上,编码一个含有322个氨基酸的蛋白激酶.组织表达分析显示XCRK基因在根、茎、叶、花序等组织中均有表达,且其表达受高盐、H 2O 2和脱落酸(ABA)的诱导.为了探究XCRK基因在水稻BLS中的作用,通过PCR扩增XCRK基因编码区,构建超量表达载体,并转化水稻愈伤组织获得了超量表达XCRK基因的转基因水稻植株;同时构建了RNA干扰(RNAi)表达载体,并获得了抑制表达XCRK基因的转基因水稻植株.对T1代转基因植株进行了BLS抗性分析,结果显示:超量表达XCRK基因明显增强了转基因水稻对BLS致病菌的抗性;相反地,抑制表达XCRK基因的转基因水稻对BLS致病菌的敏感性则略有增强.综上结果表明XCRK基因正调控水稻对BLS的抗性,这为进一步研究该基因的作用机制提供了理论依据. 展开更多
关键词 细菌性条斑病 超量表达载体 RNAi表达载体 转基因水稻
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转GO基因水稻杂交后代对稻瘟病及纹枯病的田间抗性评价 预览 被引量:1
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作者 谢戎 刘成元 +2 位作者 李永洪 何珊 向箭宇 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期965-972,共8页
【目的】发掘新的稻瘟病和纹枯病抗源对于育种和生产上有重要意义.【方法】在水尾病圃对46个已稳定的转GO基因杂交后代进行了3年的田间自然诱发鉴定.【结果】①转GO基因水稻杂交后代株系中,既抗稻瘟病又抗纹枯病的株系很少,高感稻瘟病... 【目的】发掘新的稻瘟病和纹枯病抗源对于育种和生产上有重要意义.【方法】在水尾病圃对46个已稳定的转GO基因杂交后代进行了3年的田间自然诱发鉴定.【结果】①转GO基因水稻杂交后代株系中,既抗稻瘟病又抗纹枯病的株系很少,高感稻瘟病和中感纹枯病的株系较多.②株系HR332既高抗稻瘟病,又中抗纹枯病;HR333及HR336对稻瘟病和纹枯病均表现为中抗;HR321高抗稻瘟病,中感纹枯病;HR337及HR339抗纹枯病,但感或高感稻瘟病.【结论】这些株系可作为新抗源在抗稻瘟病及纹枯病育种中利用. 展开更多
关键词 转基因水稻 葡萄糖氧化酶基因 稻瘟病 纹枯病 抗性
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抗除草剂转基因水稻的研究进展
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作者 温莉娴 周菲 邹玉兰 《植物保护学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期954-960,共7页
水稻是我国乃至世界上最重要的粮食作物之一,杂草是影响水稻产量和品质的主要因素。近年来,抗除草剂转基因水稻的研究与应用取得了较大进展。本文概述了稻田的主要杂草及防除方法,简述了稻田常用的几种除草剂及其作用机理,介绍了全球抗... 水稻是我国乃至世界上最重要的粮食作物之一,杂草是影响水稻产量和品质的主要因素。近年来,抗除草剂转基因水稻的研究与应用取得了较大进展。本文概述了稻田的主要杂草及防除方法,简述了稻田常用的几种除草剂及其作用机理,介绍了全球抗除草剂转基因作物的现状,着重阐述了抗除草剂转基因水稻的研发进展、应用及未来发展方向。 展开更多
关键词 杂草 转基因水稻 抗除草剂基因
数字PCR在转基因水稻拷贝数鉴定中的应用 预览
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作者 王永 兰青阔 +6 位作者 赵新 陈锐 沈晓玲 李文 张耀中 李亮 王勤英 《生物技术通报》 CSCD 北大核心 2018年第3期53-58,共6页
转基因作物中插入外源基因拷贝数等分子特征是转基因生物安全评价的重要内容,但是以往的拷贝数鉴定方法存在操作性差等不足,因此亟需操作简单且准确的鉴定方法。应用微流滴数字PCR方法鉴定转基因水稻中插入目的基因的拷贝数,测试方法的... 转基因作物中插入外源基因拷贝数等分子特征是转基因生物安全评价的重要内容,但是以往的拷贝数鉴定方法存在操作性差等不足,因此亟需操作简单且准确的鉴定方法。应用微流滴数字PCR方法鉴定转基因水稻中插入目的基因的拷贝数,测试方法的可行性。实验结果表明,4个重复样品的目的 /内标准基因的比值分别为674/662、516/541、737/759、528/571,均值为0.97,因此验证的目的基因拷贝数为1,与Southern杂交结果一致。微流滴数字PCR作为插入外源基因拷贝数鉴定的新方法,具有操作简单、准确度高、设计灵活等优点。 展开更多
关键词 转基因水稻 目的基因拷贝数 微流滴数字PCR
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转基因水稻秸秆还田对土壤硝化反硝化微生物群落的影响 预览 被引量:5
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作者 王沛譞 徐焱 宋亚娜 《中国生态农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第1期8-15,共8页
转基因作物可能通过根系分泌物和植株残体组成的改变及外源基因的转移释放令土壤微生物群落产生变化,影响土壤微生物的生态功能。氨氧化细菌和反硝化细菌是驱动土壤硝化和反硝化过程的关键微生物,其群落结构的变化直接关系土壤氮素的转... 转基因作物可能通过根系分泌物和植株残体组成的改变及外源基因的转移释放令土壤微生物群落产生变化,影响土壤微生物的生态功能。氨氧化细菌和反硝化细菌是驱动土壤硝化和反硝化过程的关键微生物,其群落结构的变化直接关系土壤氮素的转化与利用。本研究利用荧光定量PCR和PCR-DGGE技术分析了转cry1Ac/cpti双价抗虫基因水稻‘Kf8’秸秆还田降解过程中,土壤氨氧化细菌和反硝化细菌群落丰度与组成的变化,探讨转基因水稻是否存在影响稻田土壤氮素转化与N2O排放的可能。结果显示:无论是氨氧化细菌amoA基因还是反硝化细菌nirS基因,其丰度在转基因水稻‘Kf8’与非转基因水稻‘Mh86’的秸秆还田土壤中都没有显著差异;转基因水稻‘Kf8’和非转基因水稻‘Mh86’秸秆还田降解过程中0?10cm土层中的amoA基因丰度均显著高于10?20cm及20?30cm土层(P<0.05);各深度土层中的nirS基因丰度均存在随秸秆还田时间延长而增加的趋势。水稻秸秆还田降解过程中,转基因水稻‘Kf8’的土壤氨氧化细菌和反硝化细菌的群落多样性指数及组成,均与非转基因水稻‘Mh86’没有显著差异。相关分析结果表明土壤氨氧化细菌和反硝化细菌群落组成均与水稻秸秆还田时间存在显著相关性(P=0.002),反硝化细菌群落组成还与土层深度显著相关(P=0.024)。本研究表明转cry1Ac/cpti抗虫基因水稻秸秆还田对稻田土壤硝化和反硝化关键微生物群落不会产生明显影响。就土壤微生物群落而言,转cry1Ac/cpti抗虫基因水稻秸秆还田不存在影响土壤氮素转化与N2O排放的可能。 展开更多
关键词 转基因水稻 秸秆还田 氨氧化细菌 AMOA基因 反硝化细菌 nirS基因 群落结构
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