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龙蛭汤对衣霉素诱导人脐静脉内皮细胞内GRP78和CHOP的影响
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作者 蒙家泉 陈永斌 +2 位作者 刘启华 何泉 邹玲 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期454-459,共6页
目的探讨龙蛭汤对衣霉素(TM)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)内质网应激及其标志蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和特异性蛋白C增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)表达的影响。方法制备龙蛭汤含药血清,体外培养HUVEC细胞株,分为对照组(10%空白血... 目的探讨龙蛭汤对衣霉素(TM)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)内质网应激及其标志蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和特异性蛋白C增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)表达的影响。方法制备龙蛭汤含药血清,体外培养HUVEC细胞株,分为对照组(10%空白血清),TM组(10%空白血清+3μg/mL TM),TM+龙蛭汤组(10%含药血清+3μg/mL TM),龙蛭汤组(10%含药血清),继续培养6 h。使用CCK-8法比较各组细胞活力,细胞免疫荧光法和Western Blot比较各组GRP78和CHOP蛋白表达,RT-PCR法比较各组GRP78和CHOP mRNA表达。结果与对照组比较,TM组HUVEC细胞活力下降,GRP78、CHOP蛋白及mRNA表达增加(均P<0.05);与TM组比较,TM+龙蛭汤组、龙蛭汤组HUVEC细胞活力升高,GRP78、CHOP蛋白及mRNA表达降低(均P<0.05)。结论龙蛭汤可通过下调GRP78、CHOP表达,减轻细胞过度的内质网应激反应,提高HUVEC细胞活力。 展开更多
关键词 龙蛭汤 人脐静脉内皮细胞 内质网应激 葡萄糖调节蛋白78 特异性蛋白C增强子结合蛋白同源蛋白
内质网应激对白藜芦醇代谢的影响 预览
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作者 姜佳蕾 蒋昆谕 +3 位作者 牛慧敏 董松涛 王诗琪 孟胜男 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期961-964,共4页
目的研究内质网应激(ERS)对白藜芦醇代谢的影响。方法将肝癌HepG2细胞分为正常组和模型组,模型组细胞用毒胡萝卜素诱导制备ERS模型。采用Western blotting测定2组细胞中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的蛋白表达及差异,检测Ⅱ相药物代谢酶UGT... 目的研究内质网应激(ERS)对白藜芦醇代谢的影响。方法将肝癌HepG2细胞分为正常组和模型组,模型组细胞用毒胡萝卜素诱导制备ERS模型。采用Western blotting测定2组细胞中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的蛋白表达及差异,检测Ⅱ相药物代谢酶UGT1A1、UGT1A9蛋白的表达变化;将2组细胞分别制备成细胞裂解液,以白藜芦醇为模型药,进行葡萄糖醛酸化反应的体外孵育实验。用超高效液相色谱分别测定白藜芦醇及其葡萄糖醛酸化代谢产物在2种孵育体系中的含量,并计算其白藜芦醇葡萄糖醛酸化代谢产物生成速率的变化。结果模型组HepG2细胞的GRP78蛋白表达水平较正常组显著升高(P<0.001),提示HepG2细胞ERS模型构建成功;模型组细胞的Ⅱ相药物代谢酶UGT1A1、UGT1A9蛋白表达较正常组显著增加(P<0.05);白藜芦醇在模型组细胞裂解液中的代谢速率较正常组显著降低(P<0.001)。结论毒胡萝卜素能成功诱导肝癌HepG2细胞发生ERS,可引起Ⅱ相药物代谢酶UGT1A1、UGT1A9蛋白表达发生明显变化,进而导致白藜芦醇葡萄糖醛酸化代谢发生改变。 展开更多
关键词 内质网应激 白藜芦醇 葡萄糖调节蛋白78 尿苷二磷酸葡萄糖酸转移酶1A1 尿苷二磷酸葡萄糖酸转移酶1A9
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黄连素抑制GRP78表达促进三阴乳腺癌细胞凋亡的研究 预览
3
作者 赵虹 沃立科 +2 位作者 胡袁媛 王安妮 卢德赵 《浙江中医药大学学报》 CAS 2019年第5期407-412,共6页
[目的]通过检测黄连素对三阴乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)细胞株MDA-MB-231细胞凋亡及葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)表达的影响,探讨黄连素抗TNBC的机制。[方法]以MTT法检测不同浓度黄连素对MDA... [目的]通过检测黄连素对三阴乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)细胞株MDA-MB-231细胞凋亡及葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)表达的影响,探讨黄连素抗TNBC的机制。[方法]以MTT法检测不同浓度黄连素对MDA-MB-231细胞增殖的影响,筛选黄连素的处理浓度。将MDA-MB-231细胞分为对照组、40μmol·L-1黄连素组、60μmol·L-1黄连素组、免疫球蛋白重链结合蛋白诱导剂X(immunoglobulin heavy chain binding protein inducer X,BiX)组,以及BiX联合40μmol·L-1黄连素组、BiX联合60μmol·L-1黄连素组。相应药物处理24h后,应用流式细胞术检测细胞凋亡情况,并以Western blot检测细胞GRP78和凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达。[结果]40μmol·L-1以上浓度的黄连素可剂量依赖性抑制MDA-MB-231细胞增殖。与对照组比较,BiX组细胞凋亡率降低(P<0.05)、GRP78和Bcl-2表达增高(P<0.01,P<0.001)、Bax表达减低(P<0.05)。与BiX组比较,BiX联合40、60μmol·L-1黄连素组细胞凋亡率增加(P<0.01),GRP78和Bcl-2表达减低(P<0.01,P<0.01),Bax表达增加(P<0.01)。[结论]黄连素可以促进MDA-MB-231细胞凋亡,其机制可能是通过下调GRP78的表达,从而降低Bcl-2表达,并促进Bax的表达。 展开更多
关键词 三阴乳腺癌 黄连素 葡萄糖调节蛋白78 细胞凋亡 细胞增殖 免疫球蛋白重链结合蛋白诱导剂X
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促红细胞生成素对高氧脑损伤新生大鼠CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白及葡萄糖调节蛋白78表达的影响
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作者 何欣 金福 +1 位作者 赵寒阳 许春花 《延边大学医学学报》 CAS 2019年第1期12-15,共4页
[目的]探讨促红细胞生成素(EPO)对高氧脑损伤新生大鼠CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达的影响.[方法]取足月新生Wistar大鼠随机分为正常对照组(FiO2为21%)、高氧组(FiO2高于85%)和高氧+EPO组(FiO2高于85... [目的]探讨促红细胞生成素(EPO)对高氧脑损伤新生大鼠CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达的影响.[方法]取足月新生Wistar大鼠随机分为正常对照组(FiO2为21%)、高氧组(FiO2高于85%)和高氧+EPO组(FiO2高于85%).将正常对照组新生大鼠置于室内空气中饲养,高氧组和高氧+EPO组大鼠置于FiO2高于85%的室内玻璃箱中饲养.实验第1 d起,高氧+EPO组大鼠每日腹腔注射给予EPO(800 U/kg),实验第1,3,7,14 d时测定各组大鼠脑组织湿/干质量(W/D)比值,采用蛋白免疫印记法检测脑组织中CHOP,GRP78蛋白表达水平.[结果]高氧组新生大鼠第1,3,7,14 d时的脑组织W/D值较正常对照组显著升高(P<0.05),高氧下暴露时间越长,W/D值升高越显著;高氧+EPO组新生大鼠脑组织含水量较高氧组显著降低(P<0.05).高氧组第1,3,7,14 d时的CHOP和GRP78蛋白表达水平较正常对照组显著升高(P<0.05),高氧+EPO组CHOP,GRP78蛋白表达水平较高氧组显著降低(P<0.05).[结论] EPO可缓解高氧引起的新生大鼠脑水肿,对高氧脑损伤具有神经保护作用,其机制认为可能与下调CHOP和GRP78蛋白表达有关系. 展开更多
关键词 高氧脑损伤 重组人促红细胞生成素 CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白 葡萄糖调节蛋白78 大鼠
ASPP2调控GRP78在L-NAME诱导胎盘滋养细胞凋亡中的作用 预览
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作者 谢琳 张辉 +7 位作者 丁宁 王艳华 吴凯 曹军 王青青 刘昆 张慧萍 姜怡邓 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期765-770,共6页
目的 探讨p53凋亡刺激蛋白2(apoptosis stimulating protein 2 of p53,ASPP2)调控葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)在N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-nitro-arginine methyl ester,L-NAME)诱导胎盘滋养细胞凋亡中的作用,... 目的 探讨p53凋亡刺激蛋白2(apoptosis stimulating protein 2 of p53,ASPP2)调控葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)在N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-nitro-arginine methyl ester,L-NAME)诱导胎盘滋养细胞凋亡中的作用,为临床研究妊娠期高血压疾病提供理论依据。方法 体外培养HTR-8/SVneo人胎盘滋养细胞,分为对照组(0 μmol·L -1 L-NAME)和L-NAME组(100 μmol·L -1 L-NAME),干预48 h后,分别采用Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术和吖啶橙/溴化乙锭染色,检测胎盘滋养细胞凋亡水平的变化;运用Western blot检测caspase-12、GRP78和ASPP2的蛋白变化;ASPP2干扰腺病毒感染人胎盘滋养细胞后,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ASPP2的mRNA表达水平,Western blot检测GRP78的蛋白表达水平;给予100 μmol·L -1 L-NAME干预48 h后,Western blot和免疫荧光分别检测caspase-12和GRP78的蛋白表达。结果 与对照组相比,L-NAME组胎盘滋养细胞凋亡水平明显增加( P <0.05);吖啶橙染色显示,与对照组相比,L-NAME组细胞多数呈现鲜亮的橙色,晚期凋亡细胞数明显增加;同时caspase-12、GRP78和ASPP2蛋白的表达明显增加( P <0.05, P <0.01);干扰ASPP2后,caspase-12和GRP78蛋白表达明显降低( P <0.05)。结论 下调ASPP2可降低GRP78的表达,进而抑制L-NAME诱导的胎盘滋养细胞凋亡。 展开更多
关键词 p53凋亡刺激蛋白2 葡萄糖调节蛋白78 N-硝基-L-精氨酸甲酯 胎盘滋养细胞 细胞凋亡 妊娠期高血压疾病
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靶向GRP78增强小鼠抗TfR单克隆抗体抑制神经胶质瘤细胞增殖 预览
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作者 文雪 沈关心 《基础医学与临床》 CSCD 2019年第10期1410-1416,共7页
目的研究抗转铁蛋白受体(TfR)抗体作用于胶质瘤细胞是否会诱导内质网(ER)应激,以及靶向应激分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)能否促进抗TfR抗体的抗瘤效应。方法Western blot检测抗TfR抗体作用胶质瘤细胞后GRP78和CHOP的表达。构建针对GRP7... 目的研究抗转铁蛋白受体(TfR)抗体作用于胶质瘤细胞是否会诱导内质网(ER)应激,以及靶向应激分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)能否促进抗TfR抗体的抗瘤效应。方法Western blot检测抗TfR抗体作用胶质瘤细胞后GRP78和CHOP的表达。构建针对GRP78的小干扰RNA,小干扰RNA转染胶质瘤细胞后与抗TfR抗体共孵育,流式细胞计量术(FCM)检测肿瘤细胞的增殖和凋亡。结果抗TfR抗体能够诱导ER应激反应,提高胶质瘤细胞GRP78和CHOP的表达水平。与对照组相比,转染针对GRP78的小干扰RNA的胶质瘤细胞与抗TfR抗体作用后,增殖显著减少,凋亡显著增加(P<0.05)。结论抗TfR抗体的抗肿瘤作用触发了内质网应激反应,沉默应激分子GRP78的表达,可增强抗TfR抗体的抗瘤效应。 展开更多
关键词 转铁蛋白受体 胶质瘤 葡萄糖调节蛋白78
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利拉鲁肽抑制ERS改善高脂饮食诱导的DN肾损害 预览
7
作者 梁日英 符畅 +3 位作者 梁华 徐芬 王美君 蔡梦茵 《新医学》 2019年第11期826-831,共6页
目的探讨内质网应激(ERS)机制是否参与调节利拉鲁肽改善高脂饮食诱导的糖尿病肾病(DN)。方法采用高脂饮食喂养7~8周龄C56BL/6小鼠共12周以诱导早期DN,正常饮食喂养小鼠作为对照组。将高脂饮食小鼠分为高脂饮食(HFD)组及高脂饮食+利拉鲁... 目的探讨内质网应激(ERS)机制是否参与调节利拉鲁肽改善高脂饮食诱导的糖尿病肾病(DN)。方法采用高脂饮食喂养7~8周龄C56BL/6小鼠共12周以诱导早期DN,正常饮食喂养小鼠作为对照组。将高脂饮食小鼠分为高脂饮食(HFD)组及高脂饮食+利拉鲁肽干预(HFD+Lira)组,HFD+Lira组予腹腔注射利拉鲁肽400μg/(kg·d)8周。HFD组与对照组均予相对应体积的生理盐水。每2周监测小鼠体质量及血糖情况,干预8周后评估/观察小鼠胰岛功能、胰岛素抵抗、尿蛋白、肾脏组织形态结构以及肾脏组织ERS通路蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)与剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1s)的表达水平。结果HFD组体质量、空腹血糖和体脂含量均高于对照组;利拉鲁肽干预8周后,与HFD组比较,HFD+Lira组体质量、空腹血糖和体脂含量均改善(P均<0.01)。HFD组血糖、尿蛋白高于对照组、胰岛素抵抗较对照组明显,HFD+Lira组血糖及尿蛋白均低于HFD组、胰岛素抵抗较HFD组改善(P均<0.017)。对照组肾小球、肾小管结构正常,HFD组可见肾小管区域大量空泡形成、肾小球囊腔扩大、大量脂质沉积,与HFD组相比,HFD+Lira组肾小管区域空泡减少、扩大的肾小球囊腔及脂质沉积腔改善。HFD组GRP78与XBP1s蛋白表达水平均较对照组高,HFD+Lira组XBP1s蛋白的表达水平低于HFD组(P均<0.017)。结论利拉鲁肽可能通过抑制ERS通路而改善高脂饮食喂养诱导的DN肾损害。 展开更多
关键词 尿病肾病 胰高血素样肽1 内质网应激 葡萄糖调节蛋白78 剪接型X-盒结合蛋白1 利拉鲁肽
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麦门冬汤对肺纤维化大鼠肺功能及内质网应激作用的影响
8
作者 申萌萌 南亚楠 +6 位作者 唐磊 田如玉 朱曼 康荻 张瑞颖 牛建昭 李亚东 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期37-43,共7页
目的探讨麦门冬汤改善博来霉素所致肺纤维化模型大鼠肺功能及内质网应激(ERS)作用的相关机制。方法健康雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、麦门冬汤1组(麦门冬与大枣质量比4∶1)、麦门冬汤2组(麦门冬与大枣质量比20∶1),经气管插管雾... 目的探讨麦门冬汤改善博来霉素所致肺纤维化模型大鼠肺功能及内质网应激(ERS)作用的相关机制。方法健康雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、麦门冬汤1组(麦门冬与大枣质量比4∶1)、麦门冬汤2组(麦门冬与大枣质量比20∶1),经气管插管雾化注射博来霉素建立肺纤维化大鼠模型。造模后第14天每日早晚2次灌胃麦门冬汤,连续给药20 d。观察大鼠一般情况,通过HE和Masson染色观察肺组织的病理变化,检测大鼠用力肺活量(FVC)、0.4秒率(FEV0.4/FVC)、质量FVC、吸气阻力(Ri)、呼气阻力(Re)、肺顺应性(Cydn),并用Western blot和免疫组织化学染色分析肺组织中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达情况。结果与正常组相比,模型组FVC降低、0.4秒率升高、质量FVC下降、Cydn降低;与模型组相比,麦门冬汤1组和麦门冬汤2组FVC升高、0.4秒率降低,麦门冬汤2组质量FVC回升,麦门冬汤1组和麦门冬汤2组Cydn升高。病理可见模型组大鼠的肺组织实变区内慢性炎性细胞浸润,大量胶原沉积,高表达的GRP78和CHOP蛋白主要定位于空泡化的Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡs)。麦门冬汤2组大鼠炎症缓解,胶原沉积减少,肺组织中GRP78和CHOP蛋白的表达均减少。结论麦门冬汤能够明显改善大鼠肺功能,减少肺间质胶原沉积,可能与调节纤维化肺组织实变区内AECⅡs的GRP78和CHOP蛋白表达,缓解ERS压力,恢复AECⅡs的正常功能有关。 展开更多
关键词 麦门冬汤 内质网应激 Ⅱ型肺泡上皮细胞 葡萄糖调节蛋白78 C/EBP同源蛋白 大鼠
Survivin shRNA-APC双基因对结肠癌裸鼠皮下移植瘤细胞内质网通路中GRP78、Caspase-12 表达的影响 预览
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作者 袁禧先 张书娟 张玉健 《临床内科杂志》 CAS 2019年第6期415-418,共4页
目的探讨细胞增殖因子短截型核糖核酸-腺瘤样结肠息肉基因(Survivin shRNA-APC)双基因对内质网应激凋亡通路中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-12(Caspase-12)表达的影响。方法将40只健康裸鼠随机分成5组(每组8只)... 目的探讨细胞增殖因子短截型核糖核酸-腺瘤样结肠息肉基因(Survivin shRNA-APC)双基因对内质网应激凋亡通路中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-12(Caspase-12)表达的影响。方法将40只健康裸鼠随机分成5组(每组8只):SurvivinshRNA-APC双基因组(简称双基因组)、APC组、Survivin shRNA组、空载组和空白组。将前期构建好的Survivin shRNA-APC、APC、Survivin shRNA、空载稳转株及人HT-29结肠癌细胞分别接种至对应组裸鼠的左前腋下,采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-timePCR)及免疫组化方法分别检测5组移植瘤组织细胞中GRP78、Caspase-12mRNA及蛋白的表达情况。结果与空白组、空载组比较,双基因组、APC组、SurvivinshRNA组GRP78.Caspase-12mRNA及蛋白的表达明显增强(P<0.05),与APC组和Survivin shRNA组比较,双基因组增加更显著(P<0.05),空载组与空白组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论Survivin shRNA-APC双基因可能通过抑制Survivin表达,上调内质网通路中GRP78、Caspase-12mRNA及蛋白表达,最终诱导结肠癌细胞发生凋亡,且Survivin shRNA-APC双基因调控GRP78、Caspase-12mRNA及蛋白表达、诱导细胞凋亡能力较APC组和Survivin shRNA组强。 展开更多
关键词 短截型核核酸-腺瘤样结肠息肉基因双基因 内质网应激 葡萄糖调节蛋白78 半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-12 细胞凋亡
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姜黄素对ERS诱导NASH大鼠肝细胞保护作用的研究 预览
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作者 李敏 黄婷婷 +4 位作者 姜双燕 杨洋 陈莎莎 张文佳 赵丽娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期2050-2054,共5页
目的:探讨姜黄素是否通过抑制内质网应激(ERS)来减轻非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝细胞凋亡,从而发挥对肝脏的保护作用。方法:30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(n=10)、模型组(n=10)及姜黄素组(n=10)。模型组和姜黄素组采用高脂饮食... 目的:探讨姜黄素是否通过抑制内质网应激(ERS)来减轻非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝细胞凋亡,从而发挥对肝脏的保护作用。方法:30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(n=10)、模型组(n=10)及姜黄素组(n=10)。模型组和姜黄素组采用高脂饮食喂养4周以建立NASH模型。继续喂养4周,姜黄素组每日给予姜黄素(200 mg/kg)灌胃,模型组与正常对照组给予等量生理盐水。4周后处死大鼠,留取血液及肝脏组织,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平;HE染色观察肝组织病理学变化;Western blot法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)蛋白的表达;TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠血清ALT和AST水平均显著升高,姜黄素组大鼠血清ALT和AST较模型组显著降低(P<0.05);同时,姜黄素组大鼠的肝细胞脂肪变性及炎性程度均较模型组减轻,未见明显坏死灶。模型组GRP78和CHOP蛋白的表达水平均较正常对照组显著增加,姜黄素组GRP78和CHOP的表达水平较模型组显著降低(P<0.01)。TUNEL结果表明,模型组大鼠肝组织内凋亡细胞较正常对照组增多,姜黄素组大鼠的凋亡肝细胞较模型组减少。结论:高脂饮食能诱发肝脏细胞发生过度ERS,从而启动细胞凋亡,导致NASH的发生。姜黄素减轻肝细胞凋亡的作用机制可能与其抑制ERS有关。 展开更多
关键词 姜黄素 内质网应激 非酒精性脂肪性肝炎 葡萄糖调节蛋白78 C/EBP同源蛋白
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子宫内膜癌组织中G蛋白偶联受体30和葡萄糖调节蛋白78的表达及其临床意义
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作者 叶佳 吕蓓 +3 位作者 张阳 张金伟 马锦琪 张俊 《上海医学》 CAS 北大核心 2019年第6期351-356,共6页
目的研究子宫内膜组织、癌组织中G蛋白偶联受体30(GPR30)和葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)的表达变化,分析其与子宫内膜癌患者临床病理参数间的关系,探讨其临床意义。方法选取正常子宫内膜增生期组织(正常组)、子宫内膜增生不伴不典型增生(EH... 目的研究子宫内膜组织、癌组织中G蛋白偶联受体30(GPR30)和葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)的表达变化,分析其与子宫内膜癌患者临床病理参数间的关系,探讨其临床意义。方法选取正常子宫内膜增生期组织(正常组)、子宫内膜增生不伴不典型增生(EH)组织(EH组)、不典型增生(AH)组织(AH组)各30例,子宫内膜癌组织(癌症组)69例。采用免疫组织化学方法分析159例组织中GPR30和GRP78蛋白的表达情况。采用χ~2检验比较各组间和癌症组不同临床病理参数患者间GPR30和GRP78阳性表达率的差异,采用Spearmen相关性分析子宫内膜癌组织中GPR30与GRP78表达的关系。结果正常组、EH组、AH组、癌症组的GPR30和GRP78蛋白阳性表达率依次升高,GPR30蛋白的阳性表达率分别为13.33%(4/30)、26.67%(8/30)、60.00%(18/30)、75.36%(52/69),组间两两比较差异均有统计学意义(P值均<0.05);GRP78蛋白的阳性表达率分别为6.67%(2/30)、20.00%(6/30)、43.33%(13/30)、62.32%(43/69),组间两两比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。癌症组中,子宫内膜癌国际妇产科协会(FIGO)分期高、组织分级高、肌层浸润深度≥1/2、雌激素受体(ER)表达阳性者的GPR30蛋白阳性表达率高(P值均<0.05),不同年龄、淋巴结转移与否、绝经与否、孕激素受体(PR)表达与否的患者GPR30蛋白阳性表达率的差异无统计学意义(P值均>0.05);子宫内膜癌FIGO分期高、组织分级高、淋巴结转移者GRP78蛋白阳性表达率高(P值均<0.05),不同年龄、不同肌层浸润深度、绝经与否、ER和PR表达与否的患者GRP78蛋白阳性表达率的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。Spearman相关分析显示,子宫内膜癌组织中GPR30与GRP78的表达呈正相关(r=0.735,P<0.05)。结论子宫内膜癌组织中GPR30、GRP78蛋白表达均高于正常增生期、EH和AH组织,其阳性表达程度与子宫内膜恶性程度有关。GPR30与GRP78的表达在子宫内膜癌组织中呈正相关 展开更多
关键词 子宫内膜肿瘤 G蛋白偶联受体30 葡萄糖调节蛋白78 内质网应激
组蛋白去乙酰化酶诱导肺泡上皮细胞发生内质网应激 预览
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作者 朱红兰 刘代顺 龚玲 《遵义医学院学报》 2019年第2期182-185,190共5页
目的探讨组蛋白去乙酰化酶是否可诱导肺泡上皮细胞发生内质网应激。方法衣霉素单独作用于A549细胞,组蛋白去乙酰化酶抑制剂(SAHA)和内质网应激抑制剂(4-PBA)分别与衣霉素共同作用于A549细胞。RT-PCR检测GRP78 mRNA表达,Western blot检测... 目的探讨组蛋白去乙酰化酶是否可诱导肺泡上皮细胞发生内质网应激。方法衣霉素单独作用于A549细胞,组蛋白去乙酰化酶抑制剂(SAHA)和内质网应激抑制剂(4-PBA)分别与衣霉素共同作用于A549细胞。RT-PCR检测GRP78 mRNA表达,Western blot检测GRP78、HDAC2和HDAC6的蛋白水平。结果衣霉素作用于A549细胞后,上调GRP78 mRNA的表达而诱导内质网应激效应(P<0.01);但4-PBA处理A549细胞后,GRP78蛋白的表达受抑制(P=0.000)。同时衣霉素处理A549细胞后引起HDAC2、HDAC6蛋白表达增加(P=0.000,P=0.005),加入SAHA后,HDAC2、HDAC6蛋白的表达受抑制(P=0.000),GRP78蛋白的表达也降低(P=0.000),内质网应激受抑制。结论在肺泡上皮细胞中,HDAC2、HDAC6可诱导发生内质网应激。 展开更多
关键词 蛋白去乙酰化酶 内质网应激 葡萄糖调节蛋白78
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葡萄糖调节蛋白78对单核巨噬细胞分化的影响
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作者 胡继军 王梅 +4 位作者 方静 马春梅 沈加裙 凃星 陈文莹 《临床血液学杂志:输血与检验》 2019年第2期252-257,共6页
目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)对单核巨噬细胞分化的影响。方法:利用佛波酯(PMA)诱导形成THP-1单核细胞来源巨噬细胞模型。实验分为4组,分别为对照组(PMA浓度为50 ng/ml)、GRP78 10 ng/ml组(GRP78浓度10 ng/ml+PMA 50 ng/ml)、GRP78... 目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)对单核巨噬细胞分化的影响。方法:利用佛波酯(PMA)诱导形成THP-1单核细胞来源巨噬细胞模型。实验分为4组,分别为对照组(PMA浓度为50 ng/ml)、GRP78 10 ng/ml组(GRP78浓度10 ng/ml+PMA 50 ng/ml)、GRP78 20 ng/ml组(GRP78浓度20 ng/ml+PMA 50 ng/ml)、GRP78 40 ng/ml组(GRP78浓度40 ng/ml+PMA 50 ng/ml),培养72 h。应用流式细胞术检测巨噬细胞M1型特异表面标志物CD86、M2型特异表面标志物CD163的表达;实时荧光定量PCR检测巨噬细胞M1型相关因子iNOS、M2型相关因子FIZZ-1、TGF-β、ARG-1及IL-10的mRNA表达。结果:与对照组比较,其他3组的CD163阳性巨噬细胞百分比显著增加(P<0.01);而各实验组CD86阳性巨噬细胞百分比没有明显改变。与对照组相比,GRP78实验组中各组FIZZ-1、TGF-β的mRNA水平均有增加,其中GRP78 40 ng/ml组FIZZ-1、TGF-β的mRNA水平明显增高(P<0.01);各组其他因子iNOS、IL-10和ARG-1的mRNA水平则没有明显变化。结论:GRP78可诱导THP-1单核巨噬细胞极化成M2型巨噬细胞。 展开更多
关键词 葡萄糖调节蛋白78 THP-1 巨噬细胞 极化
葡萄糖调节蛋白78对非小细胞肺癌患者吉西他滨化疗敏感性的影响 预览
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作者 王志静 苏荣健 杜晓媛 《吉林大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期595-600,I0004共7页
目的:探讨葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)表达与非小细胞肺癌(NSCLC)患者吉西他滨化疗的关系及GRP78对肺腺癌SPCA1细胞活力和吉西他滨化疗敏感性的影响,并阐述其作用机制。方法:选取32例NSCLC患者的癌组织石蜡标本,采用免疫组织化学染色检测N... 目的:探讨葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)表达与非小细胞肺癌(NSCLC)患者吉西他滨化疗的关系及GRP78对肺腺癌SPCA1细胞活力和吉西他滨化疗敏感性的影响,并阐述其作用机制。方法:选取32例NSCLC患者的癌组织石蜡标本,采用免疫组织化学染色检测NSCLC癌组织中GRP78阳性表达率。选取GRP78高表达的SPCA1细胞作为研究对象。采用RNA干扰技术在SPCA1细胞中下调GRP78的表达水平(干扰组),并设对照组(给予shNC);MTT法检测各组SPCA1细胞活力。实验分为阴性对照组、干扰组、对照+吉西他滨组和干扰+吉西他滨组,克隆形成实验检测各组SPCA1细胞克隆形成率, Western blotting法检测各组SPCA1细胞中Akt、p-Akt、PI3K和p-PI3K的表达量。结果:免疫组织化学染色法检测,与经吉西他滨治疗缓解的NSCLC患者癌组织比较,经吉西他滨治疗未缓解NSCLC患者癌组织中GRP78阳性表达率明显升高(P<0.05)。MTT法检测,与对照组比较,干扰组细胞活力明显降低(P<0.05)。克隆形成实验,与阴性对照组比较,干扰组SPCA1细胞克隆形成率明显降低(P<0.05),干扰+吉西他滨组SPCA1细胞克隆形成率降低更加明显(P<0.05)。Western blotting法检测,与阴性对照组比较,干扰组细胞中p-Akt、p-PI3K表达量明显降低,干扰+吉西他滨组细胞中p-Akt和p-PI3K表达量降低更加明显。结论:干扰GRP78可以增加吉西他滨化疗的敏感性,GRP78可能通过PI3K/Akt途径降低NSCLC患者对吉西他滨的敏感性。 展开更多
关键词 非小细胞肺 葡萄糖调节蛋白78 吉西他滨 化疗敏感性
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柴胡疏肝散对功能性消化不良大鼠胃窦组织中GRP78和c-JNK表达的影响 预览
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作者 罗高标 凌江红 《山西中医》 2019年第5期56-58,共3页
目的:探讨柴胡疏肝散对功能性消化不良(FD)大鼠胃窦组织内质网应激相关分子葡萄糖调节蛋白(GRP78)、c-Jun氨基末端激酶(c-JNK)的影响。方法:将36只大鼠随机分成正常组、模型组、柴胡疏肝散低浓度组、中浓度组、高浓度组、多潘立酮组,除... 目的:探讨柴胡疏肝散对功能性消化不良(FD)大鼠胃窦组织内质网应激相关分子葡萄糖调节蛋白(GRP78)、c-Jun氨基末端激酶(c-JNK)的影响。方法:将36只大鼠随机分成正常组、模型组、柴胡疏肝散低浓度组、中浓度组、高浓度组、多潘立酮组,除正常组正常饲养外,其余组均以夹尾刺激法制成FD模型,然后于造模同一天开始分别予以对应药物水溶液灌胃(柴胡疏肝散低、中、高剂量分别为0.16 g/mL, 0.32 g/mL和0.64 g/mL、多潘立酮0.30 mg/mL),持续用药4周后,麻醉取胃,测定胃排空率,ELISA检测胃窦组织c-JNK、GRP78蛋白含量,qRT-PCR技术检测GRP78、c-JNK的mRNA表达情况。结果:(1)相对于正常组而言,模型组胃排空率明显降低(P﹤0.05);与模型组对比,柴胡疏肝散低、中、高浓度组及多潘立酮组胃排空率高(P﹤0.05);(2)相比正常组而言,模型组大鼠胃窦组织内GRP78、c-JNK蛋白表达明显升高(P﹤0.05);与模型组相比,柴胡疏肝散低、中、高浓度组及多潘立酮组胃窦组织内GRP78、c-JNK蛋白表达降低(P﹤0.05);(3) qRT-PCR结果显示模型组胃窦组织内GRP78、c-JNK的mRNA表达量较正常组升高(P﹤0.05);与模型组相比,各用药组GRP78、c-JNK的mRNA表达量降低(P均﹤0.05)。结论:柴胡疏肝散治疗功能性消化不良的机制可能与其能调控内质网应激分子GRP78、c-JNK有关。 展开更多
关键词 功能性消化不良 柴胡疏肝散 内质网应激 葡萄糖调节蛋白78 C-JUN氨基末端激酶 实验研究
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FOXM1和GRP78在进展期胃癌组织中的表达及其临床意义 预览
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作者 龚军 孙峰 +3 位作者 金聪慧 葛建娟 宋佳烨 杨磊 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 2019年第8期566-571,共6页
目的探讨进展期胃癌组织中叉头框M1(FOXM1)及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达及其临床意义。方法对2010年1月至2015年6月在南通市肿瘤医院行胃癌根治术的168例标本,采用免疫组织化学方法检测进展期胃癌组织及癌旁组织中FOXM1及GRP78的表... 目的探讨进展期胃癌组织中叉头框M1(FOXM1)及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达及其临床意义。方法对2010年1月至2015年6月在南通市肿瘤医院行胃癌根治术的168例标本,采用免疫组织化学方法检测进展期胃癌组织及癌旁组织中FOXM1及GRP78的表达情况;应用χ^2检验分析进展期胃癌病理特征与FOXM1及GRP78表达的相关性,并应用Cox单因素及多因素分析进展期胃癌预后危险因素。结果进展期胃癌组织中FOXM1和GRP78的表达率分别为53.57%(90/168)和67.26%(113/168),癌旁组织中二者无表达或弱阳性表达。二者表达在胃癌组织中呈正相关(r=0.41,P<0.001)。FOXM1蛋白表达与脉管癌栓(P<0.001)、淋巴结转移(P<0.001)、T分期(P=0.022)、TNM分期(P<0.001)及分化程度(P<0.001)相关,GRP78蛋白表达与脉管癌栓(P=0.003)、淋巴结转移(P=0.002)及分化程度(P<0.001)相关。FOXM1及GRP78共表达阳性患者术后总生存期显著低于共阴性者,差异具有统计学意义(χ^2=35.1189,P<0.001)。FOXM1、T分期是影响进展期胃癌预后的独立危险因素。结论FOXM1及GRP78可能协同参与了胃癌的发生、发展,并可能成为进展期胃癌临床治疗的新靶点。 展开更多
关键词 进展期胃癌 叉头框转录因子M1 葡萄糖调节蛋白78
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黄连素调控GRP78表达对内皮细胞新生血管的抑制作用 预览
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作者 唐利红 麻庆乐 卢德赵 《浙江医学》 CAS 2019年第13期1348-1353,I0005共7页
目的探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在内皮细胞新生血管中的表达及黄连素的干预作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),利用4-苯基丁酸(4-PBA)5mmol/L,毒胡萝卜素(TG)300nmol/L,TG 300nmol/L联合低、中、高剂量(50、75、100μmol/L)... 目的探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在内皮细胞新生血管中的表达及黄连素的干预作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),利用4-苯基丁酸(4-PBA)5mmol/L,毒胡萝卜素(TG)300nmol/L,TG 300nmol/L联合低、中、高剂量(50、75、100μmol/L)黄连素分别作用24h,对照组为正常培养的HUVEC。采用噻唑蓝(MTT)法、划痕法、Matrigel Matrix胶法分别检测细胞增殖、迁移、成血管能力,q RT-PCR法、Western blot法分别检测HUVEC中血管内皮生长因子(VEGF)、GRP78、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)m RNA和蛋白表达,免疫荧光法观察GRP78在细胞内的定位。结果≤100μmol/L的黄连素对HUVEC增殖无明显影响(P<0.05)。与对照组比较,4-PBA组细胞迁移、成血管能力均明显减弱(均P<0.05);TG组细胞迁移、成血管能力均明显增强(均P<0.05),HUVEC中VEGF、GRP78、HIF-1αm RNA和蛋白相对表达量均明显升高(均P<0.05)。与TG组比较,黄连素低、中、高剂量干预组细胞迁移、成血管能力均明显减弱(均P<0.05),HUVEC中VEGF、GRP78、HIF-1αm RNA和蛋白相对表达量均明显降低(均P<0.05)。在荧光显微镜下观察,GRP78分布于内皮细胞的细胞膜上。结论GRP78在HUVEC新生血管过程中发挥重要作用,黄连素可能通过抑制GRP78表达从而抑制内皮细胞血管新生。 展开更多
关键词 葡萄糖调节蛋白78 动脉粥样硬化 血管新生 黄连素
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葡萄糖调节蛋白78在卵巢癌侵袭转移中的作用 预览
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作者 顾雪 余美玲 +2 位作者 肖成炜 张苗苗 王才智 《蚌埠医学院学报》 CAS 2019年第9期1148-1152,1157共6页
目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在卵巢癌侵袭转移中的作用。方法:免疫组织化学法检测60例卵巢浆液性癌和40例卵巢浆液性囊腺瘤组织中GRP78的表达情况,Western blotting法检测GRP78的表达水平,分析GRP78的表达与卵巢浆液性癌临床病理... 目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在卵巢癌侵袭转移中的作用。方法:免疫组织化学法检测60例卵巢浆液性癌和40例卵巢浆液性囊腺瘤组织中GRP78的表达情况,Western blotting法检测GRP78的表达水平,分析GRP78的表达与卵巢浆液性癌临床病理指标之间的关系。采用Transwell小室法检测HO-8910细胞和HO-8910PM细胞侵袭、迁移能力;分别使用shRNA-GRP78干扰和pcDNA-GRP78过表达GRP78检测HO-8910PM细胞和HO-8910细胞侵袭、迁移能力的变化。结果:免疫组织化学结果显示,GRP78在卵巢浆液性癌组织中的阳性表达率为90%,明显高于卵巢浆液性囊腺瘤的25%(P<0.01)。GRP78在卵巢浆液性癌组织中表达水平高于卵巢浆液性囊腺瘤组织。GRP78表达水平高的卵巢浆液性癌病人,临床病理分级、分期更高,糖类抗原125水平更高,且发生淋巴结转移、盆腔转移、盆腔外转移的病人比例更高(P<0.01)。体外研究结果显示,GRP78在高转移潜能的HO-8910PM细胞中的表达明显高于低转移潜能的HO-8910细胞(P<0.01)。在HO-8910细胞中过表达GRP78可明显促进细胞的侵袭、迁移能力,而在HO-8910PM细胞中干扰GRP78的表达可明显降低细胞的侵袭、迁移潜能(P<0.01)。结论:卵巢癌组织中GRP78可促进卵巢癌细胞的侵袭、迁移能力。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 葡萄糖调节蛋白78 侵袭 转移
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乏氧和低糖条件下低表达ESE3促进胰腺癌细胞的侵袭 预览 被引量:1
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作者 肖笛 赵天锁 俞鸣 《天津医药》 CAS 北大核心 2019年第3期225-229,共5页
目的观察乏氧和低糖条件下胰腺癌细胞中上皮特异性ETS转录因子3(ESE3)表达的变化及其对胰腺癌细胞侵袭能力的影响。方法收集在天津医科大学肿瘤医院2005年1月—2014年10月期间行根治性手术治疗的99例胰腺癌患者的胰腺癌组织和16例邻近... 目的观察乏氧和低糖条件下胰腺癌细胞中上皮特异性ETS转录因子3(ESE3)表达的变化及其对胰腺癌细胞侵袭能力的影响。方法收集在天津医科大学肿瘤医院2005年1月—2014年10月期间行根治性手术治疗的99例胰腺癌患者的胰腺癌组织和16例邻近正常胰腺组织标本。采用免疫组化法分析癌组织和邻近正常胰腺组织中ESE3的表达水平,探究其表达水平与胰腺癌患者生存预后间的关系;进一步在TCGA数据库中分析ESE3的mRNA表达水平与147例胰腺癌患者的临床病理学特征间的关系;构建胰腺癌细胞PANC-1过表达ESE3稳定转染细胞系并验证;Transwell法探究过表达ESE3的胰腺癌细胞侵袭能力的变化;利用蛋白质免疫印迹法检测乏氧和低糖条件下胰腺癌细胞中乏氧诱导因子1α(HIF-1α)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和ESE3蛋白表达水平的变化。结果胰腺癌组织中ESE3的表达量明显低于正常胰腺组织,ESE3的低表达与患者总生存期(OS)和无复发生存期(DFS)缩短密切相关(均P<0.05)。TCGA数据库分析表明ESE3表达高低与肿瘤转移相关(P<0.05);在乏氧和低糖条件下胰腺癌细胞侵袭能力增强,ESE3的表达降低,HIF-1α与GRP78的表达增加(P<0.05)。结论在乏氧和低糖条件下,胰腺癌细胞中ESE3的表达降低,促进胰腺癌细胞的侵袭。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 肿瘤转移 细胞低氧 上皮特异性ETS转录因子3 乏氧诱导因子1Α 葡萄糖调节蛋白78
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GRP78-ATF6-CHOP通路相关分子在葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎中的表达 预览
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作者 郭腾飞 轩青霞 +5 位作者 吴玉丹 董仕桢 高磊 陈攀 常永超 高强 《郑州大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2019年第6期806-811,共6页
目的:探讨GRP78-ATF6-CHOP通路在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎中的表达及意义。方法:选取6-8周龄的健康清洁级129S1/SvJ种系小鼠,随机分为DSS组和对照组(n=8),DSS组饮用30 g/L DSS溶液,对照组饮用无菌蒸馏水;于第6天处死小鼠。通... 目的:探讨GRP78-ATF6-CHOP通路在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎中的表达及意义。方法:选取6-8周龄的健康清洁级129S1/SvJ种系小鼠,随机分为DSS组和对照组(n=8),DSS组饮用30 g/L DSS溶液,对照组饮用无菌蒸馏水;于第6天处死小鼠。通过疾病活动指数评分(DAI)、结肠长度测定和HE染色等方法评估小鼠肠道炎症程度,采用qRT-PCR检测小鼠结肠组织中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α以及内质网应激相关分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、IRE1α、PERK、活化转录因子6(ATF6)和CHOP mRNA的表达水平,采用免疫组化法和蛋白印迹法检测小鼠结肠组织中GRP78、ATF6和CHOP蛋白的表达。结果:对照组无肠炎表现,DSS组有严重的肠炎表现。与对照组相比,DSS组结肠组织中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-αGRP78、ATF6和CHOP mRNA表达升高(P均<0.001.。免疫组化显示GRP78主要表达于结肠上皮细胞的胞质及胞膜,ATF6主要表达于结肠上皮细胞的胞质及胞核,CHOP主要表达于结肠上皮细胞的胞核中;DSS组GRP78、ATF6和CHOP蛋白表达水平高于对照组(P均<0.001.。结论:GRP78-ATF6-CHOP通路相关分子可能在DSS诱导的小鼠结肠炎的发生、发展中起重要作用。 展开更多
关键词 炎症性肠病 葡聚硫酸钠 葡萄糖调节蛋白78 活化转录因子6 CHOP 小鼠
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