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大鼠脂肪间充质干细胞改善大鼠自体卵巢移植效果 预览
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作者 邢彦彦 丁海遐 +1 位作者 赵玮 李文 《生殖医学杂志》 CAS 2020年第2期225-230,共6页
目的观察大鼠脂肪间充质干细胞(ADMSCs)对大鼠卵巢自体移植的作用。方法8周龄SD大鼠分为4组:正常对照组、自体移植组、自体移植+ADMSCs组及去势组,在自体移植后28 d,行卵巢组织HE染色卵泡计数,用免疫组化观察血管生成情况,用TUNEL荧光... 目的观察大鼠脂肪间充质干细胞(ADMSCs)对大鼠卵巢自体移植的作用。方法8周龄SD大鼠分为4组:正常对照组、自体移植组、自体移植+ADMSCs组及去势组,在自体移植后28 d,行卵巢组织HE染色卵泡计数,用免疫组化观察血管生成情况,用TUNEL荧光染色技术进行细胞凋亡计数,ELISA测定血清FSH、AMH水平。结果自体移植+ADMSCs组总卵泡数、原始卵泡数均显著高于自体移植组(P<0.05)。自体移植+ADMSCs组细胞凋亡计数显著低于自体移植组(P<0.05)。与自体移植组相比,自体移植+ADMSCs组大鼠血清FSH水平更低,AMH水平更高(P<0.05)。自体移植+ADMSCs组CD31阳性细胞分布与正常对照组更接近。结论在大鼠卵巢自体移植过程中应用ADMSCs可改善大鼠卵巢自体移植效果,提高移植效率。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 卵巢移植 卵泡计数 凋亡
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脂肪间充质干细胞成骨分化条件培养基联合骨形态发生蛋白2治疗去卵巢大鼠骨质疏松症 预览
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作者 杨九杰 赵伟 +9 位作者 王楠 陈晓春 李治 马骥 申德伟 王勇 牛庆飞 王涛 周禹伯 张洋 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第1期7-13,共7页
背景:脂肪间充质干细胞分泌各种骨重塑需要的细胞因子和生长因子,被认为是骨再生的优良候选细胞。骨形态发生蛋白2与脂肪间充质干细胞对骨再生有协同作用,并能显著增强脂肪间充质干细胞的成骨分化作用。目的:探讨脂肪间充质干细胞成骨... 背景:脂肪间充质干细胞分泌各种骨重塑需要的细胞因子和生长因子,被认为是骨再生的优良候选细胞。骨形态发生蛋白2与脂肪间充质干细胞对骨再生有协同作用,并能显著增强脂肪间充质干细胞的成骨分化作用。目的:探讨脂肪间充质干细胞成骨分化条件培养基与骨形态发生蛋白2联合应用对大鼠绝经后骨质疏松症的影响。方法:8-10月龄雌性SD大鼠75只,随机取60只采用卵巢切除方法建立绝经后骨质疏松症大鼠模型,余15只进行假手术,未切除卵巢。将60只造模成功大鼠随机分为4组:骨质疏松症组、条件培养基组、骨形态发生蛋白2组、联合治疗组,通过尾静脉分别注射DMEM培养基、脂肪间充质干细胞成骨分化条件培养基、骨形态发生蛋白2、脂肪间充质干细胞成骨分化条件培养基联合骨形态发生蛋白2。治疗12周,取各组大鼠股骨和血清,组织学观察骨小梁数量和结构以及骨小梁间距,ELISA检测血清P1NP、ALP、TRAP、OPG、RANKL水平,Western blot、Realtime PCR检测RANKL、OPG蛋白和mRNA水平,细胞因子芯片分析脂肪间充质干细胞成骨分化条件培养基中细胞因子水平。结果与结论:①与假手术组相比,骨质疏松症组大鼠的骨小梁间距扩大,骨小梁数量明显减少,骨小梁失去正常结构并且不连续。与骨质疏松症组、条件培养基组、骨形态发生蛋白2组比较,联合治疗组大鼠骨小梁间距扩大较少,骨小梁结构更完整、更连续;②与骨质疏松症组、条件培养基组、骨形态发生蛋白2组比较,联合治疗组大鼠血清P1NP和ALP水平显著升高(P<0.05),血清TRAP水平显著降低(P<0.05);③与骨质疏松症组、条件培养基组、骨形态发生蛋白2组比较,联合治疗组RANKL/OPG比值显著降低(P<0.01),从而促进更多的骨形成;④脂肪间充质干细胞成骨分化条件培养基含有多种与骨形成密不可分的细胞因子,包括骨形态发生蛋白4和7、 展开更多
关键词 绝经后骨疏松症 脂肪干细胞 条件培养基 骨形态发生蛋白2 成骨分化 骨再生
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基于细胞生物学方法比较5种不同组织来源间充质干细胞的特征 预览
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作者 刘超 张丽君 +7 位作者 陶昊 杜心洁 王芮 李文菁 丁淑梅 王怡 姜磊 黄玉香 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第33期5334-5340,共7页
背景:间充质干细胞的来源以及分离方法越来越多样,充分认识到这些间充质干细胞的异同,将有助于间充质干细胞在临床中更加合理规范的应用。目的:比较不同组织来源间充质干细胞的生物学特征。方法:采集剖宫产产妇在生育后脱落的脐带、胎... 背景:间充质干细胞的来源以及分离方法越来越多样,充分认识到这些间充质干细胞的异同,将有助于间充质干细胞在临床中更加合理规范的应用。目的:比较不同组织来源间充质干细胞的生物学特征。方法:采集剖宫产产妇在生育后脱落的脐带、胎盘以及部分脂肪组织,采用胰酶消化法或组织块贴壁法培养出底蜕膜间充质干细胞、绒毛膜间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、脐带胎盘连接处间充质干细胞、脐带间充质干细胞,所用的干细胞培养基有3 种:含胎牛血清的干细胞培养基、含脐血裂解物的干细胞培养基、含无血清添加物的干细胞培养基。检测不同培养条件下的细胞直径、表面标志物以及多向分化能力,检索GEO数据库分析不同间充质干细胞的基因表达情况。结果与结论:①不同培养条件影响细胞大小和细胞周期,其中无血清培养体系培养的间充质干细胞直径偏小,而脐血裂解物干细胞培养基能够增加胎盘源间充质干细胞的直径;②5 种间充质干细胞有类似的表面标志物,都具有成骨、成软骨和成脂肪分化能力,其中脂肪间充质干细胞成脂肪分化能力更强;③脂肪间充质干细胞相比于与其他4 种干细胞在基因表达上存在较大差异,具有更复杂细胞基质成分。 展开更多
关键词 干细胞 组织块培养法 胰酶消化法 脐带胎盘连接处干细胞 脐带干细胞 脂肪干细胞 底蜕膜干细胞 绒毛膜干细胞
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不同来源间充质干细胞条件培养基对内源性衰老细胞作用的比较 预览 被引量:1
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作者 郑桂纯 赵姝灿 +4 位作者 黄丽贞 张晓芳 王丙云 陈胜锋 陈志胜 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第21期3357-3363,共7页
背景:随着经济的发展,人们对美的追求越来越高,抗衰老研究成为当今的研究热点。干细胞是具有自我更新能力和多向分化能力的细胞,间充质干细胞是其中的一种。研究表明间充质干细胞能通过旁分泌作用修复损伤衰老的细胞,但对于不同来源间... 背景:随着经济的发展,人们对美的追求越来越高,抗衰老研究成为当今的研究热点。干细胞是具有自我更新能力和多向分化能力的细胞,间充质干细胞是其中的一种。研究表明间充质干细胞能通过旁分泌作用修复损伤衰老的细胞,但对于不同来源间充质干细胞条件培养基的抗皮肤衰老作用研究甚少。目的:比较人脂肪、羊水、胎盘、脐带来源间充质干细胞条件培养基对自然衰老皮肤成纤维细胞的抗衰老作用。方法:制备人脂肪、羊水、胎盘、脐带4种不同来源的间充质干细胞条件培养基,添加到自然衰老皮肤成纤维细胞中,采用CCK-8法检测细胞活力、β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测细胞衰老率、DCFH-DA探针检测活性氧含量以及qPCR检测p16、p53、COL1、KLOTHO基因表达量。结果与结论:①4种间充质干细胞条件培养基均能提高皮肤成纤维细胞的活力,其中脂肪间充质干细胞条件培养基的效果最好,β-半乳糖苷酶染色率最低;②4种间充质干细胞条件培养基均能降低活性氧含量,脂肪和羊水来源间充质干细胞条件培养基组的活性氧含量最低;③p16和p53在胎盘和脐带间充质干细胞条件培养基组的表达均高于对照组,在羊水来源间充质干细胞条件培养基组的表达较低,脂肪间充质干细胞条件培养基组p16表达显著低于对照组,但p53的表达较高;④COL1基因表达除羊水间充质干细胞条件培养基组外,其他3组均显著高于对照组,KLOTHO基因表达除胎盘间充质干细胞条件培养基组外,其他3组均显著高于对照组,且脂肪间充质干细胞条件培养基组的表达最高;⑤结果显示,4种不同来源间充质干细胞条件培养基能在一定程度上延缓细胞衰老,但作用效果存在差异,其作用机制还有待进一步研究。 展开更多
关键词 皮肤成纤维细胞 内源性衰老 脂肪干细胞 胎盘干细胞 脐带干细胞 羊水干细胞 干细胞条件培养基 广东省自然科学基金
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3种间充质干细胞成软骨分化潜能比较
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作者 韩俊柱 朱勋兵 +2 位作者 武世伍 李徽徽 王胜 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第12期2252-2255,共4页
目的:比较骨髓间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、滑膜间充质干细胞3种间充质干细胞的成软骨分化潜能,为软骨组织工程中种子细胞的选择提供实验依据。方法:采用贴壁法分别分离提取兔骨髓间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、滑膜间充质干细... 目的:比较骨髓间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、滑膜间充质干细胞3种间充质干细胞的成软骨分化潜能,为软骨组织工程中种子细胞的选择提供实验依据。方法:采用贴壁法分别分离提取兔骨髓间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、滑膜间充质干细胞3种间充质干细胞,并进行传代培养,绘制3种间充质干细胞的生长曲线并比较其倍增时间。将3种间充质干细胞成软骨诱导14 d后,行甲苯胺蓝染色及II型胶原免疫组化染色以观测3种细胞成软骨分化能力。结果:脂肪间充质干细胞的倍增时间短于骨髓间充质干细胞,滑膜间充质干细胞的倍增时间最短;3种细胞成软骨诱导14 d后均产生糖胺聚糖和II型胶原,且组与组之间II型胶原表达水平的差异有统计学意义,骨髓间充质干细胞组高于脂肪间充质干细胞组(P<0.01),滑膜间充质干细胞组高于骨髓间充质干细胞组(P<0.01)。结论:在一定的培养条件下,3种间充质干细胞均有一定的成软骨细胞分化潜能,滑膜间充质干细胞最快的增殖速度及最强的成软骨分化潜能。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓干细胞 脂肪干细胞 滑膜干细胞 成软骨分化
成体干细胞治疗皮肤损伤性疾病的研究进展 预览
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作者 陈涛 冯高科 +1 位作者 易欣 蒋学俊 《广西医学》 CAS 2019年第19期2478-2481,共4页
干细胞是一类具有自我更新、分化能力的多潜能细胞。近年来,成体干细胞在皮肤创伤治疗中的应用备受关注,主要用于治疗糖尿病皮肤溃疡、静脉溃疡、遗传性皮肤病等。本文就成体干细胞在皮肤损伤性疾病中的研究进展进行综述。
关键词 干细胞 皮肤损伤 治疗 表皮干细胞 骨髓干细胞 脂肪干细胞 人羊膜上皮细胞 多能干细胞 综述
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大鼠BMSCs与ADSCs全基因组DNA甲基化差异分析 预览
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作者 陈旭涛 万卓 +2 位作者 韦梦影 杨国栋 宋应亮 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期170-175,共6页
目的:探讨BMSCs和ADSCs全基因组甲基化模式。方法:提取大鼠原代培养的BMSCs和ADSCs基因组,使用高通量测序技术检测BMSCs与ADSCs甲基化谱,筛选DNA甲基化差异基因,并对检测结果进行GO分析和Pathway分析。结果:基因组甲基化测序共检测到差... 目的:探讨BMSCs和ADSCs全基因组甲基化模式。方法:提取大鼠原代培养的BMSCs和ADSCs基因组,使用高通量测序技术检测BMSCs与ADSCs甲基化谱,筛选DNA甲基化差异基因,并对检测结果进行GO分析和Pathway分析。结果:基因组甲基化测序共检测到差异性甲基化区域112 545个,共富集到4 603条GO条目,其中610条GO条目具有显著差异(P<0.05)。通过Pathway分析可以富集到322条通路,其中有98条通路显著富集(P<0.05)。结论:BMSCs与ADSCs基因组存在大量甲基化差异位点,这些甲基化差异位点可能在BMSCs与ADSCs分化与免疫表型的差异有关。 展开更多
关键词 全基因组甲基化测序 骨髓干细胞 脂肪干细胞
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脂肪间充质干细胞移植减轻大鼠肾缺血再灌注损伤的机制 预览
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作者 雷雨 刘蓉安 曾帆 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第5期749-755,共7页
背景:缺血再灌注引起的急性肾损伤是有较高死亡率的临床常见问题,尚缺乏有效治疗方法。目前,已有一些间充质干细胞移植应用于改善此病情的研究,但可能机制仍不明确。目的:观察脂肪间充质干细胞移植对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及... 背景:缺血再灌注引起的急性肾损伤是有较高死亡率的临床常见问题,尚缺乏有效治疗方法。目前,已有一些间充质干细胞移植应用于改善此病情的研究,但可能机制仍不明确。目的:观察脂肪间充质干细胞移植对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及其可能机制。方法:实验所用SD大鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司,分离培养SD大鼠腹股沟部位脂肪组织,获得脂肪间充质干细胞并鉴定;将30只大鼠夹闭左肾动脉,45min后去除动脉夹恢复血流建立肾缺血再灌注大鼠模型,随机分为移植对照组和干细胞移植组,每组15只,另取15只大鼠作为假手术组,其中,移植对照组尾静脉注射生理盐水,干细胞移植组尾静脉注射脂肪间充质干细胞。在移植后5,15和30d进行下列检测:荧光显微镜观察大鼠肾组织冰冻切片中脂肪间充质干细胞定植情况;ELISA法检测血清肌酐与尿素氮水平;生化法检测肾组织中丙二醛含量;石蜡切片苏木精-伊红染色观察肾组织病理学结构并进行肾小管损伤评分;Westernblot法检测肾组织中谷胱甘肽过氧化物酶4的表达。结果与结论:①分离培养的SD大鼠脂肪间充质干细胞表达CD90和CD44,具有多向分化能力,移植对照组肾组织无绿色荧光,干细胞移植组在移植后5d可见绿色荧光;②与移植对照组比较,干细胞移植组血清肌酐与尿素氮水平、肾组织丙二醛含量及肾小管损伤评分降低(P<0.05),肾组织谷胱甘肽过氧化物酶4表达升高(P<0.05),肾组织形态结构有明显改善;③以上结果说明,脂肪间充质干细胞移植可减轻大鼠肾缺血再灌注损伤,可能通过促进肾组织中谷胱甘肽过氧化物酶4的表达发挥抗脂质过氧化作用。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 肾缺血再灌注损伤 干细胞移植 谷胱甘肽过氧化物酶4 肾小管损伤 急性肾损伤 组织工程 干细胞 干细胞
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红细胞生成素预处理脂肪间充质干细胞移植治疗大鼠糖尿病肾病 预览
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作者 王迪生 孔刘莎 +1 位作者 王佳 李霞 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第9期1370-1376,共7页
背景:研究证实,糖尿病肾病的发生、发展与肾小管上皮细胞转分化及肾间质纤维化密切相关。目的:探讨红细胞生成素干预的脂肪间充质干细胞对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法:获取和培养人脂肪间充质干细胞并进行多向分化能力... 背景:研究证实,糖尿病肾病的发生、发展与肾小管上皮细胞转分化及肾间质纤维化密切相关。目的:探讨红细胞生成素干预的脂肪间充质干细胞对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法:获取和培养人脂肪间充质干细胞并进行多向分化能力鉴定;采用Transwell体外迁移体系,观察不同浓度红细胞生成素(0,5,20,50 IU/mL)对脂肪间充质干细胞向高糖诱导大鼠肾小管上皮细胞系迁移的影响;将48只SD大鼠(徐州医学院动物实验中心提供)随机分为正常对照组、糖尿病模型组、脂肪间充质干细胞组、脂肪间充质干细胞+20 IU/mL红细胞生成素组,每组12只。经尾静脉注射150μL细胞总数为3.5×105个脂肪间充质干细胞或20 IU/mL红细胞生成素干预的脂肪间充质干细胞,14周后采用Western blot检测肾组织中转化生长因子β1、α-平滑肌肌动蛋白、E-钙黏蛋白、基质金属蛋白酶9及基质金属蛋白酶抑制剂1的表达。结果与结论:①红细胞生成素干预使脂肪间充质干细胞的迁移数量明显增加且呈浓度依赖性(P<0.05),以20 IU/mL浓度最为显著;NRK-52E细胞内基质细胞衍生因子1蛋白表达趋势与脂肪间充质干细胞迁移趋势基本一致;②与糖尿病模型组比较,脂肪间充质干细胞及脂肪间充质干细胞+20 IU/mL红细胞生成素组转化生长因子β1、α-平滑肌肌动蛋白及基质金属蛋白酶抑制剂1蛋白表达均显著下降(P<0.05),E-钙黏蛋白、基质金属蛋白酶9蛋白表达显著上升(P<0.05),且脂肪间充质干细胞+红细胞生成素组变化更明显(P<0.05);③结果表明,红细胞生成素可以促进脂肪间充质干细胞的定向趋化,且在红细胞生成素作用下脂肪间充质干细胞可以更好地抑制肾小管上皮细胞转分化,减轻细胞外基质沉积,延缓糖尿病肾纤维化。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 脂肪干细胞 细胞生成素 糖尿病模型 肾小管 纤维化 干细胞 脂肪组织 干细胞 组织工程
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脂肪间充质干细胞条件培养液联合富血小板纤维蛋白修复小鼠皮肤损伤 预览 被引量:2
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作者 黄敏 颜洪 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第1期18-23,共6页
背景:富血小板纤维蛋白可促进软组织愈合,间充质干细胞分泌的可溶性因子具有促进皮肤再生的作用,两者联合应用促进皮肤损伤修复尚未见报道。目的:探讨脂肪间充质干细胞条件培养液联合富血小板纤维蛋白对小鼠皮肤创伤愈合的影响。方法:制... 背景:富血小板纤维蛋白可促进软组织愈合,间充质干细胞分泌的可溶性因子具有促进皮肤再生的作用,两者联合应用促进皮肤损伤修复尚未见报道。目的:探讨脂肪间充质干细胞条件培养液联合富血小板纤维蛋白对小鼠皮肤创伤愈合的影响。方法:制作C57/BL6小鼠(西南医科大学实验动物中心提供)全层皮肤损伤模型,随机分为4组,每组10只。自造模后即开始治疗,各组分别涂抹脂肪间充质干细胞专用培养基、脂肪间充质干细胞条件培养液、富血小板纤维蛋白、脂肪间充质干细胞条件培养液+富血小板纤维蛋白,3次/d,连续7 d。在治疗后的1,3,7,10 d测量创面大小并计算治疗后3,7 d的创面愈合率;治疗后第14天进行创面愈合的组织学分析。结果与结论:①与脂肪间充质干细胞专用培养基组相比,其他3组创面愈合时间缩短;②治疗后3,7 d,脂肪间充质干细胞条件培养液+富血小板纤维蛋白组的创面愈合率高于其他3组,脂肪间充质干细胞条件培养液组和富血小板纤维蛋白组的创面愈合率高于脂肪间充质干细胞专用培养基组,差异有显著性意义(P<0.05);③组织学分析显示,脂肪间充质干细胞条件培养液+富血小板纤维蛋白组小鼠创面白细胞及成纤维细胞聚集、血管新生、肉芽组织重塑、上皮化均比其他3组明显,伤口愈合效果最好;④结果表明,脂肪间充质干细胞条件培养液与富血小板纤维蛋白联合应用能有效促进小鼠皮肤损伤的修复,效果优于单独应用脂肪间充质干细胞条件培养液或富血小板纤维蛋白。 展开更多
关键词 皮肤损伤 脂肪干细胞 条件培养液 富血小板纤维蛋白 创面愈合 小鼠 干细胞 皮肤 创伤和损伤 脂肪组织 干细胞 培养基 条件性 富血小板血浆 组织工程
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脂肪间充质干细胞来源外泌体对角质形成细胞增殖和迁移的影响与机制 预览
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作者 田新立 江波 颜洪 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第1期68-73,共6页
背景:皮肤烧烫伤是一类非常常见且致死和致残率极高的疾病,探索有效促进伤口愈合的方法意义重大。目的:探讨脂肪间充质干细胞来源外泌体是否对角质形成细胞增殖与迁移产生影响及其潜在机制。方法:采用胰酶消化法培养人角质形成细胞,并... 背景:皮肤烧烫伤是一类非常常见且致死和致残率极高的疾病,探索有效促进伤口愈合的方法意义重大。目的:探讨脂肪间充质干细胞来源外泌体是否对角质形成细胞增殖与迁移产生影响及其潜在机制。方法:采用胰酶消化法培养人角质形成细胞,并利用角质形成细胞特异标记蛋白Keratin 14进行鉴定;超速离心法分离人脂肪间充质干细胞来源外泌体,并利用外泌体特异标记蛋白CD9、CD63和CD81进行鉴定;将纯化好的脂肪间充质干细胞来源外泌体,以不同质量浓度(0,10,20,50,100 mg/L)加入第3代角质形成细胞中,在处理的不同时间点(0,12,24,48 h)进行增殖和迁移相关指标检测。结果与结论:脂肪间充质干细胞来源外泌体促进角质形成细胞增殖和迁移,在质量浓度为50 mg/L和处理48 h时增殖最显著,脂肪间充质干细胞来源外泌体可能通过调控ERK、AKT和STAT3蛋白的磷酸化而促进角质形成细胞增殖与迁移。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 外泌体 形成细胞 细胞增殖 细胞迁移 干细胞 角蛋白细胞 脂肪组织 干细胞 外泌体 细胞增殖 细胞运动 组织工程
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亚低温联合脂肪间充质干细胞对肝缺血再灌注损伤的保护作用 预览
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作者 刘剑 李立 +7 位作者 王晓川 张升宁 李来邦 莽源祎 高扬 陈永林 任刚 李望 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第13期2081-2087,共7页
背景:肝缺血再灌注损伤的机制复杂多样,是制约肝脏外科手术的瓶颈,如何减轻肝缺血再灌注损伤一直是医学研究的热点与难点之一。目的:探讨亚低温联合脂肪间充质干细胞预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法:将60只雄性SD大鼠... 背景:肝缺血再灌注损伤的机制复杂多样,是制约肝脏外科手术的瓶颈,如何减轻肝缺血再灌注损伤一直是医学研究的热点与难点之一。目的:探讨亚低温联合脂肪间充质干细胞预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法:将60只雄性SD大鼠(购于昆明医科大学实验动物中心)随机分为6组:假手术组、肝缺血再灌注损伤组、亚低温组、脂肪间充质干细胞组、亚低温+脂肪间充质干细胞组、ERK通路阻断剂组,每组10只,均于缺血前30 min给予亚低温、脂肪间充质干细胞、ERK通路阻断剂干预。肝缺血再灌注12 h后收集大鼠血清及肝组织标本,进行相关指标检测。肝缺血再灌注12 h后收集大鼠血清、肝组织,术后7 d收集大鼠肝组织,进行相关指标检测。结果与结论:①全自动生化分析仪检测肝功能指标:亚低温组、脂肪间充质干细胞组、亚低温+脂肪间充质干细胞组血清中天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶和乳酸脱氢酶活性均低于肝缺血再灌注损伤组(P <0.05),亚低温+脂肪间充质干细胞组血清中3种酶活性低于亚低温组和脂肪间充质干细胞组(P <0.05);②ELISA检测氧化应激指标:亚低温组、脂肪间充质干细胞组、亚低温+脂肪间充质干细胞组肝组织中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于肝缺血再灌注损伤组(P <0.05),丙二醛水平均显著低于肝缺血再灌注损伤组(P <0.05);亚低温+脂肪间充质干细胞组肝组织中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶水平显著高于亚低温组和脂肪间充质干细胞组(P <0.05),而丙二醛水平低于亚低温组和脂肪间充质干细胞组(P <0.05);③Western blotting检测相关蛋白表达:与肝缺血再灌注损伤组相比,亚低温组、脂肪间充质干细胞组、亚低温+脂肪间充质干细胞组肝组织中p-ERK1/2相对表达水平显著升高(P <0.05),各组中ERK1/2的表达差异无显著性意义;④ 展开更多
关键词 肝缺血再灌注 脂肪干细胞 亚低温 细胞凋亡 ERK 信号通路 干细胞 再灌注损伤 脂肪组织 干细胞移植 低温 人工 组织工程
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脂肪间充质干细胞复合多孔壳聚糖微球修复大鼠肝损伤 预览
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作者 黄坤 刘承利 +5 位作者 韩公海 刘锐 陈伟伟 丁晓 汤贺 彭江 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第5期716-722,共7页
背景:随着干细胞治疗及组织工程的发展,利用生物相容性好的生物高分子材料结合脂肪间充质干细胞构建肝脏组织工程微单元成为治疗肝脏疾病的新策略。目的:探讨脂肪间充质干细胞复合多孔壳聚糖微球对急性肝损伤的修复能力。方法:将SD乳鼠... 背景:随着干细胞治疗及组织工程的发展,利用生物相容性好的生物高分子材料结合脂肪间充质干细胞构建肝脏组织工程微单元成为治疗肝脏疾病的新策略。目的:探讨脂肪间充质干细胞复合多孔壳聚糖微球对急性肝损伤的修复能力。方法:将SD乳鼠脂肪间充质干细胞与多孔壳聚糖微球在体外复合培养,分别在培养第1,3,5天观察细胞在微球上增殖情况。取36只SD大鼠(北京市维通利华实验技术有限公司提供),随机分为3组(n=12):空白对照组,腹腔注射生理盐水;急性肝损伤组,腹腔注射10%四氯化碳-橄榄油;脂肪间充质干细胞-多孔壳聚糖微球组,腹腔注射10%四氯化碳-橄榄油,于注射后第1天通过手术将脂肪间充质干细胞-多孔壳聚糖微球平铺于肝脏表面。分别于注射后第1,2,3,7天进行大体、血清学及组织学评价。结果与结论:①脂肪间充质干细胞与多孔壳聚糖微球复合后第1,3,5天,经过活/死染色观察到细胞可在微球上正常生长(死细胞数量远远少于活细胞数量),且细胞在不断增殖;②注射后第1,2,3,7天,脂肪间充质干细胞-多孔壳聚糖微球组的大体形态、肝功能及组织学评价均优于急性肝损伤组,从第3天开始脂肪间充质干细胞-多孔壳聚糖微球组与空白对照组已无明显差异;③结果表明,将脂肪间充质干细胞-多孔壳聚糖微球移植入肝脏表面可加速肝损伤的修复。 展开更多
关键词 肝损伤 脂肪干细胞 壳聚糖 四氯化碳 肝功能 肝脏修复 肝疾病 脂肪组织 干细胞 组织工程
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脂肪间充质干细胞移植治疗脓毒症大鼠急性呼吸窘迫综合征及机制 预览
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作者 冯芳 董晨明 +1 位作者 陈宇 齐艳 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第5期741-748,共8页
背景:脓毒症合并急性呼吸窘迫综合征病情凶险,传统治疗以支持为主,虽对预后有所改善,但效果不明显,故急需寻找一种新的有效的治疗手段。间充质干细胞是具有多向分化潜能的干细胞,可用于多种疾病的治疗,且已被多项实验证明有效。目的:探... 背景:脓毒症合并急性呼吸窘迫综合征病情凶险,传统治疗以支持为主,虽对预后有所改善,但效果不明显,故急需寻找一种新的有效的治疗手段。间充质干细胞是具有多向分化潜能的干细胞,可用于多种疾病的治疗,且已被多项实验证明有效。目的:探讨脂肪间充质干细胞对脓毒症大鼠急性呼吸窘迫综合征的保护作用及机制。方法:①采用组织细胞贴壁培养法分离大鼠脂肪间充质干细胞;②按照随机数字表法将成年雄性SD大鼠(兰州大学实验动物中心提供)分为生理盐水组(A组)、生理盐水+脂肪间充质干细胞组(B组)、脓毒症+急性呼吸窘迫综合征组(C组)、脓毒症+急性呼吸窘迫综合征+脂肪间充质干细胞组(D组),每组10只;③A组及B组大鼠开腹后,取出盲肠,然后放回腹腔,关腹;12h后经尾静脉注射1.0mL生理盐水或1.0mL生理盐水+脂肪间充质干细胞(1.2×106个)。C组及D组行盲肠结扎穿刺术,大鼠持续吸纯氧48h后造成肺损伤形成急性呼吸窘迫综合征模型,12h后经尾静脉注射1.0mL生理盐水或脂肪间充质干细胞(1.2×106个);④建模24h后测定动脉血氧饱和度;建模48h后计算肺湿/干质量比值;ELISA检测肺组织炎症因子水平;苏木精-伊红染色镜下观察肺组织病理学改变;凝胶电泳迁移率分析肺组织核因子κB活性;RT-PCR、WesternBlot测定肺部Toll样受体2,4mRNA和蛋白表达。结果与结论:①与A组、B组相比较,C组肺湿/干质量比值、肺损伤评分、炎症因子水平、核因子κB活性、Toll样受体mRNA表达、Toll样受体蛋白表达均明显升高,动脉血氧饱和度明显下降(P<0.05);②与C组比较,D组肺湿/干质量比值、肺损伤评分、促炎因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6水平、核因子κB活性、Toll样受体mRNA表达、Toll样受体蛋白表达均明显降低(P<0.05);而动脉血氧饱和度、抗炎因子白细胞介素10水平明显升高(P<0.05);③A� 展开更多
关键词 脓毒症 急性呼吸窘迫综合征 脂肪干细胞 TOLL样受体 核因子ΚB 肺疾病 呼吸障碍 脂肪组织 干细胞移植 组织工程
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Nanofat制作、临床应用及作用机制的研究进展 预览
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作者 曾茂娇(综述) 贺光照(审校) 《中国医疗美容》 2019年第3期106-110,共5页
自体脂肪组织是理论上最理想的软组织填充材料,具有容易获取,来源广泛,生物相容性高等优点。颗粒脂肪移植能够自然地重塑面部轮廓和改善面部老龄化状态,然而其面临着高度不可预测的吸收率及难以于面颈部精细部位(细小沟槽、皱纹、眼睑... 自体脂肪组织是理论上最理想的软组织填充材料,具有容易获取,来源广泛,生物相容性高等优点。颗粒脂肪移植能够自然地重塑面部轮廓和改善面部老龄化状态,然而其面临着高度不可预测的吸收率及难以于面颈部精细部位(细小沟槽、皱纹、眼睑、口周、颈纹、瘢痕组织等)进行注射等缺点。Nanofat是一种来源于自体脂肪组织的乳化悬浮液,能够通过细小注射针注入真皮层,其包含丰富的基质血管成分(SVF)、脂肪来源的间充质干细胞(ADSCs)及其他重要细胞因子,在改善皮肤老化、防治瘢痕及创面愈合等过程中能起到良好的效果。现从nanofat的制作、临床应用及作用机制等方面进行综述。 展开更多
关键词 纳米脂肪 乳糜化脂肪 脂肪干细胞 血管成分
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脂肪间充质干细胞膜片移植促进创面愈合的可行性 预览 被引量:2
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作者 陈梅红 党旖旎 +4 位作者 朱旭东 李璇 彭磊 杨佳佳 张国新 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第5期790-796,共7页
背景:脂肪间充质干细胞因其能旁分泌多种生长因子、获取方便、具有免疫调节等作用,常被用于组织修复和功能重建。食管内镜黏膜下剥离后狭窄的预防和治疗是困扰医生和患者的难题。脂肪间充质干细胞结合新型组织工程技术——细胞膜片,具... 背景:脂肪间充质干细胞因其能旁分泌多种生长因子、获取方便、具有免疫调节等作用,常被用于组织修复和功能重建。食管内镜黏膜下剥离后狭窄的预防和治疗是困扰医生和患者的难题。脂肪间充质干细胞结合新型组织工程技术——细胞膜片,具有促进创面修复、预防食管狭窄发生的潜能和应用价值。目的:探讨脂肪间充质干细胞膜片的生物学特征,分析其预防食管内镜黏膜下剥离后狭窄的可行性。方法:①将使用温度敏感培养皿制备的绿色荧光蛋白标记的脂肪间充质干细胞膜片设为实验组,常规贴壁脂肪间充质干细胞为对照组,通过ELISA、反转录实时PCR及Western blot比较2组血管内皮生长因子、转化生长因子β1、肝细胞生长因子含量;②取裸鼠制备皮肤人工溃疡,随机分为贴膜组与模型组,贴膜组立即在皮肤创面处贴附绿色荧光蛋白标记的脂肪间充质干细胞膜片。结果与结论:①脂肪间充质干细胞膜片中细胞含量较高,细胞外基质丰富,细胞与细胞之间连接存在;膜片组血管内皮生长因子、转化生长因子β1、肝细胞生长因子表达水平均高于对照组;②裸鼠背部脂肪间充质干细胞膜片移植成功,且贴膜组愈合速度快于模型组;③实验结果提示脂肪间充质干细胞结合细胞膜片技术预防食管内镜黏膜下剥离后狭窄具有可行性,但仍需大量的基础及临床研究进一步证实。 展开更多
关键词 内镜黏膜下剥离 食管狭窄 脂肪干细胞 细胞膜片 血管内皮生长因子 转化生长因子β1 细胞生长因子 创面愈合 干细胞 信号肽类和蛋白 溃疡 组织工程
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富血小板血浆对兔脂肪间充质干细胞AnxAl基因和PPARγ基因表达的影响
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作者 魏思明 胡刚 +3 位作者 郭惠中 王昱权 康乐 秦宏智 《中华医学美学美容杂志》 2019年第1期64-67,共4页
目的探讨自体富血小板血浆(PRP)对兔脂肪间充质干细胞(ADSC) AnxAl基因和PPARγ基因启动的影响。方法取新西兰大白兔附睾脂肪组织中ADSC,用形态学及诱导分化进行细胞鉴定,将细胞培养至第4代,取新西兰大白兔腹主动脉血通过传统2次离心法... 目的探讨自体富血小板血浆(PRP)对兔脂肪间充质干细胞(ADSC) AnxAl基因和PPARγ基因启动的影响。方法取新西兰大白兔附睾脂肪组织中ADSC,用形态学及诱导分化进行细胞鉴定,将细胞培养至第4代,取新西兰大白兔腹主动脉血通过传统2次离心法制备PRP、贫血小板血浆(PPP),将ADSC在含PRP(实验组)、PPP(阳性对照组)、空白培养基组(空白对照组)5%培养液中分别培养24h、48h、72h,将各组细胞裂解提取总RNA,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测目的基因AnxA 1和PPARγ。结果提取的原代兔ADSC随细胞增殖,呈梭形漩涡状生长。用油红O染色和茜素红染色均能着色。RT-PCR结果显示,实验组AnxA 1基因和PPARγ基因表达量显著增多((F=6.31,P<0.05)。结论PRP可促进兔ADSC增殖并明显提高AnxAl基因和PPARγ基因表达。 展开更多
关键词 富含血小板血浆 干细胞 基因表达 AnxAl基因 PPARΓ基因 脂肪干细胞
脂肪间充质干细胞治疗慢性阻塞性肺疾病的实验研究 预览
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作者 黄志昂 尚艳 +3 位作者 刘方方 赛亚飞 路武杰 冯志军 《医学新知杂志》 CAS 2019年第2期155-158,F0003共5页
目的探究脂肪间充质干细胞(ADMSCs)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)治疗中的价值。方法将60只SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组、治疗组及模型组,每组20只,治疗组和模型组采用熏香烟加气管注入内毒素进行COPD模型的制备,对照组不造模。造模后治... 目的探究脂肪间充质干细胞(ADMSCs)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)治疗中的价值。方法将60只SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组、治疗组及模型组,每组20只,治疗组和模型组采用熏香烟加气管注入内毒素进行COPD模型的制备,对照组不造模。造模后治疗组大鼠尾静脉注射0.5 ml澳氮胞昔(BrdU)标记的ADMSCs悬液,对照组及模型组大鼠经尾静脉注射0.5ml生理盐水。移植后14 d,测定各组肺功能、炎症因子水平及肺组织病理变化c结果与对照组比较,模型组和治疗组肺功能指标均显著下降(P<0.05),而治疗组肺功能优于模型组(P<0.05);模型组和治疗组肺泡灌洗液中白细胞总数、巨噬细胞数、中性粒细胞数、白细胞介素-8、肿瘤坏死因子及C反应蛋白水平均显著高于对照组(均P<0. 05),而治疗组上述各指标均显著低于模型组(P<0.05);模型组、治疗组肺组织切片均可见COPD病理性变化,治疗组较模型组肺气肿病理性变化轻(P<0.05)。结论 ADMSCs移植治疗可显著改善COPD大鼠肺组织的病理性改变,减轻炎症反应,改善肺功能。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 慢性阻塞性肺疾病 大鼠 干细胞移植
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脂肪来源间充质干细胞移植干预系统性红斑狼疮模型小鼠的免疫功能 预览
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作者 叶玲 朱静 何成松 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第17期2696-2702,共7页
背景:虽然间充质干细胞治疗系统性红斑狼疮已取得临床疗效,但其免疫调节的内源性功能及作用机制有待深入研究。目的:探讨来源的脂肪间充质干细胞对系统性红斑狼疮小鼠(MRL/lpr小鼠)免疫功能的影响及其可能机制。方法:将36只MRL/lpr小鼠... 背景:虽然间充质干细胞治疗系统性红斑狼疮已取得临床疗效,但其免疫调节的内源性功能及作用机制有待深入研究。目的:探讨来源的脂肪间充质干细胞对系统性红斑狼疮小鼠(MRL/lpr小鼠)免疫功能的影响及其可能机制。方法:将36只MRL/lpr小鼠随机分为3组:模型对照组不进行干预、磷酸盐缓冲液对照组尾静脉注射磷酸盐缓冲液、干细胞移植组尾静脉注射脂肪间充质干细胞;另取12只C57BL/6小鼠作为正常对照组。结果与结论:①分离MRL/lpr小鼠脂肪组织获得的细胞具有脂肪间充质干细胞特性;②模型对照组、磷酸盐缓冲液对照组和干细胞移植组的血清尿素氮、肌酐和抗双链DNA抗体水平均高于正常对照组(P <0.01);干细胞移植组的血清尿素氮、肌酐和抗双链DNA抗体水平低于模型对照组和磷酸盐缓冲液对照组(P <0.05);③模型对照组和磷酸盐缓冲液对照组的外周血调节性T细胞阳性率低于正常对照组和干细胞移植组,干细胞移植组外周血调节性T细胞阳性率低于正常对照组(P <0.01);④模型对照组和磷酸盐缓冲液对照组的脾脏树突状细胞阳性率低于正常对照组和干细胞移植组(P <0.01);⑤模型对照组、磷酸盐缓冲液对照组和干细胞移植组的Th2比例高于正常对照组(P <0.05);模型对照组和磷酸盐缓冲液对照组的Th1比例和Th1/Th2比值低于正常对照组和干细胞移植组(P <0.05);⑥与正常对照组比较,模型对照组和磷酸盐缓冲液对照组外周血中白细胞介素2、干扰素γ、白细胞介素10和T淋巴细胞产生的淋巴毒素水平降低,白细胞介素4水平升高(P <0.05);与模型对照组和磷酸盐缓冲液对照组比较,干细胞移植组外周血中白细胞介素2、白细胞介素10、干扰素γ和T淋巴细胞产生的淋巴毒素水平升高,白细胞介素4水平降低(P <0.05)。结果表明脂肪间充质干细胞移植可通过提高树突状细胞和调节性T细胞比� 展开更多
关键词 脂肪干细胞 系统性红斑狼疮 干细胞移植 尾静脉注射 组织工程 小鼠 脾脏 调节性T细胞 树突状细胞 辅助性T细胞
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脂肪间充质干细胞微泡提高脂肪移植体积保留率的实验研究
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作者 牟珊 黎媛 +3 位作者 肖芃 周牧冉 汪振星 孙家明 《中华整形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期789-795,共7页
目的探讨利用脂肪间充质干细胞微泡(adipose tissue mesenchymal stem cell-derived microvesicles,ADSC-MV)辅助脂肪移植,提高移植脂肪体积保留率的可行性。方法取华中科技大学同济医学院附属协和医院于2016年12月至2017年4月收治的5例... 目的探讨利用脂肪间充质干细胞微泡(adipose tissue mesenchymal stem cell-derived microvesicles,ADSC-MV)辅助脂肪移植,提高移植脂肪体积保留率的可行性。方法取华中科技大学同济医学院附属协和医院于2016年12月至2017年4月收治的5例20~30岁健康女性来院行腹部吸脂手术所得脂肪组织,酶解贴壁法分离ADSC,传代培养获取其上清液后梯度离心获取ADSC-MV。使用透射电镜观察微泡形态,PKH26染色观察微泡性质。将16只BCLA裸鼠采用随机数表法分2组,每组8只,每只裸鼠背部皮下左右两侧分别注射等量脂肪移植物:空白组每个部位注射0.35 ml脂肪颗粒;微泡组每个部位注射0.35 ml脂肪颗粒+7μg ADSC-MV(混合物终浓度为20μg/ml)。于术后1、3个月取材,测量移植物重量及体积,HE染色切片观察脂肪细胞形态、组织纤维化及空洞形成情况,CD31免疫组织化学染色计量血管形成数目。使用SPSS 13.0进行统计学处理,2组间比较采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果术后1个月及3个月,空白组移植物体积较微泡组小,肉眼可见明显脂肪液化部分,微泡组移植物体积较大,色泽均一,未见明显坏死、液化组织。术后3个月空白组移植物重量(53.23±9.64)mg,显著低于MV组的(106.50±14.46)mg(t=8.117,P<0.001)。术后3个月空白组移植物体积(0.057±0.009)ml,微泡组(0.103±0.015)ml(t=8.117,P<0.001)。HE染色显示,术后1、3个月空白组移植物内中心区域可见脂肪细胞被大量增生的纤维结缔组织及空洞分隔,微泡组移植物内形成的纤维结缔组织及空洞较少,且脂肪细胞大小较为均一。CD31免疫组织化学血管计数结果显示,术后3个月空白组每个视野下血管数为23.0±2.4,微泡组为29.6±4.0,移植物内血管密度高于空白组(t=2.825,P=0.022),且形成的纤维化及空洞均低于空白组。结论脂肪间充质干细胞微泡可提高脂肪移植物体积保留率。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 颗粒脂肪移植术 微泡 体积 重量
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