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脓毒症心肌功能障碍模型大鼠的构建与评价 预览
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作者 张胜 白吉佳 +1 位作者 徐艳萍 王晓红 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第8期1249-1253,共5页
背景:目前认为心肌线粒体结构与功能的损伤在脓毒症心肌功能障碍中起着关键作用。目的:构建大鼠脓毒症心肌功能障碍模型,为研究该疾病提供有效的实验手段。方法:72只清洁级雄性SD大鼠随机分为对照组28只、脂多糖组44只;两组大鼠各随机抽... 背景:目前认为心肌线粒体结构与功能的损伤在脓毒症心肌功能障碍中起着关键作用。目的:构建大鼠脓毒症心肌功能障碍模型,为研究该疾病提供有效的实验手段。方法:72只清洁级雄性SD大鼠随机分为对照组28只、脂多糖组44只;两组大鼠各随机抽取20只用于观察造模后10 d生存率;脂多糖组剩余24只依据造模后时相分为脂多糖6,12,24 h组3个亚组,每组8只。脂多糖组腹腔注射10 mg/kg脂多糖建立大鼠脓毒症模型,对照组注射等量生理盐水。脂多糖各亚组分别于各时相点行超声心动图检查心功能。留取心肌组织光镜观察心肌组织病理形态结构,透射电镜观察心肌超微结构;ELISA法检测大鼠静脉血清心肌肌钙蛋白、脑钠肽浓度。实验经宁夏医科大学总医院伦理审查委员会批准(审批号:2018-320)结果与结论:①与对照组比较,脂多糖组大鼠10 d生存率明显降低;②与对照组比较,脂多糖6 h组左室射血分数、左室缩短分数未见降低(P均>0.05),脂多糖12 h组、脂多糖24 h组左室射血分数、左室缩短分数显著降低(P均<0.01),且随时间延长降低更明显(P均<0.01);③与对照组比较,脂多糖12 h组、脂多糖24 h组血清肌钙蛋白Ⅰ、脑钠肽水平升高(P均<0.01),且随脂多糖注射时间延长,肌钙蛋白Ⅰ、脑钠肽水平逐渐升高(P均<0.01);④脂多糖各组心肌病理形态及超微结构与对照组比较出现明显损伤,且随着脂多糖注射时间延长损伤加重;⑤结果说明,实验成功建立大鼠脓毒症心肌功能障碍模型,该模型稳定可靠。 展开更多
关键词 脓毒症 多糖 大鼠模型 心肌功能障碍
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Asxl1在炎性微环境中对成骨细胞增殖分化的作用 预览
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作者 徐慧君 史东梅 +4 位作者 张咪 吴赛璇 董明 陆颖 牛卫东 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第1期130-135,共6页
背景:研究表明Asxl1的缺失可导致骨质发育不全、骨质缺损类疾病的发生,但目前在根尖周炎环境下该因子与骨破坏之间的关系暂无相关报道。目的:探讨炎性微环境下Asxl1对成骨细胞增殖分化的影响。方法:实验选用脂多糖刺激MC3T3-E1细胞建立... 背景:研究表明Asxl1的缺失可导致骨质发育不全、骨质缺损类疾病的发生,但目前在根尖周炎环境下该因子与骨破坏之间的关系暂无相关报道。目的:探讨炎性微环境下Asxl1对成骨细胞增殖分化的影响。方法:实验选用脂多糖刺激MC3T3-E1细胞建立体外炎性微环境,通过CCK-8实验筛取脂多糖最佳质量浓度和最佳作用时间,然后用20 mg/L脂多糖刺激MC3T3-E1细胞24 h,免疫荧光检测Asxl1的蛋白表达水平,Real Time-PCR检测Asxl1 mRNA的表达水平。为进一步验证Asxl1基因在炎性微环境中影响成骨细胞的增殖与分化,脂多糖刺激形成炎性微环境后转染Asxl1-SiRNA 24 h,采用CCK-8检测细胞增殖活性,RealTime-PCR检测Asxl1及成骨相关基因ALP和RUNX2 mRNA的表达水平。结果与结论:①脂多糖刺激MC3T3-E1细胞后,Asxl1蛋白和mRNA表达水平呈降低趋势;②脂多糖刺激MC3T3-E1细胞后,转染Asxl1-SiRNA 24 h,细胞增殖活性下降趋势明显,Asxl1基因及成骨相关基因ALP和RUNX2 mRNA的表达水平明显降低;③结果提示,Asxl1可能通过参与炎性反应过程,影响成骨细胞的增殖与分化,进而参与骨破坏进程。 展开更多
关键词 MC3T3-E1细胞 Asxl1 根尖周炎 骨破坏 基因转染 多糖 成骨分化 国家自然科学基金
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脂多糖干预ob/ob小鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化 预览
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作者 刘大勇 周伟伟 +3 位作者 肖蕊 王梅蕊 赵梦明 贾智 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第5期703-709,共7页
背景:肥胖是牙周炎及机体其他疾病的易感因素,因肥胖与瘦素密切相关,目前尚无通过瘦素基因突变小鼠骨髓间充质干细胞的分化情况探索相关机制的研究。目的:通过研究ob/ob遗传性肥胖小鼠骨髓间充质干细胞在脂多糖刺激下的成骨能力及成骨... 背景:肥胖是牙周炎及机体其他疾病的易感因素,因肥胖与瘦素密切相关,目前尚无通过瘦素基因突变小鼠骨髓间充质干细胞的分化情况探索相关机制的研究。目的:通过研究ob/ob遗传性肥胖小鼠骨髓间充质干细胞在脂多糖刺激下的成骨能力及成骨相关分子的表达,从分子及细胞水平探讨肥胖与成骨能力的相关机制。方法:选用8周龄雄性肥胖ob/ob小鼠、8周龄雄性C57小鼠(由中国医学科学院实验动物研究所提供)各8只,取两组小鼠双侧股骨,采用全骨髓法分离培养纯化得到ob/ob小鼠骨髓间充质干细胞及C57小鼠骨髓间充质干细胞,加入含有100μg/L脂多糖的成骨诱导液进行成骨诱导分化,通过碱性磷酸酶染色、茜素红染色和碱性磷酸酶活性检测观察比较两组小鼠骨髓间充质干细胞成骨能力。采用RT-PCR检测两组小鼠骨髓间充质干细胞中Alp、Runx2、Ocn、Nf-κbmRNA表达水平。结果与结论:①成骨诱导1周后,与C57小鼠骨髓间充质干细胞比较,ob/ob小鼠骨髓间充质干细胞碱性磷酸酶染色减弱,碱性磷酸酶活性显著降低(P<0.01);成骨诱导液中添加脂多糖后,碱性磷酸酶活性较未添加脂多糖组显著下降(P<0.01),ob/ob小鼠骨髓间充质干细胞碱性磷酸酶活性亦较C57小鼠骨髓间充质干细胞显著降低(P<0.05);②成骨诱导2周后,与C57小鼠骨髓间充质干细胞比较,ob/ob小鼠骨髓间充质干细胞茜素红染成橘红色的矿化结节减少,而成骨诱导液中添加脂多糖后,两组骨髓间充质干细胞均未见矿化结节形成;③成骨诱导后,与C57小鼠骨髓间充质干细胞比较,ob/ob小鼠骨髓间充质干细胞中Alp、Runx2、OcnmRNA表达降低(P<0.05);诱导液中加入脂多糖后,Alp、Runx2、Ocn表达较未添加脂多糖组均显著减少(P<0.05),且在ob/ob小鼠骨髓间充质干细胞中Ocn、Runx2表达较C57小鼠骨髓间充质干细胞明显降低(P<0.05);④结果表明,瘦素缺乏的肥胖小鼠 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 多糖 肥胖 OB/OB小鼠 C57小鼠 成骨分化 国家自然科学 骨髓 间质干细胞 多糖 瘦素 小鼠 肥胖 细胞分化 组织工程
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硫辛酸对脂多糖诱导帕金森病细胞模型的保护作用及机制 预览
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作者 高华 李艳霞 +1 位作者 王丹 杨新玲 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第3期447-452,共6页
背景:近年越来越多的研究证实神经免疫和炎症反应参与了帕金森病的发病,硫辛酸目前被证实具有抗炎和神经保护作用。目的:探讨硫辛酸对脂多糖诱导PC12细胞制备的帕金森病细胞模型的保护作用及相关可能机制。方法:将PC12细胞分为正常细胞... 背景:近年越来越多的研究证实神经免疫和炎症反应参与了帕金森病的发病,硫辛酸目前被证实具有抗炎和神经保护作用。目的:探讨硫辛酸对脂多糖诱导PC12细胞制备的帕金森病细胞模型的保护作用及相关可能机制。方法:将PC12细胞分为正常细胞组、脂多糖-帕金森病组和硫辛酸+脂多糖-帕金森病组。硫辛酸预处理PC12细胞2h后,再用脂多糖干预PC12细胞。用CCK8法筛选最佳帕金森细胞模型制备的脂多糖浓度以及硫辛酸最佳干预浓度;细胞免疫组织化学法检测各组细胞中酪氨酸羟化酶的表达;ELISA法检测各组中细胞上清液中白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平;Westernblot检测各组细胞中NF-κBp65、酪氨酸羟化酶的蛋白表达情况。结果与结论:①建造帕金森细胞模型最佳脂多糖的质量浓度为600μg/L,最佳硫辛酸干预浓度为25μmol/L;②硫辛酸干预后可以促进酪氨酸羟化酶阳性细胞表达,减少帕金森病细胞模型的炎症因子释放,并且可以抑制NF-κBp65的产生,提高酪氨酸羟化酶含量;③结果提示,硫辛酸对帕金森病细胞模型的作用可能通过抑制NF-κB信号通路,减轻炎症状态,从而起到对神经元的保护作用。 展开更多
关键词 硫辛酸 帕金森病 多糖 NF-κB PC12细胞 白细胞介素6 肿瘤坏死因子Α 组织构建 硫辛酸 帕金森病 多糖 白细胞介素6 肿瘤坏死因子Α 组织工程
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骆驼蓬多糖调节细胞自噬及巨噬细胞炎症反应的活性研究
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作者 曼则热姆·热杰普 木塔力甫·艾买提 +5 位作者 伊力亚斯·艾萨 冯学召 古丽努尔·阿不力米提 雷秀英 陈倩 米娜 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第4期938-944,共7页
目的探讨骆驼蓬多糖调节细胞自噬及巨噬细胞炎症反应的活性。方法用不同浓度的骆驼蓬多糖干预,诱导NRK细胞自噬,用激光共聚焦显微镜观察自噬体,筛选出骆驼蓬多糖诱导细胞自噬的最佳干预浓度和时间范围;利用RAW264.7细胞,以1μg/mL脂多糖... 目的探讨骆驼蓬多糖调节细胞自噬及巨噬细胞炎症反应的活性。方法用不同浓度的骆驼蓬多糖干预,诱导NRK细胞自噬,用激光共聚焦显微镜观察自噬体,筛选出骆驼蓬多糖诱导细胞自噬的最佳干预浓度和时间范围;利用RAW264.7细胞,以1μg/mL脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)建立体外细胞炎症模型;在骆驼蓬多糖诱导细胞自噬的最佳浓度和时间下进行干预,以CCK-8试验检测细胞活性,用Hoechst和PI双重染色方法观察细胞凋亡,用ELISA试剂盒检测炎症因子IL-1β和IL-6的分泌量。结果骆驼蓬多糖对NRK细胞诱导自噬的最佳时间为12 h,浓度范围为50~100μg/mL。骆驼蓬多糖干预LPS诱导的RAW264.7细胞炎症模型后,对细胞活力均无明显影响,诱导细胞凋亡,呈剂量依赖性,细胞培养液中IL-6和IL-1β分泌量降低,与模型组有显著差异(P(27)0.05)。结论骆驼蓬多糖能抑制LPS刺激诱导的炎症因子的释放,诱导细胞自噬和凋亡,在50~100μg/mL范围内对巨噬细胞RAW264.7具有良好的免疫调节作用。 展开更多
关键词 小鼠腹腔巨噬细胞 RAW264.7 骆驼蓬多糖 多糖 IL-1Β IL-6
红毛五加多糖对大鼠肝细胞免疫损伤的保护作用及其机制 预览
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作者 李青青 吴疆 +3 位作者 郑碧荣 李儒月 王书贤 朱耀强 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期880-886,共7页
红毛五加属于五加科植物,而五加科植物大多具有调节免疫力的双向调节作用,红毛五加多糖是从中药红毛五加中提取的单一组分,目前关于红毛五加多糖的抑炎作用还少有报道。为了探究红毛五加多糖AHP-Ⅱ对LPS导致的大鼠肝细胞免疫损伤的保护... 红毛五加属于五加科植物,而五加科植物大多具有调节免疫力的双向调节作用,红毛五加多糖是从中药红毛五加中提取的单一组分,目前关于红毛五加多糖的抑炎作用还少有报道。为了探究红毛五加多糖AHP-Ⅱ对LPS导致的大鼠肝细胞免疫损伤的保护作用及其作用机制,该研究将实验分为空白组、模型组(LPS,40μg·mL^-1)和AHP-Ⅱ低、中、高剂量组(25,50,100μg·mL^-1)五组,以LPS(40μg·mL^-1)来制备大鼠肝细胞免疫损伤模型,先用ELISA方法检测细胞分泌TNF-α的水平及流式检测ROS的含量,来探究AHP-Ⅱ不同剂量对炎症因子的抑制作用,再用western方法检测P-JNK2的蛋白水平来进一步探究AHP-Ⅱ的抑制作用机制。结果表明:低、中、高剂量组的AHP-Ⅱ均可使肝细胞损伤后的TNF-α含量下降。同时,AHP-Ⅱ中、高剂量组均可使损伤后的肝细胞ROS的分泌量下降,且AHP-Ⅱ高剂量组抑制ROS的作用最强。在加入AHP-Ⅱ后,JNK2蛋白的磷酸化水平呈剂量依赖性降低,AHP-Ⅱ高剂量组抑制作用最强。这说明红毛五加多糖AHP-Ⅱ可以通过降低P-JNK2的蛋白含量来抑制炎症因子TNF-α及ROS的水平,以发挥免疫保护作用。 展开更多
关键词 红毛五加多糖 多糖 肝损伤 JNK
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阿里红多糖对用脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠肺组织的保护作用及相关机制 预览
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作者 郭苏兰 李佳娜 肖水秀 《当代医药论丛》 2019年第10期127-130,共4页
目的:研究阿里红多糖对用脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织的保护作用及相关机制.方法:将60只SPF级BALB/c小鼠随机分为假手术组、模型组、地塞米松组(DEX组)、低剂量阿里红多糖组(FOA-L组)、中剂量阿里红多糖组(FOA-M组)和... 目的:研究阿里红多糖对用脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织的保护作用及相关机制.方法:将60只SPF级BALB/c小鼠随机分为假手术组、模型组、地塞米松组(DEX组)、低剂量阿里红多糖组(FOA-L组)、中剂量阿里红多糖组(FOA-M组)和高剂量阿里红多糖组(FOA-H组).在造模前,对这6组小鼠连续进行5天的灌胃.在末次给药3 h后,建立小鼠ALI模型(除假手术组小鼠以外).在造模24 h后,检测各组小鼠相关的指标.结果:DEX组小鼠肺泡灌洗液中WBC的计数、蛋白的浓度、血清TNF-α及IL-1β的含量、肺组织中TLR-4、NF-κB的表达量均较灌药前降低.与模型组小鼠比较,FOA-L组、FOA-M组、FOA-H组小鼠肺泡灌洗液中WBC的计数、蛋白的浓度、血清TNF-α及IL-1β的含量、肺组织中TLR-4、NF-κB的表达量均较低,P<0.05.结论:阿里红多糖对用LPS诱导ALI小鼠的肺组织具有保护作用,且该作用具有剂量依赖性.阿里红多糖的这一作用机制可能与其可抑制NF-κB的信号通路,进而可抑制炎症因子的产生、减轻小鼠机体中的炎症反应有关. 展开更多
关键词 阿里红多糖 多糖 急性肺损伤 小鼠
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刺五加多糖对脂多糖连续刺激的断奶仔猪肠黏膜炎症反应的影响
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作者 韩杰 范长友 +1 位作者 张飞 刘显军 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第22期106-108,113,182,共5页
为了研究日粮中添加刺五加多糖(ASPS)对脂多糖(LPS)刺激的断奶仔猪肠黏膜炎症反应的影响,试验选择体重(7.98±0.04)kg的杜×长×大仔猪36头,随机分为3组(对照组、LPS组、ASPS组),每组4个重复,每个重复3头猪。对照组和LPS组... 为了研究日粮中添加刺五加多糖(ASPS)对脂多糖(LPS)刺激的断奶仔猪肠黏膜炎症反应的影响,试验选择体重(7.98±0.04)kg的杜×长×大仔猪36头,随机分为3组(对照组、LPS组、ASPS组),每组4个重复,每个重复3头猪。对照组和LPS组饲喂基础日粮,ASPS组在基础日粮中添加800 mg/kg ASPS,于试验第15,18,21天时LPS组和ASPS组仔猪按体重腹腔注射100μg/kg LPS,对照组仔猪注射等量生理盐水,试验期为21 d。对仔猪外围血细胞分类计数并测定肠黏膜炎症细胞因子和肠黏膜肥大细胞数量。结果表明:与LPS组相比,ASPS组仔猪外周血白细胞和中性粒细胞数量显著减少(P<0.05);肠黏膜抗炎因子IL-10水平显著提高(P<0.05),IL-8水平降低;肠黏膜肥大细胞数量减少。说明日粮添加ASPS具有缓解LPS刺激的仔猪肠黏膜炎症反应的作用。 展开更多
关键词 刺五加多糖 仔猪 免疫应激 炎性反应 多糖 腹泻
连翘脂素对LPS诱导RAW264.7细胞炎症反应的影响 预览
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作者 汤韵秋 全云云 +2 位作者 余琳媛 郑立 李芸霞 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1117-1123,共7页
为研究连翘脂素的抗炎效应及其抗炎机制,以地塞米松作为阳性对照,建立脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症模型,检测炎症因子的释放及相关蛋白和mRNA的表达,以期提高对连翘脂素抗炎作用的全面认识并为连翘脂素临床开发提供有力的... 为研究连翘脂素的抗炎效应及其抗炎机制,以地塞米松作为阳性对照,建立脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症模型,检测炎症因子的释放及相关蛋白和mRNA的表达,以期提高对连翘脂素抗炎作用的全面认识并为连翘脂素临床开发提供有力的科学依据。实验采用Griess法检测细胞上清液中NO含量,ELISA法检测TNF-α和IL-6的含量,Westernblot法检测iNOS、COX-2蛋白的表达,RT-qPCR法检测iNOS、COX-2mRNA的表达。与LPS组比较,连翘脂素组和地塞米松组可以明显降低LPS诱导的RAW264.7细胞释放NO、TNF-α和IL-6的量,并呈现浓度依赖关系。Westrenblot和RT-qPCR结果显示连翘脂素能抑制LPS诱导的iNOS、COX-2的蛋白表达以及mRNA的表达,并呈浓度依赖关系。实验研究表明连翘脂素能够明显抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症因子的释放,iNOS、COX-2蛋白及mRNA的表达从而抑制炎症反应。 展开更多
关键词 连翘 地塞米松 多糖 小鼠巨噬细胞 炎症因子
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脂氧素A4调控mRNA-29b保护脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的机制研究 预览
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作者 纪伟平 Hui Li +3 位作者 Arvine Chandoo 蔡爱敏 董佩泓 吴晓燕 《浙江医学》 CAS 2019年第2期132-135,105共5页
目的探讨脂氧素A4(LXA4)调控miRNA-29家族分子保护脂多糖(LPS)诱导大鼠急性肺损伤(特征性表现为急性呼吸窘迫综合征)的机制。方法将30只SD大鼠按随机数字表法分为LPS组(按20mg/kg尾静脉注射LPS)、LPS+LXA4组(按20mg/kg尾静脉注射LPS6h后... 目的探讨脂氧素A4(LXA4)调控miRNA-29家族分子保护脂多糖(LPS)诱导大鼠急性肺损伤(特征性表现为急性呼吸窘迫综合征)的机制。方法将30只SD大鼠按随机数字表法分为LPS组(按20mg/kg尾静脉注射LPS)、LPS+LXA4组(按20mg/kg尾静脉注射LPS6h后,再按2μg/kg尾静脉注射LXA4作用2h)和对照组(予等量0.9%氯化钠注射液),每组10只。麻醉处死大鼠取肺,左肺用于HE染色和ELISA法检测促炎因子(TNF-α、IL-6)水平,右肺用于RT-PCR法检测miRNA-29家族表达水平。结果LPS组大鼠肺组织切片可见明显的炎症改变,肺损伤评分及肺组织内TNF-α、IL-6水平较对照组均明显升高(均P<0.05)。LPS+LXA4组大鼠肺组织切片可见炎症反应减轻,肺损伤评分及肺组织内TNF-α、IL-6水平较LPS组均明显下降(均P<0.05)。RT-PCR结果显示,LPS组大鼠肺组织内miRNA-29a、miRNA-29b表达水平均明显升高(均P<0.05),LPS+LXA4组miRNA-29b表达水平明显下降(P<0.05)。结论miRNA-29a、miRNA-29b可能在LPS诱导的大鼠急性肺损伤炎症发生过程中起着调节作用,LPS可能通过下调miRNA-29b表达来发挥促炎症消退的作用。 展开更多
关键词 miRNA-29 急性呼吸窘迫综合征 多糖 氧素A4
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不同益生菌干预对高脂饮食诱导肥胖小鼠脂代谢及脂多糖影响的研究 预览
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作者 方圆圆 吴亚 +2 位作者 陈彦辉 王建青 杨琍琦 《中国实验诊断学》 2019年第4期692-695,共4页
目的探讨不同益生菌干预对高脂饮食诱导肥胖小鼠不同阶段脂代谢及脂多糖的影响。方法将3周龄C57BL/6雄性小鼠108只随机分为对照组、高脂饮食组、高脂饮食+益生菌干预组(选取婴儿双歧杆菌及酪酸梭菌,组间分为高、低剂量组),每组18只,饲养... 目的探讨不同益生菌干预对高脂饮食诱导肥胖小鼠不同阶段脂代谢及脂多糖的影响。方法将3周龄C57BL/6雄性小鼠108只随机分为对照组、高脂饮食组、高脂饮食+益生菌干预组(选取婴儿双歧杆菌及酪酸梭菌,组间分为高、低剂量组),每组18只,饲养5周,各组分别于饲养第一、三、五周末剖杀小鼠6只,分析六组小鼠体重、血脂及脂多糖变化情况。结果与对照组及益生菌干预组相比,高脂饮食组小鼠体重明显增加(P<0.05),同种益生菌不同剂量组间对比中,高剂量组最终体重低于低剂量组(P<0.05)。高脂饮食组TC、TG、LDL、LPS较对照组均升高(P<0.05),益生菌干预组上述指标低于高脂饮食组(P<0.05),高脂饮食组HDL含量较对照组降低(P<0.05),益生菌干预组HDL含量高于高脂饮食组(P<0.05)。结论婴儿双歧杆菌及酪酸梭菌可以改善由高脂饮食造成的脂代谢异常,下调体内脂多糖含量,在不同剂量下对于肥胖个体改善的效果有差异。 展开更多
关键词 益生菌 肥胖 代谢 多糖
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组蛋白去乙酰化酶2调节Nrf2乙酰化水平在脂多糖诱导Ⅱ型肺泡上皮细胞损伤中的抗氧化作用机制
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作者 陈隆望 罗以楠 +6 位作者 蔡文超 李萌芳 连洁 赵光举 洪广亮 卢中秋 邱俏檬 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期328-334,共7页
目的探讨组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylases,HDAC2)调节核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)乙酰化水平在脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的Ⅱ型肺泡上皮细胞损伤中的抗氧化作用机制。方... 目的探讨组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylases,HDAC2)调节核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)乙酰化水平在脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的Ⅱ型肺泡上皮细胞损伤中的抗氧化作用机制。方法常规培养小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞,用不同浓度的LPS(10、100、1 000 ng/mL)刺激,分别在0、6、12、24及48 h时用CCK-8检测细胞活性,选择合适的浓度和时间点。常规培养小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞,随机分为对照组、LPS组、HDAC2慢病毒干扰组(siRNA-HDAC2组)和HDAC2慢病毒过表达组(LV-HDAC2组)。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测HDAC2和Nrf2蛋白表达水平,免疫共沉淀法检测Nrf2乙酰化水平,放线菌酮作用后检测Nrf2稳定性。化学比色法检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)活性。采用SPSS 23.0统计软件,多组间比较采用单因素方差分析检验,组间两两比较采用LSD-t检验。结果与对照组相比,LPS组HDAC2的蛋白表达水平升高(t=5.974,P=0.027),Nrf2乙酰化水平降低(t=7.223,P=0.002),Nrf2蛋白水平升高(t=2.929,P=0.043),Nrf2的蛋白稳定性升高,SOD活性下降(t=121,P<0.01),MDA含量升高(t=10.45,P=0.000 5)。与LPS组相比,过表达HDAC2后Nrf2乙酰化水平降低(t=11.29,P=0.000 4),Nrf2蛋白表达水平升高明显(t=3.194,P=0.033),Nrf2的蛋白稳定性升高,SOD活性升高(t=4.678,P=0.009),MDA含量下降(t=5.417,P=0.005 6),而下调HDAC2后呈现相反的趋势。结论LPS刺激后Ⅱ型肺泡上皮细胞氧化应激加重,HDAC2可降低Nrf2乙酰化水平,提高Nrf2蛋白表达,减轻LPS引起的氧化应激。 展开更多
关键词 组蛋白去乙酰化酶2 核因子E2相关因子2 脓毒症 多糖 氧化应激 丙二醛 超氧化物歧化酶
KAE神经保护及抗神经炎症作用机制 预览
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作者 杨滢霖 程笑 +4 位作者 李伟瀚 刘漫 张姗姗 王月华 杜冠华 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2019年第6期422-423,共2页
目的神经炎症与神经退行性疾病的发生密切相关,KAE是一种具有抗炎活性的黄酮类化合物,本研究评价KAE的抗神经炎症作用,并探讨其作用机制。方法 LPS刺激BV2细胞建立细胞水平神经炎症模型;LPS腹腔注射小鼠、侧脑室注射建立动物水平神经炎... 目的神经炎症与神经退行性疾病的发生密切相关,KAE是一种具有抗炎活性的黄酮类化合物,本研究评价KAE的抗神经炎症作用,并探讨其作用机制。方法 LPS刺激BV2细胞建立细胞水平神经炎症模型;LPS腹腔注射小鼠、侧脑室注射建立动物水平神经炎症模型;ELISA法检测炎症相关因子水平;Griess试剂检测NO水平;RT-PCR及Western蛋白印迹法检测炎症相关蛋白的表达;RNA-seq、非标记定量蛋白质组学分析方法探讨KAE调控靶点和信号通路。结果在LPS刺激BV2细胞模型上,KAE显著降低LPS诱导的BV2细胞上清中炎症因子水平,下调LPS诱导的BV2细胞中炎症蛋白TLR4和MYD88的表达。在LPS刺激小鼠模型上,KAE显著改善纹状体神经元损伤,提高纹状体TH和PSD95水平;抑制脑纹状体小胶质细胞的活化,降低IL-1β,IL-6,TNF-α,MCP-1和ICAM-1水平,抑制COX-2,TLR4和My D88等炎症蛋白的表达,保护血脑屏障的完整。在LPS侧脑室注射大鼠模型上,KAE显著降低纹状体组织中炎症因子水平,RNA-seq、非标记定量蛋白质组学分析方法检测发现KAE调控靶点和信号通路。结论 KAE具有神经保护及抗神经炎症作用,机制与下调TLR4/My D88炎症通路、保护血脑屏障相关。 展开更多
关键词 神经炎症 多糖 BV2细胞
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肌肽对脂多糖诱导脑微血管内皮细胞凋亡的保护作用及机制探讨
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作者 赵艳 胡静 +4 位作者 杨文强 何鑫 杜佳睿 李宗泽 杨菁 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第2期174-178,共5页
目的探讨肌肽对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)引起脑微血管内皮细胞(HBMEC)凋亡的保护作用及机制。方法用倒置显微镜观察细胞形态变化;MTT法检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞内的活性氧(ROS)含量及细胞凋亡情况;Western blot法检测... 目的探讨肌肽对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)引起脑微血管内皮细胞(HBMEC)凋亡的保护作用及机制。方法用倒置显微镜观察细胞形态变化;MTT法检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞内的活性氧(ROS)含量及细胞凋亡情况;Western blot法检测NF-κB P65、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达。结果与对照组相比,LPS组细胞存活率略降低(P>0.05),早期凋亡率明显增加,同时ROS含量、核内NF-κB P65及胞浆IL-1β和TNF-α的含量均显著增加(P<0.05)。与LPS组相比,LPS+肌肽组(10 mmol/L、20 mmol/L、40 mmol/L)凋亡率有明显降低,ROS含量、核内NF-κB P65蛋白量及胞浆IL-1β和TNF-α的含量均不同程度显著降低(P<0.05)。结论肌肽可能通过抑制LPS诱导ROS释放,避免NF-κB P65过度激活,进而减少IL-1β和TNF-α分泌,对脑微血管内皮细胞发挥保护作用。 展开更多
关键词 肌肽 多糖 人脑微血管内皮细胞 细胞凋亡 NF-κB
脂多糖可影响及调控牙髓干细胞的增殖与迁移 预览
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作者 冯儒学 蔡仁刚 解丹丹 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第29期4688-4693,共6页
背景:大量研究证明人牙髓干细胞是一种具有高度自我更新能力以及多向分化潜能的细胞。目的:研究脂多糖激活人牙髓干细胞后对细胞增殖及迁移的影响,并探索脂多糖对TLR4、矿化相关基因及MAPK信号通路的影响。方法:脂多糖模拟深龋时细菌入... 背景:大量研究证明人牙髓干细胞是一种具有高度自我更新能力以及多向分化潜能的细胞。目的:研究脂多糖激活人牙髓干细胞后对细胞增殖及迁移的影响,并探索脂多糖对TLR4、矿化相关基因及MAPK信号通路的影响。方法:脂多糖模拟深龋时细菌入侵牙髓的微环境。取人牙髓组织,采用组织块酶消化法分离培养人牙髓干细胞,①以0,0.1,1,10mg/L脂多糖干预1,3,5,7d,以MTT法检测脂多糖对人牙髓干细胞增殖能力;②将第3代人牙髓干细胞分为对照组和1mg/L脂多糖处理组,以细胞免疫荧光检测牙髓干细胞中Toll样受体4的表达,以反转录PCR检测矿化相关基因碱性磷酸酶、牙本质涎磷蛋白和骨桥素mRNA表达变化;③取0.1,1,10mg/L脂多糖干预24h牙髓干细胞,以Transwell小室检测细胞的迁移能力;④以1mg/L脂多糖刺激牙髓干细胞0,15,30,60,120min,以Western blot检测促分裂原活化蛋白激酶信号通路的蛋白p38及ERK1/2的活化水平。实验方案经海南省干部疗养院伦理委员会批准(伦理审批号:20180410)。结果与结论:与对照组(0mg/L脂多糖)相比,脂多糖组细胞增殖能力均下降,人牙髓干细胞中Toll样受体4表达增加,矿化相关基因牙本质涎磷蛋白、骨桥素和碱性磷酸酶mRNA的表达水平增加,迁移细胞数量增加,且随着脂多糖作用时间的延长被激活的p-p38及p-ERK1/2蛋白表达随之增强。提示脂多糖对牙髓干细胞的增殖能力、迁移能力有不同程度影响,且Toll样受体4以及促分裂原活化蛋白激酶信号通路蛋白可能参与脂多糖调控的牙髓干细胞定向分化过程。 展开更多
关键词 多糖 人牙髓干细胞 Toll样受体4 p38 ERK1/2 牙本质涎磷蛋白mRNA、骨桥素mRNA、碱性磷酸酶mRNA
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细菌脂多糖急性暴露通过炎症反应诱导小鼠睾丸损伤 预览 被引量:1
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作者 张逢 陈指龙 +5 位作者 易思亮 许璐瑶 方娟 黎陈 傅胜才 杨青 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1099-1105,共7页
旨在研究细菌脂多糖(LPS)急性暴露对小鼠睾丸及其功能的影响。将健康雄性小鼠随机分为4组:对照组(Control)、1.25mg·kg^-1LPS组、2.5mg·kg^-1LPS组和5.0mg·kg^-1LPS组,对照组腹腔注射200μL生理盐水,其余3组注射等体积... 旨在研究细菌脂多糖(LPS)急性暴露对小鼠睾丸及其功能的影响。将健康雄性小鼠随机分为4组:对照组(Control)、1.25mg·kg^-1LPS组、2.5mg·kg^-1LPS组和5.0mg·kg^-1LPS组,对照组腹腔注射200μL生理盐水,其余3组注射等体积含不同剂量的LPS,作用12h。收集睾丸组织制作石蜡切片,染色后观察其病理变化,记录体重、睾丸和附睾指数,并测定精子品质相关指标,用RT-qPCR法检测炎症相关基因TNF-α、IL-6、GAS6和TGF-β1的转录,同时用ELISA检测血清中睾酮(T)的含量。结果表明,与对照组相比,LPS急性暴露时,以剂量依赖性方式降低小鼠体重(P<0.05或P<0.01),同时显著降低睾丸指数(P<0.05或P<0.01)、精子密度(P<0.01)及精子活力(P<0.05或P<0.01),增加精子畸形率(P<0.05或P<0.01);使睾丸组织发生不同程度的病理学变化,表现在生精细胞凋亡,曲细精管管腔增大,精子数量减少等;导致血清中睾酮(T)的含量显著下降;另外,LPS还呈剂量依赖方式增加促炎因子TNF-α和IL-6及抑制抗炎因子GAS6和TGF-β1的转录。结果提示,细菌LPS急性暴露可通过破坏机体中炎症因子的平衡,使睾丸组织受到损伤从而导致生精障碍。 展开更多
关键词 多糖 睾丸 炎症因子 睾酮
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植物识别脂多糖的分子机制研究进展
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作者 李秋颍 王敏 +1 位作者 吴斌琰 梁岩 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期387-392,共6页
脂多糖(LPS)是革兰氏阴性细菌外膜的主要成分,它作为一种典型的微生物相关分子模式,被动植物识别后可以诱导产生免疫反应。相对于LPS在动物中的研究, LPS引起的植物免疫反应以及植物识别LPS的分子机制还很不清楚,但近几年也取得了一些... 脂多糖(LPS)是革兰氏阴性细菌外膜的主要成分,它作为一种典型的微生物相关分子模式,被动植物识别后可以诱导产生免疫反应。相对于LPS在动物中的研究, LPS引起的植物免疫反应以及植物识别LPS的分子机制还很不清楚,但近几年也取得了一些重要进展。因此,本文将从LPS的复杂结构和LPS引起的独特的植物免疫反应等方面出发,综述研究植物识别LPS分子机制的复杂性以及取得的研究进展。 展开更多
关键词 多糖 植物免疫反应 微生物相关分子模式 模式识别受体
脂多糖干预对军团菌肺炎作用的实验研究
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作者 邬惟为 冯永亮 +5 位作者 史晓红 张萍 王科科 杨飞飞 韩天碧 王素萍 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期682-685,共4页
目的探讨脂多糖干预对军团菌肺炎的作用。方法以C3H/HeN小鼠(6~8周龄)为实验动物,每组8只,雌雄各半。设立脂多糖干预染菌组、脂多糖未干预染菌组和对照组,每组各设12、24和48h3个时间点组。首先对脂多糖干预组小鼠利用大肠埃希菌脂多糖(... 目的探讨脂多糖干预对军团菌肺炎的作用。方法以C3H/HeN小鼠(6~8周龄)为实验动物,每组8只,雌雄各半。设立脂多糖干预染菌组、脂多糖未干预染菌组和对照组,每组各设12、24和48h3个时间点组。首先对脂多糖干预组小鼠利用大肠埃希菌脂多糖(100ng/只)行腹腔注射干预,其余组腹腔注射生理盐水。24h后与脂多糖未干预组一起气管注射军团菌悬液染菌,对照组给予等量的生理盐水,分别于12、24和48h处死小鼠。解剖小鼠,分离肺脏称重,计算脏器系数(小鼠肺脏重量/体重)。眼眶采血1ml,流式细胞术检测各组外周血单个核细胞Toll样受体4(TLR4)水平,取左肺上叶采用ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的含量。结果脂多糖未干预染菌组的肺脏脏器系数高于脂多糖干预染菌组和对照组(P<0.05),脂多糖干预染菌组与对照组间差异无统计学意义。脂多糖干预染菌组与脂多糖未干预染菌组TLR4蛋白均在12h达到高峰,且脂多糖干预组TLR4水平高于脂多糖未干预组(P<0.05),在24、48h两染菌组TLR4表达水平差异无统计学意义。脂多糖干预染菌组TNF-α、IL-1β浓度与对照组间差异无统计学意义,脂多糖未干预染菌组各个时间点TNF-α、IL-1β的分泌水平均高于脂多糖干预染菌组。结论脂多糖干预引起的脂多糖耐受可能会减轻军团菌感染的炎性症状。 展开更多
关键词 多糖 军团菌 细胞因子
关于子宫内膜异位症发病机制与肠道菌群关系的思考
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作者 胡小松 孙宇峰 +2 位作者 李婷 刘敬阁 刘春生 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期196-203,共8页
子宫内膜异位症(简称内异症)作为困扰育龄期女性健康的多发性疾病,近几年来发病率逐年上升,且趋于年轻化。目前,内异症的发病机制尚不完全清楚,治愈率不高且极易复发。近年来研究表明人体是由大量微生物组成的共生体,尤其是肠道内微生... 子宫内膜异位症(简称内异症)作为困扰育龄期女性健康的多发性疾病,近几年来发病率逐年上升,且趋于年轻化。目前,内异症的发病机制尚不完全清楚,治愈率不高且极易复发。近年来研究表明人体是由大量微生物组成的共生体,尤其是肠道内微生物与机体健康密切相关。该文以内异症前期研究为基础,提出其发病机制可能与患者肠道微生物紊乱有关,为寻找内异症的治疗方法提供新思路与参考。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 肠道菌群失调 细菌内毒素 上皮-间质转化 免疫耐受 多糖 癥瘕
壳寡糖与屎肠球菌对肉仔鸡生长性能、免疫功能及肠道短链脂肪酸含量的影响 预览
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作者 安文艺 雷佳琦 +4 位作者 董元洋 武威 刘璇 邵玉新 张炳坤 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2019年第8期110-117,共8页
本试验旨在探究饲粮中添加壳寡糖(COS)和鸡源屎肠球菌PNC01(PNC)对脂多糖(LPS)诱导的肉鸡炎症反应的调节作用。选取1日龄健康且体重相近的AA公雏560羽,采用2(LPS刺激/非LPS刺激)×2(添加COS/不添加COS)×2(添加PNC/不添加PNC)... 本试验旨在探究饲粮中添加壳寡糖(COS)和鸡源屎肠球菌PNC01(PNC)对脂多糖(LPS)诱导的肉鸡炎症反应的调节作用。选取1日龄健康且体重相近的AA公雏560羽,采用2(LPS刺激/非LPS刺激)×2(添加COS/不添加COS)×2(添加PNC/不添加PNC)三因素试验设计,共8个处理,每处理7重复,每重复10只鸡,试验期21 d。采用玉米-豆粕型基础饲粮,试验饲粮分别在基础日粮基础上添加COS(200 mg/kg)和PNC(1×109 CFU/kg)。于试验第17、19、21天,刺激组腹腔注射LPS(1 mg/kg体重),对照组注射等量生理盐水。结果表明:LPS刺激降低肉鸡采食量(P<0.01),破坏肠道形态,降低盲肠食糜中丁酸含量和血清IgA水平(P<0.05),引起脾脏肿大,上调IL-1β和IL-8 mRNA表达(P<0.01);添加COS缓解LPS刺激肉鸡采食量的下降(P<0.05),提高盲肠丙酸和丁酸含量(P<0.05),COS降低脾脏指数和回肠IL-8 mRNA表达量(P<0.05),有下调脾脏IL-1βmRNA表达的趋势(P<0.1);PNC可提高21 d肉鸡血清IgA含量(P<0.05),降低肉仔鸡脾脏指数(P<0.01);非LPS刺激时,同时添加COS和PNC可提高盲肠中乙酸含量(P<0.05)。可见,添加COS和PNC均能缓解LPS刺激导致的脾脏肿大,缓解炎症反应,改善LPS刺激对肉仔鸡的不利影响。 展开更多
关键词 壳寡糖 屎肠球菌 多糖 肉仔鸡 免疫功能
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