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电影“表达”的多重解读——以电影《我能说》为例 预览
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作者 陆秀英 郭紫薇 《电影文学》 北大核心 2019年第1期132-134,共3页
电影是一种综合表达的艺术,借助于声音、语言、画面等诸多要素,通过叙事发展、场景安排、基调设置等手段再现生活世界。本文以电影《我能说》为例,阐释电影主人公为了“存在感”“爱”和“正义”而表达的述求,分析电影中表达的隐喻如何... 电影是一种综合表达的艺术,借助于声音、语言、画面等诸多要素,通过叙事发展、场景安排、基调设置等手段再现生活世界。本文以电影《我能说》为例,阐释电影主人公为了“存在感”“爱”和“正义”而表达的述求,分析电影中表达的隐喻如何一步步推动电影叙事和情节发展。影片巧妙选择了表达的场景,将幽默、温情、坚强、善良融和形成表达的基调。论文对电影“表达”进行多重解读,关注当代人怎样走向表达的世界,思考电影该表达什么、怎样表达、如何达到表达效果等问题。 展开更多
关键词 表达 表达述求 表达艺术 表达基调
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论表达的力量 预览
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作者 潘涌 《首都师范大学学报:社会科学版》 CSSCI 北大核心 2019年第3期33-40,共8页
文章从新时代国家语言能力建设的战略高度出发,探究人类语言所具有的深沉丰富之意蕴。文章认为社会化的语言转化为生命个体的言语,而个体的言语旨在输出性地表达;输出性的表达则能够砥砺成主体的表达力,思想主体的表达力最终必然升级为... 文章从新时代国家语言能力建设的战略高度出发,探究人类语言所具有的深沉丰富之意蕴。文章认为社会化的语言转化为生命个体的言语,而个体的言语旨在输出性地表达;输出性的表达则能够砥砺成主体的表达力,思想主体的表达力最终必然升级为一种感动心魂、新人耳目的卓越创造力。文章强调"表达"行为在人的精神生产链中具有基础性重要作用,反思汉语历史传统与当代汉语语用生活中"表达"行为的被忽视和深度缺席,指出国家语言能力建设的核心就在于全面提升社会各阶层成员的语言表达能力(简称为表达力)。由于优质表达力指向精神创造力,因此,这无疑是国家发展战略中一种外"软"内"硬"、独特强大的"真实力"(true power)--国家现代化进程中的一种不可估量、动态发展的"核心资本",完全能够并且一定可以获得深远和可持续的战略性增值。 展开更多
关键词 语言 言语 表达 表达 创造力
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大鲵Agouti基因的克隆、表达及多态性分析 预览
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作者 姜维 邓捷 +3 位作者 王启军 赵虎 孔飞 张红星 《四川动物》 北大核心 2019年第2期121-129,共9页
刺鼠信号蛋白(Agouti)是哺乳动物和鸟类黑色素合成过程中的重要调控因子,影响动物的体色(毛色)。为研究Agouti在两栖动物体色形成过程中的作用,本研究利用PCR技术扩增得到大鲵Andrias davidianus的Agouti基因部分cDNA序列并进行了相关... 刺鼠信号蛋白(Agouti)是哺乳动物和鸟类黑色素合成过程中的重要调控因子,影响动物的体色(毛色)。为研究Agouti在两栖动物体色形成过程中的作用,本研究利用PCR技术扩增得到大鲵Andrias davidianus的Agouti基因部分cDNA序列并进行了相关的生物信息学分析,进一步使用实时荧光定量PCR检测了大鲵Agouti基因在皮肤、肝脏等10个组织和器官中的表达情况,并检测了4种不同体色大鲵皮肤组织中Agouti基因的表达量。同时采用直接测序法,比较了不同体色大鲵Agouti基因编码区的序列差异。结果显示,大鲵Agouti基因cDNA序列长1 068 bp,开放阅读框399 bp,编码132个氨基酸残基。蛋白质同源性分析表明,大鲵Agouti蛋白具有与其他物种一致的保守Agouti结构域,其蛋白质序列与两栖爬行类序列相似性较高,与哺乳动物和鸟类相似性较低。系统进化分析显示,大鲵Agouti基因与高山倭蛙Nanorana parkeri、美国短吻鳄Alligator mississippiensis、中华鳖Pelodiscus sinensis等物种的亲缘关系较近。实时荧光定量PCR分析表明,Agouti基因mRNA在大鲵不同组织中均有表达,皮肤中的表达量最高。在4种不同体色大鲵皮肤组织中,黄色皮肤中的Agouti基因表达量高于其他体色。不同体色大鲵Agouti基因编码区序列一致。大鲵Agouti基因独特的序列特征及其表达的组织特异性暗示了其在两栖动物体色形成过程中可能具有与其他物种不同的调控机制。这些结果为进一步研究Agouti在大鲵体色形成过程中的作用提供了基础资料。 展开更多
关键词 大鲵 体色 黑色素 Agouti基因 表达
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浅谈建筑室内环境艺术设计中意念与情感的表达 预览
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作者 李琼 《建材发展导向》 2019年第18期54-55,共2页
对于设计师而言,室内空间虽然具有物理边界,但却仍然具有无限的可能性,优秀的设计师可以在有限的空间环境中展现出天地人的和谐统一,并且根据客户的需求,选择不同的设计风格,灵活应用各种艺术设计的语言,比如色彩、线条、装饰等,为不同... 对于设计师而言,室内空间虽然具有物理边界,但却仍然具有无限的可能性,优秀的设计师可以在有限的空间环境中展现出天地人的和谐统一,并且根据客户的需求,选择不同的设计风格,灵活应用各种艺术设计的语言,比如色彩、线条、装饰等,为不同客户打造出独居匠心的室内空间环境。这样的空间环境同时符合实用和审美的特质,对于人们改善生活状态、提升心性品质具有莫大的帮助。 展开更多
关键词 室内环境 艺术设计 意念和情感 表达
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央视春晚公益广告的社会情感导向与表达 预览
5
作者 杨金宏 《视听》 2019年第2期185-187,共3页
央视春晚公益广告将内容聚焦于反映和构建社会情感,系列广告片围绕中国人过年的人情世故生动表现普通中国百姓的亲情、乡情以及家国情怀,通过多模态隐喻表达,将广告所建构的情感世界真实而生动呈现,引起受众较大的情感共鸣。广告之所以... 央视春晚公益广告将内容聚焦于反映和构建社会情感,系列广告片围绕中国人过年的人情世故生动表现普通中国百姓的亲情、乡情以及家国情怀,通过多模态隐喻表达,将广告所建构的情感世界真实而生动呈现,引起受众较大的情感共鸣。广告之所以成功,很大程度上是因为了解中国故事背后所潜藏的情感背景,熟悉中国人在除夕之夜收看春晚的心理期待,准确把握住了受众观看的心理需求。通过广告的情感功能,央视春晚公益广告实现了良好的媒介引导功效。 展开更多
关键词 央视春晚 公益广告 社会情感 表达
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结肠癌组织中p53与Ki67的表达及临床意义分析 预览
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作者 刘明剑 李文娟 《国际医药卫生导报》 2019年第16期2695-2698,共4页
目的 分析结肠癌组织中p53、Ki67的表达水平及临床意义,为病情及预后评估提供参考依据。方法 选取2017年1月至2018年7月入住本院结肠癌根治术患者手术切除标本67例,通过免疫组化法测定结肠癌组织以及癌旁黏膜组织中p53、Ki67的表达情况... 目的 分析结肠癌组织中p53、Ki67的表达水平及临床意义,为病情及预后评估提供参考依据。方法 选取2017年1月至2018年7月入住本院结肠癌根治术患者手术切除标本67例,通过免疫组化法测定结肠癌组织以及癌旁黏膜组织中p53、Ki67的表达情况,分析p53、Ki67阳性表达与临床病理特征的关系;并比较p53、Ki67阳性与阴性表达患者之间生存情况。结果 p53、Ki67在结肠癌组织中的阳性率分别为71.64%(48/67)、82.09%(55/67),均明显高于癌旁黏膜组织,差异均有统计学意义(均P<0.05);Ⅰ期+Ⅱ期、高分化、无淋巴结转移以及未达浆膜层患者p53阳性表达率均低于Ⅲ期+Ⅳ期、中低分化、有淋巴结转移、侵及浆膜层,差异均有统计学意义(均P<0.05);随访至2017年7月,p53阳性患者3年存活率为64.58%,明显低于p53阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 结肠癌组织中p53、Ki67均呈明显高表达,Ki67与细胞增殖有关,p53可作为评估结肠癌患者病情及预后的重要指标。 展开更多
关键词 结肠癌 P53 KI67 表达 临床意义
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尼美舒利对结肠癌细胞凋亡及β-catenin蛋白表达的影响 预览
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作者 吴小娟 万云 +2 位作者 黄家明 温建军 顾秋平 《临床医药实践》 2019年第8期563-566,共4页
目的:探讨尼美舒利对结肠癌细胞凋亡及β-catenin蛋白表达的影响。方法:体外培养结肠癌细胞HT-29,设对照组和尼美舒利组,采用透射电镜检测结肠癌细胞HT-29结构变化,采用细胞增殖实验(MTT)检测结肠癌细胞HT-29凋亡情况,采用过Westernblot... 目的:探讨尼美舒利对结肠癌细胞凋亡及β-catenin蛋白表达的影响。方法:体外培养结肠癌细胞HT-29,设对照组和尼美舒利组,采用透射电镜检测结肠癌细胞HT-29结构变化,采用细胞增殖实验(MTT)检测结肠癌细胞HT-29凋亡情况,采用过Westernblot法(WB)检测结肠癌细胞HT-29中β-catenin蛋白表达情况。结果:透射电镜48h后与透镜前比较,尼美舒利组结肠癌细胞HT-29的染色质浓缩、聚集,形成均匀一致的细小团块,聚集于核膜处,并可以观察到细胞膜下陷包裹核碎片及细胞器的凋亡小体,对照组结肠癌细胞HT-29结构无明显变化;尼美舒利组8h、24h、48h细胞抑制率明显高于对照组(P<0.05);尼美舒利组8h、24h、48h结肠癌细胞HT-29中β-catenin蛋白表达量明显低于对照组(P<0.05)。结论:尼美舒利可有效促使结肠癌细胞凋亡,其机制可能与降低β-catenin蛋白表达有关。 展开更多
关键词 尼美舒利 结肠癌 细胞凋亡 Β-CATENIN蛋白 表达
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幼儿音乐教育中如何加强幼儿节奏感知与表达
8
作者 李连国 《课程教育研究》 2019年第26期224-225,共2页
音乐是幼儿教育中的重要组成部分,音乐可以陶冶人的情操,消除人的紧张情绪,使人感到身心愉悦,提高审美情趣与审美能力。幼儿教育是学生的启蒙教育,对于幼儿未来的学习与成长有着重要的作用与价值。节奏感是音乐的生命线,不同的节奏能够... 音乐是幼儿教育中的重要组成部分,音乐可以陶冶人的情操,消除人的紧张情绪,使人感到身心愉悦,提高审美情趣与审美能力。幼儿教育是学生的启蒙教育,对于幼儿未来的学习与成长有着重要的作用与价值。节奏感是音乐的生命线,不同的节奏能够给人不同的美感。幼儿音乐教育只有加强对节奏感知与表达的培养,才能够让学生更加深刻地体会到音乐之美。 展开更多
关键词 幼儿音乐教育 节奏感知 表达
骨肉瘤患者在不同新辅助化疗方案实施前后多药耐药相关蛋白在mRNA及蛋白水平中的表达变化 预览
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作者 李战鹏 《河北医药》 CAS 2019年第3期432-434,438共4页
目的探讨骨肉瘤患者在不同新辅助化疗方案实施前后多药耐药相关蛋白(MRP)在mRNA以及蛋白水平中的表达变化。方法选取2016年1月至2017年1月收治的骨肉瘤患者48例,根据辅助化疗方案不同分为2组,检测患者化疗前后患者MRP表达情况。结果同... 目的探讨骨肉瘤患者在不同新辅助化疗方案实施前后多药耐药相关蛋白(MRP)在mRNA以及蛋白水平中的表达变化。方法选取2016年1月至2017年1月收治的骨肉瘤患者48例,根据辅助化疗方案不同分为2组,检测患者化疗前后患者MRP表达情况。结果同一化疗方案以及不同化疗方案治疗前后,患者MRP表达无明显区别(P >0.05);化疗前后患者CyelinD1阳性表达同预后无显著相关性(P >0.05),化疗前患者Bel-2阳性表达同预后无显著相关性(P >0.05),化疗后患者阳性表达同预后显著相关(P<0.05),阳性表达越低预后质量越好。结论新辅助化疗方案对骨肉瘤患者MRP无明显影响,耐药性主要受肿瘤组织的影响,临床上检测MRP表达可以为化疗方案的制定提供指导。 展开更多
关键词 骨肉瘤 辅助化疗方案 多药耐药相关蛋白 蛋白水平 表达
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让孩子行走在想象的美好中——以《雨靴里的麻雀》为例 预览
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作者 陈秀敏 《课外语文》 2019年第16期174-175,共2页
作文教学不应采用呆板的形式而让孩子生厌,更无权束缚孩子的想象力。在孩子的世界里,有精彩的童话故事,有无限的可能性;在孩子的世界里,他们的自由想象空间是没有界限的,他们的想象是美好、可贵且独有的。教师可以尝试用多样的教学手段... 作文教学不应采用呆板的形式而让孩子生厌,更无权束缚孩子的想象力。在孩子的世界里,有精彩的童话故事,有无限的可能性;在孩子的世界里,他们的自由想象空间是没有界限的,他们的想象是美好、可贵且独有的。教师可以尝试用多样的教学手段与形式,如绘本教学,引领孩子驰骋在广阔的想象原野里,让他们畅快地呼吸,自由地表达。在教师艺术性地引导下,让孩子们能把这份想象、感受化为自己的语言,自由表达。 展开更多
关键词 绘本 自由 想象 表达
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试论翻译的理解与表达 预览
11
作者 颜竞彦 顾雅琪 《海外英语》 2019年第11期169-170,共2页
一般来说,理解与表达是动态翻译过程的两个组成部分。理解是表达的前提和基础,表达是理解的表现形式和结果。对于理解,要求应正确、透彻;对于表达,要求得体而充分。理解与表达是翻译实践活动的主体与核心。研究翻译的理解和表达,有助于... 一般来说,理解与表达是动态翻译过程的两个组成部分。理解是表达的前提和基础,表达是理解的表现形式和结果。对于理解,要求应正确、透彻;对于表达,要求得体而充分。理解与表达是翻译实践活动的主体与核心。研究翻译的理解和表达,有助于提高翻译实践的水平,是具有意义的。 展开更多
关键词 翻译 理解 表达
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猪伪狂犬病病毒感染对PK-15细胞增殖和热休克蛋白27、70和90表达的影响 预览
12
作者 方娟 陈指龙 +3 位作者 黎陈 张逢 伍小松 杨青 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1441-1448,共8页
研究猪伪狂犬病病毒(PRV)-YY株感染对宿主细胞增殖和热休克蛋白(HSP)27、70和90表达的影响。用Reed-Muench法测定PRV-YY滴度后,用不同病毒量感染PK-15细胞,采用iCELLigence实时无标记细胞功能分析仪监测细胞的增殖,并用实时荧光定量PCR(... 研究猪伪狂犬病病毒(PRV)-YY株感染对宿主细胞增殖和热休克蛋白(HSP)27、70和90表达的影响。用Reed-Muench法测定PRV-YY滴度后,用不同病毒量感染PK-15细胞,采用iCELLigence实时无标记细胞功能分析仪监测细胞的增殖,并用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和免疫印迹试验(Western blot)分别检测感染后细胞中病毒核酸含量及三种HSPs mRNA和蛋白质表达的变化。结果表明,当用80 TCID50和100 TCID50的病毒量(滴度为106TCID50·0.1 mL^-1)感染细胞时,在所监测的时间内细胞指数均显著低于对照组;当感染60 h时,除10 TCID50感染组外,其余各组的细胞指数均极显著低于对照组(P<0.01);用10 TCID50病毒感染细胞60 h时,细胞中病毒核酸含量达峰值;当病毒黏附结束即感染0 h时,HSP70和90 mRNA的转录升高(P<0.01),两者分别在感染6、12 h后表达降低(P<0.01),而HSP27在感染0 h升高(P<0.05),3 h时极显著高于对照组(P<0.01),但在感染48 h后其表达降低;PRV感染细胞后三种HSP蛋白的变化趋势基本与其mRNA水平的变化类似(部分时间点不同)。结果表明,一定滴度的PRV可显著抑制PK-15细胞的增殖,PRV感染可诱导PK-15细胞迅速发生应激反应,使HSP27、70和90表达快速升高,三种HSP的快速应答可能在保护细胞免受PRV-YY的感染损伤起着重要作用。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 细胞增殖 热休克蛋白 表达
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浅论乡土景观元素在乡村景观中的表达与营造 预览
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作者 陈国菲 李鹏宇 《现代园艺》 2019年第15期166-167,共2页
乡土景观元素来源于生产生活与自然环境,对于体现乡土文化有重要意义。根据乡村景观元素的特性将其分为乡村自然景观元素与乡村文化景观元素2大类,探讨它在乡村景观中的表达与营造,以保护与传承、融合与升华为理念,从其分类上来探讨乡... 乡土景观元素来源于生产生活与自然环境,对于体现乡土文化有重要意义。根据乡村景观元素的特性将其分为乡村自然景观元素与乡村文化景观元素2大类,探讨它在乡村景观中的表达与营造,以保护与传承、融合与升华为理念,从其分类上来探讨乡村景观元素在乡村景观中的具体运用手法。 展开更多
关键词 景观元素 乡土文化 表达 营造 乡村景观
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湖羊NR5A1基因全序列克隆和表达特征分析 预览
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作者 李隐侠 张俊 +4 位作者 钱勇 孟春花 王慧利 曹少先 仲跻峰 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第1期114-121,共8页
以江苏特色绵羊品种——湖羊为研究对象,克隆湖羊NR5A1基因全序列,分析其序列特征,并对湖羊组织和大、小卵泡中NR5A1表达特征进行研究。结果表明,湖羊NR5A1基因全长19016bp,含6个外显子和5个内含子;编码区全长1386bp,编码461个氨基酸残... 以江苏特色绵羊品种——湖羊为研究对象,克隆湖羊NR5A1基因全序列,分析其序列特征,并对湖羊组织和大、小卵泡中NR5A1表达特征进行研究。结果表明,湖羊NR5A1基因全长19016bp,含6个外显子和5个内含子;编码区全长1386bp,编码461个氨基酸残基,包含经典的DNA结合区(DBD)和配体结合区(LBD)。RT-PCR结果显示NR5A1基因在湖羊组织中广泛表达,其中在卵巢中高表达,脾脏次之;qRT-PCR和Westernblot结果显示在湖羊大卵泡中NR5A1mRNA和蛋白质水平均显著高于小卵泡,表明NR5A1基因参与调控湖羊卵泡发育,并与繁殖性能有关。 展开更多
关键词 湖羊 NR5A1基因 序列特征 表达
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浅谈语文学科素养的提升 预览
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作者 徐伟娜 《学周刊》 2019年第6期101-102,共2页
语文学科核心素养是学生在积极的语言实践活动中积累与构建起来,并在真实的语言运用情境中表现出来的语言能力及其品质;是学生在语文学习中获得的语言知识与语言能力,思维方法与思维品质,情感、态度与价值观的综合体现。主要包括“语言... 语文学科核心素养是学生在积极的语言实践活动中积累与构建起来,并在真实的语言运用情境中表现出来的语言能力及其品质;是学生在语文学习中获得的语言知识与语言能力,思维方法与思维品质,情感、态度与价值观的综合体现。主要包括“语言建构与运用”“思维发展与提升”“审美鉴赏与创造”“文化传承与理解”四个方面。那么,如何通过语文教学提升学生的语文学科素养呢?笔者认为,阅读和表达能力的培养是提升学生语文学科素养的根本途径和基本手段。 展开更多
关键词 学科素养 阅读 表达
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实时荧光定量RT-PCR检测宫颈癌组织中HIC1基因表达的应用研究 预览
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作者 谭毅菁 招钜泉 吴校连 《现代诊断与治疗》 CAS 2019年第9期1461-1462,共2页
目的探究宫颈癌组织中HIC1基因表达以实时荧光定量RT-PCR(FQ-FCR)检测的价值。方法将2015年3月~2017年9月期间医院行宫颈癌手术治疗获取的48例宫颈癌组织为观察组,收集同期25例正常宫颈组织为对照组,提取组织RNA,以FQ-FCR法对组织中HIC... 目的探究宫颈癌组织中HIC1基因表达以实时荧光定量RT-PCR(FQ-FCR)检测的价值。方法将2015年3月~2017年9月期间医院行宫颈癌手术治疗获取的48例宫颈癌组织为观察组,收集同期25例正常宫颈组织为对照组,提取组织RNA,以FQ-FCR法对组织中HIC1基因表达进行检测,比较两组HIC1基因水平变化,分析观察组不同病理分型HIC1基因表达差异。结果观不同组织中HIC1-m RNA表达量具有明显差异,P<0.05,正常组织HIC1-m RNA表达量高于宫颈癌、宫颈原位癌,P<0.05,宫颈癌HIC1-m RNA表达量低于宫颈原位癌,P<0.05。结论 FQ-FCR用于宫颈癌相关基因HIC1检测准确度高,将HIC1基因应用于疾病早期诊断、癌变分型、预后判断具有重要意义。 展开更多
关键词 HIC1 RT-PCR 宫颈癌伤 表达
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黄色瘤胃球菌纤维小体脚手架蛋白ScaC基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 预览
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作者 曹平华 李晓霞 +3 位作者 赵龙妹 武晓红 许会英 马禹龙 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第7期1917-1925,共9页
为获得纤维小体(cellulosome)的基本元件,本试验以滩羊瘤胃液微生物混合DNA为模板,根据黄色瘤胃球菌纤维小体的脚手架蛋白ScaC基因序列(GenBank登录号:JN109634.1)设计特异性引物,扩增纤维小体脚手架蛋白基因,并对其进行克隆、测序及核... 为获得纤维小体(cellulosome)的基本元件,本试验以滩羊瘤胃液微生物混合DNA为模板,根据黄色瘤胃球菌纤维小体的脚手架蛋白ScaC基因序列(GenBank登录号:JN109634.1)设计特异性引物,扩增纤维小体脚手架蛋白基因,并对其进行克隆、测序及核苷酸和氨基酸序列分析;同时构建脚手架蛋白基因原核表达载体,分析其在大肠杆菌中的表达情况。结果显示,试验利用1对引物同时成功克隆获得2个脚手架蛋白编码基因,其中一个基因全长867bp,编码288个氨基酸,命名为ScaC2基因;另一个基因全长870bp,编码289个氨基酸,命名为ScaC7基因。核苷酸序列分析表明,脚手架蛋白基因ScaC2与ScaC7的核苷酸序列相似性为74.1%,ScaC2基因与黄色瘤胃球菌AGY80P318及ScaC7基因与黄色瘤胃球菌DA640P037ScaC基因核苷酸序列相似性均为99%;氨基酸保守序列分析显示,ScaC2和ScaC7氨基酸序列均具有典型的脚手架蛋白结构域,含有1个Ⅰ型黏附域和1个Ⅰ型锚定域。蛋白表达分析显示,ScaC2和ScaC7基因均能在大肠杆菌中实现可溶性表达,表达产物大小约为33ku。本试验克隆获得的纤维小体的脚手架蛋白基因ScaC2和ScaC7可为后续人工纤维小体的构建提供基本材料。 展开更多
关键词 纤维小体 脚手架蛋白 克隆 表达
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大肠杆菌高效表达屎肠球菌纤维素结合域谷氨酸脱羧酶的条件优化 预览
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作者 杨胜远 林谦 +1 位作者 张晓宁 甄嘉仪 《食品与机械》 北大核心 2019年第7期31-38,共8页
为了规避大肠杆菌( Escherichia coli )自身基因组表达的天然GAD的干扰,以再生无定形纤维素(regenerated amorphous cellulose,RAC)特异性吸附纤维素结合结构域谷氨酸脱羧酶(cellulose-binding domain-glutamate decarboxylase,CBD-GAD... 为了规避大肠杆菌( Escherichia coli )自身基因组表达的天然GAD的干扰,以再生无定形纤维素(regenerated amorphous cellulose,RAC)特异性吸附纤维素结合结构域谷氨酸脱羧酶(cellulose-binding domain-glutamate decarboxylase,CBD-GAD)制备的RAC-CBD-GAD固定化酶作为评价指标,采用单因素和田口试验设计法对 E. coli GDMCC60445高效表达CBD-GAD的条件进行了优化。结果表明, E. coli GDMCC60445表达CBD-GAD的适宜培养基为改良LB (Luria-Bertani)培养基,其组成为胰蛋白胨8 g/L、酵母膏 6 g/L、NaCl 10 g/L 、pH 5.5;适宜的培养条件为温度37 ℃、摇床转速120 r/min、培养时间24 h。在该适宜条件下,RAC-CBD-GAD活力为(419.79±10.37) U/g,与田口法预测值一致,较优化前提高了(30.28±3.22)%。 展开更多
关键词 纤维素结合域 谷氨酸脱羧酶 表达 屎肠球菌 大肠杆菌 培养条件
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NCAPH、AXL和YAP在喉癌中的表达及与预后的关系 预览
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作者 黄永阳 张超 周延辉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第13期2078-2083,共6页
目的观察非染色体结构维持蛋白凝缩蛋白复合体Ⅰ亚单位H(NCAPH)、受体酪氨酸激酶AXL和Hippo信号通路的转录共激活因子Yes结合蛋白(Y AP)在喉癌中的表达特征,探讨NCAPH、AXL和YAP的表达与喉癌临床病理因素和预后间的相关性。方法采用免... 目的观察非染色体结构维持蛋白凝缩蛋白复合体Ⅰ亚单位H(NCAPH)、受体酪氨酸激酶AXL和Hippo信号通路的转录共激活因子Yes结合蛋白(Y AP)在喉癌中的表达特征,探讨NCAPH、AXL和YAP的表达与喉癌临床病理因素和预后间的相关性。方法采用免疫组化的方法分别检测NCAPH、AXL和YAP在40例喉癌组织和40例声带息肉组织中的表达情况并比较各组间的差异性,分析目标蛋白的表达与各临床病理参数及其预后的关系,并进行生存分析。结果 NCAPH、AXL和YAP在喉癌组织中的表达均明显高于声带息肉组织,差异有统计学意义(均P<0.05);AXL和YAP在喉癌组织中的表达强度呈正相关(r=0.379,P<0.05);NCAPH、AXL和YAP在喉癌组织中的表达与临床分期、淋巴结转移、组织分化程度有关(均P<0.05),在年龄、解剖分区中差异无统计学意义(均P>0.05);NCAPH和YAP在喉癌组织中的表达强度与患者的生存状况有关(均P<0.05)。结论 NCAPH、AXL和YAP在喉癌中的表达对于喉癌预后判断有重要指导意义,联合检测NCAPH、AXL和YAP有望作为一组有实用价值的喉癌预后判断的客观指标。 展开更多
关键词 非染色体结构维持蛋白凝缩蛋白复合体Ⅰ亚单位H AXL Hippo信号通路的转录共激活因子Yes结合蛋白 喉癌 表达 预后
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重组杆状病毒表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的优化及蛋白免疫原性研究 预览
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作者 李天增 潘晓梅 +3 位作者 张伟 师小潇 徐龙飞 贺笋 《中国兽药杂志》 2019年第8期30-35,共6页
为获得高蛋白含量和良好免疫原性的抗原,利用杆状病毒表达体系进行猪圆环病毒2型(PCV2)重组Cap蛋白表达,采取正交试验设计确定三因素(High five细胞浓度、病毒感染量、蛋白表达时间)的最佳组合,对重组病毒株vBac-SP-PCV2的表达条件进行... 为获得高蛋白含量和良好免疫原性的抗原,利用杆状病毒表达体系进行猪圆环病毒2型(PCV2)重组Cap蛋白表达,采取正交试验设计确定三因素(High five细胞浓度、病毒感染量、蛋白表达时间)的最佳组合,对重组病毒株vBac-SP-PCV2的表达条件进行优化,利用His Bind蛋白质纯化试剂盒对表达产物进行纯化,纯化蛋白作为标准蛋白用于Western blotting中蛋白质定量分析和蛋白免疫原性检测。结果显示:2.0×10^6/mLHigh five细胞浓度、1.5MOI病毒感染量、蛋白表达时间168h为重组PCV2-rCap蛋白表达的最佳条件,表达产物纯化良好,并能被PCV2多克隆抗体识别,免疫豚鼠可诱导产生高水平PCV2抗体。研究表明纯化PCV2-rCap蛋白可作为标准蛋白用于后续表达蛋白的定量分析和PCV2亚单位疫苗研发候选抗原。 展开更多
关键词 PCV2-rCap蛋白 表达 纯化 免疫原性
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